İletişim: emily.li@wecistanche.com

Cistanche Desertica Polysakkaritlerinin Deneysel Yaşlanan Farelerde Serebral Nöronların Öğrenme ve Hafıza Fonksiyonları ve Ultrayapısı Üzerine Etkisi

SUN Yun ve ark.

ÖZET AmacıEtkilerini gözlemlemekCistanche (Sistanşe)çölpolisakkaritler(CDP) üzerindeöğrenme ve hafıza fonksiyonlarıve deneysel yaşlanan farelerde serebral ultrayapı. Yöntemler: CDP(Cistanche (Sistanşe)çölpolisakkaritler)D-galaktoz tarafından indüklenen deneysel yaşlanma modeli farelere art arda 64 gün boyunca günde 50 veya 100 mg / kg intragastrik olarak uygulandı, daha sonraöğrenme ve hafıza fonksiyonlarıfarelerin sayısı aşağı inme testi ve Y-labirent testi ile tahmin edildi; beyin dokusunun organelleri ve serebral ultrayapı iletim elektron mikroskobu ile gözlemlendi ve yüzme testi ile fiziksel güç belirlendi. Sonuçlar: CDP açıkçaöğrenme ve hafıza fonksiyonları(FV0. 01) ve yüzme süresini uzatır (P<0. 05),="" de­crease="" the="" number="" of="" lipofuscins="" and="" slow="" down="" the="" degeneration="" of="" mitochondria="" in=""><0.05), and="" improve="" the="" degeneration="" of="" cerebral="" ultra-structure="" in="" aging="" mice.="" qmdusion:="" cdp="">(Cistanche (Sistanşe)çölpolisakkaritler)bozulmuş fizyolojik fonksiyonu iyileştirebilir ve deneysel yaşlanan farelerde serebral morfolojik değişimi hafifletebilir.

ANAHTAR KELİME -LERyaşlandırmaöğrenme ve hafıza fonksiyonları,Cistanche desertica polisakkaritler, ultra yapı, D-galaktoz

Cistanche (Sistanşe)çöl'Çölden ginseng' olarak alkışlanan bitkisel bir ilaç, kemik ve iliği güçlendirmede ve ömrünü uzatmada özel bir etkiye sahiptir ve yaşlanma karşıtı etkisi modern farmakolojik çalışmalarla doğrulanmıştır). Doğal yaşlanma süreci öğrenme ve hafıza bozulması ile başlar, bunu biyolojik ve morfolojik yapılardaki dejeneratif değişiklikler izler. Bu makalede, D-galaktoza bağlı yaşlanan fare modelinin etkisini gözlemlemek için kullanılmıştır.Cistanche (Sistanşe)çölpolisakkaritler(CDP) açıköğrenme ve hafıza fonksiyonlarıve fiziksel gücün yanı sıra beyin dokularının ultra yapısı. Sonuçlar aşağıdaki gibi raporlandı.

Cistanche'nin birçok işlevi vardır. Daha fazla bilgi için buraya tıklayın

YÖNTEMLER

Hayvan

2 aylık, şeffaf camdan 2 aylık ICR fareleri, yarı erkek ve yarı dişi, 20 - 22g ağırlığında, Yangzhou Üniversitesi Deneysel Hayvan Merkezi'nden satın alındı (Sertifika No. 98002). Her odada on fare tutuldu ve tüm hayvanlar yiyecek ve suya erişmekte özgürdü.

Reaktif

Şangay No. 2 İlaç Fabrikası'ndan satın alınan D-galaktoz, 5 g / L'ye kadar normal salin ile birleştirildi ve buzdolabında 4 ° C'de saklandı.(Cistanche (Sistanşe)çölpolisakkaritler)Nanjing Yabani Bitki Enstitüsü tarafından, 2.5 g / L ve 5'e birleştirmek için damıtılmış su kullanılarak sağlanmıştır. 0 g / L. Step-down kiti ve Y-labirent aparatı, Shanghai Haodun Medical Apparatus Company'nin ürünleriydi.

