Anastatica Hierochuntica Etanolik ve Sulu Ekstraktların Antioksidan Aktivitesi, Fenolik Profili ve Nefroprotektif Potansiyeli, Sıçanlarda CCl4-İndüklenmiş Nefrotoksisiteye Karşı

Lütfen iletişime geçinoscar.xiao@wecistanche.comdaha fazlası için

Soyut:Kaff-e-Maryam (Anastatica hierochuntica L.), özellikle doğumu kolaylaştırmak ve üreme sistemi ile ilgili bozuklukları hafifletmek için bir dizi sağlık sorununu tedavi etmek için yaygın olarak kullanılmaktadır. Bu çalışma, sıçanlarda A. hierofhantic etanolik (KEE) ve sulu (KAE) ekstraksiyonunun CCl4- ile indüklenen oksidatif stres ve nefrotoksisitenin etkisini böbrek fonksiyonları için biyokimyasal belirteçler kullanarak değerlendirmeyi amaçlamıştır.antioksidandurumu ve böbrek dokusunun histopatolojik incelemeleri.A. hiyerofantik toplamın 67.49 mg GAE g-1'ini içeriyordufenolik bileşikler(TPC), 3.51 µg g-1 toplam karotenoidler (TC) ve sırasıyla 49.78 ve 17.45 mg QE g-1 toplam flavonoidler (TF) ve toplam flflavonoller (TFL). 128.71 µmol TE g-1 DPPH-RSA ve 141.92 µmol TE g-1 ABTS-RSA ile sonuçlandı. A. hierophantic, linoleik asit radikallerini inhibe ederek ve oksidasyon metallerini şelatlayarak üstün antioksidan aktivite gösterdi. HPLC analizi, 9 ve 21 ile sonuçlandıfenolik asitlerve 6 ve 2flavonoidlersırasıyla sinapik ve siringik asitlerin baskın olduğu KEE ve KAE'de. Vit'in kas içi enjeksiyonu. 250 mg kg-1 vücut ağırlığında E artı Se ve KEE, KAE ve KEE artı KAE'nin oral yoldan verilmesi, serum kreatinin, üre, K, toplam protein ve albümin düzeylerini önemli ölçüde düzeltti. Ek olarak, malondialdehiti (MOD) düşürdüler, indirgenmiş glutatyonu (GSH) restore ettiler ve süperoksit dismutaz (SOD) seviyelerini arttırdılar. KEE, KAE ve KEE artı KAE, böbrekleri CCl4-nefrotoksisiteden korudu, çünkü bunlar esas olarak indüklenmiş oksidatif stresi azalttı. Toplam nefro-koruma KEE, KAE ve KEE artı KAE için sırasıyla yüzde 83.27, yüzde 97.62 ve yüzde 78.85 idi. Hem vit.E artı Se hem de A. hiyerofantik özütler, CCl4- ile tedavi edilen sıçanlarda histopatolojik değişikliği hafifletti. Sonuç olarak, A. hierophantic, özellikle KAE, CCl4 akut böbrek hasarından sonra oksidatif stabiliteyi geri kazanma ve böbrek fonksiyonunu KEE'den daha iyi iyileştirme potansiyeline sahiptir. Bu nedenle, A. hierophantic, ilaca bağlı nefrotoksisitenin tedavisinde yararlı bir terapötik ajan olma potansiyeline sahiptir.

Anahtar Kelimeler:Kaff-e-Meryem; polifenoller; biyoaktivite; ikincil metabolitler; böbrek belirteçleri;antioksidan enzimler; Böbrek yetmezliği

