Herba Cistanches Neden Böbrek Yetmezliği Sendromunu Tedavi Etmek İçin Kullanılabilir?

Metabolik profil oluşturma, hidrokortizonla indüklenen 'böbrek eksikliği sendromu' hayvan modelinde Herba Cistanches'in terapötik etkilerini ortaya koymaktadır.

İletişim: emily.li@wecistanche.com

Yunping Qiu, Minjun Chen, Mingming Su, Guoxiang Xie, Xin Li, Mingmei Zhou, Aihua Zhao, Jian Jiang ve Wei Jia

Soyut

Arka fon

Herba Cistanches(Roucongrong), Shenxu Zheng'in ('böbrek yetmezliği sendromu'). Bununla birlikte, bitkisel müdahaleye verilen mekanizmalar ve sistemik metabolik tepkiler belirsizdir.

yöntemler

GC-MS tabanlı metabolik profillemeyi kullanarak, metabolik tepkileri araştırdık.Herba Cistancheshidrokortizonla indüklenen fare modelinde müdahaleböbrek yetmezliği sendromu'.

Sonuçlar

Hidrokortizon enjeksiyonundan sonra sıçanların metabolik profilleri, 1. günden 10. güne kadar değişen farklı zaman noktalarında doz öncesi metabolik durumdan saparken, hem hidrokortizon hem de su özü ile tedavi edilen sıçanların metabolik profilleri,Herba Cistanches10. günde doz öncesi duruma geri döndü.

Çözüm

müdahalesiHerba Cistanchessıçanlarda hidrokortizonla indüklenen metabolik düzensizlikten sistemik bir iyileşmeye neden oldu. Bu çalışma aynı zamanda metabolik profillemenin bitkisel ilaçların terapötik mekanizmalarını incelemede yararlı olduğunu da göstermektedir.

Arka fon

Biyokimyasal reaksiyonların, kontrol mekanizmalarının ve enzim aktivitelerinin modülasyonu yoluyla, birçok ilaç veya kimyasal, tek hücre, doku veya vücut sıvılarında bulunan metabolitlerin dalgalanmasına neden olur [1]. Metabolik profil oluşturma, yani çok değişkenli istatistiklerle birleştirilmiş gelişmiş bir analitik alet aracılığıyla düşük moleküler ağırlıklı (MW < 1000="" da)="" metabolitlerin="" araştırılması,="" canlı="" sistemlerin="" ksenobiyotiklere="" karşı="" sistemik="" tepkilerini="" gösterebilir.="" ayrıca,="" bir="" organizmanın="" tüm="" çok="" faktörlü="" kalıtsal="" ve="" çevresel="" olarak="" etkilenen="" metabolik="" profillerini,="" sistemik="" düzeyde="" metabolik="" düzenleyici="" ağdaki="" toksin="" ve/veya="" hastalık="" kaynaklı="" rahatsızlıklar="" veya="" dengesizliğin="" fizyopatolojik="" sonuçları="" dahil="" olmak="" üzere="" kataloglamak="" teknik="" olarak="" da="" mümkündür.="" bugüne="" kadar,="" bazı="" ilaçların="" ve="" kimyasalların="" taranması,="" teşhisi,="" hastalıkların="" prognozu="" [2-4]="" ve="" güvenlik="" değerlendirmesinde="" metabolik="" profil="" oluşturulmuştur="">

Tek başına veya kombinasyon halinde uygulanan nükleer manyetik rezonans (NMR) [12] ve kütle spektrometrisi (MS) [13], toksin ve/veya hastalık kaynaklı rahatsızlıkların metabolik sonuçlarının profillenmesinde ve karakterize edilmesinde kullanılmıştır. Sıkıcı numune ön işlemesi gerektirmeyen NMR, karmaşık ve bozulmamış biyolojik numunelerden içsel bilgi elde etmek için hızlı ve basit bir yöntemdir. Öte yandan, metabolik profillemede tirelenmiş MS'in geniş uygulaması, yüksek duyarlılığı ve kullanılabilirliğinden kaynaklanmaktadır [14, 15]. Özellikle, GC-MS tabanlı metabolik profil oluşturma, ilaçların ve herbisitlerin in vivo mekanizmalarını, hastalıkların biyobelirteçlerini [16] ve değiştirilmiş gen ekspresyonunun metabolizma üzerindeki etkilerini keşfetmede ve biyoteknolojik uygulamalarda organizmaların performansını izlemede kullanılmıştır [17-20] .

