Perimenopozal Sendromlu Hayvan Modelinde Feniletil Alkol Glikozitlerin Cistanche'nin Müdahale Araştırması Ⅲ

Deney 2

EtkisiCistanche feniletanol glikozitfaredeperimenopozalmodel Malzemeler ve yöntemler

Deneysel malzemeler

1.1 Deney hayvanları

SPF dereceli fareler, Kunming türleri, dişi, 20-25g, Wuhan Biyolojik Ürünler Enstitüsü tarafından sağlanmıştır. Sertifika numarası: 42000400000611; Laboratuvar sertifika numarası SYXK (Yu) 2010-001. 1.2 Deneysel ilaçlar

Cistanche Deserticola feniletanol glikozidi Deney 1'in yöntemine göre hazırlandı ve içerik %66,47'ye ulaştı. Gengnian'an Kapsülü, içindekiler: Rehmannia glutinosa, Rehmannia glutinosa, Alisma, Ophiopogon japonicus, Scrophulariaceae, şakayık kabuğu, Poria cocos, sedef, curculigo, Schisandra chinensis, manyetit, Polygonum multiflorum asma, Uncaria, yüzen buğday, polygonum multiflorum . Fonksiyonları ve Endikasyonları: Yin'i besler ve yang'ı bastırır, sorunları giderir ve zihni sakinleştirir. Menopozal sıcak basması ve terleme, baş dönmesi, kulak çınlaması, sinirlilik ve uykusuzluk için kullanılır. Özellikler: Kapsül başına 0.3g. Kullanım Şekli ve Dozu: Oral, günde 3 defa, tek seferde 3 kapsül. Üretici: Shanxi Tianxing Pharmaceutical Co., Ltd. Üretim parti numarası: 121104. Onay numarası: Ulusal İlaç Onay No. Z14021848.

Soya izoflavonları ve E vitamini yumuşak kapsülleri, içerik listesi: soya izoflavonları tozu, E vitamini, ayçiçek yağı, jelatin, gliserin, su, tartrazin, titanyum dioksit. İkonik bileşenler ve içerik: Her 100 gramı 55,2 mg soya izoflavonu (genistein olarak hesaplanır) ve 608,5 mg E vitamini içerir. Sağlık fonksiyonları: Kemik yoğunluğunu artırın. Talimatlar ve dozaj: Günde 2 kez 1 kapsül ılık su ile alın. Özellikler: 500mg×100 kapsül. Üretici: Weihai Ziguang Biyoteknoloji Geliştirme Co., Ltd. Üretim parti numarası: 13070302. Onay numarası: Ulusal Gıda Sağlığı G20080032.

Sonuç 1 Fare perimenopozal modelinde otonom aktiviteler üzerindeki etki

Her deney grubundaki farelerin otonom aktivite testinin sonuçları Tablo 2 ve Şekil 2'de gösterilmektedir.

1.3 Deneysel reaktifler

Sodyum karboksimetil selüloz, Tianjin Hengxing Chemical Reagent Manufacturing Co., Ltd., parti numarası: 20120418; enjeksiyon için penisilin sodyum, North China Pharmaceutical Co., Ltd., spesifikasyon: 4 milyon adet, üretim parti numarası: c1206807; formaldehit çözeltisi (analitik sınıf), Yantai City Shuangshuang Chemical Co., Ltd., üretim parti numarası: 20130902; %0,9 sodyum klorür enjeksiyonu, Chenxin Pharmaceutical Co., Ltd.; spesifikasyon: 250ml, üretim parti numarası: 1301265303;

Kloral hidrat, Tianjin Guangfu İnce Kimyasal Araştırma Enstitüsü, parti numarası 20120827; fare E2 ELISA tespit kiti, R&D Şirketi, parti numarası: 20131001A; fare T ELISA tespit kiti, R&D Şirketi, parti numarası: 20131001A; fare LH ELISA tespiti Test kiti, Ar-Ge Şirketi, parti numarası: 20131001A;