Daha fazla bilgi için lütfen buraya tıklayın

giriiş

Böbrek hastalığı, 7'de 1'den fazlası ile 9. önde gelen ölüm nedenidir, yani ABD'li yetişkinlerin yüzde 15'i veya 37 milyon insanın kronik böbrek hastalığına (KBH) sahip olduğu tahmin edilmektedir [1]. Dikkat çekici bir şekilde, 2015 yılında kaydedilen KBH'nin en yaygın nedeni diyabetes mellitustur, bunu yüksek tansiyon ve glomerülonefrit takip eder [2]. KBH'nin diğer nedenleri idiyopatiktir (genellikle renal ultrasonda küçük böbreklerle ilişkilidir) [3]. Daha önce, CCl4 metal yağ giderme, kuru temizleme, kumaş lekeleme, yangın söndürücü sıvılar ve tahıl fümigasyonu için kullanılıyordu [4]. Aktif serbest radikaller üreterek kanda olduğu kadar karaciğerde, akciğerlerde ve testislerde de ciddi rahatsızlıklara neden olur [5]. Ögetürk ve ark. [6], bu çözücüye maruz kalma, akut ve kronik böbrek hasarı üretir. Serbest radikal kaynaklı lipid peroksidasyonunun, çeşitli patolojik koşullara yol açan hücre zarı hasarının başlıca nedenlerinden biri olduğuna inanılmaktadır [7]. Reaktif radikallerin oluşumu, lipid peroksidasyonunda ve böbreklerde yaralanmalara yol açan disfonksiyonel proteinlerin birikmesinde rol oynayan CCl4- ile indüklenen nefrotoksisite ile ilişkilendirilmiştir [8]. Tıbbi bitkilerin şaşırtıcı, geleneksel kullanımları son yıllarda arttı ve çok sayıda araştırma, çeşitli hastalıklara karşı terapötik rollerini doğruladı [9-12]. Kaff-e-Maryam (Anastatica hierochuntica), Brassicaceae familyasına ait bir çöl şifalı bitkisidir. Dünyanın çeşitli bölgelerinde, özellikle Arap ülkelerinde (örn. Suudi Arabistan, Mısır, Umman, Libya, Irak, Birleşik Arap Emirlikleri, Kuveyt) ve bazı Asya, Avrupa ve Afrika ülkelerinde yetişmektedir. A. hierophanttic'in üstün tıbbi potansiyellere sahip olduğuna inanılır ve tercihen çeşitli tıbbi durumlar için tüketilir [13]. Esas olarak doğum sürecini kolaylaştırmak ve üreme sistemi ile ilgili bozuklukları ve başta diabetes mellitus olmak üzere metabolik bozuklukları tedavi etmek için kullanılır [14]. Analjezik olarak ve epilepsi, gastrointestinal bozukluklar, artrit, bronşiyal astım, ağız ülserleri, sıtma ve zihinsel depresyon için bir tedavi olarak kullanılır [15-17]. A. hierophanttic, metallere şelatlama özellikleri verebilen birçok bitkisel bitkiyle karşılaştırılabilir veya onlardan daha fazla olan Mg, Ca, Mn, Fe, Cu ve Zn gibi önemli miktarlarda mineraller içerir [18]. Yoshikawa et al. [19], Anastasia A ve B gibi flavanonların varlığının, birincil kültürlenmiş fare hepatositlerinde D-galaktozamin kaynaklı sitotoksisiteyi inhibe ederek güçlü hepatoprotektif etkilerle ilişkili olduğu sonucuna varmıştır. Karaciğerdeki Kupffer hücreleri tarafından reaktif oksijen türlerinin (ROS) ve tümör nekroz faktörü ve interlökin-1 gibi sitokinlerin üretimi, D-galaktozamin hepatotoksisitesinde hepatosit yıkımına katkıda bulunur [20]. A. hierofantik bileşenlerinin antioksidan ve anti-inflamatuar özellikleri, D-galaktozamin kaynaklı hepatotoksisiteyi azaltmaya yardımcı olabilir [21]. A. hierophantic, CCl4-hepatotoksisitesine karşı korumaya bağlı olarak ekstrakt sağlayabilir [22]. Bununla birlikte, A. hierophantic'in kullanımıyla ilgili umut verici potansiyeller gösteren literatüre rağmen, A. hierophantic etanolik (KEE) ve sulu (KAE) ekstraktlarının nefroprotektif potansiyelinin dikkatlice incelenmesi gerekmektedir. Ayrıca, literatür taraması esas olarak A. hierophantic'in hepatoprotektif etkinliğini vurguladı, ancak nefroprotektif potansiyel şu ana kadar çalışılmadı, bu nedenle bu çalışmayı motive etti. Bu nedenle, mevcut çalışma, antioksidatif savunma enzimlerindeki değişiklikleri gözlemlemeyi, sıçanlarda CCl4 uygulamasından sonra renal mikroskopideki değişiklikleri saptamayı ve A. hierophantic ekstraktlarının CCl4-indüklediği böbrek hasarına karşı olası koruyucu etkilerini araştırmayı amaçlamaktadır.

