Soyut

Geçmiş/Hedefler:Hiyalüronan (HA) oligosakkaritleri, başta kollajen yeniden şekillenmesi ve yara iyileşmesi olmak üzere çeşitli biyolojik süreçlerde yer alır. Yaşlanan ciltte kollajen yeniden şekillenmesi gecikir ve kırışıklıklara neden olur. Bu çalışma, 2-kDa HA oligosakkaritlerin (HA2k) stratum corneum yoluyla nüfuz ederek ve kolajenin yeniden şekillenmesini teşvik ederek kırışıklıklar üzerindeki etkisini değerlendirmeyi amaçladı.

Cistanche glikozidi ayrıca kalp ve karaciğer dokularındaki SOD aktivitesini artırabilir ve her dokudaki lipofuscin ve MDA içeriğini önemli ölçüde azaltabilir, çeşitli reaktif oksijen radikallerini (OH-, H₂O₂, vb.) etkili bir şekilde temizleyerek ve neden olduğu DNA hasarına karşı koruma sağlayabilir. OH radikalleri tarafından. Cistanche feniletanoid glikozitler, serbest radikalleri güçlü bir şekilde süpürme yeteneğine, C vitamininden daha yüksek bir indirgeme kabiliyetine sahiptir, sperm süspansiyonunda SOD aktivitesini geliştirir, MDA içeriğini azaltır ve sperm zarı işlevi üzerinde belirli bir koruyucu etkiye sahiptir. Cistanche polisakkaritleri, D-galaktozun neden olduğu deneysel olarak yaşlanmış farelerin eritrositlerinde ve akciğer dokularında SOD ve GSH-Px aktivitesini artırabilir, ayrıca akciğer ve plazmada MDA ve kollajen içeriğini azaltabilir ve elastin içeriğini artırabilir. DPPH üzerinde iyi bir temizleme etkisi, yaşlanmış farelerde hipoksi süresini uzatır, serumdaki SOD aktivitesini geliştirir ve deneysel olarak yaşlanmış farelerde akciğerin fizyolojik dejenerasyonunu geciktirir Hücresel morfolojik dejenerasyonla, deneyler Cistanche'nin iyi antioksidan yeteneğe sahip olduğunu göstermiştir. ve cilt yaşlanması hastalıklarını önleyen ve tedavi eden bir ilaç olma potansiyeline sahiptir. Aynı zamanda, Cistanche'deki ekinacoside, DPPH serbest radikallerini temizleme konusunda önemli bir yeteneğe sahiptir ve reaktif oksijen türlerini temizleme ve serbest radikal kaynaklı kollajen bozulmasını önleme yeteneğine sahiptir ve ayrıca timin serbest radikal anyon hasarı üzerinde iyi bir onarım etkisine sahiptir.

Antioksidan Ürünleri Görmek İçin Tıklayınız

【Daha fazla bilgi için: david.deng@wecistanche.com / WhatApp:86 13632399501】

Yöntemler:Floresein etiketli HA2k'nin geçirgenliğini değerlendirmek için bir 3D cilt modeli ve eksize edilmiş insan derisi kullanıldı. HA2k'nin kolajen metabolizması üzerindeki etkisi, 3B cilt modelinde tip 1 pro-kollajen (COL1A1) ve matris metaloproteinaz-1 (MMP-1) protein düzeyi ölçülerek değerlendirildi. 0Dermal kollajen yoğunluğunu değerlendirmek için insan ön koluna 8 hafta boyunca yüzde 0.1 HA2k solüsyonu ve araç kontrolü uygulandı. HA2k'nin yüz kırışıklıklarının derinliği üzerindeki etkisini değerlendirmek için, 8 hafta boyunca yüzde 0.1 HA2k losyonu ve araç losyonu ile randomize kontrollü bir çalışma yürütüldü.

Sonuçlar:HA2k'nin stratum corneum'a nüfuz ettiği floresan mikroskopi ile doğrulandı. Hem COL1A1 hem de MMP-1, bir 3B dış görünüm modeli kültüründe HA2k uygulamasıyla yukarı regüle edildi. Kolajen yoğunluğu, HA2k ile tedavi edilen ön kol için 4 hafta sonra araç kontrolü ile tedavi edilen ön koldan daha yüksekti. Nazolabial kıvrım ve kaz ayağı bölgesindeki maksimum kırışıklık derinlikleri, kontrol grubuna göre HA2k losyon grubunda önemli ölçüde daha sığdı.

Çözüm:HA2k, stratum corneum'a nüfuz etti, aynı anda aktive edilmiş kollajen sentezini ve yıkımını ve kırışıklıkları iyileştirdi.

