Akıllı Duyusal Teknoloji ve Kemometriye Dayalı Farklı Mevsimlerde Hasat Edilen Cistanche Deserticola Kalitesinin Karşılaştırılması Ⅱ
Oct 14, 2025
2.4 Polisakkarit içerik analizi
2.4.1 Referans solüsyonunun hazırlanması Uygun miktarda susuz glikozu tam olarak tartın, çözün ve kütle konsantrasyonu 0,2 mg/mL olan bir glikoz referans solüsyonu hazırlayın.
2.4.2 Test solüsyonunun hazırlanması 0,05 g Cistanche tozunu (No. 4 elekten geçirilmiş) 1,5 mL'lik bir santrifüj tüpüne tam olarak tartın, 1 mL su ekleyin ve iyice karıştırın. 100 derecelik su banyosunda 2 saat ekstrakte edin, soğutun ve 10 dakika boyunca 10.000xg'de santrifüjleyin. Süpernatantı toplayın. 0,2 mL süpernatanta yavaşça 0,8 mL susuz etanol ekleyin ve iyice karıştırın. Gece boyunca 4 derecede bekletin, ardından 10.000xg'de 10 dakika boyunca santrifüjleyin ve süpernatantı atın. Çökeltiye 1 mL su ekleyin ve çökeltiyi çözmek için iyice karıştırın [11].
2.4.3 Doğrusal regresyon denkleminin oluşturulması Referans solüsyonunu alın ve kütle konsantrasyonları 0,1, 0,05, 0,025 ve 0,0125 mg/mL olan bir dizi solüsyon hazırlamak için onu art arda seyreltin. İyice karıştırdıktan sonra, doğru bir şekilde 200 μL alın, 100 μL %5 fenol çözeltisi ve 500 μL konsantre sülfürik asit ekleyin, 20 dakika boyunca bir su banyosunda ısıtın, çıkarın, akan su altında soğutun ve 0,0125–0,2000 aralığında iyi doğrusallığı gösteren Y=0.1063 X − 0,0158 regresyon denklemini elde etmek için absorbansı (A) 490 nm'de ölçün. mg/mL.
2.4.4 Polisakkaritlerin belirlenmesi Test çözeltisinin A değerini ölçün, numune kütle konsantrasyonunu elde etmek için standart eğriye koyun ve polisakkarit içeriğini hesaplayın.
2.4.5 Polisakkarit farklılıklarının analizi Fenol-sülfürik asit yöntemi kullanılarak, farklı mevsimlerde hasat edilen Cistanche'nin polisakkarit içerikleri belirlendi. Sonuçlar, ilkbaharda hasat edilen Cistanche'deki polisakkaritlerin kütle fraksiyonunun 1,36 mg/g olduğunu, yani sonbahara göre biraz daha yüksek olduğunu, ancak farkın anlamlı olmadığını gösterdi.
2.5 Biyonik teknoloji ve işaretleyici bileşenlerin kapsamlı değerlendirmesi
2.5.1 Kapsamlı değerlendirme yöntemi Pearson korelasyon analizi, özellikler ve kimyasal bileşenler arasındaki ilişkileri kurmak için Origin 2022 kullanılarak yapıldı. SIMCA yazılımı kullanılarak ortogonal kısmi en küçük kareler diskriminant analizi (OPLS-DA) yapıldı ve farklı kimyasal bileşenlerin ve özellik özelliklerinin Cistanche kalitesine olan önemini değerlendirmek için projeksiyondaki değişken önem (VIP) yöntemi kullanıldı.