Yaşlanma Modeli Çoğaltma ve Deneysel Tasarım1,3,

ICR fareleri rastgele 4 gruba ayrıldı: kontrol grubu (normal fareler), yaşlanma modeli grubu; yüksek doz CDP(Cistanche (Sistanşe)çölpolisakkaritler)grubu ve düşük doz CDP(Cistanche (Sistanşe)çölpolisakkaritler)grup, her grupta 55 fare. Kontrol grubu için 10 ml - kg-1. d_1 normal salin her fareye deri altından enjekte edildi. Diğer gruplara gelince, 50 mg. kg-1 - d_1 D-galaktoz, yaşlanma modelini çoğaltmak için 42 gün boyunca her hayvana hipodermik olarak enjekte edildi. Duplikasyonun başlangıcından itibaren, yaşlanan model grubunun her bir hayvanına intragastrik olarak 20 ml - kg-1 - d-1 normal salin uygulandı ve 50 mg • kg-1 • d_1and 100 mg - kg-1 - d-1 CDP(Cistanche (Sistanşe)çölpolisakkaritler)Düşük doz CDP'de her fareye intragastrik olarak uygulandı(Cistanche (Sistanşe)çölpolisakkaritler)grup (Tedavi grubu I) ve yüksek doz CDP(Cistanche (Sistanşe)çölpolisakkaritler)64 gün boyunca sırasıyla grup (Tedavi grubu U).

Son ilaçtan altı saat sonra, test etmek için her gruptan sırasıyla 30 fare alındı.öğrenme ve hafıza fonksiyonlarıaşağı iniş testi ve Y-labirent testi ile, her test için 15. Farelerin fiziksel toleransını değerlendirmek için yüzme testi, her gruptan 15 fare ile son ilaçtan 2 saat sonra gerçekleştirildi. Ayrıca, histomorfolojik inceleme için deney sonunda sırasıyla kontrol grubundan, model grubundan ve tedavi grubu H'den 10 fare öldürüldü.

Aşağı Düşme Testi (4)

Fareler 3 dakika boyunca çevreye uyum sağlamak için tepki odasına konuldu, ardından elektriğin odaya bağlanmasıyla eğitime başlandı. Fare platformdayken güvendeydi, ancak odanın dibine atladığında (bir hata), 36 V elektrik uyarımı fareyi platforma geri atlamaya zorlayacaktı. Eğitim 5 dakika sürdü, 5 dakika içinde biriken hata yapma süreleri kaydedildi. Resmi test, farenin elektrik stimülasyonundan kaçmak için güvenli bir alan arama kapasitesini test etmek için 24 saat sonra gerçekleştirildi. Fare platforma yerleştirildi ve ilk hatadan önceki gizli süre (platformda kalma süresi) ve 5 dakika içinde biriken hata yapma süreleri kaydedildi.

Y-labirent Testi

Y-labirent, tabanı bakır çubuklardan yapılmış ve birbirine açılacak şekilde radyal olarak düzenlenmiş üç odalı bir labirent kutusudur. Üste bir lamba yerleştirilir ve her odanın altına bir elektrik kaynağı bağlanır. Elektrik devresi bozulduğunda lamba yanacak ve daha sonra oda hayvan için güvenli bir alandır. Aksine, elektrik devresine enerji verildiğinde, karartılmış oda, hayvana elektrik hasarına neden olacak bir elektrik stimülasyon alanı haline gelir. Fare önce kendisini çevreye adapte etmek için 2 dakika boyunca Y-labirentine yerleştirildi, daha sonra farenin kaldığı odadaki devre (36 -40 V) fareyi güvenli alana kaçmaya zorlamak için bağlandı. Eğitim, faredeki ışığa bağlı güvenli alan belleğini pekiştirmek için 15 kez tekrarlandı. Daha sonra doğru oranı tahmin etmek için 10 testin doğru ve yanlış zamanlarının sayısı kaydedildi.

Yüzme Testi(1)

Fare, 28 cm yüksekliğinde ve 15 ° C sıcaklıkta suyla dolu bir kaba yerleştirildi ve tükenip boğulana kadar suda yüzecekti. Suya batırılmasından suya batırılmasına kadar geçen süre, farenin fiziksel toleransını değerlendirmek için kullanılan yüzme süresi olarak sayıldı.

