DNA Aptamer "Aptamin C" İnovasyonu Kullanan Dermatolojideki Gelişmeler: Oksidatif Stres Önleme ve Antioksidasyon Yoluyla C Vitamininin Etki Maksimizasyonu

joanna.jia@wecistanche.com/ WhatsApp: 008618081934791

Sooho Choi Doktora1|Jeongmin Han Doktora Aday2|Ji Hyun Kim MS Aday1|A-Ru Kim Ph.D. Aday3|Sang-Heon Kim Doktora Aday3|Weontae Lee Doktora, Profesör2|Moon-Young Yoon Doktora, Profesör3|Gyuyoup Kim Doktora1|Yoon-Seong Kim Ph.D., profesör1

Soyut

Arka fon:C vitamini(L-askorbik asit olarak da bilinir), hücreleri oksidatif stresten koruyarak reaktif oksijen türlerinin (ROS) azalmasında ve hücre yenilenmesinde kritik bir rol oynar. C vitamini kozmetik ve terapötik pazarlarda yaygın olarak kullanılmasına rağmen, C vitamininin kolayca aşındığına dair önemli kanıtlar vardır.oksidasyondepolama üzerine hava, pH, sıcaklık ve UV ışığı ile. Bu C vitamini eksikliği, bir antioksidan olarak gücünü azaltır ve bileşeni olarak C vitamini içeren ürünlerin raf ömrünü azaltır. C vitamini eksikliğinin üstesinden gelmek için, indirgenmiş C vitamini formuna bağlanarak ve C vitamininin etkisini geciktirerek C vitamininin antioksidan etkinliğini en üst düzeye çıkaran yenilikçi bir DNA aptameri olan Aptamin C'yi geliştirdik.oksidasyon.

Yöntemler:Aptamin C'nin C vitamini ile bağlanması, ITC analizi kullanılarak belirlendi. ITC deneyi 0.2 mmol/L ile gerçekleştirildiC vitaminibu, 0.02 mmol/L konsantrasyonunda Aptamin C içeren 1.8 mL numune hücresine 2 uL'lik kısımlar halinde 25 kez enjekte edildi. Veriler, ITC v.5.0 için orijin programı kullanılarak tek bölgeli bir bağlama izotermine yerleştirildi.

Sonuçlar:Aptamin C'nin etkisini araştırmak veC vitaminiinsan derilerinde kompleks, hem in vitro hem de klinik testler yapıldı. Aptamin C ve C vitamini kompleksinin kırışıklık iyileştirme, beyazlatma etkisi ve hidrasyon artışında önemli ölçüde etkili olduğunu gözlemledik. Klinik testte, kompleks ile tedavi edilen denekler, cilt tahrişinde ve kaşıntıda çarpıcı bir iyileşme gösterdi. Testte Aptamin C kompleksi tarafından herhangi bir advers reaksiyon gösterilmemiştir.

Çözüm:Birlikte ele alındığında, bu sonuçlar yenilikçi ve yeni bir bileşik olan Aptamin C'nin potansiyel olarak çeşitli cilt koşulları için önemli bir kozmetik bileşen olarak sunulması gerektiğini gösterdi.

ANAHTAR KELİMELERantioksidasyon, Aptamin C (C vitamini bağlayan Aptamer),oksidasyon, oksidatif stres,C vitamini(L-askorbik asit)

