Cistanche özleri PD'yi (Parkinson hastalığı) tedavi etmek için faydalı mı?

İletişim:joanna.jia@wecistanche.com

Giriş: DJ-1 mutasyonu, aileviParkinson hastalığı(PD). Leucine166Proline (L166P) ve C106S iki önemli DJ-1 mutasyonudur. Bu çalışmada, hidrojen peroksit(H, O,) ile indüklenen L166P ve C106S DJ-1-transfekte nöroblastom (SH-SY5Y) hücresel PD(Parkinson hastalığı) ve etkilerini araştırdı.Cistanche özlerive bu iki modelde asteosit, ekinakozit, kafeik asit ve Cistanche toplam glikozitler dahil olmak üzere önemli biyoaktif bileşikler. Yöntemler: Escherichia coli'de FLAG etiketli L166P ve C106S DJ-1 plazmitleri eksprese edildikten sonra eksprese edilen plazmitler toplandı, bir kısıtlama enzimi ile işlendi ve DNA elektroforezi kullanılarak tanımlandı. Saflaştırmadan sonra, L166P DJ-1 ve C106S DJ-1 plazmitleri, lipozomlar kullanılarak ayrı ayrı SH-SY5Y hücrelerine transfekte edildi. Transfekte edilmiş SH-SY5Y hücreleri, western blotlama ve immünositokimya ile tespit edildi. Hücre canlılığı, bir MTT tahlili kullanılarak belirlendi.

Sonuçlar: Hem western blotlama hem de immünositokimya, L166P ve C106S DJ-1'in transfekte edilmiş SH-SY5Y hücrelerinde yüksek oranda eksprese edildiğini gösterdi. MTT deneyleri, L166P veya C106S DJ-1 ile transfeksiyonun, transfekte edilmemiş SH-SY5Y hücrelerine kıyasla H, O'ya maruz kalan SH-SY5Y hücrelerinin canlılığını azalttığını gösterdi. Ek olarak,Cistanche özlerive asteosit, ekinakozit, kafeik asit ve Cistanche toplam glikozitleri dahil olmak üzere önemli biyoaktif bileşikler, H, O,inL166P ve C106S DJ-1-transfekte SH-SY5Y hücrelerinin neden olduğu hücre canlılığının azalmasını önemli ölçüde inhibe etti. Sonuçlar: Bu bulgular, PD'nin duyarlı ve kararlı H, O, indüklenmiş L166P DJ-1-ve C106S DJ-1-transfekte SH-SY5Y hücre modellerini başarıyla oluşturduğumuzu göstermektedir.(Parkinson hastalığı)veCistanche özleribu nedenle PD tedavisi için yararlı olabilir(Parkinson hastalığı).

cistancheözütün birçok faydası vardır

1. BÖLÜM İÇİN TIKLAYINIZ

TARTIŞMA

DJ-1 mutasyonları, otozomal resesif erken ortaya çıkan PD ile yakın ilişki içindedir(Parkinson hastalığı)(Bonifati ve diğerleri, 2003; Park ve diğerleri, 2015). Bir İtalyan ailesinde, neden DJ-1'deki (L166P) bir yanlış anlamlı mutasyondur (Bonifati ve ark., 2003). Leu-166, C-terminal sarmalının ortasında yer alır (Bonifati ve diğerleri, 2003). Güçlü bir sarmal kırıcı olan Pro'nun varlığı muhtemelen DJ-1 mutantındaki terminal sarmalın dengesini bozar (Bonifati ve diğerleri, 2003), bu da proteinin homo-terminalini bozacak olan C-terminal kısmının açılmasına yol açar. oligomerizasyon (Bonifati ve diğerleri, 2003). Transfekte edilmiş hücrelerde, L166P DJ-1, aşırı bozulma nedeniyle kararsızdır (Bonifati ve diğerleri, 2003; Gorner ve diğerleri, 2004; Moore, Zhang, Dawson ve Dawson, 2003). Bonifati et al. (2003), L166P mutasyonunun DJ'in homodimerizasyonunu ve normal işlevini bozduğunu-1 ve dolayısıyla PD'nin erken başlamasına yol açtığını öne sürdü.(Parkinson hastalığı).

Bu çalışmada, transfekte SH-SY5Y hücrelerinde moleküler kütlesi 70 kDa olan bir polimer/kompleks içinde L166P DJ-1'in mevcut olduğunu bulduk. DJ-1 yapısının, proteaz PH1704 ile aynı a/sandviç yapısını benimsediği varsayılmıştır(Bonifati ve diğerleri,2003). DJ-1 ve PH1704'ün benzer yapıları nedeniyle, PH1704 gibi DJ-1'in daha yüksek kümeler (dimmer trimerleri) oluşturduğunu varsaydık. Görner et al. (2004), transfekte edilmiş hücrelerde ve PD'nin lenfositlerinde olduğunu göstermiştir.(Parkinson hastalığı)hastalarda, monomerik L166P DJ-1, PD'nin transfekte edilmiş hücrelerinde ve lenfositlerinde daha yüksek yapılarda bulunur(Parkinson hastalığı)hastalar. Bu, L166P DJ-1 protein yanlış katlanmasının veya monomerik L166P DJ-1 ile diğer proteinler arasındaki komplekslerin oluşumunun doğrudan bir sonucu olabilir. Ayrıca, proteinin yapısına ek olarak, L166P DJ-1 mutasyonu, DJ'in antioksidan işlevini de değiştirmiştir-1(Macedo ve diğerleri,2003; Taira ve diğerleri,2004). Oksidatif stres PD'de önemli bir faktör olduğu için bu dikkate değerdir.(Parkinson hastalığı)ve L166P DJ-1 ile transfekte edilmiş SH-SY5Y hücreleri, H, O'ya transfekte edilmemiş hücrelerden daha duyarlıydı. Yabani tip DJ-1 ile transfekte edilmiş SH-SY5Y hücrelerinin laboratuvarımızda başarılı bir şekilde kurulduğu önceki araştırma ile birleştirildiğinde (Zhang, Wang,& Pu,2007), H, O, indüklenmiş L166P DJ{{10 }}transfekte SH-SY5Yhücreleri, PD'nin kullanışlı yeni bir hücresel modelidir(Parkinson hastalığı).

cistancheözü önleyebilirParkinson hastalığı

DJ-1'in oksidatif stresi azalttığı rapor edilmiştir(Taira ve diğerleri, 2004; Zhou & Freed,2005). Mekanizmalardan biri, proteinin kendisinin oksidasyonudur (Taira ve diğerleri, 2004). DJ-1'in üç Cys kalıntısı arasında, Cys-106 oksidatif strese en duyarlı olanıdır. Ayrıca,

DJ'in antioksidatif işlevi-1Cys'in oksidasyonu ile düzenlenir-106 (Freed &Zhou,2006) ve Cys'in mutasyonu-106DJ'nin antioksidan işlevinin kaybına yol açar-1 (Blackinton et al,2009; Kinumi, Kimata, Taira, Ariga,& Niki,2004).DJ-1 aynı zamanda -sinüklein kümelerinin oluşumunu engelleyen moleküler bir şaperon görevi görür(Shendelman et al.,2004) Cys-106 sülfinik aside oksitlenir (Zhou & Freed,2005). Bu bulgular Cys-106'nin uygun DJ-1 işlevine önemli bir katkıda bulunduğunu göstermektedir. Tablo l'de gösterildiği gibi, C106S DJ-1 ile transfekte edilmiş SH-SY5Y hücreleri, H, O'ya transfekte edilmemiş hücrelerden daha duyarlıydı. Önceki araştırmaya dayanarak (Zhang ve diğerleri, 2007), bu aynı zamanda H, O, indüklenmiş C106S DJ-1-transfekte SH-SY5Y hücrelerinin de yararlı bir hücresel PD modeli olabileceğini düşündürmektedir.(Parkinson hastalığı).

L166P DJ-1 veya C106S DJ-1 ile transfekte edilmiş SH-SY5Y hücrelerini kullanarak,Cistanche özlerinin etkisive H2O üzerindeki asteosit, ekinakozit, kafeik asit ve Cistanche toplam glikozitler dahil olmak üzere önemli biyoaktif bileşikler, hücre canlılığında azalmaya neden oldu. Mevcut sonuçlar, asteosit, ekinakozit, kafeik asit ve Cistanche toplam glikozitlerinin hepsinin konsantrasyona bağlı bir şekilde hücre canlılığını arttırdığını ve bu da L166P DJ-1ve C106S DJ-1 seviyeleri arasında stabil ve doğrusal bir ilişki olduğunu gösterir. ve SH-SY5Y hücre canlılığı.

Özetle, PD'nin hassas ve kararlı H, O2 kaynaklı L166P DJ-1-ve C106S DJ-1-transfekte SH-SY5Y hücre modellerini başarıyla kurduk(Parkinson hastalığı)ve bunu doğruladıCistanche özleribu iki modelde H, O tarafından indüklenen nörotoksisiteyi iyileştirdi. Bu iki hücresel modelin PD için etkin bir şekilde kullanılacağını tahmin ediyoruz.(Parkinson hastalığı)araştır veCistanche özleribu nedenle PD tedavisi için yararlı olabilir(Parkinson hastalığı)gelecekte.

Cistanche özlerinin faydaları:Parkinson hastalığı

REFERANSLAR

1. Abou-Sleiman, PM, Healy, DG, Quinn, N., Lees, AJ, & Wood, NW (2003). Parkinson hastalığında patojenik DJ-1 mutasyonlarının rolü. Annals of Neurology, 54, 283-286. https://doi.org/10.1002/ (ISSN)1531-8249

2. Andres-Mateos, E., Perier, C., Zhang, L., Blanchard-Fillion, B., Greco, TM, Thomas, B., … Dawson, VL (2007). DJ-1 gen silinmesi, DJ-1'in atipik bir peroksiredoksin benzeri peroksidaz olduğunu ortaya koymaktadır. Amerika Birleşik Devletleri Ulusal Bilimler Akademisi Bildirileri, 104, 14807-14812. https://doi.org/10.1073/pnas.0703219104

3. Biosa, A., Sandrelli, F., Beltramini, M., Greggio, E., Bubacco, L., & Bisaglia, M. (2017). DJ-1'in fizyolojik işlevi üzerine son bulgular: BeyondParkinson hastalığı. Hastalıkların Nörobiyolojisi, 108, 65-72. https://doi.org/10.1016/j.nbd.2017.08.005

4. Blackinton, J., Lakshminarasimhan, M., Thomas, KJ, Ahmad, R., Greggio, E., Raza, AS, Wilson, MA (2009). Stabilize bir sistein sülfinik asit oluşumu, parkinsonizm proteini DJ-1'in mitokondriyal işlevi için kritik öneme sahiptir. Biyolojik Kimya Dergisi, 84, 6476-6485. https://doi.org/10.1074/jbc.M806599200

5. Bonifati, V., Rizzu, P., Squitieri, F., Krieger, E., Vanacore, N., van Swieten; JC, … Heutink, P. (2003). DJ-1 (DJ-1), otozomal resesif, erken başlangıçlı parkinsonizm için yeni bir gendir. Nörolojik Bilimler, 24, 159–160. https://doi.org/10.1007/s10072‐003-0108-0

6. Bonifati, V., Rizzu, P., van Baren, MJ, Schaap, O., Breedveld, GJ, Krieger, E., … van Swieten, JC, et al. (2003). Otozomal resesif erken başlangıçlı parkinsonizm ile ilişkili DJ-1 genindeki mutasyonlar. Bilim, 299, 256–259.

7. Burke, RE ve O'Malley, K. (2013). Parkinson hastalığında akson dejenerasyonu. Deneysel Nöroloji, 246, 72-83. https://doi.org/10.1016/j. expneurol.2012.01.011

8. Dexter, DT, Carter, C., Wells, FR, Javoy-Agid, FJ, Agid, Y., Lees, AJ, Marsden, CD (1989). Substantia nigra'da bazal lipid peroksidasyonu artar.Parkinson hastalığı. Journal of Neurochemistry, 52, 381– 389. https://doi.org/10.1111/j.1471

9. Dexter, DT, Holley, AE, Flitter, WD, Slater, TF, Wells, FR, Daniel, SE, … Marsden, CD (1994). Parkinson substantia nigra'da artan lipid hidroperoksit seviyeleri: Bir HPLC ve ESR çalışması. Hareket Bozuklukları, 9, 92-97.

10. Freed, CR ve Zhou, W. (2006). DJ-1, glutatyon veya ısı şoku proteininin seçici aktivasyonu ile dopamin nöronlarını korur. Deneysel Nöroloji, 198, 558-597.

11. Glizer, D. ve MacDonald, PA (2016). Bilişsel eğitimParkinsonhastalık: 2000'den 2014'e kadar olan çalışmaların gözden geçirilmesi.ParkinsonHastalık, 2016, 9291713. https://doi.org/10.1155/2016/9291713

12. Gorner, K., Holtorf, E., Odoy, S., Nuscher, B., Yamamoto, A., Regula, JT, Kahle, PJ (2004). Diferansiyel etkileriParkinsonhastalıkDJ-1'in stabilitesi ve katlanması ile ilişkili mutasyonlar. Biyolojik Kimya Dergisi, 279, 6943-6951. https://doi.org/10.1074/jbc.M3092

13. Hague, S., Rogaeva, E., Hernandez, D., Gulick, C., Singleton, A., Hanson, M., … St George‐Hyslop, PH, et al. (2003). Erken başlangıçlıParkinsonhastalıkbileşik heterozigot DJ-1 mutasyonundan kaynaklanır. Annals of Neurology, 54, 271-274. https://doi.org/10.1002/(ISSN)1531-8249

14. Kim, RH, Peter, M., Jang, YJ, Shi, W., Pintilie, M., Fletcher, GC, … Bray, MR, et al. (2005). DJ-1, tümör baskılayıcı PTEN'in yeni bir düzenleyicisi. Kanser Hücresi, 7, 263-273. https://doi.org/10.1016/j. ccr.2005.02.010

15. Kinumi, T., Kimata, J., Taira, T., Ariga, H., & Niki, E. (2004). DJ-1'in sistein-106'sı, insan göbek damarı endotel hücrelerinde in vivo hidrojen peroksit aracılı oksidasyona karşı en hassas sistein kalıntısıdır. Biyokimyasal ve Biyofiziksel Araştırma İletişimi, 317, 722–728. https://doi.org/10.1016/j.bbrc.2004.03.110

16. Kitada, T., Asakawa, S., Hattori, N., Matsumine, H., Yamamura, Y., Minoshima, S., … Shimizu, N. (1998). Parkin genindeki mutasyonlar, otozomal resesif geçişli jüvenil parkinsonizme neden olur. Doğa, 392, 605– 608. https://doi.org/10.1038/33416

17. Macedo, MG, Anar, B., Bronner, IF, Cannella, M., Squitieri, F., Bonifati, V., … Rizzu, P. (2003). Erken başlangıçlı ile ilişkili DJ-1 L166P mutant proteiniParkinsonhastalıkkararsızdır ve yüksek mertebeden protein kompleksleri oluşturur. İnsan Moleküler Genetiği, 12, 2807-2816.

18. Moore, DJ, Zhang, L., Dawson, TM ve Dawson, VL (2003). DJ-1'de ailevi ile bağlantılı bir yanlış anlamlı mutasyon (L166P)Parkinsonhastalık, azaltılmış protein stabilitesi sağlar ve homo-oligomerizasyonu bozar. Nörokimya Dergisi, 87, 1558-1567. https://doi.org/10.1111/ (ISSN)1471‐4159

19. Mullard, A. (2017). Diyabet ilacı umut vaat ediyorParkinsonhastalık. Doğa İncelemeleri. İlaç Keşfi, 16, 593.

20. Nagakubo, D., Taika, T., Kitaura, H., Ikeda, M., Tamai, K., Iguchi‐Ariga, SMM, & Agria, H. (1997). , Ras ile işbirliği içinde fare NIH3T3 hücrelerini dönüştüren yeni bir onkogen. Biyokimyasal ve Biyofiziksel Araştırma İletişimi, 231, 509–513. https://doi. org/10.1006/bbrc.1997.6132

21. Nikam, S., Nikam, P., Ahaley, SK ve Sontakke, AV (2009). oksidatif stresParkinsonhastalık. Hint Klinik Biyokimya Dergisi, 24, 98-101. https://doi.org/10.1007/s12291‐009-0017‐y

22. Niki, T., Takahashi‐Niki, T., Taira, T., Iguchi‐Ariga, SMM, & Agria, H. (2003). DJBP: Yeni bir DJ-1 bağlayıcı protein, histon deasetilaz kompleksini işe alarak androjen reseptörünü negatif olarak düzenler ve DJ-1 bu kompleksi ortadan kaldırarak bu inhibisyonu antagonize eder. Moleküler Kanser Araştırması, 1, 247–261.

Faydalarıcistancheözler: tedaviParkinsonhastalık