Fare FSH ELISA tespit kiti, Ar-Ge Şirketi, parti numarası: 20131001A. 1.4 Deneysel aletler

Elektronik terazi, Shanghai Minqiao Medical Instrument Co., Ltd., model: JY601; elektronik analitik terazi, Ohaus (Şangay) Şirketi, model: AR1140/C; yüksek hızlı masaüstü santrifüj, Şanghay Anting Bilimsel Cihaz Fabrikası, model: TGL-168; Elektrikli termostatik su banyosu, Shanghai Yiheng Scientific Instrument Co., Ltd., model: HWS12; Fare otonom aktivite test cihazı, Chengdu Taimeng Technology Co., Ltd., model: ZZ-6; Fare karanlıktan kaçınma ölçer, Chengdu Taimeng Technology Co., Ltd., model: BA-200; yüksek hızlı soğutmalı santrifüj, HKUST Innovation Co., Ltd.'nin Zhongjia Şubesi, model: KDC-160HR; ayarlanabilir pipet, Shanghai Leibo Analytical Instrument Co., Ltd.;

Mikroplaka okuyucu, American BIO-RAD Company, model: 680;

Elektrikli mikroskop, Japonya OLYMPUS şirketi, model: BX61

CISTANCHE'IN ÇALIŞMASI NE KADAR SÜRER?

2 Deneysel yöntemler

2.1 Modelleme ve İlaç Yönetimi

Modelleme yöntemi: 23-25g ağırlığında 100 dişi Kunming faresi alın, boş grup olarak rastgele 12 fare seçin ve sahte ameliyat gerçekleştirin ve geri kalan fareler menopoz modelleri oluşturmak için kullanılır . Tartıldıktan sonra farelere, %10 kloral hidratın (0.03ml/10g) intraperitoneal enjeksiyonu yoluyla anestezi uygulandı ve karın pozisyonunda sabitlendi. Daha sonra farenin sırt kısmından orta aksiller çizginin kesiştiği noktada son kaburganın altından ve omurganın dış kısmından yaklaşık 1 cm uzaklıktan saçlar kesilerek dezenfekte edildi ve kesildi. Deri ve sırt kasları yaklaşık 0,5-1cm kadar açılır ve kesi alanında süt beyazı parlak bir yağ kitlesi görülür ve yumurtalık bunun içine gömülür. Küçük cımbız kullanarak yağ kütlesini nazikçe kavrayın ve kesiden dışarı çekin, yağ kütlesini ayırın; bir grup ince, düzensiz, sarı-kırmızı yumurtalık göreceksiniz. Keserken önce yumurtalıkların altındaki fallop tüplerini (yağ dahil) ince iplerle bağlayın ve ardından yumurtalıkları çıkarın. Ameliyat sonrasında rahim boynuzları tekrar karın boşluğuna yerleştirilir, kaslar ve deri dikilir ve her iki yumurtalık da aynı şekilde çıkarılır. Ameliyattan sonra hayvanlar dikkatlice kaldırıldı ve enfeksiyonu önlemek için art arda 3 gün boyunca günde bir kez penisilin 200,000 u/kg (her biri 0,1 mL) intramüsküler olarak enjekte edildi. Yumurtalıkların tamamen alınıp alınmadığını belirlemek için her bir fareye operasyondan 5 gün sonra, ardı ardına 5 gün boyunca günde bir kez vajinal smear muayenesi yapıldı. Smearda kızgınlık reaksiyonu gösteren fareler atıldı ve 72 adet tamamen hadım edilmiş fare deneysel amaçlı olarak rastgele ve eşit bir şekilde 6 gruba (model grubu) bölündü.Gengniang'an kapsül grubu, soya izoflavon yumuşak kapsül grubu ve büyük grup. orta ve küçük dozlardaCistanche feniletanol glikozitgrup. Hazırlama yöntemi: {{0}}.5% CMC Hazırlama yöntemi: 4g karboksimetil selüloz sodyumu tartın ve 800ml elde edene kadar damıtılmış suyla karıştırın. Cistanche feniletanol glikozit grubunun büyük, orta ve küçük dozlarının dozajları sırasıyla 20{{3{0}} mg/kg, 100 mg/kg ve 50 mg/kg'dır (uygulama hacmi 0,1 ml/ 10g). Hazırlama yöntemi: Sırasıyla 2000 mg, 1000 mg ve 500 mg Cistanche feniletanoid glikozidi tartın, az miktarda %0,5 CMC ile çözün, ardından hacmi 100 ml'ye ayarlayın, iyice karıştırın ve bu kadar. Gengniangan Kapsülleri (675 mg/kg, damıtılmış su ile 67,5 mg/ml, 0,1 ml/10 g'ye kadar karıştırılmış, klinik dozajın 15 katına eşdeğer); Hazırlama yöntemi: 9 Gengniangan Kapsülünü alın, önce az miktarda %0,5 CMC Çözündürün, ardından hacmi 40 ml'ye ayarlayın ve Gengnianan Kapsül Süspansiyonu (675 mg/kg) dozunu elde etmek için iyice karıştırın. Soya fasulyesi izoflavon E vitamini yumuşak kapsül (250mg/kg, 25mg/ml, 0.1ml/10g hazırlamak için damıtılmış su kullanın, klinik dozajın 15 katına eşdeğer); Hazırlama yöntemi: 2 soya fasulyesi izoflavon kapsülü alın, önce az miktarda %0,5 Çözünmüş CMC kullanın, ardından hacmi 40 ml'ye ayarlayın ve soya izoflavon kapsül süspansiyonu dozunu (250 mg/kg) elde etmek için iyice karıştırın.

