Dendrobium Loddigesii Rolfe'den Antioksidatif, Tirozinaz İnhibitör ve Yaşlanma Karşıtı Aktivitelere Sahip Fenolik Bileşenler

Apr 07, 2023

Soyut

Dendrobium loddigesii'nin toz haline getirilmiş gövdelerinin sulu etanol özleri, üç -7-O-etil-9-O-(4-hidroksifenil)propionil-diasilgliserol (1), (R){{ 7}},5,4ʹ-trihidroksi-3,3ʹ, -trimetoksibibenzil (2) ve (S)-5,5′,7-trihidroksi-3′,4′ -dimetoksifavanon (3), bilinen on bir analog ile birlikte. Yapıları, kapsamlı spektroskopik analizlerle belirlendi. Doğal antioksidanları, beyazlatıcı ve yaşlanma karşıtı maddeleri belirlemek için, bu fenoliklerin 1,2-difenil-2-pikrilhidrazil (DPPH) radikalini temizleme, tirozinaz üretimini engelleme yetenekleri ve insan dermal fibroblastlar-yetişkin (HDFa) tahlili ile kollajen üretimini uyarma yetenekleri. Bileşik 1, 4–8, 13 ve 14'ün önemli DPPH radikali süpürme aktiviteleri sergilediği, bileşik 10'un tirozinaz inhibe edici aktivite (IC50 37.904 ug/mL) gösterdiği ve bileşik 9'un önemli kollajen üretimi gösterdiği bulundu. 3,182 ug/mL'lik bir EC50 değeri. Bu sonuçlar, D. loddigesii'den elde edilen fenolik bileşenlerin aday antioksidanlar, cilt beyazlatıcı ve/veya yaşlanma karşıtı maddeler olabileceğini düşündürmektedir.

İlgili araştırmalara göre,cistancheyaygınbitki"ömrü uzatan mucizevi bitki" olarak bilinir. Ana bileşenikistanositgibi çeşitli etkilere sahiptir.antioksidan, antienflamatuvar, Vebağışıklık fonksiyonu teşviki. Cistanche ve arasındaki mekanizmacilt beyazlatmakantioksidan etkisinde yatmaktadır.cistanche glikozitler. İnsan derisindeki melanin oksidasyonu ile üretilir.tirozintirozinaz tarafından katalize edilir ve oksidasyon reaksiyonu oksijenin katılımını gerektirir, bu nedenle vücuttaki oksijensiz radikaller melanin üretimini etkileyen önemli bir faktör haline gelir. Cistanche, bir antioksidan olan ve vücuttaki serbest radikallerin oluşumunu azaltabilen cistanoside içerir, böylecemelanin üretimini inhibe eder.

cistanche supplement review

Cistanche Tubulosa Eki'ne tıklayın

Daha fazla bilgi için:

david.deng@wecistanche.com WhatsApp:86 13632399501

Grafik Soyut

cistanche nedir

anahtar kelimelerDendrobium loddigesii · Fenolik bileşenler · Antioksidatif · Tirozinaz önleyici · Yaşlanma karşıtı

1. Giriş

Dendrobium (Orchidaceae) cinsi dünya çapında yaklaşık 1500 tür içerir ve bunların yaklaşık 80 türü Çin'de yetişir [1]. Bu cinsteki birkaç bitkinin gövdesi "Shi-Hu" olarak bilinir ve binlerce yıldır hem geleneksel Çin tıbbı hem de halk ilaçları olarak kronik atrofik gastrit, cilt yaşlanması, ateş, kardiyovasküler hastalık ve vücut sıvılarının üretimini teşvik etmek için bir tonik [2]. Bu cinsle ilgili önceki çalışmalar, bazıları antiinflamatuar [6], antimikrobiyal [2], antioksidan dahil olmak üzere çeşitli biyoaktivitelere sahip bir dizi polisakkarit, fenolik bileşik, alkaloit ve seskiterpenoid [1, 3-5] izolasyonuna yol açmıştır. [7], antitümör [8], antiplatelet agregasyon [9], immünomodülatör [10] ve influenza A aktivitelerine karşı [11].

