Bölüm 2 Cistanche Tubulosa'dan Feniletanol Glikozitlerin Sıçanlarda Bovine Serum Albumin ile İndüklenen Hepatik Fibrozis Üzerindeki Önleyici Etkileri
Mar 06, 2022
İletişim: Audrey Hu Whatsapp/hp: 0086 13880143964 E-posta:audrey.hu@wecistanche.com
HSC-T6 hücrelerinde ilaç müdahalesinden sonra NF-KB p65 ve kollajen I ekspresyonu Hepatik fibroz sinyallerini karakterize etmek için karaciğerdeki iki anahtar düzenleyici gen RT-PCR testi ile belirlendi. Veriler, kontrol grubundaki tHSC-T6 hücrelerinin daha düşük NF-κB ve kollajen tip I mRNA seviyelerine sahip olduğunu gösterdi. Tersine, TGF- 1, HSC-T6 hücrelerini, NF-κB (P < 0.01)="" ve="" col-i="" (p="">< 0.01)="" mrna'yı="" belirgin="" şekilde="" yukarı="" regüle="" etmek="" için="" indükledi;="" kontrol="" grubundakiler.="" farklı="" konsantrasyonlarda="" cphg'lerin="">cistanche gelen feniletanoid glikozit), NF-κB p65 [100 ug/ml için P NF-κB=0.001, 75 ug/ml için P NF-κB=0.002, P NF-κB {{ 50 ug/ml için 11}}.007 ve 25 ug/ml için P NF-κB=0.012, sırasıyla] ve Sütun I [P Sütun-I=0.006, P Sütun -I=0.009, P Col-I=0.014, P Col-I=0.019, sırasıyla] bu mRNA'ların azaltılmış ifadelerini gösterdi (Şekil 7).
HSC-T6 hücrelerinde ilaç müdahalesinden sonra kolajen I seviyesinin Western blot analizi Şekil 8, farklı deney gruplarının HSC-T6 hücrelerinde kolajen I protein ekspresyon seviyelerini gösterir. Kollajen I protein ekspresyon seviyesi, CPhG'lerin çeşitli doz gruplarında önemli ölçüde azaldı(cistanche gelen feniletanoid glikozit)(100 ug/ml, 75 ug/ml, 50 ug/ml ve 25 ug/ml) TGF- 1 grubuyla karşılaştırıldığında
Tartışma
CPhG'ler(cistanche gelen feniletanoid glikozit)geleneksel Çin bitkisel tıbbı olarak kullanılan Cistanche rizomundan izole edilmiş ve saflaştırılmış bir feniletanoid glikozittir. Son yıllarda, CPhG'lerin karaciğer yaralanmalarını önlemede güçlü bir yeteneğe sahip olduğu gösterilmiştir [20]. Bu nedenle, sıçanlarda BSA ile indüklenen hepatik fibrozis ile CPhG'lerin hepatit fibrozisi üzerinde inhibitör etkileri olup olmadığını araştırmayı amaçladık. BJRG, Çin'de hepatik fibroz için terapötik bir ilaç olarak yaygın olarak kullanılmaktadır. Kaplumbağa kabuğundan yapılmıştır. Radix Paeonia rubra, Cordyceps Sinensis, Radix isatidis vb. Qi ve kanı yenileme, yorgunluğu giderme, düğümleri yumuşatma etkilerine sahiptir. Ek olarak, önceki çalışmalar, erken karaciğer fibrozunu bloke etme, yağ depolayan hücrelerin proliferasyonunu inhibe etme ve kollajen sentezini azaltma işlevine sahip olduğunu göstermektedir [21]. Bu nedenle bu çalışmada pozitif ilaç olarak BJRG kullanılmıştır.
BSA enjeksiyonları tarafından indüklenen sıçanlarda hepatik fibrozun patolojik değişiklikleri, insan portal sirozundakilere benzerdir [22]. CPhG'ler(cistanche gelen feniletanoid glikozit)doza bağlı olarak karaciğer fibrozu derecesini hafifletti ve miyofibroblast benzeri hücrelere HSC dönüşümünü inhibe etti, yüksek serum ALT, AST, HA, LN, CIV, TGF- 1 ve karaciğer indeksini azalttı ve ekspresyonu belirgin şekilde bastırdı karaciğer dokusunda kolajen I, kolajen III ve TGF- 1. Hepatik fibrozisin evreleri, belirteçler olarak hepatik fibrozisin derecesini saptamada rol oynayabilen serum HA, LN ve IV-C seviyeleri ile ilişkilidir [23]. HA'nın hücre dışı matrisin ana kaynağı olduğu bildirilmiştir. Bazal membranın temel elementi olan IV-C, karaciğer sirozunun erken evrelerinde bol miktarda sentezlenecek ve yoğun bir şekilde birikecektir. LN ve IV-C'nin serum seviyeleri, bazal membranın devir hızının indeksleridir ve portal alanda ve sinüzoidal kılcal damarlardaki fibrozisin derecesini gösterir [24]. PC III, hepatik fibrozis ve erken siroz tanısında bir belirteçtir, ancak duyarlılığı ve özgüllüğü yüksek değildir ve birçok referansta fibrozisin çeşitli evreleri arasında anlamlı bir fark yoktur [24, 25].