Cinselliği iyileştirmek için Cistanche

2. Malzemeler ve Yöntemler

2.1. Numune Hazırlama Kaff-e-Maryam (A. hierophantic L.) bitkisinin bir numunesi, Suudi Arabistan'ın Qassim bölgesi, Buraydah şehrinde yerel bir pazardan satın alındı. Bitki materyali, Suudi Arabistan Qassim Üniversitesi, Ziraat ve Veterinerlik Fakültesi, Bitki Üretimi ve Koruma Bölümü tarafından doğrulanmıştır. Örnek temiz çeşme suyu ile yıkanarak yapraklardaki kum ve kiri uzaklaştırıldı ve ardından hava ile kurutulan bitki materyali (28 ± 1 ◦C'de 48 saat) mekanik olarak toz haline getirildi ve 4 ± 1 ◦C'de opak polietilen torbalarda saklandı. kullanana kadar. 2.2. Etanolik ve Sulu Ekstraktların Hazırlanması Yaklaşık 200 g kurutulmuş A. hierophanttic, 3{{1{{1{116}}6}}4}}0 ile ekstrakte edildi. Etanolik ekstraksiyon (KEE) hazırlamak için bir Soxhlet ekstraktöründe mL 7{{150}} yüzde etanol. Ekstrakt, kalan solventi buharlaştırmak için döner bir buharlaştırıcı ile 40°C'de konsantre edildi, daha sonra bir N2 akışı altında kuruyana kadar. Sulu ekstraksiyon (KAE), küçük modifikasyonlarla Asuzu [23] tarafından tarif edildiği gibi gerçekleştirildi. 500 mL sıcak steril distile suya iki yüz gram kurutulmuş bitki materyali ilave edildi. Karışım daha sonra iyice çalkalandı ve 1 saat beklemeye bırakıldı. Daha sonra şişeye bir geri akış kondansatörü takıldı ve daha sonra 10 dakika hafifçe kaynayana kadar ısıtıldı, soğutuldu, iyice çalkalandı ve Whatman No. 1 filtre kağıdından süzüldü. Süzüntü, döner bir buharlaştırıcı ile buharlaştırıldı, ardından bir N2 akımı altında kuruyana kadar buharlaştırıldı. Alkollü ve sulu ekstreler (250 mg mL-1 ), oral uygulama için kullanılmak üzere taze olarak damıtılmış su içinde formüle edildi. 2.3. Toplam Fenolik İçerik (TPC) A. hierophantic'in TPC içeriği, Bettaieb ve diğerleri tarafından uyarlanan yönteme göre belirlendi. [24]. Sonuçlar, 50–500 mg mL-1 (R2=0.99) aralığında çizilen bir gallik asit (GA) standart eğrisi ile karşılaştırıldı ve TPC, mg gallik asit eşdeğeri (GAE) olarak hesaplandı. ) A. hierophantic gramı başına (mg GAE g-1 ). 2.4. Toplam Karotenoidler (TC), Toplam Flavonoidler (TF) ve Toplam Flavonoller (TFL) Al-Qabba ve ark. [10], 5 g A. hierophantic, aseton ve petrol eter karışımı (1:1, v/v) ile tekrar tekrar ekstre edildi. Toplam karotenoid (TC) içeriği, 451 nm'de spektrofotometrik olarak belirlendi. TC mg g-1 DW olarak ifade edildi. A. hierophantic'in TF içeriği, Mohdaly ve diğerleri tarafından açıklanan protokole göre test edildi. [25]. TF içeriği, 100 g-1 dw başına mg kuersetin eşdeğeri (QE) olarak hesaplandı. Aynı bağlamda, TFL içeriği gerçekleştirilmiştir [26]. 440 nm'de absorbans kaydedildi ve TFL, 100 g-1 DW başına mg kuersetin eşdeğeri (QE) olarak hesaplandı. 2.5. Antioksidan Kapasitesinin Belirlenmesi DPPH radikal süpürme deneyi: RSA, Lu ve diğerleri tarafından değiştirilmiş bir tekniğe göre DPPH mor renkli solüsyonun ağartılmasına bağlı olarak spektrofotometrik olarak test edildi. [27]. Antiradikal kapasite, A. hierophantic (µmoL TE g-1) gramı başına µmol Trolox eşdeğerleri (TE) olarak sunuldu. ABTS radikal süpürme aktivitesi: A. hierophantic'in ABTS radikallerine karşı RSA'sı, Lu ve ark.'nın uyarlanmış yöntemiyle test edildi. [27]. Sonuçlar µmoL TE g-1 olarak ifade edildi. -karoten-linoleik asit ağartma deneyi: A. hierophantic'in antioksidan yüzdesi, Koleva ve ark. [28]; sonuçlar BHA ile ilgili yüzde olarak verildi. A. hierophantic'in demirli iyonlar üzerindeki şelatlama etkisi: A. hierophantic'in şelatlama aktivitesi, Zhao ve diğerleri tarafından protokole göre ölçülmüştür. [29]. Metal şelatlama eylemi olarak ferrozin-Fe2 artı kompleks oluşumunun inhibisyon yüzdesi ölçüldü ve pozitif kontrol olarak etilendiamintetraasetik asit (EDTA) kullanıldığında mg mL-1 olarak sunuldu. 2.6. A. hierofhantic Sulu ve Etanolik Ekstraktların Polifenolik Bileşik Fraksiyonasyonu Etanolik ve sulu ekstraktlardan polifenollerin belirlenmesi, bir otomatik numune alıcı, dörtlü pompa ve diyot dizisi ile donatılmış bir HP1100 (Agilent Technologies, Palo Alto, CA, ABD) HPLC sistemi ile yapıldı. Goupy ve diğerlerine göre 5 mm Altima C18 koruma sütunu (Alltech, Nettetal, Almanya) ile bir sütun (Altima C18 150 × 4,6 mm, 5 µm) kullanan dedektör (Hewlett Packard 1050). [30]. Kullanılan solvent sistemi, A (asetik asit yüzde 2.5), B (asetik asit yüzde 8) ve C (asetonitril) gradyanıydı. Çözücü arkadaş oranı 1 mL dk-1 idi ve ayırma 35 ◦C'de yapıldı. Enjekte edilen hacim 10 µL idi. Fenolik bileşikler harici standart kalibrasyonla test edildi ve flavan-3-oller için eşdeğer (artı)-kateşin ve polar aromatik bileşikler için eşdeğer kumarin mg g-1 DW olarak ifade edildi. Aynı numuneden beş fenolik ekstraksiyonunda yüzde 8'lik bir değişkenlik belirlendi. Tüm değerler, çift enjeksiyonların ortalamasıydı. Polifenoller ve türevleri 280 ve 320 nm'de tanımlandı ve miktarları belirlendi, flavonoidler ise 360 ​​nm'de belirlendi. 2.7. Deneysel Tasarım Tüm deneyler, QU'nun (No. 15-4-2017), KSA'nın Kurumsal Hayvan Etik Kurulu (IAEC) tarafından onaylanmıştır. Ulusal Biyoetik Komitesi (NCBE), Canlılar Üzerinde Araştırma Etiği Yasası Uygulama Yönetmeliği. Mevcut çalışmada toplam 36 erkek albino sıçan kullanıldı ve her biri 6 hayvandan oluşan 6 gruba ayrıldı ve aşağıdaki gibi tedavi edildi: Grup I (Kontrol) intraperitoneal enjeksiyon (ip) zeytinyağı (1.0 mL kg-1 iki kez) aldı. hafta) ve art arda 21 gün boyunca ağızdan/günlük 0,5 mL distile su. Grup II, Al-Qabba ve ark.'na göre, eşit hacimlerde CCl4 ve zeytinyağı (haftada iki kez 1.0 mL kg-1 dozunda) ve 0.5 mL damıtılmış sudan oluşan taze bir karışımın ip enjeksiyonunu aldı. [10] küçük değişikliklerle. Grup III (referans grup) 50 mg kg-1 vit intramüsküler enjeksiyon (im) aldı. Asuka ve arkadaşlarına göre E artı Se (Selepherol, Vetoquinol Co., Magny-Vernois, Fransa) haftada iki kez. [31] ve El-Desoky ve ark. [32] ve ağızdan/günlük 0.5 mL distile su. Grup IV test olarak kullanıldı ve haftada iki kez CCl4 ip ile birlikte oral/günlük 250 mg kg-1 KEE aldı. Grup V, haftada iki kez CCl4 ip ile birlikte oral/günlük 250 mg kg-1 KAE aldı. Grup VI, haftada iki kez CCl4 ip ile birlikte oral/günlük 250 mg kg-1 KEE artı KAE (1:1) aldı. Son tedaviden yirmi dört saat sonra (21. gün), sıçanlara karışım (alkol:kloroform:eter, 1:2:3) ile anestezi uygulandı. Tüm hayvanlardan kalp ponksiyonundan kan örnekleri alındı ​​ve serum 4000 rpm'de 10 dakika santrifüj edilerek ayrıldı ve biyokimyasal inceleme için -20 ◦C'de saklandı. 2.7.1. Böbrek Biyokimyasal Analizi Serum kreatinin, üre, toplam protein ve albümin konsantrasyonları, üreticinin talimatlarına göre otomatik spektrofotometrik yöntemlerle (BM/Hitachi autoanalyzer-911; Boehringer Mannheim, Almanya) belirlendi. Potasyum seviyeleri 766 nm'de alev fotometrisi ile belirlendi. 2.7.2. Renal Antioksidan Aktivitesinin Tahmini Kan örneklerinin alınmasından sonra tüm gruplardaki hayvanlar kurban edildi; sağ böbrekler hızla izole edildi ve buz gibi soğuk tuzlu su ile yıkandı. Doku daha sonra kırpıldı, soğuk tuzlu su içinde durulandı, kuru lekelendi ve hemen buza yerleştirildi. Bir elektrikli doku homojenleştiricisi kullanılarak, dokunun bölümleri (1.0 g) tartıldı ve pH 7.4'te 9 hacim buz gibi soğuk 0.05 M fosfat tamponu ile homojenleştirildi. Hücre döküntüsü, malondialdehit (MDA) konsantrasyonu [33], süperoksit dismutaz (SOD) aktivitesi [34] ve azaltılmış glutatyon (GSH) içeriği [34] için süpernatanları toplamak üzere 20 dakika boyunca 12.000 rpm'de (4 ◦C) santrifüjleme ile çıkarıldı. 35]. Böbrek homojenatındaki protein konsantrasyonu, Bradford yöntemi [36] kullanılarak belirlendi. 2.7.3. Nefroproteksiyon Yüzdesi Vit'in nefroproteksiyon (F) yüzdeleri. E artı Se, KEE, KAE ve KEE artı KAE, Wakchaure ve ark.'na göre her biyokimyasal parametre için ayrı ayrı hesaplandı. [37] aşağıdaki denklemi kullanarak: F yüzdesi=[1 − (T − N) (C − N)] × 100 (1) burada T=tedavi grubunun ortalama değeri, C {{ 171}} pozitif kontrol grubunun ortalama değeri ve N= negatif kontrol grubunun ortalama değeri. Ayrıca toplam nefroproteksiyon yüzdesi (TFP yüzdesi) bununla karşılaştırıldı. E artı Denizler TFP yüzdesini takip eder=Her özün biyokimyasal parametrelerinin yüzde F toplamı, bunun biyokimyasal parametrelerinin yüzde F toplamı. E artı Se × 100 (2) 2.7.4. Histopatolojik Çalışmalar Ayrı sıçan gruplarının sol böbreklerinden otopsi örnekleri toplandı ve 24 saat boyunca yüzde 10'luk formalin salin içinde sabitlendi. Musluk suyuyla yıkamayı, alkolün (metil, etil ve mutlak etil) seri seyreltmeleriyle dehidrasyon izledi. Örnekler ksilende temizlendi ve sıcak hava fırınında 56 ◦C'de 24 saat parafine gömüldü. Parafin arıları balmumu doku blokları, bir kızak mikrotomu kullanılarak 4-mikron kalınlığında kesitler için hazırlandı. Doku dilimleri cam slaytlar üzerinde toplandı, parafinden arındırıldı ve hafif bir elektrik mikroskobu altında düzenli inceleme için hematoksilen ve eozin ile boyandı [38]. 2.8. İstatistiksel Analiz Sonuçlar ortalama ± standart hata (SE) olarak gösterilmiştir. Çeşitli gruplarda ortalamalar arasındaki farklılıkların önemi, tek yönlü bir varyans analizi (ANOVA) ve ardından Duncan testi kullanılarak incelendi ve ortalamalar arasında bir p değeri p < 0.05="" düzeyinde="" verildi="" [39].="" 3.="" sonuçlar="" 3.1.="" a.="" hierophantic'in="" fitokimyasalları="" ve="" antioksidan="" kapasitesi="" dpph="" ve="" abts="" radikal="" süpürme,="" -karoten-linoleik="" asit="" ağartma="" aktiviteleri="" ve="" şelatlama="" kabiliyeti="" (ca)="" kullanılarak="" a.="" hierophantic="" fitokimyasallarının="" ve="" ilgili="" antioksidan="" aktivitelerinin="" kantitatif="" analizi="" yapıldı.="" tablo="" 1'de="" açıkça="" görülebileceği="" gibi,="" tpc="" içeriği="" 67.49="" mg="" gae="" g-1="" idi.="" tc="" içeriği="" 3.51="" µg="" g-1="" idi.="" tf="" ve="" tl="" içerikleri="" sırasıyla="" 49.78="" ve="" 17.45="" mg="" qe="" g-1="" idi.="" ayrıca,="" antioksidan="" aktivitelerin="" ilerlemesini="" ölçmek="" için="" dpph-rsa="" ve="" abts-rsa="" kullanıldı.="" sonuçlar,="" dpph-rsa="" ve="" abts-rsa="" için="" sırasıyla="" 128.71="" µmol="" te="" g-1="" ve="" 141.92="" µmol="" te="" g-1="" gösterdi.="" ek="" olarak,="" a.="" hierophantic'in="" antioksidan="" aktivitesi="" (aoa)="" tablo="" 1'de="" sunulmuştur.="" linoleik="" asit="" radikallerinin="" inhibisyon="" yüzdesi,="" -karoten="" ağartma="" (-cb)="" tahlili="" kullanılarak="" bha'ya="" kıyasla="" yüzde="" 45.74="" olarak="" hesaplanmıştır.="" ayrıca,="" metal="" şelatlama="" aktivitesinin="" değerlendirilmesi,="" oksidasyon="" metallerini="" şelatlama="" kabiliyetini="" gösteren="" fe2="" artı="" –ferrozin="" kompleks="" oluşumuna="" müdahale="" etmede="" yetkin="" görünen="" 42.89="" mg="" g-1="" ortaya="" çıkardı.="" tablo="" 1.="" a.="" hierophanttic'in="" (ortalama="" ±="" se),="" n="6" toplam="" fenolik="" içeriği,="" toplam="" karotenoidler,="" toplam="" flavonoidler,="" toplam="" flflavonoller="" ve="" bağıl="" potansiyel="" antioksidan="">

