Cistanche Tubulosa, Primer ve Metastatik İnsan Kolon Kanseri Hücrelerinin Reaktif Oksijen Türleri Aracılı Apoptozunu İndükler

SOYUT

Kolon kanseri dünya çapında en sık görülen üçüncü kanserdir. Geleneksel tedaviler, ciddi yan etkilerle birlikte orta düzeyde etkinlik göstermiştir, bu nedenle daha güvenli alternatiflere acil bir ihtiyaç vardır. Bu çalışmada, yerel adı Thanoon olan Cistanche tubulosa, geleneksel tıpta bilinen yüksek terapötik potansiyeli ve Orta Doğu bölgesindeki yaygın bolluğu nedeniyle potansiyel bir fitoterapötik strateji olarak kabul edildi. Biyoaktif bileşikler, toz haline getirilmiş Cistanche tubulosa'dan ekstrakte edildi ve ikisi birincil tümörden (CaCo2 ve HCT116) ve ikisi metastatik bölgeden (LoVo ve SW620) türetilmiş olmak üzere dört kolon kanseri hücre hattına karşı antikanser özellikleri açısından test edildi.

Cistanche tubulosa'nın apoptoz indüksiyonu ve hücresel redoks homeostazı üzerindeki etkisi de araştırıldı. Cistanche tubulosa, 1 mg/mL ham ekstraktla 72 saatlik tedaviden sonra, test edilen tüm kanser hücre dizilerinin proliferasyonunda konsantrasyona ve zamana bağlı olarak yüzde 60'tan fazla inhibisyon sergiledi. Proliferasyonun inhibisyonu, apoptozun indüklenmesi, hücre içi reaktif oksijen türleri üretimi ve mitokondriyal süperoksitler ile işaretlendi. Bu veriler, Cistanche tubulosa'nın aditif anti-kolon kanseri tedavisi için umut verici bir aday olduğunu düşündürmektedir. Bu, Cistanche tubulosa'nın kolon kanseri hücrelerine karşı antikanser biyoaktivitesini gösteren ilk çalışmadır.

Cistanche bitki özü ürününün tıbbi tedavisini tıklayın

Kısaltmalar:

7-AAD, 7-Amino-Aktinomisin D; CTE, Cistanche tubulosa özü; EMEM, Eagle'ın Minimum Temel Ortamı; FBS, fetal sığır serumu; DCF, 2,7-diklorofloresin; DCFH-DA, 2,7- diklorodihidrofloresein diasetat; DMEM, Dulbecco'nun Değiştirilmiş Eagle's Medium'u; DMSO, dimetilsülfoksit; MTT, 3-[4,5-dimetiltiazol-2-il]-2,5-difeniltetrazolyum; PE, Fikoeritrin; RFU, bağıl floresan birimleri; ROS, reaktif oksijen türleri

GİRİİŞ

Kolorektal kanser dünya çapında en yaygın kanserlerden biridir (Brenner ve ark., 2014) ve insidansı, azalan fiziksel aktivitenin yanı sıra modern beslenme ve yaşam tarzı nedeniyle 2035'te tahmini 2,4 milyon vaka ile sürekli artmaktadır. Mevcut çabalar, mevcut kolorektal kanser salgınıyla mücadele etmek için yeterli değildir ve bu nedenle, Fitoterapötikler gibi daha güvenli alternatif müdahalelerle birlikte yaşam tarzındaki değişiklikler de dahil olmak üzere etkili önleme ve tedavi için yeni yaklaşımlara ihtiyaç vardır (Weidner ve ark., 2015). Tıbbi bitkilerin hastalıkları tedavi etmek için kullanılması olan fitoterapi, eski insanlık tarihinin kaçınılmaz bir parçası olmuştur. Geleneksel tıpta kullanılan antikanser ajanların yüzde altmışından fazlasını temsil eden şifalı bitkiler, uzun süredir kanserler için alternatif tedavi kaynakları olarak kullanılmaktadır (Balunas ve Kinghorn, 2005; Saibu ve diğerleri, 2015). En iyi bilinen örneklerden bazıları, Catharanthus roseus G. Don. (Apocynaceae), Taxus baccata L. (Taxaceae) ve Camptotheca acuminate Decne (Nyssaceae) (Cragg ve Newman, 2005; da Rocha ve diğerleri, 2001). Melissa officinalis'ten elde edilen ekstrelerde olduğu gibi, çeşitli bitki özlerinin ve fitokimyasalların, reaktif oksijen türleri (ROS) üretiminin indüklenmesine ve kanser hücrelerinin ilişkili apoptozuna atfedilen kolorektal kanserde antitümör etkiler gösterdiği gösterilmiştir (Weidner ve diğerleri, 2015).