Herba Cistanches(Roucongrong), çölde yetişen yaygın bir Çin tonik bitkisidir ve hafızayı [21] ve/veya cinsel gücü [22], serbest radikalleri temizlemeyi, yaşlanmayı geciktirmeyi [23-26] ve sinirleri korumayı [27] geliştirmek için belirgin aktiviteler sergiler. , 28]. Asırlardır,Herba CistanchesShenxu Zheng'in ('böbrek yetmezliği sendromu') [29]. Son zamanlardaHerba Cistancheshidrokortizon kaynaklı böbrek bozukluklarını iyileştirdiği gösterilmiştir [30]; bununla birlikte, metabolik sonuçları net değildir. Önceki çalışmamız [31], yüksek dozda hidrokortizona maruz kalan sıçanların metabolik profillerinin (yani,böbrek yetmezliği sendromu') [32], idrarda endojen metabolitlerin benzersiz bir biyokimyasal paterni gösterdi. Bu sonuçlar, Herba Cistanches'in hidrokortizonun anormal metabolik etkilerini tersine çevirip değiştiremeyeceğini araştırmak için GC-MS tabanlı metabolik profillemeyi kullanarak hidrokortizon modifikasyonunu takiben tutarlı biyokimyasal değişikliklerin mekanizmalarını incelememize ilham verdi.

Cistanche böbrek fonksiyonunu iyileştirebilir

yöntemler

Malzemeler ve enstrüman

Herba CistanchesŞanghay Leiyunshang Pharmaceutical Co Ltd'den (Çin) satın alınmış ve standart bir protokole göre Dr. Mengyue Wang (Pharmacognostics Laboratuvarı, Eczacılık Fakültesi, Şanghay Jiao Tong Üniversitesi) tarafından Cistanche Deserticola YC Ma olarak tanımlanmıştır [33]. Enjeksiyon için hidrokortizon solüsyonu (yüzde 00.5) Shanghai Xinyi Pharmaceutical Co.'dan (Çin) satın alındı. Türevlendirme reaktifleri, 1000:1 oranında karıştırılmış N-metil-N-trimetilsilil tri floroasetamid (MSTFA) (Sigma-Aldrich Inc, ABD) ve Trimetiliyodosilan (TMSI) (Sigma-Aldrich Inc, ABD) idi. Deneyde kullanılan tüm reaktifler analitik derecedeydi. Ultra saf su, bir Millipore saflaştırma sistemi (18.2 MΩ, ABD) ile hazırlandı. Metabolik kafesler Suzhou Fengshi Laboratory Animal Experiment Co Ltd'den (Çin) satın alındı.

Herba Cistanches özü hazırlanması

Beş yüz gram kaba toz haline getirilmiş bitki materyali, 2 saat boyunca 2 L ultra saf su ile geri akıtıldı. Süzüldükten sonra öz, bir Buchi döner buharlaştırıcı üzerinde orijinal hacminin yaklaşık onda birine kadar buharlaştırıldı ve bir ölçülü balonda ultra saf su ile 250 mL'ye seyreltildi. Ham maddenin nihai konsantrasyonuHerba Cistanchesekstrakt 2 g/mL idi.

Dozaj ve numune alma

Bu çalışmadaki tüm hayvanların ele alınması, ulusal yönergelere uygundu ve Şanghay, Çin'deki Şanghay Geleneksel Çin Tıbbı Üniversitesi, Laboratuvar Hayvanları Merkezi'nde gerçekleştirildi. Shanghai Laboratory Animal Co Ltd'den (Çin) toplam 19 adet dokuz haftalık erkek Wistar faresi satın alındı. Tüm hayvanlar, düzenlenmiş sıcaklık (20–22 derece) ve nem (yüzde 60 ± 10) olan bir bariyer sisteminde ve sabah 8:00'de ışıkların açık olduğu 12 saatlik bir karanlık/aydınlık döngüsünde tutuldu. Ratlara ad libitum yem ve su verildi. İki haftalık alışmadan sonra, hayvanlar bireysel metabolik kafeslere transfer edildi ve rastgele üç gruba ayrıldı: (1) hidrokortizon (yüzde 5) 1.5 mg/100 g'de ip olarak enjekte edildiği tedavi grubu (n=7) vücut ağırlığının ardından oral uygulamaHerba Cistanches10 gün için özüt; (2) hidrokortizonun (yüzde 5) 10 gün boyunca günde bir kez 1.5 mg/100 g ip olarak enjekte edildiği model grubu (n=7); ve (3) araca 10 gün boyunca yaklaşık 0.6 mL'de ip enjekte edildiği kontrol grubu (n=5).Herba Cistanchestedavi grubuna Shen ve ark.'nın önerisine göre 20 g/kg dozunda uygulandı. [30]. Belirli zaman aralıklarında yirmi dört saatlik idrar örnekleri toplanmıştır: doz öncesi (-24 – 0 saat), 1. gün (0 – 24 saat), 3. gün, 7. gün ve 10. Gün. Tüm idrar numuneler, askıdaki kalıntıları uzaklaştırmak için 10 dakika boyunca santrifüjlendi (6383 × g, LG 16-W, Beijing Jingli Centrifuge Co Ltd, Çin) ve sonraki GC-MS analizi için hemen -80 derecede saklandı.

