Uzamsal Öğrenme Sonrası Değişen Norepinefrin İletimi Sıçanlarda Uyku Aracılı Bellek Konsolidasyonunu Bozuyor

Noradrenerjik ilaçların terapötik kullanımında biliş üzerindeki etkilerinin değerlendirilmesi ön plandadır. Norepinefrin (NE), çeşitli bilişsel süreçler için önemli bir nöromodülatördür ve uyku aracılı hafıza konsolidasyonuna önemli ölçüde katkıda bulunabilir. NE iletimi davranışsal ve/veya beyin durumuna göre dalgalanır ve ilgili sinirsel aktiviteyi etkiler. Burada, yetişkin erkek sıçanlarda hipokampal bağımlı bir görevin öğrenilmesinin ardından değişen NE iletiminin sinirsel aktivite ve uzaysal hafıza üzerindeki etkilerini değerlendirdik.

Gittikçe daha fazla çalışma norepinefrinin hafızayla yakından ilişkili olduğunu gösteriyor. Norepinefrin vücutta önemli roller oynayan bir nörotransmiterdir ve bunlardan biri hafıza oluşumunu ve depolanmasını teşvik eder.

Epinefrinin ana işlevi sinir sistemini uyarmak ve konsantrasyon ve uyanıklığı arttırmaktır. Bunlar hafızayla yakından ilgili özelliklerdir. Stresli bir durumda olduğumuzda adrenalin seviyeleri yükselir, beyni yüksek düzeyde alarm durumuna geçirir ve önemli bilgilerin hatırlanmasını kolaylaştırır.

Ayrıca epinefrinin hafıza oluşumu üzerinde uzun vadeli etkileri olabilir. Son araştırmalar, anılar tekrar tekrar etkinleştirildiğinde epinefrin seviyelerinin yükseldiğini ve bunun da hafızanın korunmasını ve kalıcılığını artırmaya yardımcı olduğunu bulmuştur.

Yukarıdaki etkilere ek olarak epinefrin, beyindeki nöronlar arasındaki etkileşimi etkileyerek anıların oluşumunu ve depolanmasını da etkileyebilir. Bu etki, sinir ağlarının bağlantısını düzenleyerek anıların oluşumunu ve korunmasını destekleyebilir.

Özetle epinefrinin hafızayla önemli bir ilişkisi vardır. Olumlu bir tutum sergilemeli ve adrenalin düzeylerini artırmak, böylece hafızamızı ve bilişsel yeteneklerimizi geliştirmek için vücudumuzu ve beynimizi çalıştırmaya odaklanmalıyız. Belleği geliştirmemiz gerektiği görülebilir ve Cistanche Deserticola hafızayı önemli ölçüde geliştirebilir çünkü Cistanche Deserticola, birçok benzersiz etkiye sahip olan geleneksel bir Çin tıbbi malzemesidir ve bunlardan biri hafızayı geliştirmektir. Kıymanın etkinliği asit, polisakkaritler, flavonoidler vb. dahil olmak üzere içerdiği çeşitli aktif bileşenlerden gelir. Bu bileşenler beyin sağlığını çeşitli şekillerde geliştirebilir.

Kısa Süreli Belleği Nasıl Geliştirebileceğinizi Bilin'e tıklayın

Yedi günlük öğrenme seansının her birinden sonra klonidin (0.05 mg/kg, ip; n= 12 sıçan) veya propranolol (10 mg/kg, ip; n= 11) uyguladık. 8-kol radyal labirent. Tuzlu su grubuyla (n= 9) karşılaştırıldığında, ilaçla tedavi edilen fareler daha düşük öğrenme oranları gösterdi. İlaçların kortikal ve hipokampal aktivite üzerindeki etkilerini değerlendirmek için, her öğrenme oturumundan veya ilaç uygulamasından sonra 2 saat boyunca dorsal hipokampusun CA1 alt alanından prefrontal EEG ve yerel alan potansiyellerini kaydettik. Her iki ilaç da hipokampal dalgaların sayısını en az 2 saat boyunca önemli ölçüde azalttı. EEG tabanlı bir uyku skorlaması, klonidinin uyku başlangıcını hızlandırırken aynı zamanda sessiz uyanıklığı uzattığını ortaya çıkardı.

Propranolol, hızlı olmayan göz hareketi (NREM) uykusu pahasına aktif uyanıklığı artırdı. Klonidin, NREM uykusu sırasında yavaş salınımların (SO) ve uyku iğciklerinin oluşumunu azalttı ve SO ile uyku iğleri arasındaki zamansal eşleşmeyi değiştirdi. Bu nedenle, NE aktarımının farmakolojik değişimi, hafıza konsolidasyonu için optimal olmayan bir beyin durumu üretti. Sonuçlarımız, öğrenme sonrası NE'nin, hafıza konsolidasyonunun altında yatan hipokampal-kortikal iletişimin verimliliğine katkıda bulunduğunu göstermektedir.

Noradrenerjik ilaçların klinik kullanımında bunların bilişsel işlevler üzerindeki etkileri büyük önem taşımaktadır1,2. Klonidin ve propranolol en sık reçete edilen ilaçlar arasındadır. Klonidin, antihipertansif ve analjezik olarak kullanılmaktadır, ancak aynı zamanda uyku bozukluklarının tedavisinde ve son zamanlarda dikkat eksikliği hiperaktivite bozukluğu (ADHD) ve Parkinson hastalığının tedavisinde de reçete edilmektedir1,3,4. Propranolol çeşitli kardiyovasküler durumların ve anksiyetenin tedavisinde kullanılmaktadır5.

Açık sağlık yararlarına rağmen, norepinefrin (NE) düzeylerindeki farmakolojik değişiklik, bir yan etki olarak hastaların bilişsel yeteneklerini bozabilir. Bilinçli (veya 'çevrimiçi') bilgi işleme için NE aktarımının temel rolü iyi bilinmektedir2,6, 7. Daha önceki çalışmalar, öğrenmenin tetiklediği moleküler, sinaptik ve devre değişikliklerinin gerçekleştiği uyku8-10 gibi bilinçsiz (veya 'iyi') durumlarda da NE'nin önemini vurgulamıştır11. Öğrenme sonrası uyku sırasında, başlangıçta kararsız hafıza izleri, hipokampustaki (HPC) hafıza kodlayan nöral temsillerin yeniden etkinleştirilmesi yoluyla stabilize olur ve daha sonra uzun süreli depolama için neokortekse entegre edilir12.

