Makrofaj Tükenmesi, Faktör H'ye Bağlı İmmün Kompleks Aracılı Glomerülonefritte Hastalık Patolojisini Azaltır Ⅱ

3. Sonuçlar

At dalak apoferritini ile tekrarlayan immünizasyon yoluyla farelerde CSS'yi indükledik. Hayvanlar aktif bir antiapoferritin IgG humoral immün üretiryanıt verir ve IgG'yi glomerüllerde biriktirir. Daha önceki çalışmalarımız Mϕ'nin arttığını ortaya çıkardıböbreklere sızmabu ortamda.

3.1. FH'ye Bağlı ICGN Böbreklerinde Makrofaj Gen İfadesi Artmıştır. FH'ye bağımlı ICGN böbreklerinde Mϕ'lerin varlığını değerlendirmek için, M2 makrofaj belirteçleri, CD204 (Mϕ temizleyici reseptör 1) ve CD206 (Mϕ mannoz reseptörü 1) ile qRT-PCR gerçekleştirildi [21-24]. Böbrekteki her iki genin ekspresyonu, FHKO farelerinde (Şekil 1) apoferritin tedavisinin ardından önemli ölçüde yukarı doğru düzenlenmiştir.böbrekte makrofaj varlığının artması.

BÖBREK İŞLEVLERİNE YÖNELİK %25 EKİNAKOSİT VE %9 AKTEOSİT İÇEREN DOĞAL ORGANİK SİSTANŞ EKSTRATINI ALMAK İÇİN BURAYA TIKLAYIN

Wecistanche Destek Hizmeti-Çin'deki en büyük cistanche ihracatçısı:

E-posta:wallence.suen@wecistanche.com

Whatsapp/Tel:+86 15292862950

Daha Fazla Özellik İçin Alışveriş Yapın Detaylar:

https://www.xjcistanche.com/cistanche-shop

3.2. Apoferritinle Tedavi Edilen FHKO Farelerinde Renal Makrofaj Sızmasında Klodronat Tedavisiyle Zaman Dersi Değişiklikleri. FH'ye bağımlı ICGN'de Mϕ'leri azaltmanın etkili yöntemini belirlemek için fh-/- farelerde Mϕ'leri tükettik

Şekil 3: Ek veriler. Kontrol ve klodronat ile tedavi edilen farelerden alınan F4/80+ monositlerinin akış sitometri profilleri verilmiştir. F4/ 80+ hücreleri, klodronat tedavisiyle önemli ölçüde azaltılarak %10'un altına iner. Her zaman noktası n=6.

3.4. Makrofaj Tükenmesi Glomerüleri Azaltır

FH Aracılı ICGN'de Patoloji. Deney sonunda böbrekteki immün kompleks birikimleri ve ICGN'nin histopatolojik özellikleri değerlendirildi. C3 ve IgG için immünofloresan boyama, Mϕ tükenmesinin bu ortamda immün kompleksleri modüle etmediğini ortaya çıkardı. Temsili immünofloresan boyama ve histopatoloji, Şekil 5'te gösterilmektedir. Birincil histopatolojik özellik, CSS'li fh-/- farelerde glomerüler kümelerin yaygın hiperselüleritesiydi ve Mϕ'lerin tükenmesi üzerine önemli ölçüde azaldı.

3.5. Makrofajlar, FH'ye Bağlı ICGN'de Sitokinleri Modüle Eder.

Bir kez Mϕböbreğe sızmakve inflamatuar uyaranlara maruz kaldıklarında sitokinleri serbest bırakırlar. Salin, apoferritin veya apoferritin ve klodronat ile tedavi edilen FHKO farelerinde plazma dolaşımdaki TNF ve IL-6 seviyelerini ve böbrek mCSF'sini ELISA ile değerlendirdik. IL-6'nin dolaşımdaki seviyeleri vahşi tip farelerde çok düşüktü ve FHKO farelerinde arttı ve klodronat ile tedavi edilen FHKO farelerinde azaldı (Şekil 6). Üç sitokin, TNF, IL-6 ve mCSF, salinle tedavi edilen kontrollerle karşılaştırıldığında apoferritinle tedavi edilen farelerde önemli ölçüde arttı. Klodronat tarafından Mϕ tükenmesi bu ortamda sitokinlerdeki artışı önemli ölçüde sınırladı