Depolama yöntemi: buzdolabında saklayın, kullanım sırasında sıcak tutun.

Uygulama yöntemi: Her gruptaki hayvanlara, ameliyattan sonraki 10. günde ilgili ilaçlar verildi. Gengnian'an kapsül grubuna ağızdan 675 mg·kg-1 Gengniang'an kapsül süspansiyonu uygulandı ve soya izoflavon yumuşak kapsül grubuna ağızdan 250 mg·kg-1 soya izoflavon yumuşak kapsül süspansiyonu uygulandı ve büyük, orta veküçük dozlarda Cistanche benzeniuygulandı. Etanol glikozit grubuna oral olarak büyük, orta ve küçük dozlarda Cistanche feniletanoid glikozit 200mg·kg-1, 10mg·kg-1, 50mg·kg{ uygulandı {5}}, sırasıyla 0,1 ml/10g. Boş gruba ve model grubuna, art arda 21 gün boyunca günde bir kez aynı hacimde %0,5 CMC solüsyonu sondayla verildi.

Fare FSH ELISA tespit kiti, Ar-Ge Şirketi, parti numarası: 20131001A. 1.4 Deneysel aletler

Elektronik terazi, Shanghai Minqiao Medical Instrument Co., Ltd., model: JY601; elektronik analitik terazi, Ohaus (Şangay) Şirketi, model: AR1140/C; yüksek hızlı masaüstü santrifüj, Şangay Anting Bilimsel Cihaz Fabrikası, model: TGL-168; Elektrikli termostatik su banyosu, Shanghai Yiheng Scientific Instrument Co., Ltd., model: HWS12; Fare otonom aktivite test cihazı, Chengdu Taimeng Technology Co., Ltd., model: ZZ-6; Fare karanlıktan kaçınma ölçer, Chengdu Taimeng Technology Co., Ltd., model: BA-200; yüksek hızlı soğutmalı santrifüj, HKUST Innovation Co., Ltd.'nin Zhongjia Şubesi, model: KDC-160HR; ayarlanabilir pipet, Shanghai Leibo Analytical Instrument Co., Ltd.;

Mikroplaka okuyucu, American BIO-RAD Company, model: 680;

