Bölüm 1: Genistein: Yeni İlaç Tasarımı ve Hafıza Bozukluğunun Tedavisine Yönelik Geliştirme İçin Potansiyel Bir Doğal Kurşun Molekül

Daha fazla bilgi için, iletişimtina.xiang@wecistanche.com

Soyut: genisteindoğal olarak oluşan bir polifenolik moleküldür.izoflavonlarsinir korumasıyla tanınan bir gruptur. Bu derlemede, genisteinin etkilerini hafifletmedeki etkinliğini özetledik.hafıza bozukluğu(MI) hayvanlarda. Scopus, PubMed ve Web of Science veri tabanları, ilgili makaleleri bulmak ve genisteinin farmakokinetiği, biyoyararlanımı, davranışsal etkileri ve çeşitli hayvan modellerinde bellek üzerindeki bazı potansiyel etki mekanizmaları dahil olmak üzere beyindeki etkilerini tartışmak için kullanıldı. Klinik öncesi çalışmaların sonuçları, genisteinin, özellikle uzamsal, tanıma, saklama ve referans anıları dahil olmak üzere hafıza alanında, MI hayvan modellerinin bilişsel performansını arttırmada oldukça etkili olduğunu ileri sürdü.oksidatif stresve zayıflatmaksinir iltihabı. Bu derleme aynı zamanda MI tedavisi için genistein ilaç dağıtımını iyileştirmeye yönelik zorlukları ve fırsatları da vurguladı. Bununla birlikte, fizikokimyasal ve ilaca benzer özelliklerini geliştirmek için genisteinin olası yapısal modifikasyonları ve türevleri de tartışılmaktadır. İncelemenin sonuçları, genisteinin farklı klinik öncesi çalışmalarda bilişsel performansı artırabileceğini ve MI'yı iyileştirebileceğini kanıtladı, böylece yeni bir nöroprotektif ilacın tasarımı ve geliştirilmesi için doğal bir lider olma potansiyelini gösterdi.

anahtar kelimeler: genistein; izoflavon; hafıza bozukluğu; nöroproteksiyon; bitki tıbbı

Ürünler hakkında daha fazla bilgi edinmek için buraya tıklayın

1. Giriş

Bellek, bilinen gerçekler, hatırlanan olaylar ve kişinin yaşamı boyunca beslediği yetenekler gibi kişinin deneyimi boyunca edindiği tüm bilgileri içeren bilgileri edinme, saklama ve geri getirme durumudur. İki ana bellek türü, bildirimsel ve bildirimsel olmayan belleklerdir; birincisi günlük hatıralar iken, ikincisi esas olarak refleks olarak alınan hatıralardan oluşur[1]. Genellikle hafıza bozukluğu (MI) olarak bilinen hafıza bozuklukları, sendromlarla ilişkili belirli etiyolojilerin teşhisi için temel göstergelerdir. Konuyla ilgili bazı durumlar şunları içerir:Alzheimer, Parkinson, Huntington, Korsakoff ve Creutzfeldt-Jakob hastalıkları (Şekil 1)[2-5]. MI, amnezi ve demansta olduğu gibi esas olarak bildirimsel belleği etkiler, ancak demans, iki veya daha fazla biliş alanındaki düşüş olarak tanımlandığından, ikincisinde durum her zaman böyle değildir. Başka bir deyişle, demans, belleğin diğer bölümlerini de etkilediği için yalnızca bildirimsel bellek bozukluğu ile sınırlı değildir [1].

Demans, belleği hem birincil hem de ikincil şekillerde etkileyebilir. Birincil bellek yetersizliği, Alzheimer hastalığının iyi bir gösteri olduğu bildirimsel bellekteki düşüşü içerebilir, çünkü bildirimsel bellek, düşüşten muzdarip bilişsel alanlardan biridir. Öte yandan, bellek yeteneğinin etkilenmesinin ikincil yolu, bellek performansını engelleyebilecek bilişsel eksiklikler, örneğin bellek performansının birçok yönünü engelleyebilecek dikkat bozukluğu demansı olduğu zamandır [1].

Şu anda, Ml gelişimini tamamen azaltabilecek onaylanmış bir tedavi yoktur. Bununla birlikte, hafıza geliştirme terapileri, MI risk faktörleriyle mücadele amacıyla hastanın bilişsel işlevini sürdürmek için önemlidir. Bir üreme hormonu olan östrojen, nöroprotektif rolü ile geniş bir etki spektrumuna sahiptir. Bununla birlikte, bir nöroprotektif ajan olarak potansiyeli, belirli hücreler üzerindeki proliferasyon ve onkojenik etkilerle iyileştirilebilir ve doğal olarak oluşan fitoöstrojenler [6] benzeri genistein dahil olmak üzere seçici östrojen reseptör modülatörlerinin (SERM'ler) geliştirilmesine ihtiyaç duyulmasına neden olabilir.

genisteinbaklagiller, yer fıstığı ve yeşil bezelye gibi diğer birçok kaynak arasında ağırlıklı olarak Glycine max(soya fasulyesi) özünde bulunan bir izoflavondur (Şekil 2). Genistein, biyolojik olarak aktif glikozid genistin metabolizmasının ardından üretilir [7]. Birçok geleneksel Asya yemeği soya fasulyesinden yapıldığından, örneğin natto, tofu ve sufu [8], Asya ülkeleri, Batı ülkeleri ile karşılaştırıldığında (2 mg/gün) nispeten yüksek miktarda genistein (25-30 mg/gün) alımı kaydetmiştir. /gün). Aslında, soya fasulyesinin fermantasyonu da sindirim dışında genistein salmanın en iyi yollarından biridir [9].

