Soyut

Arka plan:Trombosit agregasyonu ve ileri glikasyon son ürünleri (AGE'ler) ve oksidatif stres, kardiyovasküler hastalıkların ve diyabetik komplikasyonların gelişiminde anahtar faktörler olarak bilinir. Bu bağlamda, iyi bir antioksidan bileşik kaynağı olan meyve ve sebze tüketiminin, insanları bu hastalıklara karşı korumada etkili bir yol olduğu büyük ölçüde bildirilmektedir. Mevcut çalışma, nar (Punica granatum L.) çiçeklerinin (PF), yapraklarının (PL), kabuğunun (PP) suyunun (PJ) ve tohum yağının (PSO) antioksidan, antiplatelet ve anti-glikasyon aktivitelerinin değerlendirilmesine odaklanmaktadır. .

Cistanche glikozidi ayrıca kalp ve karaciğer dokularında SOD aktivitesini artırabilir ve her dokudaki lipofuscin ve MDA içeriğini önemli ölçüde azaltabilir, çeşitli reaktif oksijen radikallerini (OH-, H₂O₂, vb.) etkili bir şekilde temizleyerek ve neden olduğu DNA hasarına karşı koruma sağlayabilir. OH radikalleri tarafından. Cistanche feniletanoid glikozitler, serbest radikalleri güçlü bir şekilde süpürme yeteneğine, C vitamininden daha yüksek bir indirgeme kabiliyetine sahiptir, sperm süspansiyonunda SOD aktivitesini geliştirir, MDA içeriğini azaltır ve sperm zarı işlevi üzerinde belirli bir koruyucu etkiye sahiptir. Cistanche polisakkaritleri, D-galaktozun neden olduğu deneysel olarak yaşlanmış farelerin eritrositlerinde ve akciğer dokularında SOD ve GSH-Px aktivitesini artırabilir, ayrıca akciğer ve plazmadaki MDA ve kollajen içeriğini azaltabilir ve elastin içeriğini artırabilir. DPPH üzerinde iyi bir temizleme etkisi, yaşlanmış farelerde hipoksi süresini uzatır, serumdaki SOD aktivitesini geliştirir ve deneysel olarak yaşlanmış farelerde akciğerin fizyolojik dejenerasyonunu geciktirir. Hücresel morfolojik dejenerasyonla, deneyler Cistanche'nin iyi antioksidan yeteneğe sahip olduğunu göstermiştir ve cilt yaşlanması hastalıklarını önleyen ve tedavi eden bir ilaç olma potansiyeline sahiptir. Aynı zamanda, Cistanche'deki ekinacoside, DPPH serbest radikallerini temizleme konusunda önemli bir yeteneğe sahiptir ve reaktif oksijen türlerini temizleyebilir, serbest radikal kaynaklı kollajen bozulmasını önleyebilir ve ayrıca timin serbest radikal anyon hasarı üzerinde iyi bir onarım etkisine sahiptir.

Cistanche ve Tongkat Ali Reddit'e tıklayın

【Daha fazla bilgi için: david.deng@wecistanche.com / WhatApp:86 13632399501】

Yöntemler: Antioksidan aktiviteler, ABTS radikali ve lipid peroksidasyonuna karşı ölçüldü. Antiglikasyon aktivitesi, BSA/riboz sisteminde AGE floresan yoğunluğunun oluşumu kullanılarak belirlendi. Trombositten zengin plazmada (PRP) adenosin difosfat (ADP), Kolajen ve araşidonik asit (AA)'ye karşı antitrombosit aktivitesi ölçüldü.

Sonuçlar:PF özü, sırasıyla 0,7mg/mL ve 0,63mg/mL IC50 değerleri ile ABTS ve lipid peroksidasyonuna karşı en yüksek antioksidan aktiviteyi sergiledi. Anti-glikasyon aktivitesi için PP, PF ve PL, AGE-IC50 değeri 0,4 mg/mL olan pozitif kontrollere kıyasla pentosidin benzeri AGE oluşumunu orta derecede inhibe etti. PJ ve PSO'nun herhangi bir anti-AGE etkisi yoktur. Tüm özler, bir, iki veya üç indükleyicinin neden olduğu trombosit agregasyonunu doza bağlı bir şekilde seçici olarak inhibe etti. PF, yüzde 35,6 ila 66,6 arasında değişen inhibitör etkilerle, her üç indükleyicinin neden olduğu en güçlü inhibitördü. PP ve PJ, hem ADP'ye hem de kollajene ve PL ve PSO'ya karşı yalnızca AA'ya karşı bir antiplatelet etki sergiledi.