Çok yıllık bir epifitik bitki olan Dendrobium loddigesii, Guangxi, Guizhou ve Yunnan Eyaletleri gibi Çin'in güneybatı bölgesinde yaygın olarak dağıtılmaktadır [12]. Kökü halk tıbbında gastrit, ateş ve baş dönmesini tedavi etmek için uygulanmıştır [13]. Bu cinsten [1, 5, 14-17] yapısal olarak çeşitli ve biyolojik olarak aktif doğal ürünler aramaya devam ederken, bu bitki türünden elde edilen farmakolojik olarak aktif bileşenlerin derinlemesine bir araştırması burada gerçekleştirildi. Sonuç olarak, üç yeni fenolik bileşik (1-3) ve bilinen on bir tanesi (Şekil 1), D. loddigesii'nin sapının yüzde 80 etanolik ekstraktından izole edildi. Bu bileşiklerin izolasyonu, yapı aydınlatması ve biyolojik değerlendirmesi burada sunulmaktadır.

does cistanche work

2 Sonuçlar ve Tartışma

Beyaz bir katı olarak elde edilen bileşik 1, m/z 389.1602 [M−H]−'de (-)-HRESIMS iyonu tarafından belirlendiği üzere C21H26O7 moleküler formülünü verdi (C21H25O7 için hesaplanan, 389.16{{ 28}}6) dokuz doymamışlık derecesi ile. 1'in 1H NMR spektrumu, δH 6,85 (1H, d, J=1,7 Hz), 6,75 (1H, d, J=8,0 Hz), 6,68 (1H)'de yedi aromatik proton içerir , dd, J = 8,0, 1,7 Hz), 7,01 (2H, d, J = 8,5 Hz) ve 6,68 (2H, d, J = 8,5 Hz), 1,3,4-üç ikameli benzen halkasının ve 1,4-iki ikameli benzen halkasının varlığını düşündürür. 13C NMR spektrumu, iki metil (bir metoksi), dört alifatik metilen, dokuz metin (iki sp3, yedi sp2) ve altı kuaterner karbon (bir karbonil, üç oksijenli dahil beş olefinik) dahil olmak üzere 21 karbon rezonansı sergiledi. H-7/C-1 (δC 131.6), C-2 (δC 111.7), C-6 (δC 121.4), C'nin HMBC korelasyonları (Şekil 2) -8 (δC 74.2) ve C-10 (δC 65.3); H-9/C-7 (δC 83.8) ve C-8 (δC 74.2); H-10/C-11 (δC 15.6); 3-OMe (δH 3.81)/C-3 (δC 149.1), H-7/H-8/H2-9 ve H{{ 1 H–1 H COSY spektrumundan (Şekil 2) 87}}/H3-11, 7-O-etilguayasilgliserolün varlığını gösterdi [18]. J7,8'in şırınga-gliseroller ve diasilgliserol türevleri durumunda eritro izomer için yaklaşık 5 Hz ve üç izomer için 7 Hz olduğu bildirilmiştir. Böylece bileşik 1, J7,8 (6.5 Hz) [18] ile üç izomer olarak kabul edildi. H-7ʹ (δH 2,79, t, J = 7,5 Hz)/C-8ʹ (δC 37,1), C-1ʹ (δC 132,7), C-2ʹ, 6ʹ (δC 130,2) ve C-9ʹ (δC) HMBC korelasyonları 174.6), H-8ʹ (δH 2,59, t, J = 7,5 Hz)/C-7ʹ (δC 31.0), C-1ʹ ve C-9ʹ, H-8ʹ/H-7ʹ'nin COSY çapraz tepe noktaları belirtilmiştir p-hidroksikumarik asidin varlığı [19]. Yukarıda açıklanan kanıtlara dayanarak, 1'in bir ester bağı yoluyla bir 7-O-etilguayasilgliserol parçasına ve bir p-hidroksi-kumarik aside sahip olduğu önerildi. H-9 ile C-9ʹ arasındaki HMBC korelasyonu, ester bağlantısının C-9 ile C-9ʹ arasında olduğunu öne sürdü. Böylece 1'in yapısı şekildeki gibi belirlendi.