cistanchegüçlü bir antioksidasyon yeteneğine sahip

1|GİRİİŞ

Reaktif oksijen türleri (ROS), hücre sinyalizasyonu ve homeostazında önemli rol oynayan oksijen içeren kimyasal olarak reaktif kimyasal türlerdir.1-3 Bunlar, yalnızca konak savunma genlerinin uyarılması ve iyon taşıma sistemlerinin mobilizasyonu gibi olumlu etkileri değil, aynı zamanda apoptozda (programlanmış hücre ölümü) de rol oynar.4,5ROS seviyeleri çevresel stres tarafından artırılarak hücre yapılarına zarar verebilir.3 Bu fenomene "oksidatif stres" denir. Oksidatif stres, nörodejeneratif hastalıklar, Lou Gehrig hastalığı, otizm, multipl skleroz ve cilt hastalıkları dahil olmak üzere çeşitli hastalıkların önde gelen nedenlerinden biridir.6-15 Ayrıca, oksidatif stres cildin yaşlanma süreci üzerinde doğrudan bir etkiye sahiptir16; proteinler, lipidler ve DNA, ROS'un neden olduğu oksidatif strese karşı hassas bir şekilde tepki verirler.17 Antioksidanlar, biyolojik hedef moleküllere ulaşmalarını önleyen ROS'a doğrudan tepki gösterdikleri için cilt korumasında oldukça etkilidirler.18,19 Antioksidanlar, örneğin;C vitamini, E vitamini, koenzim Q10 ve polifenolik bileşikler cildi ROS'un neden olduğu hasarlardan korur. Antioksidanlar, böylece çeşitli cilt hastalıklarını önlemeye ve tedavi etmeye ve cildin yaşlanma sürecini yavaşlatmaya yardımcı olur.20 C vitamininin endüstrilerde kullanılması, öncelikle antioksidan özellikleri nedeniyledir.C vitamini'nin serbest oksijen radikallerini radikal süpürme adı verilen bir süreçle nötralize etme yeteneği.21,22 Bununla birlikte, bu aynı antioksidan özelliklerden dolayı, molekülün kendisi doğası gereği şu yollarla bozulmaya karşı hassastır:oksidasyon. Bu sorunu çözmek için, spesifik olarak C vitaminine bağlanan ve C vitamini oksidasyonunu engelleyen bir DNA aptameri olan Aptamin C'yi geliştirdik. Aptamerler, çok çeşitli molekülleri seçici olarak bağlayabilen tek iplikli DNA veya RNA bazlı oligonükleotitlerdir. Aptamerler yaygın olarak üstel zenginleştirme veya "SELEX" ile Ligandların Sistematik Evrimi olarak adlandırılan bir in vitro seçim yöntemiyle tanımlanır. Aptamin C'nin aşağıdakileri inhibe ettiğini belirledik.oksidasyonÇeşitli oksitleyici ajanlardan C vitamini içerir ve uzun süreli depolama sırasında antioksidan aktiviteyi korur. Aptamin C'nin güvenlik değerlendirmesini doğrulamak için hücresel düzeyde deneyler yapıldı ve doğrudan insanlara uygulandı ve hiçbir toksisite gözlemlenmedi. Atopik dermatit, sedef hastalığı ve akne gibi cilt hastalıkları, bağışıklık tepkisi ve ROS ile ilişkilidir.23C vitaminiROS'u ortadan kaldırma özelliğine sahiptir ve iltihap önleyici etkiye sahiptir.24 Aptamin C önleroksidasyonC vitamini ve yavaş salım yoluyla etkinliğini en üst düzeye çıkarır. Bu nedenle Aptamin C-vitamin C kompleksinin sinerjik etki göstermesini bekliyoruz.

