Karaciğer Koruma Tedavisinde Cistanches Faydaları Mekanizma Çalışması

Soyut:aktif bileşenlerinin mekanizmasını incelemekCistanchesİlaçlar, hastalıklar ve hedefler açısından karaciğer fibrozunun tedavisinde Herba. Cistanches Herba'nın etkili bileşenleri, geleneksel Çin tıbbı sistemi farmakoloji veri tabanı ve analiz platformu (TCMSP), geleneksel Çin tıbbı ansiklopedi veri tabanı (ETCM), geleneksel Çin tıbbı araştırma kapsamlı veri tabanı (TCMID), CNKI veri tabanı, PubMed ve diğer veri tabanları aracılığıyla toplanmıştır. aktif bileşenlerinin hedef genleriCistanches HerbaUniprot veri tabanı ile elde edildi ve karaciğer fibrozunun hastalık genleri GeneCards veri tabanı ve OMIM veri tabanı tarafından toplandı, aktif bileşen hedefleri ile kesiştikaraciğer fibrozuhedefler ve geleneksel Çin tıbbı-aktif bileşenler-hastalık ağı çizilmiştir. Protein etkileşim ağı (PPI), String veritabanı ve Cytoscape 3.7.1 yazılımı ile oluşturulmuştur. GO işlevi ve KEGG yolu, DAVID veritabanı ile zenginleştirildi.

hayvan modelikaraciğer fibrozukuruldu, fare karaciğer dokusundaki LN, HA, PCIII ve Col IV içerikleri ELISA kiti ile tespit edildi, karaciğer histopatolojik değişiklikleri HE ve Masson boyama ile gözlemlendi ve PI3K ve AKT mRNA'nın transkripsiyonu gerçek zamanlı floresan ile tespit edildi. kantitatif PCR. Cistanches Herba'nın sekiz aktif bileşeni, 157 hedef ve 1 005 hedefkaraciğer fibrozutoplanarak taranmış ve kanser sinyal yolu, hepatit B virüs sinyal yolu, PI3K-AKT sinyal yolu, tümör nekroz faktör sinyal yolu, proteoglikan ve kanser olmak üzere 5 ana sinyal yolunu içeren 92 hedef birbiriyle kesişmiştir. Hayvan deneyi, model grubu ile karşılaştırıldığında, yüksek, orta ve düşük doz gruplarının toplamfeniletanol glikozitlerActeoside içeren Cistanches Herba (700, 350, 175 mg/kg) karaciğer fibrozlu farelerin karaciğer dokusunda LN, HA, PCIII ve Col IV içeriğini önemli ölçüde azaltabilir. Karaciğer dokusunun patolojik gözlemi, toplamCistanches Otlarının feniletanol glikozitleri Faydaları:abilirkaraciğer hasarını azaltmakve geliştirmekyaşlanma karşıtı sistem. Gerçek zamanlı floresan kantitatif PCR tespiti, model grubunun karaciğer dokusunda PI3K ve AKT'nin mRNA ekspresyonunun normal gruba kıyasla önemli ölçüde yukarı regüle edildiğini gösterdi. Model grubu ile karşılaştırıldığında, Cistanches Herba'nın toplam feniletanol glikozitlerinin yüksek, orta ve düşük doz gruplarında PI3K ve AKT'nin mRNA ekspresyonu önemli ölçüde azaldı ve mekanizması, PI3K-AKT yolunun aktivasyonunu inhibe ederek karaciğer fibrozunun ilerlemesini geciktirebilir. . Cistanches Herba'nın toplam feniletanol glikozitleri aşağıdaki etkiye sahiptir:karaciğer yaşlanmasına karşıfarmakolojik etkileri hakkında daha fazla çalışma için bir temel oluşturanCistanches Herba. 

