Diyet Cistanche Ördeklerin Akut İleum Hasarını Hafifletti Ⅱ

3.1. Bağırsak Morfolojisi

Bu çalışmada, üst patolojik inceleme (H&E) ve ileumun ince yapısı tarafından değerlendirilen mikroyapı talimatı Şekil 1'de gösterilmiştir.0 grubu, T'deki ileum0artı AFB1 grubu epitel kalınlığında azalma, villus yapısında hasar veiltihaplıhücre agregasyonu ve çok sayıda mikrovillus ciddi şekilde kırılır ve mitokondri iyileşir ve büzülür. Yapısal içerikli ördeklerin ileumunda meydana gelen hasar AFB1 uygulamasından sonra villus ve mikrovillusların yok edilmesi, iltihaplıoksidasyon stresi. Beklenildiği gibi,diyet cistancheyeteneği vardıileum'u AFB1'in neden olduğu akut hasara karşı koruruygulama, birkaç ileum villi-kırık dahil,inflamatuar hücreH&E tarafından yapısal olarak derecelendirilen ve kırık mikrovillus sayısını azaltan, mitokondriyal azaltan ileumda küçük bir hasar mitokondri küçültme yaşının şişmesi ve ortadan kaldırılması, gösterilen halka şeklindeki yapısal tarafından değerlendirildi T arasındaki yapı farkı500artı AFB1group ve T0artı AFB1 grubu.

grup; T500 artı AFB1: cistanche artı AFB1 grubu

Cistanche Anti-Oksidasyon Takviyelerini Almak İçin Buraya Tıklayın

Daha fazlasını iste:

E-posta:wallence.suen@wecistanche.com Whatsapp artı 86 15292862950

3.2. Plazmadaki AFB1-DNA Eklentilerinin Düzeyleri

Ördek plazmasındaki AFB1-DNA eklentileri, dolaylı rekabetçi ELISA ile ölçülmüş ve Şekil'de gösterilmiştir.2. T ile karşılaştırıldığında0 grubunda, AFB1 yönetimi, AFB1-DNA eklentilerinin (p < 0.001) in the plasma. As expected, diyet cistancheazaltılmış AFB1-DNA eklenti içeriği (p = 0.001) T500 artı AFB1 grubundaki ördeklerin plazmasında T'dekine göre0 artı AFB1 grubu.

artı AFB1: cistanche artıAFB1 grubu. Değerler Ortalama olarak ifade edilir± SEM (n= 15), ** şu anlama gelir: < 0.01.

3.3. Plazma ve İleumda Antioksidan Kapasite

Plazmanın antioksidan kapasitesi Şekil'de gösterilmiştir.3. AFB1'in maruz kalması oksidasyon stresine yol açarak T-SOD'un (p = 0.073), GSH-PX (p = 0.034) ve GSH-ST (p = 0.003) plazmadaki aktiviteler T'de azaldı0 artı T'dekilerden daha AFB1 grubu0 grup. Bununla birlikte, T-SOD (p = 0.039), GSH-PX (p = 0.009) ve GSH-ST (p = 0.003) etkinlikler T'de önemli ölçüde geliştirildi500 artı T'dekilerden daha AFB1 grubu0 artı AFB1 grubu. MDA konsantrasyonu (p = 0.028) plazmada T'de arttı0 artı T'dekinden daha AFB1 grubu0 grubu ve MDA konsantrasyonu (p < 0.001) in the plasma was decreased in the T500 artı T'dekilerden daha AFB1 grubu0 artı AFB1. 

3.4. İleumdaki Nrf2-ARE Sinyal Yoluyla İlgili Genlerin İfadesiAFB1 uygulaması, hücre oksidasyon stresini indükledi ve ayrıca ileumda Keap1, Nrf2, CAT, SOD1, GPX, GST, NQO-1, HO-1, GCLC ve GCLM dahil olmak üzere genlerin ekspresyon değişiklikleriyle sonuçlandı. ördekler Şekilde gösterildiği gibi4, AFB1 uygulaması mRNA'yı önemli ölçüde artırdı (p = 0.001) Keap1 geni seviyesi ve Nrf2 dahil olmak üzere genlerin mRNA seviyelerini inhibe etti (p = 0.171), KAT (p = 0.166), SOD1 (p = 0.121), GPX (p = 0.065), GST (p = 0.008), NQO-1 (p = 0.061), HO-1 (p = 0.068), GCLC (p = 0.800) ve GCLM (p = 0.090) ve Nrf2 protein içeriği (p = T'deki ördeklerin ileumunda 0.001)0 artı T'dekilere göre AFB1 grubu0 grup. Beklendiği gibi, diyetle beslenen ördeklere 70 gün boyunca cistanche eklenmesi mRNA'yı önemli ölçüde azalttı (p = 0.012) Keap1 geninin ileumda ifadesi, Nrf2 (p = 0.042), SOD1 (p = 0.038), HO-1 (p = 0.041), NQO-1 (p = 0.047) ve GCLC (p = 0.043) ve CAT (p = 0.229), GPX (p = 0.568), GST (p = 0.454) ve GCLM (p = 0.860) ve Nrf2 proteini (p = T'deki ördeklerin ileumunda 0.005)500 artı T'dekilere göre AFB1 grubu0 artı AFB1 grubu.

