İnflamatuvar Bağırsak Hastalığı Olan Hastalarda Bağırsak Geçirgenliği ve DepresyonⅠ
Dec 20, 2023
Özet: Depresyon, uygun tedaviye hızlı erişimi sağlamak için erken ve doğru tanı gerektiren küresel bir sağlık sorunudur. Son zamanlarda dikkatler çoklu psikopatolojik yollar arasında beyin-bağırsak-mikrobiyota eksenini analiz etmeye odaklanmıştır. Bağırsak bariyeri önemli bir rol oynar ve bu seviyede meydana gelen işlev bozukluklarının ruh sağlığı üzerinde etkileri vardır. Bu çalışma, kalprotektin, zonulin, lipopolisakkarit bağlayıcı protein (LBP) ve bağırsak yağ asidi bağlayıcı protein (I-FAB) gibi bağırsak geçirgenliği biyobelirteçlerinin, inflamatuar bağırsak hastalığı (İBH) olan hastalarda depresyondaki rolünü araştırmayı amaçladı. ).
Bu, Romanya'da, Doğu Avrupa'da Crohn hastalığı ve ülseratif kolit hastalarına odaklanan bu türden ilk çalışmadır. Depresyon ile kalprotektin ve depresyon ile LBP arasında belirlenen korelasyonlar, biyobelirteçler yardımıyla depresyonun hızlı tanısı sürecine ışık tutma potansiyeline sahiptir. Depresyon, İBH'li yatan hastaların yaşam kalitesinde azalma ile ilişkili olduğundan, uygun tedavilere erişim ihtiyacı acil olmalıdır.
1. Giriş
Depresyon, bedensel hastalıklarla [1,2] ve intihar nedeniyle yüksek ölüm riski taşıyan [3] bireysel, mesleki ve sosyal bir yetersizliktir. Ancak uzmanlara erişim, doğru tanı ve etkili tedavi sınırlıdır [4]. Hastalığın acısını ve mali yükünü azaltmak için erken ve doğru tanının [5,6] yanı sıra kişiye özel tedavi seçiminin [7] yapılması gereklidir [3]. Mental Bozuklukların Tanısal ve İstatistiksel El Kitabındaki tanı kriterlerine göre (DSM V) [8], depresyon, heterojen bir semptom grubuna sahip duygusal bir bozukluktur. Teşhis konulabilmesi için aşağıdaki dokuz belirtiden beşinin bulunması gerekir: depresif ruh hali, zevk eksikliği, uyku ve iştahta zorluk, düşük enerji seviyeleri, bilişsel değişiklikler, suçluluk ve suçluluk duyguları ve intihar düşünceleri. Şu ana kadar kesin olarak ortaya konan Etkili tedaviden yararlanmayı sağlayacak patofizyolojik mekanizmalar bilinmemektedir. Çeşitli mekanizmalar sorgulanmıştır ancak teoriler hala gelişmektedir.
Bu nedenle, hipotalamik-hipofiz ekseni, nörotransmiterler, vagus siniri, kısa zincirli yağ asidi metabolitleri, triptofan, inflamatuar faktörler ve beyin-bağırsak-mikrobiyota eksenindeki işlev bozuklukları araştırılmıştır [9-12]. Strese bağlı bozuklukların sadece hipotalamik-hipofiz-adrenal eksen yoluyla bağırsak mikrobiyotasının bileşiminde değişikliklere neden olmadığı, aynı zamanda bağırsağın da böbreküstü bezini etkilediği kanıtlanmıştır.
vagal uyarı, bağırsak geçirgenliği, inflamatuar ve antiinflamatuar bileşiklerin salınımı ve kanda dolaşan ajanlardaki değişiklikler yoluyla merkezi sinir sistemi üzerinde etkili olur [13]. Geçtiğimiz yirmi yılda, zihinsel bozukluklarda beyin-bağırsak-mikrobiyota ekseninin tutulumuna ilişkin çalışmalar hız kazanmıştır [9,14]. Bu bağlamda sızdıran bağırsak sendromunun rolü daha fazla ilgi görmüştür [15,16].