Numune hazırlama ve GC-MS

GC-MS, önceki çalışmamıza göre küçük değişikliklerle [31] yapıldı. Kısaca, trimetilsilil (TMS) türevli analitin her 0,5 μL alikotu kaynaşmış silika kapiler kolona (17 m x 220 μm iç çap, 0.11 μm film kalınlığı) enjekte edildi; HP Ultra{ {9}}, Agilent J&W Scientific, ABD). GC-MS, tirelenmiş bir PerkinElmer gaz kromatografisi ve TurboMass-Auto sistemi XL kütle spektrometresi (PerkinElmer Inc, ABD) üzerinde gerçekleştirildi.

Veri işleme ve çok değişkenli analiz

GC-MS verileri, DataBridge (PerkinElmer Inc, ABD) aracılığıyla NetCDF formatına dönüştürüldü. Özel komut dosyaları MATLAB 7'de çalıştırıldı.0 (The MathWorks Inc, ABD) taban çizgisi düzeltmesi, tepe ters evrişim ve hizalama, dahili standart dışlama ve kromatogramın toplam toplamına normalleştirme gerçekleştirmek için. Rastgele tepe indeksini (eşleştirilmiş tutma süresi-m/z), örnekleri (gözlemleri) ve normalleştirilmiş tepe alanlarını (değişkenleri) kapsayan sonuçtaki 3-boyutlu matris SIMCA-P 11.0 yazılımına aktarıldı. çok değişkenli analiz için paket (Umetrics, İsveç).

Ofsetleri ortadan kaldırmak için ortalama merkezleme sütun bazında yapıldı. Ölçülen tüm metabolitler, çok değişkenli analizden önce otomatik ölçekleme (birim varyansa ölçeklendirilmiş) ile eşit düzeyde işlendi. Temel bileşen analizi (PCA) SIMCA-P 11.0 yazılımı kullanılarak denekler arasındaki genel kümeleme, gruplandırma ve eğilimleri önceden bilgi sahibi olmadan ortaya çıkarmak için yapıldı. Birinci temel bileşen (PC1) verilerdeki en fazla varyansı temsil eder. İkinci temel bileşen (PC2), PC1'e diktir ve PC1 tarafından açıklanmayan maksimum varyans miktarını temsil eder. Kalan ana bileşenler aynı şekilde inşa edilmiştir. Bu arada, PCA puanlarının ortalama yörüngeleri, sendromun zaman içinde başlangıcı, ilerlemesi ve/veya iyileşmesi için dinamik bir gösterge sağlamak için kullanıldı. Kısmi en küçük kareler - diskriminant analizinden (PLS-DA) gelen korelasyon katsayıları, gruplar arasındaki ayrımdan sorumlu olan farklı şekilde ifade edilen metabolitleri daha fazla yakalamak için her bir değişkenin önemini sıralamak için kullanıldı. PLS-DA, çoklu doğrusal tahmin ediciler ve yanıt değişkenleriyle ilgilenen genelleştirilmiş bir çoklu regresyon yöntemi olan kısmi en küçük kareler (PLS) yönteminden türetilmiştir [34]. PLS-DA, SIMCA-P 11.0 yazılımı [35] kullanılarak gerçekleştirilmiştir. Tipik bir 7-yuvarlak çapraz doğrulama yapıldı. Modeli doğrulamak için örneklerin yedide biri her turda modelden çıkarıldı. Bu prosedür, her numune bir kez hariç tutulana kadar çapraz doğrulama için yinelemeli bir şekilde tekrarlandı.