Öğrenme sonrasında NE seviyesinin farmakolojik değişiminin hayvanlarda13-18ve insanlarda9,10,19,20 hafıza pekiştirmesini etkilediği gösterilmiştir. Ayrıca davranışsal farmakoloji çalışmaları, NE'nin sinaptik plastisiteyi kolaylaştırıcı rolüyle tutarlıdır21-25. NE'nin hafıza kodlaması ve sağlamlaştırılmasındaki rolüne ilişkin psikofarmakoloji tarafından sağlanan kapsamlı kanıtlara rağmen, NE aktarımının öğrenme sonrası dinamikleri sistematik olarak karakterize edilmemiştir. Kendiliğinden davranan farelerde NE salınımının yüksek zamansal çözünürlükte izlenmesiyle yapılan son çalışmalar, daha önceki çalışmaları daha da geliştirmiş ve hızlı göz hareketi olmayan (NREM) uykunun ve NREM uyku aracılı hafıza konsolidasyonunun sürekliliği için NE salınımının bir rolünü önermiştir26,27

Neokortikal yavaş (~1 Hz) salınımlar (SO), talamokortikal uyku iğcikleri (10-16 Hz) ve hipokampal dalgalanmalar (~150 Hz), NREM uykusunun ayırt edici özellikleridir ve uykuya bağlı sistem düzeyindeki anahtar salınımlar olarak tanımlanmıştır. bellek birleştirme28. NE'nin hafızayı destekleyen kortiko-hipokampal ağ içindeki geçici olarak koordine edilmiş aktivitedeki etkisi yeterince anlaşılmamıştır11. Farede prefrontal NE salınımının mikrodiyaliz ölçümü, koku ayrımcılığından yaklaşık 2 saat sonra geçici bir artış tespit ederken, hafıza eksikliğine neden olan öğrenme sonrasında prefrontal adrenoreseptörlerin bloke edilmesi29. Dorsal HPC'de, duygusal ve mekansal hafızanın etkili bir şekilde pekiştirilmesi için -adrenoreseptörlerin aktivasyonu gereklidir30,31. Hem 1- hem de -adrenerjik reseptörler, uyku iğciklerinin ve hipokampal dalgaların oluşumunda rol oynar26,32,33. Daha önce, öğrenmeden sonra NREM uykusu sırasında Locus Coeruleus (LC) noradrenerjik nöronlarının yüksek aktivitesini34 ve bunların koordineli olduğunu belgelemiştik. SO35 ile ateşleme. Son çalışmamızda, anestezi altındaki sıçanlarda LC fazik aktivasyonunun, tek bir SO döngüsünün zamansal ölçeğinde kortikal popülasyon dinamiklerini modüle ettiğini gösterdik. Son olarak, NREM uykusu sırasında doğal LC aktivite modellerinin değiştirilmesi hafıza eksikliğine yol açmıştır37,38.

Bu çalışmada, mekansal öğrenme eksikliğini, hafızayı destekleyen ağdaki değişen sinirsel aktiviteyle ilişkilendirdik. NE aktarımını değiştirmek için klinik açıdan anlamlı iki ilaç olan klonidin ve propranolol kullandık. Klonidin, 2-adrenoreseptörlerin aktivasyonu yoluyla LC-NE nöronlarının ateşlenmesini bastırır ve LC terminallerinden NE salınımını azaltır39. Propranolol, orta dozda tekrarlanan tedaviden sonra -adrenoreseptörlere bağlanarak NE geçişini bloke eder (< 40 mg/kg) inhibits the LC activity40,41. We report that the alteration of NE transmission during the post-acquisition period impaired spatial learning. The reduction of SO, sleep spindles, and hippocampal ripples together with the appearance of high voltage spike-and-wave patterns (HVS) was indicative of a pharmacologically induced switch to a brain state that was likely suboptimal for memory consolidation. Our results further support the view that NE transmission during NREM sleep importantly contributes to information processing within the thalamocortical and hippocampal-cortical networks, which are thought to mediate systems-level memory consolidation.

Sonuçlar

Sonuçlar, rastgele olarak üç ilaç durumuna (klonidin, propranolol ve salin) ayrılan yetişkin (300-400 g) erkek Sprague-Dawley sıçanlarından (n=38) elde edildi. Her sıçan için koşullar ve veri dahil etme/hariç tutma Ek Tablo S1'de listelenmiştir.

Öğrenme sonrası klonidin ve propranolol, uzamsal hafıza eksikliğine neden olur.

Yedi günlük seans sırasında toplam 32 fareyi uzamsal hafıza görevi konusunda eğittik (Şekil 1a; ayrıntılar için Ek Yöntemlere bakın). Yirmi altı sıçana, ön EEG'yi ve yerel alan potansiyellerini (LFP) izlemek için kronik elektrotlar implante edildi. hipokampus (ayrıntılar için Yöntemlere bakın). İlave 6 sıçan sağlamdı (implante edilmemiş) ancak aynı eğitim/ilaç protokolünü izlediler. Daha da önemlisi, implante edilmiş ve implante edilmemiş sıçanlar arasında öğrenme oranında bir fark yoktu (Ek Şekil S1). Her öğrenme seansından hemen sonra farelere klonidin (0.05 mg/kg, ip; n=12), propranolol (10 mg/kg, ip; n=11) verildi. ) veya salin (1 ml/kg, ip; n=9). İlk (ilaçsız) öğrenme oturumunda, herhangi bir davranışsal değişkene göre gruplar arasında fark yoktu (Ek Tablo S1). Öğrenme sürecinde, tüm sıçanlar aktif olarak farklı labirent kollarına girdiler (Şekil 1b) ve neredeyse her denemede tüm ödülleri topladılar (Şekil 1c); bu davranış modeli, genel lokomotor aktivite veya yiyecek motivasyonunda gruplar arasında hiçbir fark olmadığını gösterdi. Davranışsal değişkenlerin çoğu öğrenme dinamiklerini yansıtıyordu. Görev performansının doğruluğu giderek artıyordu (tekrarlanan ölçümler ANOVA, F (3,7,106,6)=12,0, p<0.0001; Fig. 1d) with the between-group difference approaching a significance level (F (2,29)=3.33, p=0.05). The overall number of errors was significantly higher in the drug-treated rats (Fig. 1e). There was a significant effect of repetition (F (5,145)=11.0, p<0.001) and between-group difference by the number of errors (F(2,29)=7.34, p=0.003). The post-hoc comparisons confirmed a higher number of errors in the drug-treated groups (clonidine: p=0.031, propranolol: p=0.002; Bonferroni post-hoc comparisons vs. saline). Notably, propranolol-treated rats made the most errors during the first trial (Fig. 1f); the latter was indicative of a memory retrieval defect. To further explore the nature of spatial memory deficit, we split the errors into working memory (WM, re-entering the maze arm within a trial) and reference memory (RM, entering unbaited maze arm) errors. There was a significant between-group difference by both WM (F (2, 29)=8.0, p=0.002) and RM (F (2, 29)=5.0, p=0.014). The posthoc comparisons showed that drug-treated rats committed significantly more RM errors (Fig. 1g). Besides, the propranolol-treated rats also made more WM errors (Fig. 1g). Despite obvious spatial memory deficit at the early stages of learning, all rats reached a similar performance level by the end of the learning period (Fig. 1d,e). The trial time was decreasing (F (3.5, 102.4)=16.1, p<0.0001), yet equally in all groups (time: F (2,29)=0.43, p=656). Finally, we used the K-means cluster analysis to split rats according to their learning speed (see Methods for details). Indeed, individual rats learned the task at different rates (Fig. 1h). Remarkably, the proportion of 'slow' learners was much higher among the drug-treated rats (Fig. 1i).

