Laminaria Japonica ve Cistanche Tubulosa Ekstraktlarının Kombine Tedavisinin Saç Büyümesinde Etkinliği

İletişim: emily.li@wecistanche.com

Kyungha Shin1# ve diğerleri

Saçlı derideki saç dökülmesi son zamanlarda gençlerde bile artarak bireylerin yaşam kalitesini ciddi şekilde etkilediği için,saç uzaması-Laminaria japonica özütünün (LJE) uyarıcı etkileri veCistanche tübülozaözü (CTE) araştırıldı. Tıraş altında foliküllerin anagen fazı doğrulandıktan sonra, erkek C57BL/6 farelerine yüzde 3 Minoxidil deri yoluyla uygulandı veya LJE ve CTE（ kombinasyonları ile ağızdan uygulandı.Cistanche tübülozaAyıkla)21 gün boyunca. Minoxidil, saçların yeniden büyümesini ve -glutamil transpeptidaz (-GTP) ve alkalin fosfataz (ALP) aktivitelerini arttırdı. Ek olarak, Minoxidil, epidermal büyüme faktörü (EGF) ve vasküler endotelyal büyüme faktörü (VEGF) seviyelerini yukarı regüle etti. LJE ve CTE'nin birlikte yönetimi（Cistanche tübülozaAyıkla)54 mg/kg LJE artı 162 mg/kg, CTE (Cistanche tübülozaAyıkla)yüzde 3 Minoxidil ile karşılaştırılabilir, saçın yeniden büyümesi üzerinde sinerjik teşvik edici etkiler uyguladı. LJE tercihen ALP etkinliğini artırırken, CTE（Cistanche tübülozaAyıkla)hem -GTP hem de ALP aktivitelerinin yanı sıra EGF ve VEGF ifadelerini arttırdı. İn vivo hava kesesi inflamasyon modeli, karagenan kaynaklı vasküler eksüdasyon ve eksüdalardaki artan nitrik oksit ve prostaglandin E2 konsantrasyonları, LJE ve CTE'nin birlikte uygulanmasıyla sinerjik olarak baskılanmıştır.（Cistanche tübülozaAyıkla). Ek olarak, enflamatuar hücre infiltrasyonu, kombinasyon tedavisi ile büyük ölçüde inhibe edildi. Sonuçlar, LJE ve CTE ile kombinasyonel oral tedavinin（Cistanche tübülozaAyıkla)Uygun olmayan dozlar ve oranlar, kısmen anti-inflamatuar aktivitelerinin aracılık ettiği saç dökülmesini önler ve alopesiyi iyileştirir.

anahtar kelimeler Saç uzaması, iltihap, Laminaria japonica,Cistanche tübüloza, kombinasyon tedavisi

Cistanche tübülozaözütün birçok işlevi vardır

Son zamanlarda, saçlı derideki saç dökülmesi gençlerde bile artmakta ve bireyin yaşam kalitesini ciddi şekilde etkilemektedir. Kellik sağlık sorunlarından biri olmasa da, psikolojik-rahatsız edici sosyal strese neden olabilir. Bu nedenle, saç dökülmesi ve yeniden büyümesi için yeni önleyici ve/veya tedavi edici materyallerin geliştirilmesi büyük ilgi görmektedir. Milyar dolarlık piyasaya rağmen, şu anda etkili olan birkaç ürün var [1].
Saç kökleri büyüme (anagen), gerileme (katagen), dinlenme (telogen) ve dökülme (eksojen) döngüleri sırasında kendilerini yeniden şekillendirirler [2]. Katagen sırasında, birçok foliküler hücre programlanmış hücre ölümüne (apoptoz) [3] uğrar, bu da foliküller telojene girerken folikül boyutunu azaltır. Foliküllerin çıkıntı bölgesinde yer alan nadiren döngüsel epitel kök hücrelerinin aktivasyonu, bir sonraki anagen fazın başlangıcında foliküler rejenerasyonu sağlar [4]. Kök hücre soyu erken anajen sırasında yeni bir foliküler matris oluşturur ve kıl gövdesi ve iç kök kılıfı bu nispeten farklılaşmamış matris hücrelerinden türetilir [5]. Kıl folikülünün boyutunun ve anajen fazın süresinin, sırasıyla kıl şaftının boyutunu (çapını) ve uzunluğunu belirlediği iyi bilinmektedir. Saçın bu döngüsel büyümesi, çeşitli büyüme faktörleri tarafından düzenlenir.

Minoxidil, finasterid ve Propecia, saç dökülmesini yavaşlatmak ve saçın yeniden büyümesini kolaylaştırmak için ticari olarak mevcuttur. Minoxidil, kolaylaştırmak için yan etki uygulayan bir vazodilatördür.saç uzaması[6] besin kaynağı ve potasyum kanalı açma aktivitelerinden kaynaklanabilir [7,8]. Minoxidil, diğer kellik tedavileri arasında androjenik alopesi için etkilidir, ancak tedavinin kesilmesinden sonraki aylar içinde etkinliği kaybolur. Karşılaştırıldığında, iyi huylu prostat hiperplazisi ve prostat kanserinin terapötikleri olan finasterid ve Propecia, androgenetik alopesi (erkek tipi kellik) için birçok ülkede tescil edilmiştir. Finasterid ve Propecia, kıl foliküllerinin altındaki papilla hücrelerinde testosteronu dihidrotestosterona (DHT) dönüştüren bir enzim olan tip II 5- redüktazı inhibe eden sentetik antiandrojenlerdir [9].

