Metabolomiklere dayalı böbrek yankı eksikliği olan sıçanlarda üreme disfonksiyonunun tedavisinde Cistanches Herba ekstraktının etkinliği ve mekanizması ⅱ

3.2 Cistanche ekstraktının böbrek yang eksikliği olan sıçanların genel durumu üzerindeki etkisi

Deneyden önce, her gruptaki sıçanlar normal saçları ve normal yeme ve içme ile iyi ruhlardaydı. Deney sırasında normal grup sıçanlarında anormallik bulunmamıştır ve beslenme süresinin uzatılmasıyla vücut ağırlığı istikrarlı bir şekilde artmıştır; Adenin modelleme süresi uzadıkça, model grup sıçanlarının saçları düştü ve pürüzlü hale geldi, ruhları düşüktü, reaksiyonları yavaşladı, sırtlarını kıvrıldılar, idrar hacimleri arttı, vücut ağırlıkları önemli ölçüde azaldı ve rektal sıcaklıkları önemli ölçüde azaldı (001), bariz semptomları gösterdi;Cistanche özütü ve LC müdahale tedavisiyukarıdakileri hafifletebilirdeğişen derecelerde belirtiler, rektal sıcaklığın önemli ölçüde ayarlandığı (p <0. 001), bkz. Şekil 1.

Şekil 1 Cistanches Herba ekstraktının, böbrek-yang eksikliği olan sıçanların vücut ağırlığı ve rektal sıcaklığı üzerindeki etkisi (𝑥̅ ± s (n =10 (

3.3 Cistanche ekstraktının viseral-beyin oranı üzerindeki etkisi Böbrek-yang eksikliği olan sıçanların

Normal grupla karşılaştırıldığında, model grubundaki testisin viseral-beyin oranı katsayıları önemli ölçüde azaldı (p <0. 0 0 1); Model grubu ile karşılaştırıldığında, her bir doz cistanche ekstraktı grubundaki testis ve epididimin viseral-beyin oranı katsayıları önemli ölçüde artmıştır (p <0. 0}. ayrıca anlamlı olarak artmıştır (p <0.01, p <0.001), bakınız Şekil 2.

Tablo 2 Cistanches Herba ekstraktının böbrek-yang eksikliği olan sıçanlarda sperm hareketlilik parametreleri üzerindeki etkisi (𝑥̅ ± s, n =10)

3.5 Böbrek Yang eksikliği olan sıçanlarda cistanche ekstraktının sperm sayısı, motilite ve deformite oranı üzerindeki etkisi

Normal sperm orak şeklindeki bir kafaya, ince bir gövdeye, doğal olarak kavisli bir kuyruğa ve pürüzsüz bir genel şekle sahiptir. Diğer deforme olmuş spermin morfolojisi Şekil 3'te gösterilmektedir. Normal grupla karşılaştırıldığında, model grubundaki sıçanların sperm yoğunluğu ve sperm motilitesi önemli ölçüde azalmıştır (P<0.01, P<0.001), and the sperm deformity rate was significantly increased (P<0.001); compared with the model group, the sperm density and motility of the rats in each dose group of Cistanche extract and the LC group were significantly increased (P<0.05, P<0.01, P<0.001), and the sperm deformity rate was significantly reduced (P<0.001), as shown in Figure 4.

3.6 Böbrek Yang eksikliği olan sıçanlarda cistanche ekstraktının testiküler ve epididimal doku morfolojisi üzerindeki etkisi
Normal gruptaki sıçanların testis seminifer tübülleri sağlamdı, her seviyede spermatojenik hücrelerin düzenli düzenlenmesi ve berrak katmanlar. Lümende bol spermatositler ve uzatılmış spermatidler görüldü. Normal grupla karşılaştırıldığında, model grubundaki sıçanlarda lezyonlu seminifer tübüllerin oranı önemli ölçüde arttı (P<0.001), which was manifested as irregular structure of seminiferous tubules, thinning of tubular walls, enlargement of lumen, increased number of exfoliated cell blocks in the lumen, decreased number of linear sperm, and disordered arrangement of spermatogenic cells. Compared with the model group, the proportion of testicular seminiferous tubule lesions in rats in all dose groups of Cistanche extract and LC group was significantly reduced (P<0.05, P<0.01), among which the low dose group of Cistanche extract had better improvement effect, which was equivalent to the LC group, as shown in Figure 5.

