Oruç ve Aşırı Besleme, Kanatlı Hayvanların Karaciğerindeki Bağışıklık veya İltihapla İlgili Genlerin Endojen Retrovirüs Yoluyla Ekspresyonuna Etki Ediyor

SOYUT

Beslenme ve bağışıklığın bağlantılı olduğu biliniyor ancak mekanizması çok net değil. Endojen retrovirüsler (ERV), insan ve fare genomlarının %8 ila 10'unu oluşturur ve hayvanların bazı biyolojik süreçlerinde önemli bir rol oynar. Son çalışmalar, ERV aktivasyonunun, bağışıklık veya inflamasyonla ilişkili genlerin ekspresyonunu etkileyebileceğini ve ERV aktivitelerinin, beslenme faktörleri de dahil olmak üzere birçok faktörün düzenlenmesine tabi olduğunu göstermektedir. Bu nedenle beslenme durumunun, ERV yoluyla bağışıklık veya inflamasyonla ilişkili genlerin ekspresyonunu etkileyebileceğini varsayıyoruz. Bu hipotezi doğrulamak için hayvanların beslenme durumu, açlık veya aşırı beslenme nedeniyle değiştirildi ve karaciğerde bozulmamış ERV (ERVK18P, ERVK25P) ve bağışıklık veya iltihaplanma ile ilgili genlerin (DDX41, IFIH1, IFNG, IRF7, STAT3) ifadesi değiştirildi. kantitatif PCR ile belirlendi, ardından kaz primer hepatositlerinde ERVK25P'nin aşırı ekspresyonu yapıldı ve bağışıklık veya iltihaplanma ile ilgili genlerin ekspresyonu belirlendi. Veriler, kontrol grubuyla (açlık olmayan) karşılaştırıldığında, aç bırakılmış tavukların karaciğerinde ERV ve bağışıklık veya iltihaplanma ile ilişkili genlerin ekspresyonunun arttığını, ancak aç kazların karaciğerinde azaldığını gösterdi. Ayrıca, kontrol grubuyla (düzenli olarak beslenen) karşılaştırıldığında, aşırı beslenen kazların karaciğerinde ERV ekspresyonu ve bağışıklık veya iltihaplanma ile ilgili genlerin arttığı görüldü. Ek olarak, kaz primer hepatositlerinde ERVK25P'nin aşırı ekspresyonu, bağışıklık veya inflamasyonla ilişkili genlerin ekspresyonunu indükleyebilir. Sonuç olarak, bu bulgular, ERV'nin, açlık ve aşırı beslenmenin bağışıklık veya iltihaplanma ile ilgili genlerin ekspresyonu üzerindeki etkilerine aracılık ettiğini, bu aracılığın kümes hayvanı türlerine göre değiştiğini ve ERV ile bağışıklık veya iltihaplanma ile ilgili genlerin rol oynayabileceğini göstermektedir. kaz yağlı karaciğerinin gelişimi. Bu çalışma beslenme ve bağışıklık arasındaki bağlantı için potansiyel bir mekanizma sunmaktadır.

Cistanche Deserticola ma-Karaciğer bakımı

Anahtar Kelimeler: beslenme, bağışıklık, kümes hayvanları, yağlı karaciğer, endojen retrovirüs

GİRİİŞ

Endojen retrovirüsler (ERV), eksojen retrovirüslerin (provirüsler) kalıntıları olarak kabul edilir. Geriye kalan bu 'fosil' dizilerin çoğu, konakçı genomlarına entegrasyonlarından bu yana uzun vadeli evrim sürecinde birikmiş çeşitli mutasyonlar içerir (Cañadas ve diğerleri, 2018). Neredeyse tüm memeli hayvanlarda (insanlar, fareler, kediler ve koyunlar gibi) ve diğer omurgalılarda (tavuklar gibi) bulunurlar (Melanie ve Nair, 2014; Xu ve diğerleri, 2014). Tavukta ERV, tavuk genomunun %3'ünden fazlasını oluşturur (Huda ve ark., 2008). ERV'ler hayvan genomlarında bol miktarda bulunmasına rağmen çoğu ERV sağlam değildir. Sağlam ERV, yapıları ekzojen retrovirüslerden kolaylıkla ayırt edilemeyenleri ifade eder. Bu ERV'ler genellikle transkripsiyonel düzenleme için öğeler içeren 2 uzun terminal tekrarı (LTR), viral proteinlerin kodlama dizileri (gruba özgü antijen [Gag], ters transkriptaz [Pol] ve zarf proteini [Env]), polipurin iz dizisi içerir. ve konakçı hücrelerinin kısa yan genomik dizileri (Jern ve Coffin, 2008; Dolei ve diğerleri, 2015; K€ury ve diğerleri, 2018). Şu ana kadar tavuk genomunda yaklaşık 500 nispeten sağlam ERV bulunmuştur (Bolisetty ve diğerleri, 2012). Nispeten sağlam ERV'ye ek olarak, kendi kendini kopyalama için gerekli bir veya daha fazla kodlama geninden (genellikle Env geni) yoksun 'ince' ERV ve 'solo LTR' ERV dahil olmak üzere başka ERV türleri de vardır. 'Yalnız LTR' ERV'lerin sayısı, nispeten sağlam ERV'lerin sayısının yaklaşık 60 katıdır (Bolisetty ve diğerleri, 2012). Filogenetik analiz, kuş proretrovirüslerinin (yani ERV), sınıf I (gama benzeri), sınıf II (alfa ve beta benzeri) ve sınıf III (uzak spuma benzeri) proretrovirüsler halinde sınıflandırılabileceğini göstermektedir. Alfa benzeri proretrovirüslerin sayısı, beta benzeri, gama benzeri ve alfabe proretrovirüslerinin sayısından fazladır (Bolisetty ve diğerleri, 2012). Memeli proretrovirüsleriyle karşılaştırıldığında kuş proretrovirüsleri daha heterojendir. Beta benzeri pro retrovirüsler, beta retroviral belirteçlerin kademeli olarak kaybıyla birlikte beta benzeri pro retrovirüslerden alfabe benzeri pro retrovirüslere ve ardından alfa benzeri pro retrovirüslere evrimsel bir geçiş geçirmiştir. Alfabe proretrovirüsleri, daha önce tanınan bazı kuş proretrovirüsleri de dahil olmak üzere, alfa benzeri ve beta benzeri olanlar arasındaki ara maddedir. Sınıf III pro retrovirüsler en eskileri gibi görünür, bunu beta benzeri ve gama benzeri pro retrovirüsler takip eder, alfabe ve alfa benzeri pro retrovirüsler ise en gençleri gibi görünür. Çoğu proretrovirüs, duyu yöneliminde konakçı genlere entegre edilir (Bolisetty ve diğerleri, 2012).