Birçok ülkede yaygın olarak bulunan Laminaria japonica, Undaria pinnatifida ve Cladosiphon okamuranus, Doğu tıbbında uzun süredir tedavi edici olarak kullanılmaktadır. Önceki çalışmalarda, bir sülfat polisakarit kompleksi olan fucoidan, deniz yosunlarından ekstrakte edilmiş ve tanımlanmış ve anti-oksidatif, anti-pıhtılaştırıcı, anti-kanser ve anti-inflamatuar aktivitelere sahip olduğu doğrulanmıştır [10,11]. Daha sonra fucoidan'ın inflamatuar hastalıklar, iskemi, immün disfonksiyon ve tümörler üzerindeki faydalı etkileri gösterilmiştir [12,13]. Diğer taraftan,Cistanche tübülozaözü (CTE), Çin'de geleneksel ilaçlar için de yaygın olarak kullanılmaktadır. CTE（Cistanche tübülozaAyıkla)kan kolesterol seviyelerini düşürerek kan akışını iyileştirir [14]. Son zamanlarda, CTE'nin, inflamatuar yolakta nitrik oksit (NO) üretiminin ana faktörleri olan tümör-nekroz faktör- (TNF- ) ve interlökin-4 (IL-4) üretimini azalttığı bildirilmiştir. [15]. Ayrıca Laminaria japonica özünden (LJE) ve CTE'den fucoidan olduğunu gösterdik.（Cistanche tübülozaAyıkla)in vitro ve in vivo olarak sinerjik olarak azaltılmış inflamasyon [16]. Özellikle, cilt (özellikle gözyaşı bezi) iltihabı ile alopesi arasında yakın bir ilişki olduğu gösterilmiştir [17]. Böylece, alopesi tedavisinin anti-inflamatuar yönleri ortaya çıkmaktadır [18].
Kan akışı ve inflamasyon üzerindeki iyileştirme faaliyetlerine dayanarak, LJE ve CTE'nin kombinasyonel etkinliğini araştırıyoruz.（Cistanche tübüloza Ayıkla)üzerindesaç uzamasıve altta yatan mekanizma(lar), iyi bilinen yüzde 3 Minoxidil (Hyundai Pharmaceutical, Seul, Kore) ile karşılaştırıldığındasaç uzamasıgüçlendirici.

Cistanche tübülozaekstrakt için iyidirSaç uzaması

Malzemeler ve yöntemler

Malzemeler

LJE ve CTE (Cistanche tübülozaAyıkla)Misuba RTech Co., Ltd.'den (Asan, Kore) elde edilmiştir. Kurutulmuş Laminaria japonica tozu, 24 saat boyunca 60oC'de saf su içinde ekstre edildi, 0.45 um'lik bir zardan süzüldü, dezenfekte edildi ve püskürterek kurutuldu.Cistanche tübülozayüzde 80 etanol içinde özütlendi, dezenfekte edildi, konsantre edildi ve kurutuldu. LJE ve CTE (Cistanche tübülozaAyıkla)4oC'de saklandı, karıştırıldı (1:3) ve kullanımdan önce saf suda eritildi ve 5 mL/kg hacimde ağızdan verildi.
Hayvanlar
Erkek C57BL/6 farelersaç uzamasıçalışma ve inflamasyon çalışması için erkek ICR fareleri Daehan Biolink'ten (Eumseong, Kore) satın alındı ​​ve sabit çevresel koşullara (23±2ºC; 45-65 yüzde bağıl nem; 12-saat ışığı) sahip bir odaya yerleştirildi. -karanlık döngü; 150-300 lüks parlaklık). Pelet yem ve arıtılmış su, ad libitum olarak mevcuttu. Tüm hayvan deneyleri, Kore'deki Chungbuk Ulusal Üniversitesi'nin (CBNU) Kurumsal Hayvan Bakım ve Kullanım Komitesi (IACUC) tarafından onaylandı ve CBNU Laboratuvar Hayvanları Araştırma Merkezi'nin Standart Operasyon Prosedürlerine (SOP) göre yapıldı.

Saç büyümesi için tedavi

C57BL/6 farelerinin (6 haftalık, n=8/grup) arka derisinde homojen pembe ten rengi gözlemlenerek anagen fazı teyit edildikten sonra, telojen fazda kırpıldıktan sonra saçlar traş edildi [1,19 ,20]. Ertesi günden itibaren, gözle görülür çizik olmayan fareler seçildi ve sözlü olarak
21 gün boyunca günde bir kez LJE (18 veya 54 mg/kg), CTE (54 veya 162 mg/kg) veya bunların karışımı (18 artı 54 veya 54 artı 162 mg/kg) ile tedavi edildi. Düşük dozlarda LJE (18 mg/kg) ve CTE (54 mg/kg), vücut ağırlığının yüzey alanı translasyonundan sonra (Km{{14}) 100 mg/vücut (70 kg) ve 300 mg/vücut tahmini insan dozlarından alınmıştır. } sırasıyla insan/Km=3 fare için). Yüksek dozda LJE ve CTE（Cistanche tübülozaAyıkla)maksimum sinerjik etkileri değerlendirmek için tek başına veya kombinasyon halinde 3 kat olarak ayarlanmıştır [16]. Minoxidil (yüzde 3, 0.2 mL), LJE/CTE tedavisi ile aynı programda traşlı cilde günde bir kez topikal olarak uygulandı.

Saç büyümesinin brüt gözlemi

Tıraştan sonraki 3-gün aralıklarla ve tedavi sırasında farelere dietil eterle hafifçe anestezi uygulandı ve fotoğrafları arka yüzlerinden çekildi. Fotoğraflardaki yeniden saç çıkma oranı (yenilenen alan/traşlı alan) bilgisayarlı bir görüntü analiz sistemi (Imageinside, Daejeon, Kore) kullanılarak analiz edildi.