(Cistanche faydalarını öğrenmek için buraya tıklayın)

Anahtar Kelimeler:Cistanches Herba; ağ farmakolojisi; moleküler yerleştirme;karaciğer fibrozu;karaciğer koruması;

Yazar:ZHANG Bo-rui1, MA Qian-qian1, WANG Wen-yi1, ZHANG Shi-lei1, LIU Tao1, ZHAO Jun2, MA Long1*

Halk Sağlığı Okulu, Sincan Tıp Üniversitesi, Urumçi 830054, Çin; 2Key Uygur Tıbbı Laboratuvarı, Sincan İlaç Araştırma Enstitüsü, Urumçi 830004, Çin

Karaciğer insan vücudunda önemli bir sindirim bezidir ve hastalık ortaya çıktığında insan vücudunun normal metabolik fonksiyonunu etkileyecektir. Çalışmalar göstermiştir ki,karaciğer kanseri oluşturmanın önemli bir yolu karaciğer fibrozisidir.Karaciğer uyarıldığında, bağışıklık hücreleri çok sayıda bağışıklık düzenleyici faktör salgılar, bu da hepatik yıldız hücrelerinin aktivasyonuna ve çoğalmasına, büyük miktarda kolajen sentezine ve karaciğerde büyük miktarda hücre dışı matrisin birikmesine yol açar, bu da karaciğerde büyük miktarda hücre dışı matrisin birikmesine neden olur. fibroz oluşumu. Bu nedenle, karaciğer hastalığı sürecinin herhangi bir aşamasında kontrol, karaciğer hastalığının hasarını azaltabilir ve karaciğer fibrozunun tedavisine yönelik araştırmalar çok önemlidir.

Son yıllarda yapılan araştırmalar göstermiştir ki,cistancheKaraciğer hastalığının tedavisinde bariz iyileştirici etkiye sahiptir ve karaciğer fibrozunun tedavisinde bariz avantajlar gösterir.

Sincan'da gerçek bir tıbbi malzeme olan Cistanches Herba, "çöl ginsengi" olarak bilinir ve binlerce yıldır klinik olarak kullanılmaktadır.

Cistanche'nin Faydaları

Modern araştırmalar, çeşitli biyolojik aktivitelere sahip olduğunu göstermiştir.anti-aging, karaciğeri koruma, yorgunluğu giderme, anti-osteoporoz, müshil vb.Siz ve diğerleri [8] gösterdi kicistanchefeniletanoid karaciğer fibrozunun derecesini hafifletebilir. Zhang ve ark.[9] hepatik stellat hücrelerin aktivasyonunun ve karaciğer fibrozunun aşağıdakiler tarafından inhibe edilebileceğini buldu.cistanchefeniletanoid lipozomlar. Ancak farmakolojik etkilericistancheKaraciğer fibrozunun tedavisinde ve mekanizması hala belirsizdir ve açıklığa kavuşturulmaya devam etmektedir.

Bu çalışmada, bir "bileşen-hastalık-hedef-yol" ağ diyagramı [10] oluşturmak için ağ farmakolojisi kullanıldı ve ardından ilgili hedef ve hedefleri tahmin etmek için protein etkileşimi ve hedef zenginleştirme analizi [11] kullanıldı.cistanchetedavisindekaraciğer fibrozu. Moleküler yerleştirme teknolojisi ve hayvan deneylerinden geçen yol, aktif bileşenlerinin farmakolojik etkileri için bir temel sağlar.cistanchekaraciğer fibrozu tedavisinde.

1 Cistanche malzemesi ve yöntemleri

1.1 Cistanche Deserticola'nın aktif bileşenlerinin ilgili hedeflerinin taranması

1.1.1 Cistanche'nin kimyasal olarak aktif bileşenlerinin taranması

Arama terimi olarak "Cistanche" kullanılarak, Geleneksel Çin Tıbbı Sistemi Farmakoloji Analiz Platformu'nda (TCMSP) yüzde 30'den büyük veya buna eşit oral biyoyararlanım (OB) ilaca benzerliği (ilaç benzerliği) tarandı. . , DL) Aktif bileşenler olarak 0.18'e eşit veya daha büyük ve daha sonra Cistanche'nin ilgili bileşenlerini desteklemek için Çin Tıbbı Ansiklopedisi Veritabanı (ETCM), Çin Tıbbı Araştırma Kapsamlı Veritabanı (TCMID), CNKI veritabanı, PubMed veritabanı ile birleştirildi.

1.1.2 Cistanche ve karaciğer fibroz hastalığı hedeflerinin aktif bileşenleri

Uniprot veri tabanı kullanılarak, Cistanche'nin aktif bileşenlerine karşılık gelen protein hedefleri tarandı. Daha sonra, genom açıklama veri tabanı ve Mendel genetik veri tabanı, veri tabanındaki ilgili protein hedeflerini elde etmek için anahtar kelime olarak "karaciğer fibrozu" ile arama yapmak ve son olarak ikisinin ortak protein hedeflerini elde etmek için kullanıldı.