Klonidin ve propranolol hipokampal dalgalanmaları bastırır.

Klonidin ve propranolol'ün hipokampal dalgalar üzerindeki etkilerini hafıza güçlendirmenin temel unsurları olarak değerlendirdik12. Retrospektif analiz, başlangıçta labirentte implante edilen ve eğitilen 26 fareden 14'ünde dalgalanma tespitinin çeşitli teknik arızalar nedeniyle güvenilir olmadığını ortaya çıkardı. Bu nedenle, örneklem boyutunu artırmak için, ilaçlarla tedavi edilen ancak labirent üzerinde test edilmeyen ilave 6 sıçandan EEG ve hipokampal LFP'ler kaydedildi (Ek Şekil S1). Böylece, ilaçların hipokampal dalgalar üzerindeki etkileri 24 sıçanda test edildi (klonidin, n=8; propranolol, n=9 ve salin, n=7; Ek Tablo S1). Her iki ilaç da enjeksiyondan sonra en az 2 saat boyunca dalgalanma oranını önemli ölçüde azalttı (F(2, 23)=13.27, p=0.0002; Şekil 2a–d). Sıçan davranışını aktif uyanıklık (AW), sessiz uyanıklık (QW) ve NREM uykusu olarak sınıflandırmak (ayrıntılar için Yöntemlere bakın), her iki ilacın en belirgin etkisinin AW ve QW bölümleriyle karşılaştırıldığında NREM uykusu sırasında meydana geldiğini ortaya çıkardı (Tablo 1). Yani, salin grubuyla (n=7) karşılaştırıldığında, NREM uykusu sırasındaki dalgalanma baskılama derecesi klonidinden (n=8) sonra %40,1 ile %91,3 arasında ve %2,3 ile 86 arasında değişmiştir. Propranolol (n=9) enjeksiyonundan sonra %0,6. Dalgalanma oranındaki çarpıcı azalmanın dışında, dalgalanmanın kendine özgü özellikleri (genlik: F(2, 23)=1) üzerinde hiçbir ilaç etkisi ortaya çıkmadı. 12, p=0.34; güç: F(2, 23)=3.3, p=0.056; dalga içi frekans: (F(2, 23){{ 45}}.40,p=0.11), klonidinden sonra daha uzun bir dalgalanma süresi hariç (F(2, 23)=11.47, p=0.0004; Şek. 2d–f).

Klonidin ve propranolol'ün davranış durumu ve uykuyla ilişkili EEG salınımları üzerindeki etkileri. Geçersiz EEG verilerinin (n{{{0}} sıçan) hariç tutulmasından sonra, EEG tabanlı analizler toplam 21 veri kümesi (klonidin, n=6; propranolol, n{{4}) kullanılarak gerçekleştirildi. } ve salin, n=6; Ek Tablo S1). Hipokampal popülasyon aktivitesi üzerindeki etkilere ek olarak, her iki ilaç da spontan davranış modelini etkiledi. Her davranış durumunda harcanan toplam süre açısından gruplar arasında bir fark vardı (AW: F(2, 20)=4.09, p=0.034; QW:F(2, 20){{ 16}}.84, p=0.021; NREM: F(2, 20)=4.66, p=0.023). Spesifik olarak, enjeksiyondan sonraki 2 saatlik gözlem süresi boyunca klonidin QW'yi uzatırken propranolol AW'yi uzattı ve NREM uykusunu kısalttı (Ek Şekil S2). Her iki ilaç da her iki davranış durumunda da ortalama dönem süresini etkilemedi (tümü için F(2, 20) ⩽ 2,57, p ⩾ 0,10). Klonidinin hafif bir yatıştırıcı etkisi, daha hızlı uyku başlangıcıyla yansıtıldı (Ek Şekil S2).

Ayrıca prefrontal EEG ilaca özgü bir şekilde etkilenmiştir (Şekil 3a-c). Spesifik olarak klonidin, AW ve QW sırasında sigma (10-16 Hz) gücünü arttırırken NREM uykusu sırasında azaltır (Şekil 3d-f). Ayrıca, ilaçla tedavi edilen sıçanlarda NREM uykusu sırasında delta (< 2 Hz) power was decreased and the power within the 5–7 Hz frequency range was increased due to the appearance of HVS (Fig. 3f). Te observed changes in the EEG power spectrum reflected drug-induced modulation of the oscillatory events like SO and sleep spindles (Figs. 3a–c and 4). In clonidine-treated rats, the SO was less frequent (Table 1) and of smaller amplitude (Supplementary Figure S3). There was no effect on the SO (half-wave) duration (F(2, 20)=2.55, p=0.11). The effect of clonidine on SO was almost immediate and lasted at least for 2 h (Fig. 4d). In clonidine-treated rats, the spindles were more frequent during AW and QW, while their occurrence was decreased during NREM sleep (Table 1). Notably, the effect of clonidine was delayed (Fig. 4h). Te spindle power was significantly decreased by clonidine (Supplementary Figure S3). No change was detected in the spindle length (F(2, 20)=0.08, p=0.92) or the intra-spindle frequency (F(2, 20)=1.09, p=0.36). Te clonidine-induced effects persisted across repeated drug treatments (Supplementary Figure S3). The SO and sleep spindles were unaffected by propranolol (Fig. 4d,h, and Supplementary Figure S3).