* araçp < 0.05, ** meansp < 0.01

3.5. NF- ile İlgili Genlerin İfadesiκB İleumdaki Sinyal Yolu

Enflamatuar genlerin ekspresyonu Şekil'de gösterilmiştir.5. T ile karşılaştırıldığında0 grubunda, AFB1 uygulaması TLR4 gibi bazı genlerin mRNA düzeyini artırdı (p = 0.037), NF-κB (p <0.001), TNF- (p = 0.025), IL-6 (p = 0.072), TXNIP (p = 0.007), NLRP3 (p <0.001) ve IL-18 (p = 0.478) T'deki ördeklerin ileumunda0 artı AFB1 grubu. Beklenildiği gibi,diyet cistancheTLR4 dahil olmak üzere genlerin aşırı ekspresyonunu önemli ölçüde bastırdı (p <0.001), NF-κB (p = 0.001), TNF- (p = 0.012), IL-6 (p = 0.007), TXNIP (p = 0.001), NLRP3 (p = 0.001) ve IL-18 (p <T'deki ördeklerin ileumunda 0.001)500 artı T'dekilere göre AFB1 grubu0 artı AFB1 grubu. Ek olarak, PP 65'in içeriği (p = İleumda 0.004) T'de arttı0 artı T'dekine göre AFB1 grubu0 grup. Beklenildiği gibi,diyet cistancheönemli ölçüde bastırılmış PP 65 (p = 0.015) protein içeriği.

hedef proteinin dahili referansa (GAPDH) yoğunluğu. Değerler Ortalama olarak ifade edildi± SEM (n = 15) ve* araçp < 0.05, ** means p < 0.01

4. Tartışma

Bağırsak morfolojisi, AFB1 uygulamasının neden olduğu bağırsağın iltihaplanmasını ve oksidasyon stresini değerlendirmek için davranışsal belirteçlerden biridir. AFB1 uygulamasının ördeklerin ileum morfolojisi üzerindeki etkilerine ilişkin literatür yetersizdir. Yan ve ark. (2020), AFB1 uygulamasının Sprague-Dawley sıçanlarında kardiyak patolojik hasara, enflamatuar hücre infiltrasyonuna ve daha fazla kardiyomiyosit dejenerasyonuna yol açtığını bildirdi [29]. AFB1 tarafından indüklenen broyler civcivlerin bağırsağında inflamatuvar hücre infiltrasyonları olan kataral enteritis, bağırsağın yapısını tahrip etmiştir.12]. Luzi ve ark. (2002), akut AFB1 uygulamasının neden olduğu ileum kasılmalarını bildirmiştir [30]. Bu çalışmadaki sonuçlar, diyet cistanche'nin, inflamasyonu inhibe etmeye karşı ileumun güçlü bir koruyucu ajanı olduğunu göstermiştir; bu, cistanche'nin farelerde çoklu enflamatuar bozukluklarda anti-enflamatuar inhibe etme kabiliyetine sahip olması olabilir.31–33]. Oksidatif stresin neden olduğu DNA hasarı, çeşitli DNA eklentilerinin oluşumunu destekleyebilen DNA'nın stabilitesini bozacaktır.34]. AFB1-DNA eklentisi, AFB1 tarafından indüklenen vücudun yaralanma derecesini değerlendirmek için bir biyobelirteçtir. AFB1-DNA eklentilerinin sentezlenmesi ve zenginleştirilmesi, dokuların yapısını tahrip ederek kanserojen gelişmeye neden oldu [35]. AFB1, sitokrom P450 izoenzimleri tarafından AFB1-8,9-epokside (AFBO) metabolize edilir ve ilgili eklentileri üretir [36] ve ROS'un doku hasarını, oksidatif stresi ve DNA hasarını arttırır [37]. AFB1-DNA eklentileri, nükleoproteinler ve nükleik asitlerle bağlanabilir, böylece DNA ve hücre hasarına neden olur ve antioksidan enzimlerin ve protein sentezinin seviyesini düşürür [38]. Zhang ve ark. (2016), cistanche takviyesinin, antioksidan enzimlerin (GPx, SOD, CAT ve GST) antioksidasyon aktivitesini artırarak ve AFB1-DNA üretimini inhibe ederek AFB1'in neden olduğu karaciğer hasarını önlediğini bildirdi [39]. Bu çalışmada, AFB1 uygulaması, plazmada AFB1-DNA eklentileri içeriğini artırdı. Diyetle alınan cistanche bu fenomeni önemli ölçüde azalttı, sonuçlar, diyetle alınan cistanche'ın bu akut AFB1 uygulama modelinde ileum'u koruma potansiyeli olduğunu gösterdi; bu, cistanche'nin vücudun antioksidasyon kapasitesini geliştiren antioksidan etkisi ile açıklanabilir [40,41]. Oksidasyon stresi, antioksidan enzim aktivitelerinin azalması ve lipid peroksidasyon düzeylerinin artması ile vücuttaki oksidasyon ve antioksidasyon dengesizliğinin indüklenmesi sonucu ortaya çıkar. CAT, GSH-Px ve SOD içeren antioksidan enzim sistemi, serbest radikallere ve reaktif oksijen türlerine (ROS) karşı hücre savunmasının ilk hattıdır ve vücuttaki antioksidanların tüm savunma stratejisinde vazgeçilmezdir.42]. 

