Asfiksiyel Kardiyak Arrest Sıçan Modelinde Terapötik Hipoterminin Böbrek Hasarına Karşı Etkisi: Α Hayatta Kalma Oranı, Patofizyoloji ve Antioksidan Enzimlere Odaklanma
Mar 25, 2022
SO EUN KİM1*, HA-GENÇ PARLAK2*, EUI-YONG LEE2, YEO-JIN YOO2, RYUN-HEE KİM2, ET AL
Soyut.
Çoklu organ disfonksiyonu kardiyak arresti takiben sağkalım oranı ile ilişkili olsa da (ca), bugüne kadar yapılan çalışmaların çoğu kalpler ve beyinlere odaklanmıştır ve az sayıda çalışma böbrek yetmezliğini ele almıştır. Bu nedenle, bu çalışmanın amacı, asfiksiyel CA'yı takiben sıçan böbreklerinde terapötik hipoterminin hayatta kalma oranı, patofizyoloji ve antioksidan enzimler üzerindeki etkilerini incelemekti. Sıçanlar CA'dan bir gün sonra sakrifiye edildi. Kaplan‑Meier analizi kullanılarak tahmin edilen hayatta kalma oranı, yaklaşık bir gün sonra yüzde 42,9'du. Ancak, yaklaşık ca sonra indüklenen hipotermi, hayatta kalma oranını önemli ölçüde arttırdı (yüzde 71,4). ca'lı normotermi sıçanlarında, serum kan üre nitrojen düzeyi, ca'dan bir gün sonra önemli ölçüde arttı. ek olarak, serum kreatinin düzeyi CA'dan bir gün sonra önemli ölçüde arttı. Bununla birlikte, hipotermiye maruz kalan CA sıçanlarında, üre nitrojen ve kreatinin seviyeleri, yaklaşık ca. Histokimyasal boyama, normotermi grubu yakl. Bununla birlikte, hipotermi grubunda böbrek hasarı önemli ölçüde azaldı. böbreğin immünohistokimyasal analizi, normotermi grubunda zamanla antioksidan enzimlerde (bakır-çinko süperoksit dismutaz, manganez süperoksit dismutaz, glutatyon peroksidaz ve katalaz) önemli bir düşüş ortaya çıkardı. Bununla birlikte, hipotermi grubunda, bu enzimler yaklaşık olarak aşağıdakilerden önemli ölçüde yükselmiştir. toplu olarak, sonuçlar asfiksiyi takiben böbrek fonksiyon bozukluğunun erken sağkalım oranı ile güçlü bir şekilde ilişkili olduğunu ve terapötik hipoterminin etkili antioksidan mekanizmalar yoluyla böbrek hasarını azalttığını ortaya koydu.
Anahtar Kelimeler: asfiksiyel kalp durması, kalp durması sonrası sendromu, hipotermi tedavisi, böbrek, histopatoloji, antioksidan enzimler
İletişim:joanna.jia@wecistanche.com
cistanche kayıp imparatorluk otlarengellerböbrek hastalığı, numuneyi almak için buraya tıklayın
giriiş
Kardiyopulmoner arrest veya dolaşım durması olarak da bilinen kardiyak arrest (ca), kalbin yeterince kan pompalayamaması nedeniyle normal kan dolaşımının aniden kesilmesini içerir (1). ca beyin, kalp, böbrekler ve karaciğer dahil olmak üzere birçok organda hasara neden olan tüm vücut iskemisini indükler. Geçen yarım yüzyıldaki araştırma çalışmalarının çoğu, önemli ilerleme ile (2-4), spontan dolaşımın (roSc) başarılı geri dönüş oranını iyileştirmeye odaklanmıştır. Acil resüsitasyon roSc'yi iyileştirebilse de, kötü prognozlu sağkalım oranı bir endişe kaynağıdır (5-7). Post-kardiyak arrest sendromu (PcaS), ca'dan sonra başarılı kardiyopulmoner resüsitasyon (cPr) sonrası roSc'nin patofizyolojik sonuçlarını ifade eder (8). PcaS, roSc sonrası sağ kalımın azalmasının ana nedenidir (9). Hastalarda erken dönem PcaS sağkalım oranı sadece yüzde 30'dur (5). Hiç şüphe yok ki kalp ve beyin PcaS'de önemli organlardır. Bu arada, çalışmalar nadiren böbrek yetmezliğini yaklaşık olarak (1,10,11) araştırmıştır. Yaklaşık olarak hayatta kalan hastalarda geçici bozulmuş böbrek fonksiyonu yaygındır (12). Ca'yı takiben böbrek fonksiyon bozukluğunun insidansı ve etkisi iyi tanımlanmamıştır (13). ek olarak, önceki çalışmamız, deneysel çalışmalarda (14) roSc sonrası düşük erken sağkalım oranının akut böbrek hasarı gibi böbrek yetmezliği ile güçlü bir şekilde ilişkili olabileceğini öne sürmüştür. akut böbrek hasarının en sık nedenlerinden biri ca'dır (15). akut böbrek hasarı, ca'lı hastanede yatan hastaların yaklaşık yüzde 30'unda gelişen yaygın bir PcaS'dir (16).
