TNBC Bölüm 2'de İmmünoterapiyi Artırmak İçin Aptamer Tabanlı Stratejiler

Ek olarak aptamerler, in vivo uygulamaları için gerekli olan hedefleme etkinliğini, farmakokinetik profili ve biyolojik ortamlarda stabiliteyi geliştiren çeşitli kimyasal modifikasyonları tolere eder [47]. Başka bir yerde kapsamlı bir şekilde gözden geçirildiği gibi [27,48], aptamerlere SELEX sırasında veya SELEX sonrası nükleazlara karşı dirençlerini artırmak için uygulanan en çok kullanılan modifikasyonlar şunları içerir (Şekil 3): 2 0 -OH gruplarının değiştirilmesi floro, metoksi, tiol veya amino grupları ile riboz; oligonükleotitlerin uçlarının kaplanması veya siklizasyonu; fosfodiester omurgasının bir fosforotiyoat omurga ile ikame edilmesi; ve kilitli nükleik asitlerin eklenmesi. Ayrıca, doğal nükleik asitlerin enantiyomerleri oldukları için nükleazlar tarafından tanınmayan spiegelmerler adı verilen L-aptamerler üretilebilir. Polietilen glikol (PEG) veya kolesterol gibi çok hacimli molekülleri konjuge ederek küçük boyutlu aptamerlerin hızlı renal filtrasyonunun üstesinden gelmek için kimyasal modifikasyonlar da uygulanır, böylece hedefe erişilebilirliği etkilemeden dolaşım sürelerini arttırır. Kombinasyon terapisinde aptamerleri ikincil terapötiklerle kimyasal olarak konjuge etmek için karmaşık yaklaşımlar da geliştirilmiştir ve ilginç bir şekilde, işlevselliklerini genişletmek ve nükleik asitlerdeki kimyasal çeşitlilik eksikliğinin üstesinden gelmek için aptamer molekülüne egzotik kimyasal gruplar eklemek için yenilikçi stratejiler keşfedilmiştir [49 ].

Nükleazlar, RNA veya DNA'nın hidroliz reaksiyonunu hızlandırabilen ve çok çeşitli biyolojik fonksiyonlara sahip enzimleri ifade eder. Bağışıklık sisteminde, nükleazlar viral enfeksiyonları tanımak ve temizlemek için önemli araçlardır. Virüs bir hücreyi enfekte ettikten sonra, hücreye RNA veya DNA salar. Bu nükleik asit molekülleri, enfekte olmuş hücrenin nükleazı tarafından tanınacak ve hidrolize edilecek, böylece virüs replikasyonu ve enfeksiyonun yayılması önlenecektir.

Ek olarak, nükleazlar ayrıca doğuştan gelen ve kazanılmış bağışıklık tepkilerinin düzenlenmesinde yer alır. Nükleazlar, RNA veya DNA'nın bozulmasını ve stabilitesini düzenleyerek gen ekspresyon seviyelerini düzenleyebilir. Bağışıklık hücrelerinde nükleazlar, apoptoz, antijen sunumu ve T-hücresi farklılaşması gibi bağışıklık tepkilerini düzenler.

Genel olarak, nükleazlar, bağışıklık tepkisinde, viral enfeksiyonu tanımada, gen ekspresyonunu modüle etmede ve bağışıklık tepkisini modüle etmede önemli bir rol oynar. Bu nedenle, bağışıklık üzerindeki etki için birden fazla mekanizma mevcuttur. Bu açıdan bağışıklığı geliştirmeye dikkat etmek gerekiyor. Cistanche bağışıklığı artırır. Cistanche, C vitamini, C vitamini, karotenoidler vb. gibi çeşitli antioksidan maddeler açısından zengindir. Bu bileşenler serbest radikalleri ortadan kaldırabilir, oksidatif stresi azaltabilir ve bağışıklığı artırabilir. bağışıklık sistemi direnci.

Tıklayın cistanche tubulosa faydaları

Aptamerlerin bağlanma afinitesini, hedef seçiciliğini ve in vivo biyoyararlanımını iyileştirmeye yönelik başka bir strateji, düşük hızlı modifiye aptamerlerin (SOMAmerler) üretilmesiyle temsil edilir. Bunlar, yalnızca hedef proteinle etkileşimlere katılamayan, aynı zamanda erişilebilen hedeflerin repertuarını büyük ölçüde artıran yeni ikincil ve üçüncül yapısal motifler oluşturan parçalarla üridin 5-pozisyonunda işlevselleştirilmiş kimyasal olarak değiştirilmiş nükleotitleri taşıyan DNA aptamerleridir. aptamerlere [50].