(R){0},5,4'-Trihidroksi-3,3', -trimetoksibibenzil (2) beyaz bir katı olarak elde edildi. 2 HRESIMS spektrumu, 8 derece doymamışlık ile m/z 319.1180 [M−H]− (C17H19O6 için hesaplanan, 319.1187) değerinde yarı moleküler bir iyon zirvesi sergiledi. 2'nin 1H NMR spektrumu, 8H 3.75 (3H, s), 3.70 (3H, s) ve 3.17'de (3H, s) üç metoksil grubu gösterdi; δH 4.13'te bir oksijenli metin protonu (1H, t, J=6.8 Hz, H-); δH 2.73 (1H, dd, J=13.5, 6.9 Hz) ve 2.96'da (1H, dd, J=13.5, 6.9 Hz) iki metilen sinyali; ve δH 6,28 (1H, d, J=1,8 Hz) ve 6,34'te (1H, d, J{{ 60},8 Hz) ve δH 6,49'da (1H, d, J=2,0 Hz), 6,62'de (1H, 1,3,{64}}üç ikameli bir aromatik halka) d, J{73}},0 Hz) ve 6,52 (1H, dd, J = 8,0, 2,0 Hz). 2'nin 13CNMR ve DEPT spektrumları, üç oksimetilen, bir metilen, bir oksijenli metin ve 12 aromatik karbon (beş oksijenli) gösterdi. NMR verilerinin (Tablo 1) dendrokandin C [20] ile karşılaştırılması, 3ʹ-OMe ve H-5ʹ ila HMBC korelasyonları tarafından C-3ʹ'de bulunan bir metoksil grubunun daha varlığı dışında büyük benzerlikler gösterdi. C-3' (δC 148.4). Ek olarak, 3-OMe ve H-2/C-3'nin (δC 149.5) çoklu HMBC etkileşimleri (Şekil 2); -OMe/C- (δC 86.9), sırasıyla C-3 ve C-'deki diğer metoksil gruplarını önerdi. C-'deki mutlak konfigürasyon, aphyllous D [훼] 20 D –20.3, MeOH)'ye benzer negatif optik rotasyona ([훼] 26 D –12.46) dayalı olarak R olarak belirlendi [15]. Buna göre 2'nin yapısı gösterildiği gibi belirlenmiştir.

desert cistanche benefits

(S){0},7,5'-Trihidroksi-3',4'-dimetoksifavanon (3), sarı şekilsiz toz halinde elde edildi ve moleküler C17H16O7 (1{{69}) } hidrojen eksikliği indeksleri) (-)-HRESIMS iyonuna göre m/z 331.0819 [M – H]- (hesaplanan 331.0823). 206 ve 294 nm'deki UV absorpsiyon maksimumları, bir flavononun varlığını gösterdi [21]. 1H NMR spektrumu (Tablo 1), aromatik olmayan bölgede δH 5.29 (1H, dd, J=12.7, 3.1, H-2), 3.04 (1H, dd, J=17.1, 12.7, H-3ax) ve 2.71 (1H, dd, J=17.1, 3.1, H-3 eq), dört aromatik protonlar δH 5,87 (1H, d, J=2.2, H{52}}), 5.91 (1H, d, J=2.2, H-8), 6.62 (1H, d, J=2.0, H-2ʹ) ve 6.61 (1H, d, J=2.0, H-6ʹ), iki metoksil grubu δH 3.83 (3H, s) ve 3.77 (3H, s). 13C NMR ve DEPT spektrumları (Tablo 1), iki metoksi, bir metilen, bir metin, bir karbonil karbon ve 12 aromatik karbon dahil olmak üzere 17 karbon için rezonanslar içerir. NMR verilerinin kapsamlı analizi, düzlemsel yapısının dihidrotrisin [22] ile yakından ilişkili olduğunu göstermiştir, ancak dihidrotrisin içindeki OH-4' ve OCH3-5' rezonansları 3'te yer değiştirmiştir. Bu, HMBC çapraz- tepe noktaları (Şekil 2) H-2ʹ, H-6ʹ ve OCH3-4ʹ ile C-4ʹ (δC 137.7), H-6ʹ ile C-5ʹ (δC 151.8) arasında. C-2'deki mutlak konfigürasyonun, optik dönüşünde [23] negatif bir özgül dönüş değeri (– 46.64, MeOH) temelinde S-formunda olduğu varsayılmıştır. Bu nedenle, bileşik 3'ün yapısı böylece açık bir şekilde gösterildiği gibi atanmıştır.

Trepidasyon 4 [24], meskalin 5 [25], 4,5,4'-trihidroksi- 3,3'-dimetoksibibenzil 6 [26], 4',5- olarak bilinen on bir bileşik tanımlanmıştır. dihidroksi-3,3'- dimetoksibibenzil 7 [27], Tristin 8 [28], III 9'daki batatalar [27], 3,5,3'-hidroksibibenzil 10 [29], afillöz C 11 [15], dentiform A 12 [30], dihidrokoniferil dihidro-p-kumarat 13 [31], p-hidroksifenil trans-ferulat 14 [32] spektroskopik analiz ve spektral verilerinin literatürle karşılaştırılması.

cistanche and tongkat ali reddit

Fenolik bileşikler, insan diyetinin önemli bir parçasıdır ve güçlü zincir kırıcı etkilerinden dolayı güçlü antioksidanlar olarak bilinirler ve anti-oksidatif aktiviteye doğrudan katkıda bulunabilirler [33]. DPPH radikal temizleme testi, antioksidan aktiviteyi değerlendirmek için kullanılan en yaygın ve nispeten hızlı yöntemlerden biridir. DPPH radikaline bir hidrojen atomu bağışlayabilen ve daha sonra DPPH'nin indirgenmiş biçimine yol açabilen bileşikler, potansiyel antioksidan maddeler olarak kabul edilecektir. Tüm bileşikler, DPPH radikal yakalama aktiviteleri açısından değerlendirildi. Mevcut sonuçlar (Tablo 2), fenolik bileşiklerin çoğunluğunun (1, 4-8, 13 ve 14), 100 ug/mL'de yüzde 89.411 ila 94.278 arasında değişen süpürme kapasiteleriyle önemli aktiviteler gösterdiğini gösterdi.

