Bölüm Ⅰ: Erkek ve Erkeklerde Gelişim ve Yetişkinlik Sırasında Çözünür Lüteinizan Hormon Reseptörünün Olası İlişkisi

Basit Özet

Her ikisi de lüteinizan hormon reseptörünün (LHCGR) agonisti olan üreme hormonları lüteinizan hormon (LH) ve insan koryonik gonadotropin (hCG), gelişme ve yetişkinlik döneminde erkek üremesi için gereklidir. lHCGR eksprese edilir ve testiküler Leydig hücreleri tarafından testosteron üretimini uyarır. Bu çalışmada, çözünür LHCGR'nin sağlıklı erkek ve erkeklerin kanında, idrarında ve semeninde ve ayrıca cinsiyet kromozomu anormallikleri olan hastalarda bulunduğunu gösterdik. Dolaşımdaki sLHCGR seviyelerinin pubertal gelişim, testis fonksiyonu ve semen kalitesi ile nasıl ilişkili olduğunu gösteriyoruz ve LHCGR'nin fetal insan gonadal olmayan dokusundan salındığını gösteriyoruz. HCG, testisler ve diğer organlar yoluyla seruma salınır, bu da erkek ve erkeklerde LH veya hCG'nin olası bir ekstragonadal rolü olduğunu düşündürür.

Soyut

Luteinize edici hormon (LH) ve insan koryonik gonadotropin (hCG), erkek üreme fonksiyonunu düzenleyen luteinize edici hormon reseptörünün (LHCGR) agonistleridir. lHCGR vücut sıvılarına salınabilir. Çözünür LHCGR'nin gonadal fonksiyonun bir belirteci olup olmadığını belirlemek istedik. Serum, semen, idrar ve karaciğer/böbrek arterlerinde ölçülen LHCGR'yi gonadal fonksiyona bağlamak için 195 sağlıklı erkek ve erkek ve kısırlık, eksiklik veya Klinefelter sendromu (KS) olan 396 erkek üzerinde kesitsel, uzunlamasına ve girişimsel çalışmalar yapıldı. . lHCGR, insan testis dokusu ve hücre hatları, ksenogreft fare modellerinin in vitro ve in vivo modellerinde ölçüldü ve insan Western blot sonuçları, LHCGR fragmanlarının üç farklı antikor kullanılarak benzer büyüklükteki serum ve gonadal dokularda tespit edildiğini gösterdi. İnsan ksenogreftlerinden sonra bile LHCGR-ELISA, fare serumunda türler arası çapraz reaktivite veya spesifik olmayan reaksiyonlar göstermedi. Buna karşılık, sLHCGR, insan fetal böbrek ve adrenal bez kültüründen sonra kültür ortamına salındı. Serum sLHCGR, ergenlik çağındaki sağlıklı erkeklerde önemli ölçüde daha düşüktü (p=0.0001). Sağlıklı erkeklerde serum sLHCGR, inhibin B/FSH oranı ile negatif korelasyon gösterdi (-0.004,p=0.027). Kısır erkeklerde semen sLHCGR, serum FSH ( 0.006, p=0.009), sperm konsantrasyonu ( -3.5, p=0.003) ve toplam sperm sayısı ile negatif korelasyon gösterdi. ( -3.2, p=0.007). hCG enjeksiyonu, sağlıklı erkeklerin serum ve idrarında sLHCGR'yi azalttı (p <0.01). Sonuç olarak, sLHCGR vücut sıvılarına salınır ve pubertal gelişim ve gonadal fonksiyon ile ilişkilidir. Orkide erkeklerinde dolaşımdaki sLHCGR, serumdaki sLHCGR'nin gonadal olmayan dokulardan kaynaklanabileceğini ve gonadal olmayan dokularda işlev görebileceğini düşündürür. (Klinik Denemeler: NTC01411527, NCT01304927, NCT03418896).

anahtar kelimeler

LH reseptörü; ergenlik; gelişim; kısırlık;Cistanche faydaları; gonad dışı etkiler; gonadotropinler; fetal böbrek; fetal adrenal bez; TCAM2; NTera2