Cinsel işlevi geliştirmek için Cistanche hakkında daha fazla ayrıntı alın

Normal gruptaki sıçanların epididimal tübülleri sağlamdı, epitel hücreleri düzgün bir şekilde düzenlendi ve eşit olarak dağılmış sperm gözlemlenebilir; Model grubundaki sıçanların epididimal tübülleri şişti, epitel hücreleri düzensiz düzenlendi ve lümendeki sperm sayısı önemli ölçüde azaldı; Model grubu ile karşılaştırıldığında, sistanche ekstrakt gruplarındaki ve LC grubundaki sıçanların epididimal lümen lezyonları önemli ölçüde iyileştirildi, epitel hücreleri sıkı ve düzgün bir şekilde düzenlendi ve lümendeki normal sperm sayısı, Şekil 6'da gösterildiği gibi arttı ve eşit olarak dağıtıldı.

4 Tartışma

Böbrek Yang eksikliği sendromu, geleneksel Çin tıbbında, böbrek yang eksikliğini ve vücudun ısınamamasını ifade eden bir sendrom tipidir. Modern tıp, böbrek yang eksikliğinin hipotalamik-hipofiz hedef bezinin (esas olarak adrenal bezler, gonadlar ve tiroid bezleri) ekseninin disfonksiyonu ile ilişkili olduğuna inanmaktadır [11]. Adenin, sıçanların HPG ekseni üzerinde hareket ederek işlev bozukluğuna neden olabilir, böylece vücudun hormon seviyelerinin homeostazına müdahale edebilir ve böbrek yang eksikliğine benzer semptomlar gösterir. T seviyesi bu modelin tespit göstergelerinden biri olarak kullanılabilir [12]. Böbrek Yang eksikliği için diğer genel tanı kriterleri model sıçanlara uygulanır, yani vücut sıcaklığı, kilo kaybı, kıvırma, seyrek saçlar, artan idrar hacmi, gevşek dışkı vb. [9,13]. Cistanche Deserticola, Böbrek Yang'ı tonlamak için geleneksel Çin tıbbı reçetelerinde en yaygın kullanılan ilaçlardan biridir. Anahtar aktif maddesi olan feniletanoid glikozitlerin de HPG ekseni homeostaz ve anti-yorgunluk düzenleme işlevlerine sahip olduğu bildirilmiştir [14]. Bu çalışmada, adenin eksikliği olan sıçanlar, böbrek yang eksikliği modeli olarak kullanılmıştır. Cistanche Deserticola ekstraktının böbrek yang eksikliği olan sıçanlar üzerindeki iyileştirme etkisi, sıçanların genel belirtilerinden ve HPG ekseni ile ilgili hormonlardaki değişikliklerden değerlendirildi. Sonuçlar, tüm dozlarda Cistanche Deserticola ekstraktı, adenin neden olduğu sıçanlarda böbrek yang eksikliği semptomlarını iyileştirebileceğini ve adenin HPG ekseni inhibitör etkisini azaltabileceğini gösterdi.

Oligospermi ve astenospermi, geleneksel Çin tıbbında "çocuksuzluk", "infertilite", "soğuk sperm" ve "sperm tıkanması" kategorilerine sınıflandırılabilir. Ana patogenez, böbrek yang eksikliği, nemli ısı, yin eksikliği ve ateşin hiperaktivitesi, qi durgunluğu ve kan stazunu içerir; Böbrek Yang eksikliği sperm sarayını ısıtamaz, bu da soğuk sperm ve Qi ile sonuçlanır, dolayısıyla çocuksuzluk [17]. Böbrek yang eksikliği ve infertilite için böbrek yang reçetelerinin ısınmasının ve tonlanmasının etkinliği de yaygın olarak bildirilmiştir [18]. Bu deneyin sonuçları, canlandırıcı böbrek yang için geleneksel bir Çin tıbbı olan tüm dozlarda Cistanche Deserticola ekstraktlarının, testis ve epididimal organların adenin neden olduğu beyne oranındaki azalmayı önemli ölçüde hafifletebileceğini gösterdi; Sperm dinamiği parametre analizinin sonuçları, tüm dozlarda Cistanche Deserticola ekstraktlarının VCL ve VAP dahil olmak üzere sperm dinamiği parametrelerini önemli ölçüde artırabileceğini ve sperm motilitesini ve sperm konsantrasyonunu önemli ölçüde artırabileceğini gösterdi; Sperm floresanının sonuçları, Cistanche Deserticola ekstraktlarının, adenin neden olduğu sperm motilitesindeki azalmayı önemli ölçüde artırabileceğini gösterdi; HE boyamasının sonuçları, Cistanche Deserticola ekstraktlarının, adenin neden olduğu sperm deformitesini önemli ölçüde hafifletebileceğini ve adenin neden olduğu testisin ve epididimdeki morfolojik değişiklikleri hafifletebileceğini gösterdi; ELISA'nın sonuçları, Cistanche Deserticola ekstraktlarının, testis spermatogenezi için gerekli olan T serum seviyesini önemli ölçüde ayarladığını ve Cistanche Deserticola'nın düşük doz ekstraktlarının daha iyi sonuçlar gösterdiğini gösterdi. Yukarıdaki sonuçlar, Cistanche Deserticola ekstraktlarının, böbrek yang eksikliği olan sıçanların üreme hasarı üzerinde iyileştirici bir etkiye sahip olduğunu göstermektedir.

