Ocimum Gratissimum Yaprağının Polifenol Zengini Özü Siklofosfamidin Wistar Sıçanlarının Böbrek Fonksiyonu Üzerindeki Toksik Etkilerini Önledi

Daha fazlası için lütfen iletişime geçin:oscar.xiao@wecistanche.com

Soyut

Arka fon:Siklofosfamid (CP), çeşitli tümörlere karşı klinik ortamlarda kullanılan güçlü ve düşük maliyetli kemoterapilerden biridir. Bununla birlikte, nefrotoksisite ile ilişkisi, terapötik kullanımını sınırlar. Ocimum gratis simum yaprağı, antioksidan, anti-inflamasyon ve anti-apoptotik özellikler gibi sayısız farmakolojik ve terapötik etkinliği olan tıbbi bir bitkidir.

Yöntemler: Bu çalışma, Ocimum gratissimum'un (OG) sıçanlarda CP'nin neden olduğu böbrek fonksiyon bozukluğuna karşı koruyucu etkisini değerlendirmek için tasarlanmıştır. Sıçanlar, 4 gün boyunca 400 mg/kg canlı ağırlık Ocimum gratissimum(Ocimum G.) yaprak özütü ile ön işleme tabi tutuldu ve ardından 50 mg/kg canlı ağırlık CP, Ocimum G ile birlikte 5. günden 7. güne kadar birlikte uygulandı. ve oksidatif stres, gıda ve su alımı, elektrolitler, aldosteron, lökosit infltrasyonu, inflamasyon ve histopatolojik değişiklik değerlendirildi.

Sonuçlar:CP ile tedavi edilen gruplarda bariz böbrek iltihabı ve böbrek yaralanmaları gözlendi. Bununla birlikte, Ocimum G.'nin yaprak özütünün uygulanması, sıçanlarda oksidatif stresi, böbrek yaralanmalarını, hafifletilmiş inflamasyonu, artan aldosteron üretimini ve azaltılmış sodyum iyonu ve su kaybını önledi. Plazma kreatinin, üre ve idrar albümin konsantrasyonu, CP ile tedavi edilen sıçanlarda Ocimum G. özütünün uygulanmasından sonra normalleştirildi. Ocimum G. ayrıca CP ile tedavi edilen sıçanlarda Interlökin-(IL)-6, C-reaktif proteinin plazma konsantrasyonlarını ve miyeloperoksidaz ve malondialdehit aktivitesini azalttı.

Sonuç: Ocimum G., inflamasyonu ve oksidan kaynaklı CP toksisitesini inhibe ederek böbrek hasarını önledi ve böbrek fonksiyonunu iyileştirdi. Ocimum G.'nin etkinliği, bitkide çeşitli fitokimyasalların varlığı ile ilgilidir.

Anahtar Kelimeler:Antioksidan, Kreatinin, Siklofosfamid, Ocimum gratissimum yaprağı, Böbrek, Sodyum.