Saç köklerinin mikroskobik incelemesi

14. ve 21. günlerde, fareler dietil eter ile derin anestezi ile öldürüldü ve sırt derileri çıkarıldı [1]. Sırt derisi iki parçaya bölündü. Bir parçanın formalinle sabitlenmiş, parafine gömülmüş (5 μm çapında) doku kesitleri, kıl foliküllerinin sayısını ve histolojik bulguları incelemek için hematoksilen-eozin ile boyandı. Dokunun diğer kısmı, enzim tahlili ve bağışıklık tahlili için sıvı nitrojen içinde donduruldu.

Enzim aktivitesinin tahlili

Deri dokusu, 4 hacim fosfat tamponu (pH 7.4) içinde homojenleştirildi. Homojenat, 20 dakika süreyle 3,{4}} rpm'de santrifüjlendi ve süpernatan, p-nitrofenil fosfat (PNPP)-DEAV kullanılarak -glutamil transpeptidaz (-GTP) ve alkalin fosfataz (ALP) aktivitelerinin tahlili için kullanıldı. substrat [1,21].

Cistanche tübüloza

Büyüme faktörlerinin sayısallaştırılması

Epidermal büyüme faktörü (EGF) ve vasküler endotelyal büyüme faktörü (VEGF), imalatçının talimatlarına göre enzim bağlantılı immünosorbent deneyi (ELISA) kitleri (R&D Systems, Minneapolis, ABD) kullanılarak nicelendirildi [1,22].

Enflamasyon tedavisi

ICR fareleri (7 haftalık, n=8/grup) oral olarak LJE (18 veya 54 mg/kg), CTE ile tedavi edildi.（Cistanche tübülozaAyıkla)(54 veya 162 mg/kg) veya bunların karışımı (18 artı 54 veya 54 artı 162 mg/kg) 7 gün boyunca günde bir kez [16]. LJE ve CTE'nin 1. gününde（Cistanche tübülozaAyıkla)Tedavide, farelere bir kese oluşturmak için deri altından 10 mL steril hava enjekte edildi [16,23,24]. 2 ve 5 gün sonra torbaya 5 mL hava yeniden enjekte edildi. Son LJE ve CTE'den bir saat sonra（Cistanche tübülozaAyıkla)muamele, 1 mL karagenan (tuzlu su içinde yüzde 1; Sigma-Aldrich, St. Louis, ABD) veya aracı (tuzlu su) torbaya enjekte edildi.

Eksüda analizi

Hava kesesi, karagenan enjeksiyonundan 6 saat sonra 1 mL soğuk salin ile yıkandı ve lavaj sıvısının net hacmi kaydedildi [16]. Nötrofiller, monositler ve lenfositler dahil olmak üzere toplam enflamatuar hücre sayısı, bir colter sayacı kullanılarak belirlendi.

NO ve prostaglandin E2 (PGE2) konsantrasyonları, sırasıyla bir Correlate-EIA kiti (Assay Designs, Ann Arbor, ABD) kullanılarak Griess reaktifi (Sigma-Aldrich) ve enzim immünolojik testi (EIA) ile belirlendi [16].

istatistiksel analiz

Veriler ortalama±standart hata olarak sunulmuştur. İstatistiksel anlamlılık, tek yönlü varyans analizi ve ardından posthoc Tukey'nin çoklu karşılaştırma testi ile belirlendi. P-değerleri<0.05 were="" considered="" to="" be="" statistically="">

Sonuçlar

Referans malzeme olan Minoxidil'in (yüzde 3) uygulanması,saç uzaması21. günde normal büyümedeki (Şekil 1, 2A) yüzde 29.2 ile karşılaştırıldığında, tıraş edilen alanın (Şekil 1, 2B) tama yakın bir kapsama (yüzde 92.4) sergileyen C57BL/6 fareleri. Minoxidil uygulamasından daha az etkili olsa da , LJE'nin oral tedavisi de kolaylaştırdısaç uzaması, sırasıyla 18 ve 54 mg/kg'da yüzde 33.5 ve 69,1 kapsamaya yol açar (Şekil 1, 2C, 2D). CTE（Cistanche tübülozaAyıkla)artırmada da etkili oldu.saç uzaması, sırasıyla 54 ve 162 mg/kg'da yüzde 73,6 ve yüzde 80,4 kapsamaya ulaşır (Şekil 1, 2E, 2F). Özellikle, yüksek dozlarda LJE (54 mg/kg) ve CTE ile kombinasyon tedavisi（Cistanche tübülozaAyıkla)(162 mg/kg),saç uzaması12. günden itibaren, düşük dozlarda LJE (18 mg/kg) ve CTE olmasına rağmen Minoxidil'in etkisi ile karşılaştırılabilir (Şekil 1, 2H)（Cistanche tübülozaAyıkla)(54 mg/kg) sadece erken fazda sinerjik bir etki gösterir (Şekil 1, 2G).

Şekil 1. Minoxidil veya Laminaria japonica özü (LJE) ve/veya ile tedavi edilen farelerin yeniden saç uzamasının zaman süreciCistanche tübülozaözü (CTE). ,

○normal; ● Minoxidil (yüzde 3) uygulaması; 8, 18 mg/kg LJE; 8, 54 mg/kg LJE; 8, 54 mg/kg CTE; ■, 162 mg/kg CTE; ◇, 18 mg/kg LJE artı 54 mg/kg CTE; ◆, 54 mg/kg LJE artı 162 mg/kg CTE（Cistanche tübülozaAyıkla).