Elektrikli mikroskop, Japonya OLYMPUS şirketi, model: BX61

2 Deneysel yöntemler

2.1 Modelleme ve ilaç uygulaması

Modelleme yöntemi: 23-25g ağırlığında 100 dişi Kunming faresi alın, boş grup olarak rastgele 12 fare seçin ve sahte ameliyat gerçekleştirin ve geri kalan fareler menopoz modelleri oluşturmak için kullanılır . Tartıldıktan sonra farelere, %10 kloral hidratın (0.03ml/10g) intraperitoneal enjeksiyonu yoluyla anestezi uygulandı ve karın pozisyonunda sabitlendi. Daha sonra farenin sırt kısmından orta aksiller çizginin kesiştiği noktada son kaburganın altından ve omurganın dış kısmından yaklaşık 1 cm uzaklıktan saçlar kesilerek dezenfekte edildi ve kesildi. Deri ve sırt kasları yaklaşık 0,5-1cm kadar açılır ve kesi alanında süt beyazı parlak bir yağ kitlesi görülür ve yumurtalık bunun içine gömülür. Küçük cımbız kullanarak yağ kütlesini nazikçe kavrayın ve kesiden dışarı çekin, yağ kütlesini ayırın; bir grup ince, düzensiz, sarı-kırmızı yumurtalık göreceksiniz. Keserken önce yumurtalıkların altındaki fallop tüplerini (yağ dahil) ince iplerle bağlayın ve ardından yumurtalıkları çıkarın. Ameliyat sonrasında rahim boynuzları tekrar karın boşluğuna yerleştirilir, kaslar ve deri dikilir ve her iki yumurtalık da aynı şekilde çıkarılır. Ameliyattan sonra hayvanlar dikkatlice kaldırıldı ve enfeksiyonu önlemek için art arda 3 gün boyunca günde bir kez penisilin 200,000 u/kg (her biri 0,1 mL) intramüsküler olarak enjekte edildi. Yumurtalıkların tamamen alınıp alınmadığını belirlemek için her bir fareye operasyondan 5 gün sonra, ardı ardına 5 gün boyunca günde bir kez vajinal smear muayenesi yapıldı. Smearda kızgınlık reaksiyonu gösteren fareler atıldı ve 72 adet tamamen hadım edilmiş fare deneysel amaçlar için rastgele ve eşit bir şekilde 6 gruba ayrıldı; model grubu, Gengniang'an kapsül grubu, soya izoflavon yumuşak kapsül grubu ve büyük grup. orta ve küçük dozlardaCistanche feniletanol glikozitgrup. Hazırlama yöntemi: 0.5% CMC Hazırlama yöntemi: 4g karboksimetil selüloz sodyumu tartın ve 800 ml elde etmek için damıtılmış suyla karıştırın. Büyük, orta ve küçük dozların dozajlarıCistanche feniletanol glikozitgrup sırasıyla 200mg/kg, 10{{20}}mg/kg ve 50mg/kg idi (uygulama hacmi) 0.1ml/10g). Hazırlama yöntemi: Sırasıyla 2000 mg, 1000 mg ve 500 mg Cistanche feniletanoid glikozidi tartın, az miktarda %0,5 CMC ile çözün, ardından hacmi 100 ml'ye ayarlayın, iyice karıştırın ve bu kadar. Gengniangan Kapsülleri (675 mg/kg, damıtılmış su ile 67,5 mg/ml, 0,1 ml/10 g'ye kadar karıştırılmış, klinik dozajın 15 katına eşdeğer); Hazırlama yöntemi: 9 Gengniangan Kapsülünü alın, önce az miktarda %0,5 CMC Çözündürün, ardından hacmi 40 ml'ye ayarlayın ve Gengnianan Kapsül Süspansiyonu (675 mg/kg) dozunu elde etmek için iyice karıştırın. Soya fasulyesi izoflavon E vitamini yumuşak kapsül (250mg/kg, 25mg/ml, 0.1ml/10g hazırlamak için damıtılmış su kullanın, klinik dozajın 15 katına eşdeğer); Hazırlama yöntemi: 2 soya fasulyesi izoflavon kapsülü alın, önce az miktarda %0,5 Çözünmüş CMC kullanın, ardından hacmi 40 ml'ye ayarlayın ve soya izoflavon kapsül süspansiyonu dozunu (250 mg/kg) elde etmek için iyice karıştırın.