Fitoterapötik adaylar arasında, Afrika, Asya ve Akdeniz bölgesinin kurak ve yarı kurak bölgelerinde yaygın olarak dağıtılan bir Orobanchaceae parazit çöl bitkisi olan Cistanche tubulosa'nın (Jiang ve diğerleri, 2009) değerli tıbbi özelliklere sahip olduğu gösterilmiştir. Cistanche tubulosa, geleneksel tıpta yaygın olarak kullanılmaktadır ve böbrek yetmezliği, morbid lökore, metroraji, kadın kısırlığı ve senil kabızlıkta iyileştirici etkileri olduğu öne sürülmüştür (Jiang ve ark., 2009). Geleneksel tıbbi kullanımlarına ek olarak, önemli tıbbi kullanımları Cistanche Tubulosa'nın vasorelaxant (Yoshikawa ve diğerleri, 2006), hepatoprotektif (Morikawa ve diğerleri, 2010), anti-hiperglisemik ve hipolipidemik etkiler (Xiong ve diğerleri, 2013) dahil olmak üzere son on yılda yoğun bir şekilde çalışılmıştır. Cistanche Tubulosa'nın ayrıca bağışıklık sisteminin güçlü bir güçlendiricisi, kemik oluşumunun destekleyicisi ve yaşlanma karşıtı ve yorgunluk önleyici bir ajan olduğu öne sürülmüştür (Xu ve diğerleri, 2014). Ayrıca, Cistanche tubulosa ekstraktının Alzheimer hastalığı modelinde amiloid birikimini bloke ettiği gösterilmiştir (Wu ve diğerleri, 2015). Çeşitli terapötik kullanımlarına rağmen, Cistanche Tubulosa'nın potansiyel bir antikanser ajan olarak etkisi henüz araştırılmamıştır.

Mevcut çalışmada, Cistanche Tubulosa'nın iki primer ve iki metastatik kolon kanseri hücre hattı üzerindeki antikanser etkisini ve bu etkinin altında yatan potansiyel mekanizmaları araştırdık.

MALZEMELER VE YÖNTEMLER

Bitki özünün toplanması ve hazırlanması, Cistanche tubulosa örnekleri 2014 yılında Katar'daki bir çöl bölgesinden toplandı ve bitkinin orijinalliği bir bitki uzmanı tarafından doğrulandı. Fiş örnekleri, ADLQ'daki Toksikoloji ve Çok Amaçlı Departmanında arşivlenir. Güneşte kurutulan bitki numuneleri, Retsch Knife Mill Grindomix GM300 ile ince toz halinde öğütüldü. Yirmi gram toz, 200 mL ultra saf su ile gece boyunca 37 derecede 200 rpm'de bir döner çalkalayıcıda ekstrakte edildi. Ham Cistanche tubulosa özleri (CTE), çözünmeyen bileşikleri peletlemek için 8000 rpm'de 30 dakika santrifüjlendi, süpernatan toplandı ve Labconco Freezone 6 artı Dondurarak kurutucu kullanılarak dondurularak kurutuldu. Kurutulmuş ekstrakt, Dulbecco's Modified Eagle's Medium (DMEM, SIGMA, Almanya) içinde 20 mg/mL'lik bir konsantrasyona yeniden oluşturuldu ve 0.2-mikron membran filtreden steril olarak süzüldü.