Daha sonra, ince konsolidasyonun altında yatan ağ koordinasyonunun bir mekanizması olarak önerilen köklü bir fenomen olan SO ve uyku iğcikleri arasındaki zamansal bağlantı üzerindeki ilacın etkisini değerlendirdik42-44. Bu amaçla, NREM uyku bölümlerini seçtik ve SO negatif zirvesinin ± 1,5 civarında meydana gelen iğleri çıkardık. Genel olarak, iğlerin yaklaşık 1/3'ü SO-bağlantılıydı (F(2, 20)=1.03, p=0.38); ancak, SO negatif tepe noktası etrafında gruplanan iş mili gruplar arasında bölünmüştür (Şekil 4i-l). Salin ve propranolol ile tedavi edilen sıçanlarda, iğler tercihen SO'nun yükselen fazı boyunca meydana geldi ve SO negatif zirvesinden sonra maksimum ms'ye ulaşırken, klonidin ile tedavi edilen sıçanlarda iğler, SO negatif tepe etrafında gruplandı (Şekil 41).

Son olarak, klonidin uygulaması, ilaçsız koşullar altında nadiren meydana gelen yüksek genlikli geçici salınımlar olan HVS'yi destekledi (Tablo 1 ve Ek Şekil S4). İlk HVS, klonidin enjeksiyonundan sonra 8,4 ± 1,0 dakika (aralık: 5,4 – 11,3 dakika) kadar hızlı ortaya çıktı; bu, salin enjeksiyonundan (24,6±2,3 dakika) (aralık: 16,6 – 30,7 dakika) sonra çok daha erkendi. veya propranolol (27,6 ± 6,2 dk) (aralık: 7,7 – 62,2 dk).

Dikkat çekici bir şekilde, klonidin ile tedavi edilen 6 sıçandan 5'inde (%83,3) ve propranolol ile tedavi edilen 9 sıçandan 5'inde (%55,5) HVS AW durumu sırasında tespit edilirken, 6 salinden 5'inde AW sırasında HVS yoktu. -tedavi edilen sıçanlar. Klonidin ile tedavi edilen sıçanlarda HVS oranı, enjeksiyon sonrası ilk saatte daha yüksekti ve bu etki günler boyunca devam etti (Ek Şekil S4). Ayrıca klonidin, HVS süresini artırdı (Ek Şekil S4) ve HVS arası frekansı azalttı (F(2, 20)=7.94, p=0.003). HVS gücü klonidinden etkilenmedi (F(2, 20)=2.28, p=0.13). Propranololün HVS üzerinde tespit edilebilir bir etkisi yoktu (Ek Şekil S4).

Tartışma

Bu çalışmada, bir 8-kol radyal labirent görevine günlük olarak maruz kaldıktan sonra tekrar tekrar klonidin (0.05 mg/kg, ip) ve propranolol (10 mg/kg, ip) uygulamasının Yetişkin erkek sıçanlarda uzaysal hafıza konsolidasyonunda bozulma. İlaçla tedavi edilen sıçanlarda uzamsal hafıza eksikliği, daha yüksek sayıda WM ve RM hatasında belirgindi. Önceki çalışmalar, muhtemelen artan SOaktivite ve prefrontal-otonomik ağların güçlendirilmesine bağlı olarak NREM uykusunun WM üzerinde yararlı bir etkisine işaret etmiştir45,46. Aslında, NREM uykusu sırasında parasempatik aktivite artar ve vagal girdiler yoluyla LC'den NE salınımını teşvik etmesi muhtemeldir45. Bu nedenle, NREM uykusu35 sırasındaki couleur-SO eşleşmesi, ertesi gün prefrontal bağımlı WM performansını45 destekleyebilir. Sonuçlarımız, öğrenme sonrası dönemde LC-NE aktivitesinin farmakolojik baskılanmasının, WM kapasitesi için gerekli olan prefrontal fonksiyonu gerçekten etkilemiş olabileceğinden, bu hipotezi dolaylı olarak desteklemektedir. RM hatalarına yansıyan uzamsal belleğin daha düşük doğruluğu, ilaçların sistem düzeyinde konsolidasyonun önemli bir bileşeni olan dalga aracılı hipokampal kortikal iletişim üzerindeki etkisini gösterdi28. Son olarak, öğrenmenin erken dönemindeki en güçlü hafıza eksikliği, yeni alınan bilgilerin hassas bir şekilde işlenmesi için NE iletiminin önemini gösterdi8-10.

İlaçla tedavi edilen sıçanların çoğunda daha düşük bir öğrenme oranı, muhtemelen değişen uykuyla ilişkili beyin aktivitesiyle ilişkiliydi. Aslında, NE aktarımının farmakolojik değişimi, sistem düzeyinde hafıza konsolidasyonunda yer alan talamokortikal ve hipokampal ağlar içindeki uykuyla ilişkili nöral dinamiği etkilemiştir28. Spesifik olarak, her iki ilaç da hafıza kodlayan hücre düzeneklerinin stabilizasyonuna aracılık ettiği düşünülen hipokampal dalgalanmaların oluşumunu önemli ölçüde azaltmıştır12,47. Sonuçlarımız, dalgalanma üreten mekanizmanın optimal seviyede NE gerektirdiğini, hem artan hem de azalmış LC-NE aktivitesinin dalgalanmalar için elverişsiz olduğunu gösterdi. Bu nedenle, öğrenme sonrası dönemde ilacın neden olduğu dalgalanma baskılaması, uzaysal hafıza eksikliğini açıklayabilir. Bu sonuç, elektriksel dalgalanma bastırma48,49 tarafından üretilen bir öğrenme kusuruyla tutarlıdır. Bildiğimiz kadarıyla, hipokampal dalgalar üzerindeki noradrenerjik etkiler, davranışlı hayvanlarda henüz karakterize edilmemiştir. Hipokampal dalgalanmalar üzerindeki etkisinin yanı sıra klonidin, propranolol değil, SO ve uyku iğciklerini baskıladı; bu, mevcut literatürle tutarlıdır50,51; aynı zamanda SO-iş mili bağlantısını da değiştirdi.