Histomorfolojik Değerlendirmede Numune Hazırlama (3)

Kontrol grubundan, yaşlanma modeli grubundan ve Tedavi grubu II'den alınan on farenin kafası kesildi ve her farenin sol serebrumun korteksi çıkarıldı,% 4 glutaral ve% 1 ozmik asit ile iki kez sabitlendi, aseton tarafından kademeli olarak dehidre edildi, Epon 812 tarafından gömüldü, Pb-U boyaması ile boyandı. Başlıca organeller transmisyon elektron mikroskobu altında gözlendi (TEM, Hitachi H-300, Japonya).

İstatistiksel Analiz

Veriler x+s olarak ifade edildi. Sonuçların istatistiksel karşılaştırmaları eşleştirilmiş t-testi ile yapıldı.

SONUÇ -LARI

CDP'nin Etkileri(Cistanche (Sistanşe)çölpolisakkaritler)Öğrenme ve Hafıza Fonksiyonları üzerine

Aşağı iniş testi gösterdiöğrenme ve hafıza fonksiyonlarıYaşlanan farelerin oranı, kontrol grubununkilere kıyasla daha belirgin bir şekilde azalmış, gecikme süresinin kısalması ve birikmiş hata yapma sürelerinin artması olarak kendini göstermiştir. Gecikme süresi uzadı ve tedavi grubu I ve U'da birikimli hata yapma süreleri azaldı; yaşlanan model grubu ile karşılaştırıldığında anlamlı bir farklılık bulunmuştur. Sonuçlar CDP'nin(Cistanche (Sistanşe)çölpolisakkaritler)açıkça geliştirebiliröğrenme ve hafıza fonksiyonları. Bkz. Tablo 1.

Y-labirent testinin sonuçları, yaşlanan farelerde doğru güvenlik hafızası oranının azaldığını gösteren aşağı iniş testine benzerdi. Tedavi grupları I ve H, model grubuyla karşılaştırıldığında anlamlı bir fark vardı, bu da CDP'den sonra yükselen doğru güvenlik belleği oranını düşündürmektedir.(Cistanche (Sistanşe)çölpolisakkaritler)muamele.

CDP'nin Etkisi(Cistanche (Sistanşe)çölpolisakkaritler)Fiziksel Tolerans Üzerine

Yaşlanan farelerde yüzme süresi, kontrol grubundakine kıyasla önemli ölçüde kısaldı. Sadece yüksek dozda CDP'nin olduğu gösterilmiştir.(Cistanche (Sistanşe)çölpolisakkaritler)yüzme süresini önemli ölçüde uzatabilir, böylece yorgunluk önleyici fonksiyona sahip olabilir. Bkz. Tablo 2.

CDP'nin Etkisi(Cistanche (Sistanşe)çölpolisakkaritler)Serebral Nöronlarda Organeller Üzerinde

Bir elektron mikroskobu altında, her numuneden 10 nöron gözlendi ve organel sayısı ölçüldü (4). Sonuçlar, nöronlarda lipofussin ve lizozom seviyelerinin arttığını, yaşlanan model grubunda mitokondri ve Golgi kompleksi sayısının azaldığını göstermiştir. İki kriter, büyük doz CDP'den sonra belirli bir dereceye kadar restore edildi.(Cistanche (Sistanşe)çölpolisakkaritler)muamele. Bkz. Tablo 3.

CDP'nin Etkisi(Cistanche (Sistanşe)çölpolisakkaritler)Beyin Dokusu Ultra-Yapısı Üzerine

Mitokondriyal kristanın parçalandığı ve vakuoler dejenerasyon ile seyrek dağıldığı gösterilmiştir. NissP'nin gövdesinin sayısı azaldı ve pürüzlü yüzeyli endoplazmik retikulumun birkaçında degranülasyon ortaya çıktı, glikojen granülü azaldı, düzleştirilmiş Golgi sakkülükompleks hafifçe genişledi, sinaps sayısı azaldı ve presinaptik bileşendeki sinaptik vezikül sayısı azaldı. Bkz. Şekil 1.