2.5.2 PCA analizi Cistanche'nin kalitesi birden fazla göstergeyi içerir ve bileşen endeksleri arasında karmaşık korelasyonlar vardır. Gösterge olarak yalnızca kimyasal bileşenlerin veya özelliklerin kullanılması, genel kaliteyi yansıtmak için yeterli değildir; Temel Bileşen Analizi (PCA), değerlendirme göstergeleri arasındaki ilişkili etkileri ortadan kaldırabilir. Bu nedenle özellik ve kimyasal bileşen göstergeleri birlikte analiz edildi ve GidiAoYun bulut aracı kullanılarak bir PCA grafiği oluşturuldu. Farklı mevsimlerde hasat edilen Cistanche örnekleri iki grupta toplanmıştır; bu da hasat mevsiminin kaliteyi önemli ölçüde etkilediğini göstermektedir (Şekil 6). Origin kullanan PCA, PC1 ve PC2'nin katkılarının sırasıyla %34,4 ve %19,6 olduğunu, PC3, PC4, PC5 ve PC6'nın ise %11,0, %10,0, %8,8 ve %4,5 katkıda bulunduğunu ve %85'i aşan kümülatif katkının altı ana bileşenin Cistanche kalite göstergelerinin karakteristik bilgilerini temsil edebildiğini gösterdi (Tablo 6). Geniposidik asit, loganik asit, ekinakozit, cistanosid A, verbaskosit, a*, b* ve koku ile ilgili göstergeler sonbaharda hasat edilen Cistanche'nin kalitesini önemli ölçüde etkilerken, L*, N değeri, ΔE ve 2'-asetilverbaskosit ilkbaharda hasat edilen materyali önemli ölçüde etkiledi.
Tablo 6. Temel Bileşen Katkı Analizi
| Ana Bileşen | Özdeğer | Fark Katkısı (%) | Kümülatif Katkı (%) |
|---|---|---|---|
| 1 | 7.90168 | 34.35515 | 34.35515 |
| 2 | 4.48800 | 19.51305 | 53.86820 |
| 3 | 2.52958 | 10.99818 | 64.86638 |
| 4 | 2.03447 | 10.01945 | 74.88583 |
| 5 | 2.03308 | 8.83947 | 83.72530 |
| 6 | 1.02508 | 4.45688 | 88.18218 |
2.5.3 Pearson korelasyon analizi Şekil 7'de gösterildiği gibi geniposidik asit, 8-epi-loganik asit, ekinakosid ve cistanosid A ile anlamlı pozitif korelasyonlar sergilemiştir; loganik asit, ekinekosid ve verbaskosid ile anlamlı pozitif korelasyon ve 2'-asetilverbaskozit ile anlamlı negatif korelasyon gösterdi; ekinakozid, cistanosid A ve verbaskosid ile anlamlı pozitif korelasyon gösterdi; cistanosid A, verbascoside ile anlamlı pozitif korelasyon gösterdi; polisakkaritler cistanosid A ile anlamlı derecede negatif korelasyon gösterdi.
Cistanche Fabrikası
Özellik ile ilgili göstergeler açısından L*, polisakkarit içeriği ile önemli ölçüde negatif korelasyona sahipti; a*, ekinekozit ile anlamlı pozitif korelasyon ve 2'-asetilverbaskozit ve polisakkaritler ile anlamlı negatif korelasyon gösterdi; b*, ekinekosid ve cistanosid A ile önemli ölçüde pozitif korelasyona sahipti ve polisakkaritler ile anlamlı derecede negatif korelasyona sahipti; ΔE geniposidik asit, loganik asit, ekinakozit, cistanosid A ve verbaskozid ile anlamlı negatif korelasyonlar gösterdi; W1C, W3S ve W5C, geniposidik asit, 8-epi-loganik asit, ekinekosid, cistanosid A ve 2'-asetilverbaskozit ile önemli ölçüde negatif korelasyona sahipti ve polisakkaritler ile anlamlı derecede pozitif korelasyona sahipti; W6S, W1S ve W2S geniposidik asit, 8-epi-loganik asit, ekinakozit ve cistanosid A ile önemli ölçüde pozitif korelasyona sahipti ve polisakkaritler ile anlamlı derecede negatif korelasyona sahipti; W1W ve W2W, verbascoside ile anlamlı derecede pozitif korelasyon gösterdi; sertlik geniposidik asit, 8-epi-loganik asit, ekinakozit, cistanosid A ve verbaskozid ile önemli negatif korelasyonlar gösterdi.
Kırmızı pozitif bir korelasyonu, mavi negatif bir korelasyonu temsil eder ve renk ne kadar koyu olursa korelasyon o kadar güçlü olur; *P < 0,05 **P < 0,01.