Hücre hatları ve hücre bakımı

İnsan kolon kanseri hücre dizileri CaCo2, SW620 ve LoVo, Cell Lines Service'ten (CLS, Eppelheim, Almanya) temin edilirken, HCT 116 hücre dizisi, Katar Üniversitesi Biyoloji ve Çevre Bilimleri Bölümü'nden bir tür hediyeydi. CaCo2 ve HCT11, kolon karsinomunun birincil bölgesinden, SW620 ve LoVo ise metastatik bölgeden türetildi. SW620, HCT116 ve LoVo hücreleri, DME Ortamında kültürlendi ve muhafaza edildi, CaCo2 hücreleri ise Eagle's Minimum Essential Medium'da (EMEM, SIGMA, Almanya) tutuldu. Hücreler, yüzde 10 fetal sığır serumu (FBS, SIGMA, Almanya) ve yüzde 1 Penisilin/Streptomisin (SIGMA, Almanya) ile takviye edilmiş ilgili ortamda, yüzde 5 karbon dioksit içeren nemlendirilmiş bir atmosferde 37 derecede kültürlenmiş tek tabakalı olarak büyütüldü.

Hücre canlılığı deneyi

{{0}}[4,5-dimetiltiazol-2-il]-2,5-difeniltetrazolyum (MTT) testi, sitotoksik aktiviteyi değerlendirmek için kullanıldı. CTE, daha önce açıklanana benzer (Jaganjac ve diğerleri, 2010). 96-Kuyu plakalarında kültürlenen CaCo2, HCT116, SW620 ve LoVo hücrelerinin tohumlama yoğunluğu, oyuk başına 104 hücre idi. Hücreler, tedaviden 24 saat önce yüzde 10 FBS ile takviye edilmiş ilgili ortam içinde plakalandı. 24 saat sonra ortam çıkarıldı ve hücreler, yüzde 5 C02 içeren nemlendirilmiş bir atmosferde 37 derecede 24, 48 ve 72 saat boyunca 0, 0.25, 0.5, 1 ve 2 mg/mL CTE ile muamele edildi. CTE tedavisi üzerine ortam çıkarıldı ve her bir oyuğa 40 uL MTT solüsyonu (0.5 mg/mL) eklendi.

3 saatlik inkübasyonun ardından MTT solüsyonu çıkarıldı, formazan ürünü dimetilsülfoksit (DMSO, SIGMA, Almanya) içinde çözüldü ve absorbans bir mikroplaka okuyucu (Infinite 200 PRO NanoQuant, Tecan Trading AG, İsviçre) ile 590 nm'de ölçüldü. .

Apoptoz testi

CaCo2, HCT116, SW620 ve LoVo hücrelerinde apoptoz, vital boya (Becton) olarak 7-Amino-Aktinomisin D (7-AAD) içeren PE Annexin V Apoptosis Detection Kit I kullanılarak tespit edildi Dickinson International, Belçika) üreticinin talimatlarına göre. Kısaca hücreler, CTE eklenmeden önce (0, 0.5) 24 saat boyunca yüzde 10 FBS ile takviye edilmiş ilgili bir ortamda 5×104 hücre/oyuk yoğunlukta kuyucuklu plakalara ekildi. veya 1 mg/mL). 24 CTE inkübasyonunun ardından hücreler toplandı, iki kez soğuk fosfat tamponlu salinle yıkandı ve karanlıkta, oda sıcaklığında 15 dakika boyunca Fikoeritrin (PE) Annexin V ve 7-AAD ile boyandı. Lekeli hücreler, FACS kullanılarak akış sitometrisi ile 1 saat içinde analiz edildi. Minimum 104 hücreli düşük akış hızında Aria III akış sitometresi ve FACSDiva yazılımı (Becton Dickinson). Hücrelerin 4 saat süreyle 6 uM kamptotesin (SIGMA) ile muamele edilmesi deney için pozitif kontrol olarak kullanıldı.

