Kronik Böbrek Hastalığı Olan Kedilerde Serum Ve Fekal Amino Asit Profilleri

Soyut

Çalışmanın amacı, kronik böbrek hastalığı (KBH) olan kedilerde serum ve dışkı amino asitlerini (AA) ölçmek ve bunları sağlıklı kedilerle karşılaştırmaktı. Uluslararası Renal İlgi Derneği Evre 1-4 KBH'li otuz beş kedi ve 16 sağlıklı olgun yetişkin ve müşteriye ait yaşlı kedi, bu prospektif kesitsel çalışmaya dahil edildi. Sera, sütun sonrası ninhidrin türevlendirmeli bir iyon değiştirme kromatografisi AA analiz cihazı kullanılarak 25 AA konsantrasyonu için analiz edildi. İşlenmemiş dışkı numuneleri, tandem kütle spektrometresi ile sıvı kromatografi kullanılarak 22 AA konsantrasyonu için analiz edildi. KBH olan kedilerin fenilalanin serum konsantrasyonları daha düşüktü (ortalama fark ± ortalamanın standart hatası: 12,7 ± 4,3 uM; p=0.03), treonin (29,6 ± 9,2 μM; p {{19} }.03), triptofan (18.4 ± 5.4 µM; p=0.005), serin (29.8 ± 12.6 µM; p=0.03) ve tirozin (11.6 ± 3.8 µM; p {{ 37}},01) ve daha yüksek aspartik asit serum konsantrasyonları (4,7 ± 2,0 µM; p=0,01), -alanin (3,4 ± 1,2 µM; p=0,01), sitrülin (5,7) Sağlıklı kedilerle karşılaştırıldığında ± 1,6 µM; p=0,01) ve taurin (109,9 ± 29,6 µM; p=0,01). Fekal AA konsantrasyonları, sağlıklı kediler ve KBH'li kediler arasında farklılık göstermedi. 3-Metilhistidin-kreatinin, kas kaybı olan ve olmayan sağlıklı kediler arasında farklılık göstermedi. KBH IRIS Evre 1-4 olan kediler, sağlıklı kedilere kıyasla dengesiz bir serum amino asit profiline sahiptir.

anahtar kelimeler

kediler; kronik böbrek hastalığı; amino asit; triptofan.

Cistanche'nin etkilerini öğrenmek için buraya tıklayın

giriiş

Kronik böbrek hastalığı (KBH) olan kedilerde yağ depolarında eş zamanlı kayıp olsun olmasın kas kaybı meydana gelir ve kilo kaybına katkıda bulunabilir [1,2]. Kaşeksi, akut ve kronik hastalıklarda yağsız vücut kütlesi kaybıdır ve birincil enerji kaynağı olarak kastaki amino asitlerin (AA) kullanılmasından kaynaklanır [3]. KBH'ye sekonder kaşeksi, veteriner türlerine ekstrapolasyonla insanlarda en iyi şekilde tanımlanmıştır. İnsanlarda ve sıçan modellerinde yapılan çalışmalara göre kaşeksi, negatif enerji alımının ve metabolik asidoz, sistemik inflamasyon ve insülin direncine sekonder artmış protein katabolizmasının bir sonucudur [4]. Ayrıca KBH, protein sindirim etkinliğinin azalması ve ince bağırsakta AA emiliminin azalması sonucu protein malasimilasyonuna neden olabilir [5,6]. Bozulmuş protein sindirimi, proteolitik bakterilerin bolluğunu ve AA'ların üremik toksinlerin öncüllerine fermantasyonunu arttırır [4,7,8].

Proteinleri sentezlemek için amino asitlere ihtiyaç vardır. 11'i kediler için gerekli olan 20 proteinojenik AA vardır. Temel olmayan AA'larla karşılaştırıldığında, temel AA'lar organizma tarafından sentezlenemez ve diyet alımını gerektirir. Böbrek hastalığı olan insanlar, köpekler ve kediler, hatta erken hastalık olanlar bile, daha önce dolaşımdaki AA'ların dengesiz bir profiline sahip oldukları rapor edilmişti [9-14]. Ek olarak, sağlıklı kontrollerle karşılaştırıldığında, hemodiyaliz alan kişilerde ve bir kemirgen KBH modelinde dışkı AA profillerinin değiştiği gösterilmiştir [6,15]. Bugüne kadar, KBH'li kedilerde fekal AA konsantrasyonları ve serum ve fekal AA konsantrasyonları arasındaki korelasyon belgelenmemiştir.

Bir amino asit, yakından ilişkili biyoaktif moleküller oluşturmak için fosforilasyon veya metilasyon gibi çeviri sonrası değişikliklere uğrayabilir. Bu amino asitlerden biri, iskelet kası tarafından sentezlenen, kas yıkımı sırasında dolaşıma salınan ve değişmeden idrarla atılan 3- metilhistidindir (3-MH). Daha önce yapılan bir çalışma, plazma 3-MH konsantrasyonlarının, sağlıklı kontrol kedilerine kıyasla KBH'li kedilerde ve ayrıca iştahsız KBH'li kedilerde normal iştahı olanlara kıyasla daha yüksek olduğunu bildirmiştir [9]. Yaş, kedilerde hastalık (yani sarkopeni) yokluğunda yağsız vücut kütlesi kaybı ile ilişkilidir ve yaşlı kedilerde genç kedilere göre daha yaygın olarak sarkopeni vardır [17,18]. Serum kreatinin, iskelet kası kütlesinin vekil bir belirteci olduğundan, 3-MH'yi kreatinin konsantrasyonlarına normalleştirmek (3-MH/Crea), yaşlılarda kas proteini döngüsünün bir biyobelirteci olarak kullanılmıştır [19,20] . Veteriner hekimlikte, kedilerde dolaşımdaki 3-MH konsantrasyonları ile kas kaybı arasındaki potansiyel ilişki daha önce değerlendirilmemiştir.