3.2. A. hiyerofantik Fenolik Bileşiklerin Kantifikasyonu HPLC analizi ile KEE ve KAE için fenolik bileşiklerin kantitatif analizi yapıldı ve veriler Tablo 2'de tablolaştırıldı. A'nın KEE'sinden saptanabilir miktarlarda dokuz ayrı fenolik asit ve altı flavonoid tanımlandı. hiyerofantik. En bol bulunan fenolik asitler, sinapik asit (28.704 mg 1{{50}}0 g-1 ) gibi hidroksisinamik asitler ve ardından kafeik asit (6.621 mg 1{) idi. {63}}0 g-1 ), rosmarinik asit (2.884 mg 100 g-1 ), ferulik asit (1.854 mg 10{{85} } g-1 ) ve sinnamik asit (0.094 mg 100 g-1); ve p-hidroksibenzoik asit (3.440 mg 100 g-1), protokateşik asit (1.811 mg 100 g-1), vanilik asit (3.326 mg 100 g-1) ve siringik asit (1.083 mg 100 g) gibi hidroksi-benzoik asitler -1 ). Myricetin (16.269 mg 100 g-1 ), D-catechin (2.410 mg 100 g-1 ), kaempferol (0.434 mg 100 g-1 ), rutin (0.539 mg 100 g-1 ), apigenin gibi flavonoidler{{58} }glukozid (0.192 mg 100 g-1 ) ve kersetin (0.184 mg 100 g-1 ) paha biçilmez miktarlar saptandı. A. hierophantic'in KAE'sindeki fenolik bileşikler de belirlendi ve veriler Tablo 2'de tablolaştırıldı. Siringik asit, tanımlanan 21 fenolik arasında en yüksek fenolik asit olarak kaydedildi. Katekol ve pirogallol sırasıyla 2.526 ve 1.589 mg 100 g-1 idi. Veriler, kafeik, kateşin, klorojenik, epikateşin, e-vanillik, p-hidroksibenzoik ve protokateşik asitler gibi bazı fenolik asitlerin orta düzeyde 0.725, 0.256, 0.136, 0.193, 0.443, 0.223 ve 0.454 mg 100 tespit edildiğini göstermiştir. g-1, sırasıyla. Aynı bağlamda, düşük miktarlarda 3,4,5-trimetoksisinnamik, 4-aminobenzoik, benzoik, sinamik, kumarin, ellajik, ferulik, gallik, izo-ferulik, -kumarik, p-kumarik ve salisilik asitler tanımlandıktan sonra nicelleştirildi. Flavonoidler olarak Epicatechin ve D-catechin, A. hierophanttic'in KAE'sinde de ölçülmüştür.