Bugüne kadar, vasküler endotelyal büyüme faktörünün 165 izoformunu hedef alan, kimyasal olarak büyük ölçüde değiştirilmiş bir aptamer (Macugen olarak adlandırılır), yaşa bağlı maküler dejenerasyonun tedavisi için onaylanmıştır ve on bir aptamer, farklı insan hastalıklarının tedavisi için klinik deneylerde bulunmaktadır. [51,52]. Bunlar arasında, anti-nükleolin AS1411 aptamer ve anti-stromal hücre türevli faktör 1 NOX-A12 aptamer, kanser tedavisi için faz II klinik deneylerini çoktan tamamladı. Ayrıca, 68 Ga ile etiketlenmiş anti-protein tirozin kinaz-7 Sgc8 DNA aptamer, kolorektal hastalarda teşhis değerini değerlendirmek için erken faz I'dedir (ClinicalTrials.gov Tanımlayıcı: NCT03385148).

3. TNBC Tedavisi için Aptamer Tabanlı Bağışıklık Stratejileri

Kanser hücrelerindeki genetik ve epigenetik mutasyonlar, IS'nin kendinden olmayan olarak tanıdığı ve bu nedenle mutasyona uğramış hücreleri yok ettiği tümörle ilişkili birçok antijenin varlığına yol açar. Bununla birlikte, kanser hücrelerinin, bağışıklık tahribatından kaçmak için çeşitli mekanizmalar geliştirdiği ve çevredeki mikro ortamı kendi lehlerine değiştirerek tümör büyümesi, istilası ve metastazı ile sonuçlandığı iyi bilinmektedir (53 55).

Kanser immünoterapisinin amacı, tümörlerin bağışıklık tepkisinden kaçtığı ve baskıladığı mekanizmaların üstesinden gelerek IS'nin kanser hücrelerini tespit etme ve yok etme yeteneğini geliştirmek veya eski haline getirmektir. Son birkaç yılda Is'ı TNBC'de bir antitümör durumuna döndürmek için çarpıcı aptamer tabanlı stratejiler geliştirilmiştir. Aşağıda tartışıldığı gibi, artan kanıtlar aptamerin bağışıklık hücrelerinin sitotoksik aktivitesini güçlendirme, bağışıklık kontrol noktalarını bloke etme veya bağışıklık hücrelerini kanser hücrelerine toplama yeteneğini göstermektedir (Şekil 4).

3.1. Tümör Sızan Lenfositler

TNBC mikroçevresindeki başlıca immün hücre tipleri TIL'lerdir ve bunların varlığı, erken evre tedavi edilmemiş tümörleri olan hastalarda daha iyi sağkalım sonuçları ile önemli ölçüde ilişkilidir [56]. TIL'ler, tümör yıkımını (CD8 artı sitotoksik T hücreleri) ve bir antitümör yanıtı (CD4 artı T-yardımcı 1) destekleyebilen veya antitümör bağışıklık yanıtlarını sınırlayabilen (CD4 artı T-yardımcı 2, Forkhead box P3 dahil) tüm CD3 artı T hücrelerini içerir ( FOXP3), CD4 artı düzenleyici T hücreleri).

Son zamanlarda, Zhao ve ark. kanser immünoterapisinde geliştirilmiş antitümör yanıtı için bir "süper-sitotoksik T lenfositi" oluşturmak üzere aptamerlerin hedefleme kabiliyetinden yararlanan orijinal bir strateji önerdi [59]. CD8 artı T hücrelerinin lizozomlarında bulunan iki antitümör toksin olan perforin ve granzim B ile yüklenen ve lizozom üzerindeki CD63 reseptörünü hedefleyen bir aptamer ile işlevselleştirilen asitle parçalanabilen metal-organik bazlı ve lizozom hedefli nanopartiküller ürettiler. Ca2 plus, biyouyumluluğunu ve stabilitesini iyileştirmek ve toksin aktivitesini güçlendirmek için nano platformda biriktirildi. Yazarlar, lizozomların CD8 artı T hücrelerinin sitotoksik içeriğini zenginleştirmek için böyle bir aptamer kılavuzlu platformu (LYS-NP'ler olarak adlandırılır) kullanmayı başardılar.

TNBC 4T1 fare modelinde test edildiğinde, T hücreleri, işlenmiş 4T{3}}spesifik antijenlerle önceden aktive edildi ve LYS-NP'ler tarafından yeniden birleştirildi ve lizozomal içeriği immünolojik sinapslara salarak güçlü bir antitümör reaksiyonunu tetikledi (Şekil 4). Önerilen aptamer bazlı immünoterapi, düşük T hücresi aktivasyonunu indükleyen ve sitotoksik proteinlerin sentezini ve salınımını azaltan, esas olarak güçlü immünosüpresif sinyallerle temsil edilen katı tümörler için T hücresi immünoterapisindeki önemli zorlukların üstesinden gelmek için büyük bir potansiyele sahiptir [60].

