CAR-T Hücre Tedavisi uygulamasında karşılaşılan zorluklar ve zorluklar

İletişim:joanna.jia@wecistanche.com/ WhatsApp: 008618081934791

Kimerik antijen reseptörü T hücresi (kimerik antijen reseptörü T hücresi, CAR-T) immünoterapisi, kimerik antijen reseptörünü (kimerik antijen reseptörü) eksprese etmek için hastalardan veya allojenik donörlerden izole edilen T hücrelerinin genetik mühendisliğini yapmaktır. reseptör, CAR), tümör hücrelerini spesifik olarak tanıyan ve öldüren bir adaptif hücre tedavisi. CAR-T, son yıllarda kanser immünoterapisi alanındaki en büyük atılımlardan biridir. Hematolojik malignitelerin tedavisinde büyük avantajlara sahiptir ve geniş gelişme beklentilerine sahiptir. Şu anda, CAR-T hücre tedavisi de büyük zorluklarla karşı karşıya. Aşağıdaki içerik, CAR-T hücre tedavisinin karşılaştığı zorlukları anlamanıza, sınırlamalara yol açan mekanizmaları belirlemenize ve bu engellerin üstesinden gelmenize, böylece CAR-T hücrelerinin potansiyellerini daha iyi kullanabilmelerine, Tedavi stratejilerini optimize etmeye ve hasta sonuçlarını iyileştirmeye götürecektir. CAR-T hücre tedavisinin etkinliğini etkilediği bulunan birkaç anahtar faktör, CAR-T hücrelerinin üretimini, toksik yan etkilerin yönetimini ve ilaç direncinin tekrarını içerir.

Anti-tümör otlar:Cistanche bitkisel ürünler veKimerik antijen reseptörü T hücresi

1 CAR-T Hücre İmalatında Sorun

CAR-T hücre üretiminin karşılaştığı zorluklar, T hücresi edinimi, izolasyon ve tarama, transdüksiyon, kültür genişletme ve ilk T hücresi fenotip seçimi gibi çoklu bağlantıları içerir. Her bağlantıdaki yöntemlerin optimizasyonu sayesinde, CAR-T hücre ürünleri, daha yüksek klinik etkinlik ve daha az toksik yan etki ile gerçekleştirilebilir. Şu anda, FDA tarafından onaylanan CAR-T hücrelerinin tamamı otologdur ve allojenik rejeksiyon ve graft-versus-host hastalığı (GVHD) riski yoktur, ancak elde edilmesi zordur ve hücre kalitesi genellikle mevcut değildir. . Garanti etmek. CAR-T ürünleri üretmek için sağlıklı donörlerden alınan hücrelerin kullanılması, düşük kaliteli CAR-T hücre kaynakları sorununa bir çözümdür. Erken klinik çalışmalar, daha düşük GVHD riski olan allojenik transplantasyondan sonra hastalık nüksü olan hastalarda donör kaynaklı CAR-T hücrelerinin kullanılmasının fizibilitesini göstermiştir. Ek olarak, donör kaynaklı T hücreleri, yetersiz CAR-T hücre kaynakları, düşük kalite ve uzun üretim döngüleri gibi mevcut sorunların üstesinden gelmek için büyük önem taşıyan evrensel CAR-T ürünlerinin geliştirilmesini kolaylaştırır, ancak ek genetik modifikasyonlar gereklidir. bağışıklık reddi ve GVHD riskini azaltmak için. Ek olarak, CAR yapıları genellikle eksojen diziler içerir. Hazırlamanın zorluğu nedeniyle, CAR-T hücrelerinin çoğu scFv'si murin kökenlidir ve immünojeniktir. Tedavi edilen hastalarda scFv'ye karşı insan anti-fare antikorları tespit edilmiştir.