Bağırsak bariyeri, besinlerin sindirimi ve emiliminde ana role sahiptir; ikincil olarak, antijenlerin lümenden submukozaya taşınmasını sıkı bir şekilde kontrol eder ve tolerans ile iltihaplanmaya neden olan bağışıklık tepkisi arasındaki dengeyi korur. Bağırsak bariyerinin bütünlüğü diyetten, bağırsak mikrobiyotasındaki disbiyozdan veya diğer faktörlerden etkilenebilir. Bunlar, mikrobiyal antijenlerin ve metabolitlerin translokasyonu yoluyla immün aktivasyona neden olma potansiyeline sahiptir. Şu anda, serum zonulin, bağırsak yağ asidi bağlayıcı protein (IFABP/FABP2) ve LBP'nin yanı sıra dışkı albümini, kalprotektin ve zonulin, bağırsak geçirgenliği olarak analiz edilmiştir. belirteçleri [17]. Calprotectin, başlangıçta lökositlerden izole edilen, kalsiyum ve çinkoyu bağlayan bir proteindir; inflamatuar bağırsak hastalığını irritabl bağırsak sendromundan ayırmada faydalıdır. İnflamasyon sırasında önemli bir rol oynar ve bir akut faz proteini olarak kabul edilir [18 ]
Normal değerler 10 ila 50 veya 60 (ug/g) arasındadır. 200'ün (ug/g) üzerindeki değerler inflamatuar bir hastalığı gösterebilir ve 500-600'ün (ug/g) üzerindeki değerler kesinlikle bir bağırsak hastalığının varlığını gösterir [19]. Lipopolisakkarit bağlayıcı protein (LBP), dış zarın temel bir lipit bileşenidir. endotoksemiye neden olan Gram-negatif bakterilerin [20] varlığıdır [21]. Hepatositler, yağ dokusu ve bağırsak hücreleri tarafından üretilen LBP'ler, bir akut faz I proteini olarak işlev görür ve bağışıklık tepkisinde önemli bir rol oynar [22]. LBP, serumda 5-15 mg/mL konsantrasyonlarda bulunur ve akut faz reaksiyonu sırasında 10 ila 50 kat artar. Bariyer fonksiyonu, yakın hücre içi bağlantıların (TJ'ler) tek fizyolojik modülatörü olarak bilinen zonulin tarafından korunur [15,23, 24]. Zonulin, kavşak kompleksinin hücre içi boşluğunda yer alan proteazla aktive edilen reseptör 2 üzerinde etki ederek TJ'yi tersine çevrilebilir şekilde açar [25]. Zonulin'in ortalama değeri 34 ng/mL'dir [26].
Bağırsak yağ asidi bağlayıcı protein (I-FABP/FABP2), lipitleri bağlayan proteinlerin bir süper ailesine ait olan, tanımlanan dokuz farklı FABP'den biridir. Ana rol hücre içi taşıma ve yağ asidi emiliminin düzenlenmesidir [27]. Epitelyal bağırsak bariyerinde hasar oluştuğunda I-FABP dolaşıma salınır ve plazma konsantrasyonu artar [28]. I-FAPB için eşik değeri 2 ng/mL olarak kabul edilmektedir. Bu bağlamda, inflamatuar bağırsak hastalığı (İBH) olan hastalarda bağırsak geçirgenliği biyobelirteçlerinin depresyondaki rolünü (i) kalprotektin, zonulin, LBP arasındaki ilişkiyi inceleyerek araştırmayı amaçladık. , IFABP/FABP2 ve depresyon ve(ii) depresyonun yaşam kalitesi üzerindeki etkisini değerlendirerek.
2. Malzemeler ve Yöntemler
2.1. Çalışma Grubu
İlk grup, Nisan ve Haziran 2021 arasında Köstence İlçe Klinik Hastanesi Gastroenteroloji Kliniğinden 60 hastayı içeriyordu. Dahil etme kriterleri, İBH tanısı, 18 yaş ve üzeri, okuma-yazma bilgisi ve çalışmaya katılmayı kabul etmekti. Hariç tutma kriterleri, rızanın reddi, şiddetli depresyon veya uzman psikiyatri servisine yönlendirildikleri diğer ciddi zihinsel bozukluklardı. Bilgilendirilmiş onam alındıktan sonra, hastalarla bir araştırmacı tarafından telefonla iletişime geçerek depresyona ilişkin bir sosyodemografik anket ve sağlık durumunun kalitesine ilişkin bir anket uygulandı. Çalışmaya çalışmanın tüm aşamalarını geçen 30 hasta dahil edildi.
2.2. Kullanılan Anketler
Katılımcılara, etkilendikleri depresyon düzeyini değerlendirmek için Hasta Sağlığı Anketi-9 (PHQ-9) [29] uygulandı. Bu standart anket, hastanın son 14 gün içinde yaşadığı semptomlara göre yanıtlanacak dokuz maddeyi içermektedir. Puanlar şu şekilde sınıflandırılır: 1-4 minimal depresyon, 5-9 hafif depresyon, 10-14 orta derecede depresyon, 15-19 orta derecede şiddetli depresyon ve 20-27 şiddetli depresyon Benzer şekilde yaşam kalitesi için bir anket uyguladık (EQ{{ 14}}D) [30,31] yaşam kalitesine ilişkin verileri toplamak. Bu aracın içerdiği maddeler; hastanın hareketliliği, öz bakımı, olağan aktivitelere katılımı, ağrı veya rahatsızlık ve yaşanan anksiyete veya depresyondur. Maddeler beş seviyeli bir ölçekte cevaplanmaktadır.