3.2. Bağışıklık Kontrol Noktası İfade Eden Hücreler

Alatrash'ın grubu, TNBC hastalarında PD-L1 geninin ekspresyonunun, TNBC olmayan hastalardakinden önemli ölçüde daha yüksek olduğunu bildirdi.19. Başlıca tümör hücresi ile ilişkili immün kontrol noktalarından biri olan PD-L1, çeşitli immün hücrelerde eksprese edilir. makrofajlar, bazı aktive edilmiş T hücreleri, B hücreleri ve BC hücreleri dahil olmak üzere birçok katı tümör hücresinde. Bunun reseptörü transmembran protein PD-1, TIL'lerin, NK hücrelerinin, makrofajların, dendritik hücreler ve monositler [61].PD-L1 ve PD-1 arasındaki bağlanma, CD8 artı TIL'lerin inhibisyonuna neden olur, onları anerjik bir forma dönüştürür ve sonuç olarak kanser bağışıklığından kaçar.

Ayrıca, PD-1/PD-L1 ekseni, tümör hücreleri içinde PI3K/AKT, MAPK ve JAK/STAT [62] gibi çeşitli proliferatif ve hayatta kalma sinyal yollarını ve en önemlisi TNBC'de aktivasyon modüle eder. Bu eksenin farklılaşması, oldukça agresif ve metastatik tümörlerle ilişkili bir fenotip olan epitelyal-mezenkimal geçişi (EMT) teşvik eder [63].

TNBC'de farklı aptamer tabanlı yaklaşımlar şu anda PD-1/PD-L1 etkilerini geri döndürmek için araştırılmaktadır (Şekil 5).

Şekil 5. TNBC'de PD-1/PD-L1 eksenini bloke etmek için aptamer tabanlı stratejilerin şematik gösterimi. (a) anti-PD-L1 siRNA yüklü TNBC aptamerle dekore edilmiş nanopartiküller; (b) hem doksorubisin hem de anti-IDO1 siRNA ile yüklenmiş anti-CD44 ve antiPD-L1 aptamerle dekore edilmiş lipozomlar; (c) paklitaksele konjüge edilmiş antiPD-L1 aptamer; (d) anti-PD-L1 veya anti-CTLA-4 mAb'lere kovalent olarak bağlı anti-EGFR aptamer (ayrıntılar için metne bakın). BioRender.com ile oluşturuldu (2 Mart 2023'te erişildi).

Bu bağlamda, grubumuz ilk kez TNBC'de Gint4.T adlı bir anti-platelet kaynaklı büyüme faktörü reseptörü (PDGFR ) aptamer ile bir anti-PD-L1 mAb kombinasyonunu araştırdı [64]. Gint4.T, TNBC hücreleri [65] ve TNBC TME bileşenleri dahil olmak üzere farklı insan kanser hücrelerinin yüzeyinde ifade edilen PDGFR'ye bağlanan ve bu hücreleri inhibe eden, nükleaza dirençli bir 20 -floropirimidinler (20F-Py) RNA aptameridir. mezenkimal kök hücreler [66] ve T hücreleri [64]. İlginç bir şekilde, TNBC 4T1 syngeneic farelere intravenöz olarak enjekte edildiğinde, aptamer hem tümör hücreleri hem de TME bileşenleri üzerinde hareket ederek antiPD-L1 mAb'lerin tümör büyümesini ve akciğer metastaz oluşumunu inhibe etme etkisini güçlü bir şekilde güçlendirir [64].

Ayrıca, PDGFR ve PD-L1'in kombine blokajı, FOXP3 artı Treg hücrelerinin tükenmesine ve tekli monoterapilerden daha tutarlı bir şekilde CD8 artı T hücreleri ve granzim B artışına neden olur. Bu sonuçlar, Gint4.T aptamerine kovalent olarak bağlı bir anti-PD-L1 antikorundan oluşan bispesifik bir immünokonjugat oluşturmak için temel oluşturur, böylece kombinasyon terapisinin etkinliğini optimize eder. Bir anti-epidermal büyüme faktörü reseptörü (EGFR) 20F-Py RNA aptamerinin anti-PD-L1 (10_12) [67] veya anti-CTLA-4 (ipilimumab) immünomodülatörlerine kovalent olarak bağlanmasıyla elde edilen bispesifik yapılar [68] mAb'ler Passariello ve ark. ve her iki ebeveyn parçasının biyolojik fonksiyonlarını koruduğu, böylece BC hücrelerine karşı güçlü bir sitotoksik aktivite uyguladığı kanıtlanmıştır.