KBH'li kedilerin sağlıklı kedilerle karşılaştırıldığında dengesiz bir serum ve dışkı AA profiline sahip olacağını varsaydık. Özellikle, KBH kedilerinin, ince bağırsakta protein malasimilasyonunu destekleyen, bu AA'ların fekal konsantrasyonlarının artmasıyla birlikte, esansiyel AA'ların serum konsantrasyonlarını azaltacağını varsaydık. Ek olarak, 3-MH/Crea oranının sağlıklı yetişkin ve yaşlı kedilerde kas kaybının değerlendirilmesine yardımcı olacağını varsaydık. Bu hipotezleri test etmek için çalışmanın birincil amacı, KBH'li kedilerde serum ve dışkı AA konsantrasyonlarını ölçmek ve bunları bir grup sağlıklı kedidekilerle karşılaştırmaktı. İkincil amaç, sağlıklı olgun yetişkin ve yaşlı kedilerde 3-MH/Crea'nın kas durumu skoru (MCS) ile enine kesit ilişkisini araştırmaktı.

Cistanche tubulosa

Malzemeler ve yöntemler

1. Çalışma Tasarımı ve Kedilerin Seçimi

Bu prospektif kesitsel çalışmada, 2018 ve 2020 yılları arasında Colorado Eyalet Üniversitesi Veterinerlik Eğitim Hastanesi müşterilerinden sağlıklı olgun yetişkin ve yaşlı kediler (8 yaşından büyük veya eşit) ve KBH teşhisi konan kediler alınmıştır. , kediler, bir müşteri öyküsü ve geçmiş tıbbi kayıtların gözden geçirilmesi, tek kurul onaylı dahiliye uzmanı tarafından gerçekleştirilen eksiksiz bir fizik muayene, CBC, serum biyokimya profili, idrar tahlili, serum toplam tiroksin konsantrasyonu, kan basıncını içeren kapsamlı bir değerlendirmeye tabi tutuldu. Doppler ve idrar protein-kreatinin oranı (idrar protein ölçüm çubuğu 1 artıya eşit veya daha büyükse). Fizik muayene bir 9- vücut kondisyon skoru (BCS; Nestle Purina, St. Louis, MO, ABD) ve kas kondisyon skorunu (MCS) içermiştir [21,22]. KBH'li kediler, Uluslararası Renal İlgi Derneği (IRIS) yönergelerine [23] göre evrelendirildi. Kediler, serum kreatininine dayalı olarak IRIS KBH Aşama 1 olarak evrelendirildi<1.6 mg/dL with an inadequate urinary concentrating ability (urine specific gravity (USG) ≤1.035) and either abnormal renal palpation or renal imaging findings consistent with chronic renal degenerative disease. Cats were diagnosed as IRIS CKD Stage 2–4 based on a serum creatinine >1.6 mg/dL with an inadequate urinary concentrating ability. Cats were considered healthy based on an unremarkable client history, physical examination, and normal laboratory testing including a serum creatinine ≤1.8 mg/dL and urine specific gravity (USG) >1.035. Kayıt sırasında, sahiplerden kedilerinin iştahını bir 5-puan ölçeği (tüketilen rasyonun yüzde 0'ı, yüzde 25'i, yüzde 50'si, yüzde 75'i veya yüzde 100'ü) kullanarak sübjektif olarak değerlendirmeleri istendi.

Hariç tutma kriterleri, akut obstrüktif üriner hastalık, idrar yolu enfeksiyonu veya yakın zamanda hastaneye yatış gibi KBH komplikasyonlarını ve diabetes mellitus, hipertiroidizm veya bilinen veya şüphelenilen gastrointestinal hastalık (gıdaya duyarlı kronik enteropati dahil) dahil olmak üzere sistemik hastalık tanısını içermiştir.

2. Serum Amino Asit Analizi

Sahiplere, kan alımından en az 12 saat önce kedilerinden mama vermemeleri talimatı verildi. Kan, heparinize edilmemiş steril tüplerde toplandı ve bir pıhtı oluştuktan sonra 5 dakika boyunca 5000 rpm'de santrifüjlendi (örnek alımından sonraki 30 dakika içinde). Serum hemen toplandı ve kuru buz üzerinde analiz için Texas A&M Gastrointestinal Laboratuvarına gönderilmeden önce -8{16}} ◦C'de 0-2 hafta saklandı. Varışta, numuneler oda sıcaklığında eritildi ve dahili standart olarak 500 uM L-norlösin ile eşit hacimde yüzde 5 (ağırlık/hacim) sülfosalisilik asit ile deproteinize edildi. Numuneler daha sonra 10,000× g'de 5 dakika santrifüjlemeden önce 10 dakika 4°C'de saklandı. Süpernatan, bir PVDF 0.2 um gözenek boyutlu santrifüj filtreye aktarıldı ve 10,000 x g'de 5 dakika 4 °C'de santrifüjlendi. Numuneler daha sonra kolon sonrası ninhidrin türevlendirmeli bir iyon değiştirme kromatografisi amino asit analiz cihazı (Biochrom 30 plus, Biochrom Ltd., Holliston, MA, ABD) kullanılarak amino asit içeriği açısından analiz edildi. Yüz mikrolitre filtre edilmiş süpernatan, otomatik numune alıcı şişelerine aktarıldı ve analitik kolona 30 uL'lik otomatik enjeksiyondan önce maksimum 48 saat boyunca 4 °C'de saklandı.

Aşağıdaki 25 amino asidin ve ilgili bileşiklerin serum konsantrasyonları analiz edilmiştir: -alanin, L-alanin, L-arginin, L-asparagin, L-aspartik asit, L-sitrulin, L-glutamik asit, L-glutamin, glisin, taurin , L-histidin, hidroksi-L-prolin, L-izolösin, L-lösin, L-lizin, L-metiyonin, 3-MH, L-ornitin, L-fenilalanin, L-prolin, L-serin, L-treonin, L-triptofan, L-tirozin ve L-valin. 2,5 uM ila 750 uM arasında değişen standart eğrilerin R2'si, tüm bileşikler için 0,998'den büyüktü. 250 uM'de dahili standart L-norlösinin pik alanı, tüm numuneler ve standartlar için ortalamanın 2 standart sapması içindeydi. 250 uM'de çalışan bir standart kalibratör hazırlandı ve elde edilen konsantrasyonlar arasındaki fark yüzde 5'in altında olacak şekilde her 10 enjeksiyonda bir çalıştırıldı. Ölçümün alt limitleri, gözlemlenen/beklenen oranın yüzde 80-120 arasında kaldığı standart eğrideki en düşük konsantrasyon kullanılarak hesaplandı.