ANAHTAR KELİMELER

yaşlanma karşıtı, hücre kültürü, kollajen yeniden modelleme, insan çalışması, hiyalüronan

1|GİRİŞ

Hücre dışı matris (ECM), çevreleyen hücrelere mekanik destek sağlayan proteinler ve glikozaminoglikanları içeren makromoleküllerin bir bileşimidir. Dermal dokuda, ECM derinin fiziksel özelliklerine katkıda bulunur. Örneğin, dermal ECM'nin birincil bileşeni olan kollajen, cildin bütünlüğüne, elastikiyetine ve pürüzsüzlüğüne katkıda bulunur.1 Fizyolojik olarak, cilt kollajeni, eski kollajenin parçalanması ve kollajen adı verilen bir süreçte yeni kollajenin yeniden sentezlenmesiyle korunur. yeniden şekillenme.2 Bununla birlikte, kolajen yeniden biçimlenme döngüsü yaşlanan ciltte gecikerek kırışmaya, sarkmaya ve elastikiyetin azalmasına neden olabilir.3 Bu sorunlar, kişinin algılanan yaşının gerçek yaşından daha yüksek olmasıyla önemli ölçüde ilişkilidir. Bu nedenle, kollajen yeniden modelleme, yaşlanmayı geciktirmek için umut verici bir hedeftir. Yüzeysel yaklaşımlar ECM'yi etkilemediği için potansiyel olarak ECM'yi hedefleyen bir yaklaşım bu sorunları yönetmek için daha iyi olabilir. Mikro iğneleme, dermal kollajen yeniden modellemesini desteklemek için ECM'yi hedefleyen bir yoldur; ancak, nispeten invaziv bir yöntemdir.

Biyolojik olarak türetilmiş bir polisakkarit olan Hyaluronan (HA), aynı zamanda ECM'nin bir bileşenidir. HA ilk olarak gözün vitröz gövdesinde ve daha sonra sinoviyal sıvı, göbek kordonu ve deride keşfedilmiştir. HA'nın moleküler ağırlığı doku tipine ve biyolojik durumuna göre 1 kDa ila 3000 kDa arasında değişir.4 HA deride genellikle yüksek moleküler ağırlıklı bir durumda bulunur ve yüksek viskoelastikliği ve su- tutma yeteneği, HA bir yastık, yağlayıcı ve nemlendirici olarak işlev görür. Bu nedenle yüksek molekül ağırlıklı HA, kozmetik alanında stratum corneum'un su içeriğini korumak için kullanılır. Makromoleküllerin deriden çok sınırlı geçirgenliği olduğundan, HA'yı stratum corneum'dan nüfuz ettiği doğrulanan küçük parçalara indirgeyerek HA geçirgenliğini iyileştirmeye yönelik bazı girişimler olmuştur.5

Fiziksel işleve ek olarak, HA'nın biyolojik işlevi de son zamanlarda araştırma konusu olmuştur. Kök hücre nişinin6 bir bileşeni olarak HA'nın biyolojik işlevi ve çıplak köstebek farelerinin olağanüstü uzun ömürlülüğü hakkında bazı dikkate değer raporlar yayınlandı. Biyolojik işlevleri tartışılırken HA'nın moleküler ağırlığının dikkate alınması gerekir. Derideki HA genellikle yüksek moleküler ağırlıklı bir durumda bulunur ve bildirildiğine göre doku stabilitesini korur. Buna karşılık, düşük moleküler ağırlıklı HA, çeşitli biyolojik süreçleri aktive eder.7 Önceki raporlarda, HA tetrasakarit, birlikte kültürlenmiş keratinositler ve fibroblastlarda HA ve tip I kollajenin sentezini yukarı regüle etti,8 keratinositlerde farklılaşma belirteçlerini indükledi9 ve ultraviyole-A-ışınlanmış bir fare.5 Özellikle, 10 kDa'nın altındaki oligosakaritler, ECM sentezi,9 anjiyogenez, hücresel göç ve proliferasyon gibi yara iyileşme süreçlerini birincil olarak destekler. Yara iyileşmesi ve kollajenin yeniden şekillenmesi yakından ilişkilidir ve bir 12-mer (yani yaklaşık 2 kDa) HA, kültürlenmiş fibroblastlarda eş zamanlı olarak tip I kollajen ve matris metaloproteinaz 1'i (MMP-1) yükseltir, ancak etki insanlar üzerinde açıklığa kavuşturulmayı beklemektedir.

