Akut Böbrek Hasarının Tedavisinde Cistanche Bazlı Moğol Bitkisel Reçetesinin Mekanistik Çalışması: Bir Ağ Farmakolojisi, Moleküler Yerleştirme ve İn Vivo Doğrulama Yaklaşımı

2. Sonuçlar

2.1 Ağ Farmakolojisi Analizi

2.1.1 Cistanche Bazlı Moğol Reçetesinin Aktif Bileşenleri ve Hedeflerinin Taranması ve Bileşen-Hedef Ağının Oluşturulması

Tarama kriterlerine göre, 15'i aşağıdakiler olmak üzere toplam 75 aktif bileşen toplandı:Piper longum, 8'denAreka cevizi, 13'tenAlpinia officinarum, 32'denTarçın, 7'denNarve 4'üAmomum villosum. Aralarında,NarVeAlpinia officinarum3 bileşeni paylaştık veAmomum villosumVeAlpinia officinarum1 bileşen paylaştı. Karşılık gelen hedefler 97'yi içeriyordu.Piper longum, 23 içinAreka cevizi, 188 içinAlpinia officinarum, 440 içinTarçın, 181 içinNarve 78 içinAmomum villosum. Kopyaların kaldırılmasının ardından toplam 682 benzersiz hedef elde edildi. Bu bileşenler ve hedefler, daha büyük düğümlerin daha yüksek dereceli merkeziliği gösterdiği görsel bir ağ oluşturmak için Cytoscape'e aktarılmıştır (Şekil 1).

 

 

 

2.1.2 AKI Hedeflerinin Toplanması

AKI ile ilgili hedefler aşağıdaki veritabanlarından toplanmıştır:

GeneCard'lar: 11.304 hedef

OMIM: 638 hedef

TTD: 4 hedef

İlaç Bankası: 46 hedef

PharmGKB: 91 hedef

Yinelenen kopyalar kaldırıldıktan sonra AKI ile ilgili toplam 11.792 benzersiz hedef belirlendi. Örtüşmeyi görselleştirmek için bir Venn diyagramı oluşturuldu (Şekil 2).

2.1.3 Temel Bileşenlerin ve Hedeflerin Taranması ve ÜFE Ağının Oluşturulması

Bölüm 2.1.1'deki bileşen-hedef ağından, Cistanche bazlı Moğol reçetesinin 7 temel aktif bileşeni belirlendi (bkz. Tablo 2). Bir Venn şeması, reçete ile AKI ile ilgili hedefler arasında 613 örtüşen hedef gösterdi (Şekil 3). Bunlar, 54 potansiyel hedefi ve 6 temel hedefi tanımlayan bir PPI ağı oluşturmak için STRING veritabanına girdi olarak verildi (Şekil 4).

Böbrek Sağlığının İyileştirilmesi için Cistanche Bazlı Moğol Reçetesi

Şimdi iletişime geçin

 

 

 

 

2.1.4 GO ve KEGG Zenginleştirme Analizi

GO zenginleştirme analizi, 3.454 biyolojik süreç (BP), 194 hücresel bileşen (CC) ve 295 moleküler fonksiyon (MF) dahil olmak üzere 3.943 ek açıklama sağladı. –log10(P-değeri) bazında ilk 10 giriş görselleştirildi.

BP: DNA bağlayıcı transkripsiyon faktörü aktivitesi, steroid hormon regülasyonu, miyeloid hücre farklılaşması

CC: transkripsiyon düzenleyici kompleksi, membran salı, kesecikler

MF: transkripsiyon faktörü bağlanması, fosfataz bağlanması, sitokin bağlanması (Şekil 5)

KEGG yolu analizi, ilk 20'nin görselleştirildiği 212 zenginleştirilmiş yol belirledi. Bunlar şunları içeriyordu:

PI3K/Akt sinyal yolu

IL-17 sinyal yolu

TNF sinyal yolu

HIF-1 sinyal yolu (Şekil 6)

AKI tedavisinde Cistanche bazlı Moğol tıbbının çok hedefli, çok yollu mekanizmasını göstermek için bir bileşik-hedef-hastalık-yol ağı oluşturuldu (Şekil 7).

2.1.5 Moleküler Yerleştirme Sonuçları

Temel bileşenlerKuersetin, T-Muurolol, Hekzadekanoik Asit, Alfa-Karyofililen, Linoleik Asit, Cis-Sinnamaldehit, VeFenetil Asetattemel hedeflere yerleştirildiAKT1 (PDB: 1unq), TNF (PDB: 5uui), IL6 (PDB: 1alu), TP53 (PDB: 3d06), IL1B (PDB: 5r8q), VeEGFR (PDB: 8a27).