1.1.3 "Cistanche'nin aktif bileşenleri - karaciğer fibrozu - protein hedefleri" ağının oluşturulması ve analizi String veritabanı, görselleştirme için "Cistanche'nin aktif bileşenleri - karaciğer fibrozu - protein hedefleri" ağı oluşturmak için kullanıldı. Her düğüm bir geni, proteini veya aktif bileşeni temsil eder ve düğümler arasındaki bağlantı, aktif bileşen ve ilgili hedefler arasındaki bağlantıyı temsil eder. Ağdaki çekirdek genler, ağın derecesine göre analiz edilir ve sonunda protein etkileşim ağı elde edilir. .

1.1.4 GO ve KEGG zenginleştirme analizi

David veri tabanı, karaciğer fibrozu tedavisinde Cistanche hedeflerini içe aktardı, GO ve KEGG zenginleştirme analizi yaptı ve Count değerine göre tarandı.

1.1.5 Moleküler yerleştirme

Cistanche Cistanche'ın ana aktif bileşenlerinin 2 boyutlu kimyasal yapısını PubChem veri tabanı aracılığıyla elde edin, ilgili çekirdek hedef proteinin 3 boyutlu yapısını PDB veri tabanında bulun, en yüksek bağlanma enerjisine sahip siteyi elde etmek için Autodock yazılımı aracılığıyla moleküler yerleştirme gerçekleştirin ve nihayet Pymol yazılım işleme yoluyla görselleştirin.

1.2 Cistanche Faydalarında hayvan deneyleri

1.2.1 Deney hayvanları

18-22 g ağırlığındaki SPF dereceli 60 Kunming erkek faresi, Xinjiang Tıp Üniversitesi Deney Hayvanları Merkezi'nden satın alındı. Üretim lisans numarası SCXK (yeni) 2018-0002, kullanım lisans numarası SYXK (yeni) 2018-0003 ve etik onay numarası: IACUC-20210326-10.

1.2.2 Ana reaktifler

Cistanche fenetanoid glikozitler (CPhG'ler) (Xinjiang Hetian Dichen Pharmaceutical and Biological Co., Ltd.'den satın alındı, parti numarası: 20180502); Bileşik Biejia Ruangan Tabletleri (Moğolistan Furui Technology Co., Ltd.'nin ürünü); fare laminin (LN), Fare hyaluronik asit (HA), fare tip III prokollajen (PCIII), fare tip IV kollajen (Col IV) ELISA kiti.

(Beijing Jianglai Reagent Co., Ltd., parti numarası: JL20286-96T, JL2406-96T, JL20169-96T, JL20128-96T); Masson trikrom boyama solüsyonu (Zhuhai Besso, parti numarası: 20210115); Hematoksilen ve eozin (HE) boyama kiti (Solebo HE boyanmışColor Kit G1120); SuperReal Fluorescence Quantitation Master Mix Reaktif Renk Sürümü (SYBR Green, Tiangen FP205-02); FastKing RT Kiti (gDNase ile, Tiangen KR116-02); Transzol yukarı (Tam Altın ET111-01).

1.2.3 Ana Araçlar

HZQ-C tam nemli sabit sıcaklık kültürü çalkalayıcı (Shanghai Yiheng Scientific Instrument Co., Ltd.); DK-8D elektrikli ısıtma sabit sıcaklıkta su banyosu (Jiangsu Jinyi Instrument Technology Co., Ltd.); HC-3018R yüksek hızlı soğutmalı santrifüj (Anhui Zhongke Zhongjia Science and Technology Co., Ltd.) Instrument Co., Ltd.); Varioskan Flash mikroplaka okuyucu, QuantStudio 6 gerçek zamanlı PCR cihazı (Thermo Fisher Scientific, ABD); Retsch Yüksek verimli doku öğütücü MM400; ST5020 çok fonksiyonlu boyama makinesi (Shanghai Leica Trading Co., Ltd.).