2|MALZEMELER VE YÖNTEMLER

2.1|Düşük grafen oksit ile C vitaminine karşı Aptamer taraması

Bu yöntem, önceki araştırmanın yöntemi değiştirilerek gerçekleştirilmiştir.25 Spesifik olarak bağlanabilen ssDNA adayları.C vitaminiyaklaşık 1X1018 farklı diziden oluşan rastgele bir ssDNA kitaplığından geliştirildi. ssDNA kitaplığı için, boyutu 60mer olan ve rastgele oluşturulmuş 30 nükleotid dizisi ve amplifikasyon (5'-ATGCGGATCCCGCGC-(N)30-GCGCGAAGCTTGCGC-3') içeren özel yapım bir dizi kullandık. Daha spesifik bir dizi seçmek için deneysel koşulu değiştirirken toplam beş tur gerçekleştirdik. Reaksiyon için toplam hacim 200 uL idi. Yaklaşık 20 μL 10× bağlama tamponu (10× PBS eklenmiş 10 mmol/L MgCl2), 80 μL rGO (5 mg/mL, suda seyreltilmiş) ve 200 pikomol ssDNA kitaplığı (20 μL 100 μmol/L stok ) eklendi ve dH2O 200 μL'ye dosyalandı. Reaksiyon, ssDNA kitaplığını rGO'ya bağlamak için 30 dakika sürdü ve daha sonra karışım, süpernatantı elimine etmek için 20 000 g'de 20 dakika santrifüjlendi. rGO peleti, her turun hedef bağlama koşuluyla aynı konsantrasyonda olan 200 μL bağlama tamponu ile 1 kez yıkandı. Adayları ayrıştırmak için 200 nanomolC vitamini200 μL bağlama tamponu içinde seyreltilmiş rGO peletine ilave edildi ve elüsyon adımı 1 saat sürdü. Elute edilen ssDNA, santrifüjleme ile bölündü ve bu, 20 000 g'de 20 dakika süreyle yapıldı ve amplifiye edildi. Amplifikasyondan önce ssDNA dışındaki safsızlıkları ortadan kaldırmak için EtOH çöktürmesi yaptık. Amplifiye ssDNA elde etmek için asimetrik PCR yaptık. Asimetrik PCR'nin yönlendirme primerinin ters primerine oranı 10:1 idi. Birkaç mikrolitre ile PCR ürününü doğrulamak için yüzde 2.5 agaroz jel üzerinde elektroforez yaptık. Asimetrik PCR sadece ssDNA üretemez. Böylece, ssDNA adaylarını izole etmek için ez ve ıslat yöntemini yaptık. Yöntem için yüzde 12 poliakrilamid doğal jel üzerinde elektroforez yaptık ve jeli etidyum bromür (EtBr) ile boyadık. Çift sarmallı DNA (dsDNA) ve ssDNA'yı ayırmak için, ssDNA ile boyanmış jel parçası kesildi, toz haline getirildi ve ssDNA ezme ve ıslatma tamponuyla (500 mmol/L NH4OAc, yüzde 0.1 SDS, 0.1 mmol/L EDTA) çıkarıldı. bir gecede. Toz haline getirilen jel, santrifüjleme ile ayrıldı. ssDNA içeren süpernatan konsantre edilir ve EtOH çökeltmesi yapılarak saflaştırılır. Kurutulmuş ssDNA, sterilize edilmiş dH2O ile toplandı ve bu, bir sonraki tur için bir kütüphane olarak kullanıldı.

Doğal içerikcistanche amazon

2.2|İzotermal titrasyon kalorimetrisi (ITC) deneyi

İzotermal titrasyon kalorimetri deneyi, 1 mmol/L magnezyum klorürden (pH 7.4) oluşan bir fosfat tamponlu tuzlu su içinde 25 derecede bir VP-ITC sistemi (MicroCal Inc Northampton) kullanılarak gerçekleştirilmiştir. Her titrasyon deneyinden önce Aptamin C 2 mL veC vitamini600 µL numunenin gazı 30 dakika süreyle vakum altında, karıştırılmadan, deney sıcaklığının birkaç derece altındaki bir sıcaklıkta alındı. 0.02 mmol/L konsantrasyonda Aptamin C içeren 1.8 mL numune hücresine 2 µL alikuotlar halinde 25 kez enjekte edilen 0.2 mmol/L C vitamini hazırladık. Veriler, ITC v.5.0 (MicroCal Inc) için orijin programı kullanılarak tek bölgeli bir bağlama izotermine yerleştirildi.