Amino asit konsantrasyonları, EZChrom Elite™ VA04.08 (Agilent Technologies Inc., Santa Clara, CA, ABD) veri işleme yazılımıyla entegre edilmiş Biochrom BioSys V.3.0 yazılımı kullanılarak hesaplandı.

Cistanche özü

3. Fekal Amino Asit Analizi

Sahiplere, dışkılamadan sonraki 12 saat içinde kedilerinden boşaltılmış bir dışkı örneği almaları ve örnek alındıktan sonraki 24 saat içinde buz üzerinde hastaneye getirilene kadar geçici olarak 4 ◦C'de kapalı bir kapta saklamaları talimatı verildi. Dışkı örnekleri analize kadar -80 ◦C'de saklandı. Çalışma kaydından sonra, tüm dışkı numuneleri tandem kütle spektrometresi ile sıvı kromatografisi ile analiz için bir dış laboratuvara (Metabolon Inc., Morrisville, NC, ABD) gönderildi. Dışkı numuneleri şu 22 AA için analiz edildi: L-alanin, L-arginin, L-asparagin, L-aspartik asit, L-sitrulin, L-glutamik asit, L-glutamin, glisin, L-histidin, hidroksi-L -prolin, L-izolösin, L-lösin, L-lizin, L-metiyonin, L-ornitin, L-fenilalanin, L-prolin, L-serin, L-treonin, L-triptofan, L-tirozin ve L- valin.

Dışkı numuneleri liyofilize edildi ve bir kısım tartıldı. Kurutulmuş dışkı alikotları daha sonra bir organik çözücü ile özümlendi ve süpernatanın bir kısmı temiz bir numune plakasına aktarıldı. Yüzer kısımlara sabit etiketli iç standartlar (Tablo S1) eklendi ve bir organik çözücü ile protein çökelmesine tabi tutuldu. Analit referans malzemeleri (Sigma-Aldrich, St. Louis, MO, ABD) ve izotopik olarak etiketlenmiş iç standartlar (Sigma-Aldrich, Cambridge Isotope Laboratories, CDN Isotopes) elde edildi. Santrifüjlemeden sonra süpernatanın bir bölümü seyreltildi ve bir C18 ters fazlı ultra yüksek performanslı sıvı kromatografi kolonu ile donatılmış bir Agilent 1290/AB Sciex QTrap 5500 sıvı kromatografi-tandem kütle spektrometri sistemine enjekte edildi. Kütle spektrometresi, elektrosprey iyonizasyon kullanılarak pozitif modda çalıştırıldı.

Münferit analit ana iyonlarının pik alanları, sözde-MRM modunda karşılık gelen dahili standartların ana iyonlarının pik alanlarına karşı ölçülmüştür. Kantitasyon, her çalışmadan hemen önce hazırlanan güçlendirilmiş kalibrasyon standartlarından oluşturulan ağırlıklı en küçük kareler regresyon analizi kullanılarak yapıldı. Ham veriler, SCIEX OS-MQ yazılımı v1.7 kullanılarak toplandı ve işlendi. Veri azaltma, Office 365 v.16 için Microsoft Excel kullanılarak gerçekleştirildi.

Amino asit panelinin 22 analiti için, kalite kontrol numunelerini hazırlamak üzere tek bir plazma lotu kullanıldı. Numune analizi, tahlil performansını izlemek için iki kalibrasyon eğrisi ve altı kalite kontrol numunesi (plaka başına) içeren bir kuyucuklu plaka formatında gerçekleştirildi. Kesinlik, her numune çalışmasında karşılık gelen kalite kontrol kopyaları kullanılarak değerlendirildi. Test içi kesinlik (yüzde CV) yüzde 20'den az veya buna eşitti. Tek bir parti hazırlandı ve işlendi. Konsantrasyon değerleri numune alikot ağırlığına göre düzeltildi. Değerler µg/g cinsinden ifade edilir. Glutamin için alt ölçüm limiti (LLOQ) 2,5 ug/g idi; L-alanin, L-arginin, L-lizin, L-prolin, L-tirozin ve L-valin için LLOQ 1.0 ug/g idi. Glisin için LLOQ, 0,75 µg/g idi. L-glutamik asit, L-histidin, L-lösin, L-treonin ve L-triptofan için LLOQ, 0.5 µg/g idi. L-fenilalanin ve L-serin için LLOQ 0,4 µg/g idi. L-asparagin, L-aspartik asit, L-izolösin ve L-ornitin için LLOQ 0,25 µg/g idi. L-sitrulin için LLOQ 0,2 µg/g idi. L-metiyonin için LLOQ 0,125 µg/g idi. Hidroksi-L-prolin için LLOQ, 0.05 ug/g idi.

4. İstatistiksel Analiz

IRIS KBH Evreleri arasındaki sonuçların istatistiksel olarak karşılaştırılması için, Evre 1 ve 2 KBH kedileri ve Evre 3 ve 4 KBH kedileri, çalışmaya dahil edilen birkaç Evre 1 ve Evre 4 KBH kedisi göz önüne alındığında birleştirildi.

Sağlıklı ve KBH'li kedilerde AA ölçümlerinin histogramları ve QQ grafikleri, yaklaşık normallik varsayımını doğruladı. Kutu çizimlerinin incelenmesi, KBH olan kedilerdeki ölçümlerin genellikle sağlıklı kedilere göre daha değişken olduğunu göstermiştir. Bu nedenle, iki bağımsız grup (yani, sağlıklı kediler ve KBH'li kediler) arasındaki sürekli değişkenleri karşılaştırmak için bir Welch testi kullanıldı. Üç bağımsız grup (yani, sağlıklı kediler; KBH Evre 1 ve 2 kediler; ve KBH Evre 3 ve 4 kediler) arasındaki değişkenleri karşılaştırmak için Holm-Sidak'ın çoklu karşılaştırma testi ile tek yönlü bir Welch ANOVA'sı kullanıldı. Ek olarak, serum ve fekal AA konsantrasyonları ile serum kreatinin konsantrasyonu arasındaki, serum kreatinin ile 3-MH konsantrasyonları arasındaki ve serum ve fekal AA konsantrasyonları arasındaki korelasyonu değerlendirmek için Spearman korelasyon katsayısı (rho) hesaplandı. Benjamini, Krieger ve Yekutieli'nin [24] uyarlamalı yöntemi, yüzde 5'e ayarlanmış bir q değeri ile yanlış bir keşif oranını kontrol etmek için kullanıldı. İstatistiksel analiz için, ölçülebilir bir konsantrasyonu olmayan numuneler 0 olarak rapor edildi. Mevcut olduğunda, konsantrasyonu ölçüm limitinin altında veya üstünde olan numuneler için mutlak değer kullanıldı. Sağlıklı ve KBH'li kedilerde [9] plazma AA konsantrasyonlarının rapor edilen standart sapmalarını kullanarak, çalışmamızda bir örneklem büyüklüğü ile tespit edilebilecek her bir AA için minimum farkı belirlemek üzere bir analiz yapıldı (sağlıklı kediler için 16; 26 KBH kedisi) ). Analiz, yüzde 80'lik bir güç ve {{20}.05'lik bir alfa ile her bir AA için tespit edilebilecek minimum farkı elde etti. Analize dayalı olarak, tespit edilebilecek minimum fark, bir standart sapma farkıdır. İstatistiksel analiz, istatistiksel yazılım programları (GraphPad Prism 9.2.0; GraphPad Software, La Jolla, CA ve SAS 9.4; SAS Institute, Cary, NC, ABD) kullanılarak yapıldı. Düzeltilmiş p değeri < 0,05 anlamlı olarak kabul edildi.