Şekil 1 Mitokondri şişti ve sinapsı nöronlarda kayboldu. Eskiyen model grupları 10.000

Dejeneratif değişiklikler CDP'den sonra biraz hafifledi(Cistanche (Sistanşe)çölpolisakkaritler)açıkça artmış nükleoporeler, NissPs gövdeleri ve süreçleri ve azaltılmış lipofussin ile tedavi. Bkz. Şekil 2 ve 3.

Şekil 2 Nissl ~ s nöronların vücutları yeniden ortaya çıktı ve bazı lipofussin hala görülebilir. Tedavi grubu II, X 10.000

Şekil 3 Nükleer gözenek artmış ve nöronlarda nükleolus görülebilir, sitoplazma zengindir. Tedavi grubu K, X 10.000

TARTIŞMA

E>-galaktozun yaşlanmayı indüklemedeki mekanizması, yaşlanmanın serbest radikal teorisine dayanmaktadır. Sonuç olarak, D-galaktoz organizmalardaki serbest radikal içeriğini artırabilir ve oksidasyon hasarı yoluyla organel fonksiyonlarını bozabilir. Hücrelerin "enerji fabrikası" olarak mitokondri, solunum sürecinde çok sayıda serbest radikal üretebilir ve bu serbest radikaller tarafından kolayca saldırıya uğrayabilir. Yaşlı bir organizmanın mitokondrisi serbest radikaller tarafından kolayca zarar görür, onarım kapasitesinin yetersizliği nedeniyle hasar onarılamadı。 ) ve nihai ölüme kadar giderek ağırlaşacaktı. Lipofussin yaşlanmanın önemli bir işaretidir, üretimi serbest radikal hasarı ile yakından ilişkilidir, bu nedenle yaşlanma düzeyini değerlendirmede sıklıkla bir kriter olarak kullanılır.

Bu çalışmanın sonuçları CDP'nin(Cistanche (Sistanşe)çölpolisakkaritler)yüksek dozlarda yaşlanan farelerde fiziksel toleransı artırabilir veöğrenme ve hafıza fonksiyonlarıve serebral ultra yapının hasar seviyesini hafifletir. Tüm bu sonuçlar önceki araştırmamızla (1,2) örtüşmekte ve CDP'nin(Cistanche (Sistanşe)çölpolisakkaritler)ömrünü uzatabilir, yaşlanma karşıtı etkisi, membran sistemini stabilize etmek ve stabil bir hücre içi ortamı korumak için antioksidan kapasitesi ve serbest radikallerin temizleyici etkileri (2) ile ilişkili olabilir.

Kimden: 'Cistanche Desertica Polysaccarides'in Deneysel Yaşlanma Farelerinde Serebral Nöronların Öğrenme ve Hafıza Fonksiyonları ve Ultrayapısı Üzerine Etkisi' SUN Yun ve ark.

---CJIM2001;7(4) =288--292

BAŞVURU

1. SUN Y, LIN AP, ZHANG HQ. Araştırma o£ SincanCistanche (Sistanşe)çölserbest radikallerin neden olduğu anti-oksidasyon hasarı üzerinde. Çin J Çin Malzeme Medica 1994; 19 (7): 433.

2. SUN Y, WANG DJ, SHEN SQ, ve ark. Sincan'ın GözlemlenmesiCistanche (Sistanşe) çöliletim elektron mikroskobu ile yaşlanan farelerin hepatosit ve serebral korteks üzerinde. Geleneksel Çin İlaç Araştırmaları 1997;8(1) * 30.

3. GONG GQ, XU FB. Farelerde Yaşlanma Modelinin İncelenmesi. J Çin İlaç Üniversitesi 1991;22(2):101.

4. LI YK. Farmakolojide Çin bitkisinin deneysel metodolojisi. Şanghay: Bilim ve Teknoloji Yayınevi 1991: 172.

5. ZENG ZH, ZHANG ZY. Mitokondriyal DNA'nın oksidasyon hasarı ve serbest radikalle yaşlanma. Progr Biochem ve Biophys 1995;22(5): 430.