Cistanche'nin Glikozitleri Kardiyotoksisiteyi Tedavi Etmek İçin Kullanılabilir mi?

Farelerde doksorubisin kaynaklı kardiyotoksisiteye karşı cistanche glikozitlerinin koruyucu etkisi

İletişim:joanna.jia@wecistanche.com/ WhatsApp: 008618081934791

Wu Liya, Wang Xiaowen, Wang Xuefei ve diğerleri

( Farmakoloji Bölümü, X Sincan Tıp Üniversitesi, X Xinjiang 830054)

Özet: Amaç:cistanche glikozitleri(GC'ler) doksorubisin kaynaklıkardiyotoksisitefarelerde ve mekanizmasında.

Yöntemler: NI H fareleri, bir akut miyokard yaralanma modeli geliştirmek için intraperitoneal olarak doksorubisin (Dox) ile tek doz 17.5 mg/kg- 1 ile tedavi edildi. SOD, GS H-Px aktivitesi, M DA içeriği ve kreatin fosfokinaz (CPK) aktivitesi ölçüldü. Kardiyak ultrastrüktürel değişiklikler taramalı elektron mikroskobu ile incelendi.

Sonuçlar: Uygulamadan 48 saat sonra Dox, farelerde okradial SOD ve GS H-Px aktivitemi azaltarak, miyokardiyal M DA içeriğini ve serum CPK aktivitesini artırarak ciddi miyokardiyal hasara neden oldu. Ayrıca ultrastrüktür düzeyinde ciddi miyokardiyal hücre hasarına neden oldu. GC'lerin (62. 5, 125, 250 mg /kg- 1) oral uygulaması, miyokardiyal SOD, GS H-Px aktivitesini artırarak, miyokardiyal M DA içeriğini ve serum CPK aktivitesini azaltarak Dox'un neden olduğu bu değişikliklere karşı koruma sağlamıştır. ve azaltılmasıkardiyotoksisiteo Ultrastrüktürel düzeyde Dox.

Sonuç:Cistanche glikozitleriüzerinde koruyucu bir etkiye sahipkardiyotoksisiteDox tarafından uyarıldı. Dox tarafından indüklenen azaltılmış kardiyotoksisite mekanizmaları, GC'lerin fare kalplerindeki oksig en serbest radikallerini temizleme, SOD ve GSH-Px aktivitesini koruma ve lipid peroksidasyonunu inhibe etme üzerindeki etkisine bağlı olabilir.

Anahtar Kelimeler: doksorubisin;cistanche glikozitleri; lipid peroksidasyonu;kardiyotoksisite; kreatin fosfokinaz; üst yapı

Doksorubisin (Dox) bir antrakinon antibiyotiktir ve çeşitli malign tümörler üzerinde iyi bir etkiye sahiptir. Bununla birlikte, akut ve kronik miyokardiyal toksisitesi nedeniyle, klinik pratikte Dox'un geniş uygulamasını sınırlar. Dox'un anti-tümör etkisinin DN A replikasyonunu ve RN A sentezini etkilemek olduğu bilinmektedir ve bununkardiyotoksisitesemikinon adriamisin [1, 2] tarafından indüklenen lipid peroksidasyon hasarı ile ilişkilidir. Bu nedenle, antagonize etmek için serbest radikal süpürücüler ve antioksidanlar bulmak önemlidir.kardiyotoksisiteAnti-tümör aktivitesini korurken Dox.cistanchecistanche toplam glikozitler (GC'ler), bitkilerden elde edilen aktif bileşenlerdir.cistanche. İlgili çalışmalar, GC'lerin fare dokuları üzerinde antioksidan etkilere sahip olduğunu, lipofuscin içeriğini önemli ölçüde azaltabildiğini [3], sıçan miyokardiyal iskemi üzerinde koruyucu etkileri olduğunu [4] ve anti-lipid peroksidasyonu ve anti-radyasyon etkileri olduğunu bulmuştur. [5]. Bu çalışma, Dox ile indüklenen farelerde GC'lerin miyokard hasarı üzerindeki koruyucu etkisini ve mekanizmasını araştırmayı amaçlamaktadır.