Cistanche tubulosa'nın faydaları-Karaciğer bakımı

LTR olmayan transpozonlar gibi (örneğin, uzun veya kısa serpiştirilmiş nükleer elementler), ERV'ler, kendilerini konakçı genomunda bir konumdan diğerine DNA dizileri formunda aktarabilen mobil elementlerdir. Bu transpozisyona RNA ara maddesi aracılık eder. Her ne kadar retrotranspozonlar olarak ERV, evrimin erken aşamasında güçlü transpozon yeteneğine sahip olsa da, çoğu artık bu yeteneğini kaybetmiştir (Jern ve Coffin, 2008). Dahası, derin sıralama çalışmaları birçok ERV'nin genel olarak sessiz olduğunu göstermektedir. Örneğin, ERV'nin yalnızca %20'si tavuk embriyosu fibroblastlarında kopyalanır ve bunların bir alt kümesi de in vivo olarak kopyalanır (Bolisetty ve diğerleri, 2012). Ayrıca son çalışmalar bazı sessiz ERV'lerin belirli koşullar altında aktive edilip eksprese edilebildiğini (Crichton ve ark., 2014) ve ekspresyonlarının hücre tipi veya doku tipi (özellikle plasenta ve germ hücreleri) gibi birçok faktörden etkilendiğini göstermektedir. , hücre farklılaşması ve yaşlanma süreci, sitokinler, hücrelerin normal fonksiyonunu bozan faktörler ve beslenme faktörleridir (Taruscio ve Mantovani, 2004; Denner, 2016; Elaheh ve ark., 2018). Son yıllarda, ERV'nin biyolojik fonksiyonları yavaş yavaş ortaya çıkarılmıştır: 1) ERV'nin transpozisyonu, konakçı genomlarını istikrarsızlaştırabilir, ancak orijinal bir genetik materyal olarak ERV, konakçı hayvanların türler arasındaki ve içindeki çeşitliliği artırmasına, çevreye uyum sağlama yeteneğini artırmasına ve sürekliliği sürdürmesine olanak tanır. evrim (Zhang ve diğerleri, 2008); 2) ERV'nin LTR bölgelerindeki destekleyiciler ve güçlendiriciler, bitişik genlerin transkripsiyonunu etkileyebilir ve bitişik bölgelerin epigenetik durumunu değiştirebilir (DNA metilasyonu ve histon modifikasyonu gibi) (Thompson ve diğerleri, 2016); 3) ERV, Env proteinlerini konakçı reseptörlere bağlayarak, eksojen virüslerin aynı reseptörlere bağlanmasını bloke edebilir, böylece konakçı hücrelere eksojen virüslere direnme yeteneği kazandırabilir (Nadeau ve diğerleri, 2015); 4) ERV transkriptleri, doğuştan gelen bağışıklık sistemini aktive edebilir ve çift sarmallı RNA'ya bağımlı TLR3/MDA5 sinyal yolu yoluyla IFN gibi sitokinlerin üretimini indükleyebilir, böylece tümörleri inhibe edebilir (Chiappinelli ve diğerleri, 2015); ve 5) ERV ayrıca yaşlanma, otoimmünite ve dejeneratif nörolojik hastalıklar gibi bazı hastalıkların ortaya çıkmasında ve gelişmesinde de rol oynar (Mager ve Stoye, 2015; Nadeau ve diğerleri, 2015).

Endojen retrovirüs grubu K (ERVK), farklı ERV grupları (ERVW, ERVH, ERVK vb.) arasında en son endojenize olanıdır. Fonksiyonel proteinler için kodlama dizisini içerir, dolayısıyla en sağlam ve biyolojik olarak aktif ERV grubu olarak kabul edilir (Hohn ve diğerleri, 2013). ERVK'nin yukarı regüle edilmiş ifadesi, inflamatuar hastalık, nörolojik hastalık, otoimmün hastalık vb. ile ilişkilendirilmiştir (Haraguchi ve diğerleri, 1992; Tolosa ve diğerleri, 2012). Son çalışmalar, DNA metiltransferaz inhibitörü 5-aza-2-deoksisitidin tarafından ERVK aktivasyonunun hücresel doğuştan gelen bağışıklığı artırabildiğini göstermektedir (Nogues ve diğerleri, 2018). Çok sayıda üyeye sahip insan ERVK ile karşılaştırıldığında, kuş ERVK'nin GenBank'ta yalnızca birkaç üyesi bulunmaktadır. Tavuk ve kaz tarafından paylaşılan açıklamalı ERVK üyeleri yalnızca ERVK18P (LOC106029425) ve ERVK25P'dir (LOC106046236). Şu anda kanatlı ERVK'nin biyolojik veya patolojik rolü bilinmemektedir. Beslenme ve enerji durumları hayvanın büyümesini, üremesini ve bağışıklığını etkileyen önemli faktörlerdir. Daha önce de belirtildiği gibi, beslenme faktörleri ERV'nin ekspresyonunu aktive edebilir ve ERV, bağışıklık veya inflamasyonla ilişkili genlerin ekspresyonunu birçok yolla düzenleyebilir. Bu nedenle, beslenme veya enerji seviyesinin, bağışıklık veya iltihaplanma ile ilgili genlerin ERV yoluyla ifadesini etkileyebileceğini düşünüyoruz. Bu spekülasyonu doğrulamak için, deney tavuklarında veya kazlarında açlık veya aşırı beslenme nedeniyle beslenme durumu değiştirildi ve daha sonra karaciğerde ERV ve bağışıklık veya iltihaplanma ile ilgili genlerin ekspresyonu belirlendi. Ek olarak, ERV ile bağışıklık (veya iltihaplanma) ile ilgili genler arasındaki ilişkiyi ele almak için kaz primer hepatositlerinde ERVK25P'nin aşırı ekspresyonu da gerçekleştirildi. Bu çalışma, beslenme ve bağışıklık arasındaki bağlantının mekanizmasına yeni bir bakış açısı sağlıyor.

cistanche tubulosa-bağışıklık sistemini iyileştirir

Cistanche Enhance Immunity ürünlerini görüntülemek için buraya tıklayın

【Daha fazlasını isteyin】 E-posta:cindy.xue@wecistanche.com / Whats App: 0086 18599088692 / Wechat: 18599088692

MALZEMELER VE YÖNTEMLER

Deney Hayvanları

Tüm hayvan protokolleri, tarım hayvanlarının araştırmada kullanımına ilişkin kurumsal yönergelere uygundu ve Çin'deki Yangzhou Üniversitesi Hayvan Bakım ve Kullanım Komitesi tarafından onaylandı.