Şekil 2. Minoxidil veya Laminaria japonica özü (LJE) ve/veya ile tedavi edilen farelerin yeniden saç büyümesinin temsili brüt bulgularıCistanche tübüloza21. günde özü (CTE).

A, normal; B, Minoxidil (yüzde 3) uygulaması; C, 18 mg/kg LJE; D, 54 mg/kg LJE; E, 54 mg/kg CTE（Cistanche tübülozaAyıkla); F, 162 mg/kg CTE; G, 18 mg/kg LJE artı 54 mg/kg CTE; H, 54 mg/kg LJE artı 162 mg/kg CTE（Cistanche tübülozaAyıkla).

Normal saç köklerine kıyasla (Şekil 3A), Minoxidil uygulaması saç köklerinin bütünlüğünü iyileştirdi, daha büyük saç kökleri ve daha kalın saç telleri gösterdi (Şekil 3B). Bu tür etkiler, LJE ve/veya CTE ile tedavi edilen farelerin derilerinde de bulundu.（Cistanche tübülozaAyıkla)(Şekil 3C-3H). Özellikle, LJE ve CTE'nin kombine tedavisinin saç folikülünü güçlendirme etkinliği (Cistanche tübülozaAyıkla)Minoxidil ile karşılaştırılabilir.

Şekil 3. Minoxidil veya Laminaria japonica özü (LJE) ve/veya ile tedavi edilen farelerin yeniden saç büyümesinin temsili mikroskobik bulgularıCistanche tübüloza21. günde özü (CTE).

A, normal; B, Minoxidil (yüzde 3) uygulaması; C, 18 mg/kg LJE; D, 54 mg/kg LJE; E, 54 mg/kg CTE（Cistanche tübülozaAyıkla); F, 162 mg/kg CTE（Cistanche tübülozaAyıkla); G, 18 mg/kg LJE artı 54 mg/kg CTE; H, 54 mg/kg LJE artı 162 mg/kg CTE

Minoxidil uygulaması, saç köklerini anajen faza yönlendiren -GTP'nin aktivitesini 14. ve 21. günlerde normal cilt seviyesine göre yüzde 90-120 arttırdı (Şekil 4). LJE (54 mg/kg), yüksek varyasyonlar olmasına rağmen enzim aktivitesini de arttırdı. CTE, 14. günde -GTP aktivitesini önemli ölçüde artırarak benzer etkiler gösterdi. İlginç bir şekilde, LJE ve CTE'nin kombinasyonel tedavisi（Cistanche tübülozaAyıkla)Ekstraktlar tek başına kullanıldığında enzim aktivitesini daha da arttırdı.
Kemik büyümesi ve anjiyogenezin bir belirteci olan ALP aktivitesi, Minoxidil'in topikal uygulamasını takiben 14 ve 21. günlerde deride önemli ölçüde arttı (Şekil 5). LJE ve CTE（Cistanche tübülozaAyıkla)ayrıca doza bağlı bir şekilde oral uygulamadan sonra ALP aktivitesini arttırdı. Özellikle enzim aktivitesi, LJE ve CTE ile kombinasyonel tedavi ile sinerjistik olarak arttırıldı.

Şekil 4. Minoxidil (MXD, yüzde 3) veya Laminaria japonica özütünün (LJE) ve/veya etkileriCistanche tübülozatedavinin 14 (A) ve 21 (B) günlerinde -glutamil transpeptidaz (-GTP) aktivitesi üzerinde (CTE) (mg/kg olarak) özütleyin.

*Normal (Nor) kontrolden (P) önemli ölçüde farklı<>

Şekil 5. Minoxidil (MXD, yüzde 3) veya Laminaria japonica özütünün (LJE) etkileri ve/veyaCistanche tübülozatedavinin 14 (A) ve 21 (B) günlerinde alkalin fosfataz (ALP) aktivitesi üzerine (CTE) (mg/kg olarak) ekstre edin.

*Normal (Nor) kontrolden (P) önemli ölçüde farklı<>

EGF analizinde, iyi bilinen birsaç uzamasıfaktör, Minoxidil uygulaması, hem 14. hem de 21. günde normal kontrolün EGF seviyesini 3.5 kat artırdı (Şekil 6). LJE (18 mg/kg) EGF'yi yalnızca 21. günde arttırırken, CTE (162 mg/kg) 14 ve 21. günlerde üretimini büyük ölçüde yukarı regüle etti.（Cistanche tübülozaAyıkla)düşük dozlarda bile belirgin sinerjistik etkiler sergilemiştir.

Minoxidil tedavisi ayrıca VEGF seviyesini kontrol değerinin yüzde 50-80 üzerine çıkardı (Şekil 7). LJE etkisiz olmasına rağmen, CTE (Cistanche tübülozaAyıkla)dikkate değer iyileştirici etkiler göstermiştir. Ayrıca, LJE ve CTE'nin kombinasyon tedavisi（Cistanche tübülozaAyıkla)14. günde erken aşamada sinerjik bir aktivite sergiledi.

Şekil 6. Minoxidil (MXD, yüzde 3) veya Laminaria japonica özütünün (LJE) ve/veya etkileriCistanche tübülozaTedavinin 14 (A) ve 21 (B) günlerinde epidermal büyüme faktörü (EGF) içeriği üzerine (CTE) (mg/kg olarak) ekstrakte edin.

*Normal(Nor) kontrolden önemli ölçüde farklıdır (P<>

Şekil 7. Minoxidil'in (MXD, yüzde 3) veya Laminaria japonica özütünün (LJE) ve/veyaCistanche tübülozaTedavinin 14 (A) ve 21 (B) günlerinde vasküler endotelyal büyüme faktörü (VEGF) içeriği üzerine ekstrakt (CTE) (mg/kg olarak).

