Amerika Birleşik Devletleri Farmakopisi, Avrupa Farmakopisi, Japon farmakopisi ve Çin farmakopisi arasında mikrobiyal limit testi ve TCM kaynatma parçalarının kriterlerinin karşılaştırmalı çalışması

SOYUT

Amaç:Mikrobiyolojik sınır testi ve kriterlerinin farkını karşılaştırmak içinTCM kaynatmaAmerika Birleşik Devletleri Pharmacopeia (USP43), 1 0. 0}}}}}}}}. Pharmacopeia (CHP2020) ve Çin'deki TCM kaynatma parçaları için mikrobiyolojik standartların revizyonu ve iyileştirilmesi için referans sağlamak. Yöntemler: Mikrobiyal numaralandırma testleri yöntemindeki farklılıklar (örnekleme ve numune hazırlama, bakteri ve kültür ortamı seçimi, mikroorganizmalar ve ısıya dirençli bakteriler, vb.), Belirtilen mikroorganizmalar (numune ön işlemleri dahil testler, zenginleştirme, ayrılma ve tanımlama, vb. CHP2020. Sonuçlar ve Sonuçlar: TCM kaynatma parçalarının mikrobiyolojik incelemesi açısından USP43, EP10.0, JP17'nin kendi bağımsız hükümleri vardı. CHP2020 "Genel Kural 1108" ekledi. Muayene maddeleri açısından, toplam aerobik bakteri sayısı ve toplam kombine maya ve kalıp sayımına ek olarak, CHP2020 ve EP10.0, kontrol bakterilerinin (safra dirençli Gram-negatif bakteriler, Escherichia coli, Salmonella) incelenmesi için üç yöntem sağladı. Temel olarak, JP17 takviye edilmiş Staphylococcus aureus testi; Bununla birlikte, USP43 Clostridium test yöntemi ekledi ve sakıncalı mikroorganizmalar risk değerlendirmesi kavramını ortaya koydu; CHP2020 ayrıca ısıya dayanıklı bakterileri saymak için yeni bir yöntem ekledi. Mikrobiyal sınır kriterleri açısından, USP43, EP10.0 ve JP17'den daha katı olan TCM kaynatma parçalarının sınıflandırılmasında en ayrıntılı olanıydı; CHP2020, TCM kaynatma parçalarının kontrol bakterilerinin incelenmesi için birleşik bir sınır oluşturmamıştır. CHP2020, "TCM özleri ve TCM kaynatma parçaları için mikrobiyal sınır standardını" revize etti, ancak ABD, Avrupa ve Japonya'nın farmakopesi ile karşılaştırıldığında mükemmel değildi. Mikrobiyal kontaminasyonun mevcut durumuna ve TCM kaynatma parçalarının kontrolüne göre, farmakopea ile TCM ile ilgili ürünlerin mikrobiyal sınır testi ve kriterlerinin kademeli olarak geliştirilmesi ve karşılık gelen ürünlerin mikrobiyal sınır seviyesinin makul bir şekilde rafine edilmesi gerektiği önerilmektedir.

Anahtar KelimelerTCM kaynatma parçası;Farmakope; Mikrobiyal sınır testi; sınır kriterleri; karşılaştırmalı çalışma

Çin bitkisel ilaçlarıÇin bitkisel ilaçlarının işlenmesinden sonra doğrudan TCM klinik uygulamasında kullanılabilen ürünlerdir. Bunların çoğu doğal bitkilerden, hayvanlardan veya minerallerden türetilir ve genellikle çok sayıda mikroorganizma taşır [1-2]. Çoğu Çin bitkisel ilaçının işleme işlemi basittir (temizlik, kızartma, vb. Gibi) ve sterilizasyon eksiktir, bu da artık patojenik mikroorganizmalara yol açar [3-4]. Buna ek olarak, ulaşım ve depolama sırasında, operatörlerle ve dış temiz olmayan ortamlarla temas da Çin bitkisel ilaçlarının patojenik mikroorganizmalar tarafından kontamine olma olasılığını da artırır, böylece güvenliklerini etkilemektedir [5]. Çin bitkisel ilaçlarının mikrobiyal kontaminasyonu yeterince dikkat çekmemiştir ve işleme sırasında mikrobiyal popülasyonlardaki değişiklikler hakkında araştırma eksikliği vardır, bu da Çin bitkisel ilaçlarının mikrobiyal güvenlik değerlendirmesinin olmamasına yol açar. Birçok potansiyel patojenik mikroorganizma (ısıya dirençli bakteriler ve bakteriyel toksinler gibi) etkili bir şekilde kontrol edilmemiştir, bu da Çin bitkisel ilaçlarını kullanan immünokromize hastalar riskini artırmıştır [6]. Çin farmakopesi (Cilt 1) 2015 baskısı, Çin bitkisel ilaçlarının fiziksel ve kimyasal özelliklerinin analizi için çeşitli tanımlama ve muayene yöntemleri içermesine rağmen, ilgili mikroorganizmalar için spesifik inceleme yöntemleri ve sınır standartları uzun zamandır eksiktir. Aynı zamanda, doğrudan ithal edilen Çin bitkisel ilaçları dışında, Çin farmakopesi (cilt 4) 2015 baskısının genel kurallarında, Çin bitkisel ilaçlarının diğer formları için mikrobiyal inceleme öğeleri belirtilmemiştir [7].