2.3|C vitamini oksidasyonu için floresan bazlı mikroplaka tahlilleri

Oksidasyonnın-ninC vitaminiVislisel ve ark.7 tarafından açıklanan yöntemin değiştirilmiş bir versiyonu kullanılarak oksitlenmiş ürün dehidroaskorbat (DHA) saptanarak ölçülmüştür. dihidroksietil)furo[3,4-b] kinoksalin-1-on. Tahlil siyah 384 oyuklu plakalarda (Greiner Bio-One) aşağıdaki gibi yapıldı. Aptamerler önce 1 mM MgCl2 içeren fosfat tamponlu tuzlu suda 200 µmol/L konsantrasyonda çözülmüş, ardından 95 dereceye ısıtılarak katlanmış ve 15 dakika boyunca yavaş yavaş oda sıcaklığına soğumaya bırakılmıştır. Katlanmış aptamerler daha sonra 1:1 (hacim:hacim) seyreltilerek taze hazırlanmış 5 mmol/L'lik bir çözeltiye aktarıldı.C vitaminitahlil tamponunda [50 mmol/L sodyum asetat, yüzde 1 (a/h) BSA, yüzde 0,05 (h/h) Tween 20, pH 5.5'e ayarlanmış 1mM MgCl2 (Sigma, tüm bileşenler) ve karışım, oksitleyicinin eklenmesinden önce aptamerlerin bağlanmasını sağlamak için oda sıcaklığında 30 dakika inkübe edildi. Daha sonra C vitamini/aptamer çözeltilerine (EM) H2O2 (Sigma) konsantrasyonlarında oksitleyiciler ilave edildi. Oksitleyiciler, tahlil tamponunda çalışma konsantrasyonlarına önceden seyreltildi. Numuneler daha sonra deney tamponu içinde 5.5 mmol/L'lik bir konsantrasyonda OPDA (Sigma) ilave edilmeden önce oda sıcaklığında 10 dakika inkübe edildi. OPDA'nın eklenmesinin hemen ardından, numunelerin 425 nm'deki floresansı, her 60 saniyede bir yapılan ölçümlerle 45 dakikalık bir süre boyunca, 345 nm'de uyarma ile bir SpectraMax® i3X plaka okuyucusu (Moleküler Cihazlar) kullanılarak belirlendi. Tüm numuneler ve reaktif içeren kaplar, floresan deneyleri için gerçekleştirilen tüm inkübasyonlar sırasında ışıktan korumak için folyoya sarılmıştır.

2.4|DCPIP (2,6-Diklorofenolindofenol) kullanılarak C vitamini azalmasının ölçümü

azaltılmasını belirlemek içinC vitaminiDCPIP reaksiyonunu kullanarak deneyleri gerçekleştirdik. C vitamini DCPIP ile reaksiyona girerek rengi maviden renksize değiştirir. Hazırlanan C vitamini yüzde 5 Aptamin CTM ile muamele edildi ve muamele edilmeyen C vitamini 8 hafta oda sıcaklığında inkübe edildi. Örnek 2, 4 ve 8 hafta sonra ölçülmüştür. Bir pipet kullanılarak konik şişeye yaklaşık 2 mL DCPIP ilave edildi ve çözelti renksiz hale gelene kadar işlenmemiş ilk C vitamini ilave edildi. MiktarıC vitaminieklenen diğer numuneler ile ölçülmüş ve tekrarlanmıştır. Her örneğin azalma derecesi bu verilere göre hesaplanmıştır.

2.5|İnsan dermal fibroblastlarında kırışıklık karşıtı etkinin in vitro çalışması

İnsan dermal fibroblastlarında hücre canlılığını değerlendirmek için hücreler, farklı nihai konsantrasyonlarda Aptamin C ile muamele edildi.C vitamini(Aptamin C ug artı C vitamini ug/mL) {{0}}.01 artı 0,5 ug/mL, 0,1 artı 5 ug/mL, 0,5 artı 25 ug /mL, 1 artı 50 ug/mL ve 2 artı 100 ug/mL. Daha sonra hücreler, hücre içi kollajen, hücre içi kollajenaz (MMP-1) ve elastaz aktivitesini tespit etmek için Aptamin C konsantrasyonlarında C vitamini ile tedavi edildi.

İnsan dermal fibroblastları (HDF'ler), MFDS'nin "Fonksiyonel kozmetiklerin (ΙI) etkinlik değerlendirmesi için kılavuz ilkeler" temelinde seçilmiştir. HDF'ler, 37°C'de nemlendirilmiş yüzde 5 CO2 atmosferinde yüzde 10 FBS ve yüzde 1 Antibiyotik-Antimikotik ile desteklenmiş DMEM/F12 3:1 yüksek glikoz karışımında kültürlendi.