PD-L1 hedeflemesi için anti-PD-L1 mAb'lere alternatif bir strateji, zaman ve maliyet gibi mAb'lere dayalı tedavilerin bazı yinelenen engellerinin üstesinden gelme potansiyeline sahip olan gen susturma yoluyla PD-L1'in baskılanmasıyla temsil edilir. tüketen üretim, immünojenisite potansiyeli ve düşük stabilite. Ayrıca, bu strateji, bunun yerine antikorlar tarafından erişilemeyen sitoplazmik PD-L1'in [69] içsel pro-tümörijenik rolünün bloke edilmesini sağlar. Kanser hücresini hedef alan aptamerleri uçlarında fonksiyonel gruplarla sentezleme olasılığı, nano vektörlere konjugasyona izin vererek, özellikle tümöre, nano vektöre yüklenen küçük girişim yapan RNA (siRNA) yüklerini iletmek için çarpıcı bir yaklaşımdır. , böylece siRNA'ların nükleazlara karşı savunmasızlığının ve hedef hücrelere girememelerinin üstesinden gelinir. Son zamanlarda, poli(laktik-ko-glikolik)-blok-PEG (PLGAb-PEG) bazlı nanopartiküller, anti-PD-L1 siRNA ile yüklendi ve spesifik olarak TNBC hücrelerine bağlanabilen ve içselleştirilebilen bir 20F-Py RNA aptamer ile dekore edildi. [70,71].

Elde edilen aptamer konjuge nano vektörler, TNBC hücreleri üzerinde 90 dakikalık inkübasyonun ardından, siRNA'yı hedef hücrelere verimli bir şekilde iletti ve bu, PD-L1 ekspresyonunun neredeyse tamamen baskılanmasına neden olmaya yetkindi [72]. Özellikle, aptamer ile dekore edilmiş nano-taşıyıcılar, farklı ligandları NP'lerin yüzeyine bağlama, böylece hedeflemenin özgüllüğünü artırma ve NP'lerde çoklu terapötikleri kapsülleme, böylece etkili kombine tedavilere izin verme imkanı sunar. Örneğin, TNBC aptamerleri ile donattığımız PLGA polimerik nanopartiküller tarafından sisplatin [40] ve siPD-L1'in [72] birlikte uygulanması, yalnızca toksik yan etkilerde bir azalmayı teşvik etmekle kalmaz, aynı zamanda sisplatinin bildirilen olumsuz etkisini de ortadan kaldırır. PD-L1 artı immün kaçamak TNBC hücrelerinin zenginleştirilmesi üzerine uygulama [73].

Bu bağlamda, Kim ve ark. TNBC'de sinerjistik kemoimmünoterapi için lipozomların dış yüzeyinde konjuge iki DNA aptamerine ve nano vektörlerin içinde iki farklı terapötik maddeye sahip çok işlevli bir nanosistem hazırladı [74]. Spesifik olarak, TNBC hücrelerini hedeflemek için, önceden seçilmiş anti-CD44 [75] ve anti-PD-L1 [76] DNA aptamerlerini kullandılar, her biri tiol-modifiye edilmiş ve tiyol-maleimid tarafından PEGillenmiş-DSPE misellerinin maleimid gruplarına kovalent olarak konjüge edilmiş kimya. Nanoboyutlu lipozomlar, hem doksorubisin hem de siRNA ile, immünosupresif bir TME'yi destekleyen ve doksorubisin tedavisi ile yukarı regüle edilen bir protein olan IDO1'in ifadesine müdahale ederek yüklenmiştir. TNBC 4T1 tümör-ksenogreft farelere intravenöz olarak enjekte edildiğinde, nano vektörler, kanser hücresi hedefli immünojenik hücre ölümü indüksiyonunu ve immünsupresyonun tersine çevrilmesini sinerjistik olarak birleştirerek tümör büyümesini güçlü bir şekilde azalttı ve metastaz oluşumunu inhibe etti [74].

Son zamanlarda, farklı PD-L1 aptamerleri üretildi ve tek başına antagonistler, bispesifik konjugatlar ve anti-PD-L1 antikorlarına benzer şekilde akciğer, karaciğer ve kolon tümörü fare modellerinde terapötiklerin dağıtım ajanları olarak test edildi. PD-L1'i bloke ederek PD-1/PD-L1 ekseni (Tablo 2). XQ-P3 adlı bir aptamer, karşı seçim için PD-L1 nakavt hücreleri kullanılarak MDA-MB-231 hücrelerini aşırı ifade eden PD-L1 üzerinde pozitif seçimle üretilmiştir [77]. Henüz in vivo olarak test edilmemiş olsa bile, TNBC MDA-MB-231 hücrelerinin ve bağışıklık Jurkat hücrelerinin ortak kültürlerinde PD-1 ile etkileşimi bloke ederek ve T hücresi işlevini eski haline getirerek oldukça etkili görünmektedir. Ayrıca, bir XP-Q3 aptamer-paklitaksel konjugatı, PD-L1'de aşırı eksprese edilmiş TNBC hücrelerinde proliferasyona karşı etkililik göstermiştir [77].