Herba Cistanches böbrek yetmezliği sendromunu tedavi etmek için kullanılabilir

tek değişkenli analiz

Çok değişkenli analizden tanımlanan diferansiyel olarak eksprese edilen metabolitler de MATLAB 7.0 yazılımında (The MathWorks Inc, ABD) parametrik olmayan Kruskal-Wallis testi ile P < 0.05 anlamlılık düzeyinde doğrulandı. .

Sonuçlar ve tartışma

GC-MS spektrumlarının yorumlanması

Tedavi grubu, model grubu ve kontrol grubundan 10. günde sıçan idrarının tipik GC-MS toplam iyon akımı (TIC) kromatogramları Şekil 1'de gösterilmektedir. Yazılım tabanlı bir tepe noktası ile birlikte optimize edilmiş GC-MS analiz protokolümüzün kullanılması dekonvolüsyon prosedüründe, idrar numunelerinin en az yüzde 90'ında tutarlı bir şekilde toplam 117 ayrı metabolit tespit edildi. İlgi piklerinin bileşik tanımlaması, kütle spektral fragmanı NIST (Ulusal Standartlar ve Teknoloji Enstitüsü) referans kitaplıkları, Wiley kitaplıkları ve referans standartları ile karşılaştırılarak gerçekleştirilmiştir. Çoğunluğu amino asitler, poliaminler, yağ asitleri, pürinler ve esas olarak enerji metabolizması, lipit metabolizması ve amino asit metabolizması ile ilgili adrenal hormonlar olan 117 metabolitten 23'ünü doğrulayabildik (yüzde 20).

Şekil 1 Tedavi grubu (A), model grubu (B) ve kontrol grubundan (C) 10. günde idrarın tipik GC-MS toplam iyon akımı (TIC) kromatogramları.

İdrar örneklerinde zamana bağlı değişiklikler

Model grubu ve tedavi grubundan elde edilen PCA puanlarının ortalama yörüngeleri Şekil 2'de gösterilmektedir.böbrek yetmezliği sendromuhidrokortizon ile tek başına veya kombinasyon halinde indüklenenHerba Cistanchestedavi. Model grubunda 1. ve 3. gündeki metabolik paternler 7. ve 10. gündekilerden farklıydı, bu da 1. ve 3. günlerdeki metabolik düzenleyici ağın yüksek dalgalanmalarla geçici bir dönemden geçmiş olabileceğini ve bozulan ağın bozulduğunu düşündürdü. 7. ve 10. günlerde restore edilmiş olabilir ve bu da sonuçta doz öncesi duruma yakın bir stabil modele yol açmış olabilir. Benzer şekilde, 1. gün ve 3. günün metabolik düzeninin, tedavi grubunda doz öncesi olandan açıkça sapmış olması, baskın olanı gösterdi.böbrek yetmezliği sendromu' durum. Bu dönemde, hidrokortizonun etkileri muhtemelen diğerlerine göre daha baskındı.Herba CistanchesAyıkla. Bu bulgular, her iki gruptaki sıçanların 1. ve 3. günlerde daha az aktivite gösterdiğine dair genel gözlemle tutarlıydı. İlginç bir şekilde, 7. ve 10. günlerdeki metabolik modeller kademeli olarak ve önemli ölçüde doz öncesi duruma yaklaştı, bu da şunu düşündürdü:Herba Cistancheshidrokortizona maruz kalan sıçanlar üzerinde bazı karşı veya terapötik etkilere sahipti. Bu sonuçlar klinik bulguları desteklemektedir.Herba Cistanchestedavisinde etkilidir.böbrek yetmezliği sendromu'. Genel olarak, her iki yörünge de hastalığın başlangıcı, ilerlemesi ve iyileşmesinin görsel, genel ve dinamik bir resmini sağlar.böbrek yetmezliği sendromu'.

Şekil 2 Model grubu (-●-) ve tedavi grubundan (--●--) idrar örnekleri için PC1 ve PC2 puanlarının ortalama yörüngesi. Her nokta, farklı zaman noktalarında, yani doz öncesi, 1, 3, 7 ve 10. günlerde bir ortalama puanı belirtir. Hata çubuğu, birinci ana bileşen tarafından elde edilen her zaman noktası için standart sapmayı temsil eder.