Aynı kuluçka grubundan Jurong Siji kazları, Mali Deney Çiftliğinde (Jurong, Jiangsu, Çin) doğal ışıklandırma ve geleneksel hayvancılık yönetimi altında yerde yetiştirildi. 70 günlük yaşta, 16 sağlıklı kaz rastgele 2 gruba ayrıldı: oruç tutan grup (kazlar 24 saat boyunca aç bırakıldı ve suya serbest erişim sağlandı) ve kontrol grubu (aç kalmadı, yem ve suya isteğe bağlı erişim sağlandı). 24 saatlik açlıktan sonra tüm deney bireyleri feda edildi ve karaciğer numuneleri toplandı, sıvı nitrojen içinde anında donduruldu ve depolama için 270°C'de aktarıldı. Benzer şekilde, on altı 20-haftalık sağlıklı Rhode Island Red tavuğu, bir oruç deneyi için kurban edildi. Oruç tutmanın aksine, on altı 70- günlük sağlıklı Landes kazları (Licheng Animal and Poultry Co., Ltd., Huaian, Jiangsu, Çin tarafından sağlanmıştır) rastgele ve eşit şekilde aşırı beslenenlere (24 günlük aşırı beslenme) bölündü. ve kontrol grubu (rutin olarak beslenen). Aşırı besleme protokolü daha önce Geng ve diğerleri, 2016a tarafından açıklanmıştır. Aşırı beslemenin 24. gününde hem kontrol hem de aşırı besleme gruplarından karaciğer örnekleri toplandı ve 270 C'de saklandı.

Kaz Primer Hepatositlerinin İzolasyonu ve Kültürü ve ERV'nin Aşırı Ekspresyonu

Kaz birincil hepatositleri, daha önce Osman ve diğerleri, 2016 tarafından açıklandığı gibi kuluçkalanmanın 22. veya 23. gününde kaz embriyolarından izole edildi ve kültürlendi. Kaz LOC106046236 geninin (veya ERVK üyesi 25 Pol protein benzeri, ERVK25P) özelleştirilmiş aşırı ekspresyon vektörü ) ve boş vektör, Suzhou Jima Gene Co., Ltd.'den (Suzhou, Çin) satın alındı. Aşırı ekspresyon vektörü, bir CMV promoteri ve ERVK25 polimeraz geninin kodlama dizisi olan eklenen DNA fragmanını içeren bir pcDNA3.1 vektörü kullanılarak oluşturuldu. Aşırı ekspresyon vektörü ve boş vektör, izole edilmiş ve 24 saat boyunca Lipofectamine 2000 (cat# 11,668-019, Invitrogen, Co., Ltd., Camarillo) ile kültürlenmiş kaz birincil hepatositlerine ayrı ayrı transfekte edildi. 32 saatlik transfeksiyondan sonra hücreler, kantitatif floresans PCR ile gen ekspresyonu analizi için toplandı. Transfeksiyon daha önce Geng ve diğerleri, 2013 tarafından tarif edildiği gibi gerçekleştirildi.

RNA Saflaştırma ve cDNA Sentezi

Toplam RNA, TRIzol kiti (kat# DP424; Tiangen Biotech (Beijing) Co., Ltd., Pekin, Çin) kullanılarak karaciğer örneklerinden izole edildi. Saflaştırılmış RNA örnekleri, HiS criptTM Q RTSuperMix ters transkripsiyon kiti (cat# R123-01; Vazyme Biotech Co., Ltd., Nanjing, Çin) kullanılarak cDNA'ya ters kopyalandı. Üreticinin talimatlarına göre ters transkripsiyon gerçekleştirildi.

Cistanche tubulosa'nın faydaları-Karaciğer bakımı

Kantitatif PCR Analizi

GenBank'taki her bir genin referans dizisine, ilgilenilen genlere ve dahili referans genine yönelik kantitatif PCR primerleri temel alınarak, GAPDH, çevrimiçi Primer 3.0 yazılımı (Whitehead Biyomedikal Araştırma Enstitüsü, Cambridge) kullanılarak tasarlandı ve dizi özgüllüğü NCBI web sitesindeki Primer-BLAST programı (Ulusal Biyoteknoloji Bilgi Merkezi, Bethesda) kullanılarak doğrulandı. Primer dizileri Tablo 1'de listelenmiştir. Üreticinin talimatlarına göre, Vazyme AceQ qPCR SYBR Green Master Mix kiti (cat# Q111-02/03; Vazyme Biotech Co., Ltd., Nanjing,) kullanılarak kantitatif PCR gerçekleştirildi. Çin) ve cDNA örnekleri. İlgili genlerin göreceli ifadesi, daha önce Geng ve diğerleri, 2016b tarafından tarif edildiği gibi 22OOCT yöntemi kullanılarak hesaplandı.

İmmünoblotlama Analizi

Karaciğer dokusu örnekleri, 50 mmol Tris, pH 7,5, 120 mmol NaCl, 1 mmol EDTA, 15 mmol Na4P2O7, 20 mmol NaF, %1 Nonidet içeren bir tampon içinde parçalandı. , 0,1% fenilmetil sülforür ve proteaz inhibitörleri (0,08 mmol aprotinin, 0,02 mmol löpeptin, 0,04 mmol bestatin ve 15 mmol pepstatin). Her bir lizattaki protein içeriği, üreticinin talimatlarına göre Bio-Rad RC DC protein tahlil kiti (kat no. 500-0119; Bio-Rad, Hercules) kullanılarak belirlendi. Doku lizatlarından gelen proteinler (10 mg) SDS PAGE ile ayrıldı ve daha sonra nitroselüloz membranlara aktarıldı; bunlar, %0.1 Tween 20 içeren PBS içindeki %5 süt içerisinde gece boyunca inkübe edildi. Zarlar daha sonra birincil antikorla gece boyunca 4°C'de inkübe edildi. Bu çalışmada 1:1000 seyreltmede aşağıdaki antikorlar kullanıldı: anti-STAT3 (kat no. bs- 1141R; Beijing Biosynthesis Bioteknoloji Co., Ltd., Pekin, Çin), anti-IFIH1 (kat no. bs-18740R; Beijing Biosynthesis Bioteknoloji Co., Ltd., Pekin, Çin), anti-aktin (kat no. bsm-33036M; Beijing Biosynthesis Bioteknoloji Co., Ltd., Pekin, Çin) ve GAPDH karşıtı (kat no. NB300-221; Novus Biologicals Co., Ltd., CO). Yaban turpu peroksidazı ile konjuge edilmiş ikincil antikorlar 1:10.000 seyreltmede kullanıldı. Proteinler, geliştirilmiş kemilüminesans ve Western blot tespit sistemi (Amersham Biosciences, Pekin, Çin) ile tespit edildi.