*Normal (Nor) kontrolden (P) önemli ölçüde farklı<>

ICR fare hava kesesine karagenan enjeksiyonu, kese içindeki eksüda hacmini kontrol seviyesinin 6 katına çıkardı (Tablo 1). Bu tür artan eksüdasyon, LJE (18 ve 54 mg/kg) veya CTE ile tedavi ile önemli ölçüde hafifletildi.（Cistanche tübülozaAyıkla)(54 ve 162 mg/kg). Özellikle, LJE ve CTE ile kombinasyon tedavisi, bireysel etkilere kıyasla eksüda hacmini daha da azalttı. Enflamatuar hücrelerin sayısı, karagenan enjeksiyonu ile büyük ölçüde arttı: sırasıyla nötrofiller, monositler ve lenfositler için 34.6, 4.2 ve 24.9 kat kontrol seviyeleri (Tablo 1). Ancak, LJE ve CTE（Cistanche tübülozaAyıkla)LJE'nin CTE'den biraz daha üstün olduğu doza bağlı şekillerde inflamatuar hücreleri önemli ölçüde azalttı（Cistanche tübülozaAyıkla). Beklendiği gibi, enflamatuar hücre infiltrasyonunda sinerjik etkiler, LJE ve CTE'nin birlikte uygulanmasıyla elde edildi.（Cistanche tübülozaAyıkla).
Poşetteki inflamatuar hücre infiltrasyonuna paralel olarak, kesedeki NO ve PGE2 içerikleri de carrageenan enjeksiyonunu takiben büyük ölçüde arttı (Tablo 1). LJE'nin hafif etkisi ile karşılaştırıldığında, CTE（Cistanche tübülozaAyıkla)NO konsantrasyonunu önemli ölçüde azalttı. LJE ve CTE'nin kombinasyon tedavisi（Cistanche tübülozaAyıkla)NO seviyesini doza bağlı bir şekilde daha da azalttı. Benzer şekilde, artan PGE2 seviyesi, LJE ve CTE'nin kombinasyonel tedavisi ile sinerjik olarak baskılanmıştır (Tablo 1).

Tartışma

İnsan kafasında ortalama 100,000 saç kökü vardır. Bir ömür boyunca, her bir folikül yaklaşık 20 kez büyür ve dökülür, günlük 100 tel saç dökülmesini gösterir [25]. Alopesi ve kellik dahil olmak üzere saç dökülmesi, özellikle modern toplumda erkekler ve kadınlar için üzücü bir durumdur. Bu nedenle saç dökülmesini önleyen ve saçların yeniden çıkmasını artıran yeni tedavilerin geliştirilmesi büyük önem taşımaktadır. Bu açıdan alternatif tıp araştırmacıların ilgisini çekmiştir.

Erkek tipi kelliğin yaşlanmaya bağlı morfolojik, histokimyasal ve biyokimyasal yönleri, kütük kuyruklu makaklar üzerinde yapılan bir dizi çalışma ile ortaya çıkarılmıştır. Erkek tipi kellikte telojen faz uzamış, anagen faz ise kısalmıştır. Bu nedenle saç dökülmesinin iyileştirilmesi için erken anajenden orta anajene kadar olan saç folikülü uzamasının sürdürülmesinin çok önemli olduğu düşünülmektedir [26]. Bu çalışmada, gösterdiksaç uzaması- LJE ve CTE kombinasyon tedavisinin kolaylaştırıcı aktivitesi（Cistanche tübülozaAyıkla). En önemlisi, LJE (54 mg/kg) ve CTE'nin (162 mg/kg) kombinasyon halinde reçete edilmesi, ekstraktların ağızdan uygulanmasına rağmen mükemmel bir saç büyütme aktivitesi sergiledi. Özellikle, kombinasyon terapisinin etkisi, LJE ve CTE'nin aktif bileşenlerinin konsantrasyonları olmasına rağmen, saflaştırılmış bir bileşik Minoxidil'in yüksek konsantrasyonunun (yüzde 3) dermal uygulamasının etkisi ile karşılaştırılabilirdi.（Cistanche tübülozaAyıkla)oral uygulamadan sonra ciltte teyit edilmemiştir.
Dönen fare derisinde, -GTP aktivitesi anagen sırasında telaffuz edilir, ancak telojen sırasında büyük ölçüde azalır [27]. Deride, enzim sadece -GTP'nin bulunmadığı yağ bezlerinin seviyesinin altındaki kıl foliküllerinin dış ve iç kök kılıflarında bulunur [27]. Karşılaştırıldığında, ALP pilosebase ünitelerde belirgin bir şekilde ifade edilir ve aktivite, yeniden saç çıkma alanında artar. Anjiyojenik bir faktör olarak ALP, dermal papillaya beslenme desteğini iyileştirir ve böylece anagen sırasında kalınlığa neden olur [28]. Ancak, alopesik deride ALP aktivitesinin azaldığı doğrulanmıştır [21]. Mekanistik çalışmada, referans bileşik Minoxidil, -GTP ve ALP'nin aktivitesini belirgin şekilde arttırdı, bu da Minoxidil'insaç uzamasısadece saç köklerini uyararak değil
anagen faza değil, aynı zamanda anjiyogenez yoluyla kan akışını iyileştirerek. LJE, ALP aktivitesini arttırdığından, LJE'ninsaç uzamasıLJE'nin aktif bir bileşeni olan fucoidan'ın kan akışını iyileştiren bir aktiviteye sahip olduğu önceki bir çalışmadan çıkarıldığı gibi, anjiyojenik potansiyeli sayesinde [29]. Karşılaştırıldığında, CTE（Cistanche tübülozaAyıkla)hem -GTP hem de ALP aktivitelerini arttırdı, bu da anagen faz indüksiyonu üzerindeki etkilerinin yanı sıra kan akışı iyileştirmesini düşündürdü. -GTP ve ALP enzimleri üzerindeki sinerjistik etkilere göre, LJE ve CTE'nin birlikte uygulanmasıyla daha yüksek bir saç büyümesinin elde edilebileceğine inanılmaktadır.（Cistanche tübülozaAyıkla).
EGF ve VEGF dahil olmak üzere çeşitli sitokinlerin ve büyüme faktörlerinin saç morfogenezi ve büyümesinin düzenlenmesinde rol oynadığı iyi bilinmektedir [30,31]. Dermal papilla hücre kaynaklı faktörlerin çevredeki hücreler üzerinde kemotaktik aktivitelere sahip olduğunu ve bunun da sırasıylasaç uzaması[32]. EGF, saç foliküllerinin gelişimi ile ilişkili olarak ifade edilir [33,34]. Dış kök kılıfında hem EGF'nin hem de reseptörünün (EGFR) ekspresyonu foliküler büyümenin tamamlanmasıyla aşağı regüle olmasına rağmen, foliküler hücreler anagen faza girdiğinde ekspresyonları düzelir. VEGF, inflamatuar reaksiyon ve tümör gelişimi sırasında anjiyogenezde yer alan önemli bir rol oynar [35]. Özellikle damar ağı, saç büyüme döngüsü [36-38] ile yakından ilişkilidir. Bu nedenle VEGF'nin gen ekspresyonunun insan saç döngüsüne göre değiştiği doğrulanmıştır [39].