Sonuçlar:Bu sonuçlar, bazı nar ekstraktlarının potansiyel in vitro antiglikasyon ve antiplatelet aktiviteleri sergilediğini göstermektedir.

anahtar kelimeler:Nar, Antiplatelet aktivite, Gelişmiş glikasyon son ürünleri, Oksidatif stres, Lipid peroksidasyonu

Arka plan

Nar (Punica granatum L.), yaygın olarak çok güçlü bir antioksidan meyve olarak bilinmektedir [1-3]. Nar suyunun antioksidan gücünün kırmızı şarap veya yeşil çaydan 3- kat daha yüksek olduğu [4] ve portakal sularında tespit edilenden 8- kat daha yüksek düzeylerde olduğu bildirilmiştir [5]. Ek olarak, üzerinde çok araştırma yapılan doğal bir meyve de, güçlü biyolojik aktiviteye ve tıbbi değere sahip olduğu bildirilen nar ve bileşenleridir. Nar suyu, kabuk, tohum yağı, yaprak ve çiçek özlerinin in vitro ve in vivo olarak antidiyabetik [6], antiinflamatuar [7], antioksidan, anti-obezite [8] ve antitümör etkileri olduğu tarif edilmiştir [ 9]. Bu yararlı etkiler, hidrolize edilebilir tanenler, antosiyaninler ve flavonoller dahil olmak üzere polifenolik bileşikler gibi çok yüksek seviyelerde antioksidanların varlığı ile ilgilidir [10]. Narın antidiyabetik etkilerine ilişkin önceki çalışmalarımızda, sonuçlar nar özlerinin nöroprotektif etkilerini vurgulamaktadır ve uzun süreli nar alımının HFD (Yüksek Yağ Yüksek Fruktoz Diyeti) kaynaklı insülinin önlenmesi için potansiyel bir alternatif strateji olabileceğini göstermektedir. direnç ve oksidatif stres [6, 11]. Nar suyu, yaprağı ve kabuğu tüketimi, açlık kan şekeri ve insülin düzeylerinde önemli bir düşüşe neden olmuştur. Sonuç olarak, insülin direncini ölçmek için kullanılan homeostatik insülin direnci indeksi (HOMA-IR) sırasıyla azalmış ve insülin duyarlılığında önemli bir iyileşmeye işaret etmiştir.

Bu bağlamda, nar ekstraktlarının, diyabetin ilerlemesi ve yaşlanma ile ilişkili olduğu bildirilen trombosit agregasyonu ve İleri glikasyon son ürünleri (AGE'ler) gibi en bilinen diyabet komplikasyonlarına karşı etkisini değerlendirmeye çalıştık [12, 13]. . Trombosit fonksiyonunun inhibisyonu, diyabet, kardiyovasküler hastalıklar ve iskemik inme gibi akut vasküler aterotrombotik hastalıkları tedavi etme stratejisi olarak uzun süredir benimsenmiştir [14, 15]. Gelişmiş glikasyon son ürünleri (AGE'ler), diyabetik retinopati, nöropati ve nefropati gibi daha büyük diyabetik komplikasyon riski ile ilişkilidir [16]. Ek olarak, farklı nar ağacı bölümlerinin AGE oluşumu [17] veya trombosit agregasyonu [18] üzerindeki inhibitör etkisine ilişkin az sayıda rapor yayınlanmıştır. Bu çalışmada, nar suyunun (PJ), kabuğun (PP), çiçeklerin (PF), yaprakların (PL) ve tohum yağının (PSO) anti-AGE ve antiplatelet kapasitelerini ve bazı antioksidan aktivitelerini in vitro olarak araştırdık.

Yöntemler

Bitki materyalleri ve ekstraksiyon

Tunus'un Mahdia bölgesinden Ekim 2021'de Tounsi nar ağaçlarından yapraklar ve meyveler toplandı. Çeşitlerin orijinalliği, Chott-Meriem Yüksek Tarım Enstitüsü (Sousse Üniversitesi, Tunus) Bahçe Bitkileri Departmanından taksonomist Dr. Faten Zaouay tarafından doğrulandı ve Gabes ve Chott-Mariem'de ikişer nüsha olarak tutulan ulusal koleksiyonumuza bir kupon örneği bırakıldı. (Sousse), 'TNI, TN2, TN3, TN5, TN5' koduyla.

Nar özleri, önceki çalışmamızda [11] açıklandığı gibi hazırlandı. Meyveler yıkandı ve elle soyuldu. Taneler, ticari bir karıştırıcı (Moulinex, Fransa) kullanılarak sıkıldı. Ekstrakte edilen meyve suyu 15 dakika 15000 rpm'de santrifüjlendi. Daha sonra süpernatan geri kazanıldı ve liyofilize edildi. Yapraklar, çiçekler ve meyve kabuğu kurutuldu, toz haline getirildi ve karanlıkta 48 saat metanol (MeOH) 50g/250ml ile özü çıkarıldı. Her ekstrakt, Whatman No. 42 filtre kağıdından süzüldü ve 45 derecede vakum altında bir döner buharlaştırıcı (Heidolph, Almanya) kullanılarak kuruyana kadar buharlaştırıldı ve daha fazla belirleme için -20 derecede saklandı. Nar taneleri kurutuldu ve toz haline getirildi. Yağ, soxhlet yöntemleriyle çıkarıldı. Yaklaşık 30 g tohum, 200 ml heksan ile oda sıcaklığında 6 saat süreyle özümlendi. Çözücü 40 derecede buharlaştırılarak çıkarıldı ve yağ bir nitrojen akışıyla yıkandı ve -20 derecede kapalı tüplerde saklandı.

