Kemik Mezenkimal Kök Hücrelerinin (BMSC'lerin) Cistanche Deserticola İçeren Serum Tarafından Yönlendirilen Osteoblastlara Yönlü Farklılaşmasının Deneysel Çalışması

ZENG Jian chun, FAN Yue guang＊, LIU Jian ren, ZENG Yi rong, YI Chun zhi, YAN Liang． ＊

Guangzhou Geleneksel Çin Tıbbı Üniversitesinin İlk Bağlı Hastanesi, Guangzhou 510405, Guangdong, Çin

İletişim:joanna.jia@wecistanche.com/ WhatsApp: 008618081934791

cistancheönleyebilirosteoporozveterfikemikhücre büyüme

ÖZ

Amaç: Desertliving tarafından yönlendirilen BMSC'lerin yönlü farklılaşmasını incelemekcistanche（Böbreği canlandıran Herba Cistanches） Yöntemler: Birincil BMSC'ler, tam kemik iliği kültürü ile elde edildi ve tripsin sindirimi ile dördüncü nesle alt kültürlendi ve daha sonra mililitrede 5x106 hücrede iki altı oyuklu plakaya aşılandı, tüm plakalar bölündü. boş grup olarak üç grup, Deksametazon （DXM） grubu ve Herba Cistanches grubu, her grupta üç kuyucuk, ortam 2. günde değiştirildi． Boş grup, 10％ FBS． içeren L－DMEM ile değiştirildi. DXM grubu, 10 mmol ／ L sodyum gliserofosfat, 0．1 μmol ／ L DXM ve 50 mg ／ L vitamin C． içeren bir ortam ile değiştirildi. bitkiCistanchesgrubu, Herba Cistanches ve L－DMEM． içeren 10％ kan serumu içeren bir ortam ile değiştirildi. Altı kuyulu plakalardan biri onuncu günde alkalin fosfataz （AKP） ile boyandı, diğeri ise yirminci günde alizarin Bordeaux ile boyandı． Bulgular: Onuncu günde DXM grubu ve Herba Cistanches grubu ALKP boyanmış pozitifti; 12. günden itibaren kuyuların yüzeyinde beyaz kalsiyum nodusu görüldü; hangi alizarin yirminci güne kadar pozitif boyandı?

Sonuç: Herba içeren ortamCistanchesBMSC'lerin osteoporoz ve kemik kırığı disunion tedavisi için olumlu bir olasılık vaat eden osteoblasta farklılaşmasına rehberlik edebilir．

ANAHTAR KELİMELERcistancheçöl çiçeği; Kemik iliği; Mezenkimal kök hücreler; osteoblastlar; Hücre farklılaşması

Mezenkimal kök hücreler (MSC'ler), esas olarak kemik iliğinde bulunan bir tür pluripotent yetişkin kök hücredir, aynı zamanda embriyonik dönemde mezenkimal orijinli deri fibroblastları, adipoz kök hücreler, iskelet kası uydu hücreleri gibi ekstraosseöz dokularda bulunur. kan damarları Endotel hücreleri vb. Kemik iliği MSC'leri (BM SC'ler), kemik iliği stromasının bileşenleridir. İn vitro izole edildikten ve kültürlendikten sonra, belirli indükleyici koşullar altında, osteoblastlara, kondrositlere, sinir hücrelerine, adipositlere, kardiyomiyositlere, vb. farklılaşma yeteneğine sahiptirler. Kemik dokusu mühendisliğinde tohum hücrelerinin ana kaynakları osteoblastlar ve BMSC'lerdir. Osteoblastlar iyi osteojenik aktiviteye sahip olmalarına rağmen, sınırlı kaynaklara sahiptirler, ayrılması ve büyük miktarlarda elde edilmesi zordur ve kemik dokusu mühendisliğindeki klinik uygulamaların ihtiyaçlarını karşılaması zor olan in vitro büyük ölçekli genişleme için yetersiz potansiyele sahiptirler. BMSC'ler sadece iyi osteoblast farklılaşma potansiyeline sahip olmakla kalmaz, aynı zamanda yüksek büyüme potansiyeline de sahiptir. Kemik aktivitesi, güçlü çoğalma potansiyeli ve uygun kaynak, otolog doku mühendisliğini tatmin edebilir ve araştırmaların odağı haline gelebilir.

Çin tıbbı, böbreğin kemikleri kontrol ettiğine ve ilik ürettiğine inanır. Modern farmakolojik çalışmalar, böbrek tonlandırıcı ilaçların hipofiz-adrenal-gonadal sisteme değişen derecelerde uyarıldığını ve kemik metabolizması ile yakından ilişkili olduğunu göstermiştir. Östrojen, osteogenezi arttırma etkisine sahiptir.

Çin tıbbı, böbreğin kemikleri kontrol ettiğine ve ilik ürettiğine inanır. Modern farmakolojik çalışmalar, böbrek tonlandırıcı ilaçların hipofiz-adrenal-gonadal sisteme değişen derecelerde uyarıldığını ve kemik metabolizması ile yakından ilişkili olduğunu göstermiştir. Östrojen kemik oluşumunu artırabilir ve androjen protein sentezini teşvik edebilir, kemik matrisi artışını ve kalsiyum ve fosfor birikimini teşvik edebilir. Efekt.Cistanches(bitkiCistanches) fenetil alkol toplam glikozitleri, ergot glikozitleri ve betain içerir, hepsi androjen benzeri etkilere sahiptir. Bu deney, böbrekleri güçlendiren geleneksel Çin tıbbının etkisini incelemeyi amaçlıyor.cistanche- BMSC'lerin osteoblastlara farklılaşması üzerine serum içeren.