1.2.4 Deneysel yöntem

Hayvanlar rastgele olarak normal kontrol grubu, model grubu, pozitif kontrol grubu (840 mg/kg), CPhGs yüksek doz grubu (CPhGs-H, 700 mg/kg), orta doz grubu (CPhGs-M, 350 mg/kg) olarak ayrıldı. , Düşük doz grubu (CPhGs-L, 175 mg/kg);

Pozitif kontrol grubuna, ilacın talimatlarına (bir seferde 4 tablet, günde 3 defa; 0.5 g tablet) ve tarafından yayınlanan "İşlevsel Deney Eğitimi"ne atıfta bulunarak Bileşim Biejia Ruangan Tabletleri verildi. Halkın Askeri Tıp Yayınevi. Dönüştürmek; CPhG'ler yüksek, orta ve düşük doz grupları ilgili literatüre [17] ve deney öncesi sonuçlarına dayanmaktadır ve sıçan CPhG'leri yüksek, orta ve düşük doz grupları (500, 250, 125 mg/kg) sıçanların dozlarına göre dönüştürülmüştür. ve fareler CPhG'lerin yüksek, orta ve düşük doz gruplarına dönüştürülen 1:1.4 oranı (700, 350, 175 mg/kg), her grupta 10 fare; normal kontrol grubuna aynı miktarda normal salin enjekte edildi ve diğer gruplardaki farelere enjekte edildi. Tüm farelere, 8 hafta boyunca haftada iki kez yüzde 10 CCl4 zeytinyağı çözeltisi (5 mL/kg) intraperitoneal olarak enjekte edildi, bir karaciğer fibroz fare modeli oluşturmak için; normal kontrol grubuna ve model grubuna gavaj ile distile su, diğer gruplara gavaj ile distile su verildi. Hepsi 8 hafta boyunca ayarlanan dozda gavaj yoluyla uygulandı.

1.2.5 Biyokimyasal indeks tespiti

Karaciğer doku homojenatındaki LN, HA, PCIII ve Col IV içerikleri mikroplaka okuyucu ile ELISA yöntemi ile tespit edildi ve kit talimatlarına harfiyen uyuldu.

1.2.6 Karaciğerin histopatolojik gözlemi

Karaciğer dokusu yüzde 4 paraformaldehit solüsyonu ile sabitlendi, etanol içinde dehidre edildi, parafine gömüldü ve daha sonra kesitler alındı ​​ve karaciğer dokusu kesitlerini gözlemlemek için HE ve Masson ile boyandı.

1.2.7 Gerçek zamanlı floresan kantitatif PCR ile PI3K ve AKT mRNA transkripsiyonunun tespiti

Fare karaciğer dokusu çıkarıldı ve fare karaciğer dokusunun toplam RNA'sını çıkarmak için Transzol up reaktifi ile ilave edildi. Fare karaciğerinde PI3K ve AKT'nin mRNA transkripsiyonunu belirlemek için RT-PCR kullanıldı. İlgili gen dizileri Tablo 1'de gösterilmiştir.

1.2.8 İstatistiksel yöntemler

İstatistiksel analiz için SPSS 21.0 kullanıldı ve veriler ortalama ± standart sapma (x ± s);

Gruplar arasında ortalamaların karşılaştırılması için tek yönlü ANOVA; aksi takdirde, sıra toplamı testi kullanıldı ve test seviyesi=0.05 idi.

Cistanche Fonksiyon Deneyinin 2 sonucu

2.1 Cistanche'nin aktif bileşenlerinin taranması

Toplam 75 bilinen bileşencistanchetarandı ve yüzde 30'e eşit OB ve 0,18'den büyük DL ve 0.18'e eşit olarak belirlendi ve 8 nitelikli aktif bileşen elde edildi: -sitosterol ve araşidonat. , Suzilakton (suchilakton), Liriodendron reçine B dimetil eter (yangambin), kersetin (kersetin), dipikain (marckine), verbascoside (acteoside), echinacoside (echinacoside), Uniprot veri tabanından toplam 157 hedef baz elde edildi.

(bkz. Şekil 1).

