Diyabetes mellitusun sıçanlarda kavernöz penis gövdesinde cinsel fonksiyon, histomorfoloji ve -smoth kas aktin ekspresyonu üzerindeki etkileri
Mar 05, 2025
Soyut:
Amaç:Gözlemlemek içinDiyabetin Cinsel İşleviSıçanları modelleyin ve hipergliseminin neden olduğu ikincil cinsel işlev bozukluğunun olası mekanizmasını keşfedin.
YöntemDeneysel sıçanlar rastgele boş gruba (n =5) ayrıldı vediyabet grubu(n =15). Diyabet hayvan modeli başarıyla inşa edildikten sonra, iki grubun cinsel işlevi değerlendirildi. İki grupta testisin histolojik özellikleri gözlenmiştir. İki grubun penil dokusundaki -Smoth kas aktin (-sma) ekspresyonu ölçüldü. Sonuçlar Serum seks hormonlarının seviyeleri önemli ölçüde azaldı (P<0.01). Histomorphological observation showed that in the diabetes group the interstitial tissue of testis was disordered; Compared with the blank group, the number of smooth muscle cells in the penis tissue was reduced, and the degree of fibrosis was aggravated. The expression of α-SMA positive cells in the diabetes group was significantly decreased (P<0.01).
ÇözümSeks hormonlarının azalması, penisin gövdesinde azalmış düz kas hücresi sayısı, penisin kavernöz gövdesinde -SMA ekspresyonu, testis interstisyel dokusunun düzensiz yapısı, düz kas hücrelerinin morfolojik değişiklikleri ve diyabet sıçanlarındaki fibrozun agravasyonu, bu hastalığın önemli fenotipik özellikleridir. Bu hastalığın bu fenotipik özelliklerle teşhis ve tedavisini keşfetmek büyük önem taşıyacaktır.
Anahtar Kelimeler:diyabetes mellitus;erektil disfonksiyon; cinsel işlev; seks hormonu; - pürüzsüz kas aktin ekspresyonu
Diyabetin neden olduğu erektil disfonksiyon için bitkisel cistanche takviyeleri
Diabetes Mellitus (DM)yüksek insidansı ve prevalansı nedeniyle uzun zamandır hem yurtiçinde hem de uluslararası bir odak odak noktası olmuştur [1]. DM'nin neden olduğu çeşitli komplikasyonlar, hastaların yaşam kalitesini önemli ölçüde etkiler. Bunlar arasında, insidansıerektil disfonksiyon (ED)erkeklerdeDM hastalarıbelirgin şekilde yükseltilmiş. Şu anda DM, ED için yüksek riskli bir grup haline gelmiştir [2-3]. Bu nedenle, üzerinde derinlemesine çalışmalar yapmakDM kaynaklı ED (DMED)büyük bir öneme sahiptir. Bu çalışma, DM'nin erektil fonksiyon, cinsiyet hormonları, penil kavernöz vücuttaki -smoth kas aktin (-sma) ekspresyon seviyelerini ve testis interstisyel ve interstisyel ve morfolojisinin etkilerini gözlemlemeyi amaçlamaktadır.Penil kavernöz düz kasSıçanlarda dokular, DM tarafından indüklenen ED'nin potansiyel patolojik temelini önceden araştırır.
1 Malzeme ve Yöntem
1.1 Deneysel Hayvanlar ve Reaktifler
Düzgün vücut ağırlığı olan yirmi yetişkin SPF sınıfı erkek SD sıçan seçildi. Ana deneysel reaktifler arasında streptozotosin (STZ) ve apomorfin (APO) ve aynı zamanda -sma ekspresyonunu tespit etmek için gerekli antikorları içeriyordu. Bu çalışma, Pekin Çin Tıbbı Üniversitesi Dongzhimen Hastanesi Hayvan Refahı ve Etik Komitesi tarafından onaylanmıştır (No. 17-04).
1.2 Deneysel Yöntemler
1.2.1 Diyabetik Sıçan Modelinin Kurulması
Twenty experimental SD rats were randomly divided into a control group (5 rats) and a diabetes group (15 rats). STZ was dissolved in citrate buffer to prepare a 10 mg/mL solution. The diabetes group was intraperitoneally injected with STZ solution at a dose of 55 mg/kg to induce the DM model rats. Blood glucose levels >5 günlük STZ intraperitoneal enjeksiyondan sonra herhangi bir zamanda 16.7 mmol/L, başarılı DM model kuruluşu için standart olarak kabul edilmiştir [4].