1 Malzeme ve yöntemler

1. 1 İlaç ve reaktifler

GC'ler, tuz üretencistanchekuzey Sincan'da. Ana bileşenler, ekinakozit ve ergot glikozitler gibi fenetil alkol glikozitleridir (Xinjiang Tıp Üniversitesi, Eczacılık Fakültesi, Doğal Tıp Kimyası Bölümü tarafından sağlanır); Tetrametoksipropan (TM P Sigma Company)); Doksorubisin (Do x, Zhejiang Hisun Pharmaceutical Co., Ltd.); E Vitamini (Vit E, Şanghay Yan'an İlaç Fabrikası); diğer reaktifler yurt içinde üretilir.

cistanche glikozitlerinin kardiyotoksisite üzerindeki etkisi

1. 2 Deneysel ekipman

721 tipi spektrofotometre (Shanghai Üçüncü Analitik Cihaz Fabrikası); O LYM PU S mikroskobu (Japonya'da üretilmiştir); JEM-100CXII transmisyon elektron mikroskobu (Japonya'da üretilmiştir); PHS-250 tipi asitlik ölçer (Shanghai Lei Manyetik Enstrüman Fabrikası).

1. 3 Hayvan gruplaması ve yönetimi

N IH fareleri, Xinjiang Endemik Hastalıklar Enstitüsü Hayvan Deney Merkezi tarafından sağlandı ve tıbbi laboratuvar hayvan sertifika numarası: No. {{0}}. (24±2) g ağırlığında, yarı erkek ve dişi 138 N IH faresi seçildi. Rastgele 6 gruba ayrıldı (her grupta 23): (1) Kontrol grubu: normal salin (NS) 20 ml/kg; (2) Dox yaralanma grubu: NS 20 ml/kg; (3) Vit E grubu: Vito 100 mg/kg; (4) GCsⅠ grubu: GCs 62.5 mg/kg; (5) GCsⅡ grubu: GCs 125.0 mg/kg; (6) GCsⅢ grubu: GCs 25.0 mg/kg, yukarıdaki grupların tümü günde bir kez Mide ile irrigasyonlu olarak uygulandı. Dox yaralanma grubu, Vit E grubu, GCsⅠ grubu, GCsⅡ grubu, GCsⅢ grubuna NS ve GC'lerin uygulanmasından sonraki 4. günde Dox 17.5 mg/kg intraperitoneal olarak enjekte edildi. 48 saat sonra, kan toplamak için göz küreleri çıkarıldı, serum hazırlandı ve hayvanlar, kalbi çıkarmak için hemen kurban edildi, NS ile durulandı, filtre kağıdı ile kurulandı ve tartıldı. 30 dakika sonra, biyokimyasal göstergeleri ölçmek için süpernatantı alın. Her grupta 3 fare vardı ve elektron mikroskobu örnekleri yapmak için kalpleri alındı.

1.4 Biyokimyasal göstergelerin belirlenmesi

Miyokardiyal süperoksit dismutazın (SOD) aktivitesini belirlemek için pirogallol otooksidasyon yöntemi [6] kullanıldı; miyokardiyal selenyum-glutatyon peroksidazın (Se-GS H-Px) aktivitesini belirlemek için DTNB yöntemi [7] kullanıldı; Miyokardiyal lipid peroksidasyon ürünü malondialdehit (M DA ) içeriğini belirlemek için TBA yöntemini [8] kullanarak; CBB-SDS yöntemi kullanılarak protein miktar tayini [9 ]; serum kreatin fosfokinaz (CPK) aktivitesini belirlemek için CPK yöntemini [10] kullanarak.

1.5 Miyokard dokusunun elektron mikroskobu

Kalbin apeksi yüzde 4 glutaraldehit ve yüzde 1 osmiyum asit ile çift sabitlendi, asetonla kurutuldu, Epon 812'ye gömüldü, kurşun-uranyum elektronları ile boyandı ve bir JEM-100CXII transmisyon elektron mikroskobu altında gözlemlendi. 1.6 İstatistiksel işleme Tüm veriler x-± s olarak ifade edilir. Deneysel veriler varyans homojenliği için test edildikten sonra istatistiksel işleme için F testi ve q testi kullanılır. Denetim düzeyi=0.05.