Depolama yöntemi: buzdolabında saklayın, kullanım sırasında sıcak tutun.

Uygulama yöntemi: Her gruptaki hayvanlara, ameliyattan sonraki 10inci günde karşılık gelen ilaçlar verildi. Gengnian'an kapsül grubuna ağızdan 675 mg·kg-1 Gengniang'an kapsül süspansiyonu uygulandı ve soya izoflavonu yumuşak kapsül grubuna ağızdan 250 mg·kg-1 soya izoflavonu uygulandı yumuşak kapsül süspansiyonu ve büyük, orta ve küçük dozlarda Cistanche benzeni uygulandı. Etanol glikozit grubuna sırasıyla 200 mg·kg-1, 10 mg·kg-1, 50 mg·kg-1, 0,1 ml/10g'lik büyük, orta ve küçük dozlarda Cistanche feniletanoid glikozit oral yoldan uygulandı. Boş gruba ve model grubuna, art arda 21 gün boyunca günde bir kez aynı hacimde %0,5 CMC solüsyonu sondayla verildi.

2.2 Gözlem öğeleri ve tespit yöntemleri

Uygulamanın 18. gününde her gruptaki farelerin 5 dakika içindeki spontan aktivitelerinin sayısı ölçüldü. Farelerin karanlık odaya ilk kez girme süresi ve karanlık odaya girdikten sonra 5 dakika içinde aldıkları elektrik şoklarının sayısı, uygulamanın 19. ila 20. günleri arasında ölçüldü. Son dozdan 2 saat sonra (yemek ve su olmadan 12 saat), fareler tartıldı, gözbebekleri çıkarıldı, kan toplandı, serum ayrıldı ve serumdaki E2, T, LH ve FSH içerikleri ölçüldü. ölçülen; Fareler daha sonra servikal dislokasyon yoluyla kurban edildi ve parçalara ayrıldı. , timüs, dalak ve rahim dokusunu çıkarın, ıslak ağırlıklarını tartın ve organ indeksini hesaplayın (organ indeksi=organ ıslak ağırlığı mg/fare ağırlığı g) ve ardından hipofiz bezini çıkarın; timus, dalak, uterus ve hipofiz bezini sabitleyin, parafine gömülmüş %10'luk formalin solüsyonunda kesitler alındı, HE boyandı ve her grubun doku morfolojik değişiklikleri ışık mikroskobu altında gözlendi.

2.2.1 Bağımsız faaliyetlerin sayısına ilişkin test

Her gruptaki fareler istemli aktivite aparatına konularak önce 1 dakika boyunca ortama uyum sağladıktan sonra 5 dakika içerisinde yaptıkları istemli aktivite sayıları ölçüldü.

2.2.2 Karanlıktan kaçınma testi

Her gruptaki fareleri, kuyrukları karanlık odadaki küçük açıklığa bakacak şekilde test kutusuna koyun ve eğitim yapın. 24 saat sonra karanlık odaya ilk kez giren farelerin latent süreleri ve karanlık odaya girdikten sonra 5 dakika içinde aldıkları elektrik şoklarının sayısı yeniden ölçüldü.