Çalışmalar, CAR-T hücre ürünlerinin ilk T hücre fenotipinin sonraki klinik yanıtlarda önemli bir rol oynadığını göstermiştir. Merkezi bellek T hücreleri, kök benzeri bellek T hücreleri ve öncü T hücreleri gibi spesifik T hücresi fenotipleri, CAR-T hücrelerinin genişleme kapasitesini ve kalıcılığını iyileştirebilir. KLL hastalarında CD19-hedefli CAR-T hücre tedavisine ilişkin bir çalışma, yanıt verenlerin CAR-T hücre popülasyonunun yanıt vermeyenlerle karşılaştırıldığında bol miktarda bellek T hücresi ile ilişkili gen ekspresyonuna sahip olduğunu bulmuştur. Başka bir araştırma ekibi, bir ilaç düzenleyici sistem veya dasatinib yoluyla CAR proteininin aşağı regülasyonunu zorlayarak CAR proteinini durgun bir duruma girmeye teşvik etti, böylece hafıza benzeri bir fenotip elde etti, fenotipi ve tükenmiş CAR-T hücrelerinin transkripsiyonel özelliklerini başarılı bir şekilde tersine çevirdi. ve ardından CAR-T hücrelerinin Antitümör işlevini geri yükleme.

Ayrıca, CAR-T hücrelerinin infüzyonunun zamanlamasının da tedaviye yanıt üzerinde önemli bir etkisi vardır. CAR-T hücrelerinin üretim döngüsünü teknolojik optimizasyon yoluyla kısaltarak, hastaların hastalık gecikmesini azaltması ve daha fazla hastaya fayda sağlaması bekleniyor. Ek olarak, CAR yapılarını kodlayan genler genellikle retrovirüs veya lentivirüs tarafından T hücrelerine dönüştürülür, ancak transpozon sistemlerinin gelişmesiyle CAR-T hücre üretimi için viral vektörler yerine transpozonların kullanılması daha ekonomiktir. Şu anda, Uyuyan Güzel transpozon sistemi, CD19-hedefli CAR-T hücrelerinin imalatında uygulanmaktadır.

Anti-tümör: CAR-T hücre tedavisi &cistanche tübüloza

2 CAR-T hücre tedavisinin toksik ve yan etkileri

CD19-hedefli CAR-T hücreleri ile tedavi edilen hastaların neredeyse tamamı, sitokin salıverme sendromu (CRS) ve immün efektör ilişkili nörotoksisite sendromu (ICANS) vb. dahil olmak üzere değişen derecelerde toksik yan etkiler geliştirdi; ikincisi nörotoksik olarak da bilinir. yan etkiler. Amerikan Transplantasyon ve Hücresel Tedavi Derneği (ASTCT), CAR-T toksisitesinin yönetimi ve tedavisi için yol gösterici önemi olan CRS ve ICANS için standartlaştırılmış derecelendirme önerileri geliştirmiş ve yayınlamıştır.