Tirozinaz ise bakır içeren bir enzimdir ve melanositlerde melanin biyosentez yolunun kontrolünde kritik bir rol oynar [34]. Bu nedenle, tirozinaz inhibitörleri, hiperpigmentasyon ve gelişen cilt beyazlatma ajanları için kozmetik veya tıbbi ürünlerin önemli bileşenleri haline geldi. Bu çalışmada, tüm izolatlar tirozinaz inhibitör aktiviteleri açısından değerlendirilmiştir (Tablo 2). Pozitif kontrol olarak cilt beyazlatıcı olduğu iddia edilen kojik asit kullanıldı. 3,5,3'-hidroksibibenzil (10), 37.904 ug/mL IC50 değeri ile önemli bir inhibitör aktivite ortaya koydu. Aphyllals C (11) orta derecede inhibisyon gösterdi (IC50, 152.56 ug/mL). Kalan tüm bileşikler, 200 ug/mL'ye kadar olan konsantrasyonlarda inaktifti. Bu çalışmada, bileşikler 10 ve 11'in melanin biyosentezi ile ilişkili deri hastalıklarının tedavisi için potansiyel bir aday olabileceği sonucuna varılabilir.

cistanche gnc

Bu türün tıbbi olarak cilt yaşlanması için kullanıldığı düşünüldüğünde, kollajen cildin gücü ve elastikiyeti için kritik öneme sahiptir ve bozulması yaşlanmaya eşlik eden kırışıklıklara yol açar [35]. Dolayısıyla tüm bileşikler, HDFa'da kollajen üretimi üzerindeki etkileri açısından da kasıtlı olarak değerlendirildi. Sonuçlar (Tablo 2), bileşik 9'un HDFa kollajen üretim aktivitesini (EC50 3.182 ug/mL) önemli ölçüde uyardığını gösterdi. Bileşik 6 ve 7, 10 ug/mL'de sırasıyla yüzde 33.062 ve yüzde 29.157 kollajen üretimi ile daha zayıf aktiviteler gösterdi. Mevcut sonuçlar sadece D. loddigesii'nin etnofarmakolojik kullanımını desteklemekle kalmadı, aynı zamanda yanıklar ve ülserler gibi kollajen eksikliği ile ilişkili hastalıkların gelişmesi için güvenilir bir yapı şablonu sağladı.

3 Deneysel

3.1 Genel Deneysel Prosedürler

Optik döndürme, bir JASCO P-1020 dijital polarimetre (Horiba, Tokyo, Japonya) üzerinde elde edildi. UV spektrumları, bir Shimadzu UV-2401 PC spektrofotometresi (Shimadzu, Kyoto, Japonya) kullanılarak ölçüldü. IR spektrumları, KBr peletleri ile bir Bruker Tensor 27 kızılötesi spektrofotometre (Bruker Optics GmbH, Ettlingen, Almanya) üzerinde elde edildi. Kütle spektrumları, bir API QSTAR dövüş süresi spektrometresi (MDS Sciqaszex, Concord, Ontario, Kanada) ve LCMSIT-TOF (Shimadzu, Kyoto, Japonya) spektrometresi üzerinde gerçekleştirildi. NMR spektrumları, dahili standart olarak TMS (Bruker, Bremerhaven, Almanya) ile DRX-500 ve Av III-600 cihazlarına kaydedildi. Kimyasal kaymalar, solvent sinyaline referansla 8 (ppm) cinsinden verildi. Kolon kromatografisi, silika jel (200–300 ve 300–400 ağ gözü, Qingdao Marine Chemical Inc., Qingdao, Çin), Lichroprep RP-18 jel (40–63 μm, Merck, Darmstadt, Almanya), MCI üzerinde gerçekleştirildi. jel CHP-20P (75–150 μm, Mitsubishi Chemical Corp., Tokyo, Japonya), Sephadex LH-20 (20–150 μm, Amersham Biosciences, Uppsala, İsveç) ve YMC*GEL ODS -AHG (50 μm, YMC Co. Ltd. Japonya). Fraksiyonlar TLC ile izlendi ve noktalar UV ışığı ile görselleştirildi ve EtOH içinde yüzde 10 H2S04 püskürtüldü, ardından ısıtıldı. 1,1-difenil-2-pikrilhidrazil (DPPH), Trolox, mantar tirozinazı, L-Dopa ve Kojik asit Sigma'dan (ABD) satın alınmıştır; Dönüştürücü büyüme faktörü beta (TGF-), Peprotech'ten (ABD) elde edildi; Büyüme ortamı DMEM (yüksek glukoz w/L-glut), Hank'in dengeli tuz solüsyonu, fetal bovin serumu HyClone'dan (ABD) satın alınmıştır; Procollagen peptit ELISA kiti, TaKaRa'dan (Japonya) temin edildi. Diğer tüm kimyasallar ve çözücüler analitik saflıktaydı.