Cistanche kapsülleri

Tartışma

Bu çalışmada, sağlıklı olgun yetişkin ve yaşlı kediler ile KBH'li kediler arasındaki profilleri karşılaştırmak için serum ve dışkı AA konsantrasyonlarını ölçtük. İlk olarak, KBH kedilerinin düzensiz bir serum AA profiline sahip olduğunu bulduk; özellikle, KBH olan kedilerin sağlıklı kedilere kıyasla üç temel (fenilalanin, treonin, triptofan) ve iki temel olmayan AA'nın (serin, tirozin) serum konsantrasyonları daha düşüktü. Erken evre hastalığı (IRIS Evre 1 ve 2) olan kedilerde serum AA profillerinde değişiklikler meydana geldi ve birkaç AA (aspartik asit, - alanin, sitrülin, lösin, fenilalanin, serin, taurin, triptofan, valin). İkincisi, hipotezimizin aksine, sağlıklı kediler ile KBH'li kediler arasında dışkı AA konsantrasyonlarında önemli farklılıklar bulmadık. Bu, protein malasimilasyonunun ve ardından dışkıda AA kaybının, KBH kedilerinde önemli ölçüde bozulmuş serum AA profiline önemli bir katkıda bulunmayabileceğini düşündürmektedir. Kedilerde serum AA durumundaki değişikliklerin diğer potansiyel nedenleri, daha önce tartışıldığı gibi yetersiz enerji alımı ve artan protein katabolizmasının yanı sıra tübüler disfonksiyona sekonder idrar AA kaybı, seçilmiş AA'nın azalmış renal metabolizması ve sistemik inflamasyona sekonder değişen AA metabolizmasını içerebilir. [25,26]. Bu çalışmadaki KBH kedilerinin çoğunluğu, kayıt sırasında elde edilen iştah skorlarına göre yeterli iştaha sahipti; ancak, bu puanlama sistemi sübjektiftir ve verilen bilgilere dayanarak günlük kalori alımını hesaplamak mümkün değildir. Bu nedenle, bu KBH'li kedilerde dengesiz AA profiline katkıda bulunan bir faktör olarak yetersiz alım göz ardı edilemez. Son olarak, 3-MH/Crea oranlarının, sağlıklı olgun yetişkinler ile kas kaybı olan ve olmayan yaşlı kediler arasında önemli ölçüde farklılık göstermediğini bulduk.

Önceki bir çalışma, KBH'li kedilerde yemek öncesi plazma AA konsantrasyonlarını değerlendirmiş ve sağlıklı kedilere kıyasla KBH'li kedilerde anormal bir plazma AA profili göstermiştir [9]. Çalışmamız, sağlıklı ve KBH'li kediler arasında AA konsantrasyonlarında birkaç benzer farklılık gösterdi. Her iki çalışma da sağlıklı kedilerle karşılaştırıldığında KBH olan kedilerde önemli ölçüde daha düşük triptofan ve tirozin konsantrasyonları ve daha yüksek sitrülin konsantrasyonları göstermiştir [9]. Genel olarak, insanlarda hem plazmada hem de serumda metabolit konsantrasyonlarının yeniden üretilebilirliği iyidir; ancak bazı AA konsantrasyonları (yani arginin, serin, fenilalanin, glisin) serumda daha yüksek olabilir [27]. Bu nedenle, çalışmamız ile plazmadaki AA konsantrasyonlarını ölçen önceki çalışma arasındaki bulguları doğrudan karşılaştırırken biraz dikkatli olunmalıdır.

Bazı AA'lar için serum konsantrasyonları, esansiyel AA taurin ve esansiyel olmayan AA'lar aspartik asit, sitrülin ve -alanin dahil olmak üzere KBH'li kedilerde sağlıklı kedilere göre daha yüksekti. Hem taurin hem de sitrulinin dolaşımdaki konsantrasyonları, kedilerde ve böbrek fonksiyon bozukluğu olan kişilerde daha yüksektir [9,28]. Sitrülin için bu bulgu, sitrulinin böbrek tarafından arginine dönüşümünün azalmasına bağlanır [29]. Taurin, insanlar ve köpeklerden farklı olarak kedilerde esansiyel bir amino asittir ve bu nedenle kedilerin diyetle alınması gerekir. KBH olan kedilerde daha yüksek serum taurin konsantrasyonları, renal atılımın azalmasının bir sonucu olabilir [30]. KBH olan kedilerde dolaşımdaki yüksek -alanin ve aspartik asit konsantrasyonlarının nedeni bilinmemektedir; ancak bu, böbrek hastalığı olan kişilerde belgelenen dolaşımdaki AA profili modeliyle (yani, yüksek esansiyel olmayan ve düşük esansiyel AA'lar) tutarlıdır [28,31].