Bu çalışmada elde edilen sonuçlara göre,saç uzamasıMinoxidil'in teşvik edici etkisi, folikül büyümesini ve aynı zamanda anjiyogenezi kolaylaştıran EGF ve VEGF'yi yukarı regüle etme potansiyeline bağlı olabilir. LJE, VEGF ekspresyonunu etkilememesine rağmen, oral uygulamadan sonra derideki EGF içeriğini arttırdı. Karşılaştırıldığında, CTE（Cistanche tübülozaAyıkla)hem EGF hem de VEGF ekspresyonunda etkili olmuştur. Özellikle, LJE ve CTE（Cistanche tübülozaAyıkla)büyüme faktörlerinin ifadesi üzerinde ilave etkiler yapmıştır.

Saçların uzamasına ek olarak, Minoxidil, LJE ve/veya CTE ile tedavinin ardından saç köklerinin bütünlüğü önemli ölçüde iyileştirildi.（Cistanche tübülozaAyıkla)mikroskobik incelemede. İnsan hastalarda ve hayvan modellerinde saç dökülmesi ve kelliğin erken evresinde folikül bütünlüğü bozulur ve saç telinin kalınlığı azalırken, yenilenen saçlarda foliküler bütünlük ve saç teli kalınlığı düzelir. İlginç bir şekilde, saç bileşenlerinin bütünlüğü ve yeniden büyümesi üzerindeki bu tür olumlu etkiler, LJE artı CTE'nin oral yoldan verilmesiyle elde edilmiştir.（Cistanche tübülozaAyıkla)etkisi, yüksek konsantrasyonda Minoxidil'in topikal uygulamasıyla karşılaştırılabilir. Bu nedenle, LJE artı CTE'nin oral alımı için kombinasyonun（Cistanche tübülozaAyıkla)Minoxidil'in dermal kullanımına kıyasla nispeten uygun bir reçete olabilir.
Fare alopesi modelinde, saç folikülleri çevresinde steroide duyarlı lenfosit infiltrasyonu yaygındır ve gözyaşı bezi iltihabı ile insan alopesisinin immünoterapisine benzer bir model sergiler [17,40]. Bu çalışmada, karagenan kaynaklı cilt iltihabı, LJE ve CTE ile belirgin şekilde hafifletildi.（Cistanche tübülozaAyıkla)tedavi; yani, vasküler eksüdasyon ve inflamatuar hücre infiltrasyonu sinerjistik olarak baskılanmıştır. Kantitatif analizde, ana enflamatuar aracılar NO ve PGE 2, LJE ve CTE'nin oral birlikte uygulanmasının ardından büyük ölçüde kontrol edildi (Cistanche tübülozaAyıkla). İlginç bir şekilde, LJE, yarı saflaştırılmış fucoidan'dan daha yüksek anti-inflamatuar aktivite gösterdiğinden [16], LJE'de fucoidan dışında ilave bir aktif bileşen(ler) olabileceği varsayılmaktadır.

Birlikte ele alındığında, sonuçlar LJE ve CTE ile kombinasyonel oral tedavinin（Cistanche tübülozaAyıkla)büyüme faktörlerini ve ilgili enzim aktivitelerini düzenleyerek ve kısmen anti-inflamatuar potansiyel yoluyla saç dökülmesini iyileştirir. Bu nedenle, LJE ve CTE'yi içeren bir kombinasyonun kullanılması önerilmektedir.（Cistanche tübülozaAyıkla)uygun olmayan klinik dozlar ve oranlar saç dökülmesi hastaları için aday bir reçete olabilir.

Cistanche tübülozaekstrakt ürünleri

Teşekkür

Bu araştırma, Chungcheong Önde Gelen Sanayi Ofisinin Ekonomik Bölgesi için Önde Gelen Sanayi Geliştirme, Kore Teknoloji Geliştirme Enstitüsü (KIAT) ve Bilgi Ekonomisi Bakanlığı (MKE) tarafından ve kısmen Yüksek Katma Değerli Gıda Teknolojisi Geliştirme Programı tarafından finansal olarak desteklenmiştir. , Tarım, Gıda ve Köy İşleri Bakanlığı (MAFRA; hibe numarası 113034-3).