0 kJ/mol'ün altındaki bağlanma enerjisi potansiyel bağlanmayı gösterirken, < –7 kJ/mol güçlü bağlanmayı gösterir. Tüm kenetlenme enerjileri -7 kJ/mol'ün altındaydı ve bu da güçlü bağlanma etkileşimleri gösteriyordu. İlk 6 etkileşim görselleştirildi (Şekil 9):

IL1B–T-Muurolol

TP53 – Cis-Sinnamaldehit

TP53 – Alfa-Karyofililen

IL1B – Alfa-Karyofililen

TNF–T-Muurolol

TP53–T-Muurolol

T-Muurolol ve Alpha-Caryophyllene, hedeflerle en güçlü etkileşimlere sahipti, bu da onları AKI için Cistanche bazlı tedavide muhtemelen anahtar bileşenler haline getiriyor.

2.2 İn Vivo Deneysel Sonuçlar

2.2.1 Farelerin Genel Durumu, Vücut Ağırlığı ve Böbrek İndeksi

Model grubundaki farelerde gıda alımında ve idrar çıkışında azalma, uyuşukluk ve solunum ve kalp hızlarında artış görüldü. Bu semptomlar tedavi gruplarında düzeldi. Kontrol grubu ile karşılaştırıldığında, model grubu farelerin vücut ağırlığı önemli ölçüde azalmıştır (P < 0,01, F=6.979), hem düşük hem de yüksek doz grupları anlamlı kilo iyileşmesi gösterdi (P < 0,01, Şekil 11). Böbrek indeksi model grupta önemli ölçüde yükselmişti (P < 0,01, F=8.56) ve tedaviden sonra doza bağlı olarak azaldı (P < 0,05, Şekil 12).

2.2.2 Cistanche Bazlı Reçetenin BUN, Scr ve UA Üzerindeki Etkisi

Model grup farelerinde kontrol grubuyla karşılaştırıldığında kan üre nitrojeni (BUN), serum kreatinin (Scr) ve ürik asit (UA) seviyeleri önemli ölçüde yükselmişti (P < 0,01). Her iki tedavi grubu da BUN'u azalttı (P < 0,01, F=12.46) ve yüksek doz grubu Scr ve UA seviyelerini önemli ölçüde azalttı (P < 0,01, F=12.8 ve 13,77, sırasıyla). UA, yüksek doz grubunda düşük doz grubuna göre anlamlı derecede düşüktü (P < 0,05, Şekil 13).

2.2.3 Böbrek Dokusunda Histopatolojik Değişiklikler (HE Boyama)

HE boyaması kontrol grubunda normal böbrek morfolojisi gösterdi. Model grupta tübüler epitelyal hücre dökülmesi, silindirler, glomerüler şişme ve inflamatuar infiltrasyon sergilendi. Her iki tedavi grubunda da azalmış patolojik hasar görüldü (Şekil 14).

2.2.4 TNF-, IL-6 ve IL-1 üzerindeki etkisi

Bu inflamatuar sitokinler Cistanche bazlı tedavinin temel hedefleridir. Model grubunda TNF-, IL-6 ve IL-1 düzeyleri önemli ölçüde yükselmişti (P < 0,01, Şekil 15). Her iki tedavi grubu da bu seviyeleri önemli ölçüde azalttı; yüksek doz grubu daha belirgin etkiler gösterdi.

2.2.5 PI3K/Akt Yolu Protein İfadesi Üzerindeki Etki

Kontrol ile karşılaştırıldığında, model grubunda PI3K ve p-Akt/Akt protein ekspresyon seviyeleri önemli ölçüde azaldı (P < 0,05). Tedavi bu seviyeleri doza bağımlı bir şekilde önemli ölçüde düzeltti (P < 0,01, Şekil 16).

3. Tartışma

AKI, yılda 2 milyondan fazla ölümle birlikte önemli bir küresel sağlık sorunu olmaya devam ediyor. Karmaşık etiyolojisi, yüksek insidansı ve kötü prognozu, hastalara ve sağlık sistemlerine ağır bir yük getirmektedir. Şu anda etkili bir ilaç mevcut değildir; Tedavi büyük ölçüde destekleyici ve pahalıdır.