2 sonuç

2.1 GC'lerin Dox ile hasar görmüş miyokardın biyokimyasal indeksleri üzerindeki etkisi Tablo 1'de gösterilmiştir.

2. 1.1 GC'lerin Dox ile hasar görmüş miyokardın SOD aktivitesi üzerindeki etkisi

Kontrol grubuyla karşılaştırıldığında, Dox yaralanma grubu miyokardiyal SOD aktivitesini yüzde 41,1 oranında azalttı (P<0.01). the="" gcsⅰ,="" gcsⅱ,="" gcsⅲ,="" and="" vit="" e="" groups="" increased="" the="" myocardial="" sod="" activity="" by="" 30.9%="" and="" 33.2="" compared="" with="" the="" dox="" injury="" group,="" respectively.="" %,="" 36.5%,="" and="" 34.9%="" (all=""><0.01), the="" gcsⅲ="" group="" was="" close="" to="" the="" control="" group="" (p="">0.05) ve grupların geri kalanı kontrol grubundan daha düşüktü.

2.1.2 Dox tarafından hasar gören miyokardda GC'lerin Se-GSH-Px aktivitesi üzerindeki etkisi

Kontrol grubuyla karşılaştırıldığında, Dox yaralanma grubu miyokardiyal Se-GSH-Px aktivitesini yüzde 26,2 oranında azalttı (P<0.01), and="" the="" gcsⅰ,="" gcsⅱ,="" gcsⅲ,="" and="" vit="" e="" groups="" increased="" by="" 19.="" 2%="" and="" 21="" respectively="" compared="" with="" the="" dox="" injury="" group.="" .1%,="" 25.0%="" and="" 26.1%="" (all=""><0.01), which="" are="" all="" close="" to="" the="" control="" group="" (p="">0.05).

2.1.3 Dox-yaralı miyokardda GC'lerin M DA içeriği üzerindeki etkisi

Kontrol grubuyla karşılaştırıldığında, Dox yaralanma grubunun MDA içeriği yüzde 25.8 arttı (P<0.01), and="" the="" gcsⅰ,="" gcsⅱ,="" gcsⅲ,="" and="" vit="" e="" groups="" decreased="" by="" 16.7%,="" 17.3%,="" and="" 18.="" 6%="" and="" 17.3%="" (both=""><0.01), both="" were="" close="" to="" the="" control="" group="" (p="">0.05).

glikozitlercistanche

2.1.4 Dox ile yaralanmış farelerde GC'lerin serum C PK aktivitesi üzerindeki etkisi

Dox yaralanma grubundaki serum CPK aktivitesi, normal gruba kıyasla yüzde 87.3 arttı (P<0.01), and="" the="" gcsⅰ,="" gcsⅱ,="" gcsⅲ,="" and="" vit="" e="" groups="" were="" reduced="" by="" 26.6%,="" 33.1%,="" and="" 37="" respectively="" compared="" with="" the="" dox="" injury="" group.="" .="" 4%="" and="" 36.="" 7%="" (both=""><0.01), both="" higher="" than="" the="" control="">

Tablo 1 GC'lerin Dox hasarlı miyokardın biyokimyasal indeksleri üzerindeki etkisi

Not: Kontrol grubuyla karşılaştırıldığında, * * P<0.01; compared="" with="" the="" dox="" injury="" group,="" #="" #="" p=""><>

2.2 Fare miyokardının elektron mikroskobu

2. 2. 1 Kontrol grubu

Miyokardiyal lif zarı sağlamdır, miyofibriller düzenli bir şekilde düzenlenmiştir, sarkomer bantları yapılandırılmıştır, mitokondri düzgün bir şekilde düzenlenmiştir, yapı normaldir ve nükleer yapı normaldir.

2. 2. 2 Dox hasar grubu

Miyokard liflerinin üst yapısında bariz değişiklikler olduğu, miyokard hücrelerinin şiştiği, intrasitoplazmik sarkomerin büyüdüğü, parlak bandın genişlediği, bazı bölgelerde anormal kasılma bantlarının ortaya çıktığı ve Z çizgisi materyalinin arttığı görülebilir. Mitokondri yaygın olarak şişmiş ve hiperplastikti, seyrek cristae düzenlemesi, kırıklar ve vakuolar dejenerasyon vardı. Sarkoplazmik retikulum genişler, ikincil lizozomlar artar ve fokal dejenerasyon görülebilir. Nükleer hacim artar ve perinükleer boşluk genişler.

2. 2. 3 GCsⅠ grubu

Miyokardiyal lif şişmesi azaldı. Sarkomer yapısı normaldi ancak sarkomer hala kontrol grubundan daha genişti. Mitokondriyal şişme azaldı, matris yoğunluğu arttı, cristae yoğunluğu arttı ve bireysel mitokondriyal cristae hala değişti. Sitoplazmada artan ikincil lizozomlar.