3.3. Serum Kreatinin, Üre, K, Toplam Protein ve Albümin Düzeyleri CCl4 enjeksiyonu, kontrol sıçanlarına (GI) kıyasla GII sıçanlarında serum kreatinin, üre ve k düzeylerini önemli ölçüde yükseltti. Tersine, CCl4- ile tedavi edilen sıçanlarda toplam protein ve albümin seviyeleri önemli ölçüde azaldı (Tablo 3). Vit. E artı Se ve A. hierofhantik ekstraktları (G III, IV, V ve VI), CCl4 enjeksiyonunun neden olduğu kreatinin ve üre değişikliklerini önemli ölçüde azaltırken, albümin ve toplam proteinleri GI'de normal değerlere yakın hale getirdiler (Tablo 3 ). CCl4- ile tedavi edilen sıçanlarda (GII) GI ile karşılaştırıldığında serum k seviyesi belirgin şekilde arttı (Tablo 3). Vit enjeksiyonu. E artı Se ve A. hierophantic alkollü ve sulu ekstraktların (G IV, V ve VI) uygulanması da GI ile karşılaştırıldığında k seviyesini pozitif olarak iyileştirdi (Tablo 3).

3.4. Renal Antioksidan Biyobelirteçler Tablo 4'te gösterildiği gibi, CCl4'ün uygulanması, GII böbrek homojenat dokusunda SOD ve GSH düzeylerini önemli ölçüde azalttı ve MDA düzeyini artırdı. Bununla birlikte, GI ile karşılaştırıldığında, her iki vit ile tedavi edilen sıçanlar. E artı Se ve A. hierofhantik özler (GIII, VI, V ve VI), antioksidan enzimler SOD ve GSH'nin aktivitesinde önemli bir gelişme ve ayrıca MDA seviyelerinde bir azalma sergilemiştir (Tablo 4). A. hierophantic alkollü ekstrakt (GIV), A. hierophantic sulu ekstrakttan (GV) daha iyi performans gösterdi ve A. hierophantic alkollü ve sulu ekstraktları, antioksidan seviyelerini azaltmada ve otoksidasyon süreciyle mücadele etmede, GI ile karşılaştırıldığında düşük MDA seviyeleri ile sonuçlandı.

3.5. Nefroproteksiyon Yüzdesi Kreatinin, üre, k, TP ve albümin gibi böbrek fonksiyonlarının yanı sıra böbrek homojenatındaki (MDA, SOD, GSH) antioksidan aktivitelerinin nefroproteksiyon yüzdesi (negatif kontrol (GI) ve pozitif (GII) gruplarına göre) ) Tablo 5'te gösterilmiştir. Nefro-koruma yüzdesi en yüksek değeri kreatinin, üre, GIII, TP'de k ve albümin GIII'de, MDA ve GSH ve GV'de SOD olarak kaydetmiştir (Tablo 5). Vit'e göre toplam nefro-koruma yüzdesi. E artı Se tedavisi, Tablo 5'te gösterildiği gibi, KAE ile tedavi edilen grupta (GV, yüzde 97.62), ardından KEE (GIV, yüzde 83.27) ve ardından KEE artı KAE'de (GVI, yüzde 78.85) maksimum seviyeler kaydetti.