Her ne kadar nispeten kısa (~2 saat) gözlem süresi uyku/uyanıklık döngüsünün karakterizasyonuna izin vermese de, ilacın prefrontal EEG üzerindeki etkileri genel olarak mevcut literatürle tutarlıydı50,51. Uyku/uyanıklık düzeni ve EEG güç spektrumu üzerinde ilaca özgü etkiler gözlemledik. Yani klonidin, uyku başlangıcını hızlandırarak ve QW'yi uzatarak hafif sedasyona neden olurken propranolol, NREM uykusu pahasına AW'yi artırdı. Her iki ilaç da EEG gücünü düşük (<2 Hz) frequency range and increased 5–7 Hz power during NREM sleep due to the appearance of the HVSs; clonidine also reduced the sigma (10–16 Hz) power. The effects of clonidine were overall more pronounced, lasted for at least 2 h, and were consistent across daily injections. Of note, the aforementioned effects were observed during the dark (active) phase of the rat circadian cycle, while the drug-induced effects may differ during the light (inactive) phase as well as during the extended post-administration period.

Daha önceki farmakolojik çalışmalar, öğrenme sonrasında NE iletiminin modülasyonunun hafıza gücünü etkilediğini defalarca göstermiştir13-15,18,29,52,53. Uyanıklık durumları sırasındaki daha yüksek LC-NE aktivitesi, çevrimiçi bilgi işlemedeki rolü üzerine araştırmalara yol açmıştır6,7, uyku gibi düşük uyanıklık durumları sırasında beyin ağlarının noradrenerjik modülasyonunun rolü ise uzun süredir odak dışı kalmıştır. Çeşitli çalışmalar, hipokampal bağımlı hafıza konsolidasyonu için NE'nin -adrenoreseptörler30,31 yoluyla hareket etmesinin önemini vurgulamıştır10,37,38,54,55. NE'nin sıklıkla meydana gelen uzun vadeli sinaptik plastisiteyi21-25 desteklediği iyi bilinmektedir. Daha önceki çalışmamızda, NREM uykusu sırasında LC-NE nöronlarının göreceli sakinliğinin, öğrenme sonrasında ortaya çıkma olasılığı daha yüksek olan geçici aktivite nöbetleri tarafından kesintiye uğradığını bildirmiştik. NREM uykusu sırasında LC aktivitesinin optogenetik değişimi, sıçanın hipokampusa bağlı hafıza görevindeki performansını bozdu. Kortikal NE salınımını ölçen son iki çalışma, yavaş-zamansal ölçekte LC-iş mili bağlantısını gösterdi.

Noradrenerjik aktivitenin29,34 öğrenme sonrası dalgalanmalarının yanı sıra, LC-NE nöronlarının geçici olarak koordineli bir şekilde devreye girmesi ofine ağlarını etkileyebilir. Uyku sırasında LC aktivite dinamiğini yöneten kesin mekanizma bilinmemekle birlikte, NE düzeyi ile uykuyla ilişkili salınımlar arasında zamansal ilişkiler mevcuttur. LC-NE nöronlarının beslenme hızı uyku iğcikleri sırasında artar ve iş mili başlangıcından önce azalır.57Daha önce LC-NE nöron ateşlemesi ile SO35 fazı arasında geçici bir bağlantı olduğunu göstermiştik.

Üretan anestezisi altındaki sıçanlarda yaptığımız son çalışmamızda, fazik LC aktivasyonunun kortikal artmış uyarılabilirlik durumunu uzattığını ve prefrontal nöronların ateşlenme hızını arttırdığını gösterdik36. Daha önce dalgalanmayla tetiklenen elektriksel LC uyarımının, muhtemelen endojen LC aktivite düzenine müdahale nedeniyle uzaysal bir hafıza hatası ürettiğini bildirmiştik. Mevcut çalışmamızda, NE salınımının klonidin kaynaklı baskılanması, iş mili üretim ağını etkilemiş ve muhtemelen LC-iş mili bağlantısını bozmuştur. SO'nun kortikal kökenine rağmen, talamustan58 ve LC36,60 da dahil olmak üzere nöromodülatör çekirdeklerden59 gelen subkortikal girdiler SO'nun uzay-zamansal dinamiklerini etkiler. SO dinamiklerinin NE aracılı modülasyonu mevcut bulgularla daha da desteklenmektedir. Spesifik olarak, klonidinin SO üretimini baskıladığını, SO genliğini azalttığını ve SO-iş mili bağlantısını etkilediğini gösterdik. SO-iş mili birleştirme epizodlarının, öğrenme içeriğinin yeniden etkinleştirildiğini gösterdiği düşünülür; birleştirme hassasiyeti, hafıza için faydalı olan yeniden etkinleştirme gücünü tahmin eder61-63. Bu nedenle, sistem düzeyindeki konsolidasyonun önemli bir unsuru olan bölgeler arası zamansal bağlantı, optimal bir NE düzeyi gerektirebilir. SO-iş mili ve iş mili-dalgalanma bağlantısının gücü, LC-NE nöronlarının ateşleme düzenine ve NE salınımının zamanlamasına bağlı olabilir. NE iletiminin zamansal ve mekansal değişimi, daha az verimli işleme ve hafıza açıklarına neden olabilir. LC-NE nöron ateşlemesi ve uykuyla ilişkili salınımlar arasındaki bu ince ayarlı zamansal ilişkinin işlevsel sonuçlarını daha fazla araştırmaya acil bir ihtiyaç vardır. En önemlisi, uyku sırasında koordineli bir nöromodülatör aktivite patlamasının tetikleyicileri henüz belirlenmemiştir.

Genel olarak, sonuçlarımız, etkili bilgi işleme ofine için optimal düzeyde NE'nin gerekli olduğunu göstermektedir. Birikmiş deneysel kanıtlar ve mevcut bulgularımız, en iyi haller sırasında NE salınımının hem sinaptik hem de sistem düzeyinde konsolidasyonu teşvik ettiği görüşünü desteklemektedir8,11. NE iletimindeki değişiklik, esas olarak sistem düzeyindeki hafıza konsolidasyonunda yer alan tüm talamokortikal ve hipokampal salınımları etkiledi. LC-NE nöronlarının beyindeki geniş projeksiyonları64, NE'nin, talamokortikal dahil hafızayı destekleyen ağlar içindeki koordineli aktiviteyi etkilemesi için birçok yol sağlar. SO, uyku iğciklerinin ve dalgaların kaynaklandığı prefrontal ve limbik bölge12,65,66. Gelecekteki çalışmalar, hafızayı destekleyen büyük ölçekli bir ağın ortaya çıkışının, sürdürülmesinin ve yeniden aktivasyonunun altında yatan noradrenerjik mekanizmaları daha ayrıntılı olarak araştıracaktır.