cistanche bienfaits

3.2 Bitki Materyali

D. loddigesii'nin gövdeleri Eylül 2014'te Çin Halk Cumhuriyeti, Yunnan Eyaleti, Wenshan Şehrinden toplandı ve Profesör Hong Yu (Yunnan Üniversitesi, Kunming, Çin Halk Cumhuriyeti) tarafından tanımlandı. Kupon örneği (No. 20.140.829), Çin Bilimler Akademisi, Kunming Botanik Enstitüsü, Batı Çin'deki Devlet Bitki Kaynakları ve Bitki Kaynakları Ana Laboratuvarı'nda saklandı.

3.3 Ekstraksiyon ve İzolasyon

D. loddigesii'nin kurutulmuş ve toz haline getirilmiş gövdeleri (10.2 kg), oda sıcaklığında yüzde 80 etanol ile üç kez özümlendi ve indirgenmiş basınç altında konsantre edildi. Daha sonra tortu, H20 içinde süspanse edildi ve bir petrol eteri/aseton gradyanı (15:1 ila {) ile yıkanan silis jel kolon kromatografisine tabi tutulan EtOAc fraksiyonunu (220 g) elde etmek için EtOAc ile paylaştırıldı. {110}}:1) 22 kesir elde etmek için (Fr.1–22). Fr.11 (6 g), CHCl3/MeOH (300:1) ile yıkanan silika jel CC'ye, ardından MCI kolonuna (MeOH/H2O gradyan, 60:40–95:5) ve silika jel CC'ye (CHCl3/) tabi tutuldu. MeOH, 200:1) 12 (4 mg) verir. Fr.13 (850 mg), beş fraksiyon (Fr.13.1–Fr.13.5) verecek şekilde bir MCI kolonu (MeOH/H20, 60:40 ila 95:5) üzerinde ayrıldı. Fr.13.4 (150 mg), HPLC preparasyonuyla (MeOH/H20, 60:40) bileşikler 4 (3 mg) ve 5'i (5 mg) verdi. Fr.16 (19 g), 6 alt fraksiyon (Fr.16.1–Fr.16.6) verecek şekilde CHCl3/MeOH (100:1 ila 20:1) ile yıkanan silis jel kolonu üzerinde kromatografiye tabi tutuldu. Fr.16.4 (2.3 g), MeOH/H20 (50:50–100:0) ile yıkanan MCI kolonuna uygulandı ve daha sonra bir Sephadex LH-20 (MeOH/H2O, 90:10) kolonu üzerinde fraksiyonlara ayrıldı. verim 7 (716 mg) ve 13 (39 mg). Fr.16.4, Fr.16.6 (240 mg) ile aynı koşullar kullanılarak bileşik 9 (7 mg) elde edildi. Fr.18 (10 g), silika jel CC (CHCl3/MeOH, 100:1–20:1) ile ayrıldı, ardından MCI (MeOH/H20 gradyan, 50:50–100:0) ve Sephadex LH{{ 96}} (MeOH/H20, 90:10) sütunları 3 (25 mg) ve 11 (4 mg) verir. Fr.19 (20 g), yedi fraksiyon (Fr.19.1–Fr.19.7) elde etmek için MeOH/H20 (30:70–100:0) ile yıkanan bir MCI kolonuna tabi tutuldu. Fr.19.5 (2.3 g), 8 (15 mg) ve 10 (7 mg) verecek şekilde tekrarlanan silika jel kolonu (CHCl3/MeOH, 30:1) ile ayrıldı. Fr.19.6 (4.3 g), 5 fraksiyon (Fr.19.6.1 – Fr.19.6.5) verecek şekilde bir silis jel kolonu (CHCl3/MeOH, 30:1) üzerinde fraksiyonlara ayrıldı. Fr.19.6.1 (1.2 g), silika jel kolonuna (CHCl3/MeOH, 30:1) tabi tutuldu ve HPLC (MeOH/H20, 45:55) ile saflaştırıldıktan sonra 1 (15 mg) sağladı. Fr.19.6.3 (540 mg), MeOH/H20 (90:10) ile yıkanan bir Sephadex LH{157}} kolonuna uygulandı ve daha sonra yarı hazırlayıcı HPLC (MeOH/H20, 45:55) ile daha da saflaştırıldı. 2 (6 mg) ve 6 (5 mg) sağlamak için. Fr.20 (12 g), bir MCI jel (MeOH/H20, 30:70–100:0) kromatografik adıma uygulandı ve ardından silika jel CC'ye (CHCl3/MeOH, 30:1) tabi tutularak 14 (21) elde edildi mg).üç{{0}}O-Etil-9-O-(4-hidroksifenil) propionil-diasilgliserol (1): beyaz katı; [ ]D26 – 3.72 (c 0.51, MeOH); UV (MeOH) λmaks (log e) 203 (4,53), 225 (4,17), 280 (3,66) nm; IR (KBr) νmaks 3426, 1727, 1516, 829 cm-1; 1H ve 13C NMR (CD3OD), bakınız Tablo 1; ESIMS m/z 389 [M-H]-, HRESIMS m/z 389.1602 [M-H]- (C21H25O7 için hesaplanan, 389.1606).

