Enflamatuar bağırsak hastalığının tedavisinde Cistanche Deserticola'nın mekanizma tahmini ve doğrulaması ⅱ
Nov 15, 2024
| Bileşik Adı (Çince) | TCMSP Kimliği | Moleküler ağırlık | Sözlü biyoyararlanım |
|---|---|---|---|
| -Sitosterol (植物甾醇) | Mol000358 | 36.91 | 0.75 |
| Anchidonolol (安诺炼) | Mol005320 | 45.57 | 0.20 |
| suchillinolol (苏沟酚) | Mol005384 | 57.52 | 0.56 |
| Yangambul (杨安补) | Mol007563 | 57.53 | 0.81 |
| Quercitrin (槲皮素) | Mol000098 | 46.43 | 0.28 |
| Myricetin (桑椹素) | Mol001454 | 37.05 | 0.68 |
| asetosid (毛蕨花酷) | Mol003333 | 2.94 | 0.62 |
| EcDisteroid (脱皮激素) | Mol003734 | 3.14 | 0.38 |
| Poliumosid (金合欢苷) | Na | Na | Na |
| cistanosid A (肥皂树 a) | Mol008856 | 3.62 | 0.36 |
| Cistanosid B (肥皂树 B) | Mol008872 | 4.27 | 0.35 |
| Cistanosid C (肥皂树 C) | Na | Na | Na |
| Cistanosid D (肥皂树 D) | Mol008882 | 5.19 | 0.69 |
| Tubulosid A (管花草 A) | Na | Na | Na |
| Tubulosid B (管花草 B) | Na | Na | Na |
| izoakreosid (异亮芨芨草) | Mol107795 | 1.52 | 0.66 |
| 2- asetilakteosid (乙酰柠檬晶) | Na | Na | Na |
| L-Arabinoz (L- 阿拉伯糖) | Mol010200 | 54.12 | 0.03 |
| Galaktosid (半乳糖) | Mol010203 | 10.22 | 0.55 |
| Dulciol (半乳醇) | Na | Na | Na |
| D-glukarik asit (d- 葡萄糖酸) | Mol012957 | 60.80 | 0.06 |
| Mannitol (甘露醇) | Mol000003 | 17.73 | 0.03 |
| fruktoz (果糖) | Mol000053 | 1.68 | 0.03 |
| Ksiloz (木糖) | Mol000731 | 58.74 | 0.03 |
| glikoz (葡萄糖) | Mol000734 | 24.44 | 0.03 |
| Rhamnose (鼠李糖) | Mol004690 | 40.73 | 0.03 |
| Sükroz (蔗糖) | Mol000842 | 7.17 | 0.23 |
| Mannose (甘露糖) | Mol000951 | 1.76 | 0.03 |
İşte İngilizce'ye çevrilen tablo:
| Bileşik Adı (Çince) | TCMSP Kimliği | Moleküler ağırlık | Sözlü biyoyararlanım |
|---|---|---|---|
| fruktoz (果糖) | Mol000053 | 1.68 | 0.03 |
| Ksiloz (木糖) | Mol000731 | 58.74 | 0.03 |
| glikoz (葡萄糖) | Mol000734 | 24.44 | 0.03 |
| Rhamnose (鼠李糖) | Mol004690 | 40.73 | 0.03 |
| Sükroz (蔗糖) | Mol000842 | 7.17 | 0.23 |
| Mannose (甘露糖) | Mol000951 | 1.76 | 0.03 |
| Canın (肉桂素) | Mol008855 | 71.78 | 0.06 |
| Kıyafet (肉桂苷素) | Na | Na | Na |
| Kankanosid A (甘菊苷 A) | Na | Na | Na |
| Kankanosid B (甘菊苷 B) | Na | Na | Na |
| 8- epilojanik asit (8- 表乙酸) | Mol003203 | 98.51 | 0.09 |
| glukozit (榈苷) | Na | Na | Na |
| liriodendrin (鹤掌枫脂素) | Mol007927 | 5.19 | 0.29 |
| Citrusin A (柑橘素 A) | Mol013438 | 25.04 | 0.73 |
| Palmit asit (棕榈酸) | Mol000069 | 19.30 | 0.10 |
| Niasin (烟酸) | Mol000421 | 47.65 | 0.02 |
Şekil 1 "İlaç-Yenilendirme-Hedef-Hasar" Etkileşim Ağı
3.1.4 Git ve Kegg Zenginleştirme Analizi
Şekil 3 ve 4'te gösterildiği gibi, IBD tedavisinde Cistanche Deserticola'nın biyolojik süreci esas olarak protein fosforilasyonu, apoptozun negatif regülasyonu, eksojen uyaranlara yanıt, vb.