3.6. Makrofajlar Profibrotikleri Modüle Ediyor

FH'ye Bağlı ICGN'de Moleküller ve Laminin. Bir kereböbrekler bir hastalık geliştirirfibrotik olma eğilimindedirler. Mϕ'ler profibrotik molekülleri aşırı üreterek fibrotik sürece katılırlar. Gerçek zamanlı PCR, dönüştürücü büyüme faktörü-beta1 (TGFbeta1) mRNA ifadesinde %75'lik bir artış, metaloproteinaz-9 (MMP9) ifadesinde %100'lük bir artış ve laminin mRNA'sında %230'luk bir artış ortaya çıkardı. MRNA ekspresyonuna uygun olarak, Mϕ'lerin yokluğunda azalan CSS'li fh-/- farelerde laminin protein ekspresyonu önemli ölçüde artar (Şekil 7).

4. Tartışma

Son çalışmalarımız FH'nin yokluğunda farelerde yaygın hastalık geliştiğini göstermiştir.proliferatif glomerülonefrit(GN), IC bölgelerinin çevresinde F4/80+ Mϕ'ler ile [10]. Ayrıca, çalışmalarımız Cd11b-/- fh-/- farelerinin glomerülonefritin kötüleşen özelliklerine sahip olduğunu göstermektedir [26]. Artan inflamatuar M1 makrofajlarının varlığının ve bunların sürekli aktivasyonunun doku patolojisine neden olabileceği ve bunların anti-inflamatuar fenotipte repolarizasyonlarının hastalık patolojisinin çözümüne yardımcı olacağı göz önüne alındığında, mevcut çalışma Mϕ'lerin fh'deki rolünü daha iyi anlamak için yapıldı. -/- ICGN'li fareler. Böbrekte Mϕ'lerin artan varlığı ve FH aracılı ICGN sırasında makrofajların tükenmesi yoluyla hastalık patolojisinin çözülmesi, Mϕ'lerin bu ortamda kritik rolünü göstermektedir ve bu nedenle, bu ortamda önemli terapötik hedefler olarak hizmet edebilirler.

Şekil 5: Mϕ'nin tükenmesi, FH'ye bağımlı ICGN'de glomerüler patolojiyi azaltır. Salinle tedavi edilen (a), apoferritinle tedavi edilen (b) ve apoferritin+klodronatla tedavi edilen FH eksikliği olan farelerden alınan glomerüllerin temsili görüntüleri verilmiştir. (A)'da bölümler C3 (yeşil) ve IgG (kırmızı) ile boyanırken, (B) PAS ile boyanmış bölümleri gösterir. Apoferritin tedavisiyle artan IgG birikimleri değişmeden kalırken, makrofaj tükenmesi üzerine glomerüller normale daha yakın görünüyordu.

FH'nin yokluğu C5a üretiminin artmasına neden olur. C5a, Mos'u böbreğe gönderen C5aR1'e bağlanır ve burada iltihaplı ortama eklenir. Ek olarak, çalışmalarımız aynı zamanda aşırı C5a üretimi ortamında C5a'nın inaktivasyonunun hastalığı sınırladığını da göstermiştir [10]. Mos'un aktivasyonu onların kutuplaşmasına neden olur, ancak süreklilik halinde kalırlar [27]. Bu çalışmadaki sonuçlarımız, makrofaj tükenmesi olmayan fh-/- farelere kıyasla Mϕ'lerin tükendiği fh-/- farelerde CSS'deki glomerüler hastalığın azaldığını göstermektedir. Dolayısıyla, fh-/- farelerde Mϕ alle viated ICGN'nin ortadan kaldırılması hastalık patolojisini azaltır. Bununla birlikte, Mϕ'ler aynı zamanda onarım süreci için de gereklidir ve Mϕ'ler pro-iltihaplanma durumlarından antiinflamatuar durumlara ve tersi durumlardan da pro-iltihaplanma durumlarına değiştiğinden, Mϕ'lerin manzarasını onları tüketmeden değiştirmenin hastalık patolojisini değiştirip değiştiremeyeceğini anlamak gelecekteki çabamız olacaktır.

