CAMP/PKA/CREB Sinyal Yolunun Aktivasyonu Yoluyla Db/db Farelerde Cistanche Bazlı Bushen Kaixuan Tongluo Formülünün Böbrek Koruyucu Etkileri

3. Sonuçlar

3.1 Cistanche Bazlı Bushen Kaixuan Tongluo Formülünün db/db Farelerinin Genel Durumu Üzerindeki Etkileri

Boş gruptaki fareler aktifti ve parlak kürkleri vardı. Buna karşılık, model grubundaki fareler obez, uyuşuk ve önemli ölçüde daha az aktif görünüyordu. Tedavi gruplarındaki fareler, model grubuyla karşılaştırıldığında genel durumlarında değişen derecelerde iyileşme gösterdi.

 

 

 

Böbrek ve Karaciğer Sağlığına Yönelik Cistanche Bazlı Bushen Kaixuan Tongluo Formülü

 

3.2 Formülün db/db Farelerin Vücut Ağırlığı Üzerindeki Etkileri

Deney süresi boyunca model grubundaki farelerin vücut ağırlığı, boş gruba kıyasla önemli ölçüde arttı (P<0.01). Compared with the model group, mice in all treatment groups showed a downward trend in body weight, with differences appearing from week 8 onward. The high-dose Cistanche bazlı formülgrup en belirgin etkiyi gösterdi. (Bakınız Tablo 2)

3.3 Böbrek Fonksiyonu Üzerindeki Etkiler

Boş grupla karşılaştırıldığında, model grubundaki serum kreatinin (Scr) istatistiksel olarak anlamlı olmasa da bir artış eğilimi gösterirken, kan üre nitrojeni (BUN), idrar albümini (uALB) ve albümin-kreatinin oranı (ACR) önemli ölçüde yükselmişti (P<0.05). Compared with the model group, mice in the formula-treated groups showed a decreasing trend in Scr (not significant), and significantly reduced levels of BUN, uALB, and ACR (P<0.05), with the medium-dose group showing the best results. In the irbesartan group, Scr and BUN showed a downward trend (not significant), while uALB and ACR were significantly reduced (P<0.01). (See Table 3)

3.4 Karaciğer Fonksiyonu ve Lipid Metabolizması Üzerindeki Etkiler

Boş grupla karşılaştırıldığında ALT, AST, toplam kolesterol (TC) ve trigliseritler (TG) model grupta önemli ölçüde arttı (P<0.05). Compared with the model group, the treatment groups showed a decreasing trend in AST and ALT (not significant), and a significant decrease in TC (P<0.01). TG levels were significantly reduced in the medium-dose formula group (P<0.05), while other formula groups showed a downward trend (not significant). In the irbesartan group, TC showed a decreasing trend (not significant), and TG was significantly reduced (P<0.01). (See Table 4)

3.5 Glikoz Metabolizması Üzerindeki Etkiler

Boş grupla karşılaştırıldığında, model grupta açlık kan şekeri (FBG), leptin (LEP), glikozile serum proteini (GSP) ve insülin (INS) düzeyleri anlamlı derecede yüksekti (P<0.05). Compared with the model group, FBG showed no significant downward trend in any group; LEP levels decreased (not significant) in the formula groups, whereas irbesartan significantly reduced LEP (P<0.05). All treatment groups showed significantly reduced GSP and INS levels (P<0.05), with the high-dose Cistanche bazlı formülen iyi etkiyi gösteren grup. (Bakınız Tablo 5)

 

3.6 Böbrek Histopatolojisi Üzerindeki Etkiler

HE boyama: Boş grup, düzenli glomerüler morfolojiye ve sağlam tübüler epitel hücrelerine sahip normal böbrek yapısını gösterdi. Model grubu, tübüler epitel hücrelerinde düzensiz glomerüller, orta derecede mesangial hücre proliferasyonu, inflamatuar infiltrasyon ve vakuoler dejenerasyon sergiledi. Bu patolojik özellikler düşük, orta ve yüksek doz formül ve irbesartan gruplarında hafifletildi. (Bkz. Şekil 1)

PAS boyama: Boş grup minimal hücre dışı matris (ECM) birikimi gösterdi. Model grubunda belirgin ECM birikimi ve kalınlaşmış bazal membranlar vardı. Tedavi grupları değişen derecelerde iyileşme gösterdi. (Bkz. Şekil 2)

Masson boyama: Boş grupta minimal kollajen birikimi ile normal glomerüler yapı ortaya çıktı. Model grubu, glomerüllerde ve renal interstisyumda yoğun mavi boyalı kollajen gösterdi. Tüm tedavi gruplarında patolojik değişiklikler azaldı. (Bkz. Şekil 3)

 

3.7 Böbrek Dokusunda p-PKA ve p-CREB İfadesi Üzerindeki Etkiler

Boş grupla karşılaştırıldığında, model grubun böbrek dokularındaki p-PKA ve p-CREB boyaması önemli ölçüde azaldı (P<0.01). Compared with the model group, the medium-dose formula group had significantly increased p-PKA expression (P<0.01), and p-CREB showed an upward trend (not statistically significant). (See Figure 4, Table 6)

 

3.8 p-PKA, PKA, p-CREB, CREB ve Bcl-2 Protein Ekspresyonu Üzerindeki Etkiler

Boş grupla karşılaştırıldığında, model grubu p-PKA/PKA, p-CREB/CREB ve Bcl-2'nin (P<0.05). These levels were significantly elevated in the medium-dose Cistanche bazlı formülgrup (P<0.01). (See Figure 5, Table 7)

 

4. Tartışma

Geleneksel Çin tıbbı (TCM) literatürü diyabetik böbrek hastalığını (DKD) açıkça tanımlamasa da köpüklü idrar gibi semptomlar "idrar bulanıklığı" ve "guan ge" gibi geleneksel Çin tıbbı koşullarıyla örtüşmektedir. Onlarca yıllık klinik deneyime dayanarak, Profesör Lü Cuiyan şunları geliştirdi:Bushen Kaixuan Tongluo Formülü, kullanarakCistancheQi ve Yang'ı tonlamak için kral bitki olarak Astragalus'un yerine böbreği ısıtmak ve bulanıklığı dönüştürmek için Aconite ile eşleştirildi.

