Cistanche Tubulosa Sulu Ekstraktının Bağırsak Bozuklukları Olan Farelerin Bağırsak Mikrobiyotası Üzerine Etkileri

Xiaowei Bao, Dongwen Bai, Xiaolu Liu, Ying Wang, Lanjun Zeng, Chenye Wei ve Weiquan Jin

Gıda Bilimi ve Eczacılık Fakültesi, Sincan Tarım Üniversitesi, Urumçi 830052, Çin

Yazışmalar Xiaowei Bao'ya gönderilmelidir; xiaoweibao0723@xjau.edu.cn

29 Nisan 2021 alındı; 30 Haziran 2021'de kabul edildi; 14 Temmuz 2021'de yayınlandı

Bu, Creative Commons Atıf Lisansı altında dağıtılan ve orijinal esere uygun şekilde atıfta bulunulması koşuluyla herhangi bir ortamda sınırsız kullanım, dağıtım ve çoğaltmaya izin veren açık erişimli bir makaledir.

İletişim:joanna.jia@wecistanche.com/ WhatsApp: 008618081934791

Soyut

Bağırsak mikrobiyotasının bozuklukları birçok hastalıkla ilişkilidir. Sulu ekstraktcistanchetübüloza(CT), geleneksel bir Çin bitkisel formülü olan insan bağırsağının korunmasında rol oynadığı bildirilmiştir. Bununla birlikte, bağırsak mikrobiyotası üzerindeki etkileri hakkında çok az şey bilinmektedir. olup olmadığını belirlemek amacıyla bu çalışma yapılmıştır.cistancheTubulozasulu ekstrakt, bağırsak bozuklukları olan farelerde bağırsak mikrobiyomunu modüle edebilir. Sefiksim ile tedaviden kaynaklanan hasarlı bağırsak morfolojisinin, sefiksim kullanılarak kurtarılabileceğini bulduk.cistancheTubulozasulu ekstrakt. Cistanche Tubulosa özütü ile tedavi edilen fareler ve kontrol fareleri arasındaki mikrobiyal çeşitliliğin karşılaştırılması, aynı zamanda, model gruplarının mikrobiyom topluluğundaki bozukluğun, yüksek ve orta konsantrasyonlarda tedavi ile düzeltilebileceğini gösterdi.cistancheTubulozasulu ekstrakt. Sefiksim ile tedavi, laktik asit bakterilerinde önemli bir azalmaya yol açtı; bununla birlikte, takviyenincistancheTubulozasulu ekstrakt, bu laktik asit bakterilerinin büyümesini geri kazandı. Ayrıca,cistancheTubulozasulu ekstrakt, sefiksim tarafından indüklenen bağırsak mikrobiyomunun metabolik yollarındaki dramatik değişiklikleri hafifletebildi. Bu bulgular, Cistanche Tubulosa sulu ekstraktının bağırsak mikrobiyotası üzerindeki yararlı etkileri hakkında bir fikir verdi ve ayrıca gelecekte ilgili ilaçların geliştirilmesi için önemli bir referans sağladı.

cistanchetübülozabirçok etkisi vardır, daha fazla bilgi için buraya tıklayın

1. Giriş

Bağırsak mikroorganizmaları esas olarak bağırsak lümeni ve mukozal tabakayı kolonize eder ve malzeme ve enerji değişimi, transformasyon ve diğer işlemler yoluyla konakçı ile ortaklaşır [1]. * bunlar, diyet gibi çevresel mesajları genetik ve bağışıklık sinyalleriyle bütünleştiren ve sonuç olarak konağın metabolizmasını, bağışıklığını, sinir sistemini ve enfeksiyonlara tepkisini etkileyen sinyal merkezleridir [2]. Normalde bağırsak florası ile konakçı arasında dinamik bir denge vardır; bununla birlikte, bağırsak disbiyozu sağlık/hastalık dengesinde değişikliklere, bağışıklık bozukluklarına ve çok sayıda hastalığa neden olabilir [3]. Bağırsak mikrobiyotasındaki orta düzeyde değişiklikler konakçı için kabul edilebilir; ancak bu yine de bakteriyofajlar, bakteriyosinler ve oksidatif stres gibi diğer ağırlaştırıcı faktörlerdeki değişiklikleri büyütmek için fırsatlar sağlayabilir [4].

Önceki çalışmalar, geleneksel bir Çin bitkisel formülü olan Cistanche tubulosa'nın (CT) etanol özütünün sıçanlarda bağırsak mikrobiyal bileşimini düzenleyebildiğini [5] ve Cistanche Tubulosa'nın toplam glikozitlerinin düzensiz bağırsak mikrobiyotasını [6] ayarladığını göstermiştir. Esas olarak Tamarix türlerinin kökleri üzerinde parazit yapan Cistanche türleri, "çölün ginsengi" olarak da adlandırılır ve bitkisel ilaç olarak Cistanche Deserticola (CD) ve Cistanche tubulosa'nın (CT) saplarından oluşan bir tonik kullanılmaktadır [7]. ]. Antioksidan maddeler [8, 9] olan Cistanche Tubulosa feniletanol glikozitlerin (PHG'ler) ana kimyasal bileşenlerinin üreme fonksiyon bozukluğunu iyileştirdiği [10], hepatik stellat hücre aktivasyonunu baskıladığı, TGF'de sinyal yollarının iletimini engellediği bulundu{{6 }}/SMAD [11] ve sıçanlarda bovin serum albümininin neden olduğu hepatik fibrozisi önler [12]. Cistanche Tubulosa'da bulunan 100'den fazla bileşen arasında polisakkarit de içeriği bol olan önemli maddelerden biridir [13, 14]. Önceki çalışmalar, C. Deserticola polisakkaritlerinin melanositlerde melanogenezi indüklediğini, oksidatif stresi azalttığını[15], sıçanlarda antioksidan ve antiinflamatuar süreçleri düzenleyerek bilişsel işlev bozukluğunu hafiflettiğini [16], PC12 hücrelerini OGD/RP kaynaklı hasara karşı koruduğunu [17] göstermiştir. , in vivo olarak ekinakozit emilimini arttırır ve bağırsak mikrobiyotasını etkiler [18].