3.3. makrofajlar

Tümörle ilişkili makrofajlar (TAM'ler), geniş bir kanser yelpazesinin TME'sinde en bol bulunan bağışıklık hücreleri arasındadır ve antitümör bağışıklık tepkilerini teşvik etmek veya baskılamak için hareket edebilir [86,87]. Aslında, yüksek derecedeki plastisiteleri nedeniyle, çeşitli mikro-çevresel uyaranlara yanıt olarak iki farklı fenotipe geçerler: klasik olarak aktive edilmiş, proinflamatuar M1 ve alternatif olarak aktive edilmiş anti-inflamatuar M2; farklı sitokin ve kemokin üretimi. M1 makrofajları tipik olarak antitümör fonksiyonları uygularken, M2 makrofajları tümörün ilerlemesini destekler. TNBC dahil çoğu agresif tümörde, TAM'ler M2-benzeri bir fenotipe benzeme eğilimindedir ve bu, geleneksel terapilerin ve bağışıklık kontrol noktası inhibisyon terapilerinin başarısızlığından büyük ölçüde sorumludur. Bu nedenle, birkaç yenilikçi immünoterapötik yaklaşım, M2 makrofajlarını hedeflemeyi ve tüketmeyi veya onları istenen fenotipe göre yeniden programlamayı amaçlar [88,89].

İnsan M2-benzeri makrofajları hedefleyen aptamerleri seçmek için, ilk hücre-SELEX yaklaşımı birkaç donörün monositlerinden türetilen ve M2-benzeri fenotipe polarize edilmiş insan makrofajlarına uygulandı [90]. Seçimden gelen en iyi M2-hedefleme DNA aptamerinin, hedef hücreleri farklılaşmamış M0-benzeri ve monositlerden ayırt edememesine ve ayrıca M1-likesine daha düşük bir ölçüde bağlanmasına rağmen makrofajlar, hızla CD14 artı monositlere içselleştirildi, böylece monosit hedefli ilaç verme uygulamaları için potansiyele sahip oldu.

Aptamerlerin katı tümör immünoterapisi için bir başka çarpıcı uygulaması, tümör hücrelerini kanser hücresini hedef alan aptamerlerle tasarlayarak M1 makrofaj özgüllüğünü güçlendirmesidir. Hastalara CAR-T hücreleri aşılayan kimerik antijen reseptörü T (CAR-T) hücre immünoterapisi, bazı lösemiler ve lenfomaların tedavisinde büyük etkinlik göstermiştir, ancak tümörlere nüfuz etmenin zorluğu nedeniyle katı tümörlerde yalnızca orta düzeyde sonuçlar vermektedir [91]. . Makrofajların tümör dokularına nüfuz etme konusundaki içsel kapasiteleri nedeniyle, son zamanlarda, tümör hücrelerini hedeflemek ve hedeflenen bir antitümör yanıtı başlatmak için kimerik CAR'ları (CAR-M) eksprese etmeleri için genetik olarak mühendislik yapan çeşitli yaklaşımlar önerilmiştir [92]. Tasarlanmış proteinlerin düşük tekrar üretilebilirliği ve güvenlik sorunları gibi geleneksel CAR-M terapileriyle ilişkili önemli dezavantajların üstesinden gelmek için Qian ve ark. aptamerlerin kullanımına dayalı yeni bir CAR-M yaklaşımı önerdi [93].

Sıçangil stabil makrofaj hücre hattı, RAW 264.7, M1 hücre yüzeyi üzerinde azido şekerleri üretmek için ilk önce bir azit içeren metabolik glikoprotein etiketleme reaktifi ve lipopolisakarit ile inkübe edildi. Daha sonra M1 hücreleri, eş zamanlı tümör hedefleme ve bağışıklık kontrol noktası blokajı için hem birkaç kanser hücresinde eksprese edilen nükleolin'e bağlanan AS1411 aptamerine hem de bir PD-L1 aptamerine tıklama kimyası reaksiyonu ile konjuge edildi. Daha da önemlisi, 4T1 TNBC taşıyan ve intravenöz olarak M1 hücreleri enjekte edilmiş, floresan aptamerler ile işlevselleştirilmiş farelerin in vivo görüntülenmesi, değiştirilmemiş M1 hücreleri ile karşılaştırıldığında tümörlerde daha büyük bir birikim gösterdi. Ayrıca, antitümör aktivitesi için test edildiğinde, çift aptamerle tasarlanmış M1, tümör büyümesinde ve metastaz oluşumunda güçlü bir azalmaya neden oldu ve buna, tümörde artan T hücresi infiltrasyonu ve gelişmiş T hücresi sitotoksisitesi ile birlikte immün TME yeniden programlaması eşlik etti.