2.2.3 Kit belirleme yöntemi

Serum örnekleri alın: Pirojen ve endotoksin içermeyen test tüpleri kullanın. Operasyon sırasında herhangi bir hücre uyarımından kaçının. Kanı topladıktan sonra, serumu ve kırmızı kan hücrelerini hızlı ve dikkatli bir şekilde ayırmak için 10 dakika boyunca 3000 rpm'de santrifüjleyin. Fare estradiol (E2) ELISA tespit kiti tahlil yöntemi: 20 dakika oda sıcaklığında dengelenmiş alüminyum folyo torbadan gerekli şeritleri çıkarın ve kalan şeritleri kendinden yapışkanlı bir torbaya koyun ve 4 dereceye geri koyun. . Standart kuyucuklar ve numune kuyucukları kurun ve her standart kuyucuğa farklı konsantrasyonlarda 50 μL standart ekleyin. Öncelikle numune kuyucuğuna test edilecek numunenin 10 µL'sini ekleyin ve ardından 40 µL numune seyrelticisini ekleyin (yani numune 5 kez seyreltilir); boş kuyucuğa eklemeyin. Boş kuyu dışında, standart kuyucuğun her kuyucuğuna 100 μL yaban turpu peroksidaz etiketli tespit antikoru ekleyin ve kuyucuğu örnekleyin ve reaksiyonu bir sızdırmazlık filmiyle iyice kapatın. 37 derecelik su banyosunda veya inkübatörde 60 dakika inkübe edin. Sıvıyı atın, emici kağıt üzerinde kurulayın, her bir kuyucuğu yıkama solüsyonuyla doldurun ve 1 dakika bekletin. Yıkama sıvısını çalkalayın, emici kağıt üzerinde kurulayın ve plakayı 5 kez yıkamayı tekrarlayın. Öncelikle her bir kuyucuğa A ve B substratlarının her birinden 50 μL ekleyin ve 37 derecede karanlıkta 15 dakika inkübe edin. Enzim plakasını çıkarın, her kuyucuğa 50 μL stop solüsyonu ekleyin ve 15 dakika içinde her kuyucuğun absorbans değerini (OD değeri) 450 nm dalga boyunda ölçün. Standart ürünün konsantrasyonuna ve karşılık gelen OD değerine göre standart ürün regresyon eğrisini çizin ve eğri denklemine göre her numunenin konsantrasyon değerini hesaplayın. Nihai konsantrasyon, ölçülen gerçek konsantrasyonun seyreltme faktörüyle çarpımıdır. Bunlar arasında standart ürünlerin (S0-S5) konsantrasyonları 0, 4, 8, 16, 32 ve 64 pmol/L'dir. Fare (Fare) testosteron (T) ELISA tespit kiti standardının (S0-55) konsantrasyonları 0, 50, 100, 200, 400 ve 800pg/mL'dir;

Fare (Fare) luteinize edici hormon (LH) ELISA tespit kiti standardının (S{{0}}) konsantrasyonları 0, 0,5, 1, 2, 4, 8mIU/mL'dir;

Fare (Fare) folikül uyarıcı hormon (FSH) ELISA tespit kiti standardının (S0-55) konsantrasyonları 0, 5, 10, 20, 40 ve 80mIU/mL'dir.

2.3 İstatistiksel işleme yöntemleri

Verilerin analizinde, verilerin istatistiksel işlenmesinde SPSS17.0 tıbbi istatistik paketi kullanıldı. Ölçüm verileri ortalama ± standart sapma (-x±s) olarak ifade edildi. Gruplar arası karşılaştırmada tek yönlü varyans analizi kullanıldı. Varyansların homojenliğini test etmek için LSD yöntemi kullanıldı. Eşit olmayan varyanslar için Games-Howell testi, not verileri için Ridit testi kullanıldı.

Şekil 3 Cistanche feniletanol glikosidin fare perimenopozal modelinde karanlıktan kaçınma deneyinin gizli periyodu üzerindeki etkisi

Şekil 4 Perimenopozal fare modelinin karanlıktan kaçınma deneyinde Cistanche feniletanol glikozidin elektrik şoku sayısı üzerindeki etkisi. Tablo 3 ve Şekil 3-4'te boş grupla karşılaştırıldığında model grubundaki farelerin kuluçka süresinin ve elektrik şoku sayısının önemli ölçüde azaldığı görülebilir ( P<0.01), reflecting the decline in memory in the mouse perimenopausal model. Compared with the model group, Gengnianan, soybean isoflavones, and large and medium doses of Cistanche phenylethanoid glycosides could significantly increase the latency of the dark avoidance test in mice, reduce the number of electric shocks (P<0.01), and improve the memory of mice.

