Cistanche Tubulosa Ekstraktlarının Streptozotosin-Nikotinamid İle İndüklenen Diyabetik Sıçanlarda Erkek Üreme Fonksiyonu Üzerine Etkisi-Ⅱ

3.2. Canlı Analizi

3.2.1. CTE'nin Vücut Ağırlığı ve Kalori Alımı Üzerindeki Etkileri

6 haftalık deneyden sonra diyabetik grup (HFD-DM), kontrol grubuna göre daha yüksek vücut ağırlığı gösterdi. HFD-DME4 grubu, HFD-DM ve HFD-DMER gruplarına göre daha düşük bir vücut ağırlığı gösterdi (Şekil 7a). Kontrol grubunun kalori alımı diğer gruplara göre anlamlı derecede düşüktü. Diğer beş grubun kalori alımları arasında anlamlı bir fark yoktu (Şekil 7b).

3.2.2. Başarılı Diyabet İndüksiyonunun Belirlenmesi İçin Oral Glikoz Tolerans Testi (OGTT)

Oral glukoz tolerans testi (OGTT), diyabetin saptanmasında umut verici bir araç olarak kullanılmaktadır. Kandaki artan glikoz seviyeleri diyabetik durumu gösterir. Şekil 8a'da gösterildiği gibi, plazma glukoz düzeyi 0, 30, 90 ve 120. dakikalarda CTE gruplarında DM grubuna göre daha düşüktü. Ayrıca plazma glikoz konsantrasyonunun eğri altındaki alanı (AUC), CTE ve RSG gruplarında kan şekeri alım oranının arttığını gösterdi (Şekil 8b).

3.2.3. Toplam Plazma Glikozu, Kolesterol ve Trigliserit İçerikleri

Plazma açlık kan şekeri düzeyi diğerlerine göre DM grubunda daha yüksek, DME2 grubunda ise (kontrol hariç) daha düşüktü. DME4 grubu dışında gruplar arasında toplam kolesterol açısından anlamlı bir fark yoktu. DME4 grubunda kolesterol düzeyi diğerlerine göre daha düşüktü. Trigliserit düzeyi DM grubunda daha yüksek, DME4 grubunda daha düşüktü ve CTE konsantrasyonunun artmasıyla trigliserit içeriği azaldı (Tablo 2). Sonuçlar, DM grubunda plazma glikozu, kolesterol ve trigliserit düzeyinin daha yüksek olduğunu ve CTE tedavisinde bu düzeyin önemli ölçüde azaldığını göstermektedir.

3.2.4. Plazma İnsülin Düzeyleri, Plazma Leptin Düzeyi ve Homeostaz Modeli Değerlendirmesi – İnsülin Direnci (HOMA-IR) Değerleri

Plazma insülin, leptin ve HOMA-IR değerleri Tablo 3'te gösterilmiştir. DM grubunun plazma insülin ve plazma leptin düzeyleri kontrol grubuna göre daha yüksekti. HOMA-IR indeksi de DM grubunda anlamlı derecede yüksekti. CTE konsantrasyonunun artmasıyla plazma insülin, leptin ve HOMA-IR değerleri azaldı. Plazma leptini CTE gruplarında anlamlı derecede azaldı ancak RSG ilaç grubu (DMR), DM grubuna göre anlamlı bir fark göstermedi.

3.2.5. Diyabetik Sıçanlarda CTE'nin Plazma LH ve Testosteron Düzeyleri Üzerine Etkisi

Tablo 4'te gösterildiği gibi, diyabetik sıçanlarda (DM) testosteron konsantrasyonları önemli ölçüde azalırken,testosteron konsantrasyonları önemli ölçüde arttıCTE'nin çeşitli dozlarında. Ayrıca sonuçlar, DMR, DME1, DME2 ve DME4 ile karşılaştırıldığında DM grubunda LH düzeyinde hafif bir düşüş gösterdi. LH üretimi DME4 grubunda daha yüksekti.

3.2.6. CTE'nin Diyabetik Sıçanların Sperm Parametreleri Üzerine Etkisi

Deneysel sonuçlar, DM grubunun sperm sayısında ve hareketliliğinde kontrol grubuna göre anlamlı bir azalma olduğunu, sperm anormallik oranının ise DM grubunda anlamlı derecede arttığını gösterdi. İlginç bir şekilde DMR grubunun sperm sayısı, sperm hareketliliği ve sperm anormallik oranı iyileşti ancak sperm hareketliliği DME4 ile karşılaştırıldığında önemli bir düzeye ulaşmıyor. DME2 hepsinden daha iyi sperm sayısı gösterdi ve DME4 grubunda hareketlilik oranı önemli ölçüde arttı. RSG ve CTE ile tedavi edilen gruplar arasında anormal sperm sayıları arasında anlamlı bir fark yoktu (Tablo 5).