ABTS radikal süpürme deneyi

Nar özlerinin antioksidan kapasitesi, ABTS (2,2'-casino-bis (3-etilbenzotiazolin-6-sülfonik asit) testi ile önceki bir yöntem [19] kullanılarak ölçülmüştür. Kısaca, ABTS• artı radikal ABTS stok solüsyonu (5mM) potasyum persülfat (K2S2O8) solüsyonu (2.7mM) ile reaksiyona sokularak solüsyon üretildi Antioksidan kapasitesinin değerlendirilmesi için ABTS• plus solüsyonu fosfat tamponu (20mM, pH 7.4) 660nm'de 0.700±0.020 absorbans elde etmek için Ten, ABTS• plus solüsyonu farklı konsantrasyonlarda hazırlanmış nar ekstraktları ile karıştırıldı.İnkübasyon sonrası absorbans 734nm'de ölçüldü.Askorbik asit kullanıldı ABTS• artı radikal inhibisyon yüzdesi aşağıdaki formülle hesaplandı:

Bir kontrol, numune yerine saf MeOH içeren solüsyonu ifade eder ve bir numune, nar özü içeren solüsyonların absorbansını ifade eder. ABTS• absorbansını azaltmak için gerekli örneğin etkin konsantrasyonu artı yüzde 50 (EC50) olarak belirlendi.

Ferrik tiyosiyanat yöntemi kullanılarak lipid peroksidasyonu

Nar özleri ile lipid peroksidasyonunun inhibisyonu, önceki prosedüre [20] göre test edildi. Lipit matrisi olarak linoleik asit (LA) ve serbest radikal başlatıcı olarak 2,2'-azobis (2-metilpropionamidin) dihidroklorür (AAPH) kullanıldı. Her bir nar ekstraktından farklı konsantrasyonlar hazırlanmıştır. Her konsantrasyon, yüzde 1,3 (ağırlık/hacim) metanolik LA ve 0,2M fosfat tamponu (pH 7,0) ile karıştırıldı ve peroksidasyon, fosfat tamponu içindeki AAPH çözeltisi (55,3 mM) eklenerek başlatıldı. Kontrol solüsyonu numune yerine saf MeOH eklenerek hazırlandı. 50 derecede 24 saat karanlıkta inkübasyonun ardından reaksiyon karışımı 3:1 (v/v) H2O-MeOH solüsyonunda çözüldü. On, yüzde 10 sulu bir NH4SCN çözeltisi ve yüzde 3.5 HC1 içinde 20 mM FeCl2 eklendi. Oda sıcaklığında 3 dakikalık inkübasyondan sonra, karşılık gelen köre karşı 546 nm'de absorbans ölçüldü. Pozitif kontrol olarak askorbik asit kullanıldı. Sonuçlar, lipid peroksidasyon inhibisyonunun yüzdesi olarak ifade edilir:

Kontrolnumune yerine saf MeOH içeren solüsyonu ifade eder ve numune, yağ içeren solüsyonların absorbansını ifade eder. Te EC50 belirlendi.

Gelişmiş glikasyon son ürünleri inhibisyon testi

Pentosidin benzeri AGE oluşumunun inhibisyonu ve EC50 değerleri, Séro ve diğerleri tarafından daha önce açıklanan bir yöntem kullanılarak belirlendi ve hesaplandı. 2013, küçük değişikliklerle [21]. Kısaca BSA (10 mg/mL), test edilen ekstraktla birlikte D-riboz (0.5M) ile pH 7.4'te (NaN3, yüzde 0.02) 50 mM fosfat tamponunda inkübe edildi. Çözeltiler, AGE floresan ölçümünden önce kapalı bir sistemde 24 saat boyunca 37 derecede kuyucuklu mikro titre plakalarında inkübe edildi. Aynı BSA (10 mg/mL) ve test edilen ekstrakt koşulları altında inkübasyondan kaynaklanan floresans, her ölçüm için çıkarıldı. Pentosidin benzeri (λexc 335nm, λem 385nm) AGE floresansı, bir mikroplaka spektroflorometre kullanılarak ölçüldü. Her ekstrakt konsantrasyonu için AGE oluşumunun yüzdesi aşağıdaki gibi hesaplandı ve EC50 değerleri belirlendi:

AGE'ler ( yüzde )=[floresan yoğunluğu (numune) - floresan yoğunluğu (örnek boşluğu)] ∗100/[floresan yoğunluğu (kontrol) - floresan yoğunluğu (kontrol boşluğu)]

Anti‑trombosit agregasyon aktivitesinin in vitro değerlendirmesi

En az 10 gün boyunca agregasyonu etkileyebilecek ilaç, içecek veya yiyecek tüketimi negatif olan ve şilomikron varlığı da agregasyon modellerini bozabileceğinden tercihen gece boyunca aç kalması gereken sağlıklı gönüllülerden taze kan alındı. Çalışma, Tunus Sfax Üniversite Hastanesi Hedi Chaker'in yerel etik kurulu tarafından onaylandı.