GST, vücutlar için detoksifikasyon sağlamak amacıyla reaktif oksijen türlerini (ROS) ve oksidatif stresi aşağı doğru düzenleyen çok önemli bir enzimdir.43]. Şekilde gösterildiği gibi3, AFB1 uygulamasının neden olduğu akut ileum hasarı sırasında ördeklerin plazmasında ve ileumunda oksidasyon stresi meydana geldi. Beklendiği gibi, diyet cistanche, AFB1 uygulamasından sonra plazma ve ileumdaki T-SOD, GSH-PX ve GSH-ST aktivitelerini artırarak vücutların oksidasyon stresini iyileştirdi. Bu çalışmadaki sonuçlar, cistanche'nin AFB1 uygulamasıyla beslenen ördekler için güçlü bir anti-oksidasyon ajanı olduğunu göstermiştir; bu, lipit oksidasyonunu baskılayarak anti-oksidatif kapasite ve cistanche ile takviye edilmiş anti-oksidasyon enzim aktivitesini artırarak açıklanabilir.8,44,45]. Bu sonuçlar, cistanche'nin AFB1-glutatyon, SOD, CAT ve MDA aktivitelerinde değişikliğe neden olduğunu iyileştirdiğini gösteren önceki bir raporla uyumludur [8]. Bunun nedeni, cistanche'ın antioksidan enzim aktivitelerini eski haline getirerek ve oksidatif stresi hafifleterek serbest radikalleri temizleme yeteneği olabilir.15,46]. İn vivo oksidasyon ve anti-oksidasyon arasındaki denge, T-SOD ve GSH-Px [47]. Nrf2, hücre çekirdeğine yer değiştirdi ve t antioksidan tepki elemanı (ARE) ile birleştirildi ve SOD, CAT, GSH-Px, HO-1, NQO-1, GCLC dahil olmak üzere antioksidan enzim genlerinin transkripsiyonunu yukarı doğru düzenledi. ve GCLM [47,48]. Ek olarak, GST, Nrf2 sinyal yolunu aktive ederek ve oksidatif stresi azaltmak için in vivo çeşitli detoksifikasyonda yer alan bir tür faz II detoksifiye edici enzim olarak yukarı regüle edilir.49,50]. Oksidatif stres ve lipid peroksidasyonu, AFB1 uygulamasıyla indüklenen sıçanlar için biyobelirteçlerdi [51,52]. Oksidatif stres, NQO-1, HO-1 ve GCLC [40]. Çok sayıda araştırma Cistanche ile desteklenen, HO-1, NQO-1 dahil olmak üzere indüklenmiş genlerin ifadesini bildirmiştir, -GCLC, -Broyler ve sıçanlarda Nrf2 aktivasyonu yoluyla GCLM, CAT ve GPX [40,41] ve AFB1 uygulamasının neden olduğu karaciğer hasarını ortadan kaldırdı [39,53]. 