Farklı etki mekanizmalarına rağmen her iki ilacın da LC aktivitesini azalttığı gösterilmiştir. Özellikle, klonidinin in vitro inhibitör etkisi, hipokampal nöronlara karşı prefrontal projeksiyon yapan LC-NE nöronları üzerinde daha güçlüydü68. Klonidin esas olarak 2-adrenoreseptörler yoluyla presinaptik NE salınımını baskılar ve propranolol –adrenerjik reseptörler yoluyla NE iletimini bloke eder. Ayrıca propranolol, NE geri alımını engelleyebilir, 1-adrenoreseptörlerde NE iletimini güçlendirebilir ve katekolamin sentezinin inhibisyonu nedeniyle dopaminerjik iletimi azaltabilir69; aynı zamanda merkezi 5-HT reseptörlerine70 olan yakınlığından dolayı serotonerjik iletimi de etkileyebilir. Klinik olarak ilgili iki noradrenerjik ilacın, farklı adrenoreseptörler üzerinde etkili olmalarına rağmen yakınsak etkileri, öğrenme sonrası dönemde farmakolojik olarak değiştirilmiş NE iletiminin hafızayı destekleyen ağ ile etkileşime girebileceğini ve bu ilaçların terapötik kullanımında bilişsel bir yan etkiye neden olabileceğini düşündürmektedir.

Yöntemler

38 adet erkek Sprague-Dawley sıçanı kullandık (300 – 400 g, Charles Rivers Laboratories, Sulzfeld, Almanya). Hayvan tesisinde çevresel olarak kontrol edilen koşullar vardı: 12 saatlik aydınlık/karanlık döngüsü (ışıklar sabah 8:00'de kapalı), 20-23 derece sıcaklık ve %40-60 nem. Sıçanlar çiftler halinde veya bireysel olarak barındırıldı ve öğrenme deneyi sırasında yiyecek kısıtlaması (sıçan başına günde ~15 g yiyecek peletleri) dışında yiyecek ve suya isteğe bağlı erişimleri vardı. Sıçan ağırlığı, sıçanın istediği kadar ağırlığının %85'inin altında olmadığından emin olmak için günlük olarak kontrol edildi. Tüm deneyler, Avrupa Parlamentosu'nun 2010/63/AB Yönergesi, Alman Hayvan Refahı Yasası (TierSchG) ve Hayvan Refahı Laboratuvar Hayvanları Yönetmeliği (TierSchVersV) ile tam uyumlu olarak gerçekleştirildi. Çalışma, Alman Hayvan Refahı Yasası'nın 15. Maddesi (Kommission nach §15 des Tierschutzgesetzes) ve etik komisyonu (§15 TierSchG) uyarınca bölgesel hayvan refahı komitesi tarafından incelendi ve eyalet otoritesi (Regierungspräsidium, Tübingen, Baden-Württemberg) tarafından onaylandı. , Almanya, Referat 35, Veterinärwesen). Bu çalışma ARRIVE yönergelerine göre gerçekleştirilmiştir (https://arriveguidelines.org).

Cerrahi ve elektrofizyolojik kayıtlar. Cerrahi ve kayıt prosedürleri başka bir yerde ayrıntılı olarak anlatılmıştır38,71. Kısaca, izofluranla anestezi uygulanmış bir sıçan (%5 indüksiyon için,~%2 bakım için) bir stereotaksik çerçeveye (David Kopf Instruments, Tujunga, CA) sıfır dereceye ayarlanmış bir kafa açısıyla sabitlendi. Elektrot yerleştirme için kraniyotomilerden önce lokal bir anestetik (Lidocard %2, B. Braun, Melsungen, Almanya) deri altına enjekte edildi. Elektroensefalogram (EEG) için, prefrontal korteks ve beyincik üzerine iki adet paslanmaz çelik vida (0.86 mm çapında) sabitlendi. Uçlar arasında 100 ila 200 µm mesafe olacak şekilde birbirine yapıştırılmış iki tek platin-iridyum elektrot (FHC Inc., Bowdoin, ME), ev yapımı hareketli bir sürücüye monte edildi ve sırt HPC'sine implante edildi ( AP=-3,5 mm, L=2,0 mm, DV=2,0 mm). Nöral aktivitenin çevrimiçi izlenmesi, elektroimplantasyon sırasında dorsal HPC'nin CA1 alanının doğru şekilde hedeflenmesini sağlamıştır. Hareketli sürücü, labirent eğitimi sırasında optimum dalga kaydı için elektrot derinliğinin ek olarak ayarlanmasına olanak sağladı. Elektromiyografi (EMG) için boyun kasına gümüş bir tel elektrot yerleştirildi. Elektrot tellerinin korunması ve elektriksel gürültüden izolasyon için bakır bir ağa bağlanan 3D baskılı plastik bir çerçeve kafatasına yapıştırıldı. Vücut sıcaklığı (~37 derece), kalp atış hızı ve kan oksijenasyonu (%90'ın üzerinde) izlendi. Cerrahi sonrası 5-7 günlük iyileşme sırasında sıçanlara bir antibiyotik (10 mg/kg, ip, Baytril, Bayer) ve ağrı kesici (5 mg/kg, ip, Rymadil, Zoetis) uygulandı.

Ameliyat sonrası iyileşme sonrasında sıçanlar uyku kutusuna (siyah Pleksiglas, 20×20×80 cm) ve kablo bağlantı prosedürüne alıştırıldı. İmplant, bir 32-kanal baş aşaması (Neuralynx, Bozeman, MT) ve özel yapım bir adaptör (SSD10-SS-) aracılığıyla Neuralynx Digital Lynx toplama sistemine (Neuralynx,Bozeman, MT) bağlandı. GS, Omnetic, Minneapolis, MN). EEG ve HPCelektrotlardan gelen geniş bantlı (0,1 Hz—8 kHz) hücre dışı sinyaller 32 kHz'de dijitalleştirildi. HPC'deki elektrot yerleşimi, kayıt başlamadan en az 24 saat önce dalgalanma tespiti için optimize edildi. Her kayıt oturumu her hayvan için aynı anda başladı ve 2 saat sürdü. Bu gözlem dönemi, ince konsolidasyonun erken evresinin NE'ye bağımlı olduğuna dair önceki kanıtlara dayanılarak seçilmiştir8. Kayıt, loş ışıkta ve farelerin eğitimi için en uygun olan sirkadiyen ritmin aktif (karanlık) aşamasında yapıldı.

Uzamsal hafıza görevi.