Çıkar çatışması

Yazarlar, bu sonuçları yayınlamak için herhangi bir mali çıkar çatışması olmadığını beyan eder.

Gönderen: 'Saç büyümesinde Laminaria japonica ve Cistanche tubulosa özlerinin kombinasyonel tedavisinin etkinliği'Kyungha Shin1# ve diğerleri

--- Lab Anim Res 2015: 31(1), 24-32http://dx.doi.org/10.5625/lar.2015.31.1.24

REFERANSLAR

1. Kim JS, Kang BS, Park HJ, Kim DY, Hwang SY, Nam SY, Yun YW, Lee BJ. Bitkisel özler karışımlarının C3H/HeJ farelerinde saçın yeniden büyümesi üzerindeki etkisini teşvik edici. J Biomed Res 2009; 10(3): 99-108.
2. Paus R, Cotsarelis G. Saç köklerinin biyolojisi. N Engl J Med 1999; 341(7); 491-497.
3. Cotsarelis G. Saç folikülü: dikkat çekmek için ölüyor. Ben J Pathol 1997; 151(6): 1505-1509.
4. Cotsarelis G, Sun TT, Lavker RM. Etiket tutan hücreler pilosebase ünitenin çıkıntı bölgesinde bulunur: foliküler kök hücreler, saç döngüsü ve cilt karsinojenezi için çıkarımlar. Hücre 1990; 61(7): 1329-1337.
5. Oshima H, Rochat A, Kedzia C, Kobayashi K, Barrandon Y. Yetişkin multipotent kök hücrelerden saç foliküllerinin morfogenezi ve yenilenmesi. Hücre 2001; 104(2): 233-245.
6. Burton JL, Marshall A. Minoksidile bağlı hipertrikoz. Br J Dermatol 1979; 101(5): 593-595.
7. Meisheri KD, Cipkus LA, Taylor CJ. Minoksidil sülfatın neden olduğu vazodilatasyonun etki mekanizması: artan K artı geçirgenlik için bir rol. J Pharmacol Exp Ther 1988; 245(3): 751-760.
8. Buhl AE, Waldon DJ, Baker CA, Johnson GA. Minoxidil sülfat, saç köklerini uyaran aktif metabolittir. J Invest Dermatol 1990; 95(5): 553-557.
9. Kaufman KD, Dawber RP. Androgenetik alopesili erkeklerin tedavisinde bir Tip 2 5alfa-redüktaz inhibitörü olan finasterid. Uzman Görüşü Araştırma İlaçları 1999; 8(4): 403-415.
10. Feldman SC, Reynaldi S, Stortz CA, Cerezo AS, Damon EB. Leathesia difformis kaynaklı fucoidan fraksiyonlarının antiviral özellikleri. Bitkisel Tıp 1999; 6(5): 335-340.
11. Wang J, Zhang Q, Zhang Z, Song H, Li P. Laminaria japonica'dan ekstrakte edilen düşük moleküler ağırlıklı fucoidan fraksiyonlarının potansiyel antioksidan ve pıhtılaşma önleyici kapasitesi. Uluslararası J Biol Macromol 2010; 46(1): 6-12.
12. Bojakowski K, Abramczyk P, Bojakowska M, Zwoliñska A, Przybylski J, Gaciong Z. Fucoidan, sıçanda renal iskemi/reperfüzyon hasarının erken evresinde renal kan akışını iyileştirir. J Physiol Pharmacol 2001; 52(1): 137-143.
13. Li N, Zhang Q, Song J. Wistar sıçanlarında Laminaria japonica'dan ekstrakte edilen fucoidan'ın toksikolojik değerlendirmesi. Gıda Kimyasal Toksikol 2005; 43(3): 421-426.
14. Shimoda H, Tanaka J, Takahara Y, Takemoto K, Shan SJ, Su MH. Bir Çin geleneksel ham ilacı olan Cistanche tubulosa özütünün farelerde hipokolesterolemik etkileri. J Chin Med 2009 muyum; 37(6): 1125-1138.
15. Yamada P, Iijima R, Han J, Shigemori H, Yokota S, Isoda H. Cistanche tubulosa'dan izole edilen ateozidin RBL-2H3 ve KU812 hücreleri tarafından kimyasal aracı salınımı ve inflamatuar sitokin üretimi üzerindeki inhibitör etkisi. Planta Med 2010; 76(14): 1512-1518.
16. Kyung J, Kim D, Park D, Yang YH, Choi EK, Lee SP, Kim TS, Lee YB, Kim YB. Laminaria japonica fucoidan ve Cistanche tubulosa özütünün sinerjik anti-inflamatuar etkileri. Laboratuvar Animasyon Res 2012; 28(2): 91-97.
17. Chee E, Fong KS, Al Jajeh I, Nassiri N, Rootman J. Gözyaşı bezi iltihabının alopesi areata ile ilişkisi. Yörünge 2015; 34(1): 45-50.
18. Brzezinska-Wcislo L, Bergler-Czop B, Wcislo-Dziadecka D, LisSwiety A. Alopesi areata tedavisinin yeni yönleri. Postepy Dermatol Alergol 2014; 31(4): 262-265.
19. Hattori M, Ogawa H. Biyokimyasal analizisaç uzamasıYaşlanma ve enzim aktiviteleri açısından. J Dermatol 1983; 10(1): 45-54.
20. Lee SH, Lee HJ, Baek IJ, Yon JM, Nam SY, Lee BJ, Yun YW, Kim YB, Hwang SY, Hong JT. DREAMMO® saç derisi losyonunun saç derisi üzerindeki etkisisaç uzamasıC57BL/6 farelerin bir alopesi modelinde promosyon. Laboratuvar Animasyon Res 2006; 22(1): 91-96.
21. Handjiski BK, Eichmüller S, Hofmann U, Czarnetzki BM, Paus R. Alkalin fosfataz aktivitesi ve murin saç döngüsü sırasında lokalizasyon. Br J Dermatol 1994; 131(3): 303-310.
22. Cross MJ, Dixelius J, Matsumoto T, Claesson-Welsh L. VEGF reseptör sinyal transdüksiyonu. Trendler Biochem Sci 2003; 28(9): 488-494.
23. Shin S, Jeon JH, Park D, Jang JY, Joo SS, Hwang BY, Choe SY, Kim YB. Carrageenan-hava kesesi inflamasyon modelinde Angelica gigas'ın etanol ekstraktının anti-inflamatuar etkileri. Uzm Animasyon 2009; 58(4): 431-436.
24. Kim D, Park D, Kyung J, Yang YH, Choi EK, Lee YB, Kim HK, Hwang BY, Kim YB. Houttuynia cordata süperkritik özütünün karagenan-hava kesesi iltihabı modelinde anti-inflamatuar etkileri. Laboratuvar Animasyon Res 2012; 28(2): 137-140.
25. Rebora A. Androgenetik alopesi patogenezi. J Am Acad Dermatol 2004; 50(5): 777-779.
26. Shirai A, Ikeda J, Kawashima S, Tamaoki T, Kamiya T. KF19418, yeni bir bileşiksaç uzamasıin vitro ve in vivo fare modellerinin tanıtımı. J Dermatol Sci 2001; 25(3): 213-218.
27. Kawabe TT, Kubicek MF, Johnson GA, Buhl AE. Fare saç köklerinde saç döngüsü ve anagen indüksiyonunun bir belirteci olarak gama-glutamil transpeptidaz aktivitesinin kullanımı. J Invest Dermatol 1994; 103(1): 122-126.
28. Hamada K, Suzuki K. C3H farelerinde saç döngüsü belirteci olarak biyokimyasal indekslerin değerlendirilmesi. Uzm Animasyon 1996; 45(3): 251-256.
29. Park SJ, Lee KW, Lim DS, Lee S. Sülfatlanmış polisakkarit fucoidan, insan adipoz türevli kök hücrelerinin osteojenik farklılaşmasını uyarır. Kök Hücre Geliştirme 2012; 21(12): 2204-2211.