Probiyotikler, sağlık açısından yararları olan ve yeterli miktarlarda uygulandığında gastrointestinal kanalda mikrobiyal denge sağlayan canlı, patojenik olmayan mikroorganizmalardır [19]. *ey, makrofajların, doğal öldürücü (NK) hücrelerin aktivasyonu ve toksik T lenfositlere karşı antijen özgüllüğü ve suşa özgü ve doza bağımlı bir şekilde çeşitli sitokinlerin salınması ile karakterize edilen spesifik olmayan hücresel bağışıklık tepkilerini artırabilir [20]. ]. Probiyotik suşlar, TJ modülasyonu yoluyla bağırsak epitelinin özelliklerini iyileştirir ve spesifik probiyotik suşların müsin ekspresyonunu düzenlediği, böylece mukus tabakasının özelliklerini etkilediği ve dolaylı olarak bağırsak bağışıklık sistemini düzenlediği gösterilmiştir [21]. Laktik asit bakterileri (LAB) ve Bifidobacterium suşları birçok alanda kullanılan başlıca probiyotiklerdir [22-26]. Sağlıkla ilgili işlevlerinde önemli bir faktör olan antioksidan kapasiteleri ile sağlık yararları çoktur [27]. Probiyotikler, oksidasyonu katalize etmelerini önlemek için metal iyonlarını şelatlayabilir [28, 29]; ayrıca antioksidan enzimlerin ekspresyonunu artırabilir [30, 31], antioksidan aktiviteye sahip çeşitli metabolitler üretebilir [32, 33], antioksidan sinyal yollarına aracılık edebilir [34-36] ve reaktif oksijen türleri (ROS) üreten enzimleri ve bağırsak mikroorganizmalarının oksidatif strese tepkisi[37].

san çiçeği

Yakın zamanda yapılan bir çalışma, Cistanche Deserticola'nın polisakkaritlerinin, insan sağlığına fayda sağlayabilecek bazı laktik asit bakterilerinin büyümesini teşvik edebileceğini göstermiştir [38]. Ancak Cistanche Deserticola'daki polisakkaritlerin içeriği Cistanche Tubulosa'dakinden farklıdır [7, 39] ve bu farklılık bağırsak mikroorganizmaları üzerinde farklı etkilere yol açabilir. Ayrıca, Cistanche Deserticola polisakkaritleri, NRF2/HO-1 yolunu aktive ederek oksidatif stresi azaltabilse de [15], tek bir polisakkaritin etkileri, Cistanche Tubulosa'daki çoklu kompozisyonların genel etkisinden farklı olabilir. Bu nedenle, Cistanche Tubulosa sulu ekstraktlarının bağırsak mikroorganizmaları üzerindeki etkilerini kesin olarak tanımlamak gerekir. Ek olarak, PHG'ler ayrıca oksidatif strese [40] direnebilir ve Keap1/Nrf2/HO-1 yolunu aktive ederek lipopolisakkarit aracılı inflamatuar yanıtları baskılayabilir [41]. Bu nedenle, Cistanche Tubulosa sulu ekstraktının etkisini belirlemek çok değerlidir. Ek olarak, sulu Cistanche Deserticola özütünün belirli bileşenlerinin oksidatif stres ve bağırsak florası üzerindeki etkileri, oksidatif strese karşı direncin bağırsak florası değişiklikleri ile ilişkili olabileceğini düşündürmektedir.

Yukarıda bahsedilen konulardaki bilgi boşluklarını doldurmak için Cistanche Tubulosa sulu ekstraktının bağırsak florası bozukluğu olan farelerin bağırsak mikrobiyotası üzerindeki etkilerini araştırdık. Bu sonuçlar, Cistanche Tubulosa'nın bağırsak florasını değiştirdiği ve oksidatif strese karşı bağırsak direnci sağladığı olası mekanizmalar hakkında değerli bilgiler sağlayacaktır.

2. Malzemeler ve Yöntemler

2.1. Deney Hayvanları.

18-22 g ağırlığında toplam 18 SPF sınıfı erkekC57BL/6J fare, Xinjiang Tıp Üniversitesi Deney Hayvanları Merkezi'nden SCXK (yeni) 2018-0003 lisans numarasıyla satın alındı. Standart koşullar altında kafeslerde barındırıldılar: 12 saat aydınlık/karanlık fotoperiyodu, 23 ± 2 derece sıcaklık ve yüzde 55 ± 5 nem. *e hayvanlara ticari bir diyet (yüzde 51 nitrojen içermeyen ekstrakt, yüzde 25 ham protein, yüzde 4,6 ham yağ, yüzde 6,5 ham kül, yüzde 4,0 ham lif ve yüzde 8,9 nem) ve musluk suyu verildi . *e hayvanlar, Ulusal Sağlık Enstitülerinin Laboratuvar Hayvanlarının Bakımı ve Kullanımı Kılavuzunda açıklanan tavsiyelere göre tedavi edildi.

2.2. Sulu Ekstrakt Ekstraksiyonu.

Kurutulmuş dilimlerC. Hotan Dichen PharmaceuticalBiotechnology Co., Ltd. tarafından sağlanan tubulosa, toz haline getirildi ve partikül boyutları 20 ile 40 ağ arasında olan granüller seçildi. Ekstraksiyon koşulları şu şekildeydi: 1:19 katı-sıvı oranı, 80 derecelik sıcaklık, 6 dakikalık mikrodalga süresi, 16 dakikalık ultrasonik süre, 400 W mikrodalga gücü ve 400 W ultrasonik güç. Sulu ekstraktın ana bileşenlerinin içeriği HPLC (Agilent 1260 Infinity II, California, ABD) ile ölçülmüştür. Kısaca, ekinakozit (0.2 mg/mL) ve ateozit (0.2 mg/mL) standart maddeleri, referans madde çözeltisi olarak hizmet etmek üzere yüzde 50 metanol içinde çözülmüştür. Daha sonra 1 g CT sulu özü, 100 mL yüzde 50 metanol içinde çözündürüldü ve 30 dakika oturmaya bırakıldı. Ekstrakt çözeltisi, 10 dakika boyunca 250 W ve 35 kHz'de ultrason ile işlendi ve ardından 12,000 rpm/dak'da santrifüjlendi. Süpernatan, 0.45 um'lik bir mikro gözenekli filtre membranı ile süzüldü. Referans madde çözeltisi ve süzüntü daha sonra aşağıdaki koşullarda HPLC ile tespit edildi: dolgu maddesi olarak oktadesilsilan bağlı silika jel, mobil faz A olarak metanol ve mobil faz B olarak yüzde 0.1 formik asit. Kolonun sıcaklığı 30 olarak ayarlandı. derece, algılama dalga boyu 330 nm olarak ayarlandı ve enjeksiyon hacmi 10 μL idi.

2.3. deneyler

Bir haftalık adaptasyondan sonra, 18 fare rastgele altı gruba ayrıldı: A (orta doz Cistanche Tubulosa sulu ekstresi eklendiğinde normal), B (Cistanche Tubulosa sulu ekstresi olmadan normal), C (sulu ekstresi olmayan model), D (yüksek doz Cistanche Tubulosa sulu özüt eklenmiş model), E (orta doz Cistanche Tubulosa sulu özüt eklenmiş model) ve F (düşük doz Cistanche Tubulosa sulu özüt eklenmiş model). Gruplar şu şekilde tedavi edildi: normal grup normal tuzlu su çözeltisi ile ıslatıldı, model grup sefiksim (30 mg/kg, Shiyao Group OuyiPharmaceutical Co., Ltd., Shijiazhuang, Çin) ve normal tuzlu su çözeltisi ile ıslatıldı, yüksek -doz grubuna sefiksim ve 221.14 mg/kg Cistanche Tubulosa sulu ekstresi, orta doz grubuna sefiksim ve 165.54 mg/kg sulu ekstrakt ile ıslatılmış ve düşük doz grubuna sefiksim ve 110.57 ile ıslatılmıştır. mg/kg sulu ekstrakt. A grubu, 165.54 mg/kg sulu ekstrakt ile ıslatıldı ve sefiksim ilave edilmedi. Sefiksim her gün 12:00 saatte uygulandı ve diğer maddeler her gün 15:00 saatte uygulandı. Deneyler sırasında, C, D, E ve F grupları, bağırsak bozukluklarının model durumunda tutuldu. *dışkılar her yedi günde bir steril ameliyat masasında toplandı ve -20 derecede saklandı.