Venöz kan, trisodyum sitrat 109mM içeren plastik bir tüp içinde toplandı. PRP, oda sıcaklığında 200xg'de 12 dakika santrifüj edilerek elde edildi. PRP, kırmızı hücreler veya buffy coat ile kontaminasyondan kaçınılarak dikkatlice çıkarıldı ve test edilene kadar oda sıcaklığında saklandı. PRP hazırlandıktan sonra 3 saat içerisinde tüm testler tamamlanmalıdır. Kalan kan daha sonra trombositten fakir plazma (PPP) elde etmek için 2000 x g'de 20 dakika santrifüjlendi. Toplayıcı maddelerden oluşan bir tarama paneli kullandık: adenosin 5'-difosfat (ADP, 20μM), kollajen (5ug/mL) ve araşidonik asit (2mM).

Agregometrede sırasıyla 0 ve yüzde 100 ışık iletimini ayarlamak için PRP ve PPP kullanıldı. Bir agonist eklendikten sonra en az 5 dakika süreyle trombosit agregasyonu izlendi.

Nar yaprağı (PL), çiçek (PF), meyve suyu (PJ) ve kabuk (PP) özleri için, DMSO içinde çözülmüş her bir özüt için önceden farklı konsantrasyonlar hazırlanmıştır (yüzde {{0}},05 nihai konsantrasyon). PSO için, suda çözünmeyen bileşikleri çözmek için in vivo olarak yaygın olarak kullanılan bir çözücü olan yüzde 70 Polietilen glikol (PEG) içinde farklı konsantrasyonlar çözüldü. Her ekstrakttan on mikrolitre 260μL kontrol PRP'ye ilave edildi ve ardından karışım, agonistler eklenmeden önce 37 derecede en az 5 dakika (30 dakikaya kadar) inkübe edildi. On kollajen (5ug/mL), AA (2mM) veya ADP (20umol/L) eklendi ve trombosit şekil değişikliği ve agregasyonu 5 dakika süreyle izlendi. Negatif kontrol olarak DMSO (yüzde 0,5 v/v) ve pozitif kontrol olarak aspirin kullanıldı.

D=test bileşiklerinin varlığında trombosit agregasyonu

S=bir solvent varlığında trombosit agregasyonu.

Trombosit agregasyonunu inhibe edici aktivite, tek başına araç (DMSO veya PEG) için ölçülenle karşılaştırılarak yüzde inhibisyon olarak ifade edildi. Her numune üç kopya halinde ölçüldü ve veriler ortalama ± SD olarak sunuldu. Trombosit agregasyonunun (EC50) yüzde 50 inhibisyonu için gereken etkili konsantrasyon değerleri, en az üç belirlemeden elde edildi.

istatistiksel analiz

Sonuçlar, standart sapmalar rapor edilmedikçe (ortalama ± SD) en az üç bağımsız ölçümün ortalaması olarak ifade edildi ve SPSS ver. 21.0, profesyonel sürüm. Antioksidan aktiviteler için, ana etkilerin önemini yüzde 5 olasılık düzeyinde tahmin etmek için Duncan testi kullanıldı (P<0.05).

Sonuçlar ve tartışma

Nar özlerinin antioksidan özellikleri

Nar ekstraktlarının antioksidan kapasiteleri ABTS ve lipid peroksidasyon deneyleri ile ölçüldü. Sonuçlar Tablo 1'de özetlendi ve EC50 değeri olarak ifade edildi. Düşük EC5{{10}}, daha yüksek antioksidan aktiviteyi gösterdi. Ekstraktların antioksidan etkileri bakımından birbirlerinden farklılık gösterdiği tespit edilmiştir. Örneğin PF, 0,7 mg/ml'lik EC50 değerleri ile ABTS'ye karşı en yüksek antioksidan aktiviteyi sergiledi ve IC50'si 1,4 mg/ml olan standart askorbik asitten bile üstündü. PF, standart askorbik asitten (0,52 mg/mL) biraz daha yüksek olan lipid peroksidasyon testi (0,63 mg/mL) için ikinci en düşük EC50'yi gösterdi, ancak bu fark istatistiksel olarak anlamlı değildi (p < 0,05). PP özü, ardından PL ve PJ özleri, serbest radikal ABTS'yi etkili bir şekilde azaltabilir. Lipid peroksidasyon testlerinde de aynı sıralama bulundu. Bununla birlikte, PSO her iki in vitro deneyde de en zayıf antioksidan aktiviteyi göstermiştir. Fenolik içerik ile antioksidan kapasite arasında kurulu bir ilişki olduğu bildirilmektedir [22]. Önceki çalışmamızda [23], nar çiçeğinin, yaprağının, kabuğunun ve suyunun fenolik içeriklerini inceledik ve bunların indirgeme güçlerini ve anti-DPPH aktivitelerini karşılaştırdık. Sonuçlar, tüm organların aynı zamanda etkili bir indirgeme gücüne ve antiradikal aktiviteye sahip olduğunu göstermektedir. Çiçekler ve yapraklar fenoller açısından daha zengindi ve en güçlü antioksidanlar olduklarını kanıtladılar.