İdrar örneklerinin karşılaştırmalı metabolik analizi

Hidrokortizonun metabolik etkilerini daha iyi anlamak için kontrol, model ve tedavi gruplarından elde edilen metabolik profilleri karşılaştırdık. Üç grubun genel kümelenmesi, çeşitli zaman noktalarında, yani doz öncesi, 3. gün ve 10. günde kolaylıkla gözlemlenebilir (Şekil 3). Doz öncesi idrar profillerinde ayrılma eğilimi olmamasına rağmen, hidrokortizon maruziyetinden sonraki 3. günde metabolik profiller kontrol grubununkinden sapmıştır. Hidrokortizon ile metabolik bozulma hem model hem de tedavi gruplarında ortaya çıktı. Ancak, art arda 7-günlük bir tedaviden sonraHerba Cistanches, tedavi grubunun metabolik profilleri tekrar kontrol grubununkilerle karşılaştırılabilir hale geldi, bu da şunu gösteriyor:Herba Cistanchesbozulmuş metabolizmayı etkili bir şekilde restore etti.

Şekil 3 Farklı zaman noktalarında kontrol grubu (siyah elmas), model grubu (kırmızı elmas) ve tedavi grubundan (mavi elmas) metabolik profillerin karşılaştırması: doz öncesi (A), 3. gün (B) ve 10. gün (C). PCA puanları grafiğindeki her nokta, bir sıçandan elde edilen verileri temsil eder.

Metabolik profillerin ayırıcı tanımlaması

Kontrol grubu sıçanları ve model grubu (yani hidrokortizonla indüklenen) sıçanlar arasında daha kolay ayrım yapmak için farklı metabolik profillerdeki anahtar metabolitleri tanımlamak için çapraz doğrulanmış bir PLS-DA modeli kullanıldı.Herba Cistanches3. günde tedavi (Tablo 1). Gruplar arasındaki her bir anahtar metabolitin nispi konsantrasyonundaki kat değişiklikleri belirlendi ve doz öncesi, 3. gün ve 1. günde 0 gruplar arasındaki değişikliklerin karşılık gelen görselleştirmesi üretildi (Şekil 4). Şekil 4 ve Tablo 1'de gösterildiği gibi, endojen metabolitlerin çoğu model grubunda önemli ölçüde artar veya azalırken, tedavi grubundakiler 1. ve 3. günlerde gözlendiği gibi geçici bir periyot geçirdi ve kademeli olarak kontrol (normal) seviyesine yaklaştı . Örneğin, 10. günde tedavi grubundaki metabolitlerin hafif varyasyonu (1,1-1,5 kat) ile karşılaştırıldığında, idrar tirozin, tiramin, dopamin ve noradrenalinin büyük ölçüde artmış seviyeleri (1,7-3,0 kat) gözlenmiştir. deney boyunca model grubu. Önceki çalışmamız, glukokortikoidler tarafından indüklenen gelişmiş katekolamin metabolizmasının, bağışıklık fonksiyonlarının aşırı tüketimi ile sonuçlandığını ve böylece 'böbrek yetmezliği sendromu' [31]. Herba Cistanches, bağışıklık sistemini geliştiren bir tonik bitki [36], hidrokortizonun bazı etkilerine karşı koyabilir.Herba Cistanchesnormal bir metabolik düzenleyici ağı da geri yükleyebilir. Moleküler biyoloji, hücre biyolojisi ve bitki kimyası gibi farklı yaklaşımlarla daha ileri deneyler,Herba Cistanches(ve bileşenleri) 'böbrek yetmezliği sendromu'.

Tablo 1 Mevcut çalışmanın metabolik profiline dahil edilen metabolitlerin listesi

Kimden: Metabolik profil oluşturma, terapötik etkileri ortaya çıkarırHerba Cistancheshidrokortizonla indüklenen bir hayvan modelindeböbrek yetmezliği sendromu'

Not: Tüm bileşiklerin korelasyon katsayıları (düzeltme katsayıları), kontrol grubu ve model grubu arasında 3. günde çapraz doğrulanmış bir PLS-DA modelinden (Q2Ycum=0.899, iki bileşen kullanan tatmin edici bir model) hesaplanmıştır. birlikte veya ayrıHerba Cistanchestedavi. Ek olarak, kat değişiklikleri parametrik olmayan Kruskal-Wallis testi ile test edildi. Kw (P) testin P değerlerini ifade etmektedir. H=kontrol grubu, M=model grubu, D=tedavi grubu. Örneğin, H/M/0, doz öncesi durumdaki göreli kat değişikliklerini (modelden kontrole) temsil eder.