reaktif oksijen türleri (roS), serbest radikal süperoksit anyonu (o2•‑), radikal olmayan hidrojen peroksit (H2o2), yüksek oranda reaktif hidroksil serbest radikal (OH•), peroksinitrit (onoo) dahil olmak üzere bir dizi oksijen ara maddesinden oluşur. , ve singlet oksijen (1o2) (17). roS'nin akut iskemik böbrek yetmezliği, böbrek greft reddi, akut glomerülonefrit ve toksik böbrek hastalıkları gibi çeşitli deneysel böbrek koşullarında önemli bir rol oynadığı ortaya konmuştur (18). Akut iskemik inme (19) ve akut miyokard enfarktüsünün (20) hemen ardından roS sentezini destekleyen önemli kanıtlar vardır. roS'nin inme ve miyokard enfarktüsü gibi iskemik hastalıklarda önemli olduğu bilinmektedir. Örneğin, Hackenhaar ve arkadaşları (21) roS'nin PcaS'li hastaların kanında üretildiğini bildirmiştir; ancak çalışmalar, PcaS sonrası erken dönemde yaklaşık olarak böbrekte roS oluşumunu nadiren araştırmıştır (22,23).
Bu nedenle roS'nin ca sonrası böbrek hasarında önemli olduğu ve PcaS'nin erken evrelerinde düşük sağkalım oranına katkıda bulunduğu varsayılmıştır. Bu hipotezi incelemek için sıçanlarda asfiksiyel ca indüklendi ve PcaS'nin erken evrelerinde hayatta kalma oranı gözlemlendi. ek olarak, roSc'yi takiben PcaS ile ilişkili düşük sağkalım oranını artırmak için acil ve gecikmeli hipotermi uygulandı. Ayrıca böbrek fonksiyon bozukluğu histopatolojik olarak analiz edildi ve bakır-çinko süperoksit dismutaz (Sod‑1), manganez süperoksit dismutaz (Sod‑2), katalaz (caT) ve glutatyon peroksidaz (GPX) gibi roS tarafından indüklenen değişiklikler değerlendirildi. roSc'yi takiben immüno-histokimyasal analiz yoluyla.
cistanche ilaç özel
Malzemeler ve yöntemler
Deney hayvanları ve grupları.Jeonbuk ulusal üniversitesinin (iksan, Kore cumhuriyeti) deney hayvanı merkezinden toplam 62 erkek Sprague-Dawley (Sd) sıçanı (ağırlık, 270‑300 g; yaş, 10 hafta) elde edildi. 12 saatlik aydınlık/karanlık döngüsü altında 23±2˚C sıcaklıkta ve yüzde 60±10 nemde barındırıldılar. Yiyecek ve suya ücretsiz erişimleri sağlandı. tüm deney protokolleri, Jeonbuk ulusal üniversitesinin kurumsal hayvan bakım ve kullanım komitesi tarafından etik prosedürlere ve bilimsel bakıma dayalı olarak onaylanmıştır (onay no. JBnu 2020‑084).
Deney hayvanları üç kategoride [sahte operasyon grubu, normotermi altında ca ve ca ve hipotermi tedavisi (HT)] aşağıdaki gibi katmanlara ayrıldı: i) grup I, bir sahte grup (n=5) normotermi koşulları altında tutuldu ca olmadan; ii) grup ii, CA (n=17) sonrasında hipotermi (33°C) tedavisi olmayan bir normotermi grubu; ve iii) grup iii (n=40), normotermi altında ca uygulanan ve ca sonra 2 saat (n=17), 4 saat (n=13) HT ile tedavi edilen bir grup ve roSc'yi takiben 6 saat (n=10), tüm sıçanlar tekrar normotermiye ısıtıldı.
CA indüksiyonu ve CPR.Ca ve cPr daha önce tarif edildiği gibi (24,25) küçük modifikasyonlarla (Şekil 1) gerçekleştirilmiştir. Kısaca, sıçanlara yüzde 2-3 izofluran ile anestezi uygulandı ve bir kemirgen vantilatörü (Harvard cihazı) kullanılarak solunumu sürdürmek için mekanik olarak havalandırıldı. Periferik oksijen satürasyonunu (Spo2) izlemek için sol ayağa bir nabız oksimetre oksijen satürasyon probu (Nonin Medical, inc.) takıldı. Ameliyat sırasında ve sonrasında vücut ısısı 37±0.5˚C'de tutuldu. Elektrokardiyogram (ecG) değişikliklerini izlemek için, sürekli olarak izlenen üç elektrotlu veri sağlamak üzere uzuvlara elektrokardiyografik problar (cytiva) yerleştirildi. Sol femoral arter ve sağ femoral ven, ortalama arteriyel basıncı (MaP) (MLT 1050/d; ADInstruments, ltd.) ve intravenöz enjeksiyonu izlemek için ayrı ayrı kanüle edildi.
5 dakikalık bir stabilizasyon süresinin ardından veküronyum bromür (2 mg/kg; Gensia Sicor Pharmaceuticals, inc.) intravenöz olarak uygulandı, anestezi durduruldu ve mekanik ventilasyon geri çekildi. CA'yı tanımlamak için 25 mm-Hg'nin altında bir MaP ve ardından nabızsız elektrik aktivitesi kullanıldı (25,26). CA, vekuronyum bromür enjeksiyonunu takiben 3‑4 dakikada doğrulandı. yaklaşık 5 dakika sonra cPr, bolus epinefrin (0.005 mg/kg; Sigma‑Aldrich;
Merck KGaa) ve sodyum bikarbonat (1 meq/kg; Sigma-Aldrich; Merck KGaa) ardından MaP 60 mm-Hg'ye ulaşana ve elektrokardiyografik aktivite gözlemlenene kadar yüzde 100 oksijen ve 300/dk hızında manuel göğüs kompresyonları ile mekanik ventilasyon . hayvan hemodinamik olarak stabil hale geldiğinde ve spontan nefes aldığında (genellikle roSc'den 1 saat sonra), kateterler çıkarıldı ve hayvan ekstübe edildi.