Geleneksel Moğol tıbbına göre böbrek,Badaganprensiptir ve vücut sıvılarını düzenleyen "su" elementine aittir. Badagan'ın fazlalığı iç neme ve böbrek fonksiyon bozukluğuna yol açar.Cistanche bazlı Moğol formülü, oluşanCistanche, Nar, Tarçın, Piper longum, Alpinia officinarum, VeAmomum villosumböbreği ısıtmak ve üç kök (Badagan, Heyi ve Shira) arasındaki dengeyi yeniden sağlamak için tasarlanmıştır.

Her bitki belirli işlevlere katkıda bulunur:

Cistanche: böbrek yang'ını tonlandırır, kan dolaşımını iyileştirir

Piper longum: Soğuğu dağıtır, bünyeyi güçlendirir

Alpinia officinarum: mideyi ısıtır, ağrıyı dindirir

Tarçın: böbrek yang'ını ısıtır, enerjiyi artırır

Nar: susuzluğu giderir, acıyı dindirir

Amomum villosum: dalağı sıkılaştırır ve ısıtır
Birlikte böbrek soğukluğunu giderir ve dengeyi yeniden sağlar, böylece böbrek bozukluklarını tedavi ederler.

Bu çalışmada kullanılanağ farmakolojisiCistanche merkezli Moğol tıbbının aktif bileşiklerini ve mekanizmalarını sistematik olarak araştırmak. Belirlenen temel bileşenler-Kuersetin, T-Muurolol, Hekzadekanoik Asit, Alfa-Karyofililen, Linoleik Asit, Cis-Sinnamaldehit, VeFenetil Asetat-literatürle desteklenmektedir:

KuersetinAKI'de apoptoz ve inflamasyonu azaltır

T-MuurololEsansiyel yağlardan elde edilen antiinflamatuar özelliklere sahiptir

Hekzadekanoik Asithücre çoğalmasını engeller

Alfa-Karyofililenantiinflamatuar, antimikrobiyal ve antikanser etkileri vardır

Linoleik Asitmakrofaj aracılı inflamasyonu modüle eder

Cis-Sinnamaldehitantioksidan ve antibakteriyel aktivite sergiler

Fenetil AsetatAromaterapi yoluyla sinir sistemini düzenler

ÜFE ağ analizi ana hedefleri ortaya çıkardı:AKT1, TNF, IL6, TP53, IL1B, EGFR. Bunlar iltihaplanma, hücre hayatta kalma, apoptoz ve bağışıklık düzenlemesinde rol oynar.

GO ve KEGG zenginleştirmesi, özellikle karmaşık biyolojik süreçleri ve anahtar yolları önerdi.PI3K/Akt, IL-17, TNF, VeHIF-1. PI3K/Akt yolu en zengin olanıdır ve metabolizma, büyüme ve iltihaplanmada kritik bir rol oynar. Bu yolun modüle edilmesi, apoptoz ve inflamasyonu azaltarak AKI'yi hafifletebilir.

Moleküler kenetlenme, çekirdek bileşikler ve hedefler arasında güçlü bağlanmayı doğruladı ve bunların AKI tedavisindeki ilgisini destekledi.

Canlı içi deneylerağ farmakoloji bulgularını doğruladı:

Vücut ağırlığı ve böbrek indeksinde iyileşme

Azaltılmış BUN, Scr ve UA

Histopatolojik hasarın hafifletilmesi

TNF- , IL-6, IL-1 seviyelerinde azalma

Yukarı regüle edilmiş PI3K ve p-Akt/Akt ifadesi

Mekanik olarak,PI3KPIP2'yi PIP3'e dönüştürür, bu da etkinleştirirAkt, inflamatuar sitokin salınımını baskılar. İnflamasyonun azaltılması, tübüler epitel onarımını destekler ve böbrek fonksiyonunu onarır.

 

Çözüm

Bu çalışma şunu ortaya koyuyor:Cistanche bazlı Moğol tıbbı AKI'yi tedavi ediyorçoklu aktif bileşikler, hedefler ve yollar aracılığıyla, özellikle dePI3K/Akt sinyal yoluEnflamasyonu modüle eden ve böbrek fonksiyonunu koruyan. Ağ farmakoloji bulguları hayvan modellerinde doğrulanırken, gelecektein vitro ve geniş ölçekli klinik çalışmalarAKI için geleneksel Moğol tıbbının klinik kullanımını ve gelişimini desteklemek için gereklidir.