Hücre içi ROS üretimi

Hücre içi ROS üretimi, 2,7- diklorodihidrofloresein diasetat (DCFH-DA, SIGMA, Almanya) kullanılarak incelenmiştir. DCFH-DA, hücre içi ROS ile floresan bileşik 2, 7- diklorofloreseine (DCF) oksitlenen floresan olmayan bir probtur (Poljak-Blazi ve diğerleri, 2011). DCFHDA testi, daha önce tanımladığımıza benzer şekilde yapıldı (Cindric ve diğerleri, 2013; Poljak-Blazi ve diğerleri, 2011). Kısaca, kuyucuklu siyah plakalarda kültürlenen CaCo2, HCT116, SW620 ve LoVo hücrelerinin tohumlama yoğunluğu, kuyu başına 104 hücre idi. Hücreler, 24 saat boyunca yüzde 10 FBS ile desteklenmiş ilgili ortam içinde plakalandı.

Tedaviden önce hücreler 10 uM DCFH-DA ile 37 derecede 30 dakika süreyle yüzde 5 CO2 / yüzde 95 hava içinde inkübe edildi. Hücreler daha sonra yıkandı vefenol kırmızısı olmadan ortamda {{0}}, 0.5 ve 1 mg/mL CTE ile işlendi. Hücre içi ROS oluşumu, üst flüoresan ve gaz kontrol modülüne sahip bir mikroplaka okuyucu (Infinite 200 PRO, Tecan Trading AG, İsviçre) kullanılarak 37 derece ve yüzde 5 CO2'de 25 saat boyunca sürekli olarak izlendi. Floresans yoğunluğu, 500 nm'lik bir uyarma dalga boyu ve 529 nm'de emisyon tespiti ile ölçüldü. Rastgele birimler, bağıl flüoresans birimleri (RFU), doğrudan flüoresans yoğunluğuna dayalıydı.

Mitokondriyal süperoksit üretimi

CTE'nin mitokondri tarafından süperoksit oluşumunu indükleme yeteneği, hücre geçirgen, mitokondri hedefli bir MitoSOX Red probu (Life Technologies) ve nükleer boyama için Hoechst 33342 (Life Technologies) kullanılarak tahmin edildi. CaCo2, HCT116, SW620 ve LoVo hücreleri, 24 saat boyunca yüzde 10 FBS ile takviye edilmiş ilgili bir ortamda, oyuk başına 104 hücre yoğunluğunda 96-kuyu plakalarına ekildi . Hücreler daha sonra 20 dakika boyunca 4 uM MitoSOX ve 2 uM Hoechst 33342 ile yüklendi, fazla boya yıkandı ve oyuklar 24 saat boyunca 37 derece ve yüzde 5 C02'de 0, 0.5 ve 1 mg/mL CTE ile işlendi. Floresans yoğunluğu, MitoSOX için 510 nm'lik bir uyarma dalga boyu ve 580 nm'de emisyon tespiti ve Hoechst 33342 için 350 nm'lik bir uyarma dalga boyu ve 461 nm'de emisyon tespiti ile üst floresanlı bir mikroplaka okuyucu (Infinite 200 PRO, Tecan Trading) kullanılarak ölçüldü. AG, İsviçre)

istatistiksel analiz

Tanımlayıcı istatistikler, ortalama artı /− SD olarak gösterildi. Gruplar arasındaki farkların anlamlılığı Student t-testi ve Ki-kare testi kullanılarak değerlendirildi. İkiden fazla grup karşılaştırıldığında, uygun post hoc testiyle tek taraflı ANOVA kullandık. Mircosoft Windows için SPSS 11.01 kullanıldı. P'nin 0.05'ten küçük olduğu farklar istatistiksel olarak anlamlı kabul edildi.

SONUÇLAR

CTE'nin insan kolon kanseri hücre dizilerinin çoğalması üzerindeki etkisi Şekil 1'de gösterilmektedir. Test edilen tüm CTE konsantrasyonları, CaCo2 hücre dizisi üzerinde konsantrasyona ve zamana bağlı bir şekilde (Şekil 1A) güçlü bir inhibitör etki göstermiştir. Yetmiş iki saatlik CTE tedavisi, CaCo2 hücrelerinin büyümesini kontrole kıyasla yüzde 60'den fazla engelledi (tüm konsantrasyonlar için p < 0.05). CTE tedavisinin HCT116 hücre büyümesi üzerindeki önemli etkisi de tüm zaman noktalarında en yüksek iki konsantrasyonda (1 mg/mL ve 2 mg/mL) tespit edildi ve ikinci bir konsantrasyonda yüzde 70'in üzerinde azalmaya ulaştı (Şekil 1B, p < 0,05).