Mϕ'ler fibrozisin başlatılmasında ve sürdürülmesinde önemli bir rol oynar ve aynı zamanda fibrozisin baskılanması, çözülmesi ve tersine çevrilmesinde de rol oynar [28]. Sonuçlarımız, CD204+ ve CD206+ Mϕ işaretleyicilerinin ifadesinin arttığını gösteriyor, bu da onların bu ortamda artan varlığını gösteriyor. Bu Mϕ'ler profibrotik moleküllerin ana kaynağı olduğundan, MMP9'un yanı sıra TGF -1'de de bir artış olduğunu gösteren sonuçlarımız, bu Mϕ'lerin farklı mekanizmalar yoluyla FH aracılı ICGN'deki fibrotik süreçlere hem doğrudan hem de dolaylı olarak katkıda bulunabileceğini göstermektedir ( 1,3,8,44). TGF -1, sitokin düzenlemesi yoluyla fibrozu değiştirebilir. Ek olarak, TGF -1, monositlerdeki C3 ve faktör B biyosentezini ve ekspresyonunu modüle eder [29] ve bağışıklık hücreleri ile böbrek hücrelerindeki komplemanın değiştirilmesi, doku fibrozunu kolaylaştırabilir [30]. Bununla birlikte, makrofajlar ve kompleman arasındaki kesin etkileşimlerin, ilgili mekanizma/mekanizmaların, rollerinin ve doku bölümlendirmesinin deşifre edilmesi gerekmektedir [31]. Çalışmalarımız, Mϕ'si tükenmiş farelerde, Mϕ'si yeterli farelere kıyasla laminin ekspresyonunun azaldığını gösterdi. FH'nin fibrotik süreci nasıl düzenlediğini daha iyi anlamak için, FH aracılı ICGN'de mevcut olan spesifik Mϕ alt kümelerini tanımlamamız ve her bir alt küme popülasyonunun katkılarını açıklamamız gerekir. Bu çalışmalar tamamlayıcı tedavilerin klinik bir gerçeklik haline gelmesi nedeniyle önemlidir. İnhibitörler, kompleman kademesindeki, aktivasyon yol(lar)ındaki aşağı yöndeki adımları bloke edecek farklı hedeflere karşı geliştirilmiş ve geliştirilmeye devam etmektedir. Şu anda klinik kullanımda olan kompleman inhibitörlerinden biri anti-C5 antikoru Eculizumab'tır [32]. Bu nedenle hastalıktaki patojenik kompleman bileşenlerinin tanımlanması ve bunun Mϕ popülasyonunun düzenlenmesiyle desteklenmesi önemsiz bir nokta değildir.

Şekil 7: Laminin birikimiFH eksikliği olan böbreklerICGN ile Mϕ'nin tükenmesi ile azalır. (a) TGFB, MMP9 ve laminin için qRT-PCRböbrek mRNA'sı5 haftalık salin ve apoferritin ve 3 haftalık klodronat sonrasında farelerden izole edildi. İfade GAPDH'ye (n=6/grup) normalleştirilir. (b) Aynı fare gruplarının böbreklerinde laminin boyaması için temsili IF fotomikrografları. ∗P < 0:01.

Özetle, burada Mϕ'lerin FH'ye bağımlı ICGN modelindeki rolünü inceledik. Sonuçlar ayrıca lupus nefriti, IgA nefropatisi ve membranöz nefropati gibi farklı hastalıklarda gözlemlenenler gibi immün komplekslerle düzensiz kompleman aktivasyonunun olduğu ortamlarda da uygulanabilir. Hem FH tarafından kompleman düzenlemesinin hem de hastalıktaki Mϕ durumunun önemini gösteriyoruz. Bu nedenle, IC aracılı GN'de kompleman kaskadının ve Mφ durumunun farmakolojik olarak hedeflenmesi potansiyel klinik öneme sahiptir.