Nar özlerinin anti-AGEs kapasiteleri

The anti-glycation capacities of pomegranate extracts evaluated by their inhibition of the formation of global fluorescent AGEs in the BSA/ribose system are depicted in Fig. 1 and Table 2. PP, PF, and PL extracts demonstrated a dose-response inhibition of the pentosidine-like AGEs formation (Fig. 1) with an AGE-EC50 value of 0.4mg/ml  (Table 2). This anti-AGEs capacity is considered moderate compared to that exhibited by Aminoguanidine (AGEEC50; 0.16-0.17mg/mL) and weak compared to Rutoside trihydrate (AGE-EC50; 0.05mg/mL). However, results show that PJ and PSO haven't any anti-AGE effect (AGEEC50; >1mg/mL). Çift kör bir çalışmada, Sohrab (2015), nar suyunun (Punica granatum) lipid peroksidasyonunu azalttığı, ancak tip 2 diyabetli erişkinlerde plazma ileri glikasyonlu son ürünler üzerinde hiçbir etkisinin olmadığı sonucuna varmıştır [24]. Nar suyuyla ilgili sonuçlarımız, nar meyve özünün (PFE) güçlü anti-glikasyon aktivitesi gösterdiğini bulan Liu (2014) tarafından bildirilen bazı geçmiş bulgularla uyumlu değildir [25]. Farklı nar özlerinin anti-glikasyon aktivitesi, fenolik bileşenlerine bağlanabilir. Kumagai (2015), in vitro olarak glikoz, fruktoz ve gliseraldehit içeren BSA'dan türetilen AGE oluşumunun, nar meyve özü PFE ve bunun punicalin, punicalagin, ellagic asit ve gallik gibi fenolik bileşenlerinin eklenmesiyle konsantrasyona bağlı olarak bastırıldığını göstermiştir. asit [17].

Nar özlerinin antiplatelet aktivitesi

Nar parçaları, güçlü agregasyon indükleyicileri olarak ADP, Kolajen ve AA tarafından indüklenen insan PRP'sinin trombosit agregasyonunu inhibe etme yetenekleri açısından değerlendirildi. Tablo 3, çeşitli konsantrasyonlarda farklı ekstraktların ve pozitif kontrol olarak aspirinin inhibitör etkilerini göstermektedir ve Tablo 4, üç ölçümün ortalama değerleri ile nar ekstraktlarının veya bileşiklerinin EC50 değerlerini özetlemektedir. Tüm özler, bir, iki veya üç indükleyicinin neden olduğu trombosit agregasyonunu doza bağlı bir şekilde seçici olarak inhibe etti.

Çiçek özünün, 3,5 mg/mL'de yüzde 35,6 ila 66,6 arasında değişen inhibitör etkileriyle, üç indükleyicinin neden olduğu trombosit agregasyonunun en güçlü inhibitörü olduğu bulundu. 2,8 mg/mL EC50 değeriyle kollajen kaynaklı trombosit agregasyonuna karşı, ardından 3,85 mg/mL EC50 değeri ve 4 ile AA kaynaklı trombosit agregasyonuna karşı aktifti. Toplama ADP tarafından uyarıldığında {15}} mg/mL. Pozitif kontrol olarak Aspirin ile karşılaştırıldığında, PF, PP ve PJ, kolajenin neden olduğu agregasyona karşı inhibitör etkilere sahiptir. Bununla birlikte Aspirin, sırasıyla 0.42 ve 0.66 mg/ml'lik bir EC50 ile AA ve ADP tarafından indüklenen agregasyonu inhibe etti ancak kollajene karşı herhangi bir etki bulunmadı. Bu çalışmada ve önceki çalışmamızda [23], PF, PP, PL ve PJ ile karşılaştırıldığında DPPH radikali, ABTS radikali ve lipid peroksidasyonuna karşı en antioksidan nar parçası olarak bulunmuştur. Bu bulgu, PF'nin neden trombosit agregasyonunun en iyi inhibitörü olduğunu açıklıyor olabilir. Ek olarak, PF, esas olarak hidrolize tanenler (ellagitannin) dahil olmak üzere fenoller (yüzde 16.6) ve çözünür diyet lifi (yüzde 30.2) açısından zengindir [26]. Hidrolize tanenlerin daha önce trombosit fonksiyonunu inhibe etmede çok etkili olduğu gösterilmiştir [18]. Öte yandan, diyet lifinin antiplatelet aktivitesi ıslakken belirsizdi [27, 28]. Bu nedenle, PF'nin güçlü ve çok hedefli antiplatelet aktivitesinin, bu organda bulunan ana fenoller olan hidrolize tanenlere atfedilebileceğini varsaydık.