İstatistiksel analiz

Tedavi ve kontrol grupları arasındaki gen ifadesindeki farkın istatistiksel anlamlılığını analiz etmek için Öğrenci t-testi kullanıldı ve istatistiksel anlamlılık kriteri olarak P,0.05 belirlendi. Tüm veriler ortalama 6 SEM olarak sunulmuştur.

SONUÇLAR

Oruç, Kaz Karaciğerinde ERV ve Bağışıklıkla İlgili Genlerin İfadesini Baskıladı

Kaz ERV genleri (ERVK18P veya LOC1{{10}}6029425, ERVK25P veya LOC106046236) için kantitatif PCR primerleri, GenBank'taki referans dizilerine dayanarak tasarlandı. Kantitatif PCR analizi, kaz karaciğerindeki ERVK18P ekspresyon seviyesinin ERVK25P'ye benzer olduğunu gösterdi (Şekil 1A). Kontrol grubuyla (açlık yok) karşılaştırıldığında, ERVK18P ve ERVK25P'nin ekspresyonu, 24 saat boyunca aç bırakılan kazların karaciğerinde önemli ölçüde inhibe edildi (P, 0,05 veya 0,01) (Şekil 1B). Buna göre, bağışıklık veya iltihaplanma ile ilgili genlerin (DDX41, IFIH1, IFNG, IRF7, STAT3) mRNA ekspresyonu da inhibe edildi; aç ve kontrol kazları arasındaki DDX41 ve IFNG mRNA ekspresyonundaki fark istatistiksel olarak anlamlı bir seviyeye ulaştı. (P, 0,05) (Şekil 1B). İmmünoblotlama analizi, aç kazların karaciğerindeki IFIH1 protein seviyesinin kontrol kazlarınınkinden daha düşük göründüğünü gösterdi (Ek Şekil 1).

Tablo 1. Kantitatif PCR için primer dizilerinin listesi.

Oruç, Tavuk Karaciğerinde ERV ve Bağışıklıkla İlgili Genlerin Ekspresyonunu İndükledi

Kantitatif PCR analizi, kontrol grubuyla (açlık yok) karşılaştırıldığında, tavuk karaciğerinde ERVK18P ve ERVK25P'nin açlık kaynaklı mRNA ekspresyonunun ve indüksiyonun istatistiksel olarak anlamlı bir düzeye ulaştığını gösterdi (P, 0.{{5} }5 veya 0.01) (Şekil 2). Benzer şekilde oruç tutmak, bu bağışıklık veya iltihaplanma ile ilişkili genlerin mRNA ekspresyonunu da indükledi; gruplar arasında IFIH1, IFNG, IRF7 ve STAT3'ün mRNA ekspresyonundaki fark istatistiksel olarak anlamlı bir seviyeye ulaştı (P, 0,05 veya 0,01) (Şekil 2) ). İmmünoblotlama analizi, aç kazların karaciğerindeki IFIH1'in protein seviyesinin kontrol kazlarınınkinden daha yüksek göründüğünü gösterdi (Ek Şekil 1).

Aşırı Besleme, Kaz Karaciğerinde ERV ve Bağışıklıkla İlgili Genlerin Ekspresyonunu İndükledi

Kantitatif PCR analizi, kontrol grubuyla (rutin olarak beslenen) karşılaştırıldığında, 24 gün boyunca aşırı beslenen kazların karaciğerinde ERVK18P ve ERVK25 P'nin mRNA ekspresyonunun arttığını, kontrol ve aşırı beslenen kazlar arasındaki ERVK18P'nin mRNA ekspresyonundaki farkın ise arttığını gösterdi. istatistiksel olarak anlamlı bir seviyeye (P, 0.05) (Şekil 3). Buna göre, aşırı beslenen kazların karaciğerlerindeki bağışıklık veya iltihaplanma ile ilgili genlerin mRNA ekspresyonu da arttı; kontrol ve aşırı beslenen kazlar arasındaki IRF7'nin mRNA ekspresyonundaki fark istatistiksel olarak anlamlı bir seviyeye ulaştı (P, 0.05) (P, 0.05) ( Figür 3). İmmünoblotlama analizi, aşırı beslenen kazların karaciğerindeki IFIH1 protein seviyesinin kontrol kazlarınınkinden daha yüksek göründüğünü gösterdi (Ek Şekil 1).

Şekil 1. Kaz karaciğerinde ERV ve bağışıklıkla ilgili genlerin ekspresyonu açlıkla inhibe edildi. ERV ve bağışıklıkla ilgili genlerin nispi ifadesi, kantitatif PCR ile belirlendi. (A) Normal yetişkin kazın karaciğerinde ERVK18P ve ERVK25P'nin ifadesi. (B) Aç kazların karaciğerlerinde ERVK18P, ERVK25P, DDX41, IFIH1, IFNG, IRF7 ve STAT3'ün ifadesi, kontrole (açlık yok) göre kat değişimi olarak sunulur, n 5 6. *,** sırasıyla P, 0.05, 0,01 ve kontrole karşılık gelir. Tüm veriler ortalama 6 SEM olarak gösterilmiştir. Kısaltma: ERV, endojen retrovirüs.

Endojen Retrovirüs Aşırı Ekspresyonu, Bağışıklıkla İlgili Genlerin Ekspresyonunu İndükledi

Kaz primer hepatositlerinin boş vektörlerle veya kaz ERVK25P'nin Pol geninin kodlama dizisini içeren aşırı ekspresyon vektörleriyle 32 saatlik transfeksiyonundan sonra, aşırı ekspresyon vektörleriyle transfekte edilmiş hücrelerde Pol geninin mRNA ekspresyonu, bundan yaklaşık 97 kat daha fazlaydı. boş vektörlerle transfekte edilmiş hücrelerde (P, 0.01) (Şekil 4). Beklendiği gibi, bağışıklık veya iltihaplanma ile ilgili genlerin ekspresyonu, ERVK25P'nin aşırı ekspresyonu ile indüklendi ve IFIH1, IFNG, IRF7 ve STAT3'ün indüksiyonu istatistiksel olarak anlamlı bir seviyeye ulaştı (P, 0.05 veya 0.01) (Şekil 4).