Arka fon

Siklofosfamid (CP), nitrojen hardalı ile ilişkili bir antineoplastik bileşiktir. Klinik ortamda çok çeşitli kanser hastalıklarını tedavi etmek için ve organ nakli sonrası immünosupresif tedavide, romatoid artrit, Wegener granülomatozu ve çocuklarda nefritik sendrom gibi otoimmün bozuklukların tedavisinde kullanılır [1]. İlacın geniş klinik kullanım yelpazesinden bağımsız olarak, CP'nin çok sayıda doza bağlı organ yaralanmasına neden olduğu bilinmektedir, bu nedenle klinik ortamda terapötik kullanımını kısıtlar. Çocuklarda nefrotik sendromun tedavisinde faydalı olduğu bilindiği için [1], SP kullanımı nedeniyle uygunsuz kullanıldığında idrar kesesi hasarına neden olduğu [2, 3] ve renal toksisiteye neden olduğu önceki bazı çalışmalarda tersine bildirilmiştir. aşırı doz [4-6]. Te CP aktif metaboliti, 4-Hidroksisiklofosfamit, kısmen aldosfosfamide dönüşür, bu da dolaşımda ve canlı hücrede fosfataz tarafından parçalanır ve iki sitotoksik metabolite, fosforamid hardal ve akroleine yol açar [6]. Fosforamid hardalın terapötik etkisinin daha önce anti-tümör etkilerinden sorumlu olduğu bildirilmiştir [6], akroleinin ise ilaç uygulaması sırasında hemorajik sistit gibi CP'nin sitotoksik etkilerinden sorumlu olduğu bildirilmiştir [2, 7]. Te CP toksik metaboliti, canlı hücrelere mutajenik olan reaktif oksijen serbest radikallerinin üretilmesi yoluyla doku endojen antioksidan sistemini azaltarak canlı dokulara zarar verir. Yüksek dozda CP uygulamasının lipid peroksidasyonunu arttırdığı ve endojen enzimatik ve enzimatik olmayan antioksidanlarda azalmaya neden olduğu bildirilmiştir [7, 8]. Önceki çalışmalar, ilacın vücut dokuları üzerindeki yan etkilerini önlemede kemoterapi ile birlikte antioksidan maddelerin yararlı kullanımlarını tanımlamıştı [7, 9, 10]. Kolaviron gibi antioksidan ajanların sıçanlarda CP kardiyotoksisitesinin önlenmesinde etkili olduğu kanıtlanmıştır [11]. Böylece, kombinasyonunantioksidan ajankemoterapi ilaçları ile birlikte, CP'nin sitotoksik gelişimini önlemek veya durdurmak için potansiyel bir terapötik yaklaşım olabilir. Ocimum gratissimum (Ocimum G.), otsu bitki türlerine ait bir Lamiaceae familyasıdır. Birçok tropikal bölge ülkesinde (Asya, Hindistan, Brezilya ve Batı Afrika vb.) karanfil veya Afrika fesleğeni olarak bilinir. Nijerya'da yaygın olarak bulunur [12]. Bu ülkenin birçok eyaleti (Nijerya) Ocimum G.'yi sos ve sebze çorbası olarak kullanmıştır. Ocimum G.'nin yaprakları ve çiçeklerinin polifenollere ve diğer biyoaktif bileşiklere sahip olduğu bulunmuştur [13, 14]. Ocimum gratissimum bitkileri ishal, ülseratif kolit, ateş ve nezle gibi çeşitli hastalıkları tedavi etmek için kullanılır [14-17]. Bitki, anti-inflamatuar, anti-oksidatif, antibakteriyel, antidiyabetik ve antimalaryal yetenekleri nedeniyle birçok farmakolojik avantaja sahiptir [14, 18-20]. Ocimum G. özütünün anti-mikrobiyal aktivitesi, Klebsiella pneumonia, Staphylococcus aureus, Escherichia, Vibro spp, Enterobacter spp, Enterococcus faecalis vb. gibi çeşitli insan patojenlerine karşı in vitro olarak test edilmiştir. Ocimum G'nin uçucu yağının antifungal aktivitesi özütleri in vitro olarak kaydedilmiştir [19, 21, 22] ve Ocimum G. sivrisinek çekici olarak kullanılmıştır [23]. Yakın tarihli bir hayvan çalışması, Ocimum G. ekstraktlarının kobalt-klorür toksisitesine karşı kan basıncı düzensizliklerinin önlenmesinde [24] ve interlökini aşağı regüle ederek karaciğer fibrozu ile ilişkili kardiyak anormallikleri azaltmada koruyucu etkisinin önemini öne sürdü-6 sinyal yolu [25] veya antioksidan etkileri indükleyerek [26]. Ocimum G. yapraklarının sulu yaprak özütü, kobalt klorürün neden olduğu kardiyo-renal hasara karşı antioksidan etkiler gösterdi [24] ve gastrik asit sekresyonunu ve ülserasyonu azaltarak gastrik ülserleri önledi [27]. Ayrıca, Ocimum G. ekstraktlarından elde edilen ursolik asit, orak önleyici aktivite [28] ve antikanser [29, 30] gösterdi. Ayrıca, Ocimum G.'nin uçucu yağlarının, sıçanlarda endotel bağımlı, damar gevşetici özellikler sergilediği gösterilmiştir [31]. In vivo ve in vitro çalışmalar, Ocimum G.'nin tıbbi bir bileşeni olan öjenolün, alfa-glukozidazın inhibisyonu yoluyla kan glukoz düzeylerini düşürmesini değerlendirmiştir [32]. Dahası, klinik bir çalışma, plak ve diş eti iltihabına karşı klorheksidin ile benzer aktivite sergilemek için Ocimum G.'nin farmakolojik yeterliliğini ortaya koydu [33]. Ocimum G.'nin tüm bu özellikleriyle, Ocimum G.'nin CP yan etkilerini önlemek veya durdurmak için CP ile birlikte kullanıldığında olası bir terapötik olabileceğini varsaydık. Bu nedenle bu çalışma, Ocimum gratissimum yapraklarının polifenol açısından zengin bir ekstraktının erkek Wistar sıçanlarında CP'nin neden olduğu nefrotoksisite üzerindeki yararlı etkilerini incelemek için tasarlanmıştır.