Gruplar arasında sıcaklık yönetimi.Normotermi grubunun vücut ısısı, CA ameliyatı sırasında ve sonrasında 37±0.5˚C'de tutuldu ve sıçanlar zaman çizelgesine göre kurban edilene kadar korundu. hipotermi grubunda ca normal sıcaklıkta kuruldu; ardından vücut ısısı, CPR'yi takiben 2, 4 ve 6 saat boyunca buz paketleri ve fanlar ile 33±0.5˚C'de tutuldu ve ısıtma yastığı ile istenen sıcaklığa kadar hızla yeniden ısıtıldı ( 37±0.5˚C) elde edildi. Sıçanlar daha sonra CPR/roSc'yi takiben bir gün kurban edilene kadar kafeslerine geri alındı. Vücut sıcaklığı bir rektal sıcaklık sensörü (27) kullanılarak izlendi.
Serum biyokimyasal analizi.Tüm hayvanları uyuşturmak için intraperitoneal 30 mg/kg pentobarbital sodyum (JW Pharm co., ltd.) enjeksiyonu kullanıldı. Her gruptaki her hayvanın karın damarlarından kan alındı. Serum, kan santrifüjü ile toplandı (2.774 xg, 15 dakika, 4˚C) ve analize kadar -80˚C'de saklandı. Serumdaki kan üre nitrojeni (Bun) ve kreatinin seviyeleri, Uluslararası Klinik Kimya Federasyonu (28) tarafından belirtilen yöntemlere göre otomatik bir kimyasal analiz cihazı Hitachi 2070 (Hitachi, ltd.) kullanılarak belirlendi. tüm deneyler, taze serum kullanılarak üç kopya halinde gerçekleştirildi.
Doku işleme.Sıçanlara 200 mg/kg pentobarbital sodyumun (JW Pharm co., ltd.) intraperitoneal enjeksiyonu ile derin anestezi uygulandı ve 0.1 M ile transkardiyal olarak perfüze edildi. fosfat tamponlu salin (PBS; pH 7.4), ardından 0.1 M fosfat tamponu (PB; pH 7.4) içinde yüzde 4 paraformaldehit. Böbrekler her hayvandan izole edildi ve 1 hafta boyunca oda sıcaklığında 0.1 M PB (pH 7.4) içinde yüzde 4 paraformaldehit ile sabitlendi, daha sonra sagital olarak dilimlendi, parafine gömüldü ve kesitlere ayrıldı (6 um).
Hematoksilen ve eozin (H&E), Periyodik Asit-Schiff (PAS) ve Masson'un trikrom boyaması.Daha önce tarif edilen bir prosedüre göre böbreklerdeki patolojik değişiklikleri incelemek için H&e boyaması yapıldı (29). Daha önce açıklanan prosedürlere (30‑32) göre glomerüllerdeki değişiklikleri incelemek için PaS boyaması yapıldı. Tübüler dilatasyon, tübüler atrofi, tübüler döküm oluşumu, vakuolizasyon, dejenerasyon, interstisyel fibroz ve tübüler epitel hücrelerinin dökülmesi veya tübüler bazal membranın daha önce tarif edilen prosedürlere göre kalınlaşması göz önünde bulundurularak tübüler yaralanmayı tanımlamak için Masson'un trikrom boyama yöntemi kullanıldı (33). ,34).
toplam 2 deneyimli patolog, histopatolojik değişiklikleri çift kör bir şekilde değerlendirdi. 10 lekeli bölümün/sıçanın görüntüleri, bir Leica dM 2500 ışık mikroskobu (Leica Microsystems GmbH) kullanılarak x400 büyütmede yakalandı. Her bölümde toplam 10 alan analiz edildi. Renal lezyonların histopatolojik analizi daha önce tarif edilen prosedürlere göre yapıldı (35,36). Kısaca, lezyonlar önemli mikroskopik lezyonlar (nSMl), minimal, hafif, orta veya belirgin lezyonlar olarak kategorize edildi ve kör testle aşağıdaki skala kullanılarak derecelendirildi: normal, 0 puan;<25% damage,="" 1="" point;="" 26‑50%="" damage,="" 2="" points;="" 51‑75%="" damage,="" 3="" points;="" and="" 76‑100%="" damage,="" 4="">
Glomerüler lezyonlar, hücresel elementlerin kaybı, kılcal lümenin çökmesi, Bowman kapsülüne yapışık veya yapışık olmayan amorf hiyalin materyali (30‑32) ile tanımlandı ve aşağıdaki sayısal ölçeklerle puanlandı: hasar yok, { {7}} puan; çok hafif, 1 puan; hafif, 2 puan; orta, 3 puan; ve şiddetli, 4 puan. Tübüler yaralanma aşağıdaki puanlama sistemine göre puanlanmıştır: tübüler yaralanma yok, 0 puan; Tübüllerin yüzde 1-9'u yaralandı, 1 puan; Tübüllerin yüzde 10-25'i yaralandı, 2 puan; Tübüllerin yüzde 26-50'si yaralandı, 3 puan; Tübüllerin yüzde 51-75'i yaralandı, 4 puan; ve tübüllerin en az yüzde 76'sı yaralanmış, 5 puan (33,34).