3 Fare perimenopozal modelinde organ indeksi üzerindeki etkiler

Her deney grubundaki farelerin timus, dalak ve uterus endeksleri Tablo 4 ve Şekil 5'te gösterilmektedir.

Tablo 4 ve Şekil 5'ten görülebileceği gibi boş grupla karşılaştırıldığında model gruptaki farelerin rahim indeksi anlamlı derecede düşüktü (P<0.01), indicating that removal of the ovaries caused uterine atrophy in the perimenopausal model mice, and removal of the ovaries resulted in insufficient estrogen secretion. Causes immune organ atrophy in perimenopausal mice. Compared with the model group, soy isoflavones, Gengnianan, large and medium doses of Cistanche phenylethanol glycoside can significantly improve the thymus, spleen and uterine index (P<0.01), and low dose Cistanche phenylethanol glycoside can significantly improve the perimenopausal model. Mouse uterine index (P<0.05). 4 Effects on serum sex hormone levels in mouse perimenopausal model

Her gruptaki farelerin serumundaki E2, T, FSH ve LH içerikleri. Bkz. Tablo 5~6 ve Şekil 6~9. Tablo 5~6 ve Şekil 6~9'dan boş grupla karşılaştırıldığında model grubundaki farelerin serumundaki E2 ve T seviyelerinin önemli ölçüde azaldığı görülebilir (P<0.01), and the levels of LH and FSH were significantly increased (P<0.01). , indicating that removal of ovaries leads to disorders of sex hormone levels in the serum of perimenopausal model mice and the perimenopausal mouse model was successfully replicated. Compared with the model group, each administration group can significantly reduce the elevated LH level in serum (P<0.01); large and medium doses of Cistanche phenylethanol glycoside, Gengniangan, and soybean isoflavones can significantly increase the levels of perimenopausal mice. E2 and T levels in the serum of the early-stage model (P<0.01) and reduced elevated FSH and LH levels in the serum. Low-dose Cistanche phenylethanol glycoside can significantly increase serum E2 levels and reduce serum FSH levels (P<0.05); low-dose Cistanche phenylethanoid glycoside has a tendency to increase serum T levels.

4 Fare perimenopozal modelinde serum seks hormonu düzeyleri üzerindeki etkiler

Her gruptaki farelerin serumunda E2, T, FSH ve LH içerikleri. Bkz. Tablo 5~6 ve Şekil 6~9.

Tablo 5~6 ve Şekil 6~9'dan boş grupla karşılaştırıldığında model grubundaki farelerin serumundaki E2 ve T seviyelerinin önemli ölçüde azaldığı görülebilir (P<0.01), and the levels of LH and FSH were significantly increased (P< 0.01), indicating that removal of ovaries leads to disorder of sex hormone levels in the serum of perimenopausal model mice, and the perimenopausal mouse model was successfully replicated. Compared with the model group, each administration group can significantly reduce the elevated LH level in serum (P<0.01); large and medium doses of Cistanche deserticola phenylethanol glycoside, Gengniannian, and soybean isoflavones can significantly reduce the level of LH in mice. E2 and T levels in serum of perimenopausal model (P<0.01) and reduced elevated FSH and LH levels in serum. Low-dose Cistanche deserticola phenylethanol glycoside can significantly increase serum E2 levels and reduce serum FSH levels (P<0.05); low-dose Cistanche deserticola phenylethanoid glycoside has a tendency to increase serum T levels. 5. Effects on organ tissue morphology in perimenopausal model mice

Her deney grubundaki farelerin rahim, timus, dalak ve hipofiz bezinin patolojik ve histolojik gözlem sonuçları aşağıdaki gibidir. Patolojik fotoğraflar perimenopozal farelerin patolojik fotoğrafları için Ek 1'de gösterilmektedir.