Satın almak için buraya tıklayınBitkisel Cistanche Özü

giriiş

Luteinize edici hormon (LH) ve insan koryonik gonadotropini (hCG), gelişim ve yetişkinlik döneminde erkek üremesi için gerekli olan luteinize edici hormon reseptörünün (LHCGR) agonistleridir [1]. HCG, Leydig, granüler lutein ve membran hücrelerinde eksprese edildiği bilinen G proteinine bağlı bir reseptördür ve seks steroid üretiminin güçlü bir düzenleyicisidir [1]. hCG güçlü ve kalıcı bir agonisttir, ancak yalnızca fetal gelişim sırasında fizyolojik olarak önemlidir [2]. Bazı germ hücreli kanserler ve pankreas kanserleri dışında, hCG yetişkinlikte üretilmez, ancak daha önceki bir çalışmada yetişkin erkeklerde ve kadınlarda hipofiz-hCG'nin düşük pulsatil sekresyonu bulunmuştur. hCG, doğurganlık tedavisi sırasında kadınları tedavi etmek için, erkekler için hipogonadal erkeklerde testosteron sentezini ve potansiyel spermatogenezi uyarmak için veya endojen testosteron üretimi için bir tanı testi olarak kullanılır [4]. Fare LH reseptörünün (LHCGR) ablasyonu, testosteron ve semen kalitesinde çarpıcı bir düşüşe yol açar [5] ve birkaç araştırma grubu, LHCGR'de mutasyonlar ve SNP tanımlayarak bunun insan üreme işlevi için önemini göstermiştir [6-8].

LHCGR geni, 2. kromozom üzerinde bulunur ve 11 ekzondan oluşur; bunların 1-10 ekzonları, hücre dışı yapısal alanları kodlar ve ekson 11, 7 transmembran ve hücre içi yapısal alanları kodlar [9]. LHCGR'nin birkaç izoformu vardır ve bunlardan birinin transmembran ankoru olmadığı için salgılandığı düşünülmektedir [10]. Diğer bir olasılık da, LHCGR'nin vücut sıvılarına salınmasının, hücre zarı üzerindeki ADAM'ler, MMP'ler ve parçalanan diğer bilinen transmembran proteinler gibi proteinlerin enzimatik bölünmesine bağlı olmasıdır. Aslında, hCG'nin MMP-2 ve MMP-9'yi [11,12] spesifik olarak yukarı regüle ettiği gösterilmiştir ve birçok çalışma LHCGR'nin transkripsiyon sonrası regülasyonunu göstermiştir [13,14]. Çözünür LHCGR (LHC), ELISA platformu [15,16] tarafından kadın serumunda ve foliküler sıvıda ölçülmüştür. ELISA tahlilinde kullanılan antikorların özgüllüğü, epitop lokalizasyonu için CHO hücrelerinde farklı LHCGR fragmanlarının ifade edilmesi ve insan plasentasında ifadenin saptanmasıyla doğrulanmıştır [15-17]. sLHCGR, LC-MS/MS ile serumda saptandı [18]. Kadınlarda sLHCGR'nin serum konsantrasyonları doğurganlık tedavisi, preeklampsi, erken doğum ve Down sendromlu çocuklarda implantasyon oranları [15,16] ile ilişkiliydi, ancak bugüne kadar diğer araştırma grupları tarafından doğrulanmadı. Bildiğimiz kadarıyla sLHCGR, sağlıklı erkeklerin, gelişmekte olan ergen erkeklerin veya cinsiyet kromozomu anormallikleri olan erkeklerin vücut sıvılarında hiç tanımlanmamıştır. sLHCGR, erkek dolaşımında, yüksek afiniteli bağlanma taşıması veya LH veya hCG aktivitesinin değiştirilmesi yoluyla gonadal fonksiyonun bir belirteci olarak işlev görebilir.

Malzemeler ve yöntemler

1. Kohortlar

Genel Nüfustan Genç Erkekler

Danimarka'da, 18 yaşının üzerindeki tüm sağlıklı genç erkeklerin askerlik hizmetine uygun olup olmadıklarının belirlenmesi için fizik muayeneden geçmesi gerekir. 1996'dan bu yana, genel nüfusu temsil eden yaklaşık 300 asker, her yıl meni kalitesi açısından incelenmektedir. Hepsi meni örnekleri verdi, bir anket doldurdu, testislerinin ultrason muayenelerini yaptı ve kan örnekleri aldı. 2013 ve 2014 yıllarında ankete katılan 148 erkekten alınan serum ve semen örneklerinin yanı sıra ultrason değerlendirmeleri ve BMI ve yaş bilgileri bu çalışmaya dahil edildi (Etik Kurul onayı: H-KF-289428).