Malondialdehit (MDA).Renal korteksteki Mda konsantrasyonu, daha önce tarif edilen bir protokole göre değerlendirildi (23,37,38). kısacası böbrek dokularının homojenizasyonu ve santrifüjü 8,832 xg'de 10 dakika 4˚C'de yapıldı ve süpernatant toplandı ve MDA analizi için -80˚C'de saklandı. MDA içeriği, TBarS test kitinin (kat. no. 10009055; cayman kimya şirketi) talimatlarına göre belirlendi.
Antioksidan enzimler için immünohistokimya (IHC). iHc, böbrekteki antioksidan immünreaktivitelerdeki değişiklikleri incelemek için Sod‑1, Sod‑2, caT ve GPX ile gerçekleştirilmiştir. iHc, daha önce tarif edilen yöntemimize (22) göre gerçekleştirildi. Kısaca, kesitler (6 µm) birincil keçi anti‑Sod1 (1:500; kat. no. SaB2500976; Sigma‑Aldrich; Merck KGaa), keçi anti‑Sod2 (1:1) ile inkübe edildi. ,000; kat. no. SaB2501676; Sigma‑Aldrich; Merck KGaa), tavşan anti‑caT (1:1,000; kat. no. ab16731; Abcam) ve tavşan anti‑GPX ( 1:1,000; kat. no. ab22604; Abcam) gece boyunca 4˚C'de, ardından biyotinlenmiş konjuge anti-tavşan (1:250; kat. no. Ba‑1000‑1.5; Vektör laboratuvarları) , inc.) ve biyotinlenmiş-konjuge anti-keçi (1:250; kat. no. Ba‑5000‑1.5; Vector Laboratories, Inc.) 2 saat boyunca 24˚C'de ve Vectastain aBc (Vektör laboratuvarları) kullanılarak geliştirilmiş ikincil antikorlar , inc.). Daha sonra bir 3,3'‑diaminobenzidin solüsyonu (0,1 M Tris‑HCl tamponu içinde) ile görselleştirildiler.
Kesitleri x400 büyütmede görüntülemek için Leica dM 2500 mikroskobu kullanıldı. Toplam 10 bölüm/sıçan seçilmiş ve 10 alan ele geçirilmiştir. Göreceli optik yoğunluğun (çubuk) yüzdesini (yüzde) ölçmek için görüntü eşiği analizi yazılımı sürüm 1.52a (ulusal Sağlık Enstitüsü) kullanıldı.
İstatistiksel analiz.Tüm deneyler üç kopya halinde tekrarlandı. Ortalama (SeM) değerlerinin ortalama ± standart hatası olarak ifade edilen verileri analiz etmek için Graph Pad Prism sürüm 5.0 (GraphPad Software, inc.) kullanıldı. Hayatta kalma, Kaplan‑Meier istatistikleri ve log-rank testi kullanılarak analiz edildi. MaP ve periferik oksijen, zamanın etkisini değerlendirmek için bir ve iki yönlü tekrarlanan varyans analizi ölçümleri kullanılarak karşılaştırıldı. Farklılıkların önemini belirlemek için, tüm ikili çoklu karşılaştırmalar için Tukey testi kullanılarak post hoc analizler yapıldı. P<0.05 was="" considered="" to="" indicate="" a="" statistically="" significant="">
Sonuçlar
Fizyolojik değişiklikler, hayatta kalma oranı ve serum biyokimyasal değişkenleri. Vücut ağırlığı, MaP ve Spo2 dahil olmak üzere başlangıç özellikleri açısından gruplar arasında istatistiksel olarak anlamlı bir fark yoktu (Tablo i ve Şekil 2). ca indüksiyonu, veküronyum bromürün (2 mg/kg) intravenöz enjeksiyonunu takiben 3‑4 dakika sonra meydana geldi. CA, bir izoelektrik ecG, Spo2 ve MaP ile doğrulandı ve bunlar, deney protokolüne göre beklendiği gibi değişti (Şekil 2a‑c). Şekil 2d'de gösterildiği gibi, vücut ısısı roSc'yi takiben tüm gruplar arasında farklıydı, Şekil 3'te gösterildiği gibi, her grubun hayatta kalma oranı yaklaşık bir gün sonra değerlendirildi. II. Grup'un oranı yüzde 42,9 oldu.
Grup iii'de 2 saat HT sonrası oran yüzde 42,9, 4 saat HT sonrası oran yüzde 57,1 ve 6 saat HT sonrası oran yüzde 71,4 idi. bu deneyde Grup ii'deki sıçanlar ile Grup iii'deki 2 h-HT'li sıçanlar arasında fark yoktu.
Şekil 4B'de gösterildiği gibi, Grup i'deki serum Bun seviyesi, ca'dan bir gün sonra 13.8 mg/dl idi. grup ii'de Bun seviyesi önemli ölçüde 35.3 mg/dl'ye yükseldi. Grup iii'te, Bun seviyesi 3{{10}}0,7 mg/dl, 2 h‑HT'yi takiben 25.0 mg/dl, 4 h‑HT'yi takiben ve 22,7 mg/dl idi. dl 6 h‑HT'den sonra. ek olarak, Şekil 4c'de gösterildiği gibi, Grup I'deki serum kreatinin düzeyi {{20}}.23 mg/dl idi. grup ii'de, kreatinin seviyesi önemli ölçüde 0.43 mg/dl'ye yükseldi. grup iii'de, kreatinin seviyeleri Grup ii'de gözlemlenenden şu şekilde daha düşüktü: 2 saat-HT'yi takiben 0,39 mg/dl, 4 saat-HT'yi takiben 0,37 mg/dl ve 6 saat-HT'yi takiben 0,36 mg/dl.