Daha fazlasını öğrenmek için lütfen buraya tıklayınız

Malzemeler ve yöntemler

Siklofosfamid (200mg/10mL) enjeksiyonu Celon Laboratory'den (Hyderabad, Hindistan) temin edildi; ketamin hidroklorür (50mg/10mL) enjeksiyonu Popular Pharmaceuticals Ltd.'den (Gazipur, Bangladeş) satın alındı; Biyokimyasal parametreler için tahlil kitleri Randox Laboratories Limited, (Crumlin, UK), vb.'den temin edildi. 1-difenil-2-pikrilhidrazil (DPPH), metanol, sodyum karbonat, Trolox ve Folin–Ciocâlteu reaktifi satın alındı Merck & Co., Kenilworth, NJ, ABD'den. Kullanılan aletler arasında gaz kromatografisi-kütle spektrometresi (GCMS-QP2010 SE, Shimadzu Corporation, Kyoto, Japonya) ve ultraviyole-görünür spektrofotometre (Beckman, DU 7400, ABD), Soxhlet cihazı, döner buharlaştırıcı, mikroskop (Olympus CH; Olympus) bulunmaktadır. , Tokyo, Japonya); kamera (Leica DM 750).

Ocimum gratissimumleaves'in polifenol özütünün hazırlanması

Ocimum gratissimum yaprakları, Nijerya, Ekiti eyaleti, Usi'deki bir bahçeden toplandı. Ocimum gratissimum toplamak için ilgili kurumsal izinler alındı. Bu çalışma, tesisin farklı bölümlerinin kullanımına ilişkin uluslararası, ulusal ve/veya kurumsal yönergelere uygundur. Bitki örnekleri, Ile-Ife'deki Obafemi Awolowo Üniversitesi Botanik Bölümü'nün herbaryumunda küratör olan Bay Omole tarafından doğrulanmıştır ve burada Üniversitenin Herbaryumunda bir kupon örneği (1945) saklanmıştır. Ocimum G. yapraklarından (900g) polifenol bakımından zengin ekstrakt, bitkinin önceki ekstraksiyon yöntemlerimize göre elde edildi [14]. Son özütleme ürününü elde etmek için metanol kullanıldı, polifenol bakımından zengin Ocimum gratissimum (PREOG) yaprağı özütü, bir döner buharlaştırıcı kullanılarak 40 derecede azaltılmış basınç altında. Nihai özüt konsantresi, bir liyofilizatör yardımıyla dondurularak kurutuldu. Kalıntı (8{{4{57}}}}.85 g), sıkı bir kapakla Petri kaplarında tutuldu ve çalışma için ihtiyaç duyulana kadar -20 derecede saklandı. Elde edilen Te OG özütü suda (0.2 mL/uygulama) çözündürüldü ve tasarlanan doza göre sıçanlara verildi. (GC‑MS) OG özütlerinin gaz kromatografisi-kütle spektrometrisi analizi Elde edilen özütün kimyasal bileşimi, gaz kromatografisi-kütle spektrometrisi (GC–MS) kullanılarak kontrol edildi. Chavez et al. [34] yöntemi küçük bir değişiklikle kabul edildi. Bileşiklerin belirlenmesi için taşıyıcı gaz olarak helyum (1/mL akış hızı) içeren bir kaynaşmış silika kapiler kolon (film kalınlığı 30x0.25 HP-5Ms, 0.25um) kullanıldı. 40 derecelik fırın sıcaklığı ayarlandı ve 5 dakika tutuldu ve ardından kademeli olarak 3 derece/dakika artırılarak 270 dereceye kadar artırıldı. 