Cistanoside A, osteoklast aktivitesini inhibe etmek için p38/MAPK yoluna aracılık eder Ⅱ

2 Sonuçlar Sonuçlar

2.1 Cistancheside A, RANKL kaynaklı osteoklast farklılaşmasını inhibe eder.

TRAP boyama sonuçları, kontrol grubuyla karşılaştırıldığında, osteoklast sayısının,Cistancheside A5, 10, 20, 40, 80 ve 160 μmol/L idi. azaldı veCistancheside A, osteoklastogenez üzerinde en güçlü inhibitör etkiye sahipti160 μmol/L konsantrasyonunda (Şekil 1A, B). CCK-8 sitotoksisite deneyinin sonuçları, Cistancheside A'nın 160 μmol/L'nin altındaki konsantrasyonlarda kemik iliği makrofajları üzerinde toksik etkisinin olmadığını gösterdi (Şekil 1C).

Cistancheside A'yı Satın Alın

2.2 Cistancheol

A, osteoklastların yüzeyinde aktin halkalarının oluşumunu engeller veOsteoklastların kemik rezorpsiyon fonksiyonu. Bkz. Şekil 2. Phalloidin ve DAPI floresan boyama sonuçları, pozitif kontrol grubuyla karşılaştırıldığında, Cistancheside A'nın düşük ve yüksek doz gruplarındaki osteoklast aktin halkalarının alanının önemli ölçüde azaldığını ve yüksek dozdaki osteoklastların aktin halkası alanının önemli ölçüde azaldığını gösterdi. Cistancheside A'nın doz grubu önemli ölçüde azaldı. Halka alanı diğerlerinden daha küçüktüCistancheside A düşük doz grubu(Şekil 2A, C). Kemik öğütme disklerinin toluidin mavisi ile boyanmasının sonuçları, pozitif kontrol grubuyla karşılaştırıldığında, Cistancheol A'nın düşük ve yüksek doz gruplarında kemik öğütme diskleri üzerindeki kemik boşluklarının alanının önemli ölçüde azaldığını ve kemik boşluklarının alanının önemli ölçüde azaldığını gösterdi. yüksek doz Cistancheol A grubunda önemli ölçüde azaldı. Alan diğerlerinden daha küçüktü.Cistancheside A düşük doz grubu(Şekil 2B, D).

Şekil 1 ｜ Cistanoside A (Cis A), nükleer faktör kappa-B ligandının (RANKL) reseptör aktivatörü tarafından indüklenen osteoklast farklılaşmasını inhibe eder

Şekil 2 ｜ Cistanoside A (CisA), osteoklastlarda F-aktin halkası oluşumunu ve kemik rezorpsiyon fonksiyonunu inhibe eder

2.3 Cistancheside A, önemli osteoklast genlerinin ekspresyonunu aşağı doğru düzenler.

GAPDH geninin ortalama ekspresyon seviyesini kontrol standardı olarak kullanarak sonuçlar, pozitif kontrol grubuyla karşılaştırıldığında düşük doz Cistancheside A grubunun, osteoklast düzenleyici farklılaşmayla ilişkili genler TRAP'ı (Nfatc'nin ekspresyon seviyelerini) önemli ölçüde azaltabildiğini gösterdi. {2}}, DC-STAMP ve kemik erimesiyle ilişkili genler c-Fos ve ctsk (Şekil 3).

2.4 Cistancheside A, JNK/MAPK yolunun aşağı yöndeki proteinlerinin ekspresyonunu inhibe eder. Western blot sonuçları, pozitif kontrol grubuyla karşılaştırıldığında Cistancheside A'nın 40, 80 ve 160 μmol/L konsantrasyonlarında Nfatc1 ve c-Fos proteinlerinin ekspresyonunu önemli ölçüde inhibe edebildiğini göstermektedir. miktar ve bu etki doza bağımlıydı (Şekil 4).

2.5 Cistanche A, p-JNK proteininin ekspresyonunu inhibe eder. Western blot sonuçları, 0, 5, 10, 20, 30 ve 60 dakikalık zaman gradyanında, p-JNK proteininin ifadesinin birinci eğilimi gösterdiğini göstermektedir. Pozitif kontrol grubuyla karşılaştırıldığında, 160 μmol/L konsantrasyondaki Cistancheside A, müdahalenin 10, 20, 30 ve 60 dakikasında p-JNK proteininin ekspresyonunu önemli ölçüde inhibe edebilir (P < 0,01, P) < 0.000 1), bkz. şekil 5.

Şekil 5 ｜ Cistanoside A (Cis A), p-JNK proteininin ekspresyonunu inhibe eder