Şekil 1 Cistanches Herba-aktif bileşen-hedef haritası

2.2 "Cistanche Deserticola'nın aktif bileşenleri - karaciğer fibrozu - protein hedeflerinin" ağ yapısı ve analizi

The GeneCards and OMIM databases were searched to obtain 1 005 targets related to liver fibrosis, and the 157 potential protein targets of Cistanche deserticola and 1 005 protein targets related to liver fibrosis were deduplicated, and Venn diagrams were drawn ( See Figure 2), import 92 common targets into the String database, and perform visual processing to construct a network of "active components of Cistanche deserticola - liver fibrosis - protein targets" (see Figure 3), in which the core targets are: AKT, ICAM1, MMP9, BCL-2, ADRB2, CASP3, JUN, PON1, PIK3CG, RXRA, CASP8, PPARG, BAX, NOS3, PRKCA, TGFB1, CASP9, etc. degree>50 eşik olarak kullanılmış ve protein etkileşim ağ diyagramı, derece ve birleştirme puanı değerine göre çizilmiştir (bkz. Şekil 4).

Şekil 2 Karaciğer fibrozu tedavisinde Cistanches Herba'nın ilaç-hastalık ortak hedefinin Venn şeması

Şekil 3 Karaciğer fibrozu tedavisinde Cistanches Herba'nın "bileşen-ortak hedef hastalığı"nın ağ diyagramı

2.2 Ağ inşası ve "Cistanche -karaciğer fibrozu-protein hedeflerinin aktif bileşenlerinin" analizi

GeneCards ve OMIM veri tabanı, karaciğer fibrozu ile ilgili 1 005 hedef elde etti, Cistanche Deserticola'nın 157 potansiyel protein hedefini ve hastalık karaciğer fibrozu ile ilgili 1 005 protein hedefini tekilleştirdi ve Venn diyagramlarını çizdi (bkz. Şekil 2), içe aktar 92 ortak hedefleri String veritabanına ekleyin ve çekirdek hedefleri AKT, ICAM1, MMP9 , BCL{ {10}}, ADRB2, CASP3, HAZİRAN, PON1, PIK3CG, RXRA, CASP8, PPARG, BAX, NOS3, PRKCA

Not: Şekildeki düğüm alanı derece değerini, bağlantı kalınlığı ise birleştirilmiş puan değerini temsil eder.

2.3 GO ve KEGG zenginleştirme analizi

David veri tabanı aracılığıyla, karaciğer fibrozunun tedavisindeki 92 protein hedefi, zenginleştirme analizi için veri tabanına aktarıldı (bakınız Şekil 5). Hücresel bileşenlerin, biyolojik süreçlerin ve moleküler fonksiyonların Sayım değerleri ile ilk on girişi seçin. Bunların arasında biyolojik süreçler, DNA transkripsiyonunun pozitif düzenlenmesini, apoptozun negatif düzenlenmesini, yaşlanmayı, inflamatuar yanıtı, hücre proliferasyonunun pozitif düzenlemesini, apoptoz, sinyal iletimini vb. içerir. Moleküler fonksiyonlar esas olarak enzimlerin, proteinlerin, transkripsiyon faktörlerinin bağlanmasını ve aynı proteinler, DNA bağlanması, çinko iyonu bağlanması vb.; hücre bileşenleri esas olarak çekirdek, sitoplazma, hücre dışı ortam, plazma zarı, hücre zarı, mitokondri vb.

İlk 20 yol, David veri tabanına ve Count değerine dayalı olarak tarandı ve yol zenginleştirme analizi, karaciğer fibrozu tedavisinde Cistanche Deserticola'nın potansiyel hedefleri üzerinde yapıldı (bakınız Şekil 6). Elde edilen ana yollar şunlardır: PI3K-AKT (bakınız Şekil 7), TNF sinyal yolu, HBV sinyal yolu, vb.

Şekil 5 Karaciğer fibrozu tedavisinde Cistanches Herba'nın potansiyel hedeflerinin GO analizi

Şekil 6 KEGG sinyal yolunun zenginleştirme analizi

Şekil 7 Karaciğer fibrozu tedavisinde Cistanches Herba'nın PI3K-AKT yolu

2.4 Cistanche'nin aktif madde-karaciğer fibrozisi-hedef-yol ağının inşası

"Cistanche Deserticola-karaciğer fibrozisi-hedef yolunun aktif bileşenlerinden" oluşan bir ağ oluşturmak için görsel işleme (bkz. Şekil 8).