60:1 bölünmüş oran olarak ayarlandı. Bağlantı parçaları ve iyon kaynakları için 180 derecelik bir sıcaklık, kütle spektrometresi için 240 derecelik bir arayüz sıcaklığı ayarlandı. İyonizasyon enerjisi miktarı için 70 eV kullanıldı, kararlı ve tekrarlanabilir kütle spektrumları üretmek için elektron darbesi (EI) modu seçildi ve numunelerin çalışması için 50-650m/z değer aralığı kullanıldı. Taramadan önceki MS gecikme süresi 5 dakikaydı. Elde edilen bileşikler Tablo 2'de gösterildi. Toplam fenolik içeriğin belirlenmesi Ekstraktların toplam fenolik içeriği (TPC), Gulcin ve diğerleri tarafından tarif edildiği gibi Folin–Ciocâlteu tekniği kullanılarak değerlendirildi. [35], birkaç değişiklikle. Kısaca, Ocimum G.'nin polifenol bakımından zengin ekstraktlarından 100μL (0.5mg/mL) ayrı düz tüplere yerleştirildi. Ocimum G. özü içeren her tüpe yaklaşık 500μL (yüzde 1 h/h) Folin–Ciocâlteu fenol reaktifi eklendi ve tüpler 5 dakika bekletildi. ve daha sonra vortekslenmiştir. 5 dakika beklemeye bırakıldıktan sonra, alikuotlara yaklaşık 400 uL (yüzde 20 w/w) sodyum karbonat ilave edildi, bunlar daha sonra karanlıkta oda sıcaklığında 90 dakika inkübe edildi. Renk gelişimi için. Her karışımın absorbansı, 765 nm'de bir ultraviyole-görünür spektrofotometre (Beckman, DU 7400, ABD) ile değerlendirildi. Kör olarak Folin–Ciocâlteu fenol reaktifi eklenmemiş sodyum karbonat çözeltisi kullanıldı. Kalibrasyon eğrisi için gallik asit standartları kullanıldı. Numunelerin TPC'leri, gallik asit standartlarının lineer regresyonundan belirlendi. Sonuçlar, Ocimum gratissimum özütünün (mg GAE/g) kuru ağırlığının gramı başına gallik asit eşdeğeri (GAE) olarak temsil edildi. Prosedür üç kopya halinde gerçekleştirildi (n=3). DPPH serbest radikal süpürme deneyi Ekstraktın serbest radikal süpürme aktivitesi, RakMai ve diğerleri tarafından tarif edilen metoda göre belirlendi. [36], küçük değişikliklerle. Yaklaşık 2 mL DPPH-metanol solüsyonu (180μmol/L) ilave edildi ve 0.1 mg/mL'de ekstrakt ile karıştırıldı. Te alikuotlar karanlıkta 25 derecede inkübe edildi. Numunenin absorbansı, 0 ila 60 dakika arasındaki farklı zaman aralıklarında 517 nm'de bir spektrofotometre kullanılarak belirlendi. DPPH-metanol solüsyonu eklenmeden ekstraktların alikuotları kör olarak kullanıldı. Trolox, sentetik bir analoğuvitaminE, pozitif kontrol olarak kullanıldı. Ekstraktların süpürücü özelliklerini değerlendirmek için aşağıdaki denklem kullanıldı. Prosedür üç kopya halinde (n=3) gerçekleştirildi. Bir numunenin ekstrakt artı DPPH olduğu durumlarda, Ablank yalnızca ekstrakttır, A kontrol, kontrol solüsyonunun (yalnızca DPPH içeren) absorbansıdır. Hayvan bakımı Çalışma için 120-180 g ağırlığındaki yirmi sekiz (28) erkek Wistar faresi kullanıldı. Tey, Ile-Ife'deki Obafemi Awolowo Üniversitesi Sağlık Bilimleri Fakültesi Hayvan Holding'den temin edildi. Tüm ratlar 28-32 derecede çevresel koşullara alışmaları için 1 hafta süreyle geleneksel kafeslerde tutuldu ve diyet ve temiz içme suyuna serbest erişimleri sağlandı. Deney, Obafemi Awolowo Üniversitesi Sağlık Araştırmaları Etik Kurulu (HREC) tarafından onaylandı ve çalışma, ARRIVE kılavuzlarına (araştırmadaki hayvanlar: in vivo deney raporlama) göre tarif edildi [37].