Tartışma

üstün antioksidan ajanlar. Polifenolik maddelerin insanlarda anti-kanserojen ve anti-mutajenik özelliklere sahip olduğu düşünülmektedir [40]. A. hierophantic'teki değerli bir TPC içeriği, Mohamed ve diğerleri tarafından elde edilenden biraz daha yüksekti. [21] A. hierochuntica bitkisinde 51.97 mg GAE g-1 olarak ve AlGamdi ve ark. [41], A. hierofhantic tohumlarında 4 mmol L-1 GAE bulmuştur. Son zamanlarda, Zin ve ark. [42] biyoaktif bir bileşik olarak A. hierophantic'te tanenlerin varlığını belirtmiş ve derinlemesine araştırılması gereken biyoaktivitesini tavsiye etmiştir. Toplam karotenoidlerin bir parçası olarak -karoten içeriği, Mohamed ve diğerleri tarafından belirtildiği gibi 2.27 µg g-1 idi. [21] ve hatta mevcut sonuçlar toplam karotenoidleri 3.51 µg g−1 olarak sundu. Flavonoid ve flavonol içeriklerinde benzer bulgular Mohamed ve ark. [21]. Fenolik bileşikler gibi biyolojik olarak aktif bileşenler, aktif serbest radikallere hidrojen vererek lipid oksidasyon zincir reaksiyonlarının parçalanması olarak antioksidan aktivite gösterirler. Fenoliklerin radikalleri inhibe etmedeki bu süpürücü potansiyeli, fenolik hidroksil grupları tarafından açıklanmıştır [8,10,22]. Bu fenolik asit, hidrojen peroksit, hidroksil radikali ve süperoksit anyonu dahil olmak üzere etkili bir antioksidan bileşen olarak tanımlanmıştır [43]. A. hiyerofantik metal şelatlama aktivitesi, "Fe2 plus –ferrozine" kompleks yapısına müdahale etmede yetkin görünmektedir, bu da "ferrozinden" önce "demirli" iyonları yakalama kabiliyetini ortaya koymaktadır. Fenolik bileşiklerin içeriklerindeki artış arasındaki pozitif ilişki, antioksidan kapasiteleri ile doğrudan belirtilmektedir [42]. Andjelković et al. [44], metallerle kompleksler oluşturmak için çok sayıda fenolik asidin aktivitesini belirledi. Farklı ölçüm yaklaşımlarını kullanan değerli TPC ve ilgili antioksidan aktiviteler, yiyecek veya içecek uygulamaları için tıbbi bir bitki olarak A. hierochuntica'nın biyoaktivitesini net bir şekilde verir ve onaylar. Fenolik bileşikler gibi biyolojik olarak aktif bileşenler, aktif serbest radikallere hidrojen vererek lipid oksidasyon zincir reaksiyonlarının parçalanması olarak antioksidan aktivite gösterir [45]. Radikalleri inhibe etmek için fenoliklerin bu süpürücü potansiyeli açıklığa kavuşturulmuştur.