3.2.7. Diyabetik Sıçanlarda CTE'nin Seminifer Tübüllerin Morfolojisi Üzerine Etkisi

Şekil 9 testis bölümünün H&E boyamasını göstermektedir. Siyah ok Leydig hücresini, beyaz ok ise Sertoli hücresini gösterir. DM grubunda hem Leydig hücresinde hem de Sertoli hücresinde belirgin atrofi görüldü ve lümende kavite görüldü. CTE ve RSG ile tedavi edilen gruplarda Leydig hücrelerinin ve Sertoli'nin yapısı restore edildi. Seminifer tübülün kalınlığı CTE ve RSG gruplarında DM grubuna göre daha yüksekti.

3.2.8. CTE'nin Diyabetik Sıçanların Hipotalamusunda KiSS1, GPR54, SOCS-3 ve SIRT1 MRNA'ları Üzerindeki Etkisi

KiSS1 (Şekil 10a), GPR54 (Şekil 10b), SOCS-3 (Şekil 10d) ve SIRT1'in (Şekil 10c) ifadesi Şekil 10'da gösterilmiştir. Diyabetik sıçanlarda KiSS1 ve GPR54 reseptörünün mRNA ifadesi şu şekildedir: kontrol grubuna göre anlamlı derecede düşüktü. DMR, DME1, DME2 ve DME4'teki KiSS1 ve GPR 54 mRNA ekspresyon seviyeleri önemli ölçüde arttı. Özellikle GPR54 mRNA ekspresyonu DME4'te önemli ölçüde arttı ve kontrol grubuna neredeyse benzerdi.

TESTOSTERON PHGS ÜRETİMİNİ KORUMAK İÇİN DOĞAL CISTANCHE TUBULOSA75% ECH 30% ACT 12%

Bu deneyde ayrıca sıçanların hipotalamusundaki SOCS-3 ve SIRT1 mRNA'larının miktarı araştırıldı. Diyabetik sıçanlarda SOCS-3 mRNA'nın ekspresyonu, leptin empedansının daha ciddi olduğunu gösterecek şekilde önemli ölçüde arttı. DMR, DME1, DME2 ve DME4 grupları diyabetik grupla karşılaştırıldığında önemli iyileşmeler gösterdi. SIRT1 mRNA ekspresyonu DM grubunda anlamlı düzeyde azaldı, DME1 ve DME4 gruplarında ise anlamlı düzeyde arttı.

3.2.9. CTE'nin Diyabetik Sıçanların Plazma ve Testisindeki Antioksidan Enzimler Üzerine Etkisi

Tablo 6, diyabetik sıçanların plazma SOD aktivitesinin, GPx aktivitesinin ve katalaz aktivitesinin önemli ölçüde azaldığını ve CTE ve RSG ile tedavi edilen gruplarda aktivitelerin arttığını göstermektedir. Buna ek olarak DME4, GPx aktivitesinde diğerlerine göre önemli gelişmeler gösterdi. Sonuçlar, diyabetik sıçanlarda SOD ve katalaz aktivitelerinin altı hafta sonra önemli ölçüde azaldığını gösterdi. DMR grubunun SOD ve katalaz aktivitesi anlamlı düzeye ulaşmamaktadır. CTE ile tedavi edilen gruplar SOD ve katalaz aktivitesinde önemli iyileşmeler gösterdi. CTE gruplarında artan katalaz ve SOD aktiviteleri testiste de görüldü (Tablo 7). En yüksek SOD ve katalaz aktivitesi sırasıyla DME1 ve DME2 gruplarında gözlendi.

3.2.10. CTE'nin Diyabetik Sıçanların Plazma ve Testisindeki Oksidatif Stres ve Enflamasyon Üzerine Etkileri

Plazma (Şekil 11a) ve testislerde (Şekil 11b) nitrik oksit (NO) üretimi Şekil 11'de gösterilmiştir. DM grubunda NO üretimi, kontrol grubuna göre hem testis hem de plazmada anlamlı derecede arttı. DME1, DME2 ve DME4 gruplarında (plazmada) NO üretiminde kademeli bir azalma gözlendi. DMR grubu ayrıca NO üretiminde önemli bir azalma gösterdi. Testis durumunda, CTE gruplarında NO üretiminde hafif bir azalma gözlenirken, DMR grubunda NO üretimini önemli ölçüde azaltmadı.