Ergenlik Öncesi ve Sonrası Sağlıklı Erkekler

Kopenhag Ergenlik Çalışması, sağlıklı Danimarkalı çocukların birleştirilmiş kesitsel ve boylamsal bir çalışmasıdır [20]. Rastgele seçilen devlet okullarından 6203 çocuk katılmaya davet edildi. Toplam katılımcı sayısı 2020 çocuktu. Her 6 ayda bir 209 çocuğun (101 erkek) boylamsal takibi yapıldı ve fizik muayene, ergenlik evrelerinin Tanner değerlendirmesi ve kan ve idrar örneklerini içeriyordu. Ergenlik döneminde sLHCGR'yi değerlendirmek için boylamsal takibi olan otuz altı erkek çocuk bu çalışmaya dahil edildi (klinik çalışma: NTC01411527).

Ciddi Komorbiditesi Olmayan İnfertil Erkekler

Kopenhag-Kemik-Gonad Çalışması, 2011'den 2015'e kadar erkek kliniğimize başvuran ve toplam 1427 erkeği kapsayan, ciddi komorbiditeleri olmayan 307 infertil erkeğin kohort çalışmasıdır [21,22]. Tüm erkekler düşük semen kalitesi ve ebeveynlik isteği nedeniyle kliniğimize yönlendirildi. Hepsine testis ultrasonu da dahil olmak üzere fizik muayene yapıldı, kan örnekleri alındı ​​ve semen örnekleri verildi. Bir uzman ayrıntılı tıbbi geçmişlerini aldı. Erkekler, araştırmacılar tarafından 150 gün boyunca takip edildi ve daha önce anlatıldığı gibi D vitamini veya plasebo aldı. Bu çalışmada sağlanan tüm veriler ilk müdahale öncesi ziyaretten alınmıştır ve dahil edilen tüm değişkenler önceden tanımlanmıştır (klinik deney: NCT01304927).

Standart Cistanche

Klinefelter Sendromlu Erkekler ve Erkekler ve Anorşi Hastaları

Erkek kliniğimizde Tanner evrelemesine göre tanımlanan 47'si ergenlik sonrası ve 16'sı ergenlik öncesi olmak üzere Klinefelter sendromlu (KS) 64 erkek ve erkek belirledik. Kesin kromozomal anormallikler, tıbbi geçmiş, pubertal başlangıç ​​durumu ve herkes için mevcut serum bilgimiz vardı. 7 erkek çocuğa puberte öncesi ve sırasında düzenli klinik değerlendirme ve kan örneklemesi ile boylamsal takip uygulandı.

Ayrıca önceki koşullar nedeniyle bilateral testisleri alınmış normal kromozom sayısına sahip 8 erkeği dahil ettik: testiküler germ hücreli karsinom (n=4), diffüz prostat kanseri (n=1), bilateral kriptorşidizm ve pediatrik orşiektomi ( n=1), bilateral germ hücreli neoplazi in situ (n=1) ve travma nedeniyle kalan testislerin alınmasından sonra ilerlemiş testis kanseri (n=1).

Splanchnicus Akış Ölçümü Yapılan Yetişkinler

Mezenterik iskemi şüphesiyle başvuran ve visseral kan akışının ölçülmesi için sevk edilen ancak mezenterik iskemi göstermeyen normal karaciğer fonksiyonuna sahip üç erkek ve üç postmenopozal kadını dahil ettik. Karaciğer, böbrek, femoral ven ve ilgili arterden eş zamanlı olarak kan örnekleri alındı ​​(Etik Kurul onayı: H.18048245)

Müdahale Çalışması: İnsan Koryonu Gonadotropinine Maruz Kalan Sağlıklı Erkekler

Bir Danimarka Rigshospitalet duyurusu aracılığıyla klinik müdahaleye katılmak üzere on bir sağlıklı erkek işe alındı. Gönüllüler 5000 IU insan koryonik gonadotropin ile tedavi edildi ve maksimum endojen testosteron üretimi, hCG enjeksiyonundan 8, 24 ve 72 saat sonra toplanan takip numuneleri ile başlangıçtaki kan ve idrar numuneleri karşılaştırılarak ölçüldü (klinik deney: NCT03418896).

