Tirozinaz aktivitesinin inhibisyonu için Cistanche glikozit

 

2 Sonuç ve Tartışma

 

2.1 PHGS, GLA ve bunların kombinasyonlarının tirozinaz aktivitesi üzerindeki etkileri

Şekil 1engelleyici etkilerini gösterirPHGS PBS Çözümü, GLA PBS Çözümü, VePHGS/GLA PBS çözümütirozinaz aktivitesi üzerine.

İtibarenŞekil 1A, yarım maksimal inhibitör konsantrasyonları (IC50)PHGS PBS Çözümü, GLA PBS Çözümü, VeARB PBS Çözümütirozinaz aktivitesi(2.192 ± 0.038) g/L, (1.376 ± 0. 025) Ug/ml, Ve({0}}}. 101 ± 0.003) Ug/ml, sırasıyla. Tirozinaz inhibisyon potansiyeli sırasıArb> gla> phgs.

İtibarenŞekil 1B, kitlesel bir konsantrasyonda0. 4 mg/ml, tirozinaz inhibisyon oranlarıPHGS/GLA (10: 1), PHGS/GLA (5: 1), VePHGS/GLA (1: 1)PBS çözümleri88.06%, 92.93%, Ve94.37%, sırasıyla. Son ikisi, aynı konsantrasyonda tek tek bileşenlerin inhibisyon oranlarından daha yüksekti (PHGS PBS çözümü için% 36.92VeGLA PBS çözümü için% 92.71). Ayrıca, inhibisyon oranıPHGS/GLA (1: 1)PBS çözümü pozitif kontrol ile karşılaştırılabilirdiARB.

Hesaplamalara dayalı:

Tirozinaz aktivitesinin inhibisyonu için yüksek seviyeli glikozitli Cistanche özütü

 

.CI (kombinasyon dizin)değerPHGS/GLA (1: 5) ~ PHGS/GLA (1:40)PBS çözümleriCI> 1, antagonistik etkileri gösteren.

.CI değerleriiçinPHGS/GLA (40: 1) ~ PHGS/GLA (1: 1)PBS çözümleriCI <1, sinerjistik etkileri gösteren.

Bu, kütle oranınınPHG'ler GLAki40: 1, 20: 1, 10: 1, 5: 1 veya 1: 1, kombinasyon, tirozinaz aktivitesini inhibe etmede önemli sinerjistik etkiler gösterir.

 

 

Şekil 1 Tirozinazın farklı kütle konsantrasyonlarına sahip PHGS PBS çözeltileri, GLA PBS çözeltisi (A) ve PHGS PBS çözeltisi, GLA PBS çözeltisi ve PHGS/GLA PBS çözeltisi, 0.

 

2.2 PHGS, GLA ve bunların kombinasyonlarının serbest radikal temizleme üzerindeki etkileri

Şekil 2DPPH radikal ve abts⁺ radikal temizleme yeteneklerini gösterirPHGS etanol çözeltisi, GLA etanol çözeltisi, VePHGS/GLA etanol çözeltisi.

İtibarenŞekil 2A, DPPH radikal temizleme için IC50 değerleriPhgs, Gla, VeVCvardı(21.135 ± 1.164) Ug/ml, (55.537 ± 5.230) Ug/ml, Ve(2.852 ± 0. 252) Ug/ml, sırasıyla. DPPH radikal temizleme yeteneği sırasıVC> PHGS> GLA.

İtibarenŞekil 2b, abts⁺ radikal temizleme için IC50 değerleriPHGS etanol çözeltisi, GLA etanol çözeltisi, VeVC etanol çözeltisivardı(22.7 0 9 ± 0.686) Ug/ml, (11.677 ± 0. 120) Ug/ml, Ve(3.237 ± 0. 345) Ug/ml, sırasıyla. Abts⁺ radikal temizleme yeteneği sırasıVC> GLA> Phgs.

İtibarenŞekil 2C, bir konsantrasyonda0.4 g/L, DPPH radikal temizleme oranlarıPHGS/GLA (40: 1) ~ PHGS/GLA (1: 1)Etanol çözümleri87.02% ~ 89.43%, bunlar tek tek bileşenlerin temizleme oranlarından daha yüksekti (PHGS etanol çözeltisi için% 85.32VeGLA etanol çözeltisi için% 83.31) ve pozitif kontrolünkiyle karşılaştırılabilirVC (84.54%). .CI değerleriiçinPHGS/GLA (1: 5) ~ PHGS/GLA (1:40)Etanol çözümleriCI> 1, antagonistik etkileri gösterirkenCI değerleriiçinPHGS/GLA (40: 1) ~ PHGS/GLA (1: 1)Etanol çözümleriCI <1ve DPPH radikal temizleme oranlarının hepsi yukarıdaydı85%, güçlü DPPH radikal temizleme yeteneğini gösteren.

İtibarenŞekil 2D, bir konsantrasyonda0.4 g/L, abts⁺ radikal temizleme oranlarıPHGS/GLA (40: 1) ~ PHGS/GLA (1: 1)Etanol çözümleri99.87% ~ 100.13%, bunlar tek tek bileşenlerden daha yüksekti (PHGS etanol çözeltisi için% 97.81VeGLA etanol çözeltisi için% 97,96) ve pozitif kontrol ile karşılaştırılabilirVC (99.92%). .CI değerleriiçinPHGS/GLA (1: 5) ~ PHGS/GLA (1:40)Etanol çözümleriCI> 1, antagonistik etkileri gösterirkenCI değerleriiçinPHGS/GLA (40: 1) ~ PHGS/GLA (1: 1)Etanol çözümleriCI <1, güçlü abts⁺ radikal temizleme yeteneğini gösterir.

Özet olarak, dokuz kombinasyon arasındaPHGS/GLA, PHGS/GLA (1: 1), PHGS/GLA (5: 1), VePHGS/GLA (10: 1)Tirozinaz aktivitesinin nispeten yüksek inhibisyonu ve antioksidasyonda güçlü sinerjistik etkiler nedeniyle sonraki hücre deneyleri için PBS çözeltileri seçildi.

Tirozinaz inhibisyon oranları:%94.37,%92.93 ve%88.06, sırasıyla.

DPPH radikal temizleme oranları:%89.44,%88.72 ve%88.10, sırasıyla.

Abts⁺ radikal temizleme oranları:%100.13,%100.01 ve%99.87, sırasıyla.

---

2.3 PHGS, GLA ve bunların kombinasyonlarının B16F10 ve HACAT hücrelerinin canlılığı üzerindeki etkileri

Şekil 3etkilerini gösterirPHGS DMEM Çözümü, GLA DMEM Çözümü, VePHGS/GLA DMEM Çözümücanlılığı üzerindeB16F10VeHacathücreler.

İtibarenŞekil 3A - C:

Phgskonsantrasyonlarında78.125 ~ 625 ug/ml(Şekil 3A) veGlakonsantrasyonlarında3.125 ~ 25 ug/ml(Şekil 3B),B16F10 hücreleri.

PHGS/GLA (1: 1), PHGS/GLA (5: 1), VePHGS/GLA (10: 1)Bir konsantrasyonda DMEM çözümleri25 ug/mlsitotoksisite sergilemedi (Şekil 3C).