(R)-4,5,4'-Trihidroksi-3,3', -trimetoksibibenzil (2): beyaz şekilsiz toz; [ ]D26 –12.46 (c 1.07, MeOH); UV (MeOH) λmaks (log e) 204 (4,59), 286 (3,75) nm; IR (KBr) νmaks 3418, 1607, 1517, 1455, 1434, 796 cm-1; 1H ve 13C NMR (CD3OD), bakınız Tablo 1; ESIMS m/z 319 [M-H]-, HRESIMS m/z 319.1180 [M-H]- (C17H19O6 için hesaplanan, 319.1187).

(2S)-5,7,3ʹ-Trihidroksi-6,4,5-trimetoksifavon (3): sarı şekilsiz toz; [ ]D26 – 46.64 (c 0.46, MeOH); UV (MeOH) λmaks (log e) 206 (4,70), 294 (4,17) nm; IR (KBr) νmax 3335, 2940, 1641, 1514, 1462, 1345, 1434, 1182, 1091, 998, 833 cm-1; 1H ve 13C NMR (CD3OD), bakınız Tablo 1; ESIMS m/z 331 [M-H]-, HRESIMS m/z 331.0819 [M-H]- (C17H15O7 için hesaplanan, 331.0823).

3.4 DPPH Radikal Temizleme Aktivitesi Deneyi

Serbest radikal yakalama aktivitesi deneyi, bazı modifikasyonlarla önceki yönteme [36] göre gerçekleştirilmiştir. Kısaca, 30 μL numune (1000 ug/mL, etanol içinde çözülmüş) ve Trolox (1 mM), 270 μL DPPH çözeltisine (100 μM, içinde çözülmüş) eklenmiştir. sırasıyla metanol). Reaksiyon, kuyucuklu bir mikroplaka üzerinde 37 derecede 1 saat devam etti. Absorbans daha sonra 515 nm'de okundu ve toplam radikal yakalama aktivitesinin yüzdesi, aşağıdaki formül kullanılarak hesaplandı: engelleme yüzdesi =[(A0− A1)/A0]× yüzde 100, burada A0, Numunesiz DPPH (kontrol reaksiyonu) ve A1, numunelerle inkübe edilmiş DPPH'nin absorbansıdır. Tüm testler üç kopya halinde yapıldı ve pozitif kontrol ajanı olarak Trolox kullanıldı.

maca ginseng cistanche

3.5 Mantar Tirozinaz İnhibitör Deneyi

Tirozinaz aktivite inhibisyonu, bazı modifikasyonlarla daha önce açıklanan [36] yönteme göre spektrofotometrik olarak belirlendi. Kısaca, test bileşiklerinin farklı konsantrasyonları yüzde 10 DMSO içinde hazırlandı. Numune solüsyonunun her biri (20 μM), L-Dopa (1,25 mM) ile karıştırıldı ve 970 μL 0,05 mM sodyum fosfat tamponu (PBS, pH 6.8) test tüplerinde. Reaksiyon, mantar tirozinazı (25 U/mL) eklenerek başlatıldı. Reaksiyon karışımı, oda sıcaklığında 5 dakika inkübe edildi. Karışımdaki Dopakrom miktarı, 490 nm'de her kuyucuğun absorbansının ölçülmesiyle belirlendi. Pozitif kontrol olarak kojik asit kullanıldı. Tirozinazın inhibe edici yüzdesi, aşağıdaki denkleme göre hesaplandı: İnhibisyon yüzdesi=[(A0− A1)/A0] × yüzde 100 , burada A0, test bileşikleri (kontrol reaksiyonu) ve A1 olmadan Dopakromun absorbansıdır. test bileşikleri ile inkübe edilen Dopakromun absorbansıdır.