Sağlıklı kontrollere kıyasla hemodiyaliz alan son dönem böbrek hastalığı (ESRD) olan kişilerde lösin, fenilalanin, lizin, histidin, metiyonin, tirozin ve triptofanın fekal konsantrasyonları önemli ölçüde artmıştır [15]. ESRD hastalarının kolonundaki bu sindirilmemiş AA'lar, bağırsaktan türetilen majör üremik toksinler, indoksil sülfat (IS) ve p-kresol sülfat (PCS) üreten proteolitik bakterileri destekleyebilir [32]. İnsanlar, kediler ve köpekler IS biriktirirken, bazı türler sistemik dolaşımda pCS biriktirir ve bu üremik toksinlerin birikmesi birincil olarak azalmış tübüler atılımın sonucudur [33-35]. Bununla birlikte, bazıları kolonda protein malasimilasyonunun ve artmış AA'ların kolondaki proteolitik bakterileri destekleyerek dolaşımdaki konsantrasyonlara katkıda bulunabileceğini teorize etmektedir [6,32]. Hipotezimizin aksine, çalışmamız KBH ve sağlıklı kediler arasında dışkı AA konsantrasyonlarında önemli farklılıklar göstermedi. Bu, KBH olan kedilerde dolaşımdaki IS ve pCS birikiminde sindirilmemiş AA'ların katkısını sorgulamaktadır. Fekal AA konsantrasyonlarında farklılık olmaması hasta popülasyonumuzdan kaynaklanıyor olabilir. Çalışmamızdaki kedilerin çoğu klinik olarak stabildi ve çalışma grubumuzda anlamlı bir karşılaştırma yapmak için çok az Evre 4 KBH kedisi (n=4) vardı. Dışkı AA profilindeki daha şiddetli farklılıklar, son dönem KBH'si olan kedilerde daha iyi değerlendirilebilir.

Sağlıklı kedilerde ve KBH'li kedilerde serum 3-MH konsantrasyonlarını ölçtük. Beklendiği gibi, KBH olan kedilerin sağlıklı kontrol kedilerine kıyasla daha yüksek serum 3-MH konsantrasyonlarına sahip olduğunu ve serum 3-MH konsantrasyonlarının serum kreatinin konsantrasyonları ile pozitif korelasyon gösterdiğini bulduk. Bu, KBH'li hastaların plazma veya serumundaki 3-MH konsantrasyonlarının sağlıklı kontrollerdekinden daha yüksek olduğunu bulan, kediler, köpekler ve insanlar üzerinde yapılan önceki çalışmaların bulgularına benzer [9,11,28]. Bu bulgu, KBH hastalarında 3-MH'nin renal atılımının azalmasına bağlanır. Bu nedenle, kreatinin karıştırıcı bir faktör olduğu için kas kaybı olan KBH'li kedilerde 3-MH/Crea oranını yapmadık. 3-MH/Crea oranlarının, sağlıklı yetişkin ve yaşlı kedilerde iskelet kası bozulmasının bir belirteci olarak kullanılıp kullanılamayacağını keşfetmek için 3-MH/Crea oranları, kas kaybı olan ve olmayan kediler arasında karşılaştırıldı. Bu kedi grubundaki kas kütlesini değerlendirmek için tek bir veteriner tarafından elde edilen bir MCS kullanıldı. MCS'nin tahmini, eğitimli bireylerin klinik ortamda gerçekleştirmesi için kolay ve non-invazivdir ve gözlemciler arasında önemli ölçüde tekrarlanabilirliğe ve orta düzeyde yeniden üretilebilirliğe sahip olduğu bulunmuştur [36]. Hafif ila orta derecede kas kaybı olan sağlıklı kediler subjektif olarak kas kaybı olmayanlara göre daha yüksek ortalama 3-MH/Crea oranlarına sahipti, ancak bu bulgu istatistiksel olarak anlamlı değildi; çalışma kohortu [20,37]. 3-MH'nin kedilerde iskelet kası bozulmasının bir biyobelirteci olarak kullanılması, daha fazla araştırma gerektirir.

Klinisyenler, KBH'li kişilerde kaşeksi ile mücadele etmek için fiziksel aktivitenin artırılmasını, metabolik asidozu tedavi etmeyi ve protein katabolizmasını en aza indirmek için düzeltilebilir inflamatuar faktörleri (örn. bağırsak hastalığı) ortadan kaldırmayı önermektedir. Ek olarak, beslenme tedavisini optimize etmek önemlidir. İnsanlara benzer şekilde, sindirilebilirliği yüksek bir protein kaynağı kullanarak protein alımının azaltılması ve yeterli kalori alımının sürdürülmesi, KBH'li kediler için tedavinin temel dayanağıdır [38,39]. IRIS Evre 1 ve 2 KBH'li kedilerde yapılan önceki bir çalışma, 6 ay boyunca protein kısıtlı bir renal terapötik diyet (6,7 g/100 kcal) kullanılarak temel AA treonin alımının artırıldığını gösterdi (Hill's Prescription Diet k/d) Tavuklu kedigiller, Hill's Pet Nutrition, Topeka, KS, ABD) [40]. Bu kedilerde diyete geçiş öncesi ve sonrası amino asit profilleri değerlendirilmemiştir. Sağlıklı kontrol kedilerine kıyasla KBH'li kedilerin serumunda treoninin düşük olduğunu bulduk, bu da KBH'li kedilerde bu AA takviyesinin potansiyel faydasını daha da destekliyor. Hemodiyaliz hastalarında, AA'lar ve peptitler formundaki protein dahil olmak üzere makrobesinlerden kalori sağlamak için kullanılan oral bir nutrasötik, serumdaki çoğu AA konsantrasyonunu iyileştirmiştir [41]. Bu çalışmalara dayanarak, temel AA'larla güçlendirilmiş renal terapötik diyetler, yağsız vücut kütlesini koruma ve potansiyel olarak serum AA konsantrasyonlarını iyileştirme umuduyla KBH'li kedilerde faydalı olabilir; ancak, ikincisi açıklanmaya devam ediyor.