Genisteinin farmakolojik özellikleri, menopoz sonrası semptomlar, kanser, kemik, beyin ve kalp sorunları dahil olmak üzere çok çeşitli hastalıkların tedavisinde öncü bir molekül olma potansiyeline sahip olduğunu ortaya çıkardı [l0. Genistein, nöroprotektif etkisini göstermek için kan-beyin bariyerini geçtiğine inanıldığından, Alzheimer, Huntington ve Sanfilippo hastalığı gibi nörodejeneratif hastalıkların tedavisinin araştırılmasında yaygın olarak uygulanır (Şekil 3)[11-13 ]. Son araştırmalar, genisteinin ß-amiloid protein (A ) üretimini （1） azaltarak, (2) nükleer faktörle aktive olan B hücrelerini (NF-kB) inhibe ederek nöro-enflamatuarı önleyerek MI'ya karşı koruduğu MI üzerindeki etkisine odaklanmıştır. , (3) asetilkolinesterazın (AChE) aktivitesinin inhibe edilmesi, (4) nöronal lif dolaşıklığının (NFT) önlenmesi için tau proteininin hiperfosforilasyonunun azaltılması, (5) Apolipoprotein E'nin (ApoE) aktivitesinin yukarı doğru düzenlenmesi ve böylece birikimin azaltılması A , ve (6) antioksidan özelliklerini uygular ve reaktif oksijen türlerini (ROS) [14-19] ortadan kaldırarak oksidatif stresi azaltır.

MI'yı iyileştirmede genisteinin potansiyel işlevlerini daha iyi anlamak için bu derlemede MI'ya karşı genistein üzerine yapılan çok sayıda çalışmaya genel bir bakış sunulmaktadır. Hayvan modelleri, hafıza testi metodolojileri ve dozu açısından Ml üzerindeki her önemli çalışmanın çalışma tasarımı da özetlenmiştir. Ek olarak, MI tedavisinde genisteinin etkinliği hakkında toplanan verilere genel bir bakış sunulmaktadır. Genistein tarafından verilen potansiyel koruyucu mekanizmalar, tamamlayıcı tıp veya MI için bir adjuvan olarak kullanımıyla ilgili bilgi boşluğunu kapatmak için de vurgulanmıştır. Bu derleme aynı zamanda MI tedavisi için genistein ilaç dağıtımını iyileştirmenin önündeki bazı engellerin ve potansiyelinin de ana hatlarını vermektedir. Ek olarak, genisteinin güvenlik, etkinlik, fizikokimyasal ve ilaca benzer özelliklerini artırmak için çeşitli yapısal modifikasyonları ve türevleri tartışıldı.

2. Çalışma Tasarımının Tanımı

2.1.Hayvanlar

Araştırmaların çoğunda sıçanlar ve fareler kullanıldı. Tüm deney protokolleri, ilgili kurumun hayvan refahı komiteleri tarafından yetkilendirilmiş ve laboratuvar hayvanlarının kullanım ve bakımına ilişkin yönergelere uygun olarak yürütülmüştür.

2.2. MI Modelleri

Dahil edilen her bir çalışma, farklı MI modellerine odaklandı. Örneğin, Rum-manet al. [19] hipoksiye bağlı Ml'ye odaklanırken, Luet al. [20] kronik uyku yoksunluğu (CSD) kaynaklı bellek açıklarını inceledi. Pierzynowska ve ark. [13] STZ ile indüklenen Alzheimer hastalığı(AH) modelini incelerken Rajput ve ark. [21] bir MI modeli için STZ kaynaklı diyabete odaklandı. Öte yandan, diğer MI modelleri, skopolamin kaynaklı bilişsel bozulma, lipopolisakkarit (LPS), kurşun, kainik asit (KA), yaşlanma ve -amiloidi [22-27] içeriyordu.

2.3. genistein DOoz

During the course of the treatment, all of the selected investigations used purchased genistein (purity>yüzde 98). Araştırmaların çoğunda genisteinat0.5-150 mg/kg kullanıldı. MI in-vivo modellerinde seçilen en yaygın iki doz 10 ve 20 mg/kg idi. Uygulama yolu açısından sekiz araştırmada oral (po)genistein kullanılırken, iki çalışmada intraperitoneal (ip) verildi. Davranışsal değerlendirmeler öncesinde en az 4 gün en fazla 90 gün genistein tedavisi uygulandı.