Bu çalışmada da benzer bir sonuç elde edilmiştir. Ek olarak, H&E ve Masson'un trikrom lekeli kesit gözlemleri, farklı hepatik lobüller ve hepatik sinüzoidler ile normal karaciğer dokuları sergiler. Model grubundaki karaciğer dokusu yapısı bozuktu ve karaciğer dokusu ve hepatik sinüzoidin yerini büyük miktarda bağ dokusu aldı. Bununla birlikte, tedavi gruplarında model grubuna göre önemli bir gelişme gözlendi. Önemli olarak, kolajen tip I ve kolajen tip III ekspresyonu, bloke edilmesi hepatik fibrozu önleyebilen ve tedavi edebilen hepatik fibrozun gelişiminde önemli roller oynar. Bu nedenle, tip I ve kollajen tip III'ün karaciğer dokusunda oluşumu ve birikimi, anti-hepatik fibroz etkinliğinin önemli bir belirleyicisi olarak hizmet edebilir. TGF- 1 ayrıca karaciğer hasarında önemli bir profibrojenik sitokindir ve çoklu farmakolojik eylemlerle biyolojik olarak aktiftir [26]. Doku homeostazını sürdürmek için bu eylemler arasında bir denge gereklidir. TGF'nin anormal ifadesi- 1 karaciğer hastalıklarının patogenezinde rol oynar [27, 28]. TGF- 1'nin karaciğer fibrozunun erken evrelerinde yer alan önemli bir sitokin olduğu bilinmektedir.
Oksidatif stres, TGF- 1'yi tetikler, bu da ikincisinin uyarıcı ECM üretimi ve birikimi ile sonuçlanır [29]. Bu nedenle, anti-hepatik fibroz ilacı üretmek için etkili stratejilerden biri, anti-TGF- 1 ajanlarını belirlemektir. İmmünohistokimyasal analiz, kolajen tip I, kolajen tip III ve TGF- 1 ifadelerinin hepatik fibrozun patolojik sürecini tespit edebildiğini gösterdi. Tedavi gruplarında kollajen tip I, kollajen tip III ve TGF- 1 ekspresyonları azalmış olup, yüksek doz CPhG'lerde önemli ölçüde daha düşüktür.(cistanche gelen feniletanoid glikozit)CPhG'lerin etkili bir kolajen tip I, kolajen tip III ve TGF- 1 inhibitörü olduğunu öne sürdü. Muhtemelen, CPhG'ler kolajenaz aktivitesini iyileştirebilir, ECM sentezi ve bozunmasının dinamik dengesini koruyarak karaciğer fibrozu oluşumunu geciktirebilir ve önleyebilir. CPhG'ler(cistanche gelen feniletanoid glikozit)sıçanlarda sadece BSA ile indüklenen hepatik fibrozu iyileştirmekle kalmaz, aynı zamanda in vitro HSC aktivasyonunun inhibe edilmesiyle de ilişkilendirilebilir. HSC aktivasyonunun, fibrogenezin çok önemli adımını temsil ettiği düşünülmektedir. Bu çalışmada, sonuçlar, 25 ila 100 ug/ml CPhG'lerin uygulanmasının, HSC'de azalmış NF-KB p65, kollajen I mRNA ekspresyonu ve kollajen I protein ekspresyonunu önemli ölçüde azalttığını göstermiştir. NF-κB, enfeksiyon veya uyaranlara karşı bağışıklık tepkisini modüle etmede önemli bir rol oynar [30]. Karaciğer hücrelerinde NF-KB'nin birikmesi, inflamatuar sitokinlerin/mediatörlerin toplanmasına neden olabilir, böylece fibroz gelişimini indükler [31, 32]. Ayrıca, kollajen aynı zamanda fibroz seviyesini yansıtan ve fibröz karaciğerdeki toplam proteinin yaklaşık yüzde 50'sini oluşturan hassas bir indekstir [33].
Sonuç olarak, hepato-fibrozise karşı moleküler mekanizmanın CPhG'lerle bağlantılı olduğunu varsaydık.(cistanche gelen feniletanoid glikozit)BSA lezyonlu karaciğer dokusunda immünotoksisite ve inflamasyon stresini azaltmanın sinerjistik rollerine katkıda bulunan ve karaciğer fonksiyonlarını iyileştirmek için dismetabolizmayı daha da düzelten NF-κB ekspresyonunun aracılı inaktivasyonu.
Sonuçlar
Sonuç olarak, çalışmalarımız CPhG'lerin(cistanche gelen feniletanoid glikozit)sıçanlarda BSA tarafından indüklenen hepatik fibrozun boyutunu önemli ölçüde hafifletir. Mekanizması, en azından kısmen, CPhG'lerin ECM'nin bileşimi üzerindeki inhibitör etkisine ve ECM'nin bozulmasının uyarılmasına ve/veya kollajen tip I, kollajen tip III'ün sentezinin ve TGF'nin ekspresyonunun doğrudan inhibisyonuna bağlı olabilir. {0}}. Bu nedenle, CPhG'lerin sağlık bakım ürünlerinde veya insan karaciğer fibrozunun önlenmesi için klinik ilaçlarda kullanılabileceğini umduk. CPhG'lerin güçlü bir anti-hepatik fibroz ilacı olarak etkinliğini belirlemek için gelecekteki çalışmalara ihtiyaç vardır.