2.4. Fare Kolonunun Histopatolojik Gözlemi.

Deneyin sonunda fareler servikal dislokasyon ile öldürüldü ve kolon içerikleri steril bir ameliyat masasına toplandı ve -80 derecede saklandı; aynı zamanda kolon doku örnekleri yüzde 10 nötr formalin içinde sabitlendi. Daha sonra numuneler, gradyan etanol konsantrasyonu kullanılarak kurutuldu, ksilen kullanılarak hyalinize edildi, parafine gömüldü, kesitler alındı ​​ve hematoksilen-eozin ile boyandı. Kolonik mukozadaki morfolojik değişiklikler gözlendi ve bir optik mikroskop kullanılarak karşılaştırıldı. Kolondaki villus uzunluğu ve kript derinliği ölçüldü ve villus uzunluğunun kript derinliğine oranı (V/C değeri) hesaplandı (51).

2.5. DNA Ekstraksiyonu ve Kütüphane İnşası. Üreticinin protokolüne göre EZNA ®Soil DNA Kiti (Omega Bio-Tek, Norcross, GA, ABD) kullanılarak dışkılardan DNA ekstrakte edildi. DNA kalitesi bir florometre (QuantiFluor™–ST, Promega Corporation, ABD) kullanılarak belirlendi. 16s rDNA'nın V3-V4 bölgesindeki eşleştirilmiş primerler, bölgeyi büyütmek ve 466 bp DNA fragmanı üretmek için tasarlanmıştır. *e ileri primer 341F (-5-CCTACGGGNGGCWGCAG-3-) ve ters primer 806R (-5-GGACTACHVGGGTATCTAAT-3-) idi. Her PCR hacmi 25 μL idi ve 2.5 μL 10 x PCR tamponu, 2 μL dNTP, her primerden 1 μL ve 20-30 ng şablon DNA içeriyordu. *tr, dizine alınmış bağdaştırıcılar, dizileme kitaplıkları oluşturmak için amplikonların sonuna eklenmiştir. Kütüphaneler, bir QuantiFluor™ florometre kullanılarak doğrulandı ve 10 nmol olarak nicelendirildi.

cistanche'deki acteoside bağışıklık sistemini artırabilir

2.6. 16s rRNA Gen Dizilemesi ve Mikrobiyal Topluluk Analizi.

Illumina platformu (Illumina MiSeq) 2 x 250 bp eşleştirilmiş uç verileri elde etmek için kullanıldı. Operasyonel taksonomik birimler (OTU'lar), Uparse yazılımı kullanılarak yüzde 97 benzerlikle standart kümeleme yoluyla elde edildi. RDP sınıflandırıcısının saf Bayes atama algoritması, OTU'ları Greengene veritabanı Sürüm 13.5 ile hizalamak ve tür açıklamalarını gerçekleştirmek için kullanıldı. Bağırsak mikrobiyotasının alfa çeşitliliği, Shannon ve Simpson endeksleri kullanılarak hesaplandı ve gruplar arasındaki farklılıklar lineer diskriminant analizi Etki Boyutu (LEfSe) ile analiz edildi. Beta çeşitliliği, Brady-Curtis farklılıklarının temel koordinat analizi (PCoA) ile analiz edildi. PICRUSt2, bağırsak mikrobiyomunun mikrobiyal metabolik kapasitesini tahmin etmek için kullanıldı [42].

2.7. İstatistiksel Veri Analizi.

Tek yönlü ANOVA için SPSS 20 kullanıldı ve deneysel veriler X ± S olarak ifade edildi; X, ortalama değeri, S ise standart sapmayı gösterir.

3. Sonuçlar

3.1. Cistanche Tubulosa Sulu Ekstraktının Kolon Morfolojisi Üzerine Etkisi.

Temsili bileşikler (ekinakozit ve ateozit) ve bunların Cistanche Tubulosa özütü konsantrasyonları HPLC ile doğrulandı (Şekil S1). Sulu ekstrenin bağırsak üzerindeki etkisini belirlemek için, Cistanche Tubulosa sulu ekstresi ile muameleyi takiben kolon villuslarının uzunluğunu ve girintilerin derinliğini araştırdık. Normal ve yüksek doz gruplarındaki (A, B ve D) kolon villusları daha uzun ve parmak şeklindeyken, model ve düşük doz gruplarındaki (C ve F) kolon villusları kısa ve kolonun uçları kısaydı. villus kırıldı (Resim 1). Buna göre, yüksek doz Cistanche Tubulosa sulu özütü, model grubundaki farelere kıyasla bağırsak bozukluğu olan farelerde kolon villusunun uzunluğunu önemli ölçüde arttırdı ve girinti derinliğini azalttı (P < 0.01).="" buna="" karşılık,="" yüksek="" doz="" grubu="" ile="" normal="" grup="" arasında="" girinti="" derinliği="" anlamlı="" derecede="" farklı="" değildi="" (p=""> 0.05) (Tablo S1). Bu sonuçlar, Cistanche Tubulosa sulu ekstraktının yüksek dozunun, bağırsak bozuklukları olan farelerin kolonunun içindeki morfolojiyi iyileştirebileceğini gösterdi.

3.2. Cistanche Tubulosa Sulu Ekstraktının Bağırsak Mikrobiyotasının Çeşitliliği Üzerindeki Etkisi.

Kolon içindeki morfolojik değişikliklerin potansiyel nedenini araştırmak ve CT sulu ekstresi ile muameleyi takiben bağırsak mikrobiyotasındaki değişiklikleri araştırmak için 16s rRNA gen dizilimi gerçekleştirdik. Ham verilerden 77.734 ila 125.144 arasında değişen ortalama 100.553 etkili etiket elde edildi (Tablo S2). Bu etiketler 4932 OTU'da (Tablo S3) kümelendi. Daha sonra Theseus'a dayalı olarak bağırsak mikrobiyotasının çeşitliliğini analiz ettik. Shannon ve Simpson indeksleri, A grubu (Cistanche Tubulosa sulu özü ile normal) ve B grubu (CT sulu özü olmadan normal) arasında hiçbir fark göstermedi (Şekil 2(a)). *sefiksim tedavisi olmayan farelerde, CT sulu ekstraktının, bağırsak mikrobiyotasının çeşitliliği üzerinde hiçbir ek yararlı veya zararlı etkisi olmayabileceği belirtilmiştir. Ancak model grubundaki (C) -çeşitlilik normal gruplara göre azalan bir eğilim göstermiştir. *e yüksek ve orta doz CT sulu özütlerle tedavi edilen fareler, çeşitlilikte iyileşme belirtileri gösterirken, düşük doz CT sulu özü ile tedavi edilen farelerde böyle bir fenomen gözlenmedi (Şekil 2(a)). Bu arada, PCoA, normal gruplar (A ve B) ve bağırsak bozukluğu grubu tarafından uygulanan yüksek doz (D) ve orta doz (E) CTaqueous özütlerinin, model grubundakilerden daha kısa örnekler arası mesafelere sahip olma eğiliminde olduğunu ortaya koydu. düşük doz CTaqueous özü takviye grubu (F) (Şekil 2(b)). Bu sonuçlar, CT sulu özütünün, bağırsak bozuklukları olan farelerde bağırsak mikrobiyotasının çeşitliliğini geliştirmeye yardımcı olabileceğini gösterdi.