Alternatif olarak, Chen ve ark. bir makrofaj mühendisliği stratejisi olarak önerilen polivalan küresel aptamerler (PSA'lar) [94]. PSA'lar, altın nanoparçacıkların, hem tiyolle modifiye edilmiş AS1411 aptamer hem de serbest uçta, yukarıda belirtilen metabolik süreç yoluyla M0 makrofajları üzerinde oluşturulan azit etiketleri ile reaksiyona giren fonksiyonel bir grup taşıyan bir DNA bağlayıcı ile işlevselleştirilmesi yoluyla üretildi. etiketleme ve biorthogonal tıklama reaksiyonları (Şekil 6). Tasarlanmış polarize olmayan makrofajların M1 alt tipine fenotipik dönüşümü, in vitro X-ışınları ile aktive edildi ve 4T1 tümör ksenogreftleri taşıyan farelerde doğrulandı, bu da sistemik toksisite belirtileri olmadan güçlü tümöre özgü öldürmeye neden oldu.

3.4. Doğal öldürücü hücreler

NK hücreleri, enflamatuar sitokinler ve kemokinler üretebilen, doğal IS'ye ait sitotoksik lenfositlerdir. "Birinci savunma hattı" olarak adlandırılırlar, çünkü T lenfositlerinden farklı olarak, antijene özgü T hücre reseptörlerini ifade etmezler, ancak önceden duyarlılaşma veya klonal genişleme olmadan mutasyona uğramış hücrelere karşı hareket ederler [95]. Kısmen immünosüpresif TME ve tümöre NK hücre özgüllüğünün olmaması nedeniyle, NK hücre uyarlamalı immünoterapi katı tümörlerin tedavisinde etkinlik gösterememiştir [96].

Bu nedenle, NK hücre antikanser terapötik etkinliğini geliştirmeye yönelik yaklaşımlar arasında, CAR'lerin ekspresyonu veya tümör hedefleme ligandlarının konjugasyonu yoluyla kansere özgüllük kazandırmaya odaklanan büyük bir çaba vardır [97]. Zu ve meslektaşları, lenfoma hücreleri üzerindeki CD30 reseptörünü spesifik olarak tanıyabilen bir aptameri, bir NK ticari hücre hattının veya üç sağlıklı donörden elde edilen NK hücrelerinin yüzeyine bağlayarak, aptamerleri aktif kanser hedefleme ajanları olarak araştırdılar [98]. Bu DNA tipi aptamer, daha önce aynı grup tarafından, CD30 artı lenfoma hücreleri üzerindeki seçim adımlarını CD30 rekombinant protein üzerindeki seçim adımlarının takip ettiği bir hibrit SELEX yaklaşımı aracılığıyla seçilmişti [99]. Aptamer 30 uçta, NK hücrelerinin zarına tutunmak için lipofilik çift C18 hidrokarbon zincirleri ile modifiye edilmiştir, bu şekilde onları öldürmek için özellikle lenfoma hücrelerine yönlendirilmektedirler [98]. Daha yakın zamanlarda, aynı yazarlar, TNBC hücrelerinde ifade edilen henüz bilinmeyen bir proteini NK hücrelerinin yüzeyine bağlayabilen bir DNA aptamerini bağlayarak TNBC'de aynı yaklaşımı uyguladılar. Aptamer ile tasarlanmış NK hücreleri, normal dokulara yan toksisite olmaksızın farelere intravenöz olarak enjekte edilen MDA-MB{16} hücrelerinin akciğer metastazını inhibe etti [100].