Şekil 8 Cistanches Herba-karaciğer fibrozisi-protein hedef yolunun aktif bileşeni

Not: Kırmızı, karaciğer fibrozunu temsil eder; Yeşil, Cistanches Herba'nın aktif bileşenlerini temsil eder; Turuncu yolu temsil eder, mavi protein hedefini temsil eder ve çizgi segmenti Cistanches Herba ve karaciğer fibrozu arasındaki ilişkiyi temsil eder

2.5 Karaciğer fibrozu tedavisinde Cistanche'nin aktif bileşenlerinin moleküler yerleştirme sonuçları

En önemli iki aktif bileşencistanche, Verascoside ve Echinacea, Autodock yazılımı tarafından ICAM1, AKT1 ve MMP9 temel albümin hedefleri ile moleküler olarak kenetlendi. Bağlanma enerjileri Tablo 2'de gösterilmektedir. Sonuçlar görselleştirme için Pymol yazılımına aktarıldı ve moleküler yerleştirme sonuçları, verbasin ve AKT'nin ASN-54, TYR-272, pozisyonlarında hidrojen bağları oluşturduğunu gösterdi. ve LYS-297; 10 konumunda bir hidrojen bağı oluşturur; Verbasin ve MMP9, LEU-188, ALA-189, GLU-227, HIS-230, HIS-236, HIS-226'da bir hidrojen bağı oluşturur. pozisyonlar;

Ekinezya, GLU-356, HIS-297, ASN-296, ALA-226, LYS-294 ve GLU-228 konumlarında AKT ile hidrojen bağları oluşturur. ; ekinakozit, DA-7, DT-8, DT-11, DT-12 ve DC-13 konumlarında ICAM1 ile hidrojen bağları oluşturur;

Verbasin, HIS-230, HIS-236, HIS-226, GLU-227, ALA-189, LEU-188 konumlarında MMP9 ile hidrojen bağları oluşturur, TYR-248 (bkz. Şekil 9).

Tablo 2 Ana aktif bileşenler ve temel protein hedefleri arasındaki bağlanma enerjisi (kJ/mol)

Şekil 9 Moleküler yerleştirmenin sonuçları

Not: AF, acteoside ve AKT, acteoside ve ICAM1, acteoside ve acteoside'ın moleküler yerleştirme diyagramlarıdır.Sırasıyla MMP9, ekinakozit ve AKT, ekinakozit ve ICAM1, ekinakozit ve MMP9.

2.6 Her fare grubunda LN, HA, PCIII ve Col IV içeriklerindeki farklılıklar

Normal grupla karşılaştırıldığında model grubunda LN, HA, PCIII ve Col IV içerikleri artmış ve aradaki fark istatistiksel olarak anlamlıydı (P<0.01). the="" contents="" of="" pciii="" and="" col="" iv="" (p="" <="" 0.01)="" indicated="" that="" cphgs="" had="" an="" anti-hepatic="" fibrosis="" effect="" (see="" table="" 3,="" figure="">

Tablo 3 Farklı gruplardaki farelerde LN, HA, PCIII ve Col IV içeriklerindeki farklılıklar (x  ± s, n = 9)

Not: Normal kontrol grubuyla karşılaştırıldığında,#P<0.01; compared="" with="" model="" group,="">**P<>

2.7 Karaciğerin histopatolojik gözlemi

HE boyama (bakınız Şekil 10): Normal grupta, hepatositlerin morfolojisi normaldi, hepatik lobüller intakttı ve hepatositlerin ve inflamatuar hücrelerin dejenerasyonu ve nekrozu dağılımı yoktu. Portal alanı açıkça görülebiliyordu ve merkezi damarın çevresinde düzgünce düzenlenmiş hepatositler vardı. Model grubunda bariz hepatosit punktat nekrozu, proliferasyon, ödem, inflamatuar hücre infiltrasyonu ve çok sayıda eozinofilik granül vardı. Yüksek, orta ve düşük doz grupları ve pozitif çiftler

Kontrol grubunda hepatositlerin nekroz derecesi hafifti ve eozinofilik granüller önemli ölçüde azaldı.

Masson boyaması (bakınız Şekil 11): normal grup hepatositlerin tam morfolojik yapısına sahipti ve kollajen boyamasından sonra damar duvarında sadece birkaç kollajen lifi görüldü; model grubunda portal alanı çevreleyen mavi liflerden oluşan çok sayıda psödolobül ve çok sayıda vakuol görüldü. Yüksek, orta ve düşük doz grupları ve pozitif kontrol grubu, karaciğer dokusundaki hepatik fibroz seviyesini önemli ölçüde azaltabilir ve portal alan çevresindeki mavi lifler önemli ölçüde azaltılmıştır.