Şekil. 7 C. Deserticola göstergeleri ile kimyasal bileşim göstergeleri arasındaki korelasyonun ısı haritası
2.5.4 Ortogonal kısmi en küçük kareler diskriminant analizi (OPLS-DA) OPLS-DA, öncelikle yüksek boyutlu verilerin sınıflandırılması ve ayırt edilmesi için kullanılan istatistiksel bir yöntemdir. Bu çalışmada OPLS-DA modelini oluşturmak için bağımsız değişken (X) olarak 23 gösterge içeriği, bağımlı değişken (Y) olarak ise sözde matris kodlu örnek sınıflar kullanılmıştır (Şekil 8). OPLS-DA modelinde örnekler iyi bir şekilde iki kategoriye ayrılmıştır. R2X 0,843, R2Y 0,99 ve Q2 0,984 idi; R2Y ve Q2'nin 1'e yakınlığı iyi model performansını gösterir. Yükleme grafiği, ilkbaharda hasat edilen Cistanche'nin L*, b*, W1W, W2W, polisakkaritler ve 2′-asetilverbaskoside daha yakın olduğunu gösterirken, W5S, loganik asit, ekinakozit, cistanosid A ve verbaskosidin sonbaharda hasat edilen Cistanche'ye daha yakın olduğunu ve kalitesini etkileyen ana faktörler olabileceğini gösterdi. VIP grafiği, VIP> 1 olan üç değişkeni gösterdi; en yüksek VIP, 3,20'de sertlik, ardından 2,48'de ΔE ve 1,78'de ekinakoziddi. Bu üç gösterge, farklı mevsimlerde hasat edilen Cistanche'nin kalitesini ayırt etmek için belirteç görevi görebilir. Bir permütasyon testi (n=200), permütasyondan elde edilen tüm Q2 değerlerinin orijinal modelin Q2 değerinden daha düşük olduğunu ve Q2 regresyon çizgisinin Y ekseni üzerindeki kesişiminin negatif olduğunu ve aşırı uyumun olmadığını gösterdi.
Satılık yüksek kaliteli cistanche
3 Cistanche kalitesinin tartışılması
Xie Zongwan, özelliklerin geleneksel Çin ilaçlarının (TCM'ler) kalitesini değerlendirmek için önemli göstergeler arasında olduğunu öne sürerek "kaliteyi anlamak için ayırt edici görünüm" teorisini önerdi [12]. Şekil, renk, tat, boyut ve doku gibi dış özellikleri gözlemleyerek tıbbi malzemelerin içsel kalitesini değerlendirebilirsiniz. Huang Luqi ve meslektaşları ayrıca "daodi tıbbi malzemeleri" olarak adlandırılan yüksek kaliteli TCM'lerin klinik kullanımda "mükemmel etkinliğe" yansıyan "mükemmel form" ve "mükemmel kalite" sunduğunu savundu [13]. "Görünüşe dayalı kalite çıkarımı"ndan "mükemmel biçim-mükemmel kalite" kavramına kadar bu perspektifler, özelliklerin kalite üzerindeki etkisini vurgulamaktadır. Geleneksel Çin Tıbbı'ndaki geleneksel özellik tanımlaması, subjektif ve ölçülmesi zor olan görsel incelemeye, tatmaya, koklamaya ve dokunmaya dayanır. Harici özellik özelliklerini dijitalleştirmek için modern tespit ekipmanının kullanılması, TCM görünümünün daha objektif ve doğru bir şekilde değerlendirilmesine yardımcı olabilir [14-15]. Bu nedenle bu çalışmada farklı mevsimlerde hasat edilen Cistanche'nin görünüm özellikleri incelenmiştir. Sonuçlar, sonbahar örneklerinin ilkbahar örneklerinden daha düşük L* ve b* değerlerine ve dokuya bağlı indekslere sahip olduğunu gösterdi; bu da sonbahar Cistanche'nin daha derin bir renge ve daha yumuşak bir dokuya sahip olduğu, ilkbahar örneklerinin ise daha parlak, daha sarımsı ve daha sert olduğu