KRS'nin klinik semptomları sıklıkla ateşle başlar ve ciddi vakalar sistemik inflamatuar yanıt, hipotansiyon, hipoksi ve organ yetmezliğine yol açabilir. ICANS esas olarak toksik ensefalopati olarak kendini gösterir, şiddetli vakalar nöbetlere, beyin ödemine ve komaya neden olabilir. ICANS'lı hastaların çoğunda bir CRS öyküsü vardı, bu da CRS'nin ICANS için başlatıcı veya teşvik edici bir faktör olarak hareket edebileceğini düşündürdü. CRS ve ICANS'ın erken semptomları saptanabilir ve etkin bir şekilde müdahale edilebilirse, her ikisinin de klinik seyri tersine çevrilebilir, ancak ciddi CRS ve ICANS ölümcül olabilir. CRS ve ICANS'ın patofizyolojik mekanizmalarını anlamak, CAR-T hücrelerinin anti-tümör aktivitesini mümkün olduğu kadar koruma temelinde CAR-T hücrelerinin toksisitesini bastırmak için hedeflenen ilaçların geliştirilmesine yardımcı olur. CRS, aralarında IL-6'nin CRS'ye aracılık eden önemli bir bağışıklık molekülü olduğu çeşitli sitokinlerin yüksek seviyeleri ile ilişkilidir. IL-6 reseptörünü bloke eden Tocilizumab, şu anda KRS'nin ana tedavisidir. Klinik öncesi denemeler, KRS'nin, aktivasyon sürecinde merkezi bir rol oynayan monosit-makrofaj sistemi ile, çok hücreli bir CAR-T hücreleri ve konakçı hücreler ağı tarafından tetiklendiğini göstermiştir. IL-1, monosit-makrofaj sisteminin ana sitokin ürünlerinden biridir ve CRS'nin itici bağlantısında yer alabilir ve bu hedefin bloke edilmesi, CRS'nin giderilmesinde etkilidir. TNF, interferon- (IFN- ), granülosit/makrofaj koloni uyarıcı faktör (GM-CSF) ve diğer proinflamatuar sitokinler de potansiyelin hedefi olabilecek KRS sürecinde yer alır. Şu anda düşük dereceli KRS, esas olarak ateş düşürücü ve destekleyici tedavi ile tedavi edilmektedir ve enfeksiyon gibi ateşe yol açabilecek diğer komplikasyonlar aktif olarak önlenmektedir. Orta ila şiddetli KRS için genellikle tocilizumab kullanılır ve hastanın durumuna göre adjuvan tedavi olarak seçici olarak steroidler kullanılır ve etkisi daha belirgindir. Şiddetli KRS hastaları için, steroidler genellikle CAR-T hücrelerinin ve diğer "seyirci" hücrelerin çoğalmasını ve sitokin salgılanmasını engellemek için kullanılır. Steroidlerin yüksek dozlarda kullanılamayacağı ve bağışıklık sistemi üzerindeki inhibitör etkisinin CAR-T'nin etkinliğinin azalmasına yol açacağı unutulmamalıdır. Ruxolitinib ve ibrutinib gibi bazı küçük molekül inhibitörleri, çeşitli sitokinlerin üretimini ve sinyal iletimini büyük ölçüde inhibe edebilir ve birden fazla hedefe bağlanabilir, böylece CAR-T hücrelerinin bağışıklık fonksiyonunu düzenleyebilir ve yan etkileri azaltabilir.

ICANS'ın mekanizması, merkezi sinir sisteminde CAR-T hücrelerinin ve proinflamatuar sitokinlerin birikimi ile ilişkili olabilir. Klinik öncesi çalışmalar, beyin omurilik sıvısındaki CAR-T hücrelerinin sayısı ile sitokinlerin seviyesi ve ICANS'ın şiddeti arasında bir korelasyon gözlemlemiştir. CD19-hedefli CAR-T terapisindeki ICANS insidansı, CD22-hedefli CAR-T hücre terapisindekinden daha yüksektir, bunun nedeni CD19'un insan beyni medial parietal hücrelerinde eksprese edilmesi olabilir. ICANS hastaları için klinik tedavi yöntemi steroid vermektir ve CAR-T'nin etkinliği ve ciddi immünosupresyon üzerindeki etkisinden kaçınmak için dozaj en düşük seviyede olmalıdır. Tocilizumab, KRS tedavisinde iyi sonuçlar elde etmiştir, ancak ICANS üzerindeki etkisi, kan-beyin bariyerini geçme zorluğuyla ilişkili olabilecek çok sınırlıdır.