Şekil 4 Anahtar metabolitlerin kat değişiklikleri. Kırmızı renk nispi yüksek konsantrasyonları (kat değişiklikleri > 1.5), yeşil renk nispi azaltılmış konsantrasyonları gösterir (kat değişiklikleri < -1.5).="" -1.5="" ile="" 1.5="" arasında="" değişen="" kıvrım="" değişiklikleri,="" fizyolojik="" varyasyonlar="" olarak="" kabul="" edilir.="" kat="" değişimi="" (m/h,="" d/h),="" model="" grubunun="" veya="" tedavi="" grubunun="" kontrol="" grubuna="" konsantrasyon="">

Çözüm

GC-MS kullanan mevcut metabolik profilleme çalışması şunu göstermiştir:Herba Cistanchesiçin bir hayvan modeli olan sıçanlarda hidrokortizonla indüklenen metabolik düzensizlikten sistemik bir iyileşmeye neden oldu.böbrek yetmezliği sendromu'. Bu çalışma aynı zamanda metabolik profil oluşturmanın bitkisel ilaçların terapötik etkilerini incelemek için yararlı bir yöntem olduğunu da göstermektedir.

Kısaltmalar

MS: kütle spektrometrisi

GC-MS: gaz kromatografisi-kütle spektrometrisi

NMR: nükleer manyetik rezonans

PCA: temel bileşen analizi

PLS-DA: kısmi en küçük kareler – diskriminant analizi

Referanslar

1. Nicholson JK, Lindon JC, Holmes E: 'Metabonomics': Biyolojik NMR spektroskopik verilerin çok değişkenli istatistiksel analizi yoluyla canlı sistemlerin patofizyolojik uyaranlara metabolik tepkilerini anlamak. Ksenobiyotik. 1999, 29 (11): 1181-1189. 10.1080/004982599238047.

2. Brindle JT, Antti H, Holmes E, Tranter G, Nicholson JK, Bethell HWL, Clarke S, Schofield PM, McKilligin E, Mosedale DE, Grainger DJ: 1H kullanılarak koroner kalp hastalığının varlığının ve ciddiyetinin hızlı ve noninvaziv teşhisi -NMR tabanlı metabonomik. Nat Med. 2002, 8 (12): 1439-1444. 10.1038/nm802.

3. Constantinou MA, Papakonstantinou E, Benaki D, Spraul M, Shulpis K, Koupparis MA, Mikros E: Kan lekeleri kullanılarak doğuştan metabolizma hatalarının saptanmasında temel bileşen analizi ile birlikte nükleer manyetik rezonans spektroskopisinin uygulanması: Metabonomik bir yaklaşım. Anal Chim Acta. 2004, 511 (2): 303-312. 10.1016/j.aca.2004.02.012.

4. Beckonert O, Monnerjahn J, Bonk U, Leibfritz D: 1H-NMR spektroskopisi ve kendi kendini organize eden haritalar kullanarak meme kanseri dokusundaki metabolik değişiklikleri görselleştirmek. NMR Biomed. 2003, 16 (1): 1-11. 10.1002/nbm.797.

5. Mortishire-Smith RJ, Skiles GL, Lawrence JW, Spence S, Nicholls AW, Johnson BA, Nicholson JK: İlaç kaynaklı toksisite mekanizması olarak bozulmuş yağ asidi metabolizmasını tanımlamak için metabonomik kullanımı. Kimyasal Res Toksikol. 2004, 17 (2): 165-173. 10.1021/tx034123j.

6. Waters NJ, Holmes E, Williams A, Waterfield CJ, Duncan Farrant R, Nicholson JK: -naftilizotiosiyanatın sıçanlarda karaciğer, idrar ve plazma üzerindeki zamana bağlı metabolik etkileri üzerine NMR ve model tanıma çalışmaları: Bütünleştirici bir metabonomik yaklaşmak. Kimyasal Res Toksikol. 2001, 14 (10): 1401-1412. 10.1021/tx010067f.

7. Coen M, Lenz EM, Nicholson JK, Wilson ID, Pognan F, Lindon JC: NMR spektroskopisi kullanılarak farede asetaminofen toksisitesinin entegre bir metabonomik araştırması. Kimyasal Res Toksikol. 2003, 16 (3): 295-303. 10.1021/tx0256127.

