Diyabetik Nefropati için Yeni Terapötik Strateji: CCR2 Antagonisti

Temas:joanna.jia@wecistanche.com/ WhatsApp: 008618081934791

II. BÖLÜM:Diyabetik nefropatinin fare modelinde CCR2 antagonistinin makrofajlar ve Toll benzeri reseptör 9 ekspresyonları üzerindeki etkileri

Seigo Ito, Hiroyuki Nakashima, Takuya Ishikiriyama, Masahiro Nakashima, Akira Yamagata ve ark.

Soyut

Patogenezidiyabetik nefropati(DN), böbreklere makrofaj (Mo) alımı, tümör nekroz faktörü-αu (TNF-o) üretimi ve oksidatif stres ile ilgilidir. Toll benzeri reseptör 9 (TLR9) aktivasyonunun sistemik inflamasyonda rol oynadığı bildirilmektedir ve metabolik sendromda bu durumu şiddetlendirmektedir. Bu nedenle, TLR9'un DN(diyabetik nefropati). DN'de böbrek Mosunun iki alt kümesidiyabetik nefropatimodel (db / db) fareler, dağılımlarını ve TLR9 ekspresyonunu ve fonksiyonunu değerlendirmek için akış sitometrisi kullanılarak analiz edildi. Farelere uygulandıCCR2 Serisi8 wk için antagonist INCB3344; Mo dağılımı ve fonksiyonundaki değişiklikler ve DN üzerindeki terapötik etkileridiyabetik nefropatipatoloji incelendi. Fare böbreklerinde kemik iliği kaynaklı CD11bhigh (BM-Mo) ve dokuda yerleşik CD11blow Mos (Res-Mo) tanımlandı. DN olarakdiyabetik nefropatiilerledi, BM-Mφ sayısı, TLR9 ifadesi ve TNF-α üretimi önemli ölçüde arttı. Res-Mos'ta, reaktif oksijen türleri (ROS) üretimi ve fagositik aktivite arttırıldı. INCB3344, albüminüri, serum kreatinin seviyesi, BM-Mφ bolluğu, TLR9 ekspresyonu ve BM-Mφs tarafından TNF-a üretimini ve Res-Mos tarafından ROS üretimini azalttı. Hem TLR9 hem de TNF-α üretimi yoluyla BM-Mo'nun artan aktivasyonu ve Res-Mos tarafından artan ROS üretimi DN'ye dahil edildi.(diyabetik nefropati)ilerleyiş. Bu nedenle, Mos'u ve TLR9 ekspresyonunu INCB3344 ile inaktive etmek, DN (diyabetik nefropati).

YENİ ve KAYDA DEĞER Böbrek makrofajlarını (Mos) yüksek CD1lb eksprese eden kemik iliği kaynaklı Mos (BM-Mos) ve düşük CD11b eksprese eden dokuya özgü yerleşik Mo (Res-Mos) olarak sınıflandırdık. İçindediyabetik nefropati(DN) model fareler. BM-Mos'ta TLR9 aktivasyonu ile toll-benzeri reseptör 9 (TLR9) ekspresyonu ve TNF-α üretimi ve Res-Mos'ta ROS üretimi ayrıca geliştirilmiştir,CCR2 Serisiantagonist, BM-Mos'un böbrek infiltrasyonunu ve fonksiyonlarını ve Res-Mos tarafından ROS üretimini, eşlik eden TLR9 baskılaması ile baskıladı. Çalışmamız DN için yeni bir terapötik strateji sunmaktadır(diyabetik nefropati).

cistanche pharma özeliçinböbrek

BÖLÜM I IÇIN BURAYA TIKLAYIN.

TARTIŞMA

Bu çalışmada üç yeni bulgu sunduk. İlk olarak, diyabetik DB / DB farelerde, BM-Mos TLR9'u ifade etti ve TNF-。 diyabetik olmayan sisli farelerdekilerden daha bol miktarda bulunurken, Res-Mos daha fazla ROS üretti ve fagositik fonksiyon gösterdi. İkincisi, INCB3344, aCCR2 Serisiantagonist, azalmış TLR9 ekspresyonu ve her iki MPS tipinden TNF-α salınımı ve Res-Mos tarafından azalan ROS üretimi. Son olarak, bu mekanizmalar diyabetik DB/DB farelerde albüminüri ve serum Cr düzeylerindeki azalmaların yanı sıra mezangial proliferasyon ve podosit ekspresyonundaki iyileşmeyi de açıklayabilir.

Bulgularımıza dayanarak, böbrek Mosları iki popülasyona ayrıldı, yani kemik iliği kaynaklı bir belirteci yüksek oranda ifade eden BM-Mos ve bunu neredeyse hiç ifade etmeyen BM-Mos. Diyabetin varlığına bağlı olmadıklarından, bunlar iki tip böbrek Mosunun benzersiz özellikleri olarak kabul edildi. Buna karşılık, diyabetik farelerde çeşitli işlevleri geliştirilmiştir. Ayrıca, esas olarak Mos tarafından üretilen bir pro-inflamatuar sitokin olan TNF-α ve bir anti-enflamatuar sitokin olan IL-10'un üretimi de artmıştır. Bu, böbrek Mos'unun aynı anda sadece indüksiyonda değil, aynı zamanda DN (Diyabetik nefropati). İki Tip Böbrek Makrofajının Rolü

Nefropati şiddetini yansıtan üriner albümin atılımı, DB/DB farelerde BM-Mos yüzdesi ile arttığından, BM-Mos'un DN(Diyabetik nefropati) geliştirme. Ayrıca, BM-Mos'ta TLR9 ekspresyonu ve TNF-α üretiminin arttığını, DN'li Res-Mos'ta ise ROS üretiminin ve fagositik aktivitenin arttığını bulduk.(diyabetik nefropati)ilerleyiş. Bu gözlemler genç ve yaşlı sisli farelerde yapılmadığından (veriler gösterilmemiştir), DN ile ilişkili olduklarını düşünüyoruz.(diyabetik nefropati)progresyon ve yaşa bağlı değişikliklerden kaynaklanmaz. TLR'ler, diyabette seviyeleri artan lipopolisakkaritler, bakteriyel DNA ve endojen tehlikeyle ilişkili moleküler paternler gibi patojenle ilişkili moleküler paternleri tanır (33,34). Özellikle, TLR2 ve TLR4'ün DN'de inflamasyonun sürdürülmesinde rol oynadığı bildirilmektedir.(diyabetik nefropati), muhtemelen Mos aracılığıyla (35-38). TLR9, hasarlı / ölü hücreler veya adipositler ve ortak bakteriyel DNA motifi CpG-ODN tarafından dolaşıma salınan mitokondriyal ve hücresiz DNA'yı tanır, böylece doğuştan gelen bağışıklığı aktive eder ve böbrek hasarına katılımını düşündürür (11,14).

ROS üretimi ve Res-Mos tarafından fagositoz, DN (Diyabetik nefropati) ilerleme. Böbrek Mos'un DN'ye karıştığı bildirildi(diyabetik nefropati)RO'ların nikotinamid adenin dinükleotid fosfat (NADPH) oksidaz aktivitesi yoluyla salınımıyla ilerlemesi (39,40) ve önceki çalışmamız Res-Mos'tan türetilen ROS'un hepatik doku hasarında rol oynadığını göstermiştir (20). Bu nedenle, böbrekte, Res-Mos ayrıca ROS'a bağlı doku hasarına da dahil olabilir. Ayrıca, Res-Mos'taki TLR9 ekspresyonu diyabetik durumda artmıştır (Şekil 1E). Res-Mos tarafından üretilen ROS, TLR9 aktivasyonundan ve yerel TNF-a seviyelerinden (20,41, 42) etkilendiğinden, DN ile Res-Mos tarafından ROS üretimindeki artış (Diyabetik nefropati) progresyonu, TLR9 ekspresyonlarındaki artıştan kaynaklanıyordu veya BM-Mos'un gelişmiş TNF-α prodüksiyonundan etkilendi. Bu nedenle, BM-Mos tarafından TNF-a üretimindeki artışın ve Res-Mgps tarafından ROS üretimindeki artışın DN'yi daha da kötüleştirdiğini düşünüyoruz.(diyabetik nefropati).

Res-Mos, gelişmiş ROS üretimi yoluyla zararlı bir rol oynayabilse de, güçlü fagositoz yetenekleri DN (Diyabetik nefropati) fareler. Res-Mos, hastalığın ilerlemesi sırasında hasarlı böbrek hücrelerini fagositoz haline getirebilir ve böbrek dokusu onarımına katılabilir. Ayrıca, Res-Mos tarafından ROS üretimindeki artış, fagositozlu hasarlı dokunun sindirimi nedeniyle ortaya çıkabilir. Böbrek Mos tarafından uyarılmamış bir ortamda üretilen ROS'u değerlendirdiğimizde, Mos'un hasarlı böbrek dokusunu fagositoz ettiği ve sindirdiği aşamada ROS üretildi. Bu nedenle, Res-Mos'ta artan ROS üretimi, DN'de olumsuz bir etki olmayabilir (diyabetik nefropati).

EtkileriCCR2 SerisiDiyabetik Nefropati üzerine antagonist INCB3344

CCL2, diyabetik model farelerin böbreklerinde aşırı eksprese edilir (43-46) ve glomerüler podositler üzerindeki etkisinden dolayı albüminürinin alevlenmesinde rol oynar (47). Ayrıca, enflamatuar bölgelerdeki monosit infiltrasyonu esas olarak CCL2 tarafından düzenlenir ve CCL2, Ms'yi böbrek dokusuna çeker (CCR2 Serisi-aracılı sinyalizasyon) ve DN(Diyabetik nefropati) patogenez(46,47). CCL2, glomerüler podositler, mezangial hücreler ve tübüler epitel hücreleri tarafından üretilir ve böbrekte interstisyel inflamasyon, tübüler atrofi ve fibrozisi indükler (44, 48,49). Birkaç tanesinin yönetimiCCR2 SerisiDiyabetik model farelerde antagonistlerin son zamanlarda böbreğe Mo infiltrasyonunu baskıladığı ve DN'yi önlediği gösterilmiştir.(diyabetik nefropati)ilerleme (50-53). FakatCCR2 Serisiantagonistler, muhtemelen kısa farmakolojik yarı ömür ve insan için düşük afinite gibi sorunlar nedeniyle insanlarda klinik olarak kullanılmamıştır.CCR2 Serisi. Buna karşılık, INCB3344, insan monositlerine yüksek seçicilikle bağlanabilir.CCR2 Serisive insan veya fare vücudunda uzun bir farmakokinetik yarı ömre sahiptir (8,9).

Bu çalışmada, INCB3344, BM-Mos'un DN'de böbreğe göçünü baskılayabilir (Diyabetik nefropati); Bununla birlikte, Res-Migos üzerinde belirgin bir etkisi olmamıştır, bu da BM ve Res-Mφ popülasyonlarının farklı özelliklere sahip olduğunu düşündürmektedir. Ayrıca, INCB3344, Mgs'yi M2 fenotipine (M2 polarizasyonu) polarize eder, bu da proenflamatuarın anti-enflamatuar fenotipe dönüştürülmesinin bir etkisini düşündürmektedir.

Özellikle, INCB3344, her iki Mos tipinde TNF-α üretimini önemli ölçüde azalttı ve bu da DN'nin iyileştirilmesine en çok katkıda bulunmuş olabilir (Diyabetik nefropati). TNF-α böbrek hipertrofisi, albümin atılımı ve DN'de böbrek fonksiyonlarının azalması ile ilişkilidir (Diyabetik nefropati) (3, 54) ve diğer sitokinlerin üretimini otokrin ve parakrin bir şekilde uyaran pleiotropik bir sitokindir (55-58). Bu nedenle, TNF-o'nun inhibisyonu, DN üzerindeki yararlı etkilerini açıklayabilecek çeşitli diğer enflamatuar mediatörleri bloke etmeye hizmet edebilir.(diyabetik nefropati). GibiCCR2 Serisistimülasyon, hücre içi glikojen sentaz kinaz 3 (GSK3) (59) aktivitesi yoluyla TNF-a üretimine yol açar, INCB3344'ün böbrek Mos'unda bu yolu bloke ederek TNF-α üretimini inhibe ettiğini tahmin ettik. Bununla birlikte, bu modeldeki GSK3 seviyelerinin değerlendirilmesi gerektiğine ve bu spekülasyonları doğrulamak için daha fazla çalışma yapılması gerektiğine inanıyoruz. Ayrıca, sonuçlarımız glomerüler Mosların çoğunun BM-Mos olduğunu ve glomerüler BM-Mos'ta TNF üretiminin böbrekteki diğer BM-Mos'lardan daha yüksek olduğunu göstermiştir. Bu sonuçlar, BM-Mφ sayımlarını (daha spesifik olarak) destekleyen INCB3344'ün, esas olarak mezangial proliferasyonu azaltarak ve podositleri koruyarak (WT-1'i artırarak) glomerüler lezyonların iyileştirilmesine katkıda bulunduğunu göstermektedir.

CCR2 Serisiinhibisyonun TLR9 baskılanması (60,61) yoluyla TNF-α prodüksiyonunu azalttığı bildirilmiştir ve bu çalışmada morfolojik olarak Mos olduğu varsayılan hücreler dışında, tübüller, interstisyum ve glomerüller de dahil olmak üzere böbrek parankiminde TLR9 ekspresyonu gözlenmemiştir. Bu nedenle, INCB3344 uygulaması her iki Mos tipinde TLR9 ekspresyonunu da azaltmıştır. Birlikte ele alındığında, sonuçlar INCB3344'ün sadece BM-Mg'nin böbreğe enflamatuar infiltrasyonunu değil, aynı zamanda zararlı inflamasyonla ilgili işlevlerini de baskıladığını ve DN'nin hafifletilmesine katkıda bulunabileceğini göstermiştir.(diyabetik nefropati).

Sonuç olarak, BM-Mos TLR9'u eksprese etti ve TNF-a'yı diyabetik olmayan farelerde diyabetik olmayan farelerden daha bol miktarda serbest bırakırken, Res-Mos daha fazla ROS üretti ve diyabetik farelerde fagositik aktivitede artış gösterdi. INCB3344, aCCR2 Serisiantagonist, TLR9 ekspresyonunu azalttı ve TNF-α her iki Mos tipinden salınım yaptı ve Res-Mos tarafından ROS üretimini azalttı. Bu değişiklikler albüminüri ve serum Cr düzeylerindeki düşüşleri ve diyabetik farelerdeki patolojik iyileşmeyi açıklamaktadır. INCB3344'ün DN'yi tedavi etmek için sağlam bir potansiyele sahip olduğunu öneriyoruz.(diyabetik nefropati)klinikte.

Bakış Açıları ve Önemi

Şunu gösterdik ki;CCR2 Serisiantagonist INCB3344, albüminüri ve serum Cr seviyesini azaltabilir ve DN'li farelerde mezangial proliferasyon ve podosit ekspresyonunu iyileştirebilir(diyabetik nefropati). Bu yararlı etkiler, BM-Mos'tan TNF-α üretiminde bir azalma ve Res-Mφs'den ROS salınımında bir azalma yoluyla uygulandı; bunların her ikisi de hem Mos hem de M2 polarizasyon tiplerinde TLR9 ekspresyonundaki bir azalmaya dayanıyordu. Gelecekte, bu reseptör antagonisti, DN'nin ilerlemesini önlemek için hastaları tedavi etmek için anjiyotensin II reseptör blokeri ve sodyum-glukoz kotransporter-2'ye sağlam bir alternatif veya ortak olarak kullanılabilir.(diyabetik nefropati).

BAŞVURU

1. Qi C. MaoX, Zhang Z.Wu H, Sınıflandırma ve ayırıcı tanıdiyabetik nefropati. J Diyabet Res 2017: 8637138,2017. doi:10.1155/2017/8637138.

2. Sen H, Gao T, Cooper TK, Brian Reeves W, Awad AS. Makrofajlar doğrudan diyabetik böbrek hasarına aracılık eder. J Physiol Renal Physiol 305:F1719-F1727,2013. doi:10.1152/ajprenal.00141.2013.

3. Awad AS, You H, Gao T, Cooper TK, Nedospasov SA, Vacher J, Wilkinson PF, Farrell FX, Brian Reeves W. Makrofaj kaynaklı tümör nekroz faktörü-alfa diyabetik böbrek hasarına aracılık eder. Böbrek Int 88:722-733,2015.doi:10.1038/ki.2015.162.

4. Lin M, Yiu WH, Wu HJ, Chan LY, Leung JC, Au WS, Chan KW, Lai KN, Tang SC. Toll benzeri reseptör 4, tübüler inflamasyonu teşvik ederdiyabetik nefropati. J Soc Nephrol 23:86-102, 2012. doi:10.1681/asn.2010111210.

5. Hou Y, Shi Y, Han B, Liu X, Qiao X, Qi Y, Wang L. Antioksidan peptit SS31, oksidatif stresi önler, CD36'yı aşağı regüle eder ve böbrek fonksiyonlarını iyileştirir.diyabetik nefropati. Nefrol Kadran Nakli 33: 1908-1918, 2018.doi:10.1093/ndt/gfy021.

6. Seok SJ, Lee ES, Kim GT, Hyun M, Lee JH, Chen S, Choi R, Kim HM, Lee EY, Chung CH. CCL2 Ablukası /CCR2 Serisisinyalizasyon iyileştirirdiyabetik nefropatiDB/DB farelerde. Nefrol Kadran Nakli 28:1700-1710,2013. doi:10.1093/ndt/gfs555.

7. Brodmerkel CM, Huber R, Covington M, Diamond S, Hall L, Collins R, Leffet L, Gallagher K, Feldman P, Collier P, Stow M, Gu X, Baribaud F, Shin N, Thomas B, Burn T, Hollis G, Yeleswaram S, Solomon K, Friedman S, Wang A, Xue CB, Newton RC. Scherle P, Vaddi K. Yeni bir kemirgen-aktif keşfi ve farmakolojik karakterizasyonuCCR2 Serisiantagonist, INCB3344. J İmmünol 175:5370-5378, 2005. doi:10.4049/jimmunol.175.8.5370.

8. Shin N, Baribaud F, Wang K, Yang G, Wynn R, Covington MB, Feldman P, Gallagher KB, Leffet LM, Lo YY, Wang A, Xue CB, Newton RC, Scherle PA. İnsanın küçük molekül antagonisti olan INCB3344'ün farmakolojik karakterizasyonuCCR2 Serisi. Biochem Biophys Res Commun 387: 251–255, 2009. doi:10. 1016/j.bbrc.2009.06.135.