L-karnitin olarak da bilinen LC, insan vücudunda temel bir enerji metabolizması maddesidir. Genellikle erkek üreme sisteminde iki biçimde bulunur: serbest ve asetillenmiş. Yağ asitlerinin oksidasyonunu teşvik ederek epididimde spermin hareketi ve olgunlaşması için enerji sağlar ve erkek üreme sistemi hastalıklarının tedavisinde yaygın olarak kullanılmaktadır [19]. Çalışmalar, LC'nin glutaminin neden olduğu HPG ekseni bozukluğunu hafifletebileceğini, luteinize edici hormon ve folikül uyarıcı hormon seviyelerini düzenleyebileceğini ve sitokrom P450 ailesi 11Subfamily bir üye 1 (CYS11A1) gibi genlerin ekspresyon seviyelerini düzenleyerek T seviyesini arttırdığını göstermiştir (CYS11A1, tuşlar, steroidojenik regülatör protein vb. sentez [20]. Ek olarak LC, varikoselin neden olduğu testisteki aşırı reaktif oksijen türlerini uzaklaştırabilir, oksidatif stres hasarını azaltabilir ve böylece testis spermatogenezini geri yükleyebilir [21]. Bu deneyde LC pozitif bir kontrol olarak seçildi. Sonuçlar, LC'nin önceki araştırma sonuçlarıyla tutarlı olan adenin neden olduğu sıçanların üreme hasarını etkili bir şekilde hafifletebileceğini gösterdi; ve Cistanche Deserticola ekstresi, LC ile karşılaştırılabilir terapötik bir etki gösterdi.

Metabolomikler, vücuttaki küçük molekül metabolitlerini bir bütün olarak niteliksel ve nicel olarak analiz edebilir ve daha sonra fizyoloji, patoloji ve ilaç etkisi arasındaki karmaşık ilişkiyi karakterize edebilen çok boyutlu istatistiksel analiz için çoklu veritabanlarının bilgi entegrasyonunu birleştirebilir. LC-MS teknolojisine dayanarak, bu deney, normal grup, model grubu ve düşük doz cistanche Deserticola grubundaki sıçanların serum örnekleri üzerinde metabolomik analizi gerçekleştirerek, cistanche deserticola'nın metabolik mekanizmasını, böbrek yat eksikliği olan sıçanlarda adenin neden olduğu üreme hasarına müdahale etmeyi amaçlamıştır. Sonuçlar, toplam 22 ilişkili diferansiyel metabolit ve 3 metabolik yolun tarandığını gösterdi. Cistanche deserticola özü esas olarak 13- hpode, 20- karboksi-arachidonik asit (20- cooh-aa), lpc (o}}}}, {}}}}}: {13}}}}: {13}}}}: {13}}}}: {13}}}}: {13}}}}: {13}}}}: {13}}}} Lipid metabolizması, pantotenik asit ve koenzim A biyosentezi gibi yollar, böylece üreme koruyucu bir etki yaratır.