İki düşük CTE konsantrasyonu ({{0},25 ve 0,5 mg/mL), 24 saat sonra hücrelerin HCT116 büyümesini önemli ölçüde azaltmış olsa da (p<0.05), 72="" they="" had="" no="" significant="" effect="" following="" hours="" of="" treatment="" compared="" to="" the="" control="" p="">{{0}}.{{10}}5). CTE ile proliferasyonun zamana ve konsantrasyona bağlı inhibisyonu ayrıca LoVo hücrelerinde en yüksek konsantrasyonda yüzde 60'den fazla doğrulandı (p < 0.05) (Şekil 1C) ve test edilen dört CTE konsantrasyonunun tümü, 48 saat sonra SW620 hücrelerinin büyümesini azalttı (Şekil 1D, tümü için p < 0.05). 72 saatlik tedaviden sonra, aynı etki yalnızca en yüksek iki konsantrasyon için gözlenirken (p < 0.05), 0.25 ve 0.5 mg/mL konsantrasyonları kontrole kıyasla önemli bir etki göstermedi (p > 0.05). 0,5 ve 1 mg/mL CTE tedavisinin apoptoz indüksiyonu üzerindeki etkisi, dört hücre hattının hepsinde ayrıca test edildi (Şekil 2). 24 saatlik 0,5 mg/mL (p<0.05, Figure 2B and 2C) and in all cell lines at 1 mg/mL (p<0.05). A significant increase in necrotic or late apoptotic cell number was further observed in CaCo2 and SW620 cell lines (p<0.05, Figure 2A and 2D).

CTE'nin hücre içi ROS üretimini indükleme yeteneği, Şekil 3'te gösterilmektedir. CTE tedavisinden üç saat sonra, tüm hücre hatlarında hücre içi ROS üretiminde güçlü bir artış oldu (p<0.05). The intracellular ROS production increased progressively throughout the 25 hours of treatment in a time and concentration-dependent manner. Furthermore, the staining of cells with a mitochondria-targeted probe revealed a strong impact of CTE on mitochondrial superoxide production in a concentration-dependent manner (Figure 4). The highest increase in superoxide production by mitochondria was observed in HCT116 (69%, Figure 4B) and LoVo cells (82%, Figure 4C) following 24 hours of treatment with 1 mg/mL of CTE.

Şekil 1:

Cistanche tubulosa'nın kolon kanseri hücre dizilerinin canlılığı üzerindeki etkisi. (A) CaCo2, (B) HCT116, (C) LoVo ve (D) SW620 hücrelerinin MTT tahlili ile ölçülen hücre canlılığı, tedavi edilmemiş kontrol kolon kanseri hücre hattının yüzdesi olarak sunulur. Temsili deneyin 5 kopyası için ortalama değerler (±SD) verilmiştir: (*) anlamlılık p<0.05 in comparison to control untreated respective cells.

İncir. 2:

Cistanche tubulosa su özü, insan kolon kanseri hücrelerinde apoptozu indükler. (A) CaCo2, (B) HCT116, (C) LoVo ve (D) SW620 hücrelerinin Annexin-V-FITC akış sitometri analizleri, tedavi edilmemiş kontrol kolon kanseri hücre hattının yüzdesi olarak sunulur. Temsili deneyin 3 kopyası için ortalama değerler (±SD) verilmiştir: (*) anlamlılık p<0.05 in comparison to control untreated respective cells.

