Hemodiyaliz, Geliştirilmiş Biyouyumluluğa Rağmen Karbon Merkezli Radikaller Yoluyla Oksidatif Stresi Artırıyor

Lökosit aktivasyonu ve sonuçlarıoksidatif strestarafından tetiklenenbiyouyumsuz malzemelersırasındahemodiyaliz etkisihastaların prognozu. birçok ilerlemeye rağmenhemodiyaliz diyalizörleri,hemodiyalizin prognozuile derinden ilişkili komplikasyonları olan hastalaroksidatif stres, örneğindiyabet Mellitus zayıf kalıyor. Böylece etkilerini yeniden değerlendirdik.hemodiyalizDaha fazla iyileştirme için elektron spin rezonansına dayalı yöntemler kullanılarak çoklu reaktif oksijen türlerinin araştırılmasıbiyouyumlulukiçindehemodiyaliz. Yüksek akışlı polisülfon diyalizörleri kullanılarak hemodiyaliz uygulanan stabil durumdaki 31 hastayı kaydettik. Hemodiyalizin reaktif oksijen türleri üzerindeki etkileri iki yöntemle değerlendirildi: Çoklu hidrofilik reaktif oksijen türlerine karşı serum temizleme aktivitelerini değerlendiren MULTiS ve lipofilik karbon merkezli radikalleri tespit eden i-STrap. Önceki çalışmalara benzer şekilde, hemodiyaliz sonrasında serum hidroksil radikal temizleme aktivitesinin önemli ölçüde arttığını bulduk. Önceki çalışmaların aksine, alkoksil radikallerine karşı temizleme aktivitesinin önemli ölçüde azaldığını keşfettik.hemodiyaliz. Ayrıca, diyabetli hastalarda hemodiyaliz sonrasında alkil peroksil radikallerine karşı serum temizleme aktivitesinde azalma ve lipofilik karbon merkezli radikallerde artış görülmüştür. Bu sonuçlar, diyalizör membranlarındaki kapsamlı gelişmelere rağmen, formlarınReaktif oksijen türleriDiyaliz sırasında elimine edilebilecek reaktif oksijen türleri sınırlıdır ve hemodiyaliz sırasında çok sayıda reaktif oksijen türü yüksek seviyelerde kalır.

Anahtar Kelimeler:hemodiyaliz, biyouyumluluk, alkil peroksil radikal elektron spin rezonansı, MULTiS, i-STrap

BÖBREK İŞLEVLERİNE YÖNELİK %25 EKİNAKOSİT VE %9 AKTEOSİT İÇEREN DOĞAL ORGANİK SİSTANŞ EKSTRATINI ALMAK İÇİN BURAYA TIKLAYIN

Wecistanche Destek Hizmeti-Çin'deki en büyük cistanche ihracatçısı:

E-posta:wallence.suen@wecistanche.com

Whatsapp/Tel:+86 15292862950

Daha Fazla Özellik İçin Alışveriş Yapın Detaylar:

https://www.xjcistanche.com/cistanche-shop

Kronik böbrek hastalığı(CKD) ile ilişkili olduğu bilinmektedir.yüksek oksidatif stres. (-4)Üremik toksinin birikmesipro-oksidatif özelliklere sahip olupmikroenflamasyonkaynaklananpro-inflamatuar sitokinin yükselmesistemel özelliğidirKBH patofizyolojisi. (s-, Yaygın olarak yürütülen bir renal replasman tedavisi olan Hemodiyaliz (HD), KBH hastalarında oksidatif stresi azaltmak için iki ucu keskin bir kılıç görevi görür. HD devrelerindeki membran veya diğer yapay yüzeylerle temas nedeniyle polimorfonükleer lökositlerin aktivasyonu , HD tarafından indüklenen oksidatif stresin ana nedenidir.s-) Tersine, pro-oksidatif üremik toksinlerin, özellikle de trimetilamin-Noksit veya guanidino bileşikleri gibi düşük moleküler ağırlıklı hidrofilik bileşiklerin uzaklaştırılması, HD'nin antioksidatif doğasını iyileştirebilir, hayatta kalma oranının ve yaşam kalitesinin uzun vadede iyileşmesine yol açacakKBH'li hastalar. (2,13) ​​Ayrıca asidozun düzeltilmesi antioksidatif enzimlerin yeniden aktivasyonuna ve hacim yükünün azalmasına yol açarak kardiyonun önlenmesine yol açar. Vasküler komplikasyonlar antioksidan mekanizmalardır. (4 Bu nedenle, HD materyallerinin lökosit aktivasyonunu en aza indirmek ve antioksidatif etkileri maksimuma çıkarmak için gereklidir. Bu sorunun üstesinden gelmek için E vitamini kaplı diyalizör örneğinde olduğu gibi antioksidan ve biyouyumlu HD materyali geliştirilmiştir. (si7) Bununla birlikte, HD diyalizörlerindeki sayısız ilerlemeye rağmen, HD hastalarının, özellikle de yüksek derecede oksidatif bir durumu teşvik eden bir hastalık olan Diabetes Mellitus (DM) hastalarının prognozu tatmin edici değildir.(8)Bu endişeler kısmen, in vivo ayrıntıların çok çeşitli ve karmaşık olmasından kaynaklanmaktadır.oksidatif strese bağlı reaksiyonlaryeterince analiz edilmemiştir. Bu nedenle, bu çalışma, vücuttaki oksidatif ve antioksidan reaksiyonların her hedef bölgesinin biyokimyasal olarak tanımlanması gerektiği kavramına dayanarak, oksidatif stres reaksiyonlarının yukarı yönlü olayları olarak HD'nin reaktif oksijen türleri (ROS) dinamikleri üzerindeki etkisini açıklamayı amaçladı. belirli bir zaman ve mekanda. Bunun bir açıklaması birdetaylı analiz eksikliğiBu hücresel reaksiyonları uyaran oksidatif strese bağlı reaksiyonların yukarı akış tarafı. Oksidatif stres reaksiyonlarının uyarıcısı olarak görev yapan ROS'un tanımlanması veya oksidatif uyarıcılar oluşturmak için ROS arasındaki etkileşimler, yüksek reaksiyon hızları ve karmaşık reaksiyon zincirleri nedeniyle zordur. ROS tekdüze olmadığından ve bireysel ROS'ların in vivo reaksiyonlar sırasında spesifik özelliklere sahip olmasından dolayı, birden fazla ROS analizi gereklidir. (9-2n Bu nedenle, antioksidatif ve biyouyumlu malzemelerin kullanımına dayalı olarak biyouyumluluğu geliştirmek için, HD'nin ROS dinamiklerinde neden olduğu değişiklikleri anlamak gerekir.