3.6 HDFa Testiyle Kollajen Üretimi

HDFa hücre çizgisi, Cascade Biologics'ten temin edildi. HDFa hücreleri, 37 derecede %5 C02'lik nemli bir atmosfer altında, %10 FBS ile DMEM içeren {{0}kuyulu plakalara ekildi. 24 saatlik inkübasyonun ardından hücreler, 72 saat boyunca test numuneleri ile muamele edildi (37 derece, yüzde 5 CO2). TGF- pozitif kontrol olarak kullanıldı. Ortam (50 uL) her kuyudan toplandı ve bir prokollajen peptit ELISA kiti ile test edilene kadar -80 derecede donduruldu. Pro-kollajen konsantrasyonu, mikroplaka okuyucu üzerinde 450 nm'de absorbans ölçülerek elde edildi. Tüm ortamları hücrelerden çıkarın ve her kuyuya 100 μL seyreltilmiş MTS reaktifi ekleyin. Reaksiyon 37 derecede 40 dakika inkübe edildi. Absorbans, bir mikroplaka okuyucu ile 490 nm'de ölçülmüştür. Artan kollajen I üretimi yüzdesi, aşağıdaki denkleme göre hesaplandı: hücre yaşayabilirliği (yüzde) =(Ortalama OD490 numunesi/Ortalama OD490 kontrolü); kolajen üretim yüzdesinde artış=(A1/B/A0 − 1) × yüzde 100 . Burada A1 numunelerle absorbanstır, A0 numuneler olmadan absorbanstır (kontrol reaksiyonu) ve B hücre canlılığıdır.

Teşekkür Bu proje, Yunnan İl Bilim ve Teknoloji Departmanı tarafından mali olarak desteklenmiştir (No. 2017ZF003-04, 2015HB093 ve 2019HA001). Yazarlar, tüm spektrumların ölçümleri için Çin Bilimler Akademisi, Kunming Botanik Enstitüsü, Batı Çin'deki Devlet Temel Fitokimya ve Bitki Kaynakları Laboratuvarı analitik grup personeline minnettardır.

cistanche portugal

Etik Standartlara Uyum

Çıkar çatışmasıBu yazıda yazarlar tarafından herhangi bir potansiyel çıkar çatışması bildirilmemiştir.

Açık ErişimBu makale Creative Commons Atıf 4.0 Uluslararası Lisansının koşulları altında dağıtılmaktadır; bu lisans, orijinal yazar(lar)a ve kaynağa uygun şekilde atıfta bulunmanız koşuluyla, herhangi bir ortamda sınırsız kullanıma, dağıtıma ve çoğaltmaya izin verir , Creative Commons lisansına bir bağlantı sağlayın ve değişiklik yapılıp yapılmadığını belirtin.