Yorgunluk için Cistanche

Histopatolojik çalışmalar

Dokular bir mikrotom ile {{0}}μm kalınlığında kesitler halinde kesildi, lamlara sabitlendi ve PAS ile boyandı. Slaytlar bir ışık mikroskobu altında (Olym pus CH; Olympus, Tokyo, Japonya) gözlendi ve Leica DM 750 kamera ile ×400 mag bildirimlerinde fotomikrografları çekildi. Böbrek dokuları bölümü, deney protokolüne kör olan sertifikalı bir patolog tarafından değerlendirildi. Glomerüler hasar, mezangial proliferasyon, bazal membran kalınlığı ve fibrinoid değişikliklerinin değerlendirilmesi ile derece 0 ve 4 arasında skorlandı. Tübüler hasar, vakuolar dejenerasyon, deskuamasyon, tübüler dejenerasyon, proksimal tübüler nekroz ve döküm oluşumu değerlendirilmesi ile 0 ve 4 derece arasında skorlandı. Tubulointerstisyel inflamatuar infiltratlar, ortamdaki inflamatuar hücrelerin çeşitliliğinin ve tübül epitelindeki sızıntıların varlığının değerlendirilmesi ile derece 0 ve 2 arasında puanlandı (Tablo 1) [44]. 0-2 toplam böbrek hasarı skoru hiç/hafif nefrotoksisiteyi, 3-6 orta derecede nefrotoksisiteyi ve 7-10 şiddetli nefrotoksisiteyi temsil ediyordu [44].

Sonuçlar

Ocimum gratissimum yaprağı ekstresinin gaz kromatografisi-kütle spektrometrisi analizi, fenolik içerikleri ve DPPH süpürme kapasitesi GC-MS analizi, Ocimum gratissimum yaprağı ekstresinin bazı biyoaktif bileşiklerini ortaya çıkardı (Tablo 2). Ekstraktın polifenolik içerikleri, Folin–Ciocâlteu yöntemi kullanılarak belirlendi (Tablo 2). Ocimum G. özünde elde edilen Te Toplam fenolik içerik (TPC) (80.36±0.50mg GAE/100g), Ocimum gratissimum özütünün fenolik içerik açısından zengin olduğunu ortaya koydu. Ekstraktın DPPH temizleme kapasitesi de, reaksiyon karışımında bulunan serbest radikallerin yüzde 50'sini temizleme kapasitesine sahip ekstrakt miktarı ile ilgili IC50 değeri hesaplanarak değerlendirildi. Ekstraktın IC50 (22.12±0.43mg/ml) değeri yüksekti ve bu yüksek değeri ifade ediyordu.antioksidanOcimum gratissimum yapraklarının etkinliği. Böylece bitkinin yüksek fenolik içeriğinin işlevi, serbest radikal aktivitesini temizleme kabiliyetinde gösterilmiştir (Tablo 2).

PREOG ve siklofosfamidin kreatinin klirensi üzerindeki etkisi

Kontrol grubu ile karşılaştırıldığında, tek başına CP grubunda renal kreatinin klirensinde önemli bir azalma gözlendi (p<0.05). however,="" the="" preog-treated="" groups="" revealed="" a="" significant="" increase="" in="" the="" creatinine="" clearance="" when="" compared="" with="" cp="" alone="" treated="" group=""><0.05)>