8. Small-Howard A, Turner H: Tütün türevli materyallere maruz kalma, mast hücrelerinde salgılanan proteinazların aşırı üretimine neden olur. Toxicol Appl Pharmacol. 2005, 204 (2): 152-163. 10.1016/j.taap.2004.09.003.

9. Waters NJ, Waterfield CJ, Farrant RD, Holmes E, Nicholson JK: Gömülü toksisitenin metabonomik dekonvolüsyonu: Tiyoasetamid hepato- ve nefrotoksisiteye uygulama. Kimyasal Res Toksikol. 2005, 18 (4): 639-654. 10.1021/tx049869b.

10. Robertson DG: Toksikolojide metabonomik: Bir inceleme. Toksikol Bilimi. 2005, 85 (2): 809-822. 10.1093/toksik/kfi102.

11. Robertson DG, Bulera SJ: Yüksek verimli toksikoloji: Pratik düşünceler. Curr Opin İlaç Keşfi Dev. 2000, 3 (1): 42-47.

12. Nicholson JK, Connelly J, Lindon JC, Holmes E: Metabonomics: İlaç toksisitesini ve gen fonksiyonunu incelemek için bir platform. Nat Rev İlaç Diskov. 2002, 1 (2): 153-161. 10.1038/nrd728.

13. Taylor J, King RD, Altmann T, Fiehn O: Metabolomiklerin istatistik ve makine öğrenimi kullanarak bitki genotip ayrımcılığına uygulanması. Biyoinformatik. 2002, 18 (EK 2): S241-S248.

14. Wilson ID, Nicholson JK, Castro-Perez J, Granger JH, Johnson KA, Smith BW, Plumb RS: Yüksek çözünürlüklü "ultra-performans" sıvı kromatografisi, farklı metabolik yol profilleme için bir araç olarak oa-TOF kütle spektrometrisine birleştirildi. fonksiyonel genomik çalışmalar. J Proteome Res. 2005, 4 (2): 591-598. 10.1021/pr049769r.

15. Jonsson P, Gullberg J, Nordstrom A, Kusano M, Kowalczyk M, Sjostrom M, Moritz T: GC/MS ile analiz edilen geniş metabolomik numune serilerindeki farklılıkları tanımlamaya yönelik bir strateji. Anal Kimya 2004, 76 (6): 1738-1745. 10.1021/ac0352427.

16. Ohdoi C, Nyhan WL, Kuhara T: Lesch-Nyhan sendromunun gaz kromatografisi-kütle spektrometrisi tespiti kullanılarak kimyasal teşhisi. J Chromatogr, B: Anal Technol Biomed Life Sci. 2003, 792 (1): 123-130. 10.1016/G1570-0232(03)00277-0.

17. Fiehn O, Kopka J, Dormann P, Altmann T, Trethewey RN, Willmitzer L: Bitki fonksiyonel genomiği için Metabolit profili. Nat Biyoteknoloji. 2000, 18 (11): 1157-1161. 10.1038/81137.

18. Lafaye A, Junot C, Pereira Y, Daniel G, Tabet JC, Ezan E, Labarre J: Kombine proteom ve metabolit-profilleme analizleri, maya kükürt metabolizmasına ilişkin şaşırtıcı içgörüler ortaya koymaktadır. J Biol Chem. 2005, 280 (26): 24723-24730. 10.1074/jbc.M502285200.

19. Schauer N, Steinhauser D, Strelkov S, Schomburg D, Allison G, Moritz T, Lundgren K, Roessner-Tunali U, Forbes MG, Willmitzer L, Fernie AR, Kopka J: Metabolitlerin hızlı tanımlanması için GC-MS kütüphaneleri karmaşık biyolojik örneklerde. FEBS Lett. 2005, 579 (6): 1332-1337. 10.1016/j.febslet.2005.01.029.

20. Willse A, Belcher AM, Preti G, Wahl JH, Thresher M, Yang P, Yamazaki K, Beauchamp GK: Karşılaştırmalı bir gaz kromatografisi/kütle spektrometrisi deneyinin istatistiksel analizi ile majör histo-uyumluluk kompleksi tarafından düzenlenen vücut kokularının tanımlanması. Anal Kimya 2005, 77 (8): 2348-2361. 10.1021/ac048711t.