Referanslar

1. D. Yang, ZQ Cheng, L. Yang, B. Hou, J. Yang, XN Li, CT Zi, FW Dong, ZH Liu, J. Zhou, ZT Ding, JM Hu, J. Nat. Üretim 81, 227–235 (2018)
2. XM Zhou, CJ Zheng, LS Gan, GY Chen, XP Zhang, XP Song, GN Li, CG Sun, J. Nat. Üretim 79, 1791–1797 (2016)
3. TB He, YP Huang, L. Yang, TT Liu, WY Gong, XJ Wang, J. Sheng, JM Hu, Int. J. Biol. Makromol. 83, 34–41 (2016)
4. Y. Hu, C. Zhang, X. Zhao, Y. Wang, D. Feng, M. Zhang, H. Xie, J. Nat. Üretim 79, 252–256 (2016)
5. WW Fan, FQ Xu, FW Dong, XN Li, Y. Li, YQ Liu, J. Zhou, JM Hu, Nat. Üretim Biyoprospekt. 3, 89–92 (2013)
6. Y. Lin, F. Wang, LJ Yang, Z. Chun, JK Bao, GL Zhang, Phytochemistry 95, 242–251 (2013)
7. M. Moretti, L. Cossignani, F. Messina, L. Dominici, M. Villarini, M. Curini, MC Marcotullio, Food Chem. 140, 660–665 (2013)
8. S. Charoenrungruang, P. Chanvorachote, B. Sritularak, V. Pongrakhananon, J. Nat. Üretim 77, 1359–1366 (2014)
9. CC Chen, LG Wu, FN Ko, CM Teng, J. Nat. Üretim 57, 1271–1274 (1994)
10. Y. Deng, M. Li, LX Chen, XQ Chen, JH Lu, J. Zhao, SP Li, Carbohyd. Polim. 180, 238–245 (2018)
11. R. Li, T. Liu, M. Liu, F. Chen, S. Liu, J. Yang, J. Agric. Gıda Kimyası 65, 3665–3674 (2017)
12. Flora Republicae Popularis Sinicae Yayın Komitesi, (Academic Press. Beijing 19, 104 (1999)
13. Y. Lu, M. Kuang, GP Hu, RB Wu, J. Wang, L. Liu, YC Lin, Molecules 19, 8544–8555 (2014)
14. C. Zhang, SJ Liu, L. Yang, MY Yuan, JY Li, B. Hou, HM Li, XZ Yang, CC Ding, JM Hu, Fitoterapia 122, 76–79 (2017)
15. D. Yang, LY Liu, ZQ Cheng, FQ Xu, WW Fan, CT Zi, FW Dong, J. Zhou, ZT Ding, JM Hu, Fitoterapia 100, 11–18 (2015)
16. WW Fan, FQ Xu, FW Dong, XN Li, XY Wei, J. Zhou, JM Hu, Tetrahedron Lett. 54, 1928–1930 (2013)
17. FQ Xu, FC Xu, B. Hou, WW Fan, CT Zi, Y. Li, FW Dong, YQ Liu, J. Sheng, ZL Zuo, JM Hu, Bioorg. Med. kimya Letonya 24 , 5268–5273 (2014)
18. CL Chang, LJ Zhang, RY Chen, CC Wu, HC Huang, MC Roy, JP Huang, YC Wu, YH Kuo, Bioorg. Med. kimya 18, 518–525 (2010)
19. J. Cai, C. Yang, T. Chen, L. Zhao, Nat. Üretim Res. Nat. Üretim Res. 32, 1600–1604 (2018)
20. Y. Li, CL Wang, YJ Wang, SX Guo, JS Yang, XM Chen, PG Xiao, Chem. eczane Boğa. 57, 218–219 (2009)
21. CL Chang, GJ Wang, LJ Zhang, WJ Tsai, RY Chen, YC Wu, YH Kuo, Phytochemistry 71, 271–279 (2010)
22. K. Šmejkal, L. Grycová, R. Marek, F. Lemière, D. Jankovská, H. Forejtniková, J. Vančo, V. Suchý, J. Nat. Üretim 70, 1244–1248 (2007)
23. D. Slade, D. Ferreira, JPJ Marais, Phytochemistry 66, 2177–2215 (2005)
24. PL Majumder, S. Chatterjee, Phytochemistry 28, 1986–1988 (1989)
25. PL Majumder, RC Sen, Phytochemistry 26, 2121–2124 (1987)
26. B. Sritularak, N. Duangrak, K. Likhitwitayawuid, Z. Naturforsch. C 66, 205–208 (2011)
27. YW Leong, CC Kang, LJ Harrison, AD Powell, Phytochemistry 44, 157–165 (1996)
28. PL Majumder, S. Pal, Phytochemistry 32, 1561–1565 (1993)
29. CF Xie, HQ Yuan, JB Qu, J. Xing, BB Lue, XN Wang, M. Ji, HX Lou, Chem. Biyoçeşitlilik 6, 1193–1201 (2009)
30. CQ Fanı, WM Zhao, GW Qin, Chin. kimya Letonya 11, 705–706 (2000)
31. Y. Tezuka, Y. Yoshida, T. Kikuchi, GJ Xu, Chem. eczane Boğa. 41, 1346–1349 (1993)
32. FMM Darwish, MG Reinecke, Phytochemistry 62, 1179–1184 (2003)
33. O. Demirkıran, T. Sabudak, M. Öztürk, G. Topçu, J. Agric. Gıda Kimyası 61, 12598–12603 (2013)
34. KH Lee, FHA Aziz, A. Syahida, F. Abas, K. Shaari, DA Israf, NH Lajis, Eur. J.Med. kimya 44, 3195–3200 (2009)
35. HI Choi, HJ Kim, JI Park, EH Shin, DW Kim, SS Kim, Bioorg. Med. kimya Letonya 19, 2079–2082 (2009)
36. T. Sabudak, O. Demirkıran, M. Öztürk, G. Topçu, Phytochemistry 96, 305–311 (2013)

Daha fazla bilgi için: david.deng@wecistanche.com WhatApp:86 13632399501

Bunları da sevebilirsiniz