3.3. Cistanche Tubulosa Sulu Ekstresi ile Tedavi Edilen Gut Mikrobiyotasının Bileşimindeki Değişiklikler.

Mikrobiyota kompozisyon profilleri farklı gruplar arasında karşılaştırıldı. Filum düzeyinde, model grubundaki Proteobakterilerin nispi bolluğu diğer gruplardakinden daha yüksekti(Şekil 3(a)). Proteobacteria'daki artış, model farelerin mikrobiyomunun sefiksim tarafından değiştirildiğini ve Proteobacteria'nın artan prevalansının düzensiz bağırsak florasının bir merkez belirteci olduğu için CT sulu ekstraktının bağırsak mikrobiyotasına fayda sağlayabileceğini öne sürdü [43–45]. Ek olarak, cins düzeyinde, model grubundaki Lactobacillus'un nispi bolluğu, normal ve yüksek doz gruplarına kıyasla azalmıştır; ancak orta ve düşük doz grubuna göre arttı(Şekil 3(b)). Bu sonuçlar, yüksek dozda CTaqueous özütünün Lactobacillus cinsinden bazı bakterilerin büyümesini destekleyebileceğini göstermiştir.

Çalışılan gruplar arasındaki farklı mikrobiyota, LEfSe analizine göre ayrıca belirlendi. Bu analiz, sefiksim ile tedaviden sonra Turicibacter, Alphaproteobacteria, Acidobacteria, Betaproteobacteriales ve Chloroflflexi'nin nispi bolluklarının önemli ölçüde arttığını, buna karşın lactobacillus, Eubacterium_nodatum_grubu, Pseudono'nun nispi bolluklarının önemli ölçüde arttığını göstermiştir. cardiales ve Christensenellaceae_R-7_grubu, normal gruptakilere kıyasla önemli ölçüde azaldı(Şekil 4(a)). Çarpıcı bir şekilde, model grubuna yüksek dozlu CT sulu özüt eklendiğinde, Muribaculaceae, Lactobacillus, Kineosporiaceae, Eubacterium no datum grubu ve Pedobacter'in nispi bollukları model grubundakilere kıyasla önemli ölçüde arttı. Bu arada, Rhodobacter, Ruminococcaceae UCG_013, Roseburia, Ruminiclostridium_9 ve Candidatus Stoquefifichus'un nispi bollukları model grubundakilere kıyasla önemli ölçüde azaldı (Şekil 4(b)).

3.4. Cistanche Tubulosa Sulu Ekstrakt ile Tedaviyle İlgili Bağırsak Mikrobiyotasının İşlevleri.

Bağırsak mikrobiyotasının metabolik yollarını tahmin etmek için PICRUSt2 yazılımını kullandık ve diğer gruplardaki değişiklikleri analiz etmek için normal grup referans olarak kullanıldı. Sefiksim tedavisi altında, etilbenzen bozunmasının nispi bolluğu, siderofor grubu ribozomal olmayan peptitlerin biyosentezi ve sitokrom P450 yollarıyla ksenobiyotiklerin metabolizması arttı; yüksek ve orta doz Cistanche Tubulosa sulu ekstraktları ile muameleden sonra, göreceli bollukları normal seviyelere döndü. Bu arada, siyano amino asit metabolizma yolunun nispi bolluğu, sefiksim tedavisi altında azaldı; bununla birlikte, yüksek dozlu CT sulu ekstrakt ile muameleden sonra arttı. Ayrıca, genel olarak, sefiksim ile tedaviden sonra farklı metabolit yollarındaki değişiklikler, normal gruptakilerle karşılaştırıldığında anlamlıydı; ancak Cistanche Tubulosa sulu ekstraktının eklenmesi aşırı değişiklikleri önleyebildi(Şekil 5).

4. Tartışma

Kolon morfolojisi büyüme, sindirim ve emilim, bağışıklık düzenlemesi ve bağırsak hasarı onarımı ile değiştirilebilir [46-50]. V/C oranı, bağırsak yolunun sindirim durumunu kapsamlı bir şekilde yansıtabilir ve bağırsak yolunun sindirim ve emilim kapasitesi ile doğru orantılıdır [51, 52]. Bu çalışmada, villus ve girinti biyopsisi ve istatistiksel veriler, yüksek doz sulu ekstraktın kolon içindeki kusurlu morfolojiyi kısmen iyileştirebileceğini göstermiştir. Sulu özütün bağırsak morfolojisini nasıl değiştirdiğini ve bağırsak mikrobiyotasını nasıl etkilediğini araştırmak için bağırsak florasındaki değişikliklerden geriye doğru çalıştık. Sefiksim tedavisi altında, düzensiz bağırsak florasının bir merkez belirteci olan Proteobacteria'nın nispi bolluğunun, sefiksim tedavisi olmayana kıyasla arttığını bulduk. in vitro [56] ve konakçı sağlığına fayda sağlayabilecek bazı laktik asit bakterilerinin büyümesini teşvik edebilir [43]. Paralel olarak, Muribaculaceae uzun ömürle bağlantılı probiyotik organizmalardır [57]. Bunlar, CT sulu özütünün bağırsak mikrobiyotasını iyileştirdiği mekanizmanın, probiyotik organizmaların büyümesinin desteklenmesi veya korunması olabileceğini öne sürdü. Kayda değer bir başka bakteri de YE57 bakterisiydi. Yüksek dozda CTaqueous özütü, bu çalışmada bakteri YE57'nin nispi bolluğunu desteklese de (Şekil 4), önceki çalışmalar, bolluğunun normal bağırsakta yüksek konsantrasyonlu bitki çayı kalıntısı ile tedavi edilen bağırsaktakinden daha yüksek olduğunu bulmuştur [ 58] ve XOS(xylooligosaccharides) ile kombine edilmiş Bacillus licheniformis ile müdahaleden sonra bolluğunun azaldığını bildirmiştir [59]. Bu nedenle, bu bakterinin bağırsak mikrobiyotasındaki rolü daha fazla çalışmayı hak ediyor. Ayrıca, bu çalışmadaki nispeten küçük örnek sayısı, yanlış pozitif ve yanlış negatif ölçümlerine neden olabilir ve daha büyük örnekler üzerinde gelecekte yapılacak çalışmaların, tanımlanan bakteri belirteçlerini doğrulamak için önerilmektedir.