Histopatolojik bulgular. Grup I'de (sham), bozulmamış histolojik yapılar H&e, PaS ve Masson'un trikrom boyaması ile ortaya çıkarıldı (Şekil 5A). Tüm gruplarda interstisyel fibrozis saptanmadı, bu arada Grup ii'de roSc'den bir gün sonra H&e, PaS ve Masson'un trikrom boyaması kullanılarak ca-indüklenen renal histopatoloji incelendi. Şiddetli CA'nın neden olduğu böbrek hasarı, proksimal tübüllerde ve glomerüllerde önemli ölçüde arttı; özellikle renal tübüler epitel hücrelerinin fırça kenarları ciddi şekilde aşınmıştır (Şekil 5a ve B). ayrıca bu grupta glomerüler kapillerler inflamatuar hücrelerle dilate idi ve interstisyel ödem ve akut renal tübüler nekroz Grup I'de gözlenenlerle karşılaştırıldığında ciddiydi (Şekil 5a).
Grup iii'de, roSc'den bir gün sonra böbrek hasarında azalma görüldü (Şekil 5a ve B). özellikle, proksimal tübüllerde ca-kaynaklı yaralanma, Grup ii'de gözlemlenene kıyasla 6 saat-HT'yi takiben önemli ölçüde azaldı. ek olarak, Grup ii'de ortaya konanla karşılaştırıldığında proksimal tübüllerin lokal genişlemesi azalmıştır (Şekil 5A). Glomerüller için, 6 h-HT, Grup ii'de (Şekil 5a ve B) ortaya konanla karşılaştırıldığında glomerüler hasarı önemli ölçüde azalttı.
MDA seviyesi. Şekil 4a'da gösterildiği gibi, renal korteksteki Mda seviyesi, Grup i'ye kıyasla Grup ii'de yaklaşık bir gün sonra önemli ölçüde arttı. Ancak Grup III'te 4 saat ve 6 saat HT'yi takiben MDA seviyesi önemli ölçüde azaldı. 2 h-HT'de de azalmıştı, ancak Grup ii ile karşılaştırıldığında istatistiksel olarak anlamlı bir fark yoktu.
Antioksidan enzim immünreaktivitelerinin bulguları.
Grup I'de normal Sod‑1, Sod‑2, GPX ve caT immünreaktiviteleri değerlendirildi ve esas olarak tübüllerde yerleştikleri ortaya çıktı (Şekil 6a). Grup ii'de, Sod‑1, Sod‑2, GPX ve CAT immünreaktiviteleri, Grup i'de ortaya konanlarla karşılaştırıldığında roSc'den bir gün sonra önemli ölçüde azaldı (Şekil 6a ve B).
Grup iii'te, Sod‑1, Sod‑2, GPX ve caT immünreaktiviteleri, 2 h‑HT'yi takiben Grup ii'de gözlenenlerden önemli ölçüde farklı değildi (Şekil 6a ve B). 4 h‑HT durumunda, dört immünoreaktivite, Grup ii'de (Şekil 6a ve B) ortaya konanlardan önemli ölçüde daha yüksekti ve bu, özellikle GPX immünoreaktivitesinin diğer immünoreaktivitelerle karşılaştırıldığında önemli ölçüde daha yüksek olduğunu gösteriyordu. 6 h‑HT durumunda, tüm immünreaktiviteler, 4 h‑HT alan sıçanlarda tanımlananlardan daha yüksekti ve bu, her Sod‑1, Sod‑2, GPX ve caT immünoreaktivitesinin çubuğunun 78.4, 67.4 olduğunu ortaya çıkardı, Grup i ile karşılaştırıldığında sırasıyla yüzde 86.5 ve yüzde 79.5 (Şekil 6a ve B).
herba epimedium yay
Tartışma
Hayvan çalışmalarında yaklaşık olarak (39,40) sonra iskemi/reperfüzyon (i/r) hasarından sonra en çok etkilenen organlar kalp ve beyindir. bununla birlikte, bazı çalışmalarda akut böbrek hasarının nörolojik iyileşme üzerinde etkisi olduğu bildirilmiştir (41,42). Bu nedenle, ca ve cPr'yi takiben akut böbrek hasarını araştırmak önemlidir. Bu çalışmada, yetişkin erkek Sd sıçanları vekuronyum bromür enjekte edilerek asfiksiyel ca için kullanıldı. CA asfiksi indüksiyonundan 3‑4 dakika sonra doğrulandı ve cPr yaklaşık 5 dakika sonra yapıldı. MaP, ecG ve Spo2, yaklaşık olarak ve roSc sonrasında beklendiği gibi değiştirildi. bu çalışmamızda, Grup iii'deki hayatta kalma oranı, roSc'den bir gün sonra 2 saat-HT'ye maruz bırakılan sıçanlarda yüzde 42,9, 4 saat-HT ile tedavi edilen sıçanlarda yüzde 57,1 ve 6 saat-HT'ye maruz bırakılan sıçanlarda yüzde 71.4 idi. che ve arkadaşları (26) bir sıçan asfiksiyel ca modelinde roSc'den iki gün sonra hayatta kalma oranının yüzde 40 olduğunu bildirmiştir. ek olarak, Wang ve arkadaşları (43) roSc'yi takiben sıçanlarda hipotermi ve levosimendan (bir kalsiyum duyarlılaştırıcı ve potasyum kanal açıcı) kombinasyonunun sağkalımı önemli ölçüde artırdığını bildirmiştir. Bu bulgulara dayanarak, ca'lı sıçanlarda HT, roSc'den birkaç gün sonra hayatta kalma oranını artırabilir. Bununla birlikte, insanlarda, HT'den sonra, roSc'yi takiben hayatta kalma oranını pek artırmaz (44).