Şekil 12 ve 13'te gösterildiği gibi, TNF- ve IL-6 seviyeleri diyabetik sıçanlarda (hem plazma hem de testislerde) önemli ölçüde arttı, bu da inflamasyonun daha ciddi olduğunu gösteriyor. Plazmada TNF- düzeyi, CTE ve RSG ile tedavi edilen gruplarda benzerdir (Şekil 12a). CTE grupları (özellikle DME2) testiste TNF- düzeyini önemli ölçüde azalttı (Şekil 12b). IL-6 düzeyi, CTE ve RSG gruplarının plazmasında önemli ölçüde azaldı (Şekil 13a). Testiste IL-6 düzeyinde azalma eğilimi vardı ancak bu önemli bir düzeye ulaşmadı (Şekil 13b).

3.2.1.1. Yüksek Yağlı Diyetle Oluşturulan Diyabetik Sıçanların Spermatozoasında CTE'nin Oksidatif Stres ve İnflamasyon Üzerine Etkileri

Şekil 14, sıçan spermindeki süperoksit anyon içeriğini göstermektedir. Sonuçlar, diyabetik sıçanların spermlerinde süperoksit anyon üretiminin önemli ölçüde arttığını ve DMR grubunda anlamlı bir iyileşmenin gözlemlenmediğini gösterdi. DME1 ve DME4 grupları, süperoksit anyonu üretiminin önemli ölçüde azaldığını gösterdi.

3.2.12. Yüksek Yağlı Diyetle İndüklenen Diyabetik Sıçanların Spermatozoasında CTE'nin Lipid Peroksidasyonu Üzerine Etkileri

Çalışmalar hem tip 1 hem de tip 2 diyabet hastalarında lipit peroksidasyonunun arttığını göstermiştir (19). Plazma, sperm ve testislerdeki malondialdehit (MDA) düzeyi Tablo 8'de gösterilmektedir. DM grubunun plazma, testis ve spermindeki MDA düzeyi anlamlı derecede yüksekti ve CTE ve RSG tedavisi MDA üretimini azalttı. Plazmada DME4 ve DMEI gruplarında anlamlı azalma gözlendi. Bu çalışma, diyabetik sıçanların sadece plazmadaki lipit peroksidasyon derecesini arttırmakla kalmayıp aynı zamanda testis ve spermde de arttığını buldu. Çeşitli CTE dozlarında anlamlı iyileşme gözlendi.

4. Tartışma

Diyabet, kandaki yüksek şeker seviyesiyle ilişkili kronik bir hastalıktır. Antioksidan ve ROS seviyeleri arasındaki dengesizlik oksidatif stres adı verilen duruma yol açacaktır. Süperoksit, hidroksil radikali, hidrojen peroksit, nitrik oksit ve singlet oksijen, oksidatif stres yoluyla diyabet koşullarına katkıda bulunacak ROS örneklerinden bazılarıdır [20].Cistanche tubulosagibi aktif bileşenleri içeren bir çöl bitkisidir.polisakkaritler, oligosakkaritler, feniletanoid glikozitler (ekinakozit, verbaskosit), palmitik asit, linoleik asit, iridoidler, alditoller ve lignanlar. Bu bitki, antiinflamatuar, nöroprotektif, antibakteriyel, antiviral, antioksidatif, anti-tümör ve immünomodülatör etkiler üretme kapasitesine sahiptir. Literatür çalışmaları, Cistanche tubulosa'dan elde edilen feniletanoid glikozitlerin antioksidan aktivitenin ana nedeni olduğunu göstermektedir [22]. İn vitro ve in vivo çalışmalarda sırasıyla resveratrol (RES) ve rosiglitazon (RSG) pozitif kontrol olarak alındı. RSG, güçlü bir insülin duyarlılaştırıcıdır ve peroksizom proliferatörüyle aktifleştirilen reseptörün (PPARc) izoformuna karşı afiniteye sahiptir. Diyabetik hastalarda hiperglisemiyi kontrol eder. RES doğal antioksidan aktiviteye sahiptir ve lipoprotein metabolizmasını düzenleyen, trombosit agregasyonunu inhibe eden ve kanseri önleyen bir vazodilatör görevi görür [24,25]. Araştırmamız, ECH'nin CTE ve RES'ten daha iyi radikal temizleme aktivitesi gösterdiğini gösterdi (Şekil 1). Ayrıca ECH'nin LC-540 ve TM3 Leydig hücrelerine herhangi bir önemli toksisiteye neden olmadığı anlaşılmaktadır (Şekil 2).