TARTIŞMA

Beslenme ve enerji seviyeleri hayvanın büyümesini, üremesini ve bağışıklığını etkileyen önemli faktörlerdir. Açlık (veya oruç tutmak) ve beslenme, beslenme veya enerji düzeylerini etkileyen iki tipik durumdur; dolayısıyla hayvanların fizyolojik işlevleri üzerinde beslenme veya enerjinin düzenlenmesini açıklamak için sıklıkla bir araştırma modeli olarak kullanılır. Örneğin oruç tutmak veya beslenmek büyüme, üreme ve bağışıklıkla ilgili genlerin ifadesini etkileyebilir (Volkoff ve diğerleri, 2016; Smati ve diğerleri, 2020). Ancak aç kalmanın veya beslenmenin ERV'yi aktive edip edemeyeceği ve ERV yoluyla bağışıklık veya inflamasyonla ilişkili genlerin ekspresyonunu etkileyip etkilemeyeceği belirsizdir. Buna ek olarak, kısa süreli aşırı besleme (3-4 hafta), insanlarda ve kemirgenlerde alkolsüz yağlı karaciğer hastalığına (NAFLD) benzeyen kaz yağlı karaciğerinin (yaygın olarak kaz ciğeri olarak bilinir) oluşumuna yol açabilir (Nahum ve ark. 2012). , 2010; Wang ve diğerleri, 2019), ancak ERV'nin aşırı beslenmeyle aktive olup olmadığı ve kaz yağlı karaciğerinin gelişiminde rol oynayıp oynamadığı bilinmemektedir. Bu çalışmada, kaz veya tavukların karaciğerinde ERV ve bazı bağışıklık veya iltihaplanma ile ilgili genlerin ekspresyonu, hayvanın beslenme veya enerji durumunun oruç tutma veya aşırı beslenme nedeniyle değiştirilmesi sonrasında belirlendi, böylece beslenme (veya enerji) durumu ile hayvan arasındaki ilişki ortaya çıktı. ERV'nin ifadesi ve bağışıklık (veya iltihaplanma) ile ilgili genler açıklığa kavuşturulabilir. Ayrıca, kaz primer hepatositlerinde ERVK25P'nin aşırı ekspresyonu, bağışıklık veya inflamasyonla ilişkili genlerin ekspresyonunun ERV'den etkilenip etkilenmediğini doğrulamak için de yapıldı. Gerçekten de sonuçlar, besin veya enerji durumunun kümes hayvanlarında ERV yoluyla bağışıklık veya iltihaplanma ile ilgili genlerin ekspresyonunu düzenleyebileceği fikrini destekleyen güçlü kanıtlar sağladı. İlginç bir şekilde, orucun ERV'nin mRNA ekspresyonu ve karaciğerdeki bağışıklık veya inflamasyonla ilişkili genler üzerindeki etkisi kümes hayvanı türlerine göre değişiklik gösteriyordu; yani tavuk karaciğerindeki genlerin mRNA ekspresyonu kaz karaciğerindekinin tersiydi. . Ayrıca aç kazların karaciğerindeki genlerin mRNA ekspresyonu aşırı beslenen kazlarınkine zıttı. Ek olarak veriler, bağışıklık veya iltihaplanma ile ilişkili genlerin, kaz yağlı karaciğerinin (veya kaz ciğeri) gelişimi üzerinde ERV'nin düzenlenmesine aracılık edebileceğini göstermektedir.

Şekil 2. Tavuk karaciğerinde ERV'nin ve bağışıklık veya iltihapla ilişkili genlerin ekspresyonu, oruç tutmakla indüklenmiştir. ERV ve bağışıklıkla ilgili genlerin nispi ifadesi, kantitatif PCR ile belirlendi. Aç bırakılan tavukların karaciğerlerindeki ERVK18P, ERVK25P, DDX41, IFIH1, IFNG, IRF7 ve STAT3 ekspresyon seviyeleri, kontrole (açlık yok) göre kat değişimi olarak sunulmuştur, n {{10}} . *,** sırasıyla P, 0.05, 0.01 ve kontrole karşılık gelir. Tüm veriler ortalama 6 SEM olarak gösterilmiştir. Kısaltma: ERV, endojen retrovirüs.

Şekil 3. Kaz karaciğerinde ERV'nin ve bağışıklık veya iltihapla ilişkili genlerin ekspresyonu aşırı beslenmeyle indüklenmiştir. ERV ve bağışıklıkla ilgili genlerin nispi ifadesi, kantitatif PCR ile belirlendi. Aşırı beslenen kazların karaciğerlerindeki ERVK18P, ERVK25P, DDX41, IFIH1, IFNG, IRF7 ve STAT3 ekspresyon seviyeleri, kontrole (rutin besleme) göre kat değişimi olarak sunulur, n {{10}} . * P, 0,05'e karşı kontrol anlamına gelir. Tüm veriler ortalama 6 SEM olarak gösterilmiştir. Kısaltma: ERV, endojen retrovirüs.

Şekil 4. Bağışıklık veya iltihaplanma ile ilgili genlerin ekspresyonu, kaz primer hepatositlerinde ERV'nin aşırı ekspresyonu ile indüklendi. ERV ve bağışıklıkla ilgili genlerin nispi ifadesi, kantitatif PCR ile belirlendi. ERVK25P aşırı ekspresyon vektörleri ile transfekte edilmiş kaz primer hepatositlerinde ERVK25P, DDX41, IFIH1, IFNG, IRF7 ve STAT3'ün ekspresyonu, kontrol (boş vektörlerle transfekte edilmiş hepatositler) üzerindeki kat değişikliği olarak sunulur, n {{1{{11 }}}}. *,** sırasıyla P, 0.05, 0.01 ve kontrole karşılık gelir. Tüm veriler ortalama 6 SEM olarak gösterilmiştir. Kısaltma: ERV, endojen retrovirüs.

Önceki çalışmalar, ERV'nin genellikle konakçı hücrelerde DNA metilasyonu yoluyla susturulduğunu, ancak ERV'nin MER48 tarafından aktive edilebileceğini göstermiştir (Walsh ve diğerleri, 1998; Gibb ve diğerleri, 2015). ERV'nin indüksiyonu ayrıca, bağışıklık veya iltihaplanma ile ilgili genlerin dahil olduğu multipl skleroz gibi bazı metabolik hastalıklar da dahil olmak üzere çeşitli hastalıklarda da gösterilmiştir (Perron ve diğerleri, 2000). Mekanistik çalışmalar inflamasyonun, genellikle beslenme veya enerji fazlalığından kaynaklanan metabolik hastalıkların patogenezinde önemli bir rol oynadığını göstermektedir (Eo ve ark., 2017). Ayrıca aç kalmanın veya aşırı beslenmenin, peroksizom proliferatörleriyle aktifleştirilen reseptör genlerinin DNA metilasyon seviyesini değiştirebildiği bulunmuştur (Jacobsen ve diğerleri, 2014; Hjort ve diğerleri, 2017). Bu bulgulara dayanarak beslenme değişikliğinin epigenetik düzenleme yoluyla ERV'nin mRNA ifadesini aktive etmesi mümkündür. Öte yandan beslenme değişikliği, bağışıklık veya iltihaplanma ile ilişkili bazı genlerin mRNA ekspresyonunu indükleyebilir (Smati ve diğerleri, 2020). Bu bulgular doğrultusunda bu çalışma, aç kalmanın veya aşırı beslenmenin ERV'nin mRNA ekspresyonunu ve bağışıklık veya inflamasyonla ilişkili genleri etkilediğini ve ERV'nin mRNA ekspresyonunun immünite veya inflamasyonla ilişkili genlerin mRNA ekspresyonuyla yakından ilişkili olduğunu gösterdi. genler.