HDF'ler (5 x 104 hücre/kuyu), 24 oyuklu plakalara ekildi ve 24 saat inkübe edildi ve çeşitli konsantrasyonlarda Aptamin C ile muamele edildi.C vitaminive 24 saat inkübe edildi. 24 saat sonra süpernatant toplandı ve ortama salınan prokollajen miktarı 450 nm'de Procollagen Type IC-Peptide (PIP) ELISA Kit kullanılarak ölçüldü. Kollajen üretiminin derecesi toplam protein içeriği ile kalibre edildi ve pozitif kontrol olarak TGF-1 ile karşılaştırıldı. Solvent kontrolü olarak test materyali içermeyen ortam kullanıldı.

HDF'ler (5 x 104 hücre/kuyu), 24 oyuklu plakalara ekildi ve 24 saat inkübe edildi ve çeşitli konsantrasyonlarda Aptamin C ile muamele edildi.C vitaminive 48 saat inkübe edildi. 48 saat sonra kollajenaz aktivitesi MMP-1 İnsan ELISA Kiti kullanılarak 450 nm'de ölçüldü. MMP-1 aktivitesi toplam protein içeriği ile değerlendirildi ve pozitif kontrol olarak TGF-1 ile karşılaştırıldı. Solvent kontrolü olarak test materyali içermeyen ortam kullanıldı.

Tüm veriler ortalama ± standart sapma olarak ifade edildi ve 3 bağımsız deneyden geldi. İstatistiksel analiz, P < .05="" anlamlılık="" düzeyinde="" spss®="" yazılım="" programı="" (ibm)="" kullanılarak="" bağımsız="" örnekler="" t-testi="" ile="">

2.6|3D görüntü analiz sistemi ile cilt kırışıklığının ölçümü

Yirmi iki kadın denek (ortalama yaş: 50.05 ± 2.94 yıl) bu çalışmaya katıldı. Kaz ayağındaki deri kırışıklığı, başlangıçta, 4. ve 8. haftalarda bir 3D görüntü analiz sistemi ile değerlendirildi. Cilt hidrasyonu kapasitans yöntemiyle, TEWL cilt yüzeyi su difüzyon yöntemiyle ve cilt elastikiyeti emme yöntemiyle başlangıçta, tedaviden 2, 4 ve 8 hafta sonra değerlendirildi. Ayrıca, etkinlikle ilgili kendi kendine anketler, denekler tarafından 2. ve 4. ve 8. haftalarda ve kullanılabilirlik anketleri, tedaviden 8 hafta sonra denekler tarafından doldurulmuştur. Elde edilen tüm veriler SPSS® yazılımı ile istatistiksel olarak analiz edildi. Kaz ayağının kırışık parametreleri, PRIMOS® Premium (GFMesstechnik GmbH) kullanılarak değerlendirildi. Bu sistem, cilt kırışıklığındaki pürüzlülük, derinlik, alan ve çıkıntı hacminin nicel analizine izin verdi. Görüntü aynı bölgede cilt kırışıklık parametreleri (1, Ortalama kırışıklık derinliği; 2, Ortalama derinlik en büyük kırışıklık; 3, Maksimum derinlik en büyük kırışıklık; 4, Toplam kırışıklık alanı; 5, Toplam kırışıklık hacmi; 6) açısından analiz edildi. , Toplam form faktörü kırışıklıkları; 7, Toplam kırışıklık uzunluğu; 8, Ra; 9, Ry; ve 10, Rz) başlangıçta, Primos 5.8 E ver ile tedaviden 4 ve 8 hafta sonra. Yazılım.

3|SONUÇLAR

3.1|Kararsız bir hedefle rGO-SELEX'i başarılı bir şekilde gerçekleştirmek için tampon hazırlamaya yönelik titiz bir yaklaşım gerekliydi.

Grafen yüzeyinin aromatik halkaları ile rGO üzerindeki DNA bazları 26,27 ve bağlı olmayan ssDNA arasındaki π-π istifleme etkileşimleri yoluyla rGO'ya bağlanan ssDNA kütüphanesi, santrifüjleme ile ayrıldı ve çıkarıldı. rGO yüzeyinde adsorbe edilen ssDNA, hedef bileşik ile muamele edilerek ayrıştırıldı. Literatür raporlarına göre, hedefle bağlandıktan sonra ve rGO ile π‐π istifleme etkileşimlerini zayıflatarak aptamerin yapısı değişir.28-31 Bu işlem beş tur boyunca tekrarlandı. Sonraki her tur, daha sert tampon koşulları ve daha kısa elüsyon süreleri ile devam etti. Bu performans, hedef bileşiklere daha iyi özgüllük ile ssDNA'yı korumamıza izin verdi.

rGO-SELEX işlemi tarafından üretilen zenginleştirilmiş kitaplığın NGS verileri 404071 dizi verdi. Bu verilerden 119 dizi seçtik, bunları yapı benzerliğine göre 11 gruba ayırdık ve aptamer adayları için temsili diziler seçtik (Şekil 1A).