başarılı resüsitasyonun ardından ca'lı hastaların yüzde 12‑28'inde renal disfonksiyon bildirilmiştir (13). ek olarak, ca sonra resüsite edilen hastaların yüzde 43'ünde akut böbrek hasarı gelişti ve bu atakların yüzde 75'inden fazlası ca'yı takip eden üç gün içinde meydana geldi (45). hayvan modellerinde, i/R tarafından indüklenen akut böbrek hasarı (yani, CA'yı takiben ROSC) HT tarafından önemli ölçüde azaltılmıştır (43,46,47). Örneğin, Tissier ve arkadaşları (47) kontrol grubu ile karşılaştırıldığında histopatoloji ve elektron mikroskobuna dayalı olarak bir tavşan modelinde HT ile böbrek lezyonlarının önemli ölçüde azaldığını bildirmiştir. bizim çalışmamızda, Grup ii'deki böbreklerin histopatolojik glomerüler ve tübüler lezyon skorları roSc'den bir gün sonra belirgin olarak yükselmiştir. bu grupta, plasebo grubu (Grup i) ile karşılaştırıldığında, ROSC'yi takiben serum Bun ve kreatinin seviyeleri önemli ölçüde arttı. Bu sonuçlar, köpek, tavşan ve domuz yavrusu modellerini (47‑49) içeren önceki çalışmaların sonuçlarına benzerdi. Bu nedenle, deney hayvanlarında ca'yı takip eden erken fazda böbrek hasarı ciddi şekilde arttı. bu çalışmamızda, Grup iii'deki renal glomerüler ve tübüler lezyonlar ve histopatolojik skorlar, roSc'den bir gün sonra 4 saat ve 6 saat HT'yi takiben Grup ii'ye kıyasla önemli ölçüde azaldı. Ribeiro ve diğerleri (46) ve Souza ve diğerleri (50), HT'nin renal i/r hasarının hayvan modellerinde etkili olduğunu bildirmiştir. Islam ve arkadaşları (23) ve Jawad ve arkadaşları (22) bir asfiksiyel ca modelinde HT'nin böbrek hasarının şiddetini azalttığını ve hayatta kalma oranını arttırdığını belirlemiştir. Bulgular, HT'nin artmış sağkalım oranı ile ilişkili önemli bir renal koruyucu etkiye sahip olduğunu ileri sürdü.
Endojen antioksidan enzimler temel olarak Sods, CAT ve GPX'i içerir. Bu enzimler, o2•‑ ve OH•'ye karşı ilk savunma hattını sağlar. SOD‑1 ve SOD‑2, o2•‑'nin o2 ve H2o2'ye dismutasyonunu katalize ederek oksidatif strese karşı bir savunma sağlar (51). Oksidatif stres, PcaS sırasında organ hasarı ve hemodinamik disfonksiyon ve i/r yaralanması sırasında roS oluşumunda çok önemli bir faktördür. Antioksidan enzimlerin aktivitesi, ca (21) sonrasında i/r hasarı ile değiştirilir. çalışmamız, Grup ii'de, Grup i'ye kıyasla roSc'yi takiben Sod‑1, Sod‑2, GPX ve caT düzeylerinin düştüğünü ortaya koydu. Bu antioksidan enzimlerin seviyeleri, i/r'yi takiben azalır, bu da roS salınımı sonucu endojen antioksidanların tüketimine bağlı olarak hücre hasarına ve ölüme neden olur (52).
Xia ve arkadaşları (53) renal i/r hasarında HT'ye maruz kalan farelerin böbrek dokularında antioksidan aktivitenin arttığını bildirmiştir. Hackenhaar ve arkadaşları (21) insanlarda roSc'yi takiben 6, 12, 36 ve 72-saat HT'den sonra Sod‑1, Sod‑2, GPX ve caT aktivitesinde önemli bir artış gözlemledi. Asfiksiyel ca'nın sıçan modelini kullanan önceki çalışmalarda, İslam ve diğerleri (23) ca'yı takiben HT'nin böbrekteki oksidatif stresi azalttığını bildirmiştir ve Jawad ve diğerleri (22) ca'dan sonra HT'nin böbreği ca'nın neden olduğu hasara karşı koruduğunu bildirmiştir, böbrekte nrf2/Ho‑1'in arttığını gösterir. bu çalışmamızda, Grup iii'de 4 saat-HT ve 6 saat-HT'yi takiben Sod‑1, Sod‑2, GPX ve caT'nin immünoreaktiviteleri, Grup ii ile karşılaştırıldığında, HT'nin antioksidan enzimleri aktive ettiğini ve azalttığını düşündürmektedir. oksidatif stres.