Tartışma

Mevcut çalışmada, lipid peroksidasyonu, hidrojen peroksit (H2O2) ve nitrik oksit (NO) gibi oksidatif stres parametrelerinde yüksek seviyelerin belirtileri vardır, bu da tedavi edilen sıçanların böbrek zar lipidleri ve proteininin Sadece CP hasar gördü. Ayrıca sadece CP ile tedavi edilen grupta süperoksit dismutaz ve katalaz gibi antioksidan enzimlerin aktiviteleri ve enzimatik olmayan antioksidan, indirgenmiş glutatyon seviyesi azalmıştı. Tek başına CP ile tedavi edilen sıçanların böbrek hücrelerinde antioksidanların azalması, redoks-homeostaz dengesizliğinin bir göstergesiydi. CP'nin daha önce metaboliti, akrolein [7, 11, 14] aracılığıyla reaktif oksijen türlerinin (ROS) aktivasyonundan ve teşvik edilmesinden sonra oksidatif hasar, inflamasyon ve hücre nekrozu veya apoptozu indüklediği gösterilmişti.antioksidan savunmaetkilenen organizmaların kapasiteleri [10, 11, 45]. Bu çalışmada, ROS'un aşırı üretimi endojenden daha ağır basmaktadır.antioksidan kapasite, oksidatif stresi tetikler ve ardından artan oksidatif stres belirteçleri seviyeleri ve azalan oksidatif stres seviyeleri ile yansıtıldığı gibi, CP ile tedavi edilen sıçanların böbrek hücrelerine zarar verir.antioksidan parametreler. Ayrıca, bu sıçanların histolojik görünümü, böbrek hücrelerinde glomerüler hasar ve tübüler nekroz gösterdi. Ayrıca redoks dengesizliği, proinflamatuar sitokinlerin aşırı üretimine neden olur [3, 14]. ROS'un aşırı üretiminin lipid peroksidasyonunu ve proinflamatuar sitokinlerin mobilizasyonunu tetiklediğini ve aynı zamanda inflamatuar renal hücre hasarı uyguladığını gözlemledi. Bu çalışmadaki IL-6 değerlendirmesi, CP ile tedavi edilen sıçanlarda önemli ölçüde yükselmiştir, bu da oksidatif stres atağı ve böbrek hücrelerinin iltihaplanmasını gösterir. IL-6 yükselmesinin karaciğeri, dolaşımdaki C-reaktif protein (CRP) üretiminde ve diğer biyoaktif aracılarda artışla sonuçlanan akut faz yanıtını başlatması için tetiklediği ve/veya uyardığı bulunmuştur [46]. CP ile tedavi edilen sıçanlarda CRP önemli ölçüde arttı ve bu biyobelirtecin yüksek seviyesi enfeksiyonlara, bilgiye ve doku hasarına karşı erken bir savunma sisteminin bir göstergesiydi [47, 48]. Bu çalışmada CRP seviyesinin yükselmesi, sadece CP ile tedavi edilen sıçanlarda iltihaplanma olduğunu doğruladı. CP'nin böbrek tübüler hücrelerinde siklofosfamid metabolit ürünlerinin birikmesi nedeniyle böbrek tarafından GSH'nin aşırı kullanımı gibi böbreğin endojen antioksidanlarının azalmasını tetiklediği gözlemlenmiştir [9]. Bu işlemin bir sonucu olarak, tek başına CP ile tedavi edilen sıçanların böbreği, hücrelerine karşı bağışıklık tepkisini artırabilir, bu da plazma CRP'sinin yükselmesiyle gösterildiği gibi daha sonra iltihaplanma ile sonuçlanmıştır. Anlaşmaya göre, CP, CP ile tedavi edilen sıçanların böbreklerinde iltihaplanma ve olası immünolojik hasarı indükleme potansiyeline sahiptir.

Çözüm

Sonuç olarak, mevcut bulgulardan elde edilen sonuçlar, Ocimum gratissimum'un polifenol bakımından zengin ekstraktının, oksidatif stresi azaltarak CP'nin böbrek fonksiyonu üzerindeki olumsuz yan etkilerini önlediğini, proinflamatuar sitokinlerin aşırı üretimini ve lökositlerin şişmesini önlediğini ve antioksidan enzimatik gelişimi iyileştirdiğini göstermiştir. böbrek dokularının aktivitesi. Ayrıca, CP'nin sıçanlarda aldosteron salgısında azalmaya neden olduğu ve idrar yoluyla aşırı sodyum ve su kaybını kolaylaştırdığı doğrulandı. Bununla birlikte, Ocimum G. özütü böbrek fonksiyonunu iyileştirdi, aldosteron üretimini arttırdı ve CP ile tedavi edilen sıçanlarda aşırı sodyum ve su kaybını önledi. Ocimum gratissimum'un yapraklarındaki polifenol ve antioksidanların varlığı, onu siklofosfamidin nefrotoksik etkisinin tedavisi ve/veya önlenmesi için mükemmel bir aday yapar.

Referanslar

1. Chabner BA, Ryand DP, Pax-Ares L, Garcis-Carbonero, Calaresi P. Anti-neoplastik ajanlar. İçinde: Harnam JG, Libmirde LE, editörler. Goodman ve Gilman, terapötiklerin farmakolojik temelidir. 10. baskı. New York: McGraw Tepesi; 2001. s. 1389–459.