2. 2. 4 GCs Ⅱ ve Ⅲ grupları

Miyokardiyal lif yapısı normale döndü. Miyofibriller düzgün bir şekilde düzenlenmiştir, sarkomer yapısı normaldir ve mitokondriyal yapı normale döner.

3 Tartışma

Dox, geniş bir anti-tümör spektrumunun özelliklerine ve güçlü etkilere sahip bir antrakinon antibiyotiktir. Bununla birlikte, Dox, ilacın erken evresinde çeşitli aritmiler, doza bağımlı ve geç evrede konjestif kalp yetmezliği gibi ciddi miyokard toksisitesine neden olabilir ve bu da klinik uygulamasını sınırlar. Dox'un miyokardiyal toksisiteye neden olan mekanizması, esas olarak miyokardiyal hasara neden olan aşırı reaktif oksijen serbest radikallerinin üretimidir. Dox'un miyokardiyal dokuya afinitesi, diğer dokulardan önemli ölçüde daha yüksektir. Miyokardiyal hücrelere girdikten sonra, oksijen molekülleri üzerinde etki ederek onu süperoksit anyon serbest radikallerine (O-2) dönüştüren semikinon Dox'a dönüştürülür ve buna hidrojen peroksit (H2 O2)) üretimi eşlik eder. O-2· ve H2 O2, Haber-Weiss reaksiyonu veya Fento n reaksiyonu yoluyla hidroksil radikalleri (OH·) üretir. O-2· ve OH· büyük miktarlarda birikir, bu da dokularda ve hücre zarlarında lipid peroksidasyonuna neden olabilir ve biyolojik makromoleküllere zarar verebilir [11].

Deneyde, farelere 48 saatlik intraperitoneal Dox (17.5 mg/kg) enjeksiyonundan sonra, fare miyokardiyal serbest radikal süpürücü enzim SOD ve Se-GSH-Px'in aktivitelerinin önemli ölçüde azaldığı ve lipid peroksidasyon ürünlerinin önemli ölçüde azaldığı gözlemlendi. MDA içeriği önemli ölçüde arttı ve serum CPK aktivitesi arttı. Elektron mikroskobu altında, kalp kasının üst yapısı hasar gördü, mitokondrinin belirgin şişmesi, kırık krista, vakuolar dejenerasyon, azalmış matris yoğunluğu ve sarkoplazmik retikulumun genişlemesi olarak kendini gösterdi.

GC'lerin tüm doz grupları, Dox ile yaralanmış farelerin kalp kasındaki serbest radikal süpürücü enzimler SOD ve Se-GS H-Px'in aktivitelerini önemli ölçüde artırabilir, MDA içeriğini azaltabilir ve CPK salınımını azaltabilir. GC'lerin, vücuttaki serbest radikal süpürücü enzimlerin aktivitesini artırarak Do x'in neden olduğu lipid peroksidasyon hasarını azaltabileceği ileri sürülmektedir. GCsⅡ ve GCsⅢ grupları, miyokardiyal liflerin üst yapısını Dox hasarından önemli ölçüde korumuştur. Modern kemilüminesans analiz teknolojisi kullanılarak in vitro tespit, GC'lerin O·2, OH·, H2O2 gibi aktif oksijen serbest radikallerini etkili bir şekilde uzaklaştırabildiği ve O·2 üzerindeki süpürme etkisinin özellikle önemli olduğu bulunmuştur [12]. GC'lerin miyokardda semikinon Dox tarafından indüklenen O-2·'yi temizleyebilmesi, böylece serbest radikallerin zincir reaksiyonunu kesintiye uğratması ve lipid peroksidasyon zincirinin bir blokörü olarak hareket etmesi önerilmektedir.

Bu deneyde, Vit E pozitif kontrol olarak kullanıldı. Sonuçlar, Vit E'nin farelerde Do x'in neden olduğu akut miyokardiyal hasar üzerinde belirli bir koruyucu etkiye sahip olduğunu gösterdi. Miyokardiyal M DA içeriğini azaltabilir ve SOD ve Se-GSH-Px aktivitelerini artırabilir. 13] Raporlar tutarlı.