Bu çalışmanın sağkalım, histopatoloji, biyokimyasal ve immünohistokimyasal sonuçlarına dayanarak, sıçan modelimizde asfiksiyel ca. Bununla birlikte, ROSC'yi takiben 4 saat veya 6 saat HT böbrek hasarını önemli ölçüde azalttı, bu da HT'nin Sod‑1, Sod‑2, GPX ve caT gibi antioksidan enzimlerin aktivasyonunu indüklediğini ve bunun da böbreklerde oksidatif stresin azalmasına neden olduğunu düşündürdü. sonuç olarak, HT'nin bir antioksidan mekanizma ile böbrek hasarını azalttığı ve erken sağ kalımı arttırdığı varsayılmıştır. Bununla birlikte, roSc'yi takiben yaklaşık olarak böbrek hasarı ve HT'nin mekanizmasını aydınlatmak için western blot analizi gereklidir. Bu, mevcut çalışmanın potansiyel bir sınırlamasıdır ve daha ileri çalışmalara duyulan ihtiyacın altını çizmektedir.
mirisetin
1Acil Tıp Departmanı, Jeonbuk ulusal üniversitesinin klinik Tıp araştırma enstitüsü, Jeonju, Jeollabuk‑do 54907;
2Veterinerlik ve Biyogüvenlik araştırma enstitüsü koleji, Jeonbuk ulusal üniversitesi, san, Jeollabuk-do 54596;
3Biyomedikal Bilim Bölümü ve Biyobilim ve Biyoteknoloji araştırma enstitüsü, Hallym Üniversitesi, chuncheon, Gangwon‑do 24252;
4Cerrahi Bölümü, Kangwon Ulusal Üniversite Hastanesi,
Tıp Fakültesi, Kangwon ulusal üniversitesi, chuncheon, Gangwon‑do 24289; 5Nörobiyoloji Bölümü, Tıp Fakültesi, Kangwon ulusal üniversitesi, chuncheon, Gangwon‑do 24341, Kore Cumhuriyeti
Teşekkür
uygulanamaz.
Finansman
Bu çalışma, Eğitim Bakanlığı tarafından finanse edilen Kore Ulusal Araştırma Vakfı aracılığıyla Temel Bilim Araştırma Programı tarafından desteklenmiştir (hibe no. nrF‑2019r1c1c1002564, nrF‑2019r1F1a1062696 ve nrF-2021r1F1a1059992).
Veri ve materyallerin mevcudiyeti
Mevcut çalışma sırasında kullanılan ve/veya analiz edilen veri setleri, makul talep üzerine ilgili yazardan temin edilebilir.
Yazar katkıları
SeK, HYS, MHW ve HJT, deneysel tasarım, veri toplama, veri analizi ve makale yazmadan sorumluydu. eYl, YJY, rHK, JHc ve TKl deneyleri ve veri analizini gerçekleştirdi. dca, BYP, JcY, SKH ve iSK, veri analizini gerçekleştirdi ve çalışmanın tüm süreci hakkında kritik yorumlar yaptı. tüm yazarlar son makaleyi okumuş ve onaylamıştır. HYS ve HJT, tüm ham verilerin doğruluğunu onaylar.
Etik onay ve katılım onayı
tüm deney protokolleri, Jeonbuk ulusal üniversitesinin Kurumsal Hayvan Bakım ve Kullanım Komitesi tarafından etik prosedürlere ve bilimsel bakıma dayalı olarak onaylanmıştır (onay no. JBnu 2020‑084; Jeonju, Güney Kore).
Yayın için hasta onayı
uygulanamaz.
rekabet eden çıkarlar
Yazarlar, rekabet eden çıkarları olmadığını beyan eder.
Referanslar
1. Girotra S, chan PS ve Bradley SM: Hastane dışı ve hastane içi kalp durması sonrasında resüsitasyon sonrası bakım. Kalp 101: 1943-1949, 2015.
2. ROH Yi, Jung WJ, Hwang So, Kim S, Kim HS, Kim JH, Kim TY, Kang HS, Lee JS ve Cha KC: Daha kısa defibrilasyon aralığı, başarılı defibrilasyon ve resüsitasyon sonuçlarını destekler. canlandırma 143: 100‑105, 2019.
3. Xanthos T, iacovidou n, Pantazopoulos i, Vlachos I, Bassiakou e, Stroumpoulis K, Kouskouni e, Karabinis a ve Papadimitriou l: İskemi ile modifiye edilmiş albümin kardiyopulmoner resüsitasyonun sonucunu tahmin ediyor: deneysel bir çalışma. canlandırma 81: 591-595, 2010.
4. Yeh ST, Cawley RJ, aune Se ve Angelos MG: spontan dolaşımın geri dönüşünü etkilemek için kardiyopulmoner resüsitasyon (cPr) sırasında oksijen gereksinimi. canlandırma 80: 951-955, 2009.
5. lópez‑Herce J, del castillo J, Matamoros M, canadas S, rodriguez‑calvo a , cecchetti c , rodríguez‑núnez a ve carrillo Á; iberoamerican Pediatrik kalp durması Çalışma ağı riBePci: Pediatrik hastane içi kardiyak arrestte mortalite ile ilişkili spontan dolaşım faktörlerinin geri dönüşü sonrası: ileriye dönük çok merkezli çok uluslu gözlemsel bir çalışma. kritik bakım 18: 607, 2014.