Çin'in biyoteknoloji şirketinden bir Çin tıbbı CoA

Daha fazla ayrıntı almak için yukarıdaki resme tıklayın

Çin tıbbıdenirbitkisel ilaçAvrupa'da, Japonya'da kaba tıp ve Amerika Birleşik Devletleri'nde beslenme takviyeleri.

Konsepti ülkemdeki Çin bitkisel ilaçlarıyla tam olarak aynı olmasa da [{{{0}}}}}}}], Avrupa farmakopesi 1 0. 0 (ep10.0). Mikrobiyal muayene yöntemlerini ekleyin ve ilgili ürünler (bitkisel ilaçlar, ham ilaçlar veya beslenme takviyeleri) için standart standartları içerir. Çin Pharmacopoeia'nın (CHP2020) (Cilt 4) [13] 2020 baskısı "Çin bitkisel ilaç parçaları için mikrobiyal sınır test yöntemi" (genel kural 1108) ekledi, ancak ilgili mikrobiyal sınır standartları hala eksiktir ve sanat-type-type-type-type-type-type-type-type-type-type-type-type-type-type-type-type-type-type-type-typines için birleştirilmiş ve net bir regülasyon yoktur. Bu makale, USP43, EP10.0, JP17 ve CHP2020 arasındaki farklılıkları mikrobiyal test yöntemleri açısından karşılaştırır ve Çin bitkisel ilaç parçaları için standart standartları anlar, Çin bitkisel ilaç parçaları için mikrobiyal standartların revizyon yönünü anlar ve Çince bitkisel ilaç parçaları için mikrobiyal sınırlar oluşturma gerekliliğini tartışır ve Çince bitişler için mikrobik sınırlar oluşturma, denetim için revize için referans için referans sağlama için referans sağlama için referans sağlamak için bu, denetleme sağlar, Bitkisel ilaç parçaları.

1 Mikrobiyal Çin bitkisel ilaç sayısı

Yazar, EP1 0 'daki Çin bitkisel ilaçlarıyla ilgili mikrobiyal test yöntemlerini karşılaştırdıktan sonra, ilk üç farmakopoeias'ın steril olmayan ürünlerin mikro bedellerine uluslararası olarak koordine edildiğini ve entegre edilmesine rağmen, üçünün kendi bağımsız mizahlarına sahip olmasına rağmen, üçü, kendi bağımsız olarak entegre olmasına rağmen, EP10.0 "2.6.12" ve "2.6.31", JP17 "5.02", USP43 "2021" ve "2022" gibi ilaçlar, CHP2020, Çin bitkisel ilaçlarında mikroorganizmaların tespiti için "Genel Prensip 1108" ekledi. Test maddeleri açısından, dört farmakopeaların tümü toplam aerobik mikrobiyal sayı (TAMC) ve toplam kombine maya ve kalıp sayımı (TYMC) için muayene yöntemlerini belirtir. Ana farklılıklar örnekleme ve örnekleme, bakteriyel türler ve kültür ortamına ve mikrobiyal sayma yöntemlerine yansır. Ayrıntılar için Tablo 1'e bakınız.

1.1 Örnekleme ve örnekleme

Çin bitkisel ilaçları, farklı şekiller, dokular ve boyutlara sahip çeşitli tiplerde bulunur. Ek olarak, mikrobiyal kontaminasyon düzensizdir, bu nedenle örnekleme ve incelemenin temsili çok önemlidir [14]. Dört farmakopei, "örnekleme ve örnekleme" hükümlerinde belirgin farklılıklar vardır. Bunlar arasında, EP1 0. 0 "2.6.12" [10] ve USP43 "2021" [12], Çin bitkisel ilaçlarının kimyasal ilaçlar olarak örneklenmesi için 10 g veya 10 mL örnekleme hacmine sahip. JP17 "5.02" [11] Çin bitkisel ilaçları için dört örnekleme yöntemini öngörür: (1) küçük hacimli veya toz örnekleri için 50-250 g numune alın ve karıştırın; (2) Büyük hacimli numuneler için 250-500 g numuneyi alın ve karıştırın ve doğrayın; (3) 100 g'dan az olmayan tek numuneler için en az 5 veya 500 g alın, doğrayın ve karıştırın; (4) Çözümler veya preparatlar şeklinde numuneler için bunları karıştırın ve doğrudan örnek alın. Muayene için numune olarak 10 g veya 10 mL karışık numune alın. CHP2020 "Genel Kural 1108" [13] "Aksi belirtilmedikçe, test örnekleri tıbbi malzemeleri ve kaynatma parçalarını ('genel kural 0211') yöntemi uyarınca çizilecektir. hacim; aksi belirtilmedikçe test hacmi 25 g veya 25 mL olmalıdır ve daha düşük yoğunluklu çeşitler veya çeşitler için test hacmi azaltılabilir. "