Cistanche Tubulosa sulu özüt bileşimi, bağırsak bozukluğu olan farelerin bağırsak mikrobiyotasındaki bileşim ve fonksiyonel değişiklikler üzerindeki etkileri açısından önemli olabilir. PHG'ler, Cistanche Deserticola ve Cistacnche Tubulosa'da bulunan yaygın aktif bileşenlerdir ve ekinakozit, Cistache'de başlıca PNG olarak tanımlanmıştır. Tubuloza [60]. Geçtiğimiz on yıllarda, ekinakozidin yaşlanmayı önleyici ve nöroprotektif etkiler, kalp fonksiyonunun iyileştirilmesi, hiperlipidemi ve hipergliseminin azaltılması ve obezitenin neden olduğu diyabet ve metabolik sendromun önlenmesi gibi birçok farmakolojik aktiviteye sahip olduğu gösterilmiştir [53, 61–65] . Aslında, bağırsak mikrobiyotasının metabolik yollarında değişiklikler tespit ettik.*e sefiksim tedavisi, etilbenzen bozunması ile ilgili bakterilerin zenginleşmesine ve siderofor grubu nonribozomal peptitlerin biyosentezine yol açarken, yüksek ve orta doz Cistanche ile tedaviler Tubulosa sulu özütü bu değişiklikleri hafifletebilir, bu özütün bu işlevlerle ilgili bakteri topluluğunu yönettiğini gösterir. Ek olarak, yüksek dozlu sulu ekstrakt ile tedavi altında siyanoamino asit metabolizması yolu ile ilgili artan bakteri zenginleşmesi ve model farelerde bunun azalması, Cistanche Tubulosa sulu ekstraktının siyanoamino asit metabolizmasını destekleyebileceğini gösterdi. * İlgili metabolitlerdeki değişiklikler, bu sulu ekstraktın farmakolojik aktivitelere sahip olmasını sağlayabilir.

cistanche otu

Cistanche Tubulosa sulu özütünün bağırsak mikrobiyotasının bileşimini ve işlevini değiştirme mekanizması karmaşık olsa da, potansiyel mekanizma hakkında spekülasyon yapmak için bazı ipuçları vardır. Hem laktik asit bakterilerinin hem de Cistanche Tubulosa sulu ekstraktlarının oksidatif stresi antagonize edebildiği bildirilmiştir. Enflamasyon sırasında meydana gelen oksidatif stres, bağırsak mikrobiyal çeşitliliğini güçlü bir şekilde azaltarak ve spesifik bakterilerin çoğalmasını teşvik ederek bağırsak bozukluklarını şiddetlendiren yaygın bir faktördür (4). Aksine, reaktif oksijen türleri nitrat ve tetratiyonat solunum yoluyla bakteri gruplarının seçici büyümesini de destekler. [66-68]; örneğin, Enterobacteriaceae familyasından bakteriler, inflamasyon sırasında oksidatif koşullar altında bağırsak florasının bileşimindeki değişikliklerin bir sonucu olarak hızla büyüyebilir [69, 70]. Çoğu canlı organizma, oksijen radikallerini temizlemek için enzimatik savunmalar, enzimatik olmayan antioksidan savunmalar ve onarım mekanizmaları geliştirir [71]. Ancak bu doğal antioksidan sistemler genellikle canlı organizmalarda oksidatif hasarı önlemek için yeterli değildir. Bütillenmiş hidroksianisol ve bütillenmiş hidroksitoluen dahil olmak üzere birkaç ilave sentetik antioksidan, oksidasyonu azaltmak için yaygın olarak kullanılmıştır, ancak güvenlikleri sorgulanmıştır [72, 73]. Bu nedenle araştırmacılar, doğal olarak oluşan maddelerden elde edilen daha güvenli ve daha doğal antioksidanlar bulmaya yöneldiler. Hem polisakkaritlerin hem de laktik asit bakterilerinin oksidatif stresi ortadan kaldırma kabiliyeti nedeniyle, Cistanche Tubulosa sulu ekstraktlarının bağırsak mikrobiyotası üzerindeki kesin antioksidatif mekanizmasının belirlenmesi gelecekte daha fazla araştırma gerektirmektedir.

Sonuç olarak, Cistanche Tubulosa sulu özütünün, çeşitliliği teşvik ederek, metabolik değişiklikleri düzenleyerek ve bağırsak mikrobiyotasının yapısını yeniden şekillendirerek bağırsak bozuklukları olan farelerde bağırsak bağırsak mikrobiyotasını iyileştirebildiğini bulduk ve bu sonuçlar gelişim için bir referans sağlayabilir. gelecekte ilgili ilaçların

Veri kullanılabilirliği

Bu çalışmanın bulgularını desteklemek için kullanılan her bir örnek veri arasındaki operasyonel taksonomik birimlerin istatistiği ek bilgi dosyalarına dahil edilmiştir ve bu çalışmanın bulgularını desteklemek için kullanılan 16s rRNA dizileme verileri yayınlandığında yayınlanacaktır.

Çıkar çatışmaları

Yazarlar herhangi bir çıkar çatışması olmadığını beyan eder.

Teşekkür

Bu çalışma, Çin Ulusal Doğa Bilimleri Vakfı (81860766) tarafından sağlanan hibelerle finansal olarak desteklenmiştir.

Ek Malzemeler

Şekil S1: Cistanche tubulosa sulu ekstresinin HPLC tespiti. (a) Referans malzemede ekinakozit ve akteozit piki ayrı ayrı 5.066 dk ve 9.988 dk'da görünür. (b) *e ekinakozit ve akteozitin sulu ekstrakttaki zirvesi ayrı ayrı 5.097 dakika ve 10.076 dakikada görünür ve konsantrasyonlar ayrı ayrı 236 mg/g ve 12.7 mg/g'dir. Tablo S1: kolon villusunun uzunluğu ve girintilerin derinliği. Tablo S2: 16S rRNA sıralama verilerinin istatistiksel bilgileri. Tablo S3: Her bir örnek arasındaki operasyonel taksonomik birimlerin istatistiği. (ek materyal).

Referanslar

[1] A. Heintz-Butchart ve P. Wilmes, "İnsan bağırsağı mikrobiyomu: işlev önemlidir," Trends in Microbiology, cilt. 26, hayır. 7, s. 563–574, 2018.

[2] CA Thaiss, N. Zmora, M. Levy ve E. Elinav, "Mikrobiyom ve doğuştan gelen bağışıklık", Nature, cilt. 535, hayır. 7610, s. 65–74, 2016.

[3] G. Quaranta, M. Sanguinetti ve L. Masucci, "Fekal mikrobiyota transplantasyonu: insan dişi üreme sistemi hastalıklarının tedavisi için potansiyel bir araç," Frontiers in Immunology, cilt. 10, s. 2653, 2019.

[4] GA Weiss ve T. Hennet, "Mekanizmalar ve intestinal disbiyozun sonuçları," Cellular and Molecular Life Sciences, cilt. 74, hayır. 16, s. 2959–2977, 2017.

[5] Y. Li, Y. Peng, P. Ma ve diğerleri, "Cistanche tubulosa özütünün bağırsak mikrobiyota homeostazının restorasyonu yoluyla kronik öngörülemeyen stres fareleri üzerindeki antidepresan benzeri etkileri", Frontiers in Pharmacology, cilt. 9, s. 967, 2018.

[6] L. Fan, Y. Peng, J. Wang, P. Ma, L. Zhao ve X. Li, "Cistanche tubulosa'nın gövdelerinden elde edilen toplam glikozitler, depresyon benzeri davranışları hafifletir: fitokimyasalların ve bağırsak mikrobiyotasının çift yönlü etkileşimi, " Bitki tıbbı, cilt. 83, Madde Kimliği 153471, 2021.