Toksik yan etkiler şu anda CAR-T'nin etkinliğini sınırlayan, CAR-T hücrelerinin dozunu artırarak veya efektör aktivitesini artırarak CAR-T hücrelerinin anti-tümör etkisinin arttırılmasını engelleyen önemli bir faktördür. Yüksek tümör yükü, ileri yaş ve yüksek yoğunluklu lenfo-tüketici ön koşullandırmanın immünotoksik yan etkilerin ortaya çıkmasıyla ilişkili olduğu düşünülmektedir. Tedavi vakalarının artması ve takip süresinin uzaması ile hemofagositik lenfohistiyositoz/makrofaj aktivasyon sendromu benzeri toksisite, B hücreli aplastik anemiye bağlı immün disfonksiyon gibi daha toksik ve yan etkiler ortaya çıktı. serebral ödem, vb. Mevcut çalışmalar, indüklenebilir kaspaz-9 veya herpes simpleks virüsü timidin kinaz gibi intihar genlerinin CAR'a eklenmesinin, CAR-T'nin sitotoksik yan etkilerini azaltmanın olası bir yolu olduğunu bulmuştur. CAR-T hücrelerinin geri döndürülemez şekilde temizlenmesine neden olur ve direnci azaltır. Tümör etkinliği.

CAR-T hücre tedavisi ve cistanche takviyelerinin etkileri: kanser ve tümör tedavisi

3 CAR-T hücre tedavisinden sonra ilaç direncinin nüksetmesi

CAR-T hücreleri hematolojik malignitelerin tedavisinde büyük ilerlemeler kaydetmiş olsa da, CD19-hedefli CAR-T hücre tedavisi alan hastalar arasında, ilaca direnç nüksetme oranı yüzde 30 ila yüzde 50 kadar yüksek ve çoğu Relapsların çoğu tedaviden 12 yıl sonra ortaya çıkar. bir ay içinde. Bununla birlikte, bu tür bir nüksetme yalnızca CD19 hedefi için değildir ve CD22 ve BCMA gibi diğer hedefler üzerindeki ilgili çalışmalar da ilaca dirençli nüksün CAR-T hücre tedavisinin yaygın olarak karşılaştığı büyük bir zorluk olduğunu kanıtlamıştır. Şu anda, relaps olayları genellikle antijen negatif relaps ve antijen pozitif relaps olarak ikiye ayrılır.

Antijen negatif nüksün birincil mekanizması antijen kaybıdır. Şu anda tanınan antijen kaybı mekanizmaları, uçbirim mutasyonlarını, epitop kriptiklerini ve hedef epitopların kaybına bağlı hücre soyu değişikliklerini içerir. Bununla birlikte, antijen tamamen kaybolmasa bile, immünomodülasyon yoluyla azaltılmış antijen ekspresyonu veya yoğunluğu, tümör hücrelerinin kaçmasına izin vermek için yeterlidir. Lösemi hastalarını tedavi etmek için CD22-hedefli CAR-T hücrelerini kullanan bir klinik denemede, pozitif antijenleri olan lösemi hastalarının nüksettiği bulundu, bu da CAR-T hücre aktivitesinin sürdürülmesinin minimum antijen ekspresyon eşiğine ulaşması gerektiğini düşündürdü. . Kombinatoryal çok moleküler hedefli CAR-T hücrelerinin, antijen kaybından veya aşağı regülasyon mekanizmalarından tümör hücresi kaçışının üstesinden gelmesi bekleniyor. CD19-hedefli CRA-T hücre tedavisinden sonra nüks eden hastalar için CD22 ideal bir hedeftir çünkü çoğu CD19-negatif hasta CD22 ekspresyonu için pozitif kalır. Klinik çalışmalarda, CD22'yi hedefleyen CAR-T hücreleri, CD19-negatif B hücreli lenfoma ve nükseden lösemili hastaların tedavisinde etkiliydi, ancak sıralı immünoterapi sürecinde, aşağı regülasyonun neden olduğu ilaç direnci nüksü Tümör hücreleri tarafından CD22 ekspresyonu da bulundu. Bu nedenle, aynı anda CD19 ve CD22'yi hedefleyen CAR-T hücrelerinin geliştirilmesi, ilaç direncinin üstesinden gelmede daha büyük potansiyele sahip olabilir. Hedef antijenlerin seçimine ek olarak, immün sinapsların oluşumunda ve hedef hücrelerin öldürülmesinde CAR-T'nin kesin mekanizmasına da dikkat etmek gerekir. Doğal TCR'ler, antijenleri düşük yoğunluklu seviyelerde tanıyabilir ve CAR'lar ile doğal TCR'ler arasındaki yapısal farklılıkların, antijen tanıma yoğunluğu gereksinimlerinde farklılıklara yol açabileceği tahmin edilmektedir.