GC'lerin ana bileşeni fenoksietanol glikozitlerdir ve yapı Vit E'ninkine benzer, yani bir fenolik hidroksil grubuna ve bir hidroksil grubuna sahiptir. Bu nedenle, GC'lerin moleküler yapısının fenolik hidroksil grubu üzerindeki hidrojen atomlarını lipit radikaline (LOO·) sağlayarak, onu lipohidroperoksite (LOOH) dönüştürdüğü ve daha sonra GSH- tarafından toksik olmayan hidroksile ayrıştırıldığı tahmin edilmektedir. Px Biyofilmdeki doymamış yağ asitlerinin serbest radikaller tarafından peroksidasyonunu önleyerek Dox'un kardiyomiyositlere verdiği zararı azaltır. Mekanizma derinlemesine incelenmeyi beklemektedir.

cistanche glikozitleri kardiyotoksisiteyi tedavi edebilir

Referanslar

[1] Baser RL, Green MD. Tedavinin karmaşıklığı: geri dönüşümün önlenmesi için stratejiler ekardiyotoksisite[J]. Cancer Tread Rer, 1993, 19: 57.

[2] Doroshow JH. Duyulan sıçanlarda antrasiklin antibiyotiklerinin oksig en radikal oluşumuna etkisi [J]. Cancer Res, 1983, 43: 460.

[3] Wang Xiaowen, Li Linlin, Muhu Yati, et al. Toplamın antioksidan etkisiCistanche glikozitlerifare dokularında [J]. Chinese Journal of Chinese Materia Medica, 1998, 23(9): 554-556.

[4] Mao Xinming, Wang Xiaowen, Li Linlin, et al. Sıçanlarda toplam Cistanche glikozitlerinin miyokardiyal iskemi üzerindeki koruyucu etkisi [J]. Çin Bitkisel Tıbbı, 1999, 30(2): 118-120.

[5] Li Linlin, Wang Xiaowen, Wang Xuefei, et al. Toplamın anti-lipid peroksidasyonu ve anti-radyasyon etkileriCistanche glikozitleri[J]. Chinese Journal of Chinese Materia Medica, 1997, 22(6): 364-367.

[6] Zou Guolin, Gui Xingfen, Zhong Xiaoling, et al. Bir SOD belirleme yöntemi-pirogallol otooksidasyon yönteminin [J] iyileştirilmesi. Biyokimya ve Biyofizikte İlerleme, 1986, 4: 17.

[7] Xia Yiming, Zhu Lianzhen. Kan ve dokularda glutatyon peroksidaz aktivitesinin belirlenmesi-DTNB direkt yöntemi [J]. Hijyen Araştırması, 1987, 16(4): 29-32.

[8] Chen Shunzhi, Jin Youyu. Lipid peroksit TB A renk gelişiminin üç yönteminin karşılaştırılması [J]. Journal of Clinical Laboratory Science, 1984, 2(4): 8-10.

[9] Macart M, Gerbaut L. Varas proteinlerine karşı iyi bir duyarlılık nedeniyle koomassie mavisi boya bağlama yönteminin iyileştirilmesi: Crerebros omurilik sıvısına uygulama [J]. Clin Chem Act a, 1982, 112: 93.

[10] Xu Shuyun, Bian Rulian, Chen Xiu. Farmakolojik Deney Metodolojisi [M]. 2. Baskı, Pekin: Halkın Tıbbi Yayınevi, 1991. 922.

[11] Halliw ell B, Gu tt ridge JMC. Biyoloji ve tıpta serbest radikaller[M ]. 2. baskı. New York: Oxford University Press, 1989. 543-550.

[12] Wang Xiaowen, Jiang Xiaoyan, Wu Liya Yiming, et al. Toplamın süpürücü etkisicistanche glikozitleriserbest radikaller ve OH· kaynaklı DNA hasarının korunması [J]. Çin Eczacılık Dergisi, 2001, 36(1): 29-31.

[13] Wu Yuling, Xu Guangyuan. Doksorubisin ile indüklenen akutun deneysel çalışmasıkardiyotoksisitefarelerde ve Vit E [J]'nin koruyucu etkisi. Dalian Tıp Üniversitesi Dergisi, 1991, 13(1): 22-27.

Kimden: Çin Kütüphanesi Sınıflandırma Numarası: Q949. 752.7; R978. 1; R-332 Belge tanımlama kodu: A Makale numarası: 1009-5551 (2003) 01-0028-03

Fon Projesi: Sincan Uygur Özerk Bölgesi Bilim ve Teknoloji Komisyonu Doğa Bilimleri Vakfı (96814)

Yazar hakkında: Wu Liya Yiming (1964-), kadın (Uygur), usta, öğretim görevlisi, araştırma yönü: kardiyovasküler farmakoloji.