[7] Y. Li, Y. Peng, M. Wang, P. Tu ve X. Li, "Cistanche herba su ekstresinin invitro insan gastrointestinal metabolizması: mide suyunda kapsamlı metabolit tanımlamasına dayalı metabolik profilin aydınlatılması, bağırsak suyu, insan bağırsak bakterileri ve bağırsak mikrozomları", Tarım ve Gıda Kimyası Dergisi, cilt. 65, hayır. 34, s. 7447–7456, 2017.

[8] H. Wang, Y. Sun, W.-C. Ye ve diğerleri, "Picrorhiza Scrophularia florasından antioksidan feniletanoid ve fenolik glikozitler," Chemical and Pharmaceutical Bulletin, cilt. 52, hayır. 5, s. 615-617, 2004.

[9] S.-L. Ji, K.-K. Cao, X.-X. Zhao ve diğerleri, "Feniletanoid glikozitlerin glutamat kaynaklı nörotoksisite üzerindeki antioksidan aktivitesi," Bioscience, Biotechnology, and Biochemistry, cilt. 83, hayır. 11, s. 2016-2026, 2019.

[10] Q. Wang, J. Dong, W. Lu ve diğerleri, "Cistanche tubulosa kaynaklı feniletanol glikozitler, testiküler steroidleri CYP450-3 -HSDpathway yoluyla düzenleyerek üreme işlev bozukluğunu iyileştirdi," Journal of Ethnopharmacology, cilt. 251, Madde ID112500, 2020.

[11] S.-P. Siz, L. Ma, J. Zhao, S.-L. Zhang ve T. Liu, "Cistanche tubulosa kaynaklı feniletanol glikozitler, hepatik stellat hücre aktivasyonunu baskılar ve potansiyel anti-hepatik fibroz ajanları olarak TGF- 1/smad'da sinyal yollarının iletimini bloke eder," Molecules, cilt. 21, hayır. 1, s. 102, 2016.

[12] S.-P. Siz, J. Zhao, L. Ma, M. Tudimat, S.-L. Zhang ve T. Liu, "Cistanche tubulosa kaynaklı feniletanoid glikozitlerin sıçanlarda bovin serum albümini ile indüklenen hepatik fibroz üzerindeki önleyici etkileri," DARU Journal of Pharmaceutical Sciences, cilt. 23, hayır. 1, s. 52, 2015.

[13] T. Morikawa, H. Xie, Y. Pan, ve diğerleri, "Bir çöl bitkisi Cistanche tubulosa'dan biyolojik olarak aktif doğal ürünlerin gözden geçirilmesi", Chemical and Pharmaceutical Bulletin, cilt. 67, hayır. 7, s. 675–689, 2019.

[14] J. Li, J. Li, A. Aspire, ve diğerleri, "Cistanche tubulosa kaynaklı feniletanoid glikozitler, mitokondriyal- bağımlı yol," Journal of Cancer, cilt. 7, hayır. 13, s. 1877–1887, 2016.

[15] Y. Hu, J. Huang, Y. Li ve diğerleri, "Cistanche Deserticola polisakkarit, melanositlerde melanogenezi indükler ve NRF2/HO-1 yolunu aktive ederek oksidatif stresi azaltır," Journal of Cellular and Molecular Medicine, cilt 24, hayır. 7, s. 4023–4035, 2020.

[16] S. Peng, P. Li, P. Liu, ve diğerleri, "Cistanches, sıçanlarda PPAR-c'ye bağımlı antioksidan ve anti-inflamatuar düzenleyerek sevofluran kaynaklı bilişsel işlev bozukluğunu hafifletir", Journal of Cellular and Molecular Medicine, cilt 24, hayır. 2, s. 1345-1359, 2020.

[17] Y. Liu, H. Wang, M. Yang, ve diğerleri, "Cistanche Deserticola polisakkaritleri, PC12 hücrelerini OGD/RP'nin neden olduğu hasara karşı korur," Biomedicine & Pharmacotherapy, cilt. 99, s. 671–680,2018.

[18] Z. Fu, L. Han, P. Zhang, ve diğerleri, "Cistanche polisakkaritleri in vivo ekinakozit emilimini arttırır ve bağırsak mikrobiyotasını etkiler," International Journal of Biological Macromolecules, cilt. 149, s. 732–740, 2020.

[19] NT Williams, "Probiyotikler," American Journal of Health-System Pharmacy, cilt. 67, hayır. 6, s. 449-458, 2010.

[20] R. Ashraf ve NP Shah, "Probiyotik mikroorganizmalar tarafından bağışıklık sistemi uyarımı", Gıda Bilimi ve Beslenmede Eleştirel İncelemeler, cilt. 54, hayır. 7, s. 938-956, 2014.

[21] G. La Fata, P. Weber ve MH Mohajeri, "Probiyotikler ve bağırsak bağışıklık sistemi: dolaylı düzenleme," Probiyotikler ve antimikrobiyal Proteinler, cilt. 10, hayır. 1, s. 11–21, 2018.

[22] MA Zocco, LZ dal Verme, F. Cremonini, et al., "Efficacy of lactobacillus GG in ülseratif kolit remisyonu," Alimentary Pharmacology and 8erapeutics, cilt. 23, hayır. 11, s. 1567–1574, 2006.

[23] MJ Saez-Lara, C. Gomez-Llorente, J. Plaza-Diaz ve A. Gil,"*e probiyotik laktik asit bakterileri ve bifidobakterilerin inflamatuar bağırsak hastalığı ve diğer ilgili hastalıkların önlenmesi ve tedavisinde rolü: randomize insan klinik deneylerinin sistematik bir incelemesi," BioMed Research International, cilt. 2015, Makale No 505878, 15 sayfa, 2015.

[24] MAO Dawood, S. Koshio, M. Ishikawa, ve diğerleri, "Lactobacillus rhamnosus ve/ve lactococcus lactis'in diyet takviyesinin kırmızı çipura, Pagrus major'un büyümesi, bağırsak mikrobiyotası ve bağışıklık tepkileri üzerindeki etkileri", Balık & Kabuklu Deniz ÜrünleriImmunology, cilt. 49, s. 275–285, 2016.

[25] A. Sivan, L. Corrales, N. Hubert, ve diğerleri, "Commensal bifidobacterium, antitümör bağışıklığını destekler ve anti-PD-L1 etkinliğini kolaylaştırır," Science, cilt. 350, hayır. 6264, s. 1084–1089,2015.

[26] PJ Whorwell, L. Altringer, J. Morel, ve diğerleri, "Enkapsüle edilmiş probiyotik Bifidobacterium bebeğinin irritabl barsak sendromlu kadınlarda etkinliği 35624," 8e American Journal of Gastroenterology, cilt. 101, hayır. 7, s. 1581–1590, 2006.

[27] Y. Wang, Y. Wu, Y. Wang ve diğerleri, "Probiyotik bakterilerin antioksidan özellikleri", Nutrients, cilt. 9, hayır. 5, s. 521, 2017.

[28] JMC Gutteridge, R. Richmond ve B. Halliwell, "Desferrioksamin ile süperoksitten hidroksil radikallerinin demir katalizli oluşumunun ve lipid peroksidasyonunun inhibisyonu," Biochemical Journal, cilt. 184, hayır. 2, s. 469-472, 1979.