Cistanche tozu

Bu çalışmanın sınırlamaları vardır. Kedi popülasyonları hakkında, sağlıklı yaşlı kedi bulmanın imkansızlığı nedeniyle kontrol grubu ile KBH grubu yaş eşleşmedi.<14 years of age in the referral hospital population. As a result, the healthy control cats were significantly younger than the CKD cats, which may have affected our conclusions. In people, serum AA profiles differ between the young and elderly, and therefore, the deranged serum AA profile in CKD cats in comparison to the healthy controls may be explained in part by age [42,43]. Second, our results reflect only a single time-point and are not representative of dynamic changes that may occur in circulating or fecal AA concentrations. Third, deproteinization of serum was not performed until after freezing and just before analysis within 2 weeks of collection. Deproteinization prevents losing AA by co-precipitation with other serum proteins, therefore this may have impacted our results, especially for sulfur-containing AAs (methionine, taurine) [44]. However, all samples were handled similarly, so any effect should have been standardized across all samples. Lastly, all healthy cats and the majority of CKD cats (21/26) were fasted before blood collection. In cats, there is a mild postprandial rise in plasma AA concentrations, and the magnitude of the postprandial rise varies based on the AA concentration of the diet and feeding regimen [45–47]. Therefore, the fed state of these five CKD could have affected results to an unknown degree.

Sonuçlar

IRIS Aşama 1-4 KBH'li kediler, sağlıklı olgun yetişkin ve yaşlı kedilere kıyasla bazı temel AA'ların serum konsantrasyonlarına sahiptir ve bu nedenle KBH'li kedilerde dengesiz serum AA profilleri, diyet yönetiminin terapötik bir hedefi olarak hizmet edebilir. Fekal AA konsantrasyonları, KBH ve sağlıklı kediler arasında önemli ölçüde farklı değildi ve bu nedenle, AA'ların fekal atılımının, KBH kedilerinde belgelenen dengesiz serum AA profillerine büyük olasılıkla önemli bir katkısı yoktur. Serum 3-MH konsantrasyonları, KBH olan kedilerde, sağlıklı kontrollere göre daha yüksektir ve bu bulgu, renal atılımın azalmasına bağlanır. 3-MH/Crea oranları, kas kaybı olan sağlıklı kedilerde, normal kas kütlesine sahip kedilere kıyasla önemli ölçüde yüksek değildi; ancak, küçük örneklem boyutu göz önüne alındığında daha fazla değerlendirme garanti edilir.

Referanslar

1. Summers, S.; Quimby, JM; Philips, RK; Stockman, J.; İşaya, A.; Lidbury, JA; Steiner, JM; Suchodolski, J. Kronik böbrek hastalığı olan kedilerde dışkı yağ asidi konsantrasyonlarının ön değerlendirmesi ve indoksil sülfat ve p-kresol sülfat ile korelasyonu. Vet. Stajyer. Med. 2020, 34, 206–215. [ÇaprazRef]

2. Freeman, LM; Lachaud, Milletvekili; Matthews, S.; Rodos, L.; Zollers, B. Kronik böbrek hastalığı olan kedilerde zamanla kilo kaybının değerlendirilmesi. Vet. Stajyer. Med. 2016, 30, 1661–1666. [ÇaprazRef]

3. Freeman, LM Kaşeksi ve sarkopeni: Köpeklerde ve kedilerde ortaya çıkan önemli sendromlar. Vet. Stajyer. Med. 2012, 26, 3–17. [ÇaprazRef]

4. Zha, Y.; Qian, Q. KBH ve ESRD'de protein beslenmesi ve yetersiz beslenme. Besinler 2017, 9, 208. [CrossRef]

5. Bammens, B.; Verbeke, K.; Vanrenterghem, Y.; Evenepoel, P. Kronik böbrek yetmezliğinde bozulmuş protein asimilasyonuna ilişkin kanıt. böbrek uluslararası 2003, 64, 2196–2203. [ÇaprazRef]

6. Liu, Y.; Li, J.; Yu, J; Wang, Y.; Lu, J.; Shang, eski; Zhu, Z.; Guo, J.; Duan, J. KBH ilerlemesi sırasında bağırsak amino asit metabolizmasının bozukluğu, bağırsak mikrobiyota disbiyozu ve metagenom değişikliği ile ilişkilidir. J. Ecz. Biyomed. Anal. 2018, 149, 425–435. [ÇaprazRef]

7. Grip, T.; Huys, GRB; Joossens, M.; Van Biesen, W.; Glorieux, G.; Vaneechoutte, M. Kronik böbrek hastalığı olan hastalarda üremik toksin öncüsü üreten bağırsak bakterilerinin izolasyonu ve miktarının belirlenmesi. Int. J. Mol. bilim 2020, 21, 1986. [CrossRef]

8. Graboski, AL; Redinbo, MR Bağırsak kaynaklı proteine ​​bağlı üremik toksinler. Toksinler 2020, 12, 590. [CrossRef]

9. Goldstein, RE; İşaretler, SL; Cowgill, LD; Kaş, PH; Rogers, Doğal olarak edinilmiş kronik böbrek yetmezliği olan kedilerde QR Plazma amino asit profilleri. Am. Vet. Res. 1999, 60, 109–113.

10. Parker, VJ; Fascetti, AJ; Klamer, BG Protein kaybettiren nefropatili köpeklerde amino asit durumu. Vet. Stajyer. Med. 2019, 33, 680–685. [ÇaprazRef]

11. Hansen, B.; DiBartola, SP; Çiğne, DJ; Browner, C.; Berrie, HK İki diyetle beslenen kronik böbrek yetmezliği olan köpeklerde amino asit profilleri. Am. Vet. Res. 1992, 53, 335–341.

12. Kumar MA; Bitla, AR; Raju, KV; Monohar, SM; Kumar, VS; Narasimha, S. Erken kronik böbrek hastalığında dallı zincirli amino asit profili. Suudi J. Böbrek Dis. nakil 2012, 23, 1202–1207.