3.1.5 Moleküler yerleştirme doğrulaması
Moleküler yerleştirme doğrulama sonuçları (Tablo 2), çekirdek hedefin ve çekirdek bileşenlerin bağlanma enerjilerinin hepsinin -4. 7 kj/mol'den daha az olduğunu göstermektedir, bu da ligand moleküllerinin reseptör proteine iyi bağlanabileceğini gösterir. Bunlar arasında, Akt1 ve -sitosterol'un bağlanma enerjisi en iyi kombinasyon.
Kabızlık için yeni bitki cistanche oral takviyesi
Çin'deki en büyük cistanche ihracatçısı Wecistanche'nin destekleyici hizmeti:
E -posta: wallence.suen@wecistanche.com
WhatsApp/Tel: +86 15292862950
3.2 Hayvan deney sonuçları
3.2.1 CE'nin fare vücut ağırlığı üzerindeki etkisi
Boş kontrol grubu ile karşılaştırıldığında, model grubundaki farelerin vücut ağırlığı önemli ölçüde azaldı (p ＜ {0}}. 0 1); Model grubu ile karşılaştırıldığında, pozitif kontrol grubu ve CE doz gruplarındaki farelerin vücut ağırlığı önemli ölçüde artmıştır (P ＜ 0.05 veya P ＜ 0.01). Sonuçlar Tablo 3'te gösterilmiştir.
Şekil 4 Cistanche Deserticola'nın IBD tedavisinde potansiyel hedeflerinin Kegg Yolu Analizi
Tablo 2 Çekirdek bileşenlerin ve çekirdek hedef proteinlerin (KJ/mol) yerleştirme sonuçları
| Birleştirmek | TNF (Radyo Frekansı | Akt | Stat3 | EGFR (İngilizce) | SRC |
|---|---|---|---|---|---|
| Oleanolik asit | -6.2 | -10.0 | -7.9 | -7.6 | -8.6 |
| Ursolik asit | -5.2 | -10.0 | -8.0 | -7.7 | -8.0 |
| Glisirrhetinik asit | -6.4 | -11.3 | -8.0 | -9.2 | -8.3 |
| 18 - Glycyrrhetinik asit | -4.8 | -6.8 | -5.2 | -4.8 | -5.5 |
Tablo 3 Her grupta farelerin vücut ağırlığı, DAI, kolon uzunluğu ve patolojik skoru (x ± S)
| Grup | n | Ağırlık (G) | Vücut uzunluğu (cm) | Dai (%) | Patolojik puan |
|---|---|---|---|---|---|
| Kontrol | 8 | 20.84 ± 0.61 | 7.48 ± 0.18 | 0 | 0.13 ± 0.22 |
| Model | 7 | 14.24 ± 0.92a | 5.77 ± 0.35* | 3.30 ± 0.50* | 2.85 ± 0.61* |
| Düşük doz | 7 | 17.59 ± 0.75b | 7.47 ± 0.70b | 1.99 ± 0.45b | 0.93 ± 0.36b |
| CE düşük doz | 7 | 16.23 ± 0.99b | 7.27 ± 0.42b | 2.66 ± 0.48b | 2.22 ± 0.60b |
| CE orta dozu | 8 | 17.07 ± 0.67b | 7.37 ± 0.34b | 2.06 ± 0.31b | 1.51 ± 0.29b |
| CE yüksek doz | 8 | 17.37 ± 0.41b | 7.43 ± 0.62b | 1.85 ± 0.43b | 1.13 ± 0.77b |
A: Kontrol grubuna kıyasla, P<0.01; b: Compared to the model group, P<0.01; c: Compared to the model group, P<0.05.
3.2.2 CE'nin fare DAI ve kolon uzunluğu üzerindeki etkisi
Boş kontrol grubuyla karşılaştırıldığında, model grubundaki farelerin Dai'sini önemli ölçüde arttırıldı ve kolon uzunluğu önemli ölçüde kısaltıldı (P<0.01); compared with the model group, the DAI of rats in the positive control group and CE groups at each dose was significantly reduced, and the colon length was significantly shortened (P<0.01). All increased significantly (P＜0.05 or P＜0.01). The results are shown in Table 3 and Figure 5.