2. Fareler, İnsan Dokusu ve Hücre Hatları

Sırasıyla embriyonal karsinom ve seminomu temsil eden insan testis kanseri hücrelerinin iki suşu NTera-2 ve TCam-2 kullanıldı ve daha önce tarif edildiği gibi kültürlendi [23].

Sırasıyla vektör, LH veya hCG ile tedavi edilen tümörsüz çıplak farelerden (WT) ve TCam-2 ksenogreft çıplak farelerden serum toplandı (Hayvan Deneyleri Müfettişliği, Kopenhag, Danimarka, lisans numarası: 2012-15-2934-00051) .

Birinci trimester insan fetüsü dokuları, planlı kürtajlardan sonra bağışlanan kadın dokularından toplandı. Fetal böbrek ve fetal adrenal doku, daha önce açıklandığı gibi süspansiyon damla modellerinde kültürlendi ve besiyeri analiz için toplandı [24,25] (Etik Kurul onayı: H-1-2012-007).

Erişkin testis örnekleri, testis kanserli ovariektomi uygulanmış erkeklerden elde edildi (Etik Kurul onayı: H{{0}}). Malign olmayan alanlar içeren peritümöral doku, - 80◦C'de saklandı veya gece boyunca 4◦C'de formalin veya modifiye Stieve's-fiksatif (200 mL yüzde 37 formaldehit, 1 L 0.05 M fosfat içinde 40 mL asetik asit) içinde sabitlendi tampon, pH 7.4).

3. Biyokimyasal Analizler

Serum, semen, idrar ve çeşitli kültür ortamlarında toplam sLHCGR'nin saptanması, insan LHCGR'sine karşı LHR029 antikoru kullanılarak New Dutch Biomarker Catalyst Laboratory'den (NBCL) ELISA kitleri kullanılarak bir doğrulama sürecinde gerçekleştirildi ve tüm ölçümler yapıldı. bunlardan tekrar tekrar. ELISA testinin tespit limiti 0,01 pmol/mL ve maksimum seviye 15,55'tir. ELISA platformunun performansı daha önce [15-17] ayrıntılı olarak açıklanmıştır.

Cistanche takviyeleri

Ayrıca laboratuvar teknisyenlerimiz tarafından kurulan iki farklı şirket içi ELISA kurduk ve diğer tüm reaktifler, önerilen kuruluma göre Origin Biomarkers Ltd, UK tarafından sağlandı [26]. İlk olarak, hCG'ye bağlı dolaşımdaki sLHCGR, 5A10C9 (ProMab) ve am0{{2{22}}}904pun () antikorlarına sahip sandviç ELISA kitleri kullanılarak tespit edildi. OriGene) sırasıyla LHCGR ve hCG'ye yöneliktir. İkinci olarak, sLHCGR'ye karşı aynı LHR{27}}29 (NBCL Holland) antikorunu kullandığımız altı yetişkin sLHCGR'den toplam karaciğer, böbrek ve alt ekstremite arteriyel ve venöz numunelerini belirlemek için benzer şekilde kurum içi ELISA kullandık. İki farklı protokol test edildi. Bu yazıda açıklanan tüm sLHCGR ölçümleri, yukarıda açıklanan organlardan alınan hCG-sLHCGR kompleksi ve arteriyel/venöz numuneler dışında NBCL ELISA kullanılarak gerçekleştirilmiştir. Sağlıklı erkeklerde testosteron, 0,23 nmol/L tespit limiti (LOD) ve zamana bağlı immünofloresan kullanılarak yüzde 8,6 CV ile DPC kaplı-sayım RIA kiti (Diagnostic Products, Los Angeles, CA) kullanılarak analiz edildi. (Delfia; Wallac, Turku, Finlandiya), saptama sınırı yüzde 6,4'lük bir CV ile 0,20 nmol/l idi. Yetişkinlerde, testosteron ve seks hormonu bağlayıcı globulin (SHBG), sırasıyla 0,35 nmol/L ve 0,33 nmol/L LOD'lerle kemilüminesans immünoassay (Access, Beckman Coulter, ABD) ile analiz edildi. Serum ve idrar FSH ve LH seviyeleri, sırasıyla 0,06 ve 0,05 IU/L tespit limitleri ile zamana bağlı immünofloresan (Delfia; Wallac, Turku, Finlandiya) kullanılarak ölçüldü ve CV ve lt; ikisi de yüzde 5'te. İnhibin B testi, spesifik bir ikili enzim immüno testi (inhibin B genII, Beckman Coulter, ABD) CV