2.3. Numune Toplama ve Laboratuvar Analizi
Zonulin, IFABP/FABP2, LBP için serolojik numuneler ve kalprotektin için dışkı numuneleri, potansiyel olarak bulaşıcı biyolojik numunelerin toplanması ve taşınmasına yönelik protokole göre toplandı. Serum örnekleri venöz ponksiyonla, aç karnına ve aktivatör bezli vakumlayıcıda toplandı. Dışkı numuneleri, taşıyıcı ortam içermeyen kaplarda kendiliğinden yayılan dışkılardan toplandı. Serum, MyBioSource Kit, Inc. (San Diego, CA, ABD) ile zonulin açısından test edildi. ve Wuhan Fine Biotech Co., Ltd. Kiti (Wuhan, Çin) ile IFABP/FABP2 ve LBP. Numuneler, EUROIMMUN Medizinische Labordiagnostika AG kiti ile kalprotektin açısından test edildi. Tüm testler, kit üreticisinin talimatlarına göre bir ADALTIS Analizörü GEN-4 ve Victor X4 üzerinde enzimle ilişkili immünosorbent testi (ELISA) ile gerçekleştirildi.
Normal değerlerin aralığı kitin üreticisi tarafından yalnızca kalpprotectin için şu şekilde tanımlandı: Normal olarak 50.0 mcg/g'ye eşit veya daha az, 50.1– Sınır değer olarak 120,0 mcg/g ve bağırsak hastalığı açısından pozitif olarak 120,1 mcg/g'ye eşit veya daha büyük. Reaksiyon kitinin üreticisi, zonulin için herhangi bir alt tespit limiti belirtmedi. IFABP/FABP2 kiti için alt tespit limiti, LBP için 0,156 ng/mL, 3,125 ng/mL ve kalprotektin için 3,125 ng/mL idi. Zonulin, I-FABP/FABP2 ve LBS/LBP için kit üreticisi bir dizi normal değer bildirmedi ve diğer yazarlar tarafından çalışmalarında kullanılan değerler kullanıldı. Serum, her kan örneğinden 3000 x g'de santrifüjleme yoluyla ekstre edildi. Thermo Scientific SL16R santrifüjü kullanılarak 30 dakika boyunca.
Elde edilen tüm serumlar analizler yapılıncaya kadar -200 ◦C'de donduruldu. IFABP/FABP2 ve LBP için numuneler, testten önce bir numune seyreltme tamponu ile 1/2 oranında seyreltildi. Dışkı örnekleri test gününe kadar -20 ◦C'de saklandı. Dışkı numunesi ekstraksiyonu, 20 mg dışkı ile birlikte 980 uekstraksiyon tamponu kullanılarak gerçekleştirildi, 30 saniye karıştırıldı ve ardından Thermo Scientific SL16R santrifüj kullanılarak 2000 x g'de 10 dakika santrifüj edildi. Numunelerin seyreltilmesi daha sonra 980 Iu numune tamponu ve 20 Iu ekstraksiyon süpernatantı ile gerçekleştirildi.
Dört işaretleyici için, yakalama antikorları ile kaplanmış 96 kuyucuklu mikroplakalar kullanıldı: anti-calprotectin antikorları, anti-IFABP/FABP2 antikorları, anti-LBP antikorları veya anti-zonulin antikorları. Testin prensipleri aynı temele dayanan tek enzimle ilişkili immünolojik test teknolojisine (ELISA) dayanıyordu. Daha sonra kuyucuklara standart numuneler, test numuneleri ve biyotinle konjuge tespit antikorları eklendi. HRP (yaban turpu peroksidaz) enzimatik reaksiyonunu görselleştirmek için TMB substratları (3,30,5,50-tetrametilbenzidin) kullanıldı. HRP, asit durdurma solüsyonunun eklenmesinden sonra sarıya dönüşen mavi bir ürün üretmek için TMB'yi katalize etti.
Sarı noktanın yoğunluğu plakada yakalanan numune miktarıyla orantılıydı. Renk yoğunluğu mikroplaka okuyucuda 450 nm'de ölçüldü ve ardından hedef konsantrasyon hesaplandı.