erkekler için cistanche faydaları-bağışıklık sistemini güçlendirir

ERV hayvan genomlarında bol miktarda bulunduğundan, ERV'nin bağışıklık veya iltihaplanma üzerindeki beslenme veya enerjinin düzenlenmesindeki rolü hafife alınabilir. Bu çalışma temel olarak açlık veya aşırı beslenmenin bağışıklık veya iltihaplanma ile ilgili genlerin mRNA ekspresyonu üzerindeki etkisine aracılık eden ERVK18 ve ERVK25'i ele almıştır. ERVK genleri şu anda yalnızca hem kaz hem de tavuk genomlarında açıklanan nispeten sağlam ERV'dir. Nispeten sağlam olan bu ERV'nin yanı sıra, 'ince' ERV ve 'solo LTR' ERV, açlık veya aşırı beslenmeyle aktive edilebilir ve dolayısıyla açlık veya aşırı beslenmenin bağışıklık veya iltihaplanma ile ilgili genlerin mRNA ekspresyonu üzerindeki etkisine de katkıda bulunabilir. 'İnce ERV' ve 'solo LTR' ERV genellikle bazı konakçı genlerin yakınında bulunduğundan (Thompson ve diğerleri, 2016), açlık veya aşırı beslenme, bağışıklık veya iltihaplanma ile ilişkili genlerin mRNA ekspresyonunu, cis-etkisi yoluyla düzenleyebilir. ERV'yi etkinleştirdi. Bu açıdan bakıldığında bağışıklığın temel düzeyde sürdürülmesi kısmen aktif ERV'nin küçük bir kısmına bağlı olabilir. Önceki çalışmalar, bazı ERV'lerin hem tavuk embriyonik fibroblastlarında (ERV'nin yaklaşık %20'si) hem de in vivo olarak düzenli olarak kopyalandığını göstermiştir (Bolisetty ve diğerleri, 2012). ERV'nin mRNA ekspresyonu üzerinde aç kalmanın veya aşırı beslenmenin düzenlenmesi, daha önce belirtildiği gibi büyük olasılıkla epigenetik modifikasyonlar (örn. DNA metilasyonu) yoluyla gerçekleşir. Bir DNA metiltransferaz inhibitörü olan AZA'nın, hücrede ERV'nin mRNA ekspresyonunu önemli ölçüde indükleyebildiği rapor edilmiştir (Jaenisch ve diğerleri, 1985; Deborah ve Bestor, 2004). ERV'nin mRNA ekspresyonu, tavuk karaciğerinde ve kaz karaciğerinde oruç tutularak farklı şekilde düzenlenmiştir; bu, tavuklar ve kazlar arasında ERV ekspresyonunu kontrol etmek için farklı derecede epigenetik modifikasyon olduğunu düşündürmektedir. Bu çıkarım, ERV'nin mRNA ifadesinin hücre tipine bağlı olduğunu gösteren kanıtlarla desteklenmektedir (Nogues ve diğerleri, 2018). Ancak aç kalmanın veya aşırı beslenmenin ERV'nin DNA metilasyonunu nasıl etkilediği henüz açıklığa kavuşturulmamıştır. Ayrıca tavuklar ve kazlar arasındaki genetik farklılıklar, transkripsiyon faktörlerinin iç veya dış uyaranlara farklı tepkileri gibi, iki tür arasındaki ERV ekspresyonundaki farklılığa katkıda bulunabilir. Gerçekten de önceki sonuçlarımız, kaz yağlı karaciğerinde normal karaciğere karşı birçok genin mRNA ekspresyonunun, NAYKH'li (veya fare) insanlarda ve normal karaciğerde görülenin tersi olduğunu göstermektedir (Liu ve diğerleri, 2016). Ayrıca yaş, yem, ışık ve diğer yetiştirme koşulları gibi çevresel ve diğer faktörler de tavuklar ve kazlar arasında ERV'nin farklı ifadesinden sorumlu olabilir.