3.2.3 CE'nin fare kolonunun histopatolojik morfolojisi üzerindeki etkileri
Boş kontrol grubundaki farelerin kolon mukozası yapıda tam ve berraktı ve enflamatuar hücre infiltrasyonu ve ülser bulunmadı; Model grubundaki farelerin kolon mukozası eksikti, bezlerin çoğu yok edildi, bazı kadeh hücreleri kayboldu ve kript yapısı yok edildi; Grupları karşılaştıran model ile karşılaştırıldığında, pozitif kontrol grubundaki ve CE gruplarındaki farelerin kolon doku hasarı iyileşti, kolon dokusundaki enflamatuar hücre infiltrasyonu ve bez yıkımı önemli ölçüde azaldı, iltihaplanma derecesi önemli ölçüde azaldı ve kolon histopatoloji skoru önemli ölçüde azaldı (p ＜}.<0.01). The results are shown in Figure 6 and Table 3.
3.2.4 CE'nin fare kolon dokusunda inflamatuar faktör seviyeleri üzerindeki etkisi
Boş kontrol grubu ile karşılaştırıldığında, model grubundaki farelerin kolon dokusundaki IL {{0}}}}}}}}}, IL -1}, mpo ve tnf- seviyeleri (p {{{{{{{{{{{{{{{{{{{{{{{{{{{{{{{{{{}}} 5 veya p 0} 5 veya p 0} 5 veya p 0. IL -10 seviyesi önemli ölçüde azaldı. (P <0.01); Model grubu ile karşılaştırıldığında, pozitif kontrol grubundaki ve CE gruplarındaki farelerin kolon dokusunda IL -6}, il -1, mpo ve tnf- seviyeleri önemli ölçüde azaldı (p <0.05 veya p <0.01), IL -10
Seviye önemli ölçüde arttı (p ＜ 0. 01). Sonuçlar Tablo 4'te gösterilmiştir.
3.2.5 Fare kolon dokusunda çekirdek hedef proteinlerin ekspresyon seviyeleri
Boş kontrol grubu ile karşılaştırıldığında, model grubundaki farelerin kolon dokusundaki PI3K, P-PI3K, EGFR, TNF-, STAT3, P-STAT3, Akt1, P-Akt1 ve SRC'nin protein ekspresyon seviyeleri önemli ölçüde artmıştır (P< 0.05 or P＜0.01); compared with the model group, the expression levels of the above proteins in the colon tissue of mice in the positive control group and CE groups were significantly reduced (P＜0.05 or P＜0.01).
Sonuçlar Şekil 7 ve Tablo 5'te gösterilmektedir.
Tablo 4 Fare kolon dokusunda inflamatuar faktör seviyelerinin karşılaştırılması (x ± S)
| Grup | n | IL -10 (pg/ml) | IL -6 (pg/ml) | IL -1 (pg/ml) | TNF- (PG/ML) | MPO (U/L) |
|---|---|---|---|---|---|---|
| Kontrol | 8 | 47.0 ± 4.70 | 17.35 ± 0.64 | 291.27 ± 72.33 | 387.71 ± 116.76 | 23.06 ± 7.26 |
| Model | 7 | 3.68 ± 0.32a | 145.08 ± 23.86a | 338.94 ± 95.11a | 635.27 ± 135.15a | 97.06 ± 28.07a |
| Düşük doz | 7 | 44.74 ± 8.34b | 23.23 ± 4.64b | 300.52 ± 84.71b | 448.21 ± 123.28b | 38.60 ± 16.78b |
| CE düşük doz | 7 | 12.87 ± 3.26b | 81.12 ± 18.95b | 331.24 ± 95.80b | 510.81 ± 110.63b | 51.61 ± 11.62b |
| CE orta dozu | 8 | 21.80 ± 4.12b | 50.75 ± 22.16b | 323.62 ± 79.21b | 508.68 ± 146.97b | 45.53 ± 15.21b |
| CE yüksek doz | 8 | 31.10 ± 7.40b | 27.55 ± 41.22b | 294.13 ± 86.05b | 461.42 ± 140.30b | 44.26 ± 13.58b |
A: Kontrol grubuna kıyasla, P<0.01; b: Compared to the model group, P<0.01.
A: boş kontrol grubu; B: Model Grubu; C: Pozitif Kontrol Grubu; D: CE yüksek doz grubu; E: CE orta doz grubu; F: CE düşük doz grubu.