2.4. Genistein Toksisite Profili

Bir in vivo çalışmada, Ek ve ark. [28] farelerde genisteinin toksisite profilini ve farmakokinetiğini araştırdı. Dişi BALB/c fareleri, her bir fareye, 0'dan birini içeren 0,2 mL(10) dimetilsülfoksit/fosfat tampon solüsyonu (DMSO/PBS) içeren bir intraperitoneal enjeksiyon aldığı çalışmalar sırasında kullanıldı. 10 gün boyunca günde ,2,20,200,400 ve 800 ug genistein. Daha sonra fareler 14 gün boyunca izlendi ve ardından hayatta kalan fareler histoloji analizi için kurban edildi. Bulgular, genistein ile tedavi edilen farelerin, en yüksek genistein dozu (40 mg/kg) ile tedaviyi takiben bile herhangi bir toksisite belirtisi göstermediğini, zayıf, uyuşuk hale gelmediğini veya herhangi bir kilo vermediğini göstermiştir. Ayrıca, genistein, Nasri ve Pohjanvirta'ya göre, 52 haftaya kadar oral yoldan uygulanan 500 mg/kg/gün'e kadar dozlarda in vivo subkronik ve kronik güvenlik araştırmalarında iyi tolere edilmiştir [29].

2.5. Bellek Test Prosedürü

Levin ve Buccafusco [30] hayvan modeli çalışmalarında üç ana bilişsel işlev bozukluğu olduğunu belirtmişlerdir: (1) farmakolojik modeller, (2) toksikolojik modeller ve (3) genetiği değiştirilmiş modeller. Öğrenme, hafıza ve dikkatin sinirsel temelleri, bilişsel bozulmanın kritik öneme sahip hayvan modelleri kullanılarak belirlendi. Farmakolojik modeller, öğrenme, hafıza ve dikkat gibi bilişsel süreçlerde yer alan nörotransmitter-reseptör sisteminin rolünü anlamak için temel oluşturdukları için bilişsel bozukluklar çalışmalarında en yaygın kullanılanlardır [30].

Kolinerjik sistem (muskarinik ve nikotinik) ve glutamat reseptörleri, çoğunlukla N-metil-D-aspartat (NMDA) reseptörleri bilişsel işlevlerde kritik nöronal roller oynarlar. Asetilkolin, kolin enzimi aracılığıyla diyet kolin ve asetil koenzim A'dan sentezlenir. asetiltransferaz (CAT): Asetilkolinin metabolizması, asetilkolinesteraz enzimi tarafından kolaylaştırılan nöronal sinapsta meydana gelir.Bugüne kadar, donepezil, rivastigmin ve galantamin gibi bozulmuş hafızayı iyileştirmek için bazı kolinesteraz inhibitörleri geliştirilmiştir [31].

Kolinerjik sistem hayvan modellerinde hafıza bozukluğunu indüklemek için, skopolamin, atropin, pirenzepin, triheksifenidil, benztropin, biperiden ve disiklomin dahil antimuskarinik ajanlar kullanılmıştır [32]. Nikotinik reseptör antagonistleri, örneğin mekamilamin (rekabetçi olmayan, seçici olmayan bir nikotinik reseptör antagonisti), klorison diamin ve d-tubokurarin (spesifik olmayan nikotinik antagonistler), dihidro- -eritrodin hidrobromür (Dh E; belirli bir reseptör {{5 }} antagonisti) ve metil akonitin (MLA) (spesifik reseptör 7 antagonisti), hayvan modellerinde bilişsel kusurları uyarmak için kullanılmıştır [33]. Benzer şekilde, NMDA reseptörleri de bilişsel işlevlerde kritik bir rol oynar, çünkü aktivasyonları, nöronlar arasındaki sinyal iletimini güçlendirmek için uzun vadeli güçlenme (LTP) ile ilişkilidir. Bu nedenle, glutamat reseptör sistemi yoluyla hayvan modellerinde bilişsel bozulmayı uyarmak için birçok araştırmacı MK-801, ketamin ve fensiklidin (PCP)[34] gibi NMDA reseptör antagonistlerinin kullanımını tercih etmiştir.

Hayvan modellerinde bilişsel işlev bozukluğunun araştırılmasında nörolojik toksikoloji başarıyla uygulanmıştır. Hayvan modellerinde nörotoksisite, bilişsel kusurlar maymun ve kemirgen modellerinde iyi modellendiğinden, kurşun, cıva ve poliklorlu bifeniller (PCB'ler) gibi nörotoksik maddeler kullanılarak elde edilir [30]. Özellikle kurşunun oksidatif stresi indüklediği birçok çalışmada rapor edilmiştir. Reaktif oksijen türlerine (ROS) karşı hassasiyeti artırarak ve katalaz (CAT) ve süperoksit dismutaz (SOD) gibi antioksidanları azaltarak oksidatif stresi indükler. ROS çoğunlukla protein kinaz C(PKC) ve kurşun maruziyeti ile indüklenebilen nükleer faktörle aktive olan B hücreleri (NF-kB) tarafından üretilir. Kurşun ayrıca kalsiyum iyonlarını taklit ederek ve voltaj kapılı kalsiyum iyon kanallarına bağlanarak nöronal hücre apoptozisine neden olabilir, böylece hipokampusta apoptoz ve otofajiye neden olabilen nörotransmitter dengesini etkiler. Son olarak kurşun, NF-kB'yi aktive ederek nöroinflamatuar reaksiyonları da indükleyebilir [24].