HD sırasında ROS dinamiklerini araştırmak için yeni geliştirilen iki elektron spin rezonansı (ESR) tabanlı yöntem kullandık. çoklu hidrofilik serbest radikal temizleme tahlili (MULTIS) ve tam kanda lipofilik radikal tespit tahlili (i-STrap) ESR ile ROS temizleme aktivitesi üzerine yapılan araştırmalar kapsamlı olmasa da, türü tanımlamak ve dinamikleri incelemek için mevcut tek yöntem olmaya devam ediyor ROS'un. Yöntem, yüksek performanslı bir sıvı kromatografi tipi akış sistemini bir ESR sistemiyle birleştirir ve 5-(2,2-dimetil-1.3-propoksisiklofosforil)-5- kullanır metil-1-pirolinNoksit(CYMPPO)'yu döndürme tuzağı olarak kullanın. MULTIS, ROS temizleme ölçümü için geleneksel ESR analizlerine göre daha yüksek hassasiyet ve stabilite sağlar.22-24) Ortak yazarlarımızdan biri daha önce evre 5 KBH'li hastalarda MULTIS ile ölçülen ROS temizleme aktivitelerini bildirmişti. Ancak HD'nin etkisini değerlendirmediler.e2) Ayrıca, i-STrap yöntemi, 2-difenilfosfinoil-2-metil-3,{ kullanarak tam kandaki ROS'u tespit eden ESR tabanlı bir yöntemdir. {20}}dihidro-2H-pirol N-oksitDPhPMPO)döndürme tuzağı olarak kullanılır ve organik ekstraksiyon sonrasında ESR'yi ölçer, böylece lipofilik ROS.2s'yi yansıtır.26 Bu çalışmada, birkaç ROS seviyesinin HD tarafından arttığı ve ortadan kaldırılmadığı, HD sonrasında radikal zincir reaksiyonlarının hala yeterince kontrol edilmediğini göstermektedir. Bu, şunları etkileyebilir:KBH'li hastaların prognozu.

Malzemeler ve yöntemler

Denekler ve bilgilendirilmiş onam. İnsan denekler üzerinde gerçekleştirilen tüm işlemler, bireysel yazılı onam alındıktan sonra gerçekleştirildi. Kullanılan protokol Tsukuba Teknoloji Üniversitesi Komitesi (Yetki No. 201809) tarafından onaylandı. Bu gözlemsel bir çalışmadır; bu nedenle hastalara müdahaleler yapıldı. Çalışmaya toplam 31 stabil HD hastası dahil edildi. Her hasta için klinik ve demografik bilgiler elde ettik ve kaydettik. Tüm hastalar, her bireyin vücut yapısına göre uyarlanmış, çeşitli membran yüzey alanlarına sahip yüksek akışlı polisülfon membran diyalizörleri (Toray Medical Co., Ltd., Tokyo, Japonya) ile tedavi edildi. Hastalar son dönem böbrek hastalığının nedenine göre iki gruba ayrıldı: diyabetik olmayan grup (DM olmayan grup, n=17) ve diyabetik grup, n=14).