Bu çalışmada, ERVK25P'nin aşırı ekspresyonu, bağışıklık veya inflamasyonla ilişkili genlerin ekspresyonunu arttırdı; bu, aç kalmanın veya aşırı beslenmenin, karaciğerdeki bağışıklık veya inflamasyonla ilişkili genlerin mRNA ekspresyonunu ERV yoluyla düzenlediği fikrini destekleyen güçlü kanıtlar sağlar. Nispeten sağlam ERV'nin aşırı ekspresyonunun, bağışıklık veya iltihaplanma ile ilgili genlerin mRNA ekspresyonunu arttırdığı 2 potansiyel mekanizma vardır: 1) ERV transkriptleri içinde veya antisens RNA'larla hibridize edilerek oluşturulan çift sarmallı RNA, NFkB sinyalini aktive edebilir çift ​​sarmallı RNA'nın reseptörlerine (örneğin, TLR3) bağlanması üzerine yol açar ve bağışıklık veya iltihaplanma ile ilgili genlerin ekspresyonunu indükler (Chiappinelli ve diğerleri, 2015); 2) nispeten sağlam ERV ayrıca kodlanmış proteinlerini veya polipeptitlerini de eksprese edebilir, bu da aşağı yöndeki sinyal yollarının aktivasyonuna ve bağışıklık veya iltihaplanma ile ilgili genlerin ekspresyonuna yol açar. Her ne kadar bu çalışma, uygun antikorların eksikliği nedeniyle ERVK18P ve ERVK25P'nin protein ekspresyonunu tespit edemese de, önceki çalışmalar bazı ERV'lerin, özellikle ERVK'nin proteinlerini sentezleyebildiğini ve nöronal hücrelerde bağışıklık veya inflamasyonla ilişkili genlerin ekspresyonunu indükleyebildiğini göstermiştir. hücreler (Manghera ve diğerleri, 2015). Bu proteinler, RIG-1, protein kinaz K ve inflamatuar vücut molekülü NLRP3 gibi hayvan reseptörleri tarafından algılanabilir (Mitoma ve diğerleri, 2013; Mu ve diğerleri, 2016). Beslenme (veya enerji) ile bağışıklık (veya iltihaplanma) arasındaki ilişki, çeşitli beslenme veya enerji ile ilgili bozukluklarda, özellikle diyabet ve NAYKH dahil olmak üzere obezite ile ilişkili hastalıklarda gösterilmiştir. Obezite, kronik bir inflamasyon olarak kabul edilmiştir, çünkü inflamasyonla ilişkili birçok gen (örneğin, proinflamatuar sitokin tümör nekroz faktörü-alfa, MCP1 ve IL6), obezitesi olan hastalarda sağlıklı gruplara karşı indüklenmektedir (Ferreira ve diğerleri, 2016). Bu sitokinler insülin direncine yol açabilir ve dolayısıyla obezite ile ilişkili metabolik bozuklukları kötüleştirebilir (Li ve ark., 2019). Bu çalışmada veriler, normal karaciğere kıyasla kaz yağlı karaciğerinde ERV ve bağışıklık veya iltihapla ilişkili genlerin indüklendiğini gösterdi. Karaciğer son derece karmaşık bir organdır ve yalnızca besin ve enerji dönüşümünde merkezi bir rol oynamakla kalmaz, aynı zamanda detoksifikasyon ve bağışıklık düzenleme işlevlerine de sahiptir. Karaciğer, Kupffer hücreleri (yerleşik makrofajlar), doğal öldürücü hücreler ve doğal öldürücü T hücreleri gibi çok sayıda bağışıklık hücresi içerir. Karaciğer ayrıca kompleman bileşenlerini ve çok sayıda başka çözünür patojen tanıma reseptörünü de sentezler (Keith ve diğerleri, 2007). Bu nedenle karaciğer şu anda önemli bir bağışıklık organı olarak kabul edilmektedir ve doğuştan gelen bağışıklıkta (veya iltihaplanmada) rol oynamaktadır (Xia ve diğerleri, 2008; Trigger, 2010). ERV ve bunların indüklenen bağışıklık veya iltihaplanma ile ilişkili genleri, karaciğerin fizyolojik fonksiyonları için gerekli olabilir ve beslenme metabolizması ile bağışıklık (veya iltihaplanma) arasında bağlantı görevi görebilir. Bu çalışmada, beslenme (veya enerji) değişikliği, kaz yağlı karaciğerinde normal karaciğere karşı ERV'nin mRNA ekspresyonunu ve bağışıklık veya iltihaplanma ile ilişkili genleri indüklese de, ERV'nin neden olduğu bağışıklık veya iltihaplanma ile ilişkili genlerin, geri bildirim beslenme metabolizmasını düzenleyebilir (Volkman ve Stetson, 2014; Cañadas ve diğerleri, 2018). Bu nedenle bu çalışma, ERV'nin bağışıklık veya iltihaplanma ile ilgili genler yoluyla kaz yağlı karaciğerinin gelişimine katıldığı fikrini destekleyen bazı kanıtlar sunmaktadır.

cistanche takviyesi faydaları-bağışıklık sistemi nasıl güçlendirilir

Bu çalışmada ayrıca aç kazların ve kontrol kazlarının, aç tavukların ve kontrol tavuklarının ve aşırı beslenmiş kazların ve kontrol kazlarının karaciğerlerindeki IFIH1 protein düzeyini de belirledik. IFIH1 protein seviyesinin paternleri IFIH1 mRNA seviyesinin paternlerine benzer olmasına rağmen tedavi ve kontrol grupları arasındaki protein seviyesindeki fark mRNA seviyesindeki kadar belirgin değildi. Olası açıklamalar arasında IFIH1'in protein seviyesinin transkripsiyon sonrası düzenlenebileceği yer almaktadır. Sonuç olarak, beslenme veya enerji durumu, bazı bağışıklık veya iltihaplanma ile ilişkili genlerin ERV aracılığıyla ekspresyonunu etkiler; bu da beslenme (veya enerji) ile bağışıklık (veya iltihaplanma) arasındaki ilişkinin altında yatan potansiyel bir mekanizmayı sağlar. Beslenme veya enerji durumu, DNA metilasyonu yoluyla ERV'nin ifadesini düzenleyebilir. Kanatlı türleri arasında bu epigenetik düzenlemede farklılık vardır ve spesifik mekanizmanın daha fazla araştırılması gerekmektedir. Beslenme veya enerji durumundan etkilenen bağışıklık veya iltihaplanma ile ilgili genler, yalnızca doğuştan gelen bağışıklık tepkisine katılmakla kalmayıp aynı zamanda iltihaplanma, hayvan büyümesi ve apoptozda ve beslenme veya enerji metabolizmasının geri bildirim düzenlemesinde de rol oynayabilir. Ek olarak, bu çalışma aynı zamanda ilk kez ERV'nin ve onun düzenlenmiş bağışıklık veya iltihapla ilişkili genlerinin kaz yağlı karaciğerinin gelişiminde rol oynadığını da ortaya çıkardı.

REFERANSLAR

Bolisetty, M., J. Blomberg, F. Benachenhou, G. Sperber ve K. Beemon. 2012. Kuş endojen retrovirüslerinin beklenmeyen çeşitliliği ve ifadesi. mBio 3 e00344-00312.

Cañadas, I., R. Thummalapalli, JW Kim, S. Kitajima, RW Jenkins, CL Christensen, M. Campisi, Y. Kuang, Y. Zhang, E. Gjini, G. Zhang, T. Tian, ​​DR Sen, D Miao, Y. Imamura, T. Thai, B. Piel, H. Terai, AR Aref, T. Hagan, S. Koyama, M. Watanabe, H. Baba, AE Adeni, CA Lydon, P. Tamayo, Z. Wei, M. Herlyn, TU Barbie, R. Uppaluri, LM Sholl, E. Sicinska, J. Sands, S. Rodig, KK Wong, CP Paweletz, H. Watanabe ve DA Barbie. 2018. Spesifik interferonla uyarılan endojen retrovirüsler tarafından başlatılan tümör doğuştan gelen bağışıklık. Nat. Med. 24:1143–1150.

Chiappinelli, KB, PL Strissel, D. Alexis, HL Li, H. Christine, A. Benjamin, H. Alexander, NS Rote, LM Cope, S. Alexandra, M. Vladimir, B. Sadna, JS Dennis, DW Jedd, Milletvekili Drew, WB Matthias, AZ Cynthia, M. Taha, AC Timothy, BB Stephen ve S. Reiner. 2015. DNA metilasyonunun engellenmesi, endojen retrovirüsler de dahil olmak üzere dsRNA yoluyla kanserde bir interferon tepkisine neden olur. Hücre 162:974–986.