Aynı labirent görevi ve eğitim protokolü, başka bir yerde ayrıntılı olarak açıklandığı gibi kullanıldı38. Fareler, yükseltilmiş sekiz kollu radyal labirent üzerinde eğitildi (Şekil 1a). Merkezi bir platformdan (30 cm çapında) uzanan, yiyecek ödülü (çikolatalı süt) için ucunda küçük bir çukur (1 cm çap) bulunan labirent kolları (66 cm uzunluk x 10 cm genişlik). Labirenti çevreleyen siyah perdelere iki büyük görsel işaret sabitlendi. Denemeler arası aralık sırasında, bir sıçan yükseltilmiş bir standa yerleştirildi. Fare davranışları videoyla izlendi. Alışkanlık ve ön eğitimden sonra (Ek Yöntemler), 8 labirent kolundan 3'ü yemlendi; ödül konumları her sıçan için rastgele atandı ve tüm eğitim seansları için aynı tutuldu (7 gün boyunca günde 3 deneme). Bir farenin merkezi platforma yerleştirilmesiyle başlayan bir deneme, 3 ödülün tamamı toplanana veya 5 dakika geçene kadar sürdü. Koku alma işaretlerini en aza indirmek için labirent yüzeyi her denemeden sonra silindi. Aşağıdaki davranışsal değişkenler kaydedildi ve analiz edildi: ziyaret edilen labirent kollarının sayısı, deneme süresi, seçim doğruluğu (ziyaret edilen kollarla ziyaret edilen toplam kol sayısı arasındaki oran olarak hesaplanır), çalışma belleği (WM) hataları (ziyaret edilen kollara yeniden giriş sayısı) , referans belleği (RM) hataları (yemlenmeyen kollara girişler).

İlaç enjeksiyonları

Klonidin ve propranolol tozu (Sigma Aldrich, Burlington, MA) tuz içinde eritildi ve her labirent seansından hemen sonra 1 ml/kg hacimde intraperitoneal (ip) olarak enjekte edildi (klonidin:0.05 mg/kg, ip; propranolol: 10 mg/kg, ip). Kontrol sıçanlarına salin (1 ml/kg, ip) verildi. Klonidinin NE iletimini baskılar72 ve 0,05 mg/kg (ip) dozunun sıçanlarda LC aktivitesini %60 başlangıç ​​düzeyine67 düşürdüğü gösterilmiştir. Bir -adrenoreseptör antagonisti olan propranolol, orta dozda tekrarlanan tedaviden sonra (<40 mg/ kg) inhibits the LC activity40,41. Besides, propranolol in a dose of 10 mg/kg (i.p.) was shown to modulate NEmediated excitability of the hippocampal neurons73 while it did not affect rat spontaneous behavior74–76. The half-life of clonidine may greatly vary between 6 and 23 h depending on the dosage, chronic use, and metabolism level75,77. Typically, the plasma peak levels are reached 60–90 min after clonidine administration. The plasma half-life of propranolol is 3 to 6 h with a peak of 1–3 h after ingestion76. The elimination half-life of propranolol is approximately 8 h (https://pubchem.ncbi.nlm.nih.gov/compound/Propranolol). This, according to the pharmacokinetics of both drugs, the drug concentration was close to the highest during the observation period of up to 2 h post-injection. Importantly, both drugs are effectively washed out within less than 24 hours.

Perfüzyon ve histoloji.

Sıçanlara ötenazi uygulandı (100 mg/kg ip, Narcoren, Merial) ve transkardiyal olarak %0,9 salin ve ardından %4 paraformaldehit ile perfüze edildi. Beyinler yatay bir dondurucu mikrotom (Microm HM 440E, Thermo Fischer Scientific, Waltham, MA) kullanılarak dilimlendi (50 um). Elektrot yerleşimini doğrulamak için Nissl boyalı beyin bölümleri mikroskop altında incelendi (Axiovision, Zeiss, Oberkochen, Almanya).

Olay tespiti.

SO, uyku iğcikleri ve hipokampal dalgalanmalar daha önce başka bir yerde71,78açıklandığı gibi tespit edildi. EEG sinyali 1 kHz'e alt örneklendi ve bant geçiren (0.3 – 4 Hz) filtrelendi. SO tespiti için, 0.4 ila 1- saniyelik bir zaman penceresi içinde meydana gelen filtrelenmiş EEG'nin sıfır geçişi çıkarıldı. Negatif tepe genliği 100 μV'nin altında ve negatiften pozitife tepeden tepeye genlik 120 μV'yi aşan iki ardışık negatiften pozitife sıfır geçiş atandı SO olarak. İş mili tespiti için bant geçiren (10–16 Hz) filtrelenmiş EEG düzeltildi ve düzeltildi. İğler, 0,4—2,0 saniye boyunca NREM uyku dönemleri sırasında ortalama sinyalin 1,5 standart sapma (SD) eşiğini aşan bir sinyal genliği ile tespit edildi. 50 ms'den daha kısa sürede meydana gelen iş milleri kaynaştırıldı. HVS'ler, ayarlanmış parametrelerle aynı algoritma kullanılarak tespit edildi (bant geçişi: 5–7 Hz, eşik: 2,5 SD, min/maks: 0,7 sn/3 sn). 200 ms'den kısa sürede meydana gelen iki HVS birleştirildi. Çift algılamayı önlemek için, HVS içermeyen dönemlerde uyku iğcikleri tanımlandı. Dalgalanma tespiti için HPC LFP, bant geçiren (120–250 Hz) filtrelendi, düzeltildi ve düzeltildi. Dalgalanmalar, 0,025 ila 0,5 saniye boyunca 3 ila 5 SD'lik bir eşiği aşan bir sinyal genliği ile tespit edildi. Tüm olaylar için, açık ve uzaklıklar, 1 SD eşiği kullanılarak sırasıyla artan ve azalan sıfır geçişler olarak tanımlandı. Salınım gücü, Hilbert tarafından dönüştürülmüş sinyalin açık ve kapalı olay arasındaki zarfının integrali olarak hesaplandı. Te SO-iş mili zamansal bağlantısı başka bir yerde43 açıklandığı gibi değerlendirildi. Te SO negatif zirvesi referans olayı olarak kullanıldı (t=0), ±1,5 saniye içinde meydana gelen iğlerin tepe ve dip noktaları çıkarıldı ve olay-korelasyon histogramı oluşturuldu. Bin sayısı olay oranına dönüştürüldü, z dönüştürüldü ve grubun ortalaması alındı.