Örnek koleksiyon. HD devresinin arteriyel tarafında bulunan numuneden diyaliz tedavisinin başlangıcında ve sonunda kan numuneleri alındı. MULTIS ölçümleri için serumlar ayrılarak {{0}} derecelik dondurucuda (ölçüm yapılana kadar, i-STrap ölçümleri için) saklandı. Tam kan örnekleri ise izin verilen heparin kaplı tüplere toplandı. ölçümlerden önce bir saat bekletilmelidir. Serumdaki çoklu serbest radikal temizleme aktivitesinin ölçümleri Hidrofilik ROS temizleme aktiviteleri, daha önce tarif edilen ve küçük modifikasyonlar içeren protokoller kullanılarak MULTIS yöntemiyle ölçülmüştür.2227) Beş ROS'a, yani hidroksil radikaline(OH) karşı temizleme aktiviteleri , süperoksit(0,"), alkoksil radikali (RO"), alkil peroksil radikali (ROO") ve singlet oksijen ('0,), ölçüldü. Bir X-bant ESR spektrometresi( RR-Xl ESR: Radical Research Inc., Tokyo, Japonya) 100 kHz alan modülasyonu ve WN-RAD operasyon yazılımı (Radical Research Inc.) kullanıldı. Kullanılan ESR dönüş yakalama reaktifleri " için CYPMPO'ydu. 'O' için OH, O, RO' ve ROO' ve 4-hidroksi-2,2,6,6-tetrametilpiperidin (TEMP). Tipik spektrometre ayarları şu şekildeydi: alan modülasyon genişliği.0,1 mT; mikrodalga gücü, 10 mW; alan tarama genişliği ve hızı+7,5 mT/2 dk; ve zaman sabiti, 0,1 s. Her ROS, 200W orta basınçlı cıva/ksenon ark lambasıyla donatılmış bir aydınlatıcıRUVF-203SR UV aydınlatıcı, Radical Research Inc.) tarafından UV/görünür ışıkla yerinde aydınlatma yoluyla üretildi ve rezonatör boşluğuna bağlı kuvars ışık kılavuzu. ROS üretmek için kullanılan ışık kaynakları, aydınlatma süreleri, öncüller ve ışığa duyarlılaştırıcılar Tablo 1'de özetlenmiştir. ROS temizleme aktiviteleri daha önce açıklanan bir yönteme göre hesaplanmış22) ve bilinen saf temizleyicilere eşdeğer bir birime dönüştürülmüştür: OH için glutatyon (GSH) ve 'O, O için süperoksit dismutaz (SOD), RO için 6-hidroksi-2,5,7,8-tetrametilkroman-2-karboksilik asit (Trolox)' ve a ROO'MULTIS için lipoik asit Her ROS için ölçümler üç kopya halinde gerçekleştirildi.

Lipofilik ölçümü

İ-Strap kullanılarak tam kanda Ros temizleme aktivitesi. Lipofilik RO temizleme aktivitesi, üreticinin protokolüne ve önceki bir rapora dayalı olarak i-STrap ESR ölçümü ki(Dojin-Glocal/Dojindo, Kumamoto, Japonya) kullanılarak ölçülmüştür.2s Bu yöntem, tam kandaki antioksidanlar ile DPhPMPO arasındaki rekabetçi reaksiyona dayanmaktadır. tert-bütil hidroperoksit (BuOOHradikal) ile karıştırılmıştır. Tam kan numuneleri DPhPMPO(1{{10}} mM) ve test-BuOOH (10 mM) ile 30 dakika boyunca oda sıcaklığında inkübe edilmiştir. İnkübasyondan sonra döndürme işlemi gerçekleştirilmiştir. organik fazdaki katkı maddeleri kloroform ve metanol çözeltileri kullanılarak ekstre edildi; ESR ölçümleri bu organik numuneler kullanılarak gerçekleştirildi. Ölçüm koşulları, +5 olarak ayarlanan alan tarama genişliği ve hızı haricinde MULTIS ölçümü ile aynıydı. 0,0 mT/2 dk, i-STrap ölçümü için spesifik antioksidanlar yoktu; bu nedenle temizleme aktivitesi bir10/-1 değeri olarak ifade edildi; burada "0", numune olmadan sinyal yoğunluğunu belirtir ve "', sinyali belirtir bir numune ile yoğunluk.(28)Reaktifler. CYMPPO, RR INC.'den (Japonya) temin edildi; riboflavin, 2,2'-azobis (2-amidinopropan) dihidroklorür(AAPH), text-BuOOH, dimetil sülfoksit(DMSO) ve Bengal gülü Sigma-Aldrich Japonya'dan (Tokyo, Japonya) satın alındı ​​ve TEMP satın alındı Tokyo Kimya Endüstrisinden (Tokyo, Japonya). Hidrojen peroksit ve tamponlar, WakoChemical Co.'dan (Osaka, Japonya) elde edildi. İstatistiksel analiz."İstatistiksel analiz, Mac OS X bilgisayar yazılımı (GraphPad Software Inc., La Jolla, CA) için Prism 6 kullanılarak yapıldı. Veriler, Öğrencinin programı kullanılarak test edildi. eşleştirilmiş t testi Veriler %95 güven aralığı (%95 GA) ile ortalama değerler olarak ifade edildi.