Semen Analizi

Sağlıklı genç erkekler ve kısır yetişkin katılımcılar semen örnekleri sağladılar ve ejakülatuar perhizin süresi hakkında kendileri tarafından bildirilen bilgileri aldılar. Semen analizi daha önce açıklandığı gibi eğitimli teknisyenler tarafından yapıldı [19]. Semen hacmi tartılarak tahmin edildi. Sperm canlılığı değerlendirmesi için, 10 μ L iyi karıştırılmış semen kopyası slaytlara yerleştirildi ve 37◦ C'lik ısıtılmış bir bölümde × 400x mikroskop altında incelendi. gelişmiş yaşayabilir (DSÖ sınıf a artı B), ilerleyici olmayan yaşayabilir (sınıf C) veya aktif olmayan (sınıf D). İki canlılık değerlendirmesinin ortalaması kullanıldı. Sperm konsantrasyonunu değerlendirmek için örnekler 0,6 moL/L NaHCO3 ve yüzde 0,4 (v/v) formaldehit distile su solüsyonunda seyreltildi ve ardından Bürker-Türk hemositometre ile değerlendirildi ve değerlendirmelerin ortalaması kullanıldı. Sadece kuyruklu spermler sayıldı. Son olarak, yaymalar hazırlandı ve Pap boyası ile boyandı ve sperm morfolojisi [29] kriterlerine göre kesin olarak değerlendirildi.

Western lekeleme

İnsan testis dokusu, lizis tamponunda homojenleştirildi, SDS yükleme tamponunda seyreltildi ve ardından 95°C'de 5 dakika ısıtıldı. Numuneler, yüzde 4-20 prekast poliakrilamid jellere (BioRad, cat# 456-8096) yüklendi ve proteinleri ayırmak için 100 V'ta 1 saat çalıştırıldı. Serumda sLHCGR'yi tespit etmek için albümin ve IgG, numuneleri jele yüklemeden önce Pierce albümin/IgG çıkarma kiti (Thermo Scientific, Waltham, MA, ABD, kat# 89875) kullanılarak çıkarıldı. jel elektroforezinden sonra, proteinler bir ıslak kurutma kağıdı (BioRad) kullanılarak poliviniliden diflorür membranlara aktarıldı. Membranlar, tris tamponlu salin ve yüzde 5 kaymağı alınmış kuru süt içinde 1 saat süreyle kapatıldı, ardından gece boyunca 4°C'de birincil antikorlarla ve 1 saat oda sıcaklığında ikincil antikorlarla inkübe edildi. Membranlar, geliştirilmiş kemilüminesans (Thermo Scientific Super Signal West Femto Maximum Sensitive Substrat, Cat# 34095) ve bir chemiDoc MP görüntüleme sistemi (BioRad, Cat# 17001402) ile fotodetektör ile yıkandı. Doku ve serumda LHCGR'yi saptamak için üç farklı antikor kullanıldı: Aviva System Biology (OASG04237); NBCL Holland, serum ELISA kiti (LHR029) ve Santa Cruz Biotechnology (Dallas, TX, ABD, SC- 26341) ile aynı antikor. Yükleme kontrolü olarak -2 mikroglobulin kullanıldı.

İmmünohistokimya

İmmünohistokimya daha önce tarif edildiği gibi yapıldı [25]. Kısaca, kesitler modifiye Stiff fiksatifi ile sabitlendi, mumu alındı ​​ve yeniden hidratlandı. Antijen ekstraksiyonu, sitrat ekstraksiyon tamponu (10 mM, pH 6.0) ​​içeren bir otoklavda gerçekleştirildi. Endojen peroksidaz metanol içinde yüzde 3 (v/v) H2O2 ile 30 dakika bloke edildi. Her adım arasında, kesitler TBS içinde yıkandı. Kesitler, 30 dakika boyunca yüzde 0,5 BSA at serumu ile inkübe edildi, ardından oda sıcaklığında 1 saat boyunca iki farklı birincil antikorla gece boyunca inkübe edildi (WB/ELISA için LHR029, Santa Cruz Biotechnology SC- 25828). Kesitler sekonder antikorlarla 30 dakika inkübe edildi. Görüntüler aminoetil karbazol (AEC, Invitrogen, Life Technologies/Thermo Fisher Scientific, Waltham, MA, ABD) ile görüntülendi. Negatif kontroller birincil antikorlar içermiyordu. Negatif kontrollerin hiçbiri boyanmadı. Mayer hematoksilin ile zıt boyama yapıldı ve Aquatex ile montaj yapıldı. Kesitler, bir Nikon Microphot-FXA mikroskobunda (Nikon Corporation, Melville, NY, ABD) değerlendirildi. Nihai analiz, NDPview sürüm 1.2.36 yazılımı (Hamamatsu Photonics, Iwata City, Japonya) kullanılarak yapıldı.