Şekil 7 Her grupta farelerin kolon dokusunda çekirdek protein ekspresyonunun elektroforezi
4 Tartışma
Bu çalışmada, moleküler yerleştirme deneylerinin sonuçları, çekirdek bileşenlerin quercetin, suzilide, -sitosterol ve cistanche glikozit H, TNF, Akt1, STAT3, EGFR ve SRC çekirdek hedeflerine güçlü bağlanma kabiliyeti gösterdiğini göstermiştir. Cistanche Deserticola'nın çok bileşenlerinin ve çok hedeflerinin sinerjistik özelliklerini yansıtır.
Çalışmalar, quercetinin inflamatuar faktörlerin ve enflamatuar aracıların salgılanmasını ve salınmasını önemli ölçüde inhibe edebileceğini ve iyi anti-enflamatuar etkilere sahip olabileceğini göstermiştir [17]. Suzilide, bağışıklık hücreleri tarafından gama-interferon salgılanmasını etkili bir şekilde teşvik edebilir ve bağışıklık hücrelerinin canlılığını artırma ve tümör hücrelerinin canlılığını azaltma etkisine sahiptir. Suzilide ve quercetin ayrıca bağışıklık hücreleri tarafından gama-interferon salgılanmasını teşvik etme etkisine sahiptir. Sinerji [18].
-Sitosterol, IL -6, IL -1 ve TNF- [19] gibi enflamatuar faktörlerin seviyelerini aşağı regüle ederek kolitin ilerlemesini hafifletebilir. Cistancheside H, gliserofosfolipid metabolizması ve araşidonik asit metabolizması gibi sinyal yolları yoluyla oksidatif stres ve enflamatuar yanıtları düzenleyebilir [20].
Quercetin, suzilide, -sitosterol ve cistanche glikozit H'nin IBD tedavisinde Cistanche Deserticola'nın maddi temeli olabileceği görülebilir.
Kegg yol analizi, Cistanche Deserticola'nın esas olarak PI3K/Akt ve EGFR tirozin kinaz inhibitör direnci gibi sinyal yollarını düzenleyerek IBD üzerinde terapötik bir etki oynadığını gösterdi. Çalışmalar, PI3K/AKT sinyal yolunun aktivasyonunun enflamatuar faktörlerin salınmasını teşvik edebileceğine ve enflamatuar hasara neden olabileceğine dikkat çekmiştir [21].
SRC, PI3K/Akt sinyal yolunun yukarı akış sinyal molekülüdür. DSS giren hücreler, SRC/PI3K/AKT sinyal yolunu hızlı bir şekilde aktive edebilir ve makrofajlar ve nötrofiller gibi doğuştan gelen bağışıklık hücrelerinin enflamatuar hasarlı dokulara alınmasını teşvik edebilir, böylece enflamatuar faktörlerin salınımı, vücudun enflamatuar tepkisini arttırır [22].
EGFR, yukarı akışla ilişkili proteinlere bağlanarak, PI3K/AKT sinyal yolunu aktive ederek ve daha sonra enflamatuar yanıtlara aracılık etmek için Wnt sinyal yoluyla işbirliği yaparak fosforile edilebilir [23]. Akt1 nükleer faktör κB'yi aktive edebilir, böylece pro-enflamatuar faktörlerin sentezini ve salınmasını teşvik edebilir ve enflamatuar yanıtı hızlandırabilir [24].
STAT3, JAK/STAT sinyal yolunun temel hedef proteinidir. STAT3 hızla aktive edildiğinde, IL -6 ve IL -1 gibi enflamatuar faktörlerin salınmasını hızlandırabilir ve bu da enflamatuar infiltrasyonda bir artışa yol açabilir [25]
. TNF-, bağışıklık tepkisinde salınan ilk sitokindir, farklı mekanizmalar yoluyla bağırsak iltihabına aracılık edebilir ve aynı zamanda bağırsak epitel hücre apoptozunu doğrudan indükleyebilir [26].
TNF-, AKT1, STAT3, EGFR ve SRC'nin Cistanche Deserticola'nın IBD tedavisinde temel hedefleri olabileceği görülebilir. Diğer hayvan deneyleri, CE'nin yukarıdaki proteinlerin ekspresyon seviyelerini azaltabileceğini ve ağ farmakoloji hedefi tahmininin doğruluğunu kanıtlayabileceğini bulmuştur.
Özetle, bu çalışma Cistanche Deserticola'nın IBD'nin ağ farmakolojisi ve hayvan deneyleri yoluyla tedavisindeki etkisini sistematik olarak doğrulamıştır. Spesifik etki mekanizması, SRC/EGFR/PI3K/AKT sinyal yolunun düzenlenmesi ile ilişkili olabilir.