anlamına geliyor. Geleneksel olarak birinci sınıf Cistanche, kalite özellikleri olarak kabul edilen "yağlı parlaklık, önemli vücut kütlesi, dolgunluk, yumuşaklık ve tatlı tat" ile yumuşak, kalın, kompakt ve dolgun olarak tanımlanır [2]. Sonbahar örneklerinde gözlemlenen özellikler, bu üstün özelliklerle daha iyi uyum sağladı. Aynı zamanda, ana aktif bileşenlerin ölçümleri, sonbahar örneklerinde ilkbahara göre önemli ölçüde daha yüksek geniposidik asit, loganik asit, ekinakozit, cistanosid A ve verbaskosid içeriklerini ortaya çıkardı. Geleneksel özellik endeksleri ile ana aktif bileşen içerikleri arasındaki müteakip korelasyon analizi, sertlik ile L* arasında önemli bir pozitif korelasyon gösterdi; bu, numune ne kadar koyu olursa, dokusunun da o kadar yumuşak olduğunu gösterir; L*, polisakkarit içeriği ile önemli ölçüde negatif korelasyon gösterdi; bu, daha koyu numunelerin daha yüksek polisakkarit içeriğine sahip olduğunu gösterir. Sertlik geniposidik asit, 8-epi-loganik asit, ekinakozit, cistanosid A ve verbaskosit içerikleri ile ilişkilidir; bu da daha yumuşak Cistanche'nin daha yüksek düzeyde temel aktif bileşenlere sahip olma eğiliminde olduğunu öne sürerek "mükemmel form-mükemmel kalite" özelliğini daha da doğrular. Buna ek olarak, bu çalışma polisakkaritler ile cistanosid A arasında önemli bir negatif korelasyon bulmuştur. Polisakkaritler güçlü hidrofilik hidroksil ve diğer polar gruplara sahiptir [8], kuruma süresini uzatır, bu da dokudaki feniletanoid glikozitlerin enzimatik hidrolizine yol açabilir ve dolayısıyla seviyelerini azaltabilir [16]. Bu nedenle, polisakkaritler ile cistanosid A arasındaki önemli negatif korelasyon, polisakkarid kaynaklı kuruma süresinin uzatılmasından ve dolaylı olarak cistanosid A içeriğinde değişikliklere neden olmasından kaynaklanıyor olabilir.
Şekil. 8 OPLS-DA dağılım grafiği (A), OPLS-DA yükleme grafiği (B), 200 ikame testi grafiği (C) ve VIP grafiği (D)
Bu çalışma aynı zamanda farklı mevsimlerde hasat edilen Cistanche'nin kokusunu da analiz etmiş ve etkili ayrımcılığı mümkün kılan koku farklılıkları bulmuştur. W1W, W2W, W5S ve W1S sensörleri için daha yüksek tepkiler gözlemlendi; bu, Cistanche'nin nispeten bol miktarda terpen, aromatik bileşik, organosülfür bileşiği, nitrojen oksit ve metan sınıfı madde içerdiğini gösterir; terpenler ve nitrojen oksitler muhtemelen mevsimsel koku farklılıklarına önemli katkıda bulunanlardır. Cistanche uçucu yağının ana bileşeni, aromatik bir bileşik olan %83,60'ı [17-18] oluşturan öjenoldür. W2W sensörünün farklı mevsimlerdeki örneklere daha yüksek tepki vermesi bu bileşenle ilgili olabilir. Metan sınıfı bileşikler arasında halometanlar, alkoller, asitler, esterler, eterler vb. yer alır [19]. Cistanche'nin uçucu bileşenleri üzerine yapılan ilk araştırmalar, aldehitler, ketonlar, furanlar, alkoller, laktonlar ve esterler gibi ana sınıfları göstermiştir [20]. Bu nedenle W1S sensörünün daha yüksek tepkisi, uçucu bileşenleri arasındaki alkoller ve esterlerle ilişkilendirilebilir.