Lipidler sinyal iletimi, enerji üretimi ve hücre homeostazının korunmasında hayati bir rol oynar [24]. Lipid molekülleri yapılarına göre sekiz kategoriye ayrılabilir: yağ asitleri, gliserolipidler, fosfolipidler, sfingolipidler, steroller, alkol öncesi, glikolipidler ve poliketidler. Yağ asidi metabolizmasındaki bozukluklar anormal sperm kapasitasyonu [25] ve kronik böbrek hasarı [26] ile yakından ilişkilidir. 13- hpode ve 20- cooh-aa sırasıyla lipit peroksidasyon reaksiyonlarına katılan linoleik asit ve araşidonik asit metabolitleridir. Seviyeleri arttığında, vücudun oksidatif strese daha duyarlı olduğunu gösterir. Bu, reaktif oksijen türlerinin aşırı üretimine yol açabilir, bu da erkek üreme fonksiyonunun azalmasına yol açar [27]. LPC, insan kanındaki en bol miktarda lizogliserofosfolipittir ve testiküler hücrelerde oksidatif strese neden olabilir ve bu da üreme hasarına neden olabilir [28]. Bazı araştırmacılar, LPC (O -18: {{1 0}}/0: 0), peroksisomomomik proliferatörün ekspresyonunu aktive ederek, renal tüplerin ekspresyonunu aktive ederek, renal tübüllerin ekspresyonunu (pparΔ) indüklediğini bulmuşlardır. bozulma [29]. Cistanche deserticola ekstraktının, lipit peroksidasyon seviyelerini aşağı regüle ederek ve oksidatif stresi inhibe ederek böbrek yang eksikliği olan sıçanlarda üreme koruyucu bir rol oynayabileceğini düşündürmektedir. Pantotenik asit, testosteron sekresyonu ve sperm motilitesi üzerinde önemli bir etkiye sahiptir. Metabolit pantetini, enerji metabolizması ve yağ asidi metabolizmasının düzenlenmesine daha fazla katılan koenzim A'nın sentezi için hammaddedir [30]. Cistanche deserticola ekstresi, vücudun enerji metabolizmasını teşvik edebilir ve pantetin seviyesini ayarlayarak böbrek yang eksikliği olan sıçanların üreme sistemine oksidatif stres hasarını azaltabilir. Bu, Cistanche Deserticola ekstraktının, lipit metabolizmasını, pantotenik asit ve koenzim A'nın biyosentezini düzenleyerek antioksidan bir rol oynayabileceğini ve böylece böbrek yang eksikliği olan sıçanların üreme fonksiyonunu koruyabileceğini gösterir.
Ek olarak, Leydig hücreleri T üretiminin ana bölgesidir ve T öncü gebeenolon oluşumu Leydig hücrelerinde mitokondriyal fonksiyona bağlıdır. Çalışmalar, Leydig hücrelerinde reaktif oksijen türlerinin aşırı birikiminin T sentez bozuklukları ile ilişkili olduğunu göstermiştir. Aşırı reaktif oksijen türleri mitokondriyal hasarı indükler, bu da adenosin trifosfat (ATP) ve adenosin siklofosfat (CAMP) sentezinin inhibisyonu ile sonuçlanır, böylece T sentezine bağlı enzimlerin ekspresyonunu inhibe eder ve T seviyelerinde bir azalmaya yol açar [31]. Bu deneyin sonuçları, Cistanche Deserticola ekstraktının serum T seviyelerinde adenin kaynaklı azalmayı önemli ölçüde tersine çevirdiğini göstermiştir. Metabolomik analiz sonuçları literatürde bildirilenlere benzerdi, yani Cistanche Deserticola ekstraktı, Leydig hücre oksidatif hasarını hafifleterek T sentezini destekleyebilir.

Cistanche deserticola ekstraktının içerik belirlemesinin sonuçları, ekinakosid, verbascosid, salidrosid, betain ve cistancheside A'nın potansiyel aktif bileşenler olabileceğini göstermiştir. Önceki çalışmalar, ekinakosidin antioksidan enzimleri ve mitojenle aktive edilen protein kinaz (MAPK) sinyaline bağlı faktörleri aktive ederek testisleri oksidatif stres hasarından koruyabildiğini göstermiştir [32]; Salidrosit, oksidatif stresin neden olduğu kan testi bariyerinin hasarını karşılamak için vücudun antioksidan faktörlerini yukarı regüle edebilir, böylece spermatogenezi teşvik edebilir [33]; Verbascosid, hidrojen peroksit ile tedavi edilen TM3 hücrelerinin proliferasyon aktivitesini önemli ölçüde arttırabilir ve bunları kısmen oksidatif stres hasarından koruyabilir [34]; Betain, süperoksit dismutaz 1, glutatyon peroksidaz 1 ve katalaz dahil olmak üzere kurşun maruz kalan farelerin testisindeki antioksidan ilişkili genlerin ekspresyon seviyelerini yukarı regüle edebilir ve testiküler Johnson skorunu önemli ölçüde artırabilir [35]; Cistancheside A'nın hipoksi ile indüklenen spermatogoni ve hücre apoptozunu azalttığı reaktif oksijen türlerinin anormal artışını azalttığı bildirilmiştir [36]. Bütün bunlar, ekinakosid, verbascosid, salidrosid, betain ve cistancheside A'nın, Cistanche'nin adenin tarafından indüklenen sıçanlarda böbrek yang eksikliği semptomlarını hafifletmesi için önemli bir malzeme olabileceğini düşündürmektedir. Özetle, Cistanche özütü, adenin tarafından indüklenen sıçanlarda böbrek yang eksikliği semptomlarını ve testis ve epididimin patolojik hasarını hafifletebilir, hasarlı HPG ekseni fonksiyonunu geri yükleyebilir, azaltılmış sperm kalitesini iyileştirebilir ve böylece böbrek Yang eksikliği olan sıçanların üreme fonksiyonunu iyileştirebilir; Etki mekanizması, lipit metabolizmasının düzenlenmesi, pantotenik asit ve koenzim A, vb. Biyosentezi ile ilişkili olabilir. Ekinakozit, verbaskosid, betain ve cistancheside A, daha fazla deneysel doğrulama gerektiren olası potansiyel biyoaktif materyal temelidir.