5.1 Perimenopozal model farelerin rahim dokusu morfolojisi üzerindeki etkisi

Her deney grubundaki farelerin endometriyumu, bezleri ve miyometriyumundaki farklı derecelerdeki değişikliklere göre, patolojik doku morfolojisini dört seviyeye bölmek için yarı niceliksel standartlar kullanıldı. Her deney grubundaki farelerin rahimleri ölçüldü. Gözlem sonuçları Tablo 7'de gösterilmektedir. Tablo 7 Cistanche Deserticola feniletanol glikozidin perimenopozal model farelerde uterus patolojik değişiklikleri üzerindeki etkisi Birim: sadece

"-" Endometriyal epitel hücreleri, bezler, miyometriyum ve serozanın tümü normaldir; "+" endometrial epitel hücreleri ve bezleri atrofiktir ve miyometriyum ve seroza normaldir; "++" endometriyal epitelyum Hücreler ve bezler kısmen atrofiye uğramıştır, kas tabakası hafifçe atrofiye uğramıştır ve seroza normaldir; "+++" endometrial epitel hücreleri ve bezleri önemli ölçüde atrofiye olmuştur ve seroza normaldir.

Ridit testi sonrasında yukarıdaki tablodan görülebileceği gibi boş grupla karşılaştırıldığında model gruptaki farelerin uterusunda önemli patolojik doku lezyonları görülmüştür (P<0.01). Compared with the model group, soy isoflavone vitamin E soft capsules, Gengnianan capsules, and high-dose Cistanche deserticola phenylethanol glycoside can significantly improve the uterine pathological tissue lesions of mice (P<0.01), and medium-dose Cistanche deserticola phenylethanol glycoside can Significantly improved uterine pathological tissue lesions in mice (P<0.05). 5.2 Effect on thymus and spleen tissue morphology in mouse perimenopausal model

Ortalamayı elde etmek için her deney grubundaki her farenin timus korteksinin en kalın ve en dar kısımlarının kalınlığını ölçmek için bir mikrometre kullanın; Taban çizgisini dalak nodülüne yerleştirmek için bir mikrometre kullanın ve merkezi arter merkez olacak şekilde iki kalınlığı ölçün. Her iki taraftaki dalak nodüllerinin kalınlığı hesaplandı ve ortalaması alındı; sonuçlar Tablo 8 ve Şekil 10'da gösterilmektedir.

Tablo 8 Perimenopozal model farelerde Cistanche Deserticola feniletanol glikozidin timus ve dalaktaki patolojik değişiklikler üzerindeki etkileri (-x±s)

Tablo 8 ve Şekil 10'dan görülebileceği gibi, boş grupla karşılaştırıldığında, model grubunda timus korteksinin kalınlığı ve dalak nodüllerinin hacmi önemli ölçüde azalmıştır (P<0.01), indicating that the thymus and spleen volumes atrophied after the perimenopausal model was created in mice. Compared with the model group, high-dose Cistanche deserticola phenylethanol glycoside can significantly thicken the thymic cortex (P<0.01), and medium-dose Cistanche deserticola phenylethanoid glycoside can significantly thicken the thymic cortex (P<0.05). Each medication group could significantly increase the volume of splenic nodules. 5.3 Effect on pituitary tissue morphology in mouse perimenopausal model

Yüksek büyütmeli görüş alanı 10000μm'lik bir alanı kapsar

2. Mikrodikdörtgen çerçevedeki bazofil hücrelerinin ve ön hipofiz hücrelerinin sayısını ölçün. Sonuçlar Tablo 9 ve Şekil 11~12'de gösterilmektedir.

Tablo 9 ve Şekiller 11-12'de boş grupla karşılaştırıldığında model grubundaki bazofil hücrelerinin ve ön hipofiz hücrelerinin sayısının önemli ölçüde azaldığı görülmektedir (P<0.01), indicating that after the perimenopausal model was created in mice, secretion of The cellular source of gonadotropins is reduced. Compared with the model group, each medication group could significantly increase the number of pituitary basophil cells (P<0.01). Except for the low-dose Cistanche deserticola phenylethanol glycoside group, all other medication groups could significantly increase the number of anterior pituitary cells (P<0.01). P<0.01).