1.2.2 Sıçanlarda erektil fonksiyon testi
Başarılı DM modellemesini onayladıktan sonra, sıçanlar tartıldı ve şeffaf bir cam kutuya yerleştirildi. APO çözücü (100 ug/kg), vücut ağırlığına göre boynun arkasına subkutan olarak enjekte edildi. Çevredeki ortam sessiz tutuldu ve kapalı aydınlatma, sıçanlarda penil ereksiyonu gözlemlemek için yeterli bir seviyeye ayarlandı. Subkutan enjeksiyondan sonraki 30 dakika içinde penil ereksiyon sayısı gözlendi ve kaydedildi. Penil ereksiyon kriterleri: penil genişleme, sünnet derisinin geri çekilmesi, hiperemi ve kızarıklık eşliğinde glanların maruz kalması ve penisin orta ve alt segmentlerinin görünürlüğü.
1.2.3 Sıçanlarda seks hormonlarının ölçümü
İki grubun serum cinsiyet hormonu seviyeleri, radyoimmunoassay kiti talimatlarında özetlenen spesifik prosedürler izlenerek RadioImMunoassay yöntemi kullanılarak ölçüldü.
1.2.4 Testis interstisyel dokusunun histopatolojik gözlemi
Sıçanların karın aortundan kan topladıktan sonra, sağ testis eşit olarak çıkarıldı. Testis, PBS tamponu ile yıkandı ve 72 saat boyunca tamamen paraformaldehit içinde sabitlendi. Doku parafine gömüldü, kesitlendi, hematoksilin-eosin (H&E) ile boyandı ve histolojik özellikler için gözlemlendi.
1.2.5 Sıçanlarda Penil Kavernöz Fibrozun Gözlemi
Karın aortundan kan topladıktan sonra, penil doku eksize edildi ve PBS tamponu ile yıkandı. Doku, 72 saat parafine parafine gömülmüş, kesitlenmiş ve Masson'un trikromu ile boyanmıştır. Her grubun penil kavernöz dokusundaki düz kas/kollajen liflerinin nispi içeriği bir mikroskop altında gözlenmiştir.
1.2.6 Penil kavernöz dokuda -sma ekspresyon seviyelerinin ölçümü
Penil kavernöz doku, suya rutin deparafinizasyona tabi tutuldu, 5 dakika boyunca PBS tamponu ile yıkandı ve sitrat tamponunda (pH 6. {2}}) 20 dakika boyunca mikrodalga ısı onarımına tabi tutuldu. Oda sıcaklığına soğutulduktan sonra, doku her seferinde 3 dakika PBS ile yıkandı. Karanlık bir odaya oda sıcaklığında 15 dakika boyunca% 3 hidrojen peroksit çözeltisi uygulandı, ardından PBS yıkama. -SMA antikoru daha sonra ilave edildi ve doku gece boyunca 4 derecede inkübe edildi. Oda sıcaklığına döndükten sonra doku PBS ile yıkandı, 37 derecede 30 dakika boyunca ikincil bir antikor ile inkübe edildi ve tekrar PBS ile yıkandı. DAB karanlıkta renk gelişimi için uygulandı ve reaksiyon su ile sonlandırıldı. PBS, birincil antikorun yerini negatif kontrol olarak kullanıldı ve bir görüntü analizörü ile kantitatif analiz gerçekleştirildi.
1.3 İstatistiksel yöntemler
Bu çalışmada toplanan veriler Microsoft Excel kullanılarak düzenlendi ve daha sonra istatistiksel testler için SPSS 25. 0 kullanılarak analiz edildi. Her grubun verileri ortalama ± standart sapma (x̄ ± S) olarak ifade edilir. 0 'dan daha az bir p değeri. 0 5 (p <0.05) istatistiksel olarak anlamlı kabul edildi.
2 Sonuçlar
2.1 İki grup arasındaki vücut ağırlığı ve kan şekeri değişikliklerinin karşılaştırılması
Tablo 1'e bakın.
2.2 İki grup arasındaki penil ereksiyon oranlarının karşılaştırılması
Tablo 2'ye bakın.
2.3 İki grup arasındaki serum seks hormonu seviyelerinin karşılaştırılması
Tablo 3'e bakın.