Şek. 3:

Cistanche tubulosa su özü, zamana ve doza bağlı olarak hücre içi ROS üretimini indükler. (A) CaCo2, (B) HCT116, (C) LoVo ve (D) SW620 hücrelerinde DCFH-DA testi ile ölçülen ROS üretimi, ilgili 5-kopyaları için ortalama RFU değerleri (±SD) olarak sunulur. temsili bir deney. (*) Anlam p<0.05 in comparison to control untreated colon cancer cells.

4:

Cistanche tubulosa su özü, insan kolon kanseri hücrelerinde mitokondriyal süperoksit üretimini indükler. A) CaCo2, (B) HCT116, (C) LoVo ve (D) SW620 hücrelerinde mitokondri hedefli MitoSOX Kırmızı probunun floresans yoğunluğu, tedavi edilmemiş kontrol kolon kanseri hücre hattının yüzdesi olarak sunulur. Temsili deneyin 5 kopyası için ortalama değerler (±SD) verilmiştir: (*) anlamlılık p<0.05 in comparison to control untreated colon cancer cells.

TARTIŞMA

Daha önceki çalışmalarda Cistanche tubulosa'nın çok sayıda tıbbi özelliği bildirilmiş olsa da, bu, malign hücrelerde anti-proliferatif etkisinin ilk raporudur. Cistanche tubulosa yüksek oranda polar bir çözücü olan suyla ekstrakte edilen biyoaktif bileşikler, güçlü antikanser biyoaktivitesi gösterdi. Daha önce suda çözünen Cistanche tubulosa'nın etkinliğini metanol ve etil asetat gibi diğer çözücülere karşı karşılaştırmıştık, ancak su özleri en umut verici antikanser aktivitelerini sergiledi (veriler gösterilmemiştir).

CTE'nin 1 mg/mL ve 2 mg/mL'de hem birincil hem de metastatik kolon kanseri hücre dizilerinin büyümesini yüzde 60'ını inhibe etme kabiliyetini gösterdik ve kolon kanseri tedavisi olarak Cistanche tubulosa'nın potansiyel olarak önemli bir rolünü ortaya koyduk. Normal hücrelerle karşılaştırıldığında, kanser hücreleri genellikle redoks homeostazında bir rahatsızlık ile karakterize edilir ve mevcut antikanser tedavilerinin ortak bir stratejisi, hücresel oksidatif stresi arttırmaktır (Yang ve diğerleri, 2013). Fizyolojik olarak düşük ROS seviyeleri sinyal molekülleri olarak önemli bir role sahip olsa da, aşırı ROS üretimi kanser kararsızlığına ve maligniteye katkıda bulunabilir (Liou ve Storz, 2010). Paradoksal olarak, hücresel redoks homeostazındaki bu dengesizlik, kanser hücrelerini ROS kaynaklı hücre ölümüne karşı daha savunmasız hale getirir (Jaganjac ve diğerleri, 2008; Nogueira ve Hay, 2013). Bu çalışmada bildirilen CTE'nin antiproliferatif etkisine, apoptozda temel roller oynayan çoklu yolları hedefleyen, ekstrakt içindeki bilinen ve bilinmeyen bileşiklerin çeşitli hücre dışı ve hücre içi mekanizmaları aracılık edebilir. Farklı hücre ölümü modları arasında ayrım yapmak için, gözlenen CTE kaynaklı sitotoksisiteden sorumlu potansiyel mekanizmayı araştırdık.

Verilerimiz, CTE'nin hücre içi ROS üretimini ve sonuç olarak ROS kaynaklı hücre ölümünü arttırdığını göstermektedir. Hücrenin Redoks durumu ayrıca apoptozu düzenlemede çok önemli bir rol oynar ve mitokondriyal elektron taşıma zinciri, hücresel ROS üretiminin ana bölgelerinden biridir (Trachootham ve diğerleri, 2008). Ayrıca, hücre içi ROS, hem mitokondriye bağımlı hem de bağımsız yollar yoluyla hücresel apoptoza neden olabilir (Sinha ve diğerleri, 2013). Gerçekten de, verilerimiz ayrıca CTE'nin neden olduğu fosfatidilserin dışsallaşmasının, hem birincil hem de metastatik kanser hücre hatlarında apoptozda yaygın bir etki olduğunu gösterir; bu, CTE'nin neden olduğu ölüm mekanizmasına nekrozdan ziyade apoptoz aracılık ettiğini düşündürür. Kanser hücrelerinde apoptozun aktivasyonu, düzeltici bir stratejidir ve birçok antikanser ilacı, kanser hücrelerinde apoptotik etkiler gösterebilir.

