Cistanche Tubulosa'dan Monoterpen Bileşenleri—Kankanosid A—E ve Kankanolün Kimyasal Yapıları—

Cistanche tubulosa (SÇRENK) R. WİYİ(Orobanchaceae), kökleri üzerinde yetişen çok yıllık parazit bir bitkidir.SalvadoraveyaKalotropistürler Kuzey Afrika, Arabistan ve Asya ülkelerinde dağıtılmaktadır.1) Bu bitkinin sapları (Japonca'da Kanka-nikujuyou) geleneksel olarak iktidarsızlık, kısırlık, lumbago ve vücut zayıflığının tedavisinde kullanılmıştır.2) Daha önce çeşitli iridoidler, monoterpenoidler,feniletanoidlerve lignanlar Çin ve Pakistan'dan izole edildiC. tubulosa. 1,3–7) Çin doğal ilaçlarındaki biyoaktif bileşenler üzerine seri çalışmalarımız sırasında,8–18) dört yeni iridoid glikozit, kankanosid A (1), B (2), C (3) ve D (4), klorlu bir iridoid, kankanol (5) ve bir asiklik monoterpen glikozit, kankanosid E (6), 12 monoterpen dahil olmak üzere bilinen 16 bileşikle birlikte bu bitkisel ilacın metanolik ekstraktından izole edilmiştir (7-18). Bu makale yeni monoterpen bileşenlerinin izolasyonu ve yapısının aydınlatılmasıyla ilgilidir (1-6). 

CİNSEL FONKSİYONU GELİŞTİREN DOĞAL CISTANCHE TUBULOSA PHGS75% ECH 30% ACT 12%

C. tubulosa'nın kurutulmuş saplarından elde edilen metanolik ekstrakt (bu bitkisel ilacın %26,8'i), kankanosidler A (1, 0) verecek şekilde normal fazlı ve ters fazlı silika jel kolon kromatografisine ve tekrarlanan HPLC'ye tabi tutuldu. }{{10}}%54), B (2, 0.030%), C (3, 0.{ {32}}0%27) ve D (4, {{40}}.00%15), kankanol (5, {{57) }}.00%34) ve kankanoside E (6, 0.0%27) mussaenosidik asit19) (7, 0 ile birlikte .0%20), geniposidik asit19) (8, %0,030), 8-epiloganik asit7) (9, %0,033), glukozit19) (10, %0,14), antirrid20) (11, 0,0079 %), ajugol19) (12, %0,011), bartsiosid19) (13, %0,21), 6-deoksikatalpol19) (14, %0,11), argyol21) (15, %0,0030), sistanin22,23) (16 , %0,0040), sistaklorin22) (17, %0,0035), (2E,6Z)-8-bD-glukopiranosiloksi-2,6-dimetil-2,6- oktadienoik asit24) (%18, %0,0028), Dmannitol25) (%4,19), üridin25) (%0,0069), (3R)-3-hidroksi-2- pirolidinon26,27) (%0,0020) ve (3R) )-3-hidroksi-1-metil- 2-pirolidinon27) (%0,0059).

Kankanoside A'nın Yapısı (1)

Kankanosid A (1), amorf bir toz halinde elde edildi ve negatif bir optik dönüş sergiledi (MeOH'de [a]D 25 - 107.4 derece). 1'in IR spektrumu, bir glikozit parçasını düşündüren 3410 ve 1076 cm- 1'deki güçlü emme bantlarına ek olarak olefin fonksiyonuna atanabilen 1647 cm{- 1'de bir emme bandı gösterdi. 1'in pozitif ve negatif iyon hızlı atom bombardımanında (FAB)-MS'de, m/z 369'da yarı moleküllü iyon zirveleri gözlendi

(M Na) ve 345 (M-H)- ve yüksek çözünürlüklü FAB-MS analizi, 1'in moleküler formülünün C16H26O8 olduğunu ortaya çıkardı. 1'in 1.0 M hidroklorik asit (HCl) ile asit hidrolizi, bir optik rotasyon detektörü kullanılarak HPLC analizi ile tanımlanan D-glikozu serbest bıraktı.8,10-12,15-18) Çeşitli NMR deneyleri tarafından atanan 1'in 'H- (CD3OD, Tablo 1) ve 13C-NMR (Tablo 2) spektrumları,28), iki metille atanabilen sinyaller gösterdi [d 1.31 (s, 10-H3) , 1,51 (br s, 11-H3)], iki metilen [d 1,49, 2,02 (hem m, 6a- hem de 6b-H), 1,64, 1,67 (hem m, 7b- hem de 7a-H)], iki metin [d 2,21 (dd, J{= 2.7, 9,5 Hz, 9-H), 2,71 (m, 5-H)] ve bir a,b-doymamış asetal grubu [d 5,33 (d, J= 2,7 Hz, 1-H), 5,95 (br s, 3-H)] bir b-glikopiranosil kısmı ile birlikte [d 4,62 (d, J= 7.9 Hz, 1'-H)]. Şekil 1'de gösterildiği gibi, 1'deki 1H–1H korelasyon spektroskopisi (1H–1H COSY) deneyi, kalın çizgilerle yazılmış kısmi yapıların varlığını göstermiştir. 1 üzerinde yapılan heteronükleer çoklu bağ korelasyonları (HMBC) deneyinde, aşağıdaki protonlar ve karbonlar (3-H, 1' -H ve 1-C; {{88}) arasında uzun menzilli korelasyonlar gözlemlendi. }H3 ve 3-C; 3-H, 5-H, 6-H2, 9-H, 11-H3 ve 4- C; 11-H3 ve 5-C; 10-H3 ve 1-H, 7-H2, 9-H; , 10-H3 ve 8-C; 10-H3 ve 9-C; Şekil 1'de gösterildiği gibi. 1'in b-glukosidaz ile enzimatik hidrolizi, Şekil 3'te gösterildiği gibi bir aglikon olan kankagenin a (1a)'yı verdi. 1 için 13CNMR spektrumunun 1a için olanlarla karşılaştırılması, 1 [ 1: dC 94,1 (1-C), 134,6 (3-C), 53,3 (9-C); 1a: d C 92,9 (1-C), 135,3 (3-C), 54,7 (9-C)]. Böylece, 1'deki bD-glukopiranosil kısmının bağlantısının da 1a'nın 1-pozisyonunda olduğu açıklığa kavuşturuldu. Daha sonra, 1'in göreceli stereo yapısı, aşağıdakiler arasındaki NOE korelasyonlarını gösteren bir nükleer Overhauser geliştirme spektroskopisi (NOESY) deneyi ile karakterize edildi.

azalan proton çiftleri ({{{0}}H ve 10-H3; 3-H ve 11-H3; 5-H ve 6b-H, {{9 }}H; 6b-H ve 7b-H; 7a-H ve 10-H3; 7b-H ve 9-H) Şekil 2'de gösterildiği gibi. 22}}1'deki pozisyon, hemiasetal bileşiklere uygulandığı bulunan 1,1'-disakkarit29)'un 13CNMR glikosilasyon kaydırma kuralının uygulanmasıyla belirlendi.30,31) 1-pozisyonunun stereoyapısı NOESY deneyi de dahil olmak üzere 1H-NMR analizinin karşılaştırılması yoluyla 1'de korunduğu doğrulandı. Glikozilasyon kayma değerlerinin [Dd 1,2 ppm (1' -C) ve 0,9 ppm (1- C), piridin-d5'te) R, Rdihemiasetal kombinasyonunun karakteristiği olduğu bulundu; bu, mutlak stereoyapıya karşılık geldi. Sonuç olarak, 1'in 1-pozisyonundaki mutlak konfigürasyonunun S konfigürasyonu olduğu belirlendi ve 1'in mutlak stereo yapısı gösterildiği gibi açıklandı.

DOĞAL CISTANCHE TUBULOSA ÇİN GELENEKSEL İLAÇLARI PHGS75% ECH 30% ACT 12%

Kankanosit B (2) ve C (3)'ün Yapıları

Kankanoside B (2) de negatif optik rotasyona sahip (MeOH'de [a]D 26 - 118.7 derece) amorf bir toz halinde izole edildi. 2'nin IR spektrumu, hidroksil, olefin ve eter fonksiyonlarına atfedilebilen 3410, 1647 ve 1085 cm- 1'de soğurma bantları gösterdi. C15H24O10 moleküler formülü, pozitif iyonlu FABMS'deki yarı moleküler iyon tepe noktaları ve yüksek çözünürlüklü FAB-MS ile belirlendi. 2'nin 1.0 M HC1 ile serbest bırakılan D-glikoz ile asit hidrolizi; bu, bir optik rotasyon detektörü kullanılarak HPLC analizi ile tanımlanmıştır.8,10-12,15-18) 1H- ( 2'nin CD3OD, Tablo 1) ve 13C-NMR (Tablo 2) spektrumları28), iki metilene atanabilen sinyaller gösterdi [d 1.40 (ddd, J= 5.2, 7.3, 13.5 Hz, 6a-H), 2.52 ( ddd, J= 7.0, 9.2, 13.5 Hz, 6b-H), 3.85, 3.99 (her ikisi de d, J= 11.9 Hz, 10-H2)], dört metin [ d 2,21 (dd, J= 6,4, 8,6 Hz, 9-H), 2,83 (m, 5-H), 4,02 (dd, J= 5,2, 7,0 Hz, 7-H), 5,49 (d, J= 6,4 Hz, 1-H)] ve bir cis-olefin çifti [d 4,95 (dd, J{{84) }}.0, 6.1 Hz, 4-H), 6.22 (dd, J= 1.8, 6.1 Hz, 3-H)], bir b-glikopiranosil kısmı ile birlikte [d 4,72 (d, J= 7,9 Hz, 1'-H)]. 2'nin 1H- ve 13C-NMR verilerindeki proton ve karbon sinyalleri, 7- ve 8-'den kaynaklanan sinyaller hariç, 6-deoksikatalpol (14)'ünkilere benzerdi. pozisyonlar. Şekil 1'de gösterildiği gibi, 2'deki 1H–1H COSY deneyi, kalın çizgilerle yazılmış kısmi yapıların varlığını gösterdi ve HMBC deneyinde, aşağıdaki proton ve karbon çiftleri arasında uzun menzilli korelasyonlar gözlemlendi ({ {117}}H, 1' -H ve 1-C; 1-H ve 10-H2 ve 7- C; }H, 7-H, 9-H, 10-H2 ve 8-C; 7-H, 10-H2 ve 9- C; 7-H ve 10-C). 2'nin göreceli stereo yapısı, aşağıdaki proton çiftleri (1-H ve 10-H2; 3- H ve 4-H; {) arasındaki NOE korelasyonlarını gösteren NOESY deneyi ile karakterize edildi. {144}}H ve 6b-H, 9-H; 6b-H ve 7-H; 7-H ve 9-H), Şekil 2'de gösterildiği gibi. 14'ün %5 sulu potasyum hidroksit (KOH) ile alkalin muamelesi sonucu 2 ve 19, 32) elde edildi, böylece 2'nin stereo yapısı açıklığa kavuşturuldu.

KankanosidC(3), negatif optik rotasyona sahip (MeOH'de [a]D 26 - 34.0 derece) amorf bir toz halinde izole edildi. Negatif iyon FAB-MS 3'te, m/z 399 ve 401 (M-H)-'de bir çift izotop yarı moleküllü iyon zirvesi gözlemlendi. Yüksek çözünürlüklü FAB-MS ölçümü ile 3'ün moleküler formülünün C15H25ClO10 olduğu belirlendi. 3'ün 1,0 M HC1 ile serbest bırakılan D-glikoz ile asit hidrolizi; bu, bir optik rotasyon detektörü kullanılarak HPLC analizi ile tanımlanmıştır.8,10-12,15-18) 1H- (CD3OD, Tablo 1) ve 3'ün 13C-NMR (Tablo 2) spektrumu28), üç metilene atanabilen sinyalleri gösterdi [d 1,70 (br dd, J{= yaklaşık 3, 13 Hz, 4a-H), 2,70 (br dd, J{{) 41}} yaklaşık 6, 13 Hz, 4b-H), 1,68 (br d, J= yaklaşık 13 Hz, 6aH), 2,44 (m, 6b-H), 4,01, 4,04 (her ikisi de d, J= 11.3 Hz, 10-H2)], beş metin [d 2.47 (dd, J= 2.5, 7.9 Hz, 9-H), 2.61 (m) , 5- H), 3,94 (br s, 7-H), 5,10 (br d, J= yaklaşık 3 Hz, 3-H), 5,48 (d, J= 2.5 Hz, 1-H)] ve bir b-glikopiranosil kısmı [d 4.60 (d, J= 8.0 Hz, 1' -H)]. 3'ün 1H- ve 13C-NMR spektrumundaki proton ve karbon sinyalleri, 3- ve 4-konumlarından kaynaklanan sinyaller hariç, 2'ninkilerin üzerine bindirilebilirdi. 3'teki bD-glukopiranosil ve klor fonksiyonunun pozisyonları, Şekil 1'de gösterildiği gibi H – H COSY ve HMBC deneylerinden aydınlatılmıştır. Sonuç olarak, 3'ün düzlemsel yapısı gösterildiği gibi inşa edilmiştir. 3'ün göreceli stereo yapısı, aşağıdaki proton çiftleri (1-H ve 3-H, 10-H2; 3-) arasında NOE korelasyonlarının gözlemlendiği bir NOESY deneyi ile belirlendi. H ve 4a-H; 4b-H ve 5-H; 5-H ve 6b-H, 9-H; 6b-H ve {{124} }H ve 9-H) Şekil 2'de gösterildiği gibi.

CİNSEL FONKSİYONU GELİŞTİREN DOĞAL CISTANCHE TUBULOSA PHGS75% ECH 30% ACT 12%

Kankanoside D (4) ve Kankanol'un (5) Yapıları

Kankanosid D (4), negatif optik rotasyona sahip amorf bir toz halinde izole edildi (MeOH'de [a]D 25 - 30.6 derece). 4'ün IR spektrumu, olefin fonksiyonuna atfedilebilen 1655 cm- 1'de bir absorpsiyon bandı ve onun glikosidik yapısını düşündüren 3410 ve 1078 cm- 1'de güçlü absorpsiyon bantları gösterdi. yapı. 4'ün pozitif iyonlu FAB-MS'sinde, m/z 341 (M Na) değerinde yarı moleküler bir iyon zirvesi gözlemlendi. 4'ün moleküler formülü C15H26O7, yüksek çözünürlüklü FAB-MS ölçümüyle belirlendi. 4'ün 1.0 M HCl ile açığa çıkan D-glikoz,8,10-12,15-18) ile asit hidrolizi, oysa (R)-rotundiol (4a) 33,34) 4'ün b- ile enzimatik hidrolizi ile elde edildi glukozidaz. 4'ün 1H-NMR (Tablo 3, CD3OD) ve 13C-NMR (Tablo 4) spektrumları28), bir metil [d 1.69 (s, 10-H3)], üç metilene [d 1.41, 2,06 (her ikisi de m, 4-H2), 1,51, 2,01 (hem m, 6a- hem de 6b-H), 2,23 (br dd, J= yaklaşık 8, 15 Hz, 7a-H) , 2,37 (br dd, J= ca. 8, 15 Hz, 7b-H)], bir metin [d 2,90 (m, 5-H)] ve bir oksijen fonksiyonu taşıyan iki metilen { d [3,56 (ddd, J= 2,8, 7,4, 13,2 Hz), 3,97 (ddd, J= 4,9, 8,0, 13,2 Hz), 3-H2], 4,04, 4,18 (her ikisi de d, J= 12,2 Hz, 1-H2)} bir b-glukopiranosil kısmı ile birlikte [d 4,25 (d, J= 7,7 Hz, 1' -H) )]. 4'teki bD-glukopiranosil kısmının konumunun bir 3- konumu olduğu HMBC deneyi ile açıklığa kavuşturuldu (Şekil 1). Bu kanıta dayanarak 4'ün mutlak stereoyapısının gösterildiği gibi olduğu belirlendi.

Kankanol (5), pozitif optik rotasyona ([a]D 25 11.1 derece) sahip amorf bir toz halinde elde edildi. 5'in kimyasal iyonizasyon (CI)-MS'si, yarı moleküler bir iyona (MH) bağlı olarak m/z 221 ve 223'te bir çift izotop iyon zirvesi gösterdi. Yüksek çözünürlüklü CI-MS ölçümü 5, moleküler formülün C9H13ClO4 olduğunu ortaya çıkardı. 5'in 1H-NMR (Tablo 1, CD3OD) ve 13C-NMR (Tablo 2) spektrumları28) aşağıdaki fonksiyonların varlığını göstermiştir: üç metilen [d 1.60 (ddd, J= 2 0,5, 5,5, 13,1 Hz, 4a-H), 1,80 (br dd, J{= yaklaşık 3, 13 Hz, 4bH), 1,83 (br d, J= yaklaşık 12 Hz, 6a-H), 2,57 (m, 6b-H), 3,75, 3,88 (her ikisi de d, J= 9,2 Hz, 10-H2)], beş metin [d 2,76 (dd, J{ {58}},3, 8,0 Hz, 9-H), 2,50 (m, 5-H), 3,80 (br s, 7-H), 5,17 (br d, J{ {71}} yaklaşık 3 Hz, 3-H), 5,26 (d, J= 4,3 Hz, 1-H)]. 5'in düzlemsel yapısı 1H–1H COSY ve HMBC deneyleriyle doğrulandı. Yani, 5'teki 1H–1H COSY deneyi, kalın çizgilerle yazılmış kısmi yapıların varlığını gösterdi ve HMBC deneyinde, Şekil 1'de gösterildiği gibi uzun menzilli korelasyonlar gözlemlendi. 5'in göreceli stereoyapısı, Aşağıdaki proton çiftleri (1-H ve 9-H; 3-H ve 4a-H; 4b-H ve {{95) arasında NOE korelasyonlarının gözlemlendiği NOESY deneyi tarafından belirlenmiştir. }} H; 5-H ve 6b-H, 9-H; 6b-H ve 7-H ve 9-H); Şekil 2. 14'ün %5 sulu HC1 ile işlenmesiyle elde edilen 5'e ait 1H- ve 13C-NMR verilerinin 14a'ya ait verilerle karşılaştırılması, Tablo 1,35'te gösterildiği gibi klor grubunun konumu 5'te 3-konum olarak desteklendi. Ayrıca 5'in asetik anhidrit (Ac2O) ve piridin ile asetilasyonu 3,{121}}oksiti (5a) verirken, 14a aynı asetilasyon koşulu altında diasetatı (14b) verdi. Bu kanıt aynı zamanda klor fonksiyonunun konumunun 3b-pozisyonu olduğunu doğrulamamıza da yol açtı (Çizelge 3). Sonuç olarak 5'in stereo yapısının şekildeki gibi olduğu belirlendi.

Kankanoside E (6)'nın Yapısı Kankanoside E (6), negatif optik rotasyona sahip amorf bir toz halinde izole edildi (MeOH'de [a]D 25 - 20.0 derece). 6'nın IR spektrumu, glikosidik ve karbonil fonksiyonlara atfedilebilen 3410, 1647 ve 1085 cm- 1'de absorpsiyon bantları gösterirken, UV spektrumu 211 nm'de (log e 4,63) maksimum absorpsiyon gösterdi; a,b-doymamış karboksilik asitin varlığı. 6'nın C16H28O8 moleküler formülü, pozitif ve negatif iyon FAB-MS ve yüksek çözünürlüklü MS ölçümü ile karakterize edildi. 6 serbest kalan D-glikozun asit hidrolizi,8,10-12,15-18), oysa (2E,6R)-8-hidroksi-2,6-dimetil{{31 }}oktanoik asit (6a) 36), 6'nın b-glukosidaz ile enzimatik hidrolizi yoluyla elde edildi. 6'nın1H-NMR (Tablo 3, CD3OD) ve 13C-NMR (Tablo 4) spektrumları28), bir (2E,6R)-8-hidroksi-2,6-'nin varlığını gösterdi dimetil-2-oktenoik asit kısmı [d 0,95 (d, J= 6,4 Hz, 10-H3), 1,30, 1,48 (her ikisi de m, 5-H2), 1,45, 1,70 (her ikisi de m, 7-H2), 1,65 (m, 6-H), 1,81 (s, 9-H3), 2,22 (2H, m, 4-H2) , 3,61, 3,94 (her ikisi de m, 8-H2), 6,78 (dd, J= 1.2, 7,3 Hz, 3-H)] bir bD-glukopiranosil kısmı ile birlikte [d 4,26 (d, J= 7.6 Hz, 1' -H)]. 6'nın 13C-NMR spektrumundaki karbon sinyalleri 6a'nınkilerle karşılaştırıldığında, glikosilasyon kayması 6'nın 8-pozisyonu civarında gözlemlendi. Glikozit bağlantısının konumu, aşağıda gösterildiği gibi HMBC deneyleriyle de doğrulandı. Şekil 1. Sonuç olarak, 6'nın mutlak stereo yapısının (2E,6R)-8-bD-glukopiranosiloksi-2,6-dimetil-2-oktenoik asit olduğu açıklandı.

CİNSEL FONKSİYONU GELİŞTİREN DOĞAL CISTANCHE TUBULOSA PHGS75% ECH 30% ACT 12%