Kısaltmalar
CPhG'ler:Cistanche kaynaklı feniletanol glikozitler; BSA: Sığır serum albümini; HSC-T6: Hepatik yıldız hücreleri; Hip: Hidroksiprolin; BJRG: Bileşik Biejiarangan tabletleri; TGF- 1: Dönüştürücü büyüme faktörü 1; ALT: Alanin aminotransferaz; AST: Aspartat aminotransferaz; HA: Hyaluronik asit; LN: Laminin; PC III: Tip III prokollajen; IV-C: Tip IV kolajen; NF-KB: Aktive B hücrelerinin nükleer faktör kappa-hafif zincir güçlendiricisi; RT-PCR: Ters transkriptaz-polimeraz zincir reaksiyonu; SDS-PAGE: Sodyum dodesil sülfat-poliakrilamid jel elektroforezi.
Rekabetçi çıkarlar Yazarlar, rekabet eden çıkarları olmadığını beyan eder. Yazarların katkıları TL, JZ, SPY, LM, MT ve SLZ deneyleri tasarladı ve tasarladı. SPY, TL ve JZ verileri analiz etti. Makaleyi SPY ve JZ yazdı. TL, LM ve JZ makaleyi inceledi. Tüm yazarlar son makaleyi okudu ve onayladı. Teşekkür Bu araştırma Çin Ulusal Doğa Bilimleri Vakfı (81260624) tarafından desteklenmiştir. Yazarlar, bu makalenin yazılması için önerdiği iyileştirmeler için Profesör Tao Liu'ya içten teşekkürlerini ifade etmek isterler. Yazar ayrıntıları 1 Toksikoloji Bölümü, Halk Sağlığı Okulu, Sincan Tıp Üniversitesi, No. 393 Xinyi Yolu, Urumçi 830011Xinjiang Uygur Özerk Bölgesi
Bölge, Çin 2 Uygur Tıbbı için Kilit Laboratuvar, Sincan Materia Medica Enstitüsü, Urumqi 830004, Çin. 3 No. 140 Xinhua Güney Yolu, Tianshan Bölgesi, Urumçi 830000Xinjiang Uygur Özerk Bölgesi, Çin. Geliş: 6 Ağustos 2015 Kabul: 24 Kasım 2015
Referanslar
Cohen-Naftaly M, Friedman SL. Kronik karaciğer hastalığı olan hastalarda yeni antifibrotik tedavilerin mevcut durumu. Ther Adv Gastroenterol. 2011;4(6):391–417.
Puche JE, Saiman Y, Friedman SL. Hepatik stellat hücreler ve karaciğer fibrozu. Compr Physiol. 2013;3(4):1473–92.
Hernandez-Gea V, Friedman SL. Karaciğer fibrozunun patogenezi. Annu Rev Pathol. 2011;6:425–56.
Sohrabpour AA, Mohamadnejad M, Malekzadeh R. İnceleme makalesi: sirozun geri döndürülebilirliği. Aliment Pharmacol Ther. 2012;36(9):824–32.
Raven PH, Zhang LB, Ventenat O. Çin Bilimler Akademisi. 23. baskı. Çin: Çin Flora Yayın Komitesi; 2013. s. 1-16.
Çin Halk Cumhuriyeti Sağlık Bakanlığı Çin Farmakopesi Komisyonu. Çin farmakopesi, Bölüm 1. Çin: Kimya Endüstrisi Yayınevi; 2010. s. 126.
Yan GH, Tian JH, Uzun BW, Li N. Cistanche tubulosa'dan feniletanoid glikozitlerin araştırma ilerlemesi. Orta Güney Ecz. 2012;10:692–5.
Li J, Huang D, He L. Rou Cong Rong'un Etkisi(Herba Cistanches Deserticola) Leigongteng glikoziti tarafından indüklenen farelerde üreme toksisitesi üzerine (Radix et Rhizoma Tripterygii). J Tradit Chin Med. 2014;34(3):324–32.
Xing Y, Liao J, Tang Y, Zhang P, Tan C, Ni H, et al. ACE ve Xinjiang'da yetişen Tamarix Hojnacki Bunge'den (Herba Cistanches'in ev sahibi bitkisi) trombosit agregasyon inhibitörleri. Farmakogn Mag. 2014;10(38):111–7.
Jia Y, Guan Q, Jiang Y, Salh B, Guo Y, Tu P, et al. Farelerde dekstran sülfat sodyum kaynaklı kolitin ekinakozitle zenginleştirilmiş Cistanche tubulosa özütü ile iyileştirilmesi. Fitoter Araş. 2014;28(1):110–9.