Katı tümörlerde NK hücrelerinin tümör özgüllüğünü daha da artırmak için, hem hepatoselüler karsinom hücrelerini hedefleyen bir aptamer hem de AptPD-L1 aptamer kullanılarak ikili aptamer donanımlı NK hücreleri üretildi [81]. Ortaya çıkan tasarlanmış NK hücreleri, uyarlanarak transfer edilen farelerde hepatoselüler karsinomun büyümesini inhibe etmede iki aptamerden sadece biriyle konjuge olmayan veya konjüge edilmiş hücrelerden daha etkiliydi. NK hücreleri ile immünoterapinin etkinliğinin bir başka sınırı, katı tümörlerde yetersiz infiltrasyonlarıdır. Aptamerler, bu sorunun üstesinden gelmek için mükemmel araçlar olduklarını bir kez daha kanıtladılar. Hock grubu, birkaç tümör hücresinde yüksek oranda eksprese edilen bir reseptör olan c-Met'e ve NK hücrelerinde eksprese edilen bir protein olan Fcg reseptörü III'e (CD16a) aynı anda bağlanabilen bispesifik aptamer bazlı bir konjugat üretti [101]. Eşlenik, iki reseptöre aynı anda bağlanmak için ∼65 Å-ideal mesafeyi koruyan, farklı bağlayıcılar tarafından kaynaştırılan iki oldukça spesifik c-Met ve CD16a DNA aptamerinden oluşur. Konjugat, NK hücrelerini kanser hücrelerine alarak antikora bağımlı hücresel sitotoksisiteyi etkili bir şekilde taklit edebildi. Daha sonra, aynı CD16 aptamer, hem NK hücrelerini PD-L1 artı tümör hücrelerine alabilen hem de TIL'leri yeniden etkinleştirerek PD-1/PD-L1 immünosüpresif eksenini bozabilen bir yapı oluşturmak için bir PD-L1 DNA aptamerine kaynaştırıldı. tümör taşıyan farelerde tümör hücrelerine karşı [82]. Bu yaklaşım özellikle TNBC gibi yüksek düzeyde PD-L1 içeren katı tümörler için endikedir.

4. Sonuçlar

Burada tartışılan son çalışmalar, oligonükleotit aptamerlerin kanserlerle savaşmak için IS'mizi güçlendirme konusundaki büyük potansiyelini açıkça göstermektedir. Aptamerler, mAb'lerle aynı şekilde antikanser ajanları olarak kullanılabilirler, ancak daha ucuzdurlar, daha hızlı üretilirler ve daha yüksek tekrarlanabilirlik ile antikorlardan daha az immünojeniktirler. Ancak, aptamerlerin kliniğe gelişinin beklenenden daha yavaş olduğu kabul edilmelidir; aslında, ilk SELEX'in [25,26] üzerinden 30 yıldan fazla zaman geçmesine rağmen, şu anda kanser tedavisi için sadece üç aptamer klinik deney aşamasındadır [51].

Bu yavaşlama çoğunlukla aptamerlerin hastalardaki etkinliğini sınırlayan, özellikle tümörü çevreleyen karmaşık ve sürekli gelişen mikroçevredeki belirsiz kararlılıkları ve yarı ömürleri gibi bazı zorluklardan kaynaklanmaktadır. Bununla birlikte, son birkaç yılda yukarıda belirtilen sınırlayıcı sorunların üstesinden gelmek için geliştirilen şaşırtıcı stratejiler ve aptamer keşfindeki son ilerleme ve bunları istenen herhangi bir uygulamaya uyarlamak için yapılan değişiklikler, aptamerlerin pratik kullanımının yakında olacağını iddia etmeyi makul kılmaktadır. acilen yeni terapötik seçeneklere ihtiyaç duyan TNBC gibi kanserler için gerçekleştirilebilir.

Yazar Katkıları:

Kavramsallaştırma, LC; yazma—orijinal taslak hazırlama, LC; yazma— gözden geçirme ve düzenleme LA, Ad, RN, MF, SC ve LC Tüm yazarlar makalenin yayınlanmış sürümünü okumuş ve kabul etmiştir.

Finansman:

Bu araştırma Fondazione AIRC per la Ricerca sul Cancro, IG 23052 tarafından finanse edildi ve LCLA, İtalya için bir AIRC bursuyla desteklendi.

Kurumsal İnceleme Kurulu Beyanı:

Uygulanamaz.

Veri Kullanılabilirliği Beyanı:

Uygulanamaz.

Teşekkür:

İçgörülü tartışmalar için A. Caliendo'ya minnettarız.

Çıkar çatışmaları:

Yazarlar herhangi bir çıkar çatışması beyan etmemektedir.

Referanslar

1. Dent, R.; Trudeau, M.; Pritchard, KI; Hanna, WM; Kahn, HK; Sawka, CA; Lickley, Los Angeles; Rawlinson, E.; Güneş, P.; Narod, SA Üçlü negatif meme kanseri: Klinik özellikler ve nüks paternleri. klinik Kanser Arş. 2007, 13, 4429–4434. [ÇaprazRef]

2. Derakhshan, F.; Reis-Filho, JS Üçlü Negatif Meme Kanserinin Patogenezi. Annu. Rahip Pathol. 2022, 17, 181–204. [ÇaprazRef]

3. Lu, JY; Alvarez Soto, A.; Anampa, JD Erken evre üçlü negatif meme kanseri için sistemik tedavinin manzarası. Uzman Görüşü Eczacı. 2022, 23, 1291–1303. [ÇaprazRef]