[29] E. Deriu, JZ Liu, M. Pezeshki, ve diğerleri, "Probiyotik bakteriler, demir için rekabet ederek salmonella Typhimurium bağırsak kolonizasyonunu azaltır", Cell Host & Microbe, cilt. 14, hayır. 1, s. 26–37, 2013.

[30] T. Kullisaar, M. Zilmer, M. Mikelsaar, et al., "Two antioxidatif lactobacilli suşu as umut verici probiyotikler," International Journal of Food Microbiology, cilt. 72, hayır. 3, s. 215–224, 2002.

[31] JG LeBlanc, S. del Carmen, A. Miyoshi, ve diğerleri, "TNBS'de laktik asit üreten laktik asit bakterilerinde süperoksit dismutaz ve katalaz kullanımı farelerde Crohn hastalığına yol açtı", Journal of Biotechnology, cilt. 151, hayır. 3, s. 287–293, 2011.

[32] M. Rossi, A. Amaretti ve S. Raimondi, "Probiyotik bakteriler tarafından folat üretimi", Nutrients, cilt. 3, hayır. 1, s. 118–134,2011.

[33] A. Pompei, L. Cordisco, A. Amaretti, et al., "Folat üreten bifidobakterilerin verilmesi Wistar sıçanlarında folat durumunu artırır," 8e Journal of Nutrition, cilt. 137, hayır. 12, s. 2742–2746, 2007.

[34] L.-X. Wang, K. Liu, DW Gao ve JK Hao, "Hiperlipidemik farelerde iki Lactobacillus Plantarum suşunun koruyucu etkileri", World Journal of Gastroenterology, cilt. 19, hayır. 20, s. 3150–3156, 2013.

[35] EO Petrof, K. Kojima, MJ Ropeleski, ve diğerleri, "Probiyotikler nükleer faktör-κB'yi inhibe eder ve proteazom inhibisyonu yoluyla kolonik epitel hücrelerinde ısı şoku proteinlerini indükler", Gastroenterology, cilt. 127, hayır. 5, s. 1474-1487, 2004.

[36] A. Seth, F. Yan, DB Polk ve RK Rao, "Probiyotikler, bir PKC ve MAP kinaz bağımlı mekanizma ile hidrojen peroksit kaynaklı epitelyal bariyer bozulmasını iyileştiriyor," American Journal of Physiology-Gastrointestinal and karaciğer Fizyolojisi , cilt 294, hayır. 4, s. G1060–G1069, 2008.

[37] M. G´omezGuzm´an, M. Toral, M. Romero, et al., "Probiyotiklerin Lactobacillus suşlarının spontan hipertansif sıçanlarda antihipertansif etkileri," Molecular Nutrition & FoodResearch, cilt. 59, hayır. 11, s. 2326–2336, 2015.

[38] H. Zeng, L. Huang, L. Zhou, P. Wang, X. Chen ve K. Ding, "Cistanchedeserticola YC Ma'dan izole edilen bir galaktoglukan ve bağırsak bakteri suşları üzerindeki biyoaktivitesi", Carbohidrat Polymers, cilt. 223, Makale Kimliği 115038, 2019.

[39] S. Zheng, X. Jiang, L. Wu, Z. Wang ve L. Huang, "UPC-QTOF/MS ve DNA barkodlamasına dayalı cistanche herbanın kimyasal ve genetik ayrımı", PLoS One, cilt. 9, hayır. 5, Makale Kimliği e98061, 2014.

[40] M. Li, T. Xu, F. Zhou, ve diğerleri, "Dört feniletanoid glikozidin Nrf2/ARE yolu yoluyla PC12 hücrelerinde H2O2-indüklenen apoptoz üzerindeki nöroprotektif etkileri, International Journal of Molecular Sciences , cilt 19, hayır. 4, s. 1135, 2018.

[41] A. Wu, Z. Yang, Y. Huang, ve diğerleri, "Callicarpa kwangtungensis'ten izole edilen doğal feniletanoid glikozitler, RAW 264.7'de Keap1/Nrf2/HO-1 yolunu aktive ederek lipopolisakarit aracılı inflamatuar yanıtı bastırdı makrofaj hücresi," Journal of Ethnopharmacology, cilt. 258, Makale Kimliği 112857, 2020.

[42] GM Douglas, VJ Maffffei, JR Zaneveld ve diğerleri, "PICRUSt2for metagenom fonksiyonlarının tahmini", Nature Biotechnology, cilt. 38, hayır. 6, s. 685–688, 2020.

[43] H.-L. Li, L. Lu, X.-S. Wang ve diğerleri, "Florourasil ile indüklenen bağırsak mukozitinde bağırsak mikrobiyotası ve enflamatuar sitokin/kemokin profillerinin değiştirilmesi", Hücresel ve enfeksiyon Mikrobiyolojisinde Sınırlar, cilt. 7, s. 455, 2017.

[44] M. Pammi, J. Cope, PI Tarr, ve diğerleri, "Nekrotizan enterokolitten önceki erken doğmuş bebeklerde bağırsak disbiyozu: sistematik bir derleme ve meta-analiz," Microbiome, cilt. 5, hayır. 1,s. 31, 2017.

[45] N.-R. Shin, TW When ve J.-W. Bae, "Proteobakteriler: bağırsak mikrobiyotasında disbiyozun mikrobiyal imzası", Trends in Biotechnology, cilt. 33, hayır. 9, s. 496-503, 2015.

[46] M. de Oliveira Bel'em, CP Cirilo, AP de Santi-Rampazzoet al., "Beslenme kısıtlamasının neden olduğu bağırsak morfolojisi ayarlamaları, farelerin yaşlanma sürecinde beslenme durumunu iyileştirir," Experimental Gerontology, cilt. 69, s. 85–93,2015.

[47] B. Potsic, N. Holliday, P. Lewis, D. Samuelson, V. DeMarco ve J. Neu, "Glutamin takviyesi ve yoksunluğu: yapay olarak yetiştirilmiş sıçan ince bağırsak morfolojisi üzerindeki etki," Pediatrik Araştırma, cilt. 52, hayır. 3, s. 430–436, 2002.

[48] ​​JL Daniels, RJ Bloomer, M. van der Merwe, SL Davis,KK Buddington ve RK Buddington, "Dayanıklılık egzersizi olan ve olmayan farklı diyetlerin bir kombinasyonuna bağırsak uyarlamaları", Journal of the International Society of Sports Nutrition, cilt 13, hayır. 1, s. 35, 2016.

[49] L. Muñoz, MJ Borrero, M. ´Ubeda ve diğerleri, "Disbiyozun yol açtığı bağırsak immün düzensizliği, sirozlu sıçanlarda bariyer bozulmasını ve bakteriyel translokasyonu teşvik eder" Hepatology, cilt. 70, hayır. 3, s. 925–938, 2019.

[50] X. Li, Y. Wu, Z. Xu ve diğerleri, "Hetiao Jianping kaynatmasının antibiyotikle ilişkili ishalli sıçanlarda bağırsak yaralanması ve onarımı üzerindeki etkileri" Medical Science Monitor, cilt. 26, Makale IDe921745, 2020.

[51] Y. Xie, F. Ding, W. Di ve diğerleri, "Yüksek yağlı bir diyetin orta yaşlı dişi farelerde bağırsak kök hücreleri ve epitel bariyer işlevi üzerindeki etkisi" Molecular Medicine Reports, cilt. 21, hayır. 3, s. 1133–1144, 2020.