PP ve PJ, hem ADP'ye hem de kollajen kaynaklı trombosit agregasyonuna karşı inhibitör etkiler sergiledi. Ancak agonist olarak AA kullanıldığında her iki ekstrakt için de herhangi bir etki gösterilememiştir. Sonuçlarımız, her iki ekstraktın da AA'ya trombosit yanıtını inhibe ettiğini gösteren Mattiello ve ark., 2009 tarafından bulunanları doğrulamamaktadır [18]. EC50 değerlerinin karşılaştırılması, PP'nin ADP'yi ve kollajen kaynaklı trombosit agregasyonunu PJ'den daha etkili bir şekilde azalttığını ortaya koydu.

Her iki ekstrakt arasındaki inhibitör etki farkı, antioksidan kapasite farkı ile açıklanabilir. PP, bu çalışmada ABTS radikaline ve lipid peroksidasyonuna ve ayrıca DPPH radikaline ve indirgeme gücüne karşı PJ'den daha güçlü bir antioksidandı [23]. Bu açıklama, meyvelerin antiplatelet potansiyelinin antioksidan aktiviteleriyle ilgisiz veya zıt olduğunu öne süren bazı önceki raporlarla uyumsuzdu [29, 30]. PL ve PSO, sadece ADP ile tetiklenen trombosit agregasyonunu inhibe edebilirken, kollajen ve AA agonist olarak kullanıldığında etkili olmadılar.

Çözüm

Sonuç olarak, nar çiçeği, yaprağı ve kabuğunun in vitro olarak protein glikasyonu ve trombosit agregasyonu üzerinde inhibitör etkisi vardır. Bu etkiler, çeşitli nar aktif bileşiklerinin antioksidan özelliklerine bağlandı. Bununla birlikte, doğal bir AGE inhibitörü olarak önerilmeden önce, bu sonuçları doğrulamak ve etki mekanizması hakkında daha derin bir anlayış elde etmek için daha fazla araştırma yapılması gerekmektedir. Antioksidan özelliği? Nardaki aktif bileşikler potansiyel olarak/bu özelliklere katkıda bulunur.

Kısaltmalar

AA: araşidonik asit; AAPH: 2,2'-azobis (2-metilpropionamidin) dihidroklorür; ABTS: 2,2'-casino-bis (3-etilbenzotiazolin-6-sülfonik asit; ADP: Adenozin Difosfat (ADP); AGE'ler: Gelişmiş Glikasyon son ürünleri; BSA: Bovin Serum Albümini; DMSO: Dimetil Sülfoksit ; FeCl2: Demir klorür; HCl: Klorhidrik asit; HFD: Yüksek Yağ Yüksek Fruktoz Diyeti; K2S2O8: Potasyum persülfat çözeltisi; LA: Linoleik asit; MeOH: Metanol; NaN3: Sodyum azit; NH4SCN: Amonyum tiyosiyanat; PEG: Polietilen glikol; PRP : Trombositten zengin plazma PPP: Trombositten fakir plazma.

teşekkürler

Tesis yönergeleri beyanı

Çeşitlerin orijinalliği Chott-Meriem Yüksek Tarım Enstitüsü (Sousse Üniversitesi, Tunus) Bahçe Bitkileri Departmanından taksonomist Dr. Faten Zaouay tarafından doğrulandı ve Gabes ve Chott-Mariem'de ikişer nüsha olarak tutulan ulusal koleksiyonumuza bir makbuz örneği bırakıldı. (Sousse), 'TNl, TN2, TN3, TN5, TN5" kodlu. Çalışma ilgili kurumsal, ulusal ve uluslararası yönergelere ve mevzuata uygundur ve Punica granatum L.'yi toplamak için Bölgesel Araştırma Merkezi'nden izin alınmıştır. Bahçe Bitkileri ve Organik Chott-Mariem, IRESA-Sousse Üniversitesi, 8.P.57-4042, Tunus.

Yazar katkıları

ZA ve IA; metodoloji, ZA; ve İA; yazılım, AZ ve RC; doğrulama, kaynaklar, ZA; yazma—orijinal taslak hazırlama, JG; süpervizyon, MH ve SH; yazma—inceleme ve düzenleme. Tüm yazarlar makalenin yayınlanan versiyonunu okudu ve kabul etti.

Finansman

Bu çalışma, Yüksek Öğretim ve Bilimsel Araştırma Bakanlığı-Tunus tarafından finanse edildi.

Veri ve materyallerin mevcudiyeti

Mevcut çalışma sırasında oluşturulan ve/veya analiz edilen veri kümeleri, makul talep üzerine ilgili yazardan temin edilebilir.

Beyannameler

Etik onay ve katılım onayı

Bu çalışma, Tunus Sfax Üniversite Hastanesi Hedi Chaker'in yerel etik kurulu tarafından onaylandı. Tüm deneyler ilgili yönergeler ve düzenlemelere göre yapıldı. Tüm deneklerden ve/veya yasal vasilerinden bilgilendirilmiş onam alındı.

yayın izni

Uygulanamaz.