3.2|Aptamin C seçimi

Aptamin C adaylarının ikincil yapıları ücretsiz M-Fold yazılımı kullanılarak tahmin edildi.32,33 Adaylar konumlarına, uzunluklarına, şekillerine ve en yüksek potansiyel yapıya sahip gövde ve halka sayısına göre gruplandırıldı (Şekil 1B). DHA, oksitC vitamini, indikatör rolü oynayan o-fenilendiamin (OPDA) ile reaksiyonu ile tespit edilir.34oksidasyonC vitaminine yardımcı olur ve oksidasyonunu önler, C vitamini ve OPDA'nın yoğunlaşma ürünü olan 3-(dihidroksietil)-furo-[3,4-b]kinoksalin-1-one'dan gelen floresan sinyali, C vitamini ve OPDA'nınkinden daha düşük olacaktır. aptamersiz kontrol Pozitif kontroller ile C vitamini ve oksitleyici ile karıştırılmış her aday aptamerin bir grafiği,C vitaminiartı C vitamini ve oksitleyici ile karıştırılmış oksitleyici ve karıştırma dizileri (Şekil 1C). Beş aptamerin, Aptamin Cb, Cc, Cf, Cg ve Ck'nin antioksidasyon etkilerine sahip olduğu gösterilmiştir.

3.3|Aptamin C tarafından C vitamini oksidasyonunun inhibisyonu

Aptamin C yüksek bağlanma afinitesine sahiptir.C vitamini. Aptamin C'nin C vitamini ile bağlanması, ITC analizi kullanılarak belirlendi. Bağlanma izoterminden, bağlanma reaksiyonunun entalpisi (ΔH), entropisi (ΔS) ve stokiyometrisi (n) elde edilebilir. ITC ölçümünden Aptamin Cb ekzotermik bağlanması tespit edildi ve entalpi (ΔH) 302,5 ± 3.788, entropi (ΔS) 18.9, stokiyometri(n) 56.7 ± {{21 olarak hesaplandı. }}.426 ve ayrışma sabitleri (Kd) C vitamini için 2.13uM olarak hesaplandı. ITC ölçümünden Aptamin Cf ekzotermik bağlanması tespit edildi ve entalpi (ΔH) 279.2 ± 2.992 olarak hesaplandı, entropi (ΔS) hesaplandı 18.4 olarak stokiyometri(n) 167 ± 1.15 olarak hesaplandı ve ayrışma sabitleri (Kd) C vitamini için 0.89uM olarak hesaplandı. ITC ölçümünden Aptamin Ck ekzotermik bağlanması tespit edildi ve entalpi (ΔH) ) 250.4 ± 3.742, entropi (ΔS) 19.8, stokiyometri(n) 82.2 ± 0.732 ve ayrışma sabitleri (Kd) 0.90 µmol/L olarak hesaplandı. C vitamini (Şekil 2A). ITC ölçümleri, Aptamin C ile birleşme üzerine entropideki değişimin,C vitamini. ÖnlemekoksidasyonC vitamini sıvı haldeyken, tüm çözeltiler nitrojen ile muamele edilmiş deiyonize su ile hazırlandı. OPDA (o-fenilendiamin) tarafından üretilen DHA'ya bağlandığında floresan ifade edildi ve nicel olarak analiz edildi.oksidasyonAptamin C konsantrasyonuna göre C vitamini oksidasyon derecesi (125, 250, 500 ve 1000 nmol/L) OPDA testi ile karşılaştırıldı ve doğrulandı. Sonuçlar göstermiştir ki,C vitaminiAptamin C konsantrasyonu daha yüksek olduğunda dehidroaskorbik aside dönüşüm daha yavaştı. (Şekil 2B). Bu veriler Aptamin C'nin C vitamini oksidasyonunun doza bağımlı bir inhibitörü olduğunu kanıtlamaktadır.