30. Danilenko DM, Yüzük BD, Pierce GF. Saç folikülü gelişimi ve döngüsündeki büyüme faktörleri ve sitokinler: hayvan modellerinden son bilgiler ve klinik tedavi için potansiyeller. Mol Med Bugün 1996; 2(11): 460-467.
31. Ozeki M, Tabata Y. In vivo olarak, büyüme faktörlerinin kontrollü salınımı ile farelerin saç foliküllerinin büyümesini destekledi. Biyomalzemeler 2003; 24(13): 2387-2394.
32. Fujie T, Katoh S, Oura H, Urano Y, Arase S. Dermal papilla hücre kaynaklı bir faktörün dış kök kılıf hücreleri üzerindeki kemotaktik etkisi. J Dermatol Sci 2001; 25(3): 206-212.
33. Stenn KS, Paus R. Saç folikülü döngüsünün kontrolleri. Physiol Rev 2001; 81(1): 449-494.
34. Chapman RE, Hardy MH İntradermal olarak enjekte edilen ve topikal olarak uygulanan fare epidermal büyüme faktörünün merinos koyunlarının yün büyümesi, derisi ve yün folikülleri üzerindeki etkileri. Aust J Biol Sci 1988; 41(2): 261-268.
35. Dvorak HF, Kahverengi LF, Detmar M, Dvorak AM. Vasküler geçirgenlik faktörü/vasküler endotelyal büyüme faktörü, mikrovasküler aşırı geçirgenlik ve anjiyogenez. Ben J Pathol 1995; 146(5): 1029-1039.
36. Ellis RA, Moretti G. İnsan kafa derisindeki katagen saç folikülleri ile ilişkili vasküler modeller. Ann NY Acad Sci 1959; 83: 448-457.
37. Stenn KS, Fernandez LA, Tirrell SJ. Sıçan vibrissa kıl folikülünün anjiyojenik özellikleri, ampul ile ilişkilidir. J Invest Dermatol 1988; 90(3): 409-411.
38. Yano K, Brown LF, Detmar M. Kontrolüsaç uzamasıve VEGF aracılı anjiyogenez ile folikül boyutu. J Clin Yatırım 2001; 107(4): 409-417.
39. Lachgar S, Charveron M, Ceruti I. Konfokal lazer mikroskopisi ile birleştirilmiş floresan in situ hibridizasyon ile VEGF mRNA'nın kayıtsız saç folikülü aşamalarının dağılımı. In: Hair Research for the Next Millenium (Van Neste DJJ, ed), Elsevier, Amsterdam, 1996; s. 407-12.
40. Freyschmidt-Paul P, Sundberg JP, Happle R, McElwee KJ, Metz S, Boggess D, Hoffmann R. C3H/HeJ farelerinde alopesi areata benzeri saç dökülmesinin kontakt duyarlılaştırıcı karek asit dibütil ester (SADBE) ile başarılı tedavisi . J Invest Dermatol 1999; 113(1): 61-68.