Streptozotosin (STZ), Alzheimer hastalığının (AD) hayvan modellerinde diyabetin indüklenmesinde yaygın olarak kullanılmaktadır. STZ'nin intraserebroventriküler enjeksiyonu, tau proteininin hiperfosforilasyonunu ve MI'a yol açabilen -amiloid birikimini indükler [13]. STZ ayrıca hayvan modellerinde hiperglisemi ve hipoinsülinemiye neden olarak MI'yı uyarmak için diyabetik bir durumu indüklemek için kullanılır. Tutarlı bir şekilde yüksek kan şekeri, inflamasyonu ve oksidatif stresi indükler, ayrıca IL-6, IL-1 ve TNF- gibi proinflamatuar sitokinlerin salınımını aktive eden birden fazla aşağı akış kinazı aktive ederek nöronlara daha fazla zarar verir. (Şekil 4). STZ, hayvan modellerinde önemli bir hiperglisemi semptomu ile uyumlu olarak önemli kilo kaybına neden olabilse de, antihiperglisemikler ve insülin sensitizörleri ile tedavi, bilişsel eksiklikleri iyileştirebilir [35].

Genetiği değiştirilmiş hayvan modelleri, Alzheimer hastalığı (AH), -amiloid birikimi, amiloid öncü proteini (APP) ve kolinerjik reseptör nakavtını içeren belirli kusurları taklit edebildiklerinden, yeni ilaç geliştirme için kullanılmak üzere bilişsel bozulma çalışmalarında giderek daha fazla kullanılmaktadır. 30]. Öte yandan, belleğe (1)Morris su labirenti (MWM), (2) pasif kaçınma testi (PAT), (3) yeni nesne tanıma (NOR), (4) nesne konumu tanıma dahil olmak üzere farklı deneysel prosedürler kullanılarak erişilir. (OLR), (5)yeni nesne ayrımcılığı (NOD), (6) yükseltilmiş artı labirent (EPM), (7) gecikmeli uzamsal değişim (DSA), (8) düşük tepki oranlarının (DRL) farklı pekiştirilmesi, (9 )Radyal kollu labirent (RAM) görevi ve (10)Y-labirent. Bu çalışmalar arasında MWM, NOR ve OLR, bellek testi için en sık kullanılan üç yöntemdir.

2.5.1.Morris Su Labirenti (MWM)

Morris su labirenti (MWM), çapı 100-160 cm ve yüksekliği 38-80 cm arasında değişen, farklı çap ve yüksekliklere sahip dairesel, su içeren çelik bir havuzdur. Havuz dört benzer çeyreğe bölünmüştür (KD, GD, KB ve GB olarak işaretlenmiştir) ve belirtilen kadranlardan birinin ortasında bir platform su altına batırılacaktır [19,22]. Platform, test oturumu boyunca aynı yerde tutulur.

Hayvanlar platformun yerini belirlemek için birkaç gün eğitilir Eğitim sırasında, kadranlara dönük olarak farklı kadranlardan serbest bırakılırlar ve 60,90 veya 120 s boyunca batık platforma doğru yüzerler. Hayvanlar verilen süre içinde platformu bulamazlarsa, kendilerini tanıdık hissettirmek için 10 veya 30 saniye daha platforma yerleştirilecektir. Eğitim aşaması, platformun yerini gizlemek için havuzun içine zararsız bir opak mürekkebin konulacağı gerçek denemeden birkaç gün önce devam edecek [22]. Hayvanlara, batık gizli platformun yerini belirlemeleri için belirli bir süre verilecektir. Uzun süreli uzaysal belleği değerlendirmek için geçen süre kaydedilecektir. Hafızada tutmayı değerlendirmek için başka bir değerlendirme de yapılabilir; deneme aşamasında platformun kaldırılacağı ve hedef platformun önceki konumundan geçen hayvan sayısının bir video kamera kullanılarak kaydedileceği [24].