Uyku puanlaması ve EEG güç spektral analizi. Uyku puanlaması, EEG ve EMG sinyallerinin ardışık 10-s dönemleri için görsel destekli sınıflandırmaya dayanıyordu79. Artefaktsız EEG, aktif uyanıklık (AW, düşük genlikli hızlı EEG ve yüksek EMG), sessiz uyanıklık (QW, düşük genlikli hızlı EEG ve düşük EMG) ve NREM (yüksek genlikli yavaş EEG ve düşük EMG) olarak sınıflandırıldı. ). 2 saatlik kayıt sırasındaki REM uyku dönemleri nadirdi ve analiz edilmedi. EEG güç spektrumları, Matlab (Mathworks, ABD) ve FieldTrip araç kutusu 80 kullanılarak her davranış durumu için hesaplandı. EEG sinyali,0.5-s'lik bir örtüşme ile {{10}}s'lik dönemlere bölünmüştür. Tek taraflı genlik spektrumunu hesaplamak için Hanning'in konik veri bölümlerine Hızlı Fourier Dönüşümü uygulandı. EEG güç spektrumundaki fraktal ve salınımlı bileşenleri ayırmak için Düzensiz Yeniden Örnekleme Otomatik Spektral Analiz prosedürünü kullandık. Zaman-frekans çizimleri, kayan bir Hanning konik penceresi ve 3 döngülük frekansa bağlı uzunluk kullanılarak oluşturuldu. SO, uyku iğcikleri ve HVS için 0,05 ila 20 Hz (0,1 Hz adım) frekans aralığı ve hipokampal dalgalar için 50 ila 300 Hz (0,05 Hz adım ve 9 döngü) frekans aralığı kullanıldı.

Deney tasarımı ve istatistiksel analiz.

Otuz iki fare labirentte eğitildi, bu 19 fareye elektrotlar implante edildi ve klonidin (n=16), propranolol (n=11) veya salin(n{{4}) ile tedavi edildi. }) her öğrenme oturumundan sonra. İlave 9 fareye elektrotlar implante edildi ve yalnızca elektrofizyoloji için kullanıldı. Davranışsal değişkenlerin oturum ortalaması alındı ​​ve tekrarlanan bir faktör olarak öğrenme oturumu ve bir grup faktörü olarak ilaç tedavisi ile tekrarlanan ölçümler varyans analizine (ANOVA) gönderildi. Küresellik varsayımı ihlal edildiğinde Greenhouse-Geisser düzeltmesi uygulandı. Öğrenme oranındaki konular arası değişkenliği ortaya çıkarmak için K-ortalama küme analizi kullanıldı. Spesifik olarak, tüm öğrenme oturumları için seçim doğruluğunu (Uzamsal Bellek görevi Yöntemi bölümünde tanımlandığı gibi) sunduk ve zaman serilerini öğrenme dinamiklerine göre farklılık gösteren iki kümeye ayırdık. Daha sonra her deney grubu için her kümedeki sıçanların oranını hesapladık. Uyku başlangıcı, dönem süresi, olay oranı vb. gibi elektrofizyolojik sinyallerden türetilen değişkenler, bir grup faktörü olarak ilaç tedavisinin ardından uygun olduğunda Bonferroni posthoc testleri ile tek yönlü bir ANOVA'ya tabi tutuldu. Enjeksiyon sonrası olay oranı, 1 saatlik bir zaman aralığıyla ve tekrarlanan ilaç tedavileri boyunca tekrarlanan ölçümler ANOVA kullanılarak karşılaştırıldı. Eşleştirilmiş örnek testi, peri-olay histogramlarındaki gruplar arası farkı ortaya çıkarmak için kullanıldı. İstatistiksel anlamlılık (-değeri) p=0,05 olarak ayarlandı. İstatistiksel analiz için IBM SPSS İstatistikleri (v.22) kullanıldı. Sonuçların görselleştirilmesinde Matlab (R2014a) ve Adobe Illustrator® yazılım paketleri kullanıldı.

Veri kullanılabilirliği

Mevcut çalışma sırasında kullanılan ve/veya analiz edilen veri kümeleri, makul talep üzerine ilgili yazardan temin edilebilir.

Referanslar

1. Giovannitti, JA, Toms, SM ve Crawford, JJ Alfa-2 adrenerjik reseptör agonistleri: Güncel klinik uygulamaların gözden geçirilmesi. Anesth. Prog. 62, 31–39. https://doi.org/10.2344/0003-3006-62.1.31 (2015).

2. Chamberlain, SR & Robbins, TW Bilişin noradrenerjik modülasyonu: Terapötik çıkarımlar. J. Psikofarmakol. 27,694–718. https://doi.org/10.1177/0269881113480988 (2013).

3. Newcorn, JH, Krone, B. & Dittmann, RW DEHB için uyarıcı olmayan tedaviler. Çocuk Ergenlerc. Psikiyatr. Klin. N. Am. 31,417–435. https://doi.org/10.1016/j.chc.2022.03.005 (2022).

4. Criaud, M. ve diğerleri. Parkinson hastalığında noradrenalin ve hareket başlatma bozuklukları: Klonidin ile farmakolojik fonksiyonel bir MRI çalışması. Hücreler https://doi.org/10.3390/cells11172640 (2022).

5. Middlemiss, DN, Buxton, DA & Greenwood, DT Psikiyatri ve nörolojide beta-adrenoseptör antagonistleri. Pharmacol.Ter. 12, 419–437. https://doi.org/10.1016/0163-7258(81)90089-9 (1981).

6. Berridge, CW & Waterhouse, BD Te locus coeruleus-noradrenerjik sistem: davranışsal durumun ve duruma bağlı bilişsel süreçlerin modülasyonu. Brain Res Brain Res Rev 42, 33–84 (2003).

7. Sara, SJ & Bouret, S. Yönlendirme ve yeniden yönlendirme: Te locus coeruleus, uyarılma yoluyla bilişe aracılık eder. Nöron 76(1), 130–141(2012).

8. Sara, SJ Locus Coeruleus anıların oluşmasıyla zamanında. Curr. Görüş. Nörobiyol. 35, 87–94. https://doi.org/10.1016/j.conb.2015.07.004 (2015).

9. Groch, S. ve diğerleri. Norepinefrinin uyku sırasında duygusal hafıza konsolidasyonuna katkısı. Psikonöroendokrinoloji 36,1342–1350. https://doi.org/10.1016/j.psyneuen.2011.03.006 (2011).

10. Gais, S., Rasch, B., Dahmen, JC, Sara, S. & Born, J. REM dışı uykuda noradrenerjik aktivitenin hafıza fonksiyonu. J. Cogn.Neurosci. 23, 2582–2592. https://doi.org/10.1162/jocn.2011.21622 (2011).

For more information:1950477648nn@gmail.com