Şekil 10 CCl4 tarafından indüklenen karaciğer fibrozu olan farelerde CPhG'lerin hepatik histopatolojik değişiklikler üzerindeki etkisi

Not: A: Normal; B: Modeli; C: Pozitif kontrol grubu; D: CPhGs-H; E: CPhGs-M; F: CPhGs-L. Aşağıdaki aynı.

Şekil 11 CCl4 tarafından indüklenen karaciğer fibrozisi olan farelerin karaciğer dokusundaki kolajen liflerinin değişiklikleri üzerinde CPhG'lerin etkisi

2.8 Gerçek zamanlı floresan kantitatif PCR ile PI3K ve AKT mRNA ifadesinin tespiti

Normal kontrol grubu ile karşılaştırıldığında, model grubundaki farelerin karaciğer dokusunda PI3K ve AKT mRNA'nın ekspresyonu önemli ölçüde yukarı regüle edildi (P<>

Model grubu ile karşılaştırıldığında, pozitif kontrol grubunda PI3K ve AKT'nin mRNA ifadesi ve Cistanche Deserticola'dan elde edilen yüksek, orta ve düşük doz fenetil alkol toplam glikozit grupları önemli ölçüde azaldı (P<0.01) (table="">

Tablo 4 Fare karaciğer dokusunda PI3K ve AKT mRNA'nın transkripsiyonu (x± s, n = 9)

Not: Normal kontrol grubu ile karşılaştırıldığında, #P<0.01; compared="" with="" model="" group,=""><>

3 Tartışma ve sonuçlar

Karaciğer fibrozunun gelişim süreci karmaşıktır ve çeşitli sitokinler ve hücresel yollar "iletişim kurar" ve karmaşık bir etkileşim ağı oluşturarak birbirlerini etkiler. Bu nedenle, tek hedefli ve tek kanallı tedavinin çalışması zordur. Geleneksel Çin tıbbı, insan vücudunu sistematik olarak düzenlemek için çok bileşenli, çok hedefli ve karmaşık eylem özelliklerine sahiptir. Cistanche Deserticola karaciğeri koruyucu etkiye sahiptir. Cistanche Deserticola'nın aktif bileşenleri, geleneksel Çin tıbbı TCMSP veritabanı ve diğer veri tabanları aracılığıyla elde edilir: Verbasin, echinacoside, -sitosterol, arachidonic asit, suzilactone, Liriodendron Resinol B dimethyl ether, quercetin, dipicaine.

Çalışmalar, feniletanoid glikozitlerincistancheana aktif bileşenleridir.cistancheekinakozid ve verbaskosit ana biyoaktif bileşenler olarak kabul edilir.cistanche. Krizantem glikozitlerinin etkisi aşağıdakilerle ilgilidir:karaciğer sorunu

hedeflenmiş ve moleküler yerleştirme ile doğrulanmıştır.

EkinezyaveverbascosideCistanche'deki ana bileşenler olarak, anti-hepatik fibroz etkisi oynarlar.apoptozun düzenlenmesihepatik stellat hücrelerden oluşur. ICAM1, AKT ve MMP9, karaciğer fibrozisinin tedavisinde ekinakozid ve verbasinin hedefleri olabilir. Bir hücre yapışma faktörü olarak ICAM1, karaciğer hasarı durumunda bol miktarda eksprese edilir. ICAM1'in aşırı ekspresyonunu inhibe ederek karaciğer fibrozunu inhibe edebilir. gelişim. Serin/treonin protein kinaz (AKT), PI3K'nın akış aşağısında önemli bir hedef kinazdır. Aktive edilmiş AKT, hepatik stellat hücrelerin proliferasyonunu teşvik etmek ve karaciğer fibrozunun ilerlemesini hızlandırmak için ayrıca aktive edilir.