Rekabet eden çıkarlar

Yazarlar herhangi bir çıkar çatışması beyan etmemektedir.

Yazar Ayrıntıları

1 Biyokimya Laboratuvarı, LR12ES05 "Beslenme- Fonksiyonel Gıdalar ve damar Sağlığı", Tıp Fakültesi, Monastir Üniversitesi, 5019 Monastir, Tunus. 2 Centre Régional de Transfusion Sanguine de Sfax, Route El-Ain Km 0.5, CP 3003 Sfax, Tunus.

Referanslar

1. Hanafy SM, Abd El-Shafea YM, Saleh WD, Fathy HM. Patojenik mikroorganizmalara karşı nar, portakal ve muz kabuğu ekstraktlarının kimyasal profili, in vitro antimikrobiyal ve antioksidan aktiviteleri. J Genet Müh Biyoteknol. 2021;19:80.

2. Benchagra L, Berrougui H, Islam MO, Ramchoun M, Boulbaroud S, Hajjaji A, et al. Punicalagin açısından zengin Fas narı (Punica granatum L. Sefri çeşidi) özlerinin oksidatif stres sürecine karşı antioksidan etkisi. yiyecekler. 2021;10:2219.

3. Akuru EA, Chukwuma CI, Oyeagu CE, Erukainure OL, Mashile B, Setlhodi R, et al. Nar kabuğunun ("harika çeşitlilik") beslenme ve fitokimyasal profili ve hepatik oksidatif stres ve metabolik değişiklikler üzerindeki etkileri. J Gıda Biyokimyası 2022:46.

4. Gil MI, Tomas-Barberan FA, Hess-Pierce B, Holcroft DM, Kader AA. Nar suyunun antioksidan aktivitesi ve bunun fenolik bileşim ve işleme ile ilişkisi. J Tarım Gıda Kimyası 2000;48:4581–9.

5. Rosenblat M, Hayek T, Aviram M. Diyabetik hastaların nar suyu (PJ) tüketiminin serum ve makrofajlar üzerindeki antioksidan etkileri. ateroskleroz. 2006;187:363–71.

6. Amri Z, Ben Khedher MR, Zaibi MS, Kharroubi W, Turki M, Ayadi F, et al. Nar özlerinin uzun süreli yüksek fruktozlu yağla beslenen sıçanlarda anti-diyabetik etkileri. Klinik Bitki Bilimi. 2020;6:55.

7. Harzallah A, Hammami M, Kępczyńska MA, Hislop DC, Arch JRS, Cawthorne MA, et al. Nar çiçeği, kabuğu ve çekirdeği yağının, yüksek yağlı ve yüksek sükrozlu diyetle indüklenen obezite fare modelinde insülin direnci ve inflamasyon üzerindeki potansiyel önleyici etkilerinin karşılaştırılması. Arch Physiol Biochem. 2016;122:75–87.

8. Al-Muammer MN, Khan F. Obezite: narın (Punica granatum) önleyici rolü. Beslenme. 2012;28:595–604.

9. Amri Z, Kharroubi W, Fidanzi-Dugas C, Leger DY, Hammami M, Liagre B. Du145 insan prostat Kanseri hücrelerinde süs nar özlerinin büyümeyi inhibe edici ve proapoptotik etkileri. Beslenme Kanseri. 2020;72:932–8.

10. Arlotta C, Puglia GD, Genovese C, Toscano V, Karlova R, Beekwilder J, et al. MYB5-like ve bHLH, nardaki flavonoid bileşimini etkiler. Bitki Bilimi 2020;298:110563.

11. Amri Z, Ghorbel A, Turki M, Akrout FM, Ayadi F, Elfeki A, et al. Bir sıçan modelinde yüksek yağ-yüksek fruktoz diyetine bağlı obezitede nar ekstraktlarının beyin antioksidan belirteçleri ve kolinesteraz aktivitesi üzerindeki etkisi. BMC Tamamlayıcı Altern Med. 2017;17:339.

12. Okura T, Ueta E, Nakamura R, Fujioka Y, Sumi K, Matsumoto K, et al. Yüksek serum ileri glikasyon son ürünleri, tip 2 diyabetli hastalarda azalmış insülin sekresyonu ile ilişkilidir: kısa bir rapor. J Diyabet Arş. 2017;2017.

13. Al-Sofani ME, Yanek LR, Faraday N, Kral BG, Mathias R, Becker LC, et al. Düşük doz aspirine diyabet ve trombosit yanıtı. J Clin Endocrinol Metab. 2018;103:4599–608.

14. McEwen BJ. Diyet ve besinlerin trombosit fonksiyonu üzerindeki etkisi. Semin Tromb Hemost. 2014;40:214–26.

15. Lim ST, Coughlan CA, Murphy SJX, Fernandez-Cadenas I, Montaner J, Thijs V, et al. Geçici iskemik atak ve iskemik inmede trombosit fonksiyon testi: literatürün kapsamlı bir sistematik incelemesi. trombositler. 2015;26:402–12.