2.5.2.Pasif Kaçınma Görevi (PAT)

Pasif kaçınma görevi (PAT), küçük bir kapıyla birbirine bağlanan aydınlık ve karanlık bölmelere bölünmüş bir aparatın kullanımını içerir. İklimlendirme aşaması sırasında, hayvanlar kendilerini yeni ortama alıştırmak için 15 dakika boyunca aparatın içine yerleştirilir. Eğitim denemesi sırasında hayvanlar karanlık bir bölmeye konulacak ve ayaklarına küçük bir elektrik şoku (3s için 39 V veya 1 sn için 1 mA) verilecektir. Eğitim denemesinden 24 saat sonra, her bir hayvanın aydınlatılmış bölmeye yerleştirileceği asıl test gerçekleştirilecektir. Karanlık bölmeye girmeden önceki gecikme süresi, şok aldıklarında karanlık bölmeden kaçınmada elektrik şokunun hayvan alıkoyma hafızasını değerlendirmek için maksimum 300 s'ye kadar kaydedilecektir [19,27].

2.5.3. Yeni Nesne Tanıma (NOR)

Hayvanın tanıma hafızasını değerlendirmek için yeni nesne tanıma testi (NOR) gerçekleştirilir. Test, hayvanın davranışını kaydetmek için odanın üzerine kurulmuş bir video kamera ile siyaha boyanmış dikdörtgen bir kutuda (40 cm × 50 cm × 50 cm) gerçekleştirilir. Alışma aşamasında hayvanlar, ardı ardına üç gün boyunca en az 10 dakika boyunca herhangi bir nesne olmaksızın haznenin içine yerleştirilir. Deneme aşamasında, hayvanların iki özdeş nesne (tipik olarak plastik toplar) içeren kutunun içinde 5 dakika boyunca dolaşmasına izin verilecektir. 30 dakika sonra, nesnelerden birinin farklı renkteki başka bir nesneyle değiştirileceği test denemesi gerçekleştirilecektir. Nesnenin koklama veya dokunma hareketine bağlı olarak hayvanların keşif davranışları gözlemlenecek, tanıma hafızasını değerlendirmek için her bir nesneyle temas süresi kaydedilecektir [19,20].

2.5.4.Nesne Konumu Tanıma (OLR)

Nesne konumu tanıma testi, NOR testine benzer şekilde tanıma belleğini değerlendirmek için kullanılır. Cihaz, içinde koyu renkli bir oda bulunan dikdörtgen bir kutu (40×50×50 cm) ve hayvanların keşif davranışlarını gözlemlemek için odanın üstüne monte edilmiş bir video kameradır. Kullanılan nesneler, boyut ve şekil olarak aynı, ancak renk olarak farklı iki küçük plastik şişedir. Yöntem üç aşamaya ayrılmıştır: alışma, alışma ve test aşamaları [20].

Alışma aşaması: Hayvanlar, arka arkaya üç gün boyunca 10 dakika boyunca hiçbir nesne olmadan oda içinde serbestçe dolaşmalarına izin verilir.

Alıştırma aşaması: Dördüncü gün, hayvanlar 5 dakika boyunca iki özdeş nesne içeren bölmeye yerleştirilir.

Test aşaması: Alışma aşaması sona erdikten 30 dakika sonra, hayvanlar tekrar bölmenin içine yerleştirilecektir, ancak orijinal nesnelerden biri farklı bir nesneyle değiştirilecek ve kalan orijinal nesne hala oda içinde tutulacaktır.

Olası koku işaretlerini önlemek için, her deneme seansının sonunda nesneler ve odanın zemini yüzde 70 etanol kullanılarak temizlenir. Hayvanların test aşamasındaki keşif davranışları, hayvanların burunlarını kullanan nesnenin koklama veya dokunma eylemine dayalı olarak gözlemlenir [22].

2.5.5. Yeni Nesne Ayrımcılığı (NOD)

Yeni nesne ayırt etme testi, hayvanların alışma aşamasında 5 dakika boyunca iki nesneyi keşfetmesine olanak tanır. 4 saat sonra nesnelerden biri yenisiyle değiştirilecektir. Daha sonra hayvanların çiğneme, yalama, koklama veya burunlarıyla nesneye dokunma gibi keşif davranışları kaydedilecektir [23].

2.5.6. Yükseltilmiş Artı Labirent (EPM)

Yükseltilmiş artı labirent, ikisi açık kol ve diğer ikisi kapalı kol olan dört uzun raydan (kollardan) oluşan yükseltilmiş artı şekilli bir aparatın kullanımını içerir. Açık iki kol, ortada bir platform ile kapalı kollara dik olarak birbirine karşı yerleştirilmiştir [36]. Eğitim aşaması sırasında, hayvanlar üç gün boyunca açık kolun ucuna, merkezi platformdan uzağa bakacak şekilde yerleştirilir. Transfer gecikme süresi (TLT), 90'lar içinde açık koldaki başlangıç ​​noktasından kapalı kola hayvanların girmesi için geçen süre olarak kaydedilir. Dördüncü gün, test denemesi sırasında, hafıza indeksi olan global serebral iskemi-reperfüzyon (IR) beyin hasarından 24 saat sonra TLT kaydedilir [21].