2. Chabner BA, et al. Antineoplastik ajanlar. İçinde: Brunton LL, Lazo JS, Parker KL, editörler. Goodman ve Gilman, terapötiklerin farmakolojik temelidir. 11. baskı. New York: McGraw Tepesi; 2006. s. 1322–8. 1694.
3. Ge B, Yang D, Wu X, Zhu J, Wei W, Yang B. Enflamatuar stresi inhibe ederek siklofosfamid kaynaklı sistite karşı glisirhetinik asit lipozomunun sitoprotektif etkileri. Int İmmünofarmakol. 2018;54:139–44.
4. Sinanoğlu O, Yener AN, Ekici S, Midi A, Aksungar FB. Spirulina'nın sıçanlarda siklofosfamid kaynaklı nefrotoksisite ve ürotoksisitede koruyucu etkileri. Temel Transl Sci. 2012.
5. Çağlayan C, Temel Y, Kandemir FM, Yıldırım S, Küçükler S. Naringin, oksidatif stres, inflamasyon, apoptoz, otofaji ve DNA hasarı modülasyonu yoluyla siklofosfamid kaynaklı hepatotoksisite ve nefrotoksisiteye karşı koruma sağlar. Çevre Bilim Kirliliği Arş. 2018;25(21):20968–84.
6. Zhang J, Tian Q, Yung S, Chuen S, Zhou S, Duan W, et al. Oksazafosforinlerin metabolizması ve taşınması ve klinik etkileri. Uyuşturucu Metab Rev. 2005;37:611–703.
7. Famurewa AC, Edeogu CO, Ofor FI, Besong EE, Akunna GG, Maduagwuna EK. Redoks dengesizliğinin aşağı regülasyonu ve çinko takviyesi ile iNOS/NF-ĸB/kaspaz-3 sinyali, sıçanlarda siklofosfamidin neden olduğu hemorajik sistitin ürotoksisitesini önler. Hayat Bilimi. 2021;266:118913.
8. Oyagbemi AA, Omobowale TO, Saba AB, Olowu ER, Dada RO, Akınrinde A.Ş. Gallik asit, Wistar sıçanlarında siklofosfamid kaynaklı nörotoksisiteyi serbest radikal temizleme aktivitesi ve antioksidan savunma sisteminde iyileştirme yoluyla iyileştirir. J Diyet Ek. 2016;13:402–19.
9. Abraham P, Isaac B. Oral glutaminin sıçanlarda siklofosfamid kaynaklı nefrotoksisite üzerindeki etkileri. Hum Exp Toksikol. 2010;30(7):616–23.
10. Şerif İ.O. nöroprotektif mekanizmakuersetinsiklofosfa‑ farelerin neden olduğu ürotoksisiteye karşı: oksidatif stres ve inflamatuar belirteçler üzerindeki etki. J Hücre Biyokimyası. 2018;119(9):7441–8. 11. Omole JG, et al. Kolaviron'un sıçanlarda siklofosfamid kaynaklı kalp toksisitesi üzerindeki koruyucu etkisi. J Kanıta Dayalı Integr Med. 2018;23:1
11. Efraim KD, Jacks TW, Sodipo OA. Ocimum gratissimum yaprağı ekstresinin tavşanların bazı organlarında toksisitesi üzerine histopatolojik çalışmalar. Afr J Biomed Arş. 2003;6:21–5.
12. Akinmoladun AC, Ibukun EO, Emmanuel A, Obuotor EM, Farombi EO. Ocimum gratissimum yapraklarından elde edilen ekstraktın fitokimyasal bileşeni ve antioksidan aktivitesi. Bilim Araştırma Denemeleri. 2007;2:163–6.
13. Alabi QK, Akomolafe RO, Omole JG, Adefsayo MA, Ogundipe OL, Aturamu A, et al. Ocimum gratissimum'un polifenol bakımından zengin özü, sıçanlarda kolonik mukoza hasarını azaltarak ve pro-inflamatuar sitokin üretimini ve oksidatif stresi düzenleyerek koliti iyileştirir. Biyomedikal Eczanesi. 2018;103:812–22.
14. Ofah VN, Chikwendu UA. Deney hayvanlarında Ocimum gratissimum yaprağı ekstresinin ishal önleyici etkileri. J Etnofarmakol. 1999;68:327–30.