6. Mongardon n, Dumas F, S, Grimaldi d, Hissem T, Pène F ve cariou a: Kardiyak arrest sonrası sendromu: Acil resüsitasyondan uzun vadeli sonuçlara. ann yoğun bakım 1: 45, 2011.
7. Neymar RW, Nolan JP, Adrie c, Hibiki M, Berg RA, Böttiger BW, Callaway c, Clark rS, Geocadin RG, Jauch EC, ve diğerleri: Post-kardiyak arrest sendromu: epidemiyoloji, patofizyoloji, tedavi ve prognostik. Uluslararası resüsitasyon irtibat komitesinden (Amerikan Kalp Derneği, Avustralya ve Yeni Zelanda resüsitasyon konseyi, Avrupa resüsitasyon konseyi, Kanada Kalp ve İnme Vakfı, Interamerican Kalp Vakfı, Asya resüsitasyon konseyi ve Güney Afrika resüsitasyon Konseyi) bir konsensüs bildirisi ); amerikan kalp derneği acil kardiyovasküler bakım komitesi; kardiyovasküler cerrahi ve anestezi konseyi; kardiyopulmoner, Perioperatif ve kritik bakım konseyi; klinik kardiyoloji konseyi; ve İnme Konseyi. sirkülasyon 118: 2452-2483, 2008.
8. Nolan JP, Neumann RW, Adrie c, Hibiki M, Berg RA, Böttiger BW, Callaway c, Clark rS, Geocadin rG, ve diğerleri: Post-kardiyak arrest sendromu: epidemiyoloji, patofizyoloji, tedavi ve prognostik. Uluslararası İrtibat Komitesinden resüsitasyonla ilgili Bilimsel Açıklama; amerikan kalp derneği acil kardiyovasküler bakım komitesi; kardiyovasküler cerrahi ve anestezi konseyi; kardiyopulmoner, Perioperatif ve kritik bakım konseyi; klinik kardiyoloji konseyi; inme konseyi. resüsitasyon 79: 350‑79, 2008. DOI: 10.1016/j.resuscitation.2008.09.017
9. Jentzer Jc, Md ve dezfulian c'yi değiştirin: Kardiyak arrest sonrası miyokardiyal disfonksiyon ve şok. BioMed res int 2015: 314796, 2015.
10. Madl c ve Holzer M: Kardiyak arrest sonrası resüsitasyon sonrası beyin fonksiyonu. curropin kritik bakım 10: 213‑217, 2004.
11. Roberts BW, Kilgannon JH, chansky Me, Mittal n, Wooden J, Parrillo Je ve Trzeciak S: Postkardiyak arrest sendromunda spontan dolaşımın geri dönmesinden sonra çoklu organ disfonksiyonu. kritik bakım Med 41: 1492-1501, 2013.
12. Zeiner a, Sunder‑Plassmann G, Sterz F, Holzer M, kaybedenler H, laggier an ve Müllner M: Erkeklerde kardiyopulmoner resüsitasyon sonrası hafif terapötik hipoterminin böbrek fonksiyonu üzerindeki etkisi. canlandırma 60: 253-261, 2004.
13. Yanta J, Guyette FX, Doshi a, Callaway CW ve Rittenberg Jc; Kardiyak arrest sonrası Servis: Hastane dışında kardiyak arrest sonrası resüsitasyon sonrası böbrek fonksiyon bozukluğu yaygındır. canlandırma 84: 1371-1374, 2013.
14. lee JH, Lee TK, Kim iH, lee Jc, Won MH, Park JH, Ahn JH, Shin Mc, ohk TG, Moon JB, et al: aşağıdaki sıçanların kalplerindeki histopatoloji ve tümör nekroz faktörü düzeylerindeki değişiklikler asfiksiyel kalp durması. Clin Exp Emerg Med 4: 160-167, 2017.
15. Lucchino S, Kellum Ja, Bellomo r, Doig GS, Morimatsu H, Morgera S, Schetz M, Tan i, Bouman c, Macedo e, ve diğerleri; Böbrek için Destekleyici Tedaviyi Başlatma ve Bitirme (BeST Böbrek) araştırmacıları: kritik hastalarda akut böbrek yetmezliği: çok uluslu, çok merkezli bir çalışma. JAMA 294: 813-818, 2005.
16. Mattana J ve Singhal Pc: Kardiyopulmoner resüsitasyon sonrası akut böbrek yetmezliğinin prevalansı ve belirleyicileri. baş stajyer Med 153: 235‑239, 1993.
17. Sachse a ve Wolf G: anjiyotensin ii'nin neden olduğu reaktif oksijen türleri ve böbrek. J am Soc Nephrol 18: 2439-2446, 2007.
18. Baud l ve ardaillou r: reaktif oksijen türleri: Böbrekte üretimi ve rolü. J Physiol 251: F765‑F776, 1986.
19. rodrigo r , Fernández‑Gajardo r , Gutiérrez r , Matamala JM, carrasco r , Miranda‑Merchak a ve Feuerhake W: oksidatif stres ve iskemik inmenin patofizyolojisi: yeni terapötik fırsatlar. CNS Nörol Bozukluğu İlaç Hedefleri 12: 698-714, 2013.
20. Shahzad S, Hasan a, Faizy AF, Mateen S, Fatima n ve Moin S: miyokard enfarktüslü hastalarda uygulanan yüksek DNA hasarı, oksidatif stres ve bozulmuş yanıt savunma sistemi. Clin Appl Tromb Hemost 24: 780-789, 2018.