13. Zeng, L.; Yu, Y.; Cai, X.; Xie, S.; Chen, J.; Zhong, L.; Zhang, Y. Diyabetik nefropati, hipertansif nefropati ve kronik nefriti olan hastalarda serum amino asit fenotiplerindeki farklılıklar. Med. bilim Monit. 2019, 25, 7235–7242. [ÇaprazRef]

14. Laidlaw, SA; Berg, RL; kopple, JD; Naito, H.; Yürüteç, ÇG; Walser, M. Kronik böbrek yetmezliğinde açlık plazma amino asit düzeylerinin modelleri: Böbrek Hastalığında Diyetin Değiştirilmesi Çalışmasının fizibilite aşamasının sonuçları. Am. J. Böbrek Dis. 1994, 23, 504–513. [ÇaprazRef]

15. Liu, S.; Liang, S.; Liu, H.; Chen, L.; Güneş, L.; Wei, M.; Jiang, H.; Wang, J. Hemodiyaliz hastalarında dışkı ve serumun metabolit profili ve tıbbi kömür tabletlerinin etkisi. Böbrek Kan Basıncı. Res. 2018, 43, 755–767. [ÇaprazRef]

16. Koçlik, B.; Gerbracht, C.; Grune, T.; Weber, D. Diyet alışkanlıklarının ve et tüketiminin plazma 3-metilhistidin—Kas proteini döngüsü için potansiyel bir belirteç üzerindeki etkisi. Mol. Nutr. Gıda Res. 2018, 62, e1701062. [ÇaprazRef]

17. Salon, JA; Jackson, MI; Farace, G.; Yerramilli, M.; Jewell, DE Yaşlı yetişkin kedilerde diyet bileşenlerinin yağsız vücut yüzdesi, üremik toksin konsantrasyonları ve böbrek fonksiyonu üzerindeki etkisi. Metabolitler 2019, 9, 238. [CrossRef]

18. Salon, JA; Yerramilli, M.; Obare, E.; Yerramilli, M.; Jewell, DE Balık yağı, L-karnitin ve orta zincirli trigliseritler ile zenginleştirilmiş proteini azaltılmış gıdalarla beslenen sağlıklı geriatrik kedilerde böbrek fonksiyonu biyobelirteçleri olarak simetrik dimetilarjinin ve kreatinin serum konsantrasyonlarının karşılaştırılması. Veteriner. J.2014, 202, 588–596. [ÇaprazRef]

19. Patel, SS; Molnar, MZ; Tayek, JA; Ix, JH; Nuri, N.; Benner, D.; Heymsfield, S.; kopple, JD; Kövesdy, CP; Kalantar-Zadeh, K. Kronik böbrek hastalığında kas kütlesinin bir belirteci olarak serum kreatinin: Kesitsel bir çalışmanın sonuçları ve literatürün gözden geçirilmesi. J. Cachexia Sarcopenia Muscle 2013, 4, 19–29. [ÇaprazRef]

20. Koçlik, B.; Stuetz, W.; Peres, K.; Korku, C.; Tegner, J.; Rodriguez-Manas, L.; Grune, T.; Weber, D. FRAILOMIC Girişiminin Fransız kohortlarında plazma 3-metilhistidin ile kırılgan durum arasındaki ilişkiler. J. Clin. Med. 2019, 8, 1010. [CrossRef]

21. Peterson, ME; Castellano, CA; Rishniw, M. Hipertiroidili kedilerde vücut ağırlığının, vücut durumunun ve kas durumunun değerlendirilmesi. Vet. Stajyer. Med. 2016, 30, 1780–1789. [ÇaprazRef]

22. Kas Kondisyon Skoru—Kat. Çevrimiçi olarak erişilebilir: https://wsava.org/global-guidelines/global-nutrition-guidelines/ (18 Ocak 2022'de erişildi).

23. KBH'nin IRIS Evrelemesi. Çevrimiçi olarak erişilebilir: http://www.iris-kidney.com/guidelines/staging.html (18 Ocak 2022'de erişildi).

24. Benjamini, Y.; Kriger, AM; Yekutieli, D. Yanlış keşif oranını kontrol eden uyarlanabilir lineer hızlandırma prosedürleri. Biometrika 2006, 93, 491–507. [ÇaprazRef]

25. van de Poll, MCG; Soeters, PB; Deutz, NEP; Fearon, KCH; Dejong, CHC Amino asitlerin böbrek metabolizması: Organlar arası amino asit değişimindeki rolü. Am. J. Clin. Nutr. 2004, 79, 185–197. [ÇaprazRef]

26. Süleyman, ME; Kureyşi, AR; Stenvinkel, P.; Pecoits-Filho, R.; Barany, P.; Heimburger, O.; Anderstam, B.; Ayala, acil servis; Filho, JCD; Alvestrand, A.; et al. Enflamasyon, kronik böbrek hastalığı olan hastalarda düşük plazma amino asit konsantrasyonlarına katkıda bulunur. Am. J. Clin. Nutr. 2005, 82, 342–349. [ÇaprazRef]

27. Yu, Z.; Kastenmüller, G.; Hey.; Belcredi, P.; Moller, G.; Prehn, C.; Mendes, J.; Wahl, S.; Roemisch-Margl, W.; Ceglarek, Ü.; et al. İnsan plazması ve serum metabolit profilleri arasındaki farklar. PLoS BİR 2011, 6, e21230. [ÇaprazRef]

28. Ceballos, I.; Chauveau, P.; Guerin, V.; Bardet, J.; Parvy, P.; Kamoun, P.; Jungers, P. Kronik böbrek yetmezliğinde plazma serbest amino asitlerinin erken değişiklikleri. klinik Chim. Açta 1990, 188, 101–108. [ÇaprazRef]

29. Bouby, N.; Hassler, C.; Parvy, P.; Bankir, L. Kronik böbrek yetmezliğinde arjinin renal sentezi: 5/6 nefrektomili sıçanlarda in vivo ve in vitro çalışmalar. böbrek uluslararası 1993, 44, 676–683. [ÇaprazRef]

30. Süleyman, ME; Barany, P.; Filho, JC; Lindholm, B.; Bergstrom, J. Böbrek yetmezliği olan hastalarda taurin birikimi. Nefrol. Aramak. nakil 2002, 17, 528–529. [ÇaprazRef]

31. Bergström, J.; Alvestrand, A.; Fürst, P. Protein malnütrisyonu olmayan idame hemodiyaliz hastalarında plazma ve kassız amino asitler. böbrek uluslararası 1990, 38, 108–114. [ÇaprazRef]

32. Wong, J.; Piceno, YM; DeSantis, TZ; Pahl, M.; Andersen, GL; Vaziri, ND ESRD'de üreaz ve ürikaz içeren, indol ve p-kresol oluşturan genişleme ve kısa zincirli yağ asidi üreten bağırsak mikrobiyotasının daralması. Am. J. Nefrol. 2014, 39, 230–237. [ÇaprazRef]

33. Yazlar, SC; Quimby, JM; İşaya, A.; Suchodolski, JS; Lunghofer, PJ; Gustafson, DL Kronik böbrek hastalığı olan kedilerde fekal mikrobiyom ve indoksil sülfat ve p-kresol sülfatın serum konsantrasyonları. Vet. Stajyer. Med. 2018, 33, 662–669. [ÇaprazRef]