Salvia ve Hirudo, kanı aktive eden ve teminatların engelini kaldıran şifalı bitkiler gibi davranırken, Saposhnikovia, Bombyx batryticatus ve ağustosböceği döküntüsü rüzgarı ve patojenleri dışarı atar. Rehmannia ve Cornus böbrek özünü besler; Achyranthes bitkileri aşağıya doğru yönlendirir; Rosa laevigata, Euryale, Rubus ve Cnidium özü pekiştiriyor; Dioscorea dalağı ve böbreği güçlendirir. Kombinasyon, dalak-böbrek tonifikasyonu, bulanıklığın giderilmesi ve stazın çözülmesini sağlayarak umut verici bir klinik etkinlik gösterir.

Modern farmakolojik çalışmalar, formülün bileşenlerinin böbrek fonksiyonunu iyileştirmek için birden fazla hedefe etki ettiğini göstermektedir:

Tanşinon IIAVehirudinTGF-/Smad sinyalini inhibe ederek fibrozis ve mikro dolaşım bozukluklarını azaltır

Saposhnikovia polisakkaritleriNF-κB aracılı inflamasyonu aşağı regüle eder

Cornus'tan iridoid glikozitlerantioksidan enzimleri arttırmak için Nrf2/ARE yolunu etkinleştirin

Achyranthes sterolleriPodosit apoptozunu inhibe ederek PI3K/Akt yolunu modüle eder

Diosinotofajiyi ve epitel hücre metabolizmasını düzenlemek için AMPK/mTOR'u aktive eder

cAMP sinyal yoluHücresel enerji metabolizması ve gen ekspresyonunda merkezi olan böbrek homeostazisi için hayati öneme sahiptir. Adenilat siklaz (AC), PKA'yı allosterik olarak aktive eden cAMP'yi üretir; aktive edilmiş PKA, çekirdeğe yer değiştiren ve aşağıdaki gibi hedef genlerin transkripsiyonunu başlatan p-CREB'yi oluşturmak için CREB'yi fosforile eder.Bcl-2anti-apoptotik etkileri teşvik eder ve böbrek hasarını azaltır.

DKD'de sürekli hiperglisemi, AC fonksiyonunu inhibe ederek ve PDE aracılı bozulmayı artırarak cAMP dengesini bozar ve cAMP seviyelerinin azalmasına yol açar. Bu, PKA/CREB sinyalini bozar, mitokondriyal fonksiyonu, antioksidan savunmayı ve anti-apoptotik gen ekspresyonunu tehlikeye atar, glomerüler sklerozu ve interstisyel fibrozisi hızlandırır.

Araştırma gösteriyor kicAMP/PKA yolunun aktive edilmesiPodosit yarık diyafram bütünlüğünün korunmasına ve proteinürinin azaltılmasına yardımcı olur. Dahası,CREBtranskripsiyonel olarak antioksidan enzimleri indüklerSOD2tübüler oksidatif stresi azaltır.Bcl-2ayrıca mitokondriyal ROS sızıntısını azaltır, hiperglisemi altında podositleri ve tübüler hücreleri korur.

Normal glikoz seviyelerinin yeniden sağlanması AGE birikimini azaltır, bazal membran kalınlaşmasını ve podosit hasarını hafifletir. Lipid profillerinin iyileştirilmesi renal lipid birikimini ve makrofaj infiltrasyonunu azaltır, böylece fibrozun ilerlemesi geciktirilir.

Fakat,Bushen Kaixuan Tongluo Formülünün cAMP yolu yoluyla DKD'yi nasıl etkilediğine dair araştırma sınırlı kalıyor.

Bu çalışmada insan DKD'sini simüle etmek için db/db fareleri kullanıldı.Cistanche bazlı formülfarelerde böbrek fonksiyonunu, genel durumu ve metabolik bozuklukları önemli ölçüde iyileştirdi ve olumlu karaciğer güvenlik profilleri sağladı. Histopatoloji, glomerüler bazal membran kalınlaşmasında azalma, mesanjiyal genişleme ve interstisyel kollajen birikimi - DKD lezyonlarının ayırt edici özelliği olduğunu gösterdi.

Moleküler düzeyde formülyukarı regüle edilmiş mRNA ve PKA, CREB ve Bcl-2'nin protein ekspresyonuPKA ve CREB'nin fosforilasyonunu arttırır, böylececAMP yolunun aktive edilmesi, antioksidan kapasitenin iyileştirilmesi ve filtrasyon bariyeri fonksiyonunun geri kazanılması.

Çözüm

Cistanche bazlı Bushen Kaixuan Tongluo Formülü:

Karaciğer ve böbrek fonksiyonlarını iyileştirir

Glikoz ve lipid metabolizma bozukluklarını düzeltir

EtkinleştirircAMP/PKA/CREB sinyal yolu

Böbrek fibrozisini ve oksidatif stresi azaltır

DKD'de böbrek koruması sağlar

Bu bulgular, klinik uygulaması için farmakolojik bir temel sağlar ve DKD tedavisi için potansiyel bir strateji olarak cAMP yolunu hedeflemeyi destekler. Gelecekteki araştırmalar, mekanizmayı daha fazla aydınlatmak için BDNF gibi aşağı akışlı molekülleri keşfetmelidir.