16. Dhananjayan K, Forbes J, Münch G. Gelişmiş Glikasyon, Diyabet ve Demans. İçinde: Tip 2 Diyabet ve Demans; 2018.s. 169–93.

17. Kumagai Y, Nakatani S, Onodera H, Nagatomo A, Nishida N, Matsuura Y, et al. Nar (Punica granatum L.) meyve özü ve bileşenlerinin in vivo ve in vitro anti-glikasyon etkileri. J Tarım Gıda Kimyası 2015;63:7760–4.

18. Mattiello T, Trifrò E, Jotti GS, Pulcinelli FM. Nar suyu ve özü polifenollerinin trombosit fonksiyonu üzerindeki etkileri. J Med Gıda. 2009;12:334–9.

19. Delgado-Andrade C, Morales FJ. Kahve demlemelerinin antioksidan aktivitesine melanoidinlerin katkısının çözülmesi. J Tarım Gıda Kimyası 2005;53:1403–7.

20. Olszewska MA, Presler A, Michel P. Fenolik bileşiklerin profili ve seçilen Sorbus türlerinden kuru ekstraktların antioksidan aktivitesi. moleküller. 2012;17:3093–113.

21. Séro L, Sanguinet L, Blanchard P, Dang BT, Morel S, Richomme P, et al. Ham bitki özlerinde AGE inhibitörlerini tanımlamak için kuyucuklu bir mikrotiter plaka floresan bazlı tahlilin ayarlanması. moleküller. 2013;18:14320–39.

22. Piluzza G, Bullitta S. Akdeniz bölgesinde geleneksel etnoveteriner kullanımda olan yirmi dört bitki türünde fenolik içerik ve antioksidan özellikler arasındaki ilişkiler. Eczacı Biol. 2011;49:240–7.

23. Amri Z, Zaouay F, Lazreg-Aref H, Soltana H, Mneri A, Mars M, et al. Narın farklı kısımlarının fitokimyasal içeriği, yağ asitleri bileşimi ve antioksidan potansiyeli: Tunus'ta yetiştirilen yenilebilir ve yenmeyen çeşitlerin karşılaştırılması. Int J Biol Makromol. 2017;104:274–80.

24. Sohrab G, Angoorani P, Tohidi M, Tabibi H, Kimiagar M, Nasrollahzadeh J. Nar (Punicagranatum) suyu lipid peroksidasyonunu azaltır, ancak tip 2 diyabetli yetişkinlerde plazma gelişmiş glikozlanmış son ürünleri etkilemez: randomize bir çift- kör klinik deneme. Yiyecek. Nutr Arş. 2015:59.

25. Liu W, Ma H, Frost L, Yuan T, Dain JA, Seeram NP. Nar fenolikleri, reaktif karbonil türlerini temizleyerek gelişmiş glikasyon son ürünlerinin oluşumunu engeller. Gıda İşlevi. 2014;5:2996–3004.

26. Aviram M, Volkova N, Coleman R, Dreher M, Reddy MK, Ferreira D, et al. Kabuklardan, tanelerden ve çiçeklerden elde edilen nar fenolikleri antiaterojeniktir: aterosklerotik apolipoprotein E-eksikliği olan (E0) farelerde in vivo ve kültürlenmiş makrofajlar ve lipoproteinlerde in vitro çalışmalar. Tarım ve Gıda Kimyası Dergisi. 2008;56:1148–57.

27. Hannan JMA, Rokeya B, Faruque O, Nahar N, Mosihuzzaman M, Azad Khan AK, et al. Trigonella foenum graecum'un çözünür diyet lifi fraksiyonunun, tip 2 diyabetik model farelerin glisemik, insülinemik, lipidemik ve trombosit agregasyon durumu üzerindeki etkisi. J Etnofarmakol. 2003;88:73–7.

28. Bagger M, Andersen O, Nielsen JB, Ryttig KR. Diyet lifleri, sıçanlarda kan basıncını, serum toplam kolesterolünü ve trombosit agregasyonunu azaltır. Br J Nutr. 1996;75:483–93.

29. Dutta-Roy AK, Gordon MJ, Kelly C, Hunter K, Crosbie L, Knight-Carpentar T ve diğerleri. Ginkgo biloba özlerinin insan trombosit agregasyonu üzerindeki inhibe edici etkisi. trombositler. 1999;10:298–305.

30. Dutta-Roy AK, Crosbie L, Gordon MJ. Domates ekstraktının in vitro insan trombosit agregasyonu üzerindeki etkileri. trombositler. 2001;12:218–27.

Yayıncının Notu 

Springer Nature, yayınlanan haritalardaki ve kurumsal bağlantılardaki yetki iddiaları konusunda tarafsız kalır.

【Daha fazla bilgi için: david.deng@wecistanche.com / WhatApp:86 13632399501】