ERKEK CİNSEL FONKSİYONU İÇİN DOĞAL CISTANCHE TUBULOSA PHGS75% ECH 30% ACT 12%

AGE'ler Leydig hücrelerinde stres koşullarını tetiklemek için kullanıldı. AGE'lerin üretimi, inflamasyon, oksidatif stres ve diyabet birbiriyle bağlantılıdır. Diyabetin hiperglisemik durumu, AGE'lerin ve oksidatif stresin üretimi yoluyla hücre hasarını arttırır. AGE'ler hücre toksisitesini indükler, bu da bağışıklık hücresi alımını ve hücre ölümünü daha da teşvik eder. Yüksek seviyedeki AGE'ler, RAGE ve AGER1 olarak adlandırılan iki tip reseptörün ekspresyonunu teşvik eder [26]. Oksidatif stres sırasında bir elektronun mitokondriyal solunum zincirinden moleküler oksijene damlaması ve ardından transferi, bir süperoksit anyonu oluşumuyla sonuçlanır. Sonuçlarımız, AGE'ler tarafından indüklenen süperoksit anyon üretiminin kontrol grubunda arttığını ve hem ECH hem de RES tedavileriyle daha fazla iyileşme gözlemlendiğini göstermektedir. Çalışmamıza göre AGE'lerin tetiklediği süperoksit (Şekil 3) ve H2O2 (Şekil 4) üretiminin ECH ve RES varlığında azaldığı anlaşıldı.

NF-κB, diyabetle ilişkili inflamasyonun önemli aracısı olarak bilinmektedir [27]. NF-κB'nin ifadesi hücre fonksiyon bozukluğuna ve hücre ölümüne yol açar. NF-κB'nin oksidatif stres ile aktivasyonu, pro-inflamatuar yanıtı, endotelinin yukarı regülasyonunu ve apoptozu uyarır [28]. RAGE ve NF-κB ekspresyonu, AGE ile uyarılan gruplarda arttı ve bunu takip eden azalma, ECH ve RES ile tedavi edilen hücrelerde gözlendi (Şekil 5).

Testosteronbir anabolik steroiddir ve birincilerkek cinsiyet hormonukolesterolden sentezlenir. Süreç, kolesterolün yan zincirinin, kolesterol yan zincir parçalama geni (CYP11A) tarafından oksidatif parçalanmasıyla başlar. Bu gen mitokondriyal membranda lokalizedir ve kolesterolü pregnenolon'a dönüştürür. Daha sonra, endoplazmik retikulumdan gelen CYP17A1 geni fazladan iki karbon atomunu uzaklaştırır ve birden fazla C19 steroidi üretir. Buna ek olarak pregnenolon, hidroksisteroid dehidrojenaz (3- -HSD) tarafından androstenedion/progesteron oluşturacak şekilde oksitlenir. Son olarak testosteron, androstenedionun 17. karbon pozisyonundaki keto grubunun 17-beta-hidroksisteroid dehidrojenaz (17- -HSD) tarafından indirgenmesiyle üretilir. Leydig hücreleri testosteronun ana üretiminde rol oynar. Kolesterolün iç mitokondriyal membrana transferi, steroidojenik akut düzenleyici proteinin (StAR) etkisini gerektirir. Mevcut çalışmalar, StAR, CYP11A1, CYP17A1 ve HSD{13}} ekspresyonunun AGE ile tedavi edilen hücrelerde (kontrol) azaldığını ve ECH ve RES ile tedavi edilen hücrelerde muazzam bir artış olduğunu göstermektedir (Şekil 6). . Dolayısıyla sonuçlar, üretiminECH ve RES ile tedavi edilen gruplarda testosteron arttı. 