Bu nedenle, kanser hücrelerinde proapoptotik aktiviteye sahip bileşikler veya özler, antikanser ilaç araştırmalarında potansiyel olarak yararlıdır (Wong, 2011). CTE'nin neden olduğu proapoptotik etkiye mitokondrinin neden olduğu ROS mekanizmasının aracılık edip etmediğini belirlemek için, CTE ile muamele edilmiş hücrelerde mitokondri hedefli bir flüoresan probu kullanarak süperoksit üretimini ölçtük. Verilerimiz, CTE'nin mitokondriyal süperoksit üretimini uyardığını açıkça göstermektedir, bu da Cistanche tubulosa antikanser aktivitesinin en azından kısmen mitokondri kaynaklı ROS mekanizması aracılığıyla aracılık ettiğini göstermektedir.

SONUÇLAR

Sonuç olarak, verilerimiz, çöl bitkisi Cistanche tubulosa'nın su ekstraktının, kolon kanserinin önlenmesi ve tedavisi için diğer geleneksel tedavilerle kombinasyon halinde antikanser yaklaşımı için umut verici bir adayı temsil edebileceğini göstermektedir. Ayrıca, bitki özünün kanser hücrelerine karşı toksisitesine, artan hücre içi ROS üretiminin ve en azından kısmen mitokondriyal bağımlı apoptozun aracılık ettiğini gösterdik. Antikanser aktiviteden sorumlu bireysel biyolojik olarak aktif bileşenleri izole etmek ve karakterize etmek için ileri çalışmalar devam etmektedir.

Bu ekstraktın etkili bir kemopreventif ajan olarak potansiyel kullanımını değerlendirmek ve kolon kanseri hücreleri üzerindeki etki mekanizmalarını moleküler düzeyde anlamak için daha fazla araştırmaya ihtiyaç vardır. Cistanche tubulosa'nın kanseri önlemede gözlenen yararlı sağlık etkilerini doğrulamak için daha ileri klinik öncesi ve klinik çalışmalara da ihtiyaç vardır.

TEŞEKKÜRLER

Mali destek ve sponsorluk: Bu çalışma Anti-Doping Lab Qatar tarafından desteklenmiştir.

Çıkar Çatışması: Yazarlar herhangi bir çıkar çatışması beyan etmemektedir.

REFERANSLAR

Balunas MJ, Kinghorn, AD. Şifalı bitkilerden ilaç keşfi. Hayat Bilimi 2005;78:431-41.

Brenner H, Kloor M, Pox CP. Kolorektal kanser. Lancet 2014;383,1490-502.

Cindric M, Çipak A, Zapletal E, Jaganjac M, Milkovic L, Waeg G, Stolc S, Zarkovic N, Suzana Borovic S. Stobadine, 4-hidroksinonenal'in neden olduğu bir bağırsak bariyeri modelinin bozulmasını azaltır. Toksikol İn Vitro. 2013;27:426-32.

Cragg GM, Newman DJ'i. Antikanser ajanlarının kaynağı olarak bitkiler. JEthnopharmacol. 2005;100:72-9.

da Rocha AB, Lopes RM, Schwartsmann G. Antikanser tedavisinde doğal ürünler. CurrOpinPharmacol. 2001;1:364-9. Jaganjac M, Matijevic T, Cindric M, Cipak A, Mrakovic L, Gubisch W, Zarkovic N. İnsan embriyonik böbrek hücrelerinde nominal 4-hidroksi-2- ile CMV-1 promotörünün indüksiyonu. Açta Biochim Pol. 2010;57:179-83.