Aptamin C'nin aşağıdakileri önleyip önleyemeyeceğini belirlemek için deneyler yaptık.oksidasyonUzun bir süre boyunca C vitamini. Birlikte tedavi edilen Aptamin CC vitaminive işlenmemiş C vitamini ışığa maruz bırakıldı ve 8 hafta oda sıcaklığında bekletildi. Sonuç olarak, tedavi edilmeyen C vitamini yalnız bırakıldığında 2 haftada azalma derecesi yarının altına indi ve 4 hafta sonra neredeyse tamamı okside oldu. Aptamin C'nin varlığında, C vitamini 8 haftaya kadar yarı yarıya azaldı (Şekil 2C). Bu, Aptamin C'nin uzun bir süre boyunca C vitamini oksidasyonunu önlediğini göstermektedir.

vücut geliştirme

3.4|Hücre içi kolajenaz (MMP-1) aktivitesi ve kolajen analizi

Kollajenaz aktivitesinin analizinde, matriks metalloproteinaz-1 (MMP-1) üretimi doza bağlı bir şekilde, {{1{ konsantrasyonlarında yüzde 7.06, yüzde 9.29 ve yüzde 31.81 ile önemli ölçüde azaldı. {12}}}}.01 artı 0.5 ug/mL, 0.1 artı 5 ug/mL ve 0.5 artı 25 ug/ mL, sırasıyla (Şekil 3A). Kollajen sentezinin analizinde, prokollajen tip Ι karboksi-terminal peptit (PIP) doza bağlı bir şekilde önemli ölçüde arttı, 0,01 artı 0,5 ug/mL'de yüzde 25.{{20}} artış , 0.1 artı 5 ug/mL'de yüzde 41.99 ve 0.5 artı 25 ug/mL'de yüzde 71.18 (Şekil 3B).

3.5|İnsan derisi üzerindeki cilt kırışıklığını iyileştirme etkilerinin klinik bir çalışması

Kırışıklık parametrelerinin istatistiksel analizi, test ürününün insan derisi üzerindeki cilt kırışıklığını iyileştirme etkilerini değerlendirmek için bir 3D görüntü analiz sistemi tarafından gerçekleştirilmiştir. Kontrol grubu ile karşılaştırıldığında, "Ortalama kırışıklık derinliği" parametresi 4 haftada yüzde 4,77 ve 8 haftada yüzde 4,25, "Ortalama derinlik en büyük kırışıklık" parametresi 4 haftada yüzde 3,37 ve 8 haftada yüzde 4,53 azaldı" dedi. Maksimum derinlik en büyük kırışıklık" parametresi 4 haftada yüzde 4,36 ve 8 haftada yüzde 7,19, "Toplam kırışıklık uzunluğu" parametresi 4 haftada yüzde 1,61, 8 haftada yüzde 2,67, "Ra" parametresinde yüzde 4,22 azaldı 4 haftada yüzde 3,90 ve 8 haftada yüzde 3,90, "Ry" parametresi 4 haftada yüzde 2,66 ve 8 haftada yüzde 7,11, "Rz" parametresi 4 haftada yüzde 3,69 ve 8 haftada yüzde 6,22, azalma 3,69 oldu yüzde -7,11 (Şekil 4).

4|ÇÖZÜM

C vitaminiticari olarak önemli ancak kararsız bir moleküldür, bu nedenle istikrarını geliştirmek çeşitli pazar sektörlerinin ilgisini çekmektedir. Çalışmamız, DNA aptamerleri olan Aptamin C'nin potansiyel olarak raf ömrünü uzattığını ve geciktirerek bu tür ürünlerin gücünü artırdığını göstermektedir.C vitamini oksidasyonbir çözümde. Aptamin C kompleksinin kırışıklık iyileştirme ve cilt nemlendirmedeki klinik etkinliğini sergiledik. Aptamin C kompleksi ayrıca cildi sertleştirmeye yardımcı olabilir.

cilt beyazlatma geliştirmek