SEKS GÜCÜNÜ ARTIRMAK İÇİN DOĞAL CISTANCHE TUBULOSA PHGS75% ECH 30% ACT 12%

Diyabetik bir durum sırasında glikozun organlara taşınması sınırlıdır ve bunun sonucunda glikoz seviyeleri artar [29]. Bu nedenle hiperglisemik durum diyabetin tespiti için önemli belirteçlerden biridir. Çalışmalarımız diyabetik gruplarda plazma glikoz düzeyinin arttığını ve DM grubunun AUC değerinin diğer gruplara göre anlamlı derecede yüksek olduğunu göstermektedir (Şekil 8). DM grubunda plazma glikozunun yanı sıra toplam kolesterol ve trigliserit içeriği de anlamlı derecede arttı (Tablo 2). Ateroskleroz, artan kolesterol ve trigliserit seviyeleri ile kolaylaştırılmaktadır [30]. Ancak CTE ve RSG ile tedavi edilen gruplarda kolesterol ve trigliserit düzeyi azaldı. DME4 grubunun trigliserit içeriği kontrol grubuyla hemen hemen benzer değerlere ulaştı.

İnsülin, pankreas hücreleri tarafından üretilen ve vücuttaki kan şekeri seviyelerini kontrol etme işlevi gören bir hormondur; leptin ise, gıda alımını ve enerji kullanımını düzenleyebilen adipositler tarafından üretilen bir hormondur. Çalışmalar leptinin obezitenin patofizyolojisinde rol oynadığını ve leptin ile insülin arasında pozitif bir etkileşim olduğunu göstermiştir (31). Çalışmalarımız DM grubunda plazma inülin ve leptin düzeyinin daha yüksek olduğunu ve CTE konsantrasyonunun artmasıyla insülin düzeyinin azaldığını göstermektedir. RSG grubu DM grubuna göre anlamlı bir farklılık göstermemektedir. İnsülin direnci ve hücre fonksiyonu HOMA-IR yöntemiyle değerlendirildi. HOMA-IR değeri DM grubunda arttı ve diğer gruplardan anlamlı derecede farklıydı (Tablo 3).

DM, HPG eksenindeki hormonal değişim yoluyla üreme fonksiyonunu etkilemektedir ve yapılan çalışmalar, testislerdeki insülin ekspresyonunun da diyabetten etkilendiğini ortaya çıkarmıştır. Sertoli hücre vakuolizasyonu, artan DNA fragmantasyonu, bozulmuş spermatogenez ve artan germ hücresi tükenmesi ile karakterizedir. Oksidatif stres ayrıca üreme fonksiyonundaki anormalliklere de katkıda bulunur [32]. Erkek üreme organında (testislerde) sperm oluşumu sürecine spermatogenez denir. Testis, seminifer tübül adı verilen sıkı bir şekilde sarılmış tübüllerden oluşur. Sertoli hücreleri seminifer tübülün duvarlarında görülür ve olgunlaşmamış spermin beslenmesini sağlar. Sperm parametreleri incelendiğinde DM grubunda sperm sayısı ve hareketliliğinin azaldığı, anormalliklerin arttığı görüldü (Tablo 5). CTE ve RSG ile tedavi edilen gruplarda ters bir etki gözlendi. DM grubunda hem Leydig hücresi hem de Sertoli hücrelerinde belirgin atrofi görüldü ve lümende kavite görüldü. DM grubunda seminifer tübülün kalınlığı da azaldı. CTE ve RSG ile tedavi edilen gruplarda daha iyi bir sonuç gözlendi (Şekil 9). Buna ek olarak DM grubunda LH ve testosteron düzeyi azalırken, CTE uygulanan gruplarda düzeyler arttı (Tablo 4). Erkeklerde düşük serum testosteronu ve düşük LH nabız frekansı sıklıkla obezite ve tip 2 diyabet ile ilişkilendirilmiştir [33].

KiSS1 geni tarafından kodlanan Kisspeptinler, HPG ekseninin güçlü uyarıcısı olarak bilinir ve Kisspeptin genindeki herhangi bir mutasyon, düşük seviyelerde seks steroidleri ve gonadotropinlere yol açacaktır. Çalışmalar, STZ ile indüklenen diyabetik sıçanlarda Kiss1 mRNA seviyelerinin azaldığını göstermektedir [33]. Memeli kısırlığının başlatılması ve sürdürülmesi, G-proteinine bağlı reseptör 54 (GPR54) ile bağlantılıdır. GPR 54'teki mutasyon, cinsel olgunlaşmanın olmaması ve düşük gonadotropik hormon seviyeleri (LH ve FSH) ile karakterize edilir. IL-6 ve TNF- gibi proinflamatuar sitokinler, karaciğerde ve adipositlerde inflamasyonun aracılık ettiği insülin direncinde rol oynayan sitokin sinyalleme 3'ün baskılayıcısının (SOCS3) ekspresyonunu yukarı doğru düzenler [34]. SIRT 1, çeşitli yaşlanma hastalıklarının düzenlenmesiyle ilişkili bir gendir. Bu gen, pankreas hücrelerinde belirgin bir şekilde eksprese edilir ve insülin sekresyonunu düzenler ve apoptozu önler. Mevcut çalışmalar KiSS1, GPR54 ve SIRT1 ekspresyonunun DM grubunda azaldığını ancak CTE ile tedavi edilen gruplarda ekspresyonun arttığını gösterdi (Şekil 10). DM grubundaki SOCS-3 ifadelerinin artması inflamatuar durumu gösterir. Obezite ve inflamasyon arasında tanımlanan ilk moleküler bağlantı TNF-'dir. Dolayısıyla artan TNF- seviyesi inflamasyonun bir göstergesidir. CTE ile tedavi edilen gruplarda TNF- ve IL{27}} gibi proinflamatuar sitokinlerin seviyesinde azalma görüldü (Şekil 12 ve 13).