2.4. İstatistiksel analiz
İstatistiksel analiz, IBM SPSS istatistik yazılımı sürüm 23 (Armonk, NY, ABD: IBM Corp.) kullanılarak yapıldı. Veriler medyan ve IQR (çeyrekler arası) olarak sunulmuştur.çarpık dağılımlar durumunda sürekli değişkenler için veya kategorik değişkenler için yüzdeler olarak P75–P25 aralığı).
Shapiro-Wilk normallik testi, analiz edilen sürekli değişkenler durumunda, olasılığı (p) anlamlılık seviyesinden {{0}.05 daha düşük olan testin istatistiksel değerlerinin gösterdiğinden, p >=0.05 olan LBP ve PHQ 9 değişkenleri dışında normallik karşılanmadı. Söz konusu değişkenler arasındaki korelasyonun incelenmesinde Spearman'ın rho korelasyon katsayısı (ρ) ve buna bağlı olasılık (p)'nin sunulmasıyla yapılan parametrik olmayan bir yaklaşımın daha uygun olduğunu düşündük. Anlamlılık düzeyi 0,05 olarak belirlendi.
Kabızlığı Gidermek İçin Doğal Bitkisel İlaç-Cistanche
Cistanche, Oobanchaceae familyasına ait parazitik bitkilerin bir cinsidir. Bu bitkiler tıbbi özellikleriyle bilinir ve yüzyıllardır Geleneksel Çin Tıbbında (TCM) kullanılmaktadır. Cistanche türleri ağırlıklı olarak Çin'in kurak ve çöl bölgelerinde, Moğolistan'da ve Orta Asya'nın diğer bölgelerinde bulunur. Cistanche bitkileri etli, sarımsı gövdeleriyle karakterize edilir ve potansiyel sağlık yararları nedeniyle oldukça değerlidir. TCM'de Cistanche'nin tonik özelliklere sahip olduğuna inanılıyor ve genellikle böbreği beslemek, canlılığı arttırmak ve cinsel işlevi desteklemek için kullanılıyor. Aynı zamanda yaşlanma, yorgunluk ve genel refahla ilgili sorunları çözmek için de kullanılır. Cistanche'nin geleneksel tıpta uzun bir kullanım geçmişi olmasına rağmen etkinliği ve güvenliğine ilişkin bilimsel araştırmalar devam etmekte ve sınırlıdır. Ancak tıbbi etkilerine katkıda bulunabilecek feniletanoid glikozitler, iridoidler, lignanlar ve polisakkaritler gibi çeşitli biyoaktif bileşikler içerdiği bilinmektedir.
Wecistanche'nincistanche tozu, cistanche tabletleri, cistanche kapsüllerive diğer ürünler kullanılarak geliştirildiçölcistancheHammadde olarak hepsi kabızlığın giderilmesinde iyi bir etkiye sahiptir. Spesifik mekanizma şu şekildedir: Cistanche'nin geleneksel kullanımına ve içerdiği bazı bileşiklere dayanarak kabızlığı gidermede potansiyel faydalara sahip olduğuna inanılmaktadır. Cistanche'nin özellikle kabızlık üzerindeki etkisine ilişkin bilimsel araştırmalar sınırlı olsa da, kabızlığı hafifletme potansiyeline katkıda bulunabilecek birden fazla mekanizmaya sahip olduğu düşünülmektedir. Laksatif etkisi:CistancheGeleneksel Çin Tıbbında uzun süredir kabızlığa çare olarak kullanılmaktadır. Bağırsak hareketlerini teşvik etmeye ve kabızlığı tetiklemeye yardımcı olabilecek hafif bir müshil etkisine sahip olduğuna inanılmaktadır. Bu etki, Cistanche'deki feniletanoid glikozitler ve polisakkaritler gibi çeşitli bileşiklere atfedilebilir. Bağırsakları Nemlendirir: Geleneksel kullanıma göre Cistanche'nin özellikle bağırsakları hedef alan nemlendirici özelliklere sahip olduğu kabul edilir. Bağırsakların hidrasyonunu ve yağlanmasını teşvik etmek, aletlerin yumuşamasına ve geçişi kolaylaştırmaya yardımcı olabilir, böylece kabızlığı hafifletebilir. Anti-inflamatuar Etki: Kabızlık bazen sindirim sistemindeki inflamasyonla ilişkilendirilebilir. Cistanche, antiinflamatuar özelliklere sahip olduğuna inanılan feniletanoid glikozitler ve lignanlar dahil olmak üzere belirli bileşikler içerir. Bağırsaklardaki iltihabı azaltarak bağırsak hareketinin düzenliliğini artırmaya ve kabızlığı hafifletmeye yardımcı olabilir.