2.5.7.Gecikmeli Mekânsal Değişim (DSA)/Düşük Tepki Verme Oranlarının Farklılaşması (DRL)

Gecikmeli uzamsal değişim (DSA) ve düşük tepki oranlarının (DRL) diferansiyel takviyesi, doğrudan her bir kolun üzerinde bir çift işaret ışığı ile pelet dağıtıcılar arasında iki geri çekilebilir kol içeren bir Skinner kutusu olan benzer bir aparatın kullanımını içerir. Eğitim aşaması sırasında, hayvanlar, bir otomatik şekillendirme programına dayalı olarak, güçlendirici olarak gıda peletleri için işaret ışığına dayalı olarak kola basmak üzere eğitilir. Hayvanların kaldıraca doğru bir yan önyargı geliştirmesini önlemek için, takviye ile ilişkili kaldıraç, verilen her beş takviyenin arasına serpiştirilir. DSA görevi, kola basmada 0,3,6,9 veya 18 saniyelik bir gecikme içeriyordu. Yavaş yanıt verme kriterleri altı ana eğitim oturumuna bölünmüştür; ilk iki oturum, 200 deneme veya 90 dakikalık sabit oranlı 1 program gerektirir. Üçüncü ve dördüncü oturumlar, bir DRL-5 programından oluşurken, pekiştirme, yanıtlar arasındaki 5 saniyelik gecikmeye bağlıdır. Aynısı, yanıtlar arasında 10 saniyelik bir gecikme gerektiren DRL-10 programıyla son iki ana oturuma uygulanır. Hayvanlar, en az 30 seans [26] için DRL-15 programında test edilir.

2.5.8.RAM Görevi

Radyal kollu labirent (RAM) görevi, uzaysal belleği değerlendirmek için kullanılır ve her bir kol sekizgen merkezi platformdan uzatılmış, yükseltilmiş sekiz kollu bir radyal labirentin kullanımını içerir. Her kolun sonunda, deneycinin takviye için yiyecek bırakması için bir yiyecek kabı mevcuttur. Bununla birlikte, deneme aşamasında, kolların sadece bir kısmı, gıda kabında gıda peletlerini içerecektir.

Eğitim aşamasında, hayvanlar merkezi platforma yerleştirilecek ve yiyecek peletleri elde etmek için labirenti özgürce keşfetmelerine izin verilecek. Bu süreçte hayvanlar aynı denemede yiyecek yokluğunda ziyaret ettikleri kollara tekrar girmemeyi öğreneceklerdir. Test denemesinde, hayvanlara labirenti keşfetmeleri ve bazı kollara yerleştirilen tüm peletleri tüketmeleri için 10 dakika verilecektir. Her bir hayvanın performansını değerlendirmek için doğru ve yanlış seçimler kullanılır. Hayvanlar ziyaret ettikleri yiyecekler olmadan tekrar kollara girerlerse hata olarak kabul edilir [27].

2.5.9.Y-Labirent

Y-labirent testi, Bagheri ve ark.[27] tarafından kullanılmaktadır. ve Shahmohammadi ve diğerleri.[23] hayvanların mekansal tanıma hafızasını değerlendirmek. Kullanılan aparat, her bir kolun diğerinden 120 derece olduğu ve büyük "Y" şeklini andıran üç kollu bir labirenttir. Kolların her biri birbirine bağlanan bir parça ile bağlanır. Protokol, hayvanların labirentin doğasına karşı saf olduğu spontane değişimi kullanarak uzamsal öğrenmeyi değerlendirmek için yürütülmüştür. Hayvanlar bir kolunun ucuna yerleştirilir ve 8 dakikalık bir seansta serbestçe hareket etmelerine izin verilir. Her biri birbirini tekrar etmeyen kollara sahip olan örtüşen üçlü setlerde üç kolun her birine başarılı girişler olarak dönüşümler gözlenir. Değişim yüzdesi daha sonra gerçek ile olası değişimlerin oranı× 100 olarak hesaplanır.

3. Genistein'ın Etkinliği

3.1.Hipooksia

Rumman ve ark. [19] genisteinin hipoksi ile indüklenen MI üzerindeki etkisi, erkek İsviçre albino fareleri kullanılarak araştırıldı. Fareler, 28 gün boyunca sürekli olarak 10,20 veya 30 mg/kg/gün genistein po ile tedavi edilir. Amnezi için bir fare modeli, fareleri genistein tedavisine benzer bir süre boyunca günlük olarak düşük bir oksijen seviyesine (yüzde 10) maruz bırakarak hipoksiye dayalı olarak geliştirildi. Morris su labirenti (MWM), pasif kaçınma testi (PAT) ve yeni nesne tanıma (NOR), genisteinin hafızasını kaybetmiş farelerde hafıza kusurlarını iyileştirmedeki etkilerini araştırmak için kullanıldı.