Bu çalışmadaki sonuçlar, AFB1 uygulamasının Nrf2 sinyal yolunu inhibe ederek ileumda oksidatif stres hasarını indükleyebileceğini gösterdi. Diyetle alınan cistanche, antioksidan genler (CAT, SOD1, GPX1, GST) ve faz II detoksifiye edici enzim genleri (NQO1, HO-1, GCLC, GCLM) gibi Nrf2 aşağı akış genlerinin ekspresyonunu teşvik etti ve bu da diyete cistanche eklenmesinin ördekler, Nrf2-ARE sinyal yolunu aktive ederek AFB1 uygulamasının neden olduğu ileumda akut oksidasyon hasarını inhibe etti. Bu çalışmanın sonuçları, diyet cistanche'nin ileumu AFB1 uygulamasının neden olduğu oksidasyon stresine karşı korumak için güçlü bir iyileştirici ajan olabileceğine dair kanıt sağladı. Oksidasyon stresiyle aktifleşen NF-κB sinyal yolu daha sonra enflamatuar sitokinlerin üretimini daha fazla değerlendirdi [54]. Bu çalışmada, AFB1 uygulamasının neden olduğu ileum hasarı inflamasyona bağlı olabilir. AFB1 uygulaması, enflamatuar faktörlerin ekspresyonunu artırarak ve doğrudan enflamatuar sinyal yolunu aktive ederek ileum hasarını indükleyebilir. Oksidasyon stresi ile dokularda inflamasyon arasında pozitif bir ilişki vardır.55]. Ko ve ark. (2020), oksidasyon stresiyle aktive olan NF-κB sinyal yolu, proinflamatuar sitokinleri yukarı doğru düzenlemiş ve sıçan akciğerinde enflamasyona neden olmuştur [56]. NF-κB sinyali, 3D4/21 hücre hattında AFB1 tarafından etkinleştirilebilir [57], bir dizi enflamatuar reaksiyonla sonuçlanır [58]. Kumara ve ark. (2020), AFB1 uygulamasının, proinflamatuar faktörler sitokinler, TNF- düzeylerini yükselterek enflamasyonu indüklediğini bulmuştur. , IL-12 ve IL-6 albino farelerin serumunda [59]. Diyetle AFB1'e maruz kalma, TNF-'nin gen aşırı ekspresyonu ile sonuçlandı. IL-1 ve domuz karaciğerindeki IL-6 ve enflamatuar faktörlerin (TNF- , IL-12, IL-6) yüzde 8 üzüm çekirdeği küspesi içeren diyetle beslenen domuzların karaciğerinde ve AFB1 kontrol seviyelerine döndü [60]. TNF- seviyeleri IL-6 ve IL-1 cistanche 400 mg kg-1 ile beslenen IUGR sıçanların karaciğerinde intrauterin gelişme geriliği olan sıçanların karaciğerinde artış görülmüştür.−1 diyet, normal doğum ağırlıklı sıçanların kontrol düzeyine döndü [38]. NF- aktivasyonuκB sinyal yolu, IL-1'yi destekleyen genlerin ifadesini (NLRP3 ve Caspase-1) yukarı regüle etti ve IL-18 olgunlaşması ve salgılanması ve enflamatuar bir yanıtı tetikledi [61]. Bu çalışmadaki sonuçlar, AFB1 uygulamasının ördeklerin ileumunda inflamasyon faktörlerinin gen ekspresyonunu önemli ölçüde değerlendirdiğini ve sıçanlarda NLRP3 sinyal yolunun NLRP3 sinyal yolunun aktivasyonunun AFB1 tarafından aktive edildiğine dair bir çalışma doğrultusunda, diyet cistanche'nin bu gen ekspresyonunu inhibe ettiğini göstermiştir.40]. Önceki sonuçlar, cistanche'nin kaspaz-1 ve IL-1'yi baskılayarak NLRP3 protein ifadesini engelleme yeteneğine sahip olduğunu gösterdi. [29]. Bu nedenle, bu çalışmadaki sonuçlar, cistanche'nin, NF-'yi inhibe ederek AFB1 uygulamasının neden olduğu ileumdaki iltihaplanmayı ve ileum hasarını gidermek için umut verici yem katkı maddelerinden biri olabileceğini ortaya koydu.κB sinyal yolu

5. Sonuçlar

Sonuç olarak, AFB1 uygulaması, Nrf2-ARE sinyal yolağının aşağı akış genlerinin ekspresyonunu inhibe ederek ve NF-'nin aşağı akış genlerinin ekspresyonunu aktive ederek ileum hasarı, oksidasyon stresi ve enflamasyonu indükledi.κB sinyal yolu. Bununla birlikte, diyetle alınan cistanche, muhtemelen Nrf2-ARE'yi aktive etmesi ve NF-'yi inhibe etmesi nedeniyle, AFB1 uygulamasının neden olduğu ileum hasarını, oksidasyon stresini ve ördek iltihabını önemli ölçüde iyileştirmiştir.κB sinyal yolu (Şekil6). Bu çalışmanın sonuçları, diyet cistanche'nin, Nrf2-ARE'yi aktive ederek ve NF-'yi inhibe ederek AFB1 uygulamasının neden olduğu akut yaralanmaya karşı ileumu korumak için etkili bir yem katkı maddesi olduğuna dair güçlü kanıtlar sağladı.κB sinyal yolu.