Cistanche özü böbrek için faydaları

REFERANSLAR

1. Dufau, ML Luteinize edici hormon reseptörü. Annu. Rev. Physiol. 1998, 60, 461–496.

2. Rao, CV Sığır corpora lutea'nın plazma zarlarına bağlanan insan koryonik gonadotropin ve insan luteinize edici hormonun farklı özellikleri. Açta Endokrinol. 1979, 90, 696–710.

3. Odell, WD; Griffin, J. Normal erişkinlerde insan koryonik gonadotropinin pulsatil salgılanması. İngilizce J.Med. 1987, 317, 1688–1691.

4. Patlama, AK; Nordkap, L.; Almstrup, K.; Priskorn, L.; Petersen, JH; Rajpert-De Meyts, E.; Andersson, A.-M.; Juul, A.; Jørgensen, N. Dinamik GnRH ve hCG testi: Yeni teşhis referans seviyelerinin oluşturulması. Avro. J. Endokrinol. 2017, 176, 379–391.

5. Zhang, FP; Poutanen, M.; Wilbertz, J.; Huhtaniemi, I. Normal doğum öncesi ancak luteinizan hormon reseptörü nakavt (LuRKO) farelerin doğum sonrası cinsel gelişiminin durdurulması. Mol. endokrinol. 2001, 15, 172–183.

6. Bruysters, M.; Christin-Maitre, S.; Verhoef-Post, M.; Sultan, C.; Auger, J.; Faugeron, I.; Larue, L.; Lumbroso, S.; Temalar, APN; Bouchard, P. Yeni bir LH reseptörü splice mutasyonu, erkek hipogonadizminden, propositusta normalin altında sperm üretimi ve etkilenen bir kız kardeşte düzenli döngülerle infertiliteden sorumludur. Hımm. Üreme 2008, 23, 1917–1923.

7. Latronico, AC; Arnhold, IJP Her iki cinsiyette insan lüteinize edici hormon reseptörünün inaktive edici mutasyonları. Semin. Üreme Med. 2012, 30, 382–386.

8. Simoni, M.; Tüttelmann, F.; Michel, C.; Böckenfeld, Y.; Nieschlag, E.; Gromoll, J. Luteinize edici hormon/koryonik gonadotropin reseptör geninin polimorfizmleri: Yanlış inmiş testisler ve erkek kısırlığı ile ilişki. Farmakogenet. Genom. 2008, 18, 193–200.

9. Ascoli, M.; Fanelli, F.; Segaloff, DL Lutropin/koriyogonadotropin reseptörü, 2002 perspektifi. Endokrin Rev. 2002, 23, 141–174.

10. Tena-Sempere, M.; Zhang, AP; Huhtaniemi, I. Etilen metan sülfonat tarafından seçici Leydig hücresi yıkımından sonra sıçan testisinde luteinize edici hormon reseptör habercisi ribonükleik asidin kesik bir formunun kalıcı ifadesi. Endokrinoloji 1994, 135, 1018–1024.

11. Fluhr, H.; Bischof-Islami, D.; Krenzer, S.; Licht, P.; Bischof, P.; Zygmunt, M. İnsan koryonik gonadotropin, sitotrofoblastik hücrelerde matris metaloproteinazları-2 ve -9 uyarır ve desidualize edilmiş hücrelerde metaloproteinazların doku inhibitörünü -1, -2 ve -3 azaltır. endometriyal stromal hücreler. Verimli. steril. 2008, 90, 1390–1395.