2.4 İki grup arasındaki testiküler interstisyel dokunun patolojik gözlemi
Kontrol grubunun testis interstisyel dokusu normal görünüyordu. İnterstisyel hücreler, düzenli morfoloji, normal hücreler arası aralık, düzenli düzenleme ve hücre sayısında anlamlı bir azalma ile yuvarlak veya oval şekildeydi. Aksine, diyabetik grup testiküler interstisyel ödem, düzensiz hücre morfolojisi, gevşek hücreler arası alanlar, düzensiz düzenleme, hücre içi yapıları bozdu ve bazı hücrelerde ayrılma belirtileri gösterdi, yapısal özellikleri kaybetti. Şekil 1'e bakın.
| Grup | Örnek boyutu (n) | Temel vücut ağırlığı (g) | Modellemeden 5 gün sonra vücut ağırlığı (G) | Modellemeden 5 gün sonra kan şekeri (mmol/l) | Kurbandan önce vücut ağırlığı (g) | Kurban öncesi kan şekeri (mmol/l) |
|---|---|---|---|---|---|---|
| Diyabet grubu | 15 | 220.4 ± 5.5 | 264.2 ± 10.8** | 24.3 ± 5.0** | 316.7 ± 16.4** | 25.2 ± 5.1** |
| Kontrol grubu | 5 | 220.0 ± 5.2 | 286.2 ± 10.1 | 4.9 ± 1.3 | 319.1 ± 13.9 | 6.8 ± 1.2 |
Not: Kontrol grubuna kıyasla,P <0. 01.
Tablo 2: İki grup arasındaki penil ereksiyon oranlarının karşılaştırılması
| Grup | Örnek boyutu (n) | Ereksiyon testinde olumlu vakalar (n) | Ereksiyon oranı (%) |
|---|---|---|---|
| Diyabet grubu | 15 | 5 | 33.3** |
| Kontrol grubu | 5 | 4 | 80.0 |
Not: Kontrol grubuna kıyasla,P <0. 01.
Tablo 3: İki grup arasındaki serum seks hormonu seviyelerinin karşılaştırılması (x̄ ± S)
| Grup | Örnek boyutu (n) | T (nmol·l⁻) | FSH (iu · l⁻) | LH (ng · l⁻) |
|---|---|---|---|---|
| Diyabet grubu | 15 | 3.38 ± 0.87** | 8.49 ± 3.06** | 489 ± 50.12** |
| Kontrol grubu | 5 | 6.04 ± 1.26 | 5.98 ± 1.03 | 386 ± 40.73 |
Not: Kontrol grubuna kıyasla,P <0. 01.
2.4 İki grup arasındaki testiküler interstisyel dokunun patolojik gözlemi
Kontrol grubunda, testiküler interstisyel doku normal ortaya çıktı, interstisyel hücreler yuvarlak veya oval şekildedir, düzenli morfoloji, normal hücreler arası boşluklar ve düzenli düzenleme gösterir. Hücre sayısı önemli bir azalma göstermedi. Kontrol grubuna kıyasla, diyabetik grup testis interstisyel ödem, düzensiz şekilli hücreler, gevşek hücreler arası boşluklar, düzensiz düzenleme, hücre içi yapıları bozdu ve bazı hücrelerde ayrılma belirtileri sergiledi, yapısal özelliklerini kaybetti. Şekil 1'e bakın.
2.5 İki grup arasında penil kavernöz fibrozun gözlemlenmesi
Masson'un boyaması, iki grup arasındaki penil kavernöz dokudaki fibroz derecesindeki farklılıkları gözlemlemek için kullanıldı. Diyabetik grupta, kollajen liflerinin oranı, nispi içerikte bir artış ile anlamlı olarak daha yüksekti, düz kas hücrelerinin oranı daha küçüktü ve nispi içerikte bir azalma. Şekil 2'ye bakın.
Şekil 1 Testislerin iki grupta boyama sonuçları (× 10, n=3)
Şekil 2 Corpora Cavernosa'nın Masson Boyama Sonuçları İki grupta (× 4, N=3)
2.6 Corpus kavernosum pürüzsüz kas hücrelerinde -sma ifadesi iki grupta
İki grupta -sma ekspresyonunu tespit etmek için immünohistokimya kullanıldı. Boş grupla karşılaştırıldığında, diyabetik gruptaki kahverengi sarı lekeli kısmı önemli ölçüde azaldı, yani diyabetik gruptaki -sma'nın pozitif hücre ekspresyonu önemli ölçüde azaldı. Bkz. Şekil 3.
Şekil 3 İmmünohistokimya iki grupta korpus kavernosumun sonuçları (× 10, n=3)