4. Lehmann, BD; Bauer, JA; Chen, X.; Sanders, ME; Chakravarthy, AB; Shyr, Y.; Pietenpol, JA Hedefe yönelik tedavilerin seçimi için insan üçlü negatif meme kanseri alt tiplerinin ve preklinik modellerin tanımlanması. J. Clin. Araştırmak 2011, 121, 2750–2767. [ÇaprazRef]

5. Lehmann, BD; Jovanoviç, B.; Chen, X.; Estrada, OG; Johnson, KN; Shyr, Y.; Musa, HL; Sanders, ME; Pietenpol, JA Üçlü Negatif Meme Kanseri Moleküler Alt Tiplerinin İyileştirilmesi: Neoadjuvan Kemoterapi Seçiminin Etkileri. PLoS BİR 2016, 11, e0157368. [ÇaprazRef]

6. Doktor Burstein; Tsimelzon, A.; Poage, GM; Covington, KR; Contreras, A.; Fuqua, SA; Vahşi, MI; Osborne, CK; Hilsenbeck, SG; Chang, JC; et al. Kapsamlı genomik analiz, üçlü negatif meme kanserinin yeni alt tiplerini ve hedeflerini tanımlar. klinik Kanser Arş. 2015, 21, 1688–1698. [ÇaprazRef]

7. Park, JH; Ahn, JH; Kim, SB Erken üçlü negatif meme kanserini (TNBC) nasıl tedavi edeceğiz: Mevcut standarttan gelecek immüno-moleküler stratejilere. ESMO Açık 2018, 3, e000357. [ÇaprazRef]

8. Li, S.; Bao, C.; Huang, L.; Wei, JF Metastatik Üçlü Negatif Meme Kanseri için Güncel Terapötik Stratejiler: Eczacıların Bakış Açısından. J. Clin. Med. 2022, 11, 6021. [CrossRef]

9. MROSS, K.; Kratz, F. Geleneksel kanser kemoterapisinin sınırları. Onkolojide İlaç Dağıtımında: Temel Araştırmadan Kanser Tedavisine; Kratz, F., Senter, P., Steinhagen, H., Eds.; John Wiley & Sons, Ltd.: Hoboken, NJ, ABD, 2011; 1. Cilt, s. 1–31.

10. Ferrari, P.; Scatena, C.; Güllü, M.; Bargagna, I.; Lorenzini, G.; Nicolini, A. Kemoterapiye Dirençli TNBC için Moleküler Mekanizmalar, Biyobelirteçler ve Ortaya Çıkan Tedaviler. uluslararası J. Mol. bilim 2022, 23, 1665. [CrossRef]

11. Gonzalez-Angulo, AM; Timms, KM; Liu, S.; Chen, H.; Liton, JK; Potter, J.; Lanchbury, JS; Stemke-Hale, K.; Hennessy, BT; Arun, BK; et al. Üçlü reseptör negatif meme kanseri olan seçilmemiş hastalarda BRCA mutasyonlarının insidansı ve sonucu. klinik Kanser Arş. 2011, 17, 1082–1089. [ÇaprazRef]

12. Robson, M.; Ben, SA; Şenkuş, E.; Xu, B.; Domchek, SM; Masuda, N.; Delologe, S.; Li, W.; Tung, N.; Armstrong, A.; et al. Germline BRCA Mutasyonlu Hastalarda Metastatik Meme Kanseri için Olaparib. İngilizce J.Med. 2017, 377, 523–533. [CrossRef] [PubMed]

13. Eikesdal, HP; Yndestad, S.; Elzawahry, A.; Llop-Guevara, A.; Gilje, B.; Blix, ES; Espelid, H.; Lundgren, S.; Geisler, J.; Vagstad, G.; et al. Seçilmemiş üçlü negatif meme kanserinde birincil tedavi olarak olaparib monoterapisi. Ann. Oncol. 2021, 32, 240–249. [CrossRef] [PubMed]

14. Litton, JK; Rugo, HS; Ettl, J.; Hurvitz, SA; Goncalves, A.; Lee, KH; Fehrenbacher, L.; Yeruşalmi, R.; Mina, Los Angeles; Martin, M.; et al. İlerlemiş Meme Kanseri ve Germline BRCA Mutasyonlu Hastalarda Talazoparib. İngilizce J.Med. 2018, 379, 753–763. [ÇaprazRef]

15. Keung, MY; Wu, Y.; Badar, F.; Vadgama, JV Göğüs Kanseri Hücrelerinin PARP İnhibitörlerine Tepkisi BRCA Durumundan Bağımsızdır. J. Clin. Med. 2020, 9, 940. [CrossRef] [PubMed]

For more information:1950477648nn@gmail.com