Aksine, AKT'nin engellenmesi, karaciğer fibrozunun ilerlemesini engelleyecektir; MMP-9 normal karaciğer kolajen matrisini bozabilir, karaciğer hücrelerinin iç ortamını tahrip edebilir, hepatik yıldız hücrelerinin aktivasyonunu teşvik edebilir, büyük miktarda kolajen salgılayabilir ve karaciğer fibrozunun gelişimini teşvik edebilir. Karaciğer fibrozu oluşumu; Bu deneyde, karaciğer fibrozunun bir fare modelini oluşturmak için CCl4'ün kullanılması klasik modelleme yöntemlerinden biridir. CCl4, intraperitoneal enjeksiyon yoluyla hayvan vücuduna enjekte edilir. PCIII ve Col IV içerikleri önemli ölçüde arttı; model grubu ile karşılaştırıldığında, CPhG'ler yüksek, orta ve düşük doz grupları LN, HA, PCIII ve Col IV içeriklerini önemli ölçüde azalttı; HE ve Masson test sonuçları, model grubu ile karşılaştırıldığında, CPhG'lerin yüksek, orta ve düşük doz grubunda hepatosit nekrozunun derecesinin hafif olduğunu, eozinofilik granüllerin önemli ölçüde azaldığını ve portal alan çevresindeki mavi liflerin azaldığını gösterdi. Önemli ölçüde azaltılmış. Yukarıdaki sonuçlar, karaciğer fibrozunun Cistanche Deserticola'nın toplam glukozitleri tarafından inhibisyonunun, ICAM1, AKT ve MMP9'un hedefleriyle ilişkili olabileceğini ve ilgili proteinlerin ekspresyonunun daha fazla saptanması gerektiğini göstermiştir.

Karaciğer fibrozu oluşumuna çeşitli faktörler neden olur. Bunlar arasında, PI3K-AKT yolu, yol zenginleştirme analizi ile elde edilen en üst sıradaki yoldur. PI3K-AKT sinyal yolu, hücre proliferasyonu ve apoptozun düzenlenmesinde, insan tümörijenezinin indüklenmesinde ve HBV geninde yer alır. Karaciğer fibrozunun tedavisi için önemli yollardan biridir. PI3K-AKT yolu, hepatik kan damarlarının oluşumunu aktive edebilir, kan akışını iyileştirebilir, hücre dışı matrisi yeniden oluşturabilir, otofajiyi düzenleyebilir, hepatositlerin apoptozunu inhibe edebilir ve hepatositlerin proliferasyonunu teşvik ederek karaciğer fibrozuna yol açabilir.

Ekinezyaveayrıntılısırasıyla ICAM1, AKT ve MMP9 hedeflerini ve toplamını düzenleyerek karaciğer hücrelerinin çoğalmasını ve aktivasyonunu engelleyebilir.Acteosideiçindefeniletil glikozitlernın-nincistancheenerji metabolizmasına katılarak karaciğer lifi ile etkileşime girebilir,karaciğer hücrelerinin proliferasyonu ve apoptozisi. Normal grupla karşılaştırıldığında, model grubundaki farelerin karaciğer dokusunda PI3K ve AKT mRNA'nın ekspresyon seviyeleri önemli ölçüde yukarı regüle edildi; model grubu ile karşılaştırıldığında, Cistanche Deserticola'nın toplam feniletanol glikozitleri yüksek, orta ve düşüktü. PI3K ve AKT'nin mRNA ekspresyonları doz grubunda önemli ölçüde azalmıştır ve mekanizma PI3K-AKT yolunun aktivasyonunu engelleyebilir ve karaciğer fibrozunun ilerlemesini geciktirebilir.

Acteosideergosteroside ve verbascoside olarak da adlandırılır. Fenilpropanoid glikozit bileşiklerine aittir. Pul pul yaprakları ile kuru etli saplardan elde edilir.Cistanche tübülozaYC Ma. Cistanche özünün ana etkili bileşenlerinden biridir.

Acteosideanti-inflamatuar, bağışıklığı güçlendirme, anti-anoksi, serbest radikalleri temizleme, DNA bazlarını tamir etme ve karaciğer fibrozunu tedavi etme gibi çeşitli fizyolojik etkileri olan, güçlü biyolojik aktiviteye sahip bir bileşikler sınıfıdır.

Karaciğer yağlanmasında Cistanche Faydalarını öğrenmek için buraya tıklayın

Sonuç olarak, toplamCistanche'nin feniletanol glikozitlerifarelerde CCl4- ile indüklenen karaciğer fibrozunu etkili bir şekilde hafifletebilir ve mekanizma, PI3K-AKT sinyal yolunun aracılık ettiği hepatik yıldız hücrelerinin proliferasyonu ve aktivasyonu ile ilgili olabilir. Cistanche'nin farmakolojik etkilerinin temