Bölüm 2 Cistanche Deserticola Phenylethanosit'in APP / PS1 Transgenik Farelerin Hipokampüsündeki -amiloid Proteinin Ekspresyonu Üzerindeki Etkileri

Bölüm 2 Cistanche'nin etkili bileşenleri: toplamın terapötik etkisifeniletanoid glikozitlerve Alzheimer Hastalığı Üzerine Acteosides

1. bölüm için buraya tıklayın

Daha fazla bilgi için lütfen ali.ma@wecistanche.com ile iletişime geçin.

Alzheimer hastalığı için Cistanche DHT için tıklayın

4. Çözüm

Alzheimer hastalığıesas olarak merkezi sinir sisteminde meydana gelir ve birçok faktör tarafından indüklenir. Şimdiye kadar patogenezi hala belirsizdir, ancak araştırmanın özü hala A ile ilgilidir. APP tarafından beyinde salgılanan ana peptitler olarak, A 1-42 ve A 1-40'nın anormal birikimi, doğrudan nöronal dejenerasyona neden olamaz. Etiyoloji açısından, A 1-42 tarafından üretilen çözünür oligomer ADDL'ler beyne neden olur. Nöronal dejenerasyonun gerçek nedeni. Bununla birlikte, bu iki proteinin ekspresyonunun araştırılması aynı zamanda AD beyin lezyonlarının boyutunu gerçek zamanlı olarak yansıtabilir, dolaylı olarak çözünür oligomer ADDL'lerin ekspresyonunu gösterebilir ve daha sonra beyindeki nöronal hasarı kaynaktan dinamik olarak izleyerek bir hastalık önleme ve tedavi için referans. Bunun ışığında, A 1-42 ve A 1-40, AD'nin patogenezinin araştırılmasında kilit hedefler haline gelmiştir. Hipokampus, beynin öğrenme ve hafıza yeteneğini değerlendiren ana kısmıdır. Nöronlarının hasarı, AD'deki bilişsel işlev bozukluğunun önde gelen nedenidir. Hipokampusun CA1 bölgesi, AD patolojik hasarının ana bölümlerinden biridir. Deneyin bu kısmı HE kullanır Boyama yöntemi, normal grubun hipokampusunun CA1 bölgesindeki nöronların düzgün ve sıkı bir şekilde düzenlendiğini, daha eşit dağıldığını ve net katmanlara sahip olduğunu gösterdi. Model grubunda, farenin hipokampal CA1 alanı, yaralanma nedeniyle nöronal hücre apoptozu gibi dejeneratif değişiklikler gösterdi. Farklı dozlarda Cistanche fenetil alkol glikozit gruplarının müdahalesinden sonra hipokampal CA1 bölgesinin hücre morfolojisi

Hepsinin farklı gelişme dereceleri vardır, bu da şunu düşündürür:Cistanche feniletanoid glikozitlernöronları koruma ve apoptozisini inhibe etme etkisine sahip olabilir, ancak HE boyaması hücre apoptozu ve nöron kaybı için spesifik olmadığı için, daha sonraki aşamada apoptoza özgü molekülleri hedeflemek hala gereklidir. İşaretçilerin ilgili tespiti.

Test edilecek dokunun ön tedavisi, boyama sonucu ile doğrudan ilişkilidir. Deneyde yazar, transgenik farelerin hipokampusunun telensefalonun temporal lobunun derin iç kısmında yer alması nedeniyle, boyutunun küçük olduğunu ve dokuyu ayırmanın zor olduğunu buldu. Küçük bir dikkatsizlik, patolojik değişikliklerin etkili bir şekilde gözlenemeyeceği şekilde mekanik hasara neden olacaktır. Aynı zamanda, genetiği değiştirilmiş fareler pahalı olduğundan ve deneysel dozlama döngüsü uzun olduğundan, örneklerin kaybı araştırmanın genel ilerlemesini etkileyebilir. Bu nedenle, fare kardiyak perfüzyonu tamamladığında, tüm beyin çıkarılır ve paraformaldehit ile sabitlenir, neşter bıçağı koku ampulünü çıkarmak için kullanılır ve beyin dokusunun geri kalanı susuz bırakılır ve gömülür. Hipokampusun sağlam olduğundan emin olmak için dilim kalınlığı 3 ila 5 μm'de kontrol edilir. Operasyon sürecini optimize etme öncülüğünde, araştırma verimliliği artırılır. Western blot tespitinde yazar, A 1-42 ve A 1-40 proteinlerinin küçük moleküler ağırlığı nedeniyle ekspresyon bantlarının lekelenmesinin kolay olmadığını, bu nedenle SDS'lerinin taranması gerektiğini buldu. -PAGE jel konsantrasyonu, elektroforez süresi ve transfer süresi. Ayırma jelinin konsantrasyonu çok küçükse, elektroforez şeritleri göç edecek ve protein aktivasyonu tamamlanmayacaktır; çok uzun elektroforez süresi bandın jel tabakasından kaymasına neden olacaktır; karşılık gelen transfer süresi western blot'u bulanıklaştıracak, böylece birincil antikor inkübasyonunu etkileyecek, ikincil antikorlarla birleşecektir. Bunu göz önünde bulundurarak, bu çalışma ön deneyler yoluyla yapıldı ve son olarak A 1-42 ve A 1-40 üzerinde Western blotlama yapmak için ekspresyonlarını araştırmak için yüzde 15 ayırma jeli seçildi, elektroforezlendi ve 2 saat boyunca membran transfer edildi. .

Şu anda protein regülasyonu için kullanılan teknik yöntemler arasında, Western-blot yöntemi esas olarak ilgili proteinlerin spesifik ekspresyonunu araştırmak için miktar tayini için kullanılır. İmmünohistokimya yöntemi niteliksel bir bakış açısıyla başlar. Bir yandan, protein ve antikorun spesifik bağlanma derecesini daha sezgisel olarak gösterebilir ve diğer yandan nicel sonuçları destekleyebilir. İmmünohistokimya, antikorları histopatolojik dilimler üzerindeki antijenik bölgelere bağlayarak protein ekspresyonunu tespit etmek olduğundan, histopatolojik dilimlerin hazırlanması özellikle önemlidir. Bölümün çok kalın olması kolay değildir. Kesit tamamlandıktan sonra doku bölümüne dışarıdan zarar gelmemesi için saklanmasına özen gösterilmelidir; işlemeden önce yeterli deparafinizasyon yapılmalı ve süre 2 saatten az olmamalıdır; hafif koşullara sahip ve antijene daha az tesadüfi hasar veren bir sitrik asit tamponu seçin Onarım gerçekleştirin, katalazı çıkarın, antijenik bölgeyi tamamen ortaya çıkarın ve birincil antikorun bölgeye tamamen uymasını sağlayın. Moleküler biyolojide yaygın olarak kullanılan saptama yöntemleri olan yukarıdaki iki yöntem, birbirini tamamlar ve protein düzenleme araştırmaları için teknik destek sağlar.

Bu çalışma, beyindeki hipokampal lezyonları ve A ile ilgili proteinlerin ekspresyonunu araştırmak için HE ve diğer yöntemleri kullandı. Sonuçlar göstermiştir ki, müdahaleden sonracistanchefeniletanoid , AD model farelerin beynindeki hipokampal CA1 alanının hücre morfolojisi değişen derecelerde iyileşti. A 1-42 ve A 1-40 ifade seviyeleri önemli ölçüde aşağı regüle edildi. Ayrıca verbascoside müdahale grubunun koruyucu nöron etkisinin toplam gruptan daha iyi olduğu tespit edildi.feniletanoid glikozitlergrup. toplam glikozitlerCistanche feniletanoid glikozitlerAD model farelerin beyin bölgesindeki patolojik değişiklikleri iyileştirme potansiyeline sahiptir ve daha sonra AD üzerinde antagonistik bir etki oynar. Spesifik etki mekanizmasının gelecekte daha fazla araştırılması gerekmektedir. Bu çalışma, mekanizma hakkındaki araştırma verilerini tamamlamaktadır.cistancheAD'yi A açısından antagonize eder ve aynı zamanda etkin bileşenlerinin veya aktif monomerlerinin mekanizmasını daha fazla aydınlatmak için araştırma temelini oluşturur.cistanchesonraki dönemde AD'ye karşı.