Kırışıklık önleyici etkiler gösteren bazı HA kozmetik ürünleri raporları vardır. 50-kDa HA'lık bir cilt kremi, randomize, yarı-kenarlı bir karşılaştırma denemesinde 30-60 yaş arası kadın deneklerin kırışık derinliğini iyileştirdi.10 Açık etiketli bir çalışma, mi mikronize-HA kreminin 35 topikal olarak uygulandığını gösterdi. –65-yaşındaki denekler, bu da kırışıklık derinliğiyle ilgili anket puanlarında iyileşmeyle sonuçlandı.11 Bu çalışmalarda, düşük molekül ağırlıklı HA'nın yüksek geçirgenliğinin bir etki mekanizması olduğu öne sürüldü, ancak insan derisi hakkında hiçbir veri olmamıştır. Ek olarak, HA fragmanlarının insanlarda kollajen yoğunluğu üzerindeki etkisi henüz açıklığa kavuşturulmamıştır.

HA oligosakkaritlerinin stratum corneum'a nüfuz ettiğini, kolajenin yeniden şekillenmesini desteklediğini ve yaşlanma karşıtı bir etki olarak kırışıklıkları iyileştirdiğini varsaydık. Bu çalışma, 2-kDa HA'nın (HA2k) kollajen yeniden şekillenmesi ve cilt koşulları üzerindeki etkilerini in vitro ve in vivo çalışmalarla değerlendirmeyi amaçladı. İlk olarak, HA2k'nin geçirgenliği yeniden yapılandırılmış bir deri modelinde ve eksize edilmiş insan derisinde değerlendirildi. Daha sonra, kollajen yeniden şekillenmesi üzerindeki etkiler in vitro ve insan deneklerde değerlendirildi. Son olarak, cilt kırışıklıkları üzerindeki etkileri değerlendirmek için 21 denek arasında HA2k içeren cilt losyonu ve kontrol losyonunun rastgele bir yarı-kenar karşılaştırması yapıldı.

2|GEREÇ VE YÖNTEM

Bu çalışma, Helsinki Deklarasyonu tarafından yürütüldü ve sırasıyla 17–4 ve 1-220 777-AN-02-DICN18228 onay numaralarıyla Kewpie Corp. Tıbbi Etik Komitesi ve DERMAPRO Ltd. Kurumsal İnceleme Kurulu tarafından onaylandı. . Bu çalışma deneklerin gönüllü onamıyla yapılmıştır.

2.1|Reaktifler

Kozmetik dereceli bir HA2k reaktifi olan HAbooster™, Kewpie Corp.'tan (Japonya) temin edildi.

2.2|Üç boyutlu kültürlenmiş insan epidermisinde ve eksize edilmiş insan derisinde HA2k'nin deriden nüfuz etmesi

HA2k geçirgenliği, önceki bir rapora göre bir Franz tipi difüzyon hücresi kullanılarak değerlendirildi.12 Floresein etiketli (Fl-) HA numuneleri,<1.25 mg/ml HA in water and dimethyl sulfoxide mixed at a ratio of 2:1 (v:v). Next, 50 mg/ml each of 5-amino fluorescein, cyclohexyl isocyanide, and acetaldehyde was added to bind fluorescein to HA. After 5 h of reaction at room temperature in the dark, the sample was purified by gel filtration chromatography using a PD Midi Trap G-10 (GE Healthcare,) with an exclusion lower limit of 700 M r. The obtained FL-HA solution was lyophilized and used in the following experiments. For evaluation with reconstituted skin by cell culture, a 3D skin model EPI-606X (Mat Tek,), which was confirmed to retain barrier function, was fixed in a Franz-type diffusion cell. The three-dimensional (3D) skin model was precultured for 16–18 h at 37°C, 5% CO2 in the medium provided by the supplier. After the equilibration process, the medium was changed for testing. A 1% solution of Fl-HA samples of 2 or 8 kDa was applied to the upper compartment and then incubated for 5 h. After washing four times with phosphate-buffered saline, the specimen was embedded in OCT compound (Sakura Finetek,) and frozen by using dry ice/acetone for the preparation of the tissue section. For evaluation on human skin, dermatomed abdominal skin from a 34-year-old Caucasian woman (Biopredic International, France) was fixed in a Franz-type diffusion cell. A 0.1% Fl-HA solution (molecular weight, 2 or 1000 kDa) was applied to the human skin. After incubation at 32°C for 24 h, the tissue was subjected to cryosection preparation as described above. The tissue slides were observed under a fluorescent microscope.

2.3|3D deri modelinde ve eksize edilmiş insan derisinde kollajen metabolizmasının değerlendirilmesi