Tüm nüksetmiş hastaların CD19 negatif olmadığını belirtmekte fayda var, bu da antijen kaybı ve tümör hücresi kaçışına ek olarak CAR-T direncine yol açan başka faktörlerin de olduğunu gösteriyor. Antijen pozitif nüksün ana nedeni, yüksek antijen seviyelerine uzun süreli maruz kalma nedeniyle kendi kendine işlev düşüşüne yol açan CAR-T hücre tükenmesidir. Genel olarak CAR-T hücrelerinin antijenden bağımsız sinyal iletiminin hücre tükenmesi ile yakından ilişkili olduğuna ve yüksek tümör yükünün de tükenmeye yol açan önemli bir faktör olduğuna inanılmaktadır. CAR-T hücreleriyle birleştirilmiş bağışıklık kontrol noktası blokaj teknolojisi, tükenmenin üstesinden gelme ve CAR-T hücrelerinin efektörünü ve kalıcılığını artırma konusunda umut vaat ediyor. IL-7 reseptörünün CAR ile birlikte ekspresyonu, "bystander" hücrelerin uyarılmasını önleyebilir ve CAR-T hücrelerinin proliferatif kapasitesini, antitümör aktivitesini ve kalıcılığını iyileştirebilir. CAR-T hücrelerinin CAR yapısı, immünojenik olan ve hümoral ve hücresel anti-CAR bağışıklığını indükleyebilen, böylece etkinliği sınırlayan ve CAR-T hücrelerinin proliferatif kapasitesini ve kalıcılığını etkileyen kendi kendine olmayan bileşenler içerir. Çalışmalar, DLBCL hastalarının yüzde 5'inin ve B-ALL hastalarının yüzde 36,7'sinin CAR-T hücrelerinin infüzyonundan sonra artan anti-CAR antikor seviyelerine sahip olduğunu göstermiştir. Siklofosfamid veya fludarabin ön tedavisi, anti-CAR hücresel bağışıklığın derecesini azaltmada önemli bir faktör olarak kabul edilir. İnsanlaştırılmış CAR-T ürünlerinin geliştirilmesi, klinik deneylerde nükseden/refrakter B-ALL'de kalıcı etkinlik gösteren bu sorunu çözmenin etkili bir yoludur. CAR yapısındaki ortak uyarıcı alan, CAR-T hücrelerinin kalıcılığını da etkiler. Genellikle 4-1BB maliyet uyarıcı etki alanı ile karşılaştırıldığında, CD28-türevli CAR'ların daha az dayanıklı olduğuna ve tükenmeye daha yatkın olduğuna inanılmaktadır; 4-1BB kostimülatör alanını içeren CAR-T hücreleri daha yüksek seviyelerde anti-apoptotik proteinler BCL-2 ve BCL-XL'e sahiptir ve bellek fenotip T hücrelerinin oluşumunu teşvik eden bir mekanizma olabilir. Şu anda klinik deneylerdeki gelişmeler, CAR-T hücrelerini aktive etmek için yapay antijen sunan hücrelerin kullanımını, CAR-T fenotiplerinin düzenlenmesini ve immün kontrol noktası moleküllerinin kombine inhibisyonunu içerir. Sonuçlar dört gözle beklemeye değer.

Cistanche, tümör ve kanseri etkili bir şekilde önleyebilir