Crichton, JH, DS Dunican, M. Marie, RR Meehan ve IR Adams. 2014. Fare germ hattında retrotranspozon baskılama mekanizmaları dahilinde genomun düşmandan korunması. Hücre. Mol. Hayat Bilimi 71:1581–1605.

Deborah, BH ve TH Bestor. 2004. Dnmt3L içermeyen erkek germ hücrelerinde mayotik felaket ve retrotranspozon reaktivasyonu. Doğa 431:96–99.

Denner, J. 2016. Plasentada endojen retrovirüslerin ekspresyonu ve işlevi. APMIS 124:31–43.

Dolei, A., E. Uleri, G. Ibba, M. Caocci, C. Piu ve C. Serra. 2015. İnsan DNA'sındaki uzaylılar: HERV-W/MSRV/syncytin-1 endojen retrovirüsler ve nörodejenerasyon. J. Enfekte edin. Dev. Sayı. 9:577–587.

Elaheh, K., N. Farzaneh, P. Mirshokraei, SE Tabatabaeizadeh ve H. Dehghani. 2018. Sığır embriyosunun implantasyon öncesi aşamalarında endojen retrovirüslerin ekspresyonu. Çoğalt. Yurtiçi. Animasyon. 53:1405–1414.

Eo, H., JE Park, YJ Jeon ve Y. Lim. 2017. Kolonyal kava polifenol ekstraktının, yüksek yağlı diyetin neden olduğu obez farelerde anormal enerji metabolizması ve oksidatif stres ile ilişkili böbrek iltihabı üzerindeki iyileştirici etkisi. J. Agric. Gıda Kimyası 65:3811–3818

Ferreira, PS, LC Spolidorio, JA Manthey ve TB Cesar. 2016. Narenciye flavanonları, yüksek yağlı diyetle beslenen C57BL/6J farelerinde sistemik inflamasyonu önler ve oksidatif stresi iyileştirir. Gıda Fonksiyonu 7:2675–2681.

Geng, TY, W. Hu, MH Broadwater, JM Snider, J. Bielawski, SB Russo, JH Schwacke, J. Ross ve LA Cowart. 2013. Yağ asitleri, tribbles homolog 3'ün endoplazma retikulum stres aracılı indüksiyonu yoluyla insülin direncini farklı şekilde düzenler: diyetteki yağ bileşimi ile obezitenin patofizyolojik sonuçları arasında potansiyel bir bağlantı. Diabetologia 56:2078–2087.

Geng, TY, B. Yang, FY Li, LL Xia, Q. Wang, X. Zhao ve DQ Gong. 2016a. Kaz yağlı karaciğerinin alevlenmesini önleyen koruyucu bileşenlerin tanımlanması: adiponektin reseptörlerinin karakterizasyonu, ekspresyonu ve düzenlenmesi. Komp. Biyokimya. Fizyol. B Biyokimya. Mol. Biyol. 194:32–38.

Geng, TY, X. Zhao, LL Xia, L. Liu, FY Li, B. Yang, Q. Wang, S. Montgomery, HM Cui ve DQ Gong. 2016b. Diyete şeker eklenmesi, kazda endoplazmik retikulum stresinden bağımsız insülin direncini ve yağlı karaciğeri destekler. Biyokimya. Biyofiz. Res. İletişim 476:665–669.

Gibb, EA, RL Warren, GW Wilson, SD Brown, GA Robertson, GB Morin ve RA Holt. 2015. İnsan adenokarsinomunda endojen retrovirüsle ilişkili uzun kodlayıcı olmayan RNA'nın aktivasyonu. Genom Med. 7:22.

Haraguchi, S., RA Good, GJ Cianciolo ve NK Day. 1992. Retroviral zarf proteinine homolog olan sentetik bir peptit, TNF-a ve IFN-g mRNA ekspresyonunu aşağı regüle eder. J. Leukoc. Biyol. 52:469–472.

Hjort, L., SW Jørgensen, L. Gillberg, E. Hall, C. Brøns, J. Frystyk, AA Vaag ve C. Ling. 2017. Genç erkeklerin 36 saatlik oruç tutması, LEP ve ADIPOQ'un yağ dokusu DNA metilasyonunu doğum ağırlığına bağlı bir şekilde etkiler. Klin. Epigenetik 9:40.

Hohn, O., K. Hanke ve N. Bannert. 2013. HERV-K (HML-2), HERV'lerin en iyi korunmuş ailesi: endojenizasyon, ekspresyon ve sağlık ve hastalık üzerindeki etkileri. Ön. Onkol. 3:246.

Huda, A., N. Polavarapu, IK Jordan ve JF McDonald. 2008. Tavuk genomunun endojen retrovirüsleri. Biyol. Doğrudan 3:9.

Jacobsen, SC, L. Gillberg, J. Bork-Jensen, R. Ribel-Madsen, E. Lara, V. Calvanese, C. Ling, AF Fernandez, MF Fraga, P. Poulsen, C. Brøns ve A. Vaag . 2014. Düşük doğum ağırlığına sahip genç erkekler, yüksek yağlı aşırı beslenme nedeniyle genom çapında kas DNA metilasyonunun esnekliğinde azalma sergiliyor. Diabetologia 57:1154–1158.

Jaenisch, R., A. Schnieke ve K. Harbers. 1985. Farelerin 5-azasitidin ile tedavisi, farklı dokulardaki sessiz retroviral genomları etkili bir şekilde aktive eder. Proc. Natl. Acad. Bilim. ABD 82:1451–1455.

Jern, P. ve JM Coffin. 2008. Retrovirüslerin konakçı genom fonksiyonu üzerindeki etkileri. Annu. Rahip Genet. 42:709–732.

Keith, EG, RB Jones, DA Meiklejohn, N. Anwar, LC Ndhlovu, JM Chapman, AL Erickson, A. Agrawal, G. Spotts, FM Hecht, NS Rakoff, J. Lenz, MA Ostrowski ve DF Nixon. 2007. HIV-1 enfeksiyonunda insan endojen retrovirüslerine karşı T hücresi yanıtları. PLoS Patog. 3:e165.

K€ury, P., A. Nath, A. Creange, A. Dolei, P. Marche, J. Gold, G. Giovannoni, HP Hartung ve H. Perron. 2018. Nörolojik hastalıklarda insan endojen retrovirüsleri. Trendler Mol. Med. 24:379–394.

Li, JY, YD Wang, XY Qi, L. Ran, T. Hong, J. Yang, B. Yan, ZZ Liao, JH Liu ve XH Xiao. 2019. Tip 2 diyabette serum CCN3 seviyeleri artar ve obezite, insülin direnci ve inflamasyonla ilişkilidir. Klin. Chim. Acta 494:52–57.