12. Licht, P.; Fluhr, H.; Neuwinger, J.; Wallwiener, D.; Wildt, L. İnsan koryonik gonadotropin, insan implantasyonunun düzenlenmesinde doğrudan yer alıyor mu? Mol. Hücre. endokrinol. 2007, 269, 85–92.

13. Li, Y.-X.; Guo, X.; Gulappa, T.; Menon, B.; Menon, KMJ SREBP, İnsan Granüloza-Lutein hücrelerinde LH/hCG Reseptörü mRNA Ekspresyonunda Düzenleyici Bir Rol Oynar. J. Clin. endokrinol. Metab. 2019.

14. Menon, KMJ; Menon, B.; Wang, L.; Gulappa, T.; Harada, M. Gonadotropin reseptörü ekspresyonunun moleküler düzenlenmesi: sterol metabolizması ile ilişki. Mol. Hücre. endokrinol. 2010, 329, 26–32.

15. Daireler, AE; Griffin, C.; Naif, SA; Değirmenler, I.; Değirmenler, BİZ; Syngelaki, A.; Nicolaides, KH; Banerjee, S. Serumda çözünür LHCGR ve hCG-LHCGR kompleksi için Kantitatif ELISA'lar: Ölü doğum, Down sendromu, erken doğum ve preeklampsi için birinci üç aylık gebelik taramasında potansiyel teşhis. Üreme Biol. endokrinol. 2012, 10, 113.

16. Daireler, AE; Nayini, KP; Değirmenler, BİZ; Lockwood, Genel Müdür; Banerjee, S. Dolaşımdaki LH/hCG reseptörü (LHCGR), OHSS ve zayıf implantasyon riski taşıyan tedavi öncesi IVF hastalarını belirleyebilir. Üreme Biol. endokrinol. 2011, 9, 161.

17. Daireler, AE; Stanley, PF; Randeva, H.; Banerjee, S. Transfekte edilmiş hücrelerden ve plasenta eksplantlarından çözülebilir LH/hCG reseptörünün (LHCGR) mikrovezikül aracılı salımı. Üreme Biol. endokrinol. 2011, 9, 64.

18. Gao, HJ; Chen, YJ; Zuo, D.; Xiao, AA; Li, Y.; Guo, H.; Zhang, N.; Chen, RB Hepatoselüler karsinom serumunda diferansiyel glikoproteinlerin yüksek verimli taraması için kantitatif proteomik analiz. Kanser Biol. Med. 2015, 12, 246–254.

19. Priskorn, L.; Nordkap, L.; Bang, AK; Krause, M.; Holmboe, SA; Egeberg Palme, DL; Kanat, SB; Morup, N.; Carlsen, E.; Joensen, BM; et al. Annenin sigara içmesindeki azalmaya rağmen ortalama sperm sayısı değişmeden kalıyor: 21 yılı aşkın yıllık araştırmaları içeren geniş kesitsel bir çalışmanın sonuçları. Hımm. Üreme 2018, 33, 998–1008.

20. Sørensen, K.; Aksglaede, L.; Petersen, JH; Juul, A. Sağlıklı Danimarkalı erkek çocuklarda pubertal zamanlamadaki son değişiklikler: Vücut kitle indeksi ile ilişkiler. J. Clin. endokrinol. Metab. 2010, 95, 263–270.

21. Blomberg Jensen, M.; Lawaetz, JG; Petersen, JH; Juul, A.; Jørgensen, N. D Vitamini Takviyesinin Semen Kalitesi, Üreme Hormonları ve Canlı Doğum Oranı Üzerindeki Etkileri: Randomize Bir Klinik Çalışma. J. Clin. endokrinol. Metab. 2018, 103, 870–881.

22. Blomberg Jensen, M.; Gerner Lawaetz, J.; Andersson, A.-M.; Petersen, JH; Nordkap, L.; Bang, AK; Ekbom, P.; Joensen, BM; Prætorius, L.; Lundstrøm, P.; et al. D vitamini eksikliği ve düşük iyonize kalsiyum, kısır erkeklerde semen kalitesi ve seks steroid seviyeleri ile bağlantılıdır. Hımm. Üreme 2016, 31, 1875–1885.