Çin'in biyoteknoloji şirketinden bir Çin tıbbının parmak izi

1.2 Suş ve Kültür Ortamı Seçimi

Gerinim seçimi açısından, USP43, Staphylococcus aureus ATCC 6538, Escherichia coli ATCC 8739, Bacillus subtilis ATCC 6633, Candida}} 231 ve Aspergillus brasiliensis 4 ve Aspergillus brasiliens takım elbise için Medya Methoingy için beş mikroorganizmayı listeler. EP10.0 ve JP17, Escherichia coli'yi Pseudomonas aeruginosa ATCC 9027 ile değiştirdi ve yukarıda belirtilen suşlara, endüstriyel, gıda ve deniz bakteriyel (NCIMB) ulusal koleksiyonlarının eşdeğer gerinim sayılarını verdi, toplama de l'stitut ciper (nite biyolojik kaynak merkezi). Bu hüküm, Uluslararası Uyum Konseyi (ICH) [10-11] koordinasyon önerisi ile tutarlıdır.
CHP2 0 20 suşlarına EP10.0 ve JP17 ile aynıdır, ancak sadece CMCC suşlarına izin verilir [13].
Kültür medyasının seçimi açısından, Çin bitkisel ilaçlarının genellikle büyük miktarda çözünmeyen maddeler ve yüksek bir bakteri ve mantar kontaminasyonu olasılığı içerdiğini göz önünde bulundurarak, TSA kültür medyası ve SDA kültür medyasını geleneksel sayma kültür medyası olarak kullanmanın yanı sıra, yukarıdaki faktörler TAMC ve TYMC sayma sonuçlarını etkileyebilir. JP17 ayrıca, bakteriyel kolonileri ve diğer safsızlıkları ayırt etmek için TSA kültür ortamına belirli bir TTC konsantrasyonunun ilave edilebileceğini öngörür; Mantar büyümesi, numunenin TAMC sayma sonuçlarını etkiliyorsa, mantar büyümesini inhibe etmek için TSA kültür ortamına amfoterisin B eklenebilir; Antibiyotikler içeren SDA kültür ortamında mantar yayılır ve büyürse, fenomenin yayılmasını engellemek için Rose Bengal eklenebilir [11]. CHP2020, TYMC sayımı bakteriyel büyümeden etkilendiğinde, antibiyotikler (kloramfenikol, gentamisin) veya diğer seçici kültür ortamı (gül Bengal sodyum agar ortamı gibi) içeren SDA kültür ortamının kullanılabileceğini öngörür [13].
Ancak, ne USP43 ne de EP1 0. 0, ilgili gereksinimleri açıkça belirtmez.

1.3 Mikrobiyal sayma yöntemi

Mikrobiyal sayma yöntemleri açısından, EP1 0. 0 ve JP17, membran filtrasyon yöntemi, plaka sayma yöntemi (dökme, kaplama) ve MPN yöntemi [10-11]; USP43 plaka sayma yöntemini (dökme) [13] belirtmezken, CHP2020 sadece plaka sayma yöntemini (dökme) belirtir [13]. MPN yöntemi düşük doğruluğa sahip olduğundan ve mantar sayımı için son derece güvenilmez olduğundan, MPN yöntemi yalnızca diğer sayma yöntemlerinin uygulanamadığı durumlar için uygundur ve sadece TAMC sayımı için kullanılabilir. Yöntem uygulanabilirliği açısından, testten önce bir yöntem uygulanabilirliği araştırması yapılmalıdır. USP43, geçerli bakteri sayısının geri kazanım oranının%70'den fazla olmasını gerektirir [12] ve diğer üç farmakopoeias 2 [10-11, 13] bir iyileşme faktörü gereksinimini benimser.
TAMC sayımı ve TYMC sayımının kültür sıcaklığı için gereksinimler, her farmakopeada tutarlıdır, ancak kültür süresi ve uygun koloni sayma aralığı ile ilgili düzenlemeler biraz farklıdır.

1.4 Isıya dayanıklı bakteri sayısı

Çin bitkisel ilaçları genellikle tüketimden önce ısıtılır. Isıtma numunenin biyoburdenini azaltabilir ve patojenite riskini azaltabilir, ancak ısıtma Çin bitkisel ilaçlarında ısıya dayanıklı bakterileri öldüremez. Ayrıca ürün bozulmasına ve biyotoksinlerin birikmesine kolayca yol açabilir. Bu nedenle, CHP2020, bir su banyosuna ({98-100 derece) 30 dakika süreyle yerleştirildikten sonra toplam aerobik sayım yöntemi ile tespit edilen mikroorganizmalar için genel terim olarak tanımlanan bir ısıya dayanıklı bakteri sayımı maddesi eklemiştir [13]. Bu yöntem, kaynatma tipi Çin bitkisel ilaçlarına yöneliktir ve ısıtma işleminden sonra bu tür Çin bitkisel ilaçlarındaki artık mikroorganizmaları değerlendirir; Diğer üç farmakopei, ilgili yöntemleri içermez.