MWM'ye dayalı sonuçlar, 20 ve 30 mg/kg genistein dozları ile tedavi edilen farelerin, platform kadranda düşük gecikme ve geçiş sayısında artış sergilediğini gösterdi. PAT'ye gelince, 20 ve 30 mg/kg genistein gruplarında gecikmede bir artış vardı. Son olarak, NOR'da, 20 ve 30 mg/kg genistein alan her iki fare grubu, tanıdık nesneye kıyasla yeni nesnenin keşif davranışında bir artış gösterdi. Genel olarak, bulgular genistein ile tedavinin hipoksiye bağlı MI'da hafıza kusurlarını azaltmaya yardımcı olabileceğini öne sürdü.

3.2.Kronik Uyku Amortismanı (CSD)

Lu ve ark. [20] genisteinin kronik uyku yoksunluğu (CSD) kaynaklı MI üzerindeki etkileri, erkek Kanser Araştırma Enstitüsü (ICR) farelerinde araştırıldı. Fareler, 23 gün boyunca günde bir kez genistein (10,20 veya 40 mg/kg/gün) ile tedavi edildi. CSD'nin indüksiyonu, toplam 14 gün boyunca günde 24 saat 2 dakikalık bir duraklamanın ardından 1 dakika dönen paslanmaz çelik bir rotatordan oluşan otomatik bir uyku kesme aparatı (SIA) kullanılarak gerçekleştirildi. Morris su labirenti (MWM), nesne konumu tanıma (OLR) ve yeni nesne tanıma (NOR), CSD ile indüklenen farelerin uzamsal ve tanıma hafızasını değerlendirmek için kullanıldı.

MWM için, genistein ile tedavi edilen grup, özellikle 40 mg/kg grubu, batık platformu bulmada önemli ölçüde azalmış bir gecikmeye sahipti. Ayrıca platformun çıkarıldığı prob testinde, genistein 20 ve 40 mg/kg arasında hedef kadranda geçiş sayılarında önemli bir artış oldu. Genistein ile tedavi edilen grup (20 ve 40 mg/kg), OLR'deki CSD grubu ile karşılaştırıldığında belirgin bir şekilde artan bir ayrım indeksi (DI) göstermiştir. NOR görevinde, özellikle genistein 20 ve 40 mg/kg tedavi grupları Genel olarak genistein tedavisi (özellikle 20 ve 40 mg/kg), CSD'nin neden olduğu hafıza kusurlarını hafifletmede etkilidir.

3.3.Streptozotosin (STZ)

Genisteinin streptozotosin (STZ) ile indüklenen bilişsel işlev bozukluğuna karşı nöroprotektif etkisini araştırmak için, erkek Wistar sıçanlarına, 48 saat arayla iki enjeksiyon üzerinden kümülatif 3 mg/kg'lık bir intraserebroventriküler (icv) enjeksiyon yoluyla streptozotosin (STZ) uygulandı [13 ]. Sıçanlar 90 gün boyunca 150 mg/kg/gün po genistein ile tedavi edildi. Genistein ile tedavi edilen grup, Morris su labirenti (MWM) test denemesi sırasında platforma doğru yüzmek için daha düşük gecikme gösterdi. Bununla birlikte, prob testinde, genistein ile tedavi edilen sıçanların hedef kadranda geçirdiği süre, diğer gruplara göre önemli ölçüde daha uzundu; bu, genistein tedavisinin STZ ile indüklenen MI'yı iyileştirmede umut verici sonuçlar verdiğini gösteriyor.

3.4.Skopolamin

Lu ve diğerleri[22] erkek Kanser Araştırma Enstitüsü farelerinde genisteinin skopolamin kaynaklı MI üzerindeki etkilerini araştırdı. Farelere ardışık yedi gün boyunca skopolamin 0.75 mg/kg/gün intraperitoneal (ip) olarak uygulandı. Farelere 24 gün boyunca günlük olarak genistein (10, 20 veya 40 mg/kg/gün, po) uygulandı. İlgili davranış testleri, uzamsal belleğin değerlendirilmesi için itiraz edilen konum tanıma (OLR) ve Morris su labirenti (MWM) idi. OLR görevinde, genistein ile tedavi edilen grup (40 mg/kg) ayrım indeksinde (DI) önemli bir artış gösterdi. MWM'nin hem deneme hem de sonda testlerinde, genistein ile tedavi edilen grup, batık platformu bulmak için daha düşük bir kaçış gecikmesi gösterdi ve hedef kadranda daha yüksek geçiş sayıları gösterdi, bu da genistein tedavisinin bilişsel performansı iyileştirebileceğini gösteriyor.

3.5. Lipopolisakkaritler (LPS)

Shahmohammadi et al. [23], genistein tedavisinin, erkek albino Wistar sıçanlarında lipopolisakkarit (LPS) ile indüklenen nöro-enflamasyon üzerindeki etkisi üzerine bir çalışma yürütmüştür. 500 ug/kg/gün LPS(ip) uygulanarak nöro-enflamasyon indüklendi. Sonraki genistein tedavisi, 10,50 veya 100 mg/kg/gün'de yedi gün boyunca gerçekleştirildi. Uzamsal ve tanıma bellekleri, Y-labirent, yeni nesne ayırt etme (NOD) ve pasif kaçınma görevi (PAT) kullanılarak değerlendirildi. Her üç testte de genistein (50 ve 100 mg/kg), ilgili parametrelerde önemli gelişmeler sağladı ve bu da daha fazla destek sağladı. genistein tedavisinin bilişsel işlev bozukluğunu hafifletebileceğini.