Referanslar

[1] T. Mijovic, A. Zeitouni ve I. Colmegna,"Otoimmün sensörinöral işitme kaybı: otoloji-romatoloji arayüzü," Romatoloji, cilt. 52, hayır. 5, s. 780–789, 2013. [2] M. Abongwa, KE Baber, RJ Martin ve AP Robertson,"Ascaris suum ACR-16 nAChR'nin açık kanal engelleyicisi olarak kolinomimetik morantel," Omurgasız Sinir Bilimi, cilt. 16, hayır. 4, 2016.

[3] AS De Vriese, S. Sethi, J. Van Praet, KA Nath ve FC Fer venza,"Kompleman alternatif yolunun düzensizliğinden kaynaklanan böbrek hastalığı: etiyolojik bir yaklaşım," Amerikan Nefroloji Derneği Dergisi, cilt. 26, hayır. 12, s. 2917– 2929, 2015. [4] RJ Quigg,"Kompleman ve otoimmün glomerüler hastalıklar," Otoimmünitede Güncel Yönelimler, cilt. 7, s. 165– 180, 2003. 

[5] MC Carroll,"Uyarlanabilir bağışıklığın düzenlenmesinde kompleman sistemi," Doğa İmmünolojisi, cilt. 5, hayır. 10, s. 981– 986, 2004. [6] MV Carroll ve RB Sim,"Sağlıkta ve hastalıkta tamamlayıcı," Gelişmiş İlaç Dağıtımı İncelemeleri, cilt. 63, hayır. 12, s.965–975, 2011. 

[7] M. Noris ve G. Remuzzi,"Kompleman aktivasyonu ve düzenlemesine genel bakış," Nefroloji Seminerleri, cilt. 33, hayır. 6, s. 479–492, 2013. 

[8] VP Ferreira, AP Herbert, C. Cortes ve diğerleri,"Atipik hemolitik üremik sendromda faktör H'nin hücreler üzerindeki fizyolojik polianyonlar ve C3b kompleksine bağlanması bozulur." İmmünoloji Dergisi, cilt. 182, hayır. 11, s.7009–7018, 2009.

[9] JJ Alexander, MC Pickering, M. Haas, I. Osawe ve RJ Quigg,"Kompleman faktörü h, immün kompleks birikimini sınırlar veflKronik serum hastalığı olan farelerin glomerüllerinde iltihaplanma ve yara izi," Amerikan Nefroloji Derneği Dergisi, cilt. 16, hayır. 1, s. 52–57, 2005.

[10] JJ Alexander, L. Chaves, A. Chang ve RJ Quigg,"C5a reseptörü, kompleman faktör H-de'deki immün kompleks glomerülonefritte anahtar bir role sahiptir.fieski fareler," Böbrek Uluslararası, cilt. 82, hayır. 9, s.961–968, 2012. 

[11] Özgeçmiş Jakubzick, GJ Randolph ve Başbakan Henson,"Monosit diFforyantasyon ve antijen sunma fonksiyonları," Doğa İncelemeleri. İmmünoloji, cilt. 17, hayır. 6, s. 349–362, 2017. 

[12] Q. Cao, Y. Wang ve DC Harris,"Böbrekte makrofaj heterojenliği, fenotipleri ve rollerifiBrosis," Böbrek Uluslararası. Ek, cilt. 4, hayır. 1, s. 16–19, 2014.

[13] Q. Cao, Y. Wang, XM Wang ve diğerleri,"Renal F4/80+ CD11c+ mononükleer fagositler, sağlıkta ve adriyamisin nefropatisinde makrofajların fenotipik ve fonksiyonel özelliklerini gösterir," Amerikan Nefroloji Derneği Dergisi, cilt. 26, hayır. 2, s. 349–363, 2015.