hidrojen peroksit, hidroksil radikali ve süperoksit anyonu dahil olmak üzere etkili antioksidan bileşen [43,45,47]. A. hierophantic'in KAE'sinde HPLC ile tanımlanan ve nicelenen bileşikler, KEE'de tanımlanan bileşiklerin sayısından daha yüksekti, ancak A. hierophantic'in KEE'sinde tanımlanan bileşikler daha yüksek miktarlarda sunuldu [22]. Sonuçlar, tüketen A. hierophantic'in hem polar hem de polar olmayan formlarda birçok bileşen sunabileceğini yansıtıyor. Bu sonuçlar benzer şekilde AlGamdi ve ark. [41] A.hirrochuntica tohumlarındaki 20 polifenolik bileşiği tanımladıkları ve miktarlarını belirledikleri gibi. Ekstrakt klorojenik asitler ve hidroksibenzoik asitler içeriyordu, ancak ana bileşenler flavon C-glikozitler, C-glikozitler, O-glikozitler ve ağırlıklı olarak luteolin konjugatları olarak meydana gelen O-glikozit-C-glikozitlerdi. Ek olarak, A. hierofhantic özündeki 20 bileşiğin 14'ü, bir HPLC-on-line antioksidan algılama sistemi kullanılarak antioksidan aktivite sergiledi [41]. İlginç bir şekilde, mevcut veriler, A. hierophantic'in fitokimyasal bileşikler açısından zengin olduğunu ve daha önce tohumlarda nadiren vurgulandığı gibi, potansiyel sağlık yararları olan iyi bir doğal antioksidan kaynağı olduğunu doğruladı [41]. Bu nedenle, bütün bitki tozundan hazırlanan çay, geleneksel tüketim şeklidir; veriler, AlGamdi et al. [41] Çok sayıda çalışmada, bitki özlerinin/ilaçlarının nefro-koruyucu etkisini test etmek için bir model sistem olarak CCl4-'nin neden olduğu nefrotoksisite kullanılmıştır [48,49]. Mevcut çalışma, A. hierofhantik ekstraktlarının CCl4- ile indüklenen böbrek hasarı üzerindeki etkisine ve ayrıca sıçanlarda nefro-koruma ve antioksidan potansiyeline baktı. Mevcut çalışmada, CCl4 tedavisi (GII) grubu, GI ile karşılaştırıldığında kreatinin, üre ve k düzeylerini önemli ölçüde artırdı ve toplam protein ve albümin konsantrasyonlarını azalttı. Bunun nedeni, CCl4 intoksikasyonunun karaciğer, böbrekler, akciğerler, beyin ve kan dahil olmak üzere birçok organda serbest radikal üretiminin ana kaynağı olması olabilir [50]. Sıçanlara CCl4 enjeksiyonunu takiben, böbreklerde CCl4'e yüksek bir afiniteye sahip olduğundan ve ağırlıklı olarak kortekste sitokrom P450 içerdiğinden, CCl4 konsantrasyonunun böbreklerde karaciğere göre daha eşit dağıldığı da gözlemlenmiştir [51]. CCl4'ten en yaygın serbest radikaller, triklorometil radikali (CCl3• ) ve triklorometil peroksil radikalidir (CCl3O2• ) [52]. Bu radikaller hücre içi bir proteine, hücre zarı lipidlerine ve DNA'ya bağlanarak protein denatürasyonuna, lipid peroksidasyonuna ve hücre ölümüne yol açan oksidatif DNA hasarına neden olur [53]. Buna karşılık, CCl4-sıçanları onunla tedavi etmek. E artı Se (GIII) ve A. hierofhantik özler (GVI: VI), kreatinin ve üre seviyelerindeki bu artışların yanı sıra artan serum albümini ve toplam proteinlerin GI seviyelerine çok yakın olmasını etkili bir şekilde azalttı. Bunun nedeni, A. hierophantic ekstraktlarının antioksidan özellikleri ve zengin fenolik içeriği ile antioksidan kapasitesi ve şelatlama aktivitesi olabilir. E artı Se, serbest radikalleri temizleyerek böbrek hasarını engeller. Fitokimyasallar, en yüksek düzeyde etkili serbest radikal süpürücülerdir ve bitkilerden elde edilen üstün antioksidan ajanlar olarak kabul edilirler [54]. KEE'de tanımlanan dokuz fenolik bileşik arasında en bol bulunan fenolik bileşikler, sinapik asit gibi hidroksisinamik asitler iken, siringik asit, KAE'de tanımlanan 21 fenolik asit arasında en yüksek fenolik asitti. HPLC analizi kullanılarak KEE'de altı ve KAE'de iki flflavonoid tanımlanmıştır [55]. Ayrıca, bir antioksidan olarak. E'nin dokuları reaktif oksijen metabolitlerinin neden olduğu zararlardan koruduğuna inanılmaktadır. Selenyum ayrıca, insan sağlığı için temel bir eser mineral olarak kabul edilir ve hücreleri serbest radikallerin zararlı etkilerinden korur [22]. Mevcut çalışmada, CCl4 uygulaması, GI'ye göre böbrek homojenatlarında GSH ve SOD'yi belirgin şekilde azalttı ve MDA seviyelerini arttırdı. Vit. E plus Se ve A. hierofhantic özleri, SOD ve GSH gibi antioksidan ajanların değişen aktivitesini geri yükleyerek CCl4'ün çeşitli etkilerini iyileştirdi ve yakın zamanda bildirildiği gibi MDA üretme sürecini devre dışı bırakabilir [15,21,40,41] . GSH, tüm memeli hücrelerinde bulunan enzimatik olmayan bir antioksidandır. Oksitlenmiş formu GSSG ile GSH, oksidatif strese karşı çok sayıda detoksifiye edici enzim (GPx, GST ve diğerleri) için bir kofaktör görevi görür ve hücresel redoks dengesini korur [47]. Bu bulgu Khan ve Siddique [56] ve Makni ve ark. [57], CCl4'ün sıçan böbreklerinde GSH seviyesini düşürdüğünü bildirmiştir. Onunla tedavi. E plus Se ve A. hierofhantic ekstreleri, CCl4 tarafından tetiklenen GSH seviyesindeki azalmaya karşı koruma gösterdi. Aynı bağlamda SOD, iki molekül süperoksit anyonunun (*O2) hidrojen peroksit (H2O2) ve moleküler oksijene (O2) dismutasyonunu katalize ederek potansiyel olarak zararlı süperoksit anyonunu daha az tehlikeli hale getirir [58,59]. CCl4 intoksikasyonu, renal SOD'u tüketerek gen ekspresyon seviyesini değiştirir [60]. SOD aktivitesinde bir azalma, hücresel hasarın hassas bir indeksidir. Test edilen A. hierophantic özlerimiz, SOD seviyesini azaltarak renal toksisiteyi iyileştirdi. Asidifikasyon reaksiyonlarının konsantrasyonunu azaltmak için çeşitli enzimatik işlemlere katılır [61]. MDA, lipid peroksidasyonunun ilk ürünüdür ve oksidatif stresin önemli belirteçlerinden biridir. A. hierophantic özleri, CCl4- ile tedavi edilen sıçan böbreklerinde MDA seviyelerindeki artışı azalttı ve toplam antioksidan gücünü geri kazandırdı. Bu koruyucu etkiler, A. hierophantic ekstraktlarının güçlü antioksidatif aktivitesine bağlı olabilir [15,21,40,41]. Bu sonuçlar ayrıca, A. hierofhantik özütlerinin CCl4-'e maruz kalan sıçan böbreklerinde lipid peroksit düzeylerini azaltarak oksidatif stresi azaltabileceğini ve böbrek hasarını önleyebileceğini düşündürmektedir. Bu sonuçlar, Zn'nin CCl4-indüklenen akut nefrotoksisite üzerindeki antioksidatif aktivitelerinin sonuçlarıyla uyumluydu [62,63]. A.hirrochuntica özleri, sırasıyla GIV, V ve IV'te böbrek fonksiyon testleri (kreatinin, üre, K, TP ve albümin) ve böbrek homojenat antioksidan aktiviteleri (GSH, SOD, MDA) ile ilgili değerli nefroproteksiyon kapasitesi sundu. Vit'e göre toplam nefro-koruma yüzdesi. E artı Se tedavisi, azalan sırada sırasıyla KAE ile tedavi edilen grupta (GV, yüzde 97.62), ardından KEE (GIV, yüzde 83.27) ve ardından KEE artı KAE'de (GVI, yüzde 78.85) maksimum seviyeler kaydetti. Bunun nedeni, antioksidan kapasite ile ilişkisi olan A.hirrochuntica ekstraktlarının fenolik ve antioksidan içeriklerinin miktar ve kalitesindeki farklılıklar olabilir [15,19,22,40,42]. Böbreklerdeki histopatolojik bulgular, araştırılan deney gruplarının biyokimyasal tahminleri ile uyumludur. CCl4 uygulaması (GII) böbreklerde vazokonjesyonlu glomerüler ve tübüler lezyona neden oldu. Doğukan et al. [64], uzun süreli CCl4 tedavisine yanıt olarak sıçan böbrek dokusunda benzer bir histolojik patern keşfetti. Ayrıca histolojik değişikliklerin, böbrek fonksiyon bozukluğuna yol açan nefronların fonksiyonel aşırı yüklenmesinden [65] ve/veya CCl4 metabolizması yoluyla serbest radikal oluşumunun bir sonucu olarak tetiklenen dokunun yıkımından [56,66] kaynaklandığı düşünülmektedir. . Etkisi. E plus Se ve A. hierophantic özleri, CCl4'ün böbreklerin yıkım etkilerini onarmak ve eski haline getirmek için dikkate değerdi. Bu ondan dolayı olabilir. E artı Se (güçlü bir antioksidan olarak), CCl4 [67] tarafından indüklenen ROS üzerinde etkilidir. A. hierofantik özler, A.hirrochuntica özlerinde bulunan fenolik bileşiklerin antioksidan rolü ve serbest radikal süpürücü özellikleri nedeniyle CCl4-indüklenen akut nefrotoksisiteyi baskılar [22]. Bulgularımız, çeşitli bitki türevlerinin CCl4 suistimallerini ortadan kaldırarak ve normale döndürerek farmakolojik etkileri olduğunu gösteren diğer araştırmacıların bulgularıyla tutarlıdır [6].