[52] BL Bivolarski ve EG Vachkova, "Tavşanlarda sütten kesme ile ilgili morfolojik ve fonksiyonel olaylar," Journal of Animal Physiology and Animal Nutrition, cilt. 98, hayır. 1, s. 9-18, 2014.

[53] H. Shimoda, J. Tanaka, Y. Takahara, K. Takemoto, S.-J. Shan ve M.-H. Su, "*e Çin geleneksel ham ilacı olan Cistanchetubulosa ekstresinin farelerde hipokolesterolemik etkileri," 8e American Journal of Chinese Medicine, cilt. 37, hayır. 6, s. 1125-1138, 2009.

[54] RE Ley, PJ Turnbaugh, S. Klein ve JI Gordon, "Obezite ile ilişkili insan bağırsak mikropları", Nature, cilt. 444, hayır. 7122, s. 1022-1023, 2006.

[55] J.-Y. Kim, YM Kwon, I.-S. Kim ve diğerleri, "Kahverengi deniz yosunu laminaria japonica takviyesinin, sıçanlarda serum IgG konsantrasyonları, trigliseritler ve kolesterol ve bağırsak mikrobiyota bileşimi üzerindeki etkileri", Frontiers in Nutrition, cilt. 5, s. 23, 2018.

[56] W. Zhang, J. Huang, W. Wang, ve diğerleri, "Cistanche tubulosa'dan polisakkaritlerin ekstraksiyonu, saflaştırılması, karakterizasyonu ve antioksidan aktiviteleri," International Journal of BiologicalMacromolecules, cilt. 93, s. 448–458, 2016.

[57] M. Sibai, E. Altuntaş, B. Yıldırım, G. ¨Özt¨urk, S. Yıldırım, andT. Demircan, "Mikrobiyom ve uzun ömür: uzun ömürlü kemirgen Spalax leucodon'un bağırsağında uzun ömürlü bağlantılı Muribaculaceae'nin yüksek bolluğu," OMICS: A Journal of IntegrativeBiology, cilt. 24, hayır. 10, s. 592-601, 2020.

[58] Y. Xie, Z. Chen, D. Wang, ve diğerleri, "Fermente bitki çayı kalıntılarının ısı stresi altında Holstein düvelerinin bağırsak mikrobiyota özellikleri üzerindeki etkileri", Frontiers in Microbiology, cilt. 11, s. 1014, 2020.

[59] Y. Li, M. Liu, H. Liu, ve diğerleri, "Birleştirilmiş Bacillus licheniformis zhengchangsheng ve ksilooligosakkaritlerin oral takviyeleri, yüksek yağlı diyet kaynaklı obeziteyi iyileştirir ve sıçanlarda bağırsak mikrobiyotasını modüle eder," BioMed Research International, cilt . 2020, Makale Kimliği 9067821, 17 sayfa, 2020.

[60] Y. Jiang ve P.-F. Tu, "Cistanche türlerindeki kimyasal bileşenlerin analizi", Journal of Chromatography A, cilt. 1216, hayır. 11, s. 1970–1979, 2009.

[61] F. Li, Y. Yang, P. Zhu, et al., "Echinacoside, MC3T'de OPG/RANKL oranını artırarak kemik rejenerasyonunu destekler3-E1cells," Fitoterapia, vol. 83, hayır. 8, s. 1443-1450, 2012.

[62] F. Tang, Y. Hao, X. Zhang ve J. Qin, "Diyabetik nefropatinin DB/DB fare modelinde TGF- 1/Smads sinyal yolunun inhibisyonu yoluyla ekinakozidin böbrek fibrozu üzerindeki etkisi ," İlaç Tasarımı, Geliştirme ve 8erapy, cilt. 11, s. 2813–2826, 2017.

[63] W.-T. Xiong, L.Gu, C. Wang, H.-X. Sun ve X. Liu, "Tip 2 diyabetik DB/DB farelerinde Cistanche tubulosa'nın antihiperglisemik ve hipolipidemik etkileri", Journal of Ethnopharmacology, cilt. 150, hayır. 3, s. 935-945, 2013.

[64] X.-x. Bao, H.-h. Ma, H. Ding, W.-w. Li ve M. Zhu, "Rotenon kaynaklı Parkinson hastalığının bir sıçan modelindeki nöro-koruyucu etkilere dayalı bir Çin bitkisel ilaç formülünün ön optimizasyonu", Journal of IntegrativeMedicine, cilt. 16, hayır. 4, s. 290–296, 2018.

[65] Y. Chen, Y.-Q. Li, J.-Y. Fang, P. Li ve F. Li, "Sıçanda Alzheimer hastalığı ile kombine osteoporozun eşzamanlı deneysel modelinin kurulması ve Cistanche tubulosa'dan echinacoside ve acteoside ikili etkileri," Journal of Ethnopharmacology, cilt. 257, Makale Kimliği 112834, 2020.

[66] M. Hensel, AP Hinsley, T. Nikolaus, G. Sawers ve B. C. Berks, "*e Genetik temeli of tetrathionate respiration in Salmonella Typhimurium," Molecular Microbiology, cilt. 32, hayır. 2, s. 275–287, 1999.

[67] SE Winter, P. Thiennimitr, MG Winter, ve diğerleri, "Bağırsak iltihabı, salmonella için bir solunum elektron alıcısı sağlar", Nature, cilt. 467, hayır. 7314, s. 426–429, 2010.

[68] SE Winter, MG Winter, MN Xavier ve diğerleri, "konakçıdan türetilen nitrat, iltihaplı bağırsakta E. coli'nin büyümesini artırır," Science, cilt. 339, hayır. 6120, s. 708-711, 2013.

[69] C. Lupp, ML Robertson, ME Wickham ve diğerleri, "Konak aracılı inflamasyon, bağırsak mikrobiyotasını bozar ve Enterobacteriaceae'nin aşırı büyümesini destekler," Cell Host &Microbe, cilt. 2, hayır. 2, s. 119-129, 2007.

[70] B. Stecher, R. Robbiani, AW Walker, ve diğerleri, "Salmonellaenterica serovar Typhimurium, bağırsak mikrobiyotası ile rekabet etmek için inflamasyonu kullanır," PLoS Biology, cilt. 5, hayır. 10, s. e244–2189, 2007.

[71] V. Mishra, C. Shah, N. Mokashe, R. Chavan, H. Yadav ve J. Prajapati, "Potansiyel antioksidanlar olarak probiyotikler: sistematik bir inceleme," Tarım ve Gıda Kimyası Dergisi, cilt. 63, hayır. 14, s. 3615–3626, 2015.

[72] JMP Mart´ın, PF Freire, L. Daimiel, et al., "Antioksidan bütillenmiş hidroksianisol, propilparabenin kültürlenmiş memeli hücrelerindeki toksik etkilerini güçlendiriyor," Food and Chemical Toxicology, cilt. 72, s. 195-203, 2014.

[73] RS Lanigan ve TA Yamarik, "BHT'nin güvenlik değerlendirmesine ilişkin nihai rapor," International Journal of Toxicology, cilt. 21, hayır. 2, s. 19–94, 2002.