HA2k'nin kollajen metabolizması üzerindeki etkilerini değerlendirmek için bir 3D deri modeli kullanıldı.13 Kısaca, keratinositler ve fibroblastlardan oluşan tam kalınlıkta bir model (EFT-412, Mat Tek), 8 ug/ml'lik bir HA2k- içinde kültürlendi. içeren ortam. 48 saat sonra şartlandırılmış ortam toplandı ve enzime bağlı immünosorbent testi (ELISA) ile tip 1 pro-kollajen (COL1A1) ve MMP-1 seviyeleri ölçüldü. Doku, immünohistolojik analiz için işlendi. Dokulardaki kollajen, formalinle fikse edilmiş parafine gömülmüş bölümlerin doku lamları üzerinde COL1A1 immünohistokimyasal boyama kullanılarak değerlendirildi. Kesitler, antijeni geri almak için 37 derecede 10 dakika proteinaz K ile muamele edildi. Bloke edildikten sonra, anti-COL1A1 monoklonal antikorları (Abcam) gece boyunca 4 derecede inkübe edildi. Slaytlar daha sonra Alexa Fluor® 488 Goat Anti-Rabbit IgG (Abcam) ile oda sıcaklığında 2 saat inkübe edildi. Çekirdek, propidyum iyodür ile karşıt lekelendi. Kesitler floresan mikroskop altında gözlendi.

2.4|İnsan deneklerde cilt kolajen yoğunluğu, nem ve tomografinin değerlendirilmesi

HA2k, aktif bir bileşen olarak işlevini değerlendirmek için insan derisine topikal olarak uygulandı. Çalışmaya gönüllü olarak sekiz denek (iki kadın ve altı erkek; yaş, 26-39) katıldı. Örneklerin günde iki kez uygulanması için önkolları 2 cm x 2 cm ölçülerinde iki bölgeye ayrıldı. 0,1 oranında HA2k çözümü ve araç kontrolü iki alana ayrı ayrı uygulandı. 0, 4 ve 8. haftalarda kollajen skoru, cilt nemi ve cilt pürüzlülüğü değerlendirildi. Denekler, 20 dakika boyunca 23 derece ± 1 derece ve yüzde 55 ± yüzde 2 bağıl nemde kontrollü bir atmosfer altında iklimlendirildi. Bu uyum sürecini ölçüm takip etti.

2.5|Kolajen skorunun değerlendirilmesi

Cilt kolajen yoğunluğunu ölçmek için ultrason kullanıldı (DermaLab, Cortex Technology, Danimarka).14 Kollajen puanlarını ölçmek için prob, HA2k losyonu ve araç kontrol bölgelerine uygulandı. Her bir sitenin dört köşesinden ve merkezinden oluşan toplam beş nokta ölçülerek ortalama değer hesaplanmıştır.

2.6|Cilt neminin değerlendirilmesi

Cilt nemi empedans yöntemi (SKICON, Yayoi,) kullanılarak ölçüldü.15 Cilt nemini ölçmek için değerlendirme bölgesine prob uygulandı. Dört köşe ve merkezde toplam beş nokta ölçülmüştür. Ortalama değer hesaplandı.

2.7|Deri pürüzlülüğünün değerlendirilmesi

Cilt pürüzlülüğü görsel analizle ölçüldü (VisioScan, Courage plus Khazaka Electronic, Almanya).16 Görüntüler dört köşeden alındı ​​ve yazılım tarafından analiz edildi. Ortalama değer hesaplandı.

2.8|İnsan deneklerde cildin kırışıklığı, sarkması ve elastikiyetinin değerlendirilmesi

Dermal kolajenin cildin kırışması, sarkması ve elastikiyeti ile ilişkili olduğu bildirildiğinden, kozmetik ürünlerde HA2K uygulaması değerlendirildi. Yirmi bir denek aşağıdaki kriterlere göre kaydedildi: görsel ve fotoğraflı değerlendirmeyle hafif ila orta derecede kırışıkları olan, Japon Kozmetik Bilimi Derneği kırışıklık derecelendirme kılavuzuna göre 1-3 kırışıklık dereceleri arasında değişen, nazolabial kıvrımı olan, hamile olmayan sağlıklı kadınlar ne emzirmek, ne de hassas veya aşırı duyarlı cilde sahip olmamak. Bu test süresi boyunca denekler, test maddesi dışında herhangi bir kozmetik ürün, güzellik aracı veya cilt bakımı prosedürü kullanmadı. Losyon olarak verilen numune ürünler günde iki kez (sabah ve akşam) uygulandı. Losyonların formülasyonları Tablo l'de gösterilmektedir. Yüz yıkandıktan sonra losyonlar uygulandı, ardından gerekirse belirlenmiş bir sütlü losyon ve krem ​​uygulandı. Bir tarafa HA2k losyon, diğer tarafa kontrol ürünü uygulandı. Denekler, başlangıçta (0 hafta), tedaviden 4 hafta ve 8 hafta sonra kaz ayağı, nazolabial kıvrım, cilt sarkması ve esnekliği değerlendirmek için bir 3D görüntü analiz sistemi ile incelendi. Tüm ölçümler belirli bir bağıl sıcaklık (20 derece –24 derece) ve nem (% 45 – yüzde 55) altında gerçekleştirilmiştir.