Sonuçlar

Bu çalışmanın sonuçları, A. hierophant bitkisinin, fitokimyasal içeriği ile doğrudan ilişkili olan üstün bir antioksidan kapasiteye sahip polar ve polar olmayan fenolik bileşikler açısından zengin olduğunu açıkça göstermiştir. A. hierophantic (özellikle sulu ekstrakt) sıçanları CCl4- ile indüklenen oksidatif strese ve akut böbrek hasarına karşı korur; bu, MDA seviyelerinde önemli bir düşüş ve artan GSH ve SOD aktivitesi ve ayrıca biyokimyasal ve histolojik tedavinin kesilmesiyle kanıtlanmıştır. böbreklerde değişiklikler. Koruyucu etkinlik, A. hierophant özütlerinde bulunan fenolik bileşiklerin antioksidan ve serbest radikal süpürücü özelliklerinden kaynaklanabilir. Bu özellikler, bitkinin bir bitkisel ilaç olarak tıbbi etkinliğini açıklamaya yardımcı olur. A. hierophantic'teki aktif ilkeleri tam olarak tanımlamak için daha fazla araştırmaya ihtiyaç vardır ve bu çalışma, mekanizmaların tanımlanması ve güvenli dozlar için yeterli veri ve öneriler sunmak için daha kapsamlı ilgili araştırmaları teşvik etmeyi amaçlamaktadır.

Referanslar

1. İstatistikler, Amerika Birleşik Devletleri'nde KD Kronik Böbrek Hastalığı. 2021. Çevrimiçi olarak erişilebilir: https://www.cdc.gov/kidneydisease/pdf/ Chronic-Kidney-Disease-in-the-US-2021-h.pdf (20 Temmuz 2021'de erişildi).
2. Ku, E.; Glidden, DV; Johansen, KL; Sarnak, M.; Tighiouart, H.; Grimes, B.; Hsu, CY Kronik böbrek hastalığı sırasında sıkı kan basıncı kontrolü ile son dönem böbrek hastalığının başlangıcından sonra daha düşük mortalite arasındaki ilişki. Böbrek İnt. 2015, 87, 1055-1060. [CrossRef] [PubMed]
3. Tumlin, JA; Madaio, MP; Hennigar, R. İdiyopatik IgA nefropatisi: Patogenez, histopatoloji ve tedavi seçenekleri. Klinik. J. Am. Soc. Nefrol. 2007, 2, 1054-1061. [CrossRef] [PubMed]
4. Olah, G.; Reddy, Başkan Yardımcısı; Prakash, GS; Reaksiyonlar, FC Kirk-Othmer kimya teknolojisi ansiklopedisi. Kontakt Lensler 1978, 720–742.
5. Öztürk, F.; Uçar, M.; Öztürk, IC; Vardi, N.; Batcioglu, K. Karbon tetraklorür kaynaklı nefrotoksisite ve betain'in Sprague-Dawley sıçanlarında koruyucu etkisi. Üroloji 2003, 62, 353-356. [Çapraz Referans]
6. Ögetürk, M.; Kuş, İ.; Çolakoğlu, N.; Zararsız, İ.; İlhan, N.; Sarsilmaz, M. Kafeik asit fenetil ester, sıçanlarda böbrekleri karbon tetraklorür toksisitesine karşı korur. J. Etnofarmakol. 2005, 97, 273-280. [Çapraz Referans]
7. Slater, Doku Yaralanmalarında TF Serbest Radikal Mekanizmalar. Hücre Fonksiyonu ve Hastalıklarında; Cañedo, LE, Todd, LE, Packer, L., Jaz, J., Eds.; Springer: Boston, MA, ABD, 1988; s. 209-218. [Çapraz Referans]
8. Han, MR; Rizvi, W.; Khan, GN; Khan, RA; Shaheen, S. Sıçanlarda karbon tetraklorür kaynaklı nefrotoksisite: Digera muricata'nın koruyucu rolü. J. Etnofarmakol. 2009, 122, 91-99. [Çapraz Referans]
9. Afşar, T.; Han, MR; Razak, S.; Ullah, S.; Mirza, B. Acacia hydaspica R. Parker'ın ateş düşürücü, iltihap önleyici ve analjezik aktivitesi ve fitokimyasal analizi. BMC Tamamlayıcı. Alternatif. Med. 2015, 15, 1–12. [Çapraz Referans]
10. Al-Kabba, MM; El-Mowafy, MA; Althwab, SA; Alfheeaid, HA; Aljutaly, T.; Barakat, H. Fenolik profil, antioksidan aktivite ve Chenopodium quinoa filizlerinin sıçanlarda CCl4 - ile indüklenen oksidatif strese karşı iyileştirici etkinliği. Besinler 2020, 12, 2904. [CrossRef]