3.6. Streptozotosin (STZ)-indüklenen Diyabet

Rajput ve arkadaşları tarafından bir in vivo çalışma yürütülmüştür. [21], erkek albino Swiss farelerde genisteinin SIZ kaynaklı diyabet üzerindeki nöroprotektif rolünü araştırmak için. Farelerde diyabet, bir filiz yoluyla 200 mg/kg STZ verilmesiyle indüklendi. Diyabet farelerde hiperglisemiye neden olmak üzere uyarıldı ve bu da iskemi-reperfüzyon (IR) kaynaklı nöronal hasara neden olabilir. Ardından, 14 gün boyunca diyabetik farelere (2.5,5 veya 10 mg/kg/gün) ip yoluyla genistein tedavisi uygulandı. Uzamsal ve alıkoyma anıları daha sonra IR'li diyabetik farelerde genistein (5 ve 10 mg/kg) tedavi grupları için transfer gecikme süresinde bir düşüşle sonuçlanan yükseltilmiş bir artı labirent (EPM) kullanılarak değerlendirildi. Genel olarak, bulgular, genistein tedavisi ile bilişsel eksikliklerin azaltılabileceğini kuvvetle önermektedir.

3.7.Kurşun

Su et al. [24], genistein tedavisinin kurşun düzeyi üzerindeki koruyucu etkisini toksik madde olarak değerlendirmiştir. Erkek Sprague-Dawley sıçanlarına 56 gün boyunca hem kurşun hem de genistein 1 mg/kg/gün oral yoldan (po) uygulandı. Sıçanların bilişsel performansını ve kurşun etkisini değerlendirmek için bir Morris su labirenti (MWM) kullanıldı. Genistein tedavisi platforma olan gecikmeyi önemli ölçüde azalttı ve hem deneme hem de prob testlerinde hedef kadranda daha yüksek geçiş sayılarına neden oldu, bu nedenle genistein tedavisinin MI'nın etkisini azaltabileceğini düşündürdü.

3.8. Kainik Asit (KA)-İndüklenmiş Nöbet

Khodamoradi ve ark. [25], genistein tedavisinin dişi Wistar sıçanlarında kainik asit (KA) kaynaklı nöbet üzerindeki olası etkisi için araştırılmıştır. KA'nın neden olduğu nöbet, MI ve nöronal yaralanmalarla sonuçlandı. KA, intraserebroventriküler（icv）route（0.5 ug/μL） yoluyla sıçanlara uygulandı. Daha sonra, KA'nın sıçanlara verilmesi, uzamsal belleği değerlendirmek için ip A Morris su labirenti (MWM) aracılığıyla 0.5 ve 5 mg/kg/gün genistein tedavisinden dört gün sonra gerçekleştirildi. Genel olarak, sonuçlar genisteinin KA ile indüklenen nöbet farelerine yönelik olumlu etkileri olduğunu göstermektedir.

3.9.Yaşlanma

Neese et al. [26] yaşlanmaya bağlı bilişsel eksiklikleri araştırdı ve genisteinin eksiklikleri hafifletmedeki potansiyel koruyucu etkilerini inceledi. Yaşlanmanın bilişsel performans üzerindeki etkilerini simüle etmek için 14-aylık dişi Long-Evans farelerini kullandılar. Çalışma belleğini değerlendirmek için hem kaldıraç presi hem de Skinner kutusu gecikmeli uzamsal değişim (DSA) ve düşük yanıt oranlarının (DRL) diferansiyel takviyesi kullanıldı. Bununla birlikte, sonuçlar genisteinin yaşlı bir sıçan MI modelinde bilişsel eksiklikleri iyileştirmede etkili olmadığını göstermiştir.

3.10.-. amiloid

Bagheri et al. [27] genistein tedavisinin -amiloid kaynaklı MI üzerindeki nöroprotektif etkisini inceledi. -amiloid 1-40, erkek Wistar sıçanlarına icv （4 μL） enjekte edildi, ardından oral genistein (10 mg/kg/gün) verildi. Y-labirent, pasif kaçınma testi (PAT) ve radyal kol labirent (RAM) testleri genistein ile tedavi edilen sıçanların hem Y-labirentinde hem de PAT'de önemli parametre artışları gösterdiği bilişsel performansı değerlendirmek için kullanıldı. doğru kol seçimlerinde önemli artış veya yanlış kol seçimlerinde azalma. Genel olarak, bulgular genistein ile tedavinin -amiloid kaynaklı MI'yı önleyebileceğini öne sürdü.

Daha fazla bilgi için bağlantıya tıklayın:https://www.xjcistanche.com/news/part2-genistein-a-potential-natural-lead-mol-55084044.html