Jaganjac M, Poljak-Blazi M, Zarkovic K, Schaur RJ, Zarkovic N. Walker 256 karsinomunun spontan regresyonunda granülositlerin katılımı. kanser Letonya 2008;260:180-6

Jiang Y, Tu PF. Cistanche türlerinde kimyasal bileşenlerin analizi. J Chromatogr A. 2009;1216:1970-9.

Liou GY, Storz P. Kanserde reaktif oksijen türleri. Serbest Radik Çöz. 2010;44:479-96.

Morikawa T, Pan Y, Ninomiya K, Imura K, Matsuda H, Yoshikawa M, Yuan D, Muraoka O. Çöl bitkisi Cistanche tubulosa'dan hepatoprotektif aktiviteye sahip asillenmiş feniletanoid aminoglikozitler. Bioorg Med Kimya 2010;18:1882-90.

Nogueira V, Hay N. Moleküler yollar: kanser hücrelerinde reaktif oksijen türleri homeostazı ve kanser tedavisi için çıkarımlar. Klinik Kanser Arş. 2013;19:4309-14.

Poljak-Blazi M, Jaganjac M, Sabol I, Mihaljevic B, Matovina M, Grce M. Ferrik iyonların reaktif oksijen türleri oluşumu, rahim ağzı kanseri hücre hatları büyümesi ve E6/E7 onkojen ekspresyonu üzerindeki etkisi. Toksikol Vitro. 2011;25:160-6.

Saibu GM, Katerere DR, Rees DJG, Meyer M. Tulbaghia violacea yapraklarının ve soğanlarının su özlerinin in vitro sitotoksik ve proapoptotik etkileri. J Etnofarmakol. 2015;164:203-9.

Sinha K, Das J, Pal PB, Sil PC. Oksidatif stres: apoptozun mitokondriye bağımlı ve mitokondriden bağımsız yolları. Arch Toxicol.2013; 87:1157-80. Trachootham D, Lu W, Ogasawara MA, Nilsa RD, Huang P. Hücre sağkalımının Redox düzenlemesi. Antioksid Redoks Sinyali. 2008;10:1343- 74.

Weidner C, Rousseau M, Plauth A, Wowro SJ, Fischer C, Abdel-Aziz H, Sauer S. Melissa officinalis ekstresi apoptozu indükler ve reaktif oksijen türlerinin oluşumu yoluyla kolon kanseri hücrelerinde proliferasyonu inhibe eder. Bitki ilacı. 2015;22:262-70.

Wong RS. Kanserde apoptoz: patogenezden tedaviye. J ExpClin Kanser Arş. 2011;30:87.

Wu SH, Chou FP, Chyau CC, Chen JH, Tu SF, Lin HH. Wasabia japonica ekstresinin Hep3B karaciğer kanseri hücrelerinde ROS birikimi, DNA hasarı ve p73-aracılı apoptoz yoluyla kanser önleyici etkileri. J Fonksiyonel Gıdalar. 2015;14:445-55.

Xiong WT, Gu L, Wang C, Sun HX, Liu X. Tip 2 diyabetik db/db farelerde Cistanche tubulosa'nın antihiperglisemik ve hipolipidemik etkileri. J Etnofarmakol. 2013;150:935-45.

Xu R, Sun S, Zhu W, Xu C, Liu Y, Shen L, Shi Y, Chen J. Çin'deki farklı Cistanche türlerinden etanol özlerinin HPLC parmak izi ile birleştirilmiş çok adımlı kızılötesi makro parmak izi özellikleri. J Mol Yapısı. 2014;1069:236-244.

Yang Y, Karakhanova S, Werner J, Bazhin AV. Kanser biyolojisinde ve antikanser tedavisinde reaktif oksijen türleri. Curr Med Chem. 2013;20:3677-92.

Yoshikawa M, Matsuda H, Morikawa T, Xie H, Nakamura S, Muraoka O. Feniletanoid aminoglikozitler ve Cistanche tubulosa'dan damar gevşetici aktiviteye sahip asillenmiş oligo şekerler. Bioorg Med Kimya 2006;14:7468-75.

For more information:1950477648nn@gmail.com