34. Cheng, FP; Hsieh, MJ; Çu, CC; Hsu, WL; Lee, YJ Doğal olarak oluşan böbrek hastalıklarından muzdarip köpeklerde ve kedilerde indoksil sülfat seviyelerinin tespiti. Veteriner. J.2015, 205, 399–403. [ÇaprazRef]

35. Lin, CN; Vu, IW; Huang, YF; Peng, SY; Huang, YC; Ning, HC UPLC-MS/MS kullanılarak kronik böbrek hastalığında serum total ve serbest indoksil sülfat ve p-kresil sülfat ölçümü. J. Gıda İlaç Anal. 2018, 27, 502–509. [ÇaprazRef]

36. Freeman, LM; Michel, KE; Zengi, BM; Boler, BMV; Fages, J. Kaşeksi ve sarkopeni olan kedilerde kas kütlesinin değerlendirilmesi için kas durumu skorunun ve ultrasonografik ölçümlerin kullanışlılığı. Am. Vet. Res. 2020, 81, 254–259. [ÇaprazRef]

37. Rebholz, CM; Zheng, Z.; gram, ME; Appel, LJ; Sarnak, MJ; Inker, LA; Levey, AS; Coresh, J. Diyetle protein alımıyla ilişkili serum metabolitleri: Renal Hastalıkta Diyetin Değiştirilmesi (MDRD) randomize klinik çalışmasının sonuçları. Am. J. Clin. Nutr. 2019, 109, 517–525. [ÇaprazRef]

38. Kıvılcım, AH; Caney, S.; Chalhoub, S.; Elliott, J.; Finch, N.; Gajanayake, I.; Langston, C.; Lefebvre, HP; Beyaz, J.; Quimby, J. ISFM kedi kronik böbrek hastalığının tanı ve tedavisine ilişkin konsensüs kılavuzları. J. Feline Med. cerrahi 2016, 18, 219–239. [ÇaprazRef]

39. Kronik Böbrek Hastalığı Olan Kediler İçin Diyetler. Çevrimiçi olarak erişilebilir: http://www.iris-kidney.com/education/protein_restriction_ feline_ckd.html#:~{}:text= Yüzde 20'ye göre yüzde 20kanıt yüzde 20'den yüzde 20'ye klinik, ilaç yüzde 20'den yüzde 20'ye kadar yüzde 20'yi yönet tıbbi yüzde 20 koşul (18 Ocak 2022'de erişildi).

40. Salon, JA; Fritsch, DA; Jewell, DE; Burris, PA; Brüt, KL IRIS evre 1 ve 2 kronik böbrek hastalığı olan Kediler, yüksek kalori yoğunluğuna ve yüksek karnitin ve esansiyel amino asit konsantrasyonlarına sahip yiyeceklerle beslendiklerinde vücut ağırlıklarını ve yağsız kas kütlelerini korurlar. Veteriner. Rec. 2019, 184, 190. [CrossRef]

41. Małgorzewicz, S.; Gał ˛ezowska, G.; Cieszy´ska-Semenowicz, M.; Ratajczyk, J.; Wolska, L.; Rutkowski, P.; Jankovska, M.; Rutkowski, B.; Debska-Slizien, A. Protein-enerji kaybı olan hemodiyaliz hastalarında oral beslenme takviyesinden sonra amino asit profili. Beslenme 2019, 57, 231–236. [ÇaprazRef]

42. Timmerman, KL; Volpi, E. Amino asit metabolizması ve yaşlanmada düzenleyici etkileri. Curr. görüş. klinik Nutr. Metab. Bakım 2008, 11, 45–49. [ÇaprazRef]

43. Servar, G.; Bot, HG; Collins, M. Genç ve yaşlı deneklerin açlık serum amino asit profillerinin karşılaştırılması. J. Am. koleksiyon Nutr. 1991, 10, 668–674. [ÇaprazRef]

44. Phipps, WS; Jones, PM; Patel, K. Amino ve organik asit analizi: Doğuştan metabolizma hatalarının teşhisinde temel araçlar. Av. klinik kimya 2019, 92, 59–103.

45. Camara, A.; Verbrugghe, A.; Kargo-Froom, C.; Hogan, K.; Devries, TJ; Sanchez, A.; Robinson, LE; Shoveller, AK 21 gün boyunca rejimlerle beslenen yetişkin kedilerde gündüz beslenme sıklığı iştah düzenleyici hormonları, amino asitleri, fiziksel aktiviteyi ve solunum katsayısını etkiler, ancak enerji harcamasını etkilemez. PLoS BİR 2020, 15, e0238522. [ÇaprazRef]

46. ​​Pion, PD; Lewis, J.; Greene, K.; Rogers, QR; Morris, JG; Kittleson, MD Kedilerde yemekle beslemenin ve yiyecek yoksunluğunun plazma ve tam kan taurin konsantrasyonları üzerindeki etkisi. J. Nutr. 1991, 121, S177–S178. [ÇaprazRef]

47. Heinze, CR; Larsen, JA; Kaş, PH; Ticari olarak hazırlanmış diyetleri yiyen kedilerde Fascetti, AJ Plazma amino asit ve tam kan taurin konsantrasyonları. Am. Vet. Res. 2009, 70, 1374–1382. [ÇaprazRef]

Stacie C. Summers 1, Jessica Quimby 2, Amanda Blake 3, Deborah Keys 4, Joerg M. Steiner 3 ve Jan Suchodolski 3

1 Carlson Veteriner Fakültesi, Oregon Eyalet Üniversitesi, Corvallis, OR 97331, ABD

2 Veteriner Klinik Bilimleri Bölümü, Ohio Eyalet Üniversitesi, Columbus, OH 43210, ABD; quimby.19@osu.edu

3 Texas A&M Gastrointestinal Laboratuvarı, Küçük Hayvan Klinik Bilimleri Bölümü, College Station, TX 77843, ABD; ablake@cvm.tamu.edu (AB); jsteiner@cvm.tamu.edu (JMS); jsuchodolski@cvm.tamu.edu (JS)

4 Kaleidoscope Statistics Veteriner Tıbbi Araştırma Danışmanlığı, Atina, GA 30606, ABD; deborah.a.keys@kaleidoscopestatistics.com