23. Lorenzen, M.; Nielsen, JE; Andreassen, CH; Juul, A.; Toft, BG; Rajpert-De Meyts, E.; Daugaard, G.; Blomberg Jensen, M. Lüteinizan Hormon Reseptörü Testiküler Germ Hücreli Tümörlerde Eksprese Edilir: Tümör Büyümesi ve Prognoz için Olası Etkiler. Yengeçler 2020, 12, 1358.

24. Elderup, E.; Theilade, S.; Lorenzen, M.; Andreassen, CH; Poulsen, KH; Nielsen, JE; Hansen, D.; El Fassi, D.; Berg, JO; Bağı, P.; et al. Kozmetik Yağ Enjeksiyonlarından Sonra Hiperkalsemi: Çözülen Etiyoloji, Patogenez ve Önem Derecesi. J. Kemik Madenci. Res. 2020, 36, 322–333.

25. Jørgensen, A.; Macdonald, J.; Nielsen, JE; Kilcoyne, KR; Perlman, S.; Lundvall, L.; Langhoff Thuesen, L.; Juul Hare, K.; Frederiksen, H.; Andersson, A.-M.; et al. Düğüm Sinyali, İnsan Fetal Testisinde Germ Hücresi Gelişimini ve Seminifer Kordonların Kurulmasını Düzenler. Hücre Temsilcisi 2018, 25, 1924–1937.e4.

26. Daireler, AE; Fairbairn, C.; Gaudoin, M.; Değirmenler, W.; Woo, ben .; Pandian, R.; Stanczyk, FZ; Chung, K.; Banerjee, S. IVF'de gebelik ve canlı doğumun belirleyicileri olarak çözünür LH-HCG reseptörü ve östradiol. Üreme Biyomed. Çevrimiçi 2019, 38, 159–168.

27. Vermeulen, A.; Verdonck, L.; Kaufman, JM Serumdaki Serbest Testosteronun Tahmini İçin Basit Yöntemlerin Kritik Bir Değerlendirmesi. J. Clin. endokrinol. Metab. 1999, 84, 3666–3672.

28. Mazer, NA Testosteron, dihidrotestosteron, estradiol, estron ve kortizolün serbest serum konsantrasyonlarını hesaplamak için yeni bir elektronik tablo yöntemi: Erkek ve kadın popülasyonlarından açıklayıcı örneklerle. Steroidler 2009, 74, 512–519.

29. Menkveld, R.; Standart, FS; Kotze, TJ; Kruger, TF; van Zyl, JA İnsan spermatozoasının morfolojik özelliklerinin daha katı kriterlere göre değerlendirilmesi. Hımm. Üreme 1990, 5, 586–592.

Li Juel Mortensen¹Mette Lorenzen¹, Anne Jürgensen², Jacob Albrethsen², Niels Jørgensen²,Søren Møller^3,4, Anna-Maria Andersson²Anders Juul^2,4ve Martin Blomberg Jensen^1,5

1. Grup İskelet, Mineral ve Gonadal Endokrinoloji, Üniversite Büyüme ve Üreme Departmanı, Rigshospitalet, 2100 Kopenhag, Danimarka; li.juel.mortensen@regionh.dk (LJM); mette.lorenzen.01@regionh.dk (ML)

2. Büyüme ve Üreme Bölümü ve Erkek Üreme ve Çocuk Sağlığının Endokrin Bozulmasında Araştırma ve Araştırma Eğitimi Uluslararası Merkezi (EDMaRC), Rigshospitalet, Kopenhag Üniversitesi, Blegdamsvej 9, 2100 Kopenhag, Danimarka; Anne.Joergensen.02@regionh.dk (AJ); Jakob.Christian.Albrethsen@regionh.dk (JA); Niels.Joergensen@regionh.dk (NJ); Anna-Maria.Andersson@regionh.dk (A.-MA); Anders.Juul@regionh.dk (AJ)

3. Fonksiyonel ve Tanısal Görüntüleme ve Araştırma Merkezi, Klinik Fizyoloji ve Nükleer Tıp Bölümü 260, Hvidovre Hastanesi, 2650 Kopenhag, Danimarka; Soeren.Moeller@regionh.dk

4. Klinik Tıp Anabilim Dalı, Sağlık Bilimleri Fakültesi, Kopenhag Üniversitesi, 2200 Kopenhag, Danimarka

5. Kemik ve Mineral Araştırma Bölümü, Harvard Diş Hekimliği Fakültesi/Harvard Tıp Fakültesi, Boston, MA 02115, ABD