2.9|Kırışıklık parametrelerinin ölçümü

Kaz ayağı ve nazolabial kıvrımın kırışıklık parametreleri görsel analiz (PRIMOS® Premium ve Lite, GFMesstechnik,) ile değerlendirildi.17 Görüntü aynı bölgede başlangıçta, tedaviden 4 ve 8 hafta sonra yazılım (Primos) kullanılarak analiz edildi. 5.8 Şimdiye Kadar).

2.10|Deri elastikiyetinin ölçümü

Cilt elastikiyeti, önceki bir rapora göre emme yöntemiyle (Cutometer® MPA580, Cesaret artı Khazaka elektronik) ölçüldü.18 Kısaca, cilt 450 bar'da 2 saniye boyunca probun açıklığına çekildi. Akabinde negatif basınç 2 saniye süreyle kapatılarak cildin eski haline dönmesi sağlandı. Bir ölçüm döngüsünde üç tekrar yapıldı. Yanaktaki cilt elastikiyeti başlangıçta, tedaviden 4 ve 8 hafta sonra R2 parametreleri ile analiz edildi.

2.11|Deri sarkmasının ölçümü

Yanaktaki cilt sarkması, bir nesne aydınlatıldığında oluşturulan üst üste binen girişim saçaklarından kontur haritalarının üretildiği üç boyutlu morfometrik bir yöntem olan Moire topografi yöntemi (F-ray®, Beyoung,)19 kullanılarak değerlendirildi. uyumlu ışık Tedavi başlangıcında, 4. ve 8. haftalarda yanaktaki Moire deseni alınarak burun ucuna iki çizgi çizilerek oluşturulan açı yazılım (Image-Pro Plus®, MediaCybernetics,) kullanılarak analiz edildi.

2.12|İstatistiksel analiz

İstatistiksel analiz SPSS® yazılım programı (IBM,) kullanılarak yapıldı. HA2k'nin kollajen yeniden şekillenmesi üzerindeki etkisini in vitro olarak değerlendirmek için Mann-Whitney U testi yapıldı. HA2k'nin insan deneklerde kollajen üzerindeki etkisi, eşleştirilmiş t-testi kullanılarak analiz edildi. HA2k'nin cildin kırışıklıkları, sarkması ve elastikiyeti üzerindeki etkisini değerlendiren insan çalışmalarında, normallik testi için Shapiro-Wilks testi veya basıklık ve çarpıklık kullanıldı. Parametrik değişkenlerin istatistiksel analizi, tekrarlanan ölçümler ANOVA kullanılarak yapıldı. Değer parametrik değilse, hepsi başlangıçta Bonferroni düzeltmeli Wilcoxon işaretli sıra testi kullanılarak karşılaştırıldı. Bölgeler arasında karşılaştırma için istatistiksel analiz, başlangıçtan tedaviden 4 ve 8 hafta sonrasına kadar olan varyasyon değeri kullanılarak tekrarlanan ölçümler ANOVA veya ANCOVA ile gerçekleştirildi. bir p-değeri<0.05 was considered to be indicative of statistical significance. Change from baseline (%)   was defined as follows: (Baseline − After treatment)/Baseline × 100.

3|SONUÇLAR

3.1|HA2k'nin deriden nüfuz etmesi

3D-cilt modelinde, flüoresan etiketli HA2k stratum corneum'dan geçerken (Şekil 1), 8-kDa HA geçmedi. İnsan derisinde, floresan etiketli HA2k dermise nüfuz etti. 1000- kDa HA, stratum corneum'dan geçmedi. Bu sonuçlar, daha büyük molekül ağırlıklı HA ile karşılaştırıldığında, HA2k'nin yüksek dermal geçirgenliğe sahip olduğunu göstermektedir.

3.2|HA2k'nin kollajen metabolizması üzerindeki etkisi

Bir 3B-cilt modelinde, şartlandırılmış ortamdaki hem COL1A1 hem de MMP-1'nin protein içerikleri, HA2k ilavesiyle yukarı regüle edildi (Şekil 2). Bu nedenle, HA2k'nin aynı anda COL1A1 ve MMP-1 üretimini desteklediği varsayılmıştır.

3.3|HA2k'nin insan deneklerde kollajen içeriği ve cilt durumu üzerindeki etkisi

İnsanlar üzerinde yapılan çalışmalarda, yüzde 0.1 HA2k solüsyonunun uygulandığı bölgede 4 hafta sonra dermal kollajen skorları, kontrol solüsyonunun uygulandığı bölgeye göre daha yüksekti (Şekil 3). Ek olarak, cilt su içeriği ve cilt pürüzlülüğü durumları, 8 hafta sonra HA2k solüsyonu ile tedavi edilen bölgede, kontrol solüsyonu ile tedavi edilen bölgeye göre daha iyiydi. Bu nedenle, HA2k'nin insan derisinde kollajen üretimini teşvik ettiği ve durumunu iyileştirdiği öne sürülmüştür.

3.4|HA2k'nin insan deneklerde cildin kırışıklığı, sarkması ve elastikiyeti üzerindeki etkisi

İnsan testinde, kaz ayağı ve nazolabial kırışıklıkların maksimum derinliği, 0 yüzde HA2k losyon ile tedavi edilen tarafta, kontrol losyonu ile tedavi edilen tarafa göre 4 hafta ve 8 haftada daha düşüktü (Şekil 4) . Cilt sarkması, HA2k losyonu ile tedavi edilen tarafta başlangıca göre 4 hafta sonra düzeldi. Cilt elastikiyeti, HA2k losyonu ile tedavi edilen tarafta 4 ve 8 hafta sonra iyileşirken, kontrol losyonu ile tedavi edilen tarafta sadece 8 hafta sonra düzeldi. Bu sonuçlar, HA2k losyonunun cildin kırışmasını, sarkmasını ve elastikiyetini iyileştirdiğini göstermektedir.

4|TARTIŞMA

Nazolabial kıvrımın, bir kişinin gerçek yaşı ile algılanan yaşı arasındaki farkı etkileyen en güçlü faktörlerden biri olduğu bildirilmiştir. Dolgu enjeksiyonu, nazolabial kıvrımı iyileştirmenin yaygın bir yoludur; ancak etki ve güvenlik hekimlerin tekniğine bağlıdır. Cilt nekrozu ve körlüğe yol açan damar tıkanıklığının neden olduğu enjeksiyonun bazı ciddi yan etkileri bildirilmiştir.20 HA2k, nazolabial kıvrımı iyileştirmek için daha güvenli ve daha az invaziv bir seçenektir. Ayrıca HA2k, bu çalışmada formüle edilmiş bir losyon olarak test edildi ve daha pratik bir aktif kozmetik bileşen (ACI) olduğu varsayıldı.

Nazolabial kıvrım dermiste yaşlanmadan kaynaklanır ve sadece epidermisin üst tabakasına yaklaşılarak düzeltilmesi zordur. ACI'leri epidermis ve dermis gibi daha derin katmanlara iletmek için stratum korneumdan nüfuz etmek gerekir. Önceden,<300-kDa HAs have been shown to permeate through the stratum corneum of excised human skin.21 It is, therefore, reasonable that HA2k permeates through the stratum corneum. Interestingly,   a 1200-kDa HA has been reported to permeate through the stratum corneum of excised skin when polyion complex particles were constructed with a specific polycation.22 It is suggested that higher transdermal absorption of HA2k would be achieved by optimizing the formulation.

Bazı raporlar, ACI'lerin kollajen sentezini yukarı doğru düzenlediğini belirtmiştir. HA tetrasakkaritler,8 soya fasulyesi peptidleri ve kollajen peptidleri dahil olmak üzere bu tür ACI'leri daha önce bildirmiştik. HA2k benzersizdir çünkü kollajen sentezini ve yıkımını aynı anda yukarı doğru düzenler. Gelecekteki çalışmalarda COL1A1 ve MMP-1 yukarı regülasyon mekanizmasının netleştirilmesine ihtiyaç vardır.

Düşük moleküler ağırlıklı HA'nın deride iltihaplanmaya neden olduğu bildirilmiştir23; ancak etki mekanizması tartışmalıdır. Sulandırılmış bir epidermisin kullanıldığı başka bir çalışmada, düşük moleküler ağırlıklı bir HA'nın enflamatuar olduğu bildirilmiştir.24 İnsan çalışmamızda, enflamatuar semptomlar da dahil olmak üzere hiçbir yan etki gözlenmemiştir. Düşük moleküler ağırlık, bir dermis olmadan yalnızca in vitro inflamasyon sinyalini indüklemiş olabilir. İnsan derisi gibi daha karmaşık koşullar altında, çeşitli doku hücreleri arasında karışma meydana gelir ve enflamatuar sinyaller iptal edilir. Son zamanlarda yapılan bir çalışmanın, endojen HA fragmantasyonunun inflamatuar yanıtları indüklediğini, oysa eksojen düşük moleküler ağırlıklı HA'ların (2800– 60 000 Da) indüklemediğini göstermesi dikkat çekicidir.25

Bu insan çalışmasında kullanılan HA2k konsantrasyonu yüzde 0,1 idi, ancak optimum dozunun açıklığa kavuşturulması gerekiyor. HA2k, daha düşük dozlar etkiliyse daha yaygın olarak kullanılabilir. Ek olarak, daha yüksek moleküler ağırlıklı HA'larla birleştirilmesi, daha büyük HA'lar daha iyi nemlendiriciler olduğundan, yaşlanmayı geciktirmek için daha etkili kozmetiklerin geliştirilmesini sağlayacaktır.4 HA2k, intravenöz olarak uygulanmadığından, kırışıklıkları iyileştirmek için hala nispeten uygun maliyetli bir malzemedir. fizikçi.

5|SONUÇ

Bu çalışmada, HA2k'nin insan derisine topikal uygulama ile cilt kırışıklıklarını iyileştirme üzerindeki etkisini araştırdık. Nazolabial kıvrım ve kaz ayakları, yüzde 0,1 HA2k losyonla önemli ölçüde iyileştirildi. Önerilen mekanizmadaki ilk adım, HA2k'nin stratum corneum'a nüfuz etmesidir; bunu, bir 3D deri modelinde ve eksize edilmiş insan derisinde bir permeasyon deneyi gerçekleştirerek doğruladık. Mekanizmanın ikinci adımı, bir 3D cilt modelinde COL1A1 ve MMP-1 üzerinde bir ELISA gerçekleştirerek ve insan üzerinde yapılan bir pilot çalışmada kollajen yoğunluğunun ultrason analizi ile gösterdiğimiz HA2k tarafından kollajen yeniden modelleme aktivasyonudur. konular. Birlikte ele alındığında HA2k, yaşlanma karşıtı kozmetikler için umut verici bir bileşendir.

YAZAR KATKILARI

YA ve YT tasarlanmış araştırma. YA, HK ve MK deneyler yaptı. YA ve SS verileri analiz etti ve SS, TY'nin gözetiminde makaleyi yazdı. Tüm yazarlar son makaleyi okudu ve onayladı.

TEŞEKKÜR

Bilimsel yazma yardımı, Crimson Interactive Pvt tarafından sağlandı. Ltd.

ÇIKAR ÇATIŞMASI 

YT ve MK, rekabet eden menfaatleri olmadığını beyan eder. YA, SS ve HK, HA'nın bir tedarikçisi olan Kewpie Corporation'ın çalışanlarıdır.

VERİ KULLANILABİLİRLİK BEYANI

Bu çalışmanın bulgularını destekleyen veriler, makul talep üzerine ilgili yazardan temin edilebilir.

ETİK ONAY

Bu çalışma Helsinki Bildirgesi tarafından yürütüldü ve Kewpie Corp. Tıbbi Etik Komitesi ve DERMAPRO Ltd. Kurumsal İnceleme Kurulu tarafından 17-4 ve 1-220777-AN-02-DICN18228 onay numaralarıyla onaylandı. , sırasıyla

REFERANSLAR

1. Arseni L, Lombardi A, Orioli D. Yapıdan fenotipe: kolajen değişikliklerinin insan sağlığı üzerindeki etkisi. Int J Mol Sci. 2018;19:1407.

2. Page-McCaw A, Ewald AJ, Werb Z. Matrix metalloproteinazlar ve doku yeniden şekillenmesinin düzenlenmesi. Nat Rev Mol Hücre Biol. 2007;8:221-233.

3. Lee DH, Oh JH, Chung JH. Cilt yaşlanmasında glikozaminoglikan ve proteoglikan. J Dermatol Sci. 2016;83:174-181.

4. Fraser JR, Laurent TC, Laurent UB. Hyaluronan: doğası, dağılımı, işlevleri ve devri. J Intern Med. 1997;242:27-33.

5. Kage M, Tokudome Y, Hashimoto F. Hiyalüronan tetrasakkaritlerin tüysüz fare derisinden geçişi: in vitro ve in vivo çalışma. Arch Dermatol Arş. 2013;305:69-77. doi:10.1007/ s00403-012-1252-2

6. Gesteira TF, Sun M, Coulson-Thomas YM, et al. Limbal kök hücre nişindeki hiyalüronan açısından zengin mikro ortam, limbal kök hücre farklılaşmasını düzenler. Invest Oftalmol Vis Sci. 2017;58:4407-4421.

7. Kavasi RM, Berdiaki A, Spyridaki I, et al. Cilt homeostazı ve inflamatuar hastalıkta HA metabolizması. Gıda Kimyasal Toksikol. 2017;101:128-138.

8. Kage M, Tokudome Y, Matsunaga Y, Hariya T, Hashimoto F. Normal insan dermal fibroblastlarında hiyalüronan tetrasakkaritler tarafından hiyalüronan sentaz ve kollajen tip I mRNA'nın ifadesi. J Japon Kozmetik Sci Soc. 2013;37:1-5.

9. Kage M, Tokudome Y, Matsunaga Y, Hariya T, Hashimoto F. Hiyalüronan tetrasakkaritlerin normal insan epidermal keratinositlerinde epidermal farklılaşma üzerindeki etkisi. Int J Cosmet Sci. 2014;36:109- 115.