Tartışma

cistancheilaçlı serum BMSC'leri indükler. Cistanche, ortayı besleme, karaciğeri canlandırma, böbreği besleme, yang'ı güçlendirme, bağırsakları nemlendirme ve müshil etkilerine sahiptir. Modern farmakolojik çalışmalar, böbrek tonlandırıcı ilaçların hipofiz-adrenal-gonadal sisteme değişen derecelerde uyarıldığını ve kemik metabolizması ile yakından ilişkili olduğunu göstermiştir. Östrojen kemik oluşumunu artırabilir ve androjen protein sentezini teşvik edebilir, kemik matrisi artışını ve kalsiyum ve fosfor birikimini teşvik edebilir. Rol [1]. Cistanche'deki toplam feniletanoid glikozitler, ergosterosid ve betain androjen benzeri etkilere sahiptir. Bu deney, ilaçlı serumuncistancheBMSC'lerin osteoblastlara farklılaşmasına neden olabilir. BMSC'lerin osteoblastlara farklılaşmasını indüklemek için tek Çin tıbbı veya bileşik Çin tıbbı kullanılmasına rağmen, spesifik moleküler mekanizma henüz bildirilmemiştir. Proteomik araştırmaları, bu süreçte ilgili proteomiklerdeki farklılıkları analiz edebilir ve böbrek yöneten kemik teorisinin yeni bir yorumuyla fonksiyonel proteomik oluşturabilir.

Hücre yoğunluğu, BMSC'lerin osteoblastlara farklılaşma sürecinde önemli bir rol oynar. Kemik nodüllerinin oluşumu sadece osteoindüktif ajanlar gerektirmekle kalmaz, aynı zamanda aşılanmış hücrelerin yoğunluğuna da bağlıdır. Hücre yoğunluğu belirli bir yoğunluğa ulaşmalıdır ve hücreler birleşebilir. Osteoblast farklılaşması. Bu deneyde, 4. nesil hücreler yüzde 90'dan fazla birleşecek şekilde çoğaldığında, kültür için indükleyici eklenir. Hücre yoğunluğu çok düşük olduğunda hücreler yavaş çoğalır ve kümeleşme ve büyüme eğilimi olmaz. Eşit olmayan hücre yoğunluğuna sahip aynı kültür kuyusunda, hücre yoğun alanı belirsiz hücre sınırlarına ve bulanık bir yapıya sahiptir ve hücreler kümeler halinde toplanır. AKP boyaması ve alizarin kırmızısı boyaması pozitiftir ancak hücre yoğunluğu düşük olan bölgede hücre yoğunluğu yoktur. Hücreler kümeler halinde toplandı ve AKP boyaması ve Alizarin Kırmızısı boyaması negatifti. Bu nedenle, daha fazla hücre elde etmek için üç boyutlu kültür (RCCS) gibi daha etkili in vitro kültür yöntemleri ile birlikte kemik doku mühendisliğinde mikro taşıyıcıların kullanılması, hücre transplantasyonunun başarısı üzerinde önemli bir etkiye sahiptir.

klinik önemicistancheBMSC'leri uyarmak için ilaçlı serum Kemik dokusu mühendisliğinin geniş klinik uygulama beklentileri vardır ve modern ortopedide bir araştırma noktası haline gelmiştir. BMSC'ler şu anda kemik dokusu mühendisliği için en ideal tohum hücreleridir. Etkileri üzerine araştırmaların temel görevi, onları mümkün olan en basit koşullarda osteoblastlara nasıl farklılaştıracakları ve daha sonra onları olgun kemik hücrelerine nasıl dönüştürecekleridir.

Şu anda, BMSC'lerin yönlendirilmiş farklılaşması için yaygın olarak kullanılan indükleyiciler, deksametazon, C vitamini ve sodyum-gliserofosfattan oluşur. İn vitro kültür, deksametazon hücre proliferasyonu üzerinde inhibitör etkiye sahiptir [2], bu deneyde görüldüğü gibi, klinik olarak deksametazon, BMSC'lerin transplantasyonunu sınırlayacak enfeksiyon, osteonekroz ve osteoporoz gibi advers reaksiyonlara sahiptir. Uygulama sonrası vücutta indükleyici olarak. Cistanche, böbreği canlandırma ve kemikleri ve kasları güçlendirme etkilerine sahiptir. Bu deney, Cistanche'nin BMSC'lerin çoğalmasını teşvik etme ve BMSC'lerin osteojenik olarak farklılaşmasını indükleme etkisine sahip olduğunu buldu. Uzun süreli klinik uygulamada, Cistanche'nin herhangi bir olumsuz reaksiyonu görülmemiştir ve in vivo olarak indükleyici olarak kullanımı, geniş klinik uygulama beklentilerine sahiptir.

Kısacası, kemik dokusu mühendisliği için tohum hücreleri olarak BMSC'ler üzerine mevcut araştırmaların çoğu hala deneysel aşamadadır. Nispeten kısa bir süre içinde yeterli BMSC'nin nasıl elde edileceği ve osteojenik olarak farklılaşmalarını sağlamak için basit yöntemlerin nasıl kullanılacağı, mevcut araştırmaların odak noktasıdır. BMSC'lerin osteojenik farklılaşmasını indüklemede böbreği canlandırma ve kemikleri ve kasları güçlendirme işlevine sahip olan Cistanche cistanche'ın mekanizması daha fazla çalışılmaya devam etse de, gecikmeli kaynama, kaynamama tedavisi için BMSC'lerin farklılaşma indükleyicisi olarak kullanımı ve MSC transplantasyonu ile kırıkların osteonekrozu parlak bir geleceğe sahiptir.

cistancheönleyebilirosteoporozve terfikemik hücresibüyüme