ROS ve antioksidanlar arasındaki dengesizlik diyabetik duruma yol açar. Süperoksit dismutaz (SOD), katalaz (CAT) ve glutatyon peroksidaz (GPX), optimum ROS seviyesinin korunmasından sorumlu birincil antioksidanlar olarak bilinir [35]. Sonuçlara göre DM grubunda antioksidan aktivitesinin anlamlı derecede düşük olduğu tespit edildi. CT ile tedavi edilen gruplar antioksidan üretiminde iyileşme gösterdi. RSG ile tedavi edilen grup antioksidan aktivitede herhangi bir anlamlı iyileşme göstermedi (Tablo 6 ve 7).

Nitrik oksit (NO), iltihaplanmaya katkıda bulunan önemli bir ROS olarak bilinir. Çalışmalarımız CTE ile tedavi edilen gruplarda NO düzeyinin azaldığına işaret etmektedir (Şekil 11). Sonuçlar, diyabetik sıçanların spermindeki süperoksit anyon içeriğinin önemli ölçüde arttığını ve RSG uygulanmasından sonra anlamlı bir iyileşme olmadığını gösterdi. CTE gruplarında süperoksit üretimi azaldı.

MDA'nın belirlenmesi lipid peroksidasyonunun değerlendirilmesinde çok faydalıdır. Lipid peroksidasyonu, lipitlerdeki oksidasyon sürecidir ve sonuçta hücre hasarına neden olur. MDA, çoklu doymamış yağ asitlerinin lipid peroksidasyonu sonucu üretilir. Çalışmalar MDA düzeyinin yaş ve açlık kan şekeri düzeyi ile ilişkili olduğunu göstermektedir [36]. Mevcut çalışma CTE'nin plazma, testis ve spermde lipit peroksidasyonunu iyileştirdiğini gösterdi (Tablo 8).

CİNSEL FONKSİYONU GELİŞTİREN DOĞAL CISTANCHE TUBULOSA PHGS75% ECH 30% ACT 12%

5. Sonuçlar

Diyabetik koşullar sırasındaki oksidatif stres, sperm bozukluğu ve gonadal fonksiyon bozukluğu yoluyla erkek üreme sistemini bozar. Cistanche tubulosa, farmakolojik etkileri nedeniyle Çin tıbbında yaygın olarak kabul gören bir çöl bitkisidir.Ekinekozit (ECH)CTE'nin antioksidan ve antiinflamatuar aktivitelerinden sorumlu ana bileşenidir. İn vitro sonuçlarımız, ECH'nin testosteron sentez yolunu onardığını ve NF-κB ve RAGE protein ekspresyonu seviyesini düşürdüğünü gösterdi. ECH, Leydig hücrelerinde süperoksit anyonu ve H2O2 üretimini etkili bir şekilde inhibe etti. İn vivo çalışmalar ECH'nin kolesterol, trigliserid, TNF- ve IL-6 düzeylerini azalttığını ortaya çıkardı. Buna ek olarak diyabetik sıçanların hipotalamusundaki mRNA ifadelerinde de önemli ölçüde iyileşme görüldü. Ayrıca ECH'nin diyabetik erkek sıçanlarda lipit peroksidasyonunu azalttığı ve insülin direncini iyileştirdiği de dikkate alınmalıdır. Antioksidan aktiviteler hem plazmada hem de testiste arttı. Bu nedenle çalışmalarımız ECH'nin STZ ile indüklenen diyabetik erkek sıçanlarda üreme bozukluklarına karşı etkili koruma sağladığını ileri sürdü.