21. Wang XW, Wang XF, Wu LY: Cistanche Deserticola'nın feniletanoid glikozitlerinin farelerde hatırlanmasının geliştirilmesi. Rep Chin Ecz. 2002, 19: 41-42.

22. Xie JH, Wu CF: Cistanche Deserticola'nın etanolik özütünün sıçan beynindeki monoamin nörotransmiterlerinin içeriği üzerindeki etkisi. Zhongcaoyao. 1993, 24: 417-419.

23. Li LL, Wang XW, Wang XF: Antilipid peroksidasyonu ve glikozitlerin antiradyasyon etkisibitkisel Cistanches.Çene J Çene Mater Med. 1997, 22 (6): 364-367.

24. Shahat AA, Nazif NM, Abousetta LM, Ibrahim NA, Cos P, Van Miert S, Pieters L, Vlietinck AJ: Duranta repens'in fitokimyasal incelemesi ve antioksidan aktivitesi. Fitoter Araş. 2005, 19 (12): 1071-1073. 10.1002/ptr.1766.

25. Gao J, Igarashi K, Nukina M: Caryopteris incana'dan üç yeni feniletanoid glikozit ve bunların antioksidan aktiviteleri. Kimya Eczacı Boğa. 2000, 48 (7): 1075-1078.

26. Kyriakopoulou I, Magiatis P, Skaltsounis AL, Aligiannis N, Harvala C: Samioside, Phlomis samia'dan serbest radikal süpürücü ve antimikrobiyal aktivitelere sahip yeni bir feniletanoid glikozit. J Nat Prod. 2001, 64 (8): 1095-1097. 10.1021/np010128 artı .

27. Deng M, Zhao JY, Ju XD, Tu PF, Jiang Y, Li ZB: Tubulosid B'nin nöronal hücrelerde TNF alfa ile indüklenen apoptoz üzerindeki koruyucu etkisi. Acta Pharmacol Sin. 2004, 25: 1276-1284.

28. Geng XC, Song LW, Pu XP, Tu PF: Cistanches salsa'dan feniletanoid glikozitlerin 1-metil-4-fenile-1 karşı nöroprotektif etkileri, 2, 3, 6- tetrahidropiridin (MPTP), C57 farelerinde dopaminerjik toksisiteye neden oldu. Biol Ecz Boğa. 2004, 27: 797-801. 10.1248/bpb.27.797.

29. He W, Shu X, Zong G, Shi M, Xiong Y, Chen M: Böbrek güçlendirme ve hazırlıktan önce ve sonra cistanche Deserticola YC Ma'nın eylemini destekleyen yang. Zhongguo Zhong Yao Zazhi. 1996, 21 (9): 534-537. 575

30. Shen LZ, Zhong XY, Wang SX: Cistanche Deserticola'nın normal ve eksik Shen-yang sıçanları üzerindeki etkisi. Zhongyao Yaoli Yu Linchuang. 2001, 17 (1): 17-18.

31. Chen M, Zhao L, Jia W: Hidrokortizonla indüklenen bir hayvan modelinin biyokimyasal profilleri üzerine metabonomik çalışma. J Proteome Res. 2005, 4 (6): 2391-2396. 10.1021/pr050158o.

32. Chen Q, Yi NY: Yin eksikliği ve Yang eksikliği için hayvan modelleri ve ilaçlar. Geleneksel Çin tıbbında farmakolojik araştırmaların deneysel metodolojisi. Düzenleyen: Chen Q. 1993, Beijing: People's Health Publishing House, 982-984.

33. Ulusal Farmakope Komitesi: Çin Halk Cumhuriyeti Farmakopesi. 2005, Beijing: Press of Chemical Industry, 1: 90-

34. Çoklu ve Büyük Değişkenli Veri Analizi Kısım I: Temel İlkeler ve Uygulamalar, İkinci gözden geçirilmiş ve genişletilmiş baskı. [http://www.umetrics.com/default.asp/pagename/training_literature/c/5]

35. SIMCA-P ve SIMCA-P plus 11 Kullanım Kılavuzu. [http://www.umetrics.com/default.asp/pagename/downloads_kullanıcı kılavuzu/c/3]

36. Chin HL, Su YC: Cistanche Deserticola Ma'nın farmakolojik etkileri üzerine çalışma. Zhongguo Zhong Yao Zazhi. 1993, 19: 143-146.

Gönderen: Çin Tıbbı cilt 3, Makale numarası: 3 (2008)