Sıcaklık, nem ve ışık yoğunluğu gibi çevresel faktörler hasat mevsimlerine göre değişiklik gösterir ve Cistanche'nin ana aktif bileşenlerinde değişikliklere yol açar. İlk çalışmalar, bitkilerin güneş radyasyonuna direnmek için yaz aylarında daha yüksek düzeyde fenolik biriktirdiğini ve bunun sonbaharda fenoliklerin artmasına neden olduğunu göstermiştir [21]. Kuraklık, Cistanche tubulosa'da ekinakozit ve verbaskozit birikimini teşvik eder [22]. Sonbaharda hasat edilen Cistanche'deki önemli ölçüde daha yüksek ekinakozit, cistanosid A ve verbaskozit seviyeleri, yaz boyunca güçlü ışığa ve kuraklığa kümülatif maruz kalma nedeniyle olabilir. Gentiana'nın bir iridoid'i olan loganik asitin birikimi iklim faktörlerinden etkilenir [23-24], yağış ve yüksek sıcaklık iridoid birikimini etkileyen baskın ekolojik faktörlerdir. Orta derecede kuraklık aynı zamanda bitkilerde terpen birikimine de katkıda bulunur [25]. İlkbaharla karşılaştırıldığında sonbaharda hasat edilen Cistanche'deki iridoidlerin (geniposidik asit ve loganik asit) önemli ölçüde daha yüksek içeriği sıcaklık, ışık ve yağışla ilişkili olabilir. Ayrıca ışık süresi, Bletilla yumrularındaki polisakkarit birikimini önemli ölçüde etkiler ve en yüksek birikim 10-11 saatlik ışıkta olur [26]. Gansu ve Alxa Left Banner'da (İç Moğolistan), gün ışığı süresi ilkbahar ve sonbahar arasında farklılık gösterir, ilkbaharda günler daha uzundur [27-28]. Sonbaharda hasat edilen Cistanche'de polisakkarit içeriği ilkbaharda olduğundan daha düşüktü, ancak fark önemli değildi, bu da ışık süresiyle ilgili olabilir.
Özetle, farklı mevsimlerde hasat edilen Cistanche'nin özelliklerinde ve aktif bileşen içeriklerinde önemli farklılıklar mevcuttur, ancak mevcut araştırmalar büyük ölçüde karşılaştırmalı analizlerle sınırlıdır. Cistanche'nin menşe yerinde işlenmesi genellikle kurutmayı içerir; Tazeden kuruya geçiş, hücre yapısının, bileşiminin, renginin ve metabolizmasının değiştiği dinamik bir süreçtir. Mevsimler arasında kurutma sırasındaki çevresel farklılıklar (kurutma sıcaklığı ve ortam nemi gibi) kalite değişikliklerini de etkileyebilir. Gelecekteki çalışmalar Cistanche'nin kuruma kinetiğini araştıracak, kurutma sırasında aktif bileşenler ve özelliklerdeki dinamik değişiklikleri daha ayrıntılı olarak değerlendirecek ve farklı mevsimlerde tazeden kuruya süreç boyunca çevresel faktörlerin (sıcaklık, nem vb.) ölçümlerini içerecektir. Bu, kurutma sırasındaki değişikliklerin nedenlerinin açıklanmasına yardımcı olacak ve Cistanche'nin hasat sonrası işlenmesi ve üretimi için daha kapsamlı kontrol standartları sağlayacak.
Çıkar çatışması Tüm yazarlar herhangi bir çıkar çatışması beyan etmemektedir.
Referanslar
[1] Çin Halk Cumhuriyeti Farmakopesi [S]. Cilt ben. 2020: 140–142.
[2] Zhang J, Zhu TT, Jin L, ve diğerleri. Yüksek kaliteli Cistanche [J] oluşumuna ilişkin araştırma ilerlemesi. Çin Deneysel Geleneksel Tıbbi Formüller Dergisi, 2023, 29(18): 259–266.
[3] Zhou SQ, Feng D, Zhou YX, ve diğerleri. Cistanche'nin [J] aktif bileşenlerinin ve sağlık uygulamalarının analizi. Ön Nutr, 2023, 10: 1101182.
[4] Cheng N, Wang H, Hao H, ve diğerleri. Potansiyel farmasötik ajanlar olarak Cistanche Deserticola'nın polisakkarit bileşenleri üzerine araştırma ilerlemesi [J]. Eur J Med Chem, 2023, 245(pt 1): 114892.
[5] Nan ZD, Zhao MB, Zeng KW, ve diğerleri. Tarım Çölü'nde [J] yetiştirilen Cistanche Deserticola'nın saplarından elde edilen anti-inflamatuar iridoidler. Chin J Nat Med, 2016, 14(1): 61–65.
[6] Pang JH, Sheng JH, Zhang X J. Büyüme yıllarının ve hasat mevsimlerinin Cistanche'nin aktif bileşenleri üzerindeki etkileri [J]. Çin Etnik Tıbbı Dergisi, 2013, 19(1): 33–34.
[7] Qian H, Yu FJ, Geng ZC, ve diğerleri. Farklı mevsimlerde hasat edilen Cistanche'deki dört feniletanoid glikozitin içeriği üzerine karşılaştırmalı çalışma [J]. Farmasötik Analiz Dergisi, 2016, 36(11): 1971–1976.
[8] Wang XY, Xiao B, Zhang ZF, ve diğerleri. Farklı hasat dönemlerinde toplanan Cistanche'de ekinekosid, verbaskosid, dulsitol, betain ve çözünür polisakkaritlerin ve daodi özelliklerinin belirlenmesi [J]. Çin Geleneksel ve Bitkisel İlaçları, 2017, 48(18): 3841–3846.
[9] Ren YN, Feng WH, Li H, ve diğerleri. Yapay zeka duyusal ve çok kaynaklı bilgi füzyonuna dayalı olarak TCM'nin beş çeşidinin ikili sınıflandırma tanımlamasının ön araştırması [J]. Geleneksel Çin ve Bitkisel İlaçlar, 2023, 54(10): 3080–3092.
[10] Chen YY, Zhang JL, Liu JJ, ve diğerleri. Yabani ve yetiştirilen Angelica sinensis'in morfolojik özellikleri ve kimyasal bileşenleri üzerine biyonik teknolojilere ve kemometriye dayalı karşılaştırmalı bir çalışma [J]. ACS Omega, 2024, 9(40): 41408–41418.
[11] Zhu TT, Zhang J, Liu TL, ve diğerleri. Transkriptomik ve metabolomik analizler, kurutmadan önce ve sonra iki tür Cistanche Deserticola arasındaki renk farkının mekanizmasını ortaya koymaktadır [J]. Front Plant Sci, 2025, 15: 1506523.
[12] Xie Z W. TCM çeşitlerinin geleneksel tanımlama deneyimi üzerine: "kaliteyi anlamak için görünümü ayırt etme" teorisi [J]. Shizhen Geleneksel Çin Tıbbı, 1994, 5(3): 19–21.
[13] Yuan Y, Huang L Q. Daodi tıbbi materyallerinin moleküler farmakognozisindeki ilerleme ve eğilimler [J]. Çin Bilim Bülteni, 2020, 65(12): 1093–1102.
[14] Liu TR, Jin Y, Meng HB, ve diğerleri. "Görünüşe dayalı kalite çıkarımı"na ilişkin TCM teorisi kapsamında renk ayrımcılığı ve kalite değerlendirmesinin biyolojik çağrışımları [J]. Çin Çin Materia Medica Dergisi, 2020, 45(19): 4545–4554.
[15] Wang HN, Tian YQ, Liu DH, ve diğerleri. "Görünüm temelli kalite çıkarımı"na ilişkin TCM teorisinin tarihçesi, gelişimi ve uygulanması [J]. Çin Tıbbi Malzemeleri, 2021, 44(3): 513–519.
[16] Yang JH, Hu JP, Rena Kasmu, ve diğerleri. Farklı işleme yöntemlerinin Cistanche kaynatma parçalarındaki feniletanoid glikozitler üzerindeki etkileri [J]. Çin Tıbbi Malzemeleri, 2010, 33(5): 691–693.
[17] Hui RH, Hou DY, Li TC, ve diğerleri. Cistanche'nin [J] uçucu kimyasal bileşenlerinin analizi. Çin Analitik Kimya Dergisi, 2003, 31(5): 601–603.
[18] Peng XY, Chen JR, Cui HY, ve diğerleri. GC-IMS'ye dayalı olarak Sincan'daki farklı konakçılardan Cistanche'deki uçucu maddelerin analizi [J]. Gıda Endüstrisi Bilimi ve Teknolojisi, 2024, 45(9): 272–279.