10. Pavicic T, Gauglitz GG, Lersch P, et al. Kırışıklık karşıtı tedavide farklı moleküler ağırlıklara sahip krem ​​bazlı yeni hyaluronik asit formülasyonlarının etkinliği. J İlaçlar Dermatol. 2011;10:990-1000.

11. Lubart R, Yariv I, Fixler D, Lipovsky A. Yeni mikronize molekül teknolojisine sahip topikal hyaluronik asit yüz kremi etkili bir şekilde nüfuz eder ve yüzdeki cilt kalitesini artırır: in-vitro, ex-vivo ve in-vivo (açık etiketli) sonuçları ) çalışmalar. J Clin Esthet Dermatol. 2019;12:39-44.

12. Kano S, Todo H, Sugie K ve diğerleri. Kimyasal bileşiklerin geçirgenlik çalışmaları için alternatif bir cilt olarak yeniden yapılandırılmış kültürlü insan derisi modellerinin kullanılması. Altern Animasyon Testi Uzm. 2010;15:61-70.

13. McDaniel DH, Hamzavi IH, Zeichner JA, et al. Toplam savunma artı onarım: güneş koruması ve cilt gençleştirmede yeni bir konsept. J İlaçlar Dermatol. 2015;14:s3-s11.

14. Vitral GLN, Aguiar RAPL, de Souza IMF, Rego MAS, Guimarães RN, Reis ZSN. Farklı fetal büyüme profillerine rağmen doğumda gebelik yaşının potansiyel bir belirteci olarak deri kalınlığı: bir fizibilite çalışması. PLoS Bir. 2018;13:e0196542.

15. Clarys P, Clijsen R, Taeymans J, Barel AO. Stratum corneum'un hidrasyon ölçümleri: kapasitans yöntemi (Corneometer CM 825'in dijital versiyonu) ile empedans yöntemi (Skicon-200EX) arasındaki karşılaştırma. Skin Res Technol. 2012;18:316- 323.

16. Li X, Yuan C, Xing L, Humbert P. Yaygın cilt mikroflorasının topografik çeşitliliği ve bunun cilt ortamı tipiyle ilişkisi: Çinli kadınlarda gözlemsel bir çalışma. Sci Rep. 2017;7:18046.

17. Roques C, Téot L, Frasson N, Meaume S. PRIMOS: cilt yüzeylerinin üç boyutlu ölçümlerini üreten bir optik sistem. J Yara Bakımı. 2003;12:362-364.

18. Matsunaga Y, Fujiwara S, Mori Y, et al. Kırışıklık önleyici bir tedavi olarak hyaluronik asitten oluşan kendi kendine eriyen mikro iğnelerin geliştirilmesi. IFSCC Dergisi. 2012;15:73-78.

19. Borkow G, Elias AC. Bakır oksit içeren yastık kılıflarında uyku sonrası yüz germe ve aydınlatma. Makyaj malzemeleri. 2016;3:24.

20. Sito G, Manzoni V, Sommariva R. Yüz dolgu enjeksiyonundan sonra vasküler komplikasyonlar: literatür taraması ve meta-analiz. J Clin Esthet Dermatol. 2019;12:E65-E72.

21. Essendoubi M, Gobinet C, Reynaud R, Angiboust JF, Manfait M, Piot O. Raman spektroskopisi ile araştırılan farklı moleküler ağırlıklardaki hyaluronik asidin insan derisine nüfuz etmesi. Skin Res Technol. 2016;22:55-62.

22. Tokudome Y, Komi T, Omata A, Sekita M. Bir poliyon kompleksi yöntemiyle hazırlanan nanopartikülat, yüksek moleküler ağırlıklı hyaluronik asidin pasif cilt iletimi için yeni bir strateji. Sci Rep. 2018;8:2336.

23. Jiang D, Liang J, Noble PW. Hyaluronan, insan hastalıklarında bir bağışıklık düzenleyicidir. Physiol Rev. 2011;91:221-264.

24. Farwick M, Gauglitz G, Pavicic T ve ark. Elli kDa hyaluronik asit, yeniden yapılandırılmış epidermiste TNF- ifadesini değiştirmeden bazı epidermal genleri yukarı doğru düzenler. Cilt Pharmacol Physiol. 2011;24:210-217.

25. Takabe P, Kärnä R, Rauhala L, Tammi M, Tammi R, PasonenSeppänen S. Melanosit hiyalüronan kaplama fragmantasyonu, UVB ile indüklenen TLR-4 reseptör sinyalini ve proinflamatuar aracılar IL6, IL8, CXCL1 ve CXCL10'un ifadesini geliştirir NF-kappaB aktivasyonu yoluyla. J Invest Dermatol. 2019;139:1993-2003.

【Daha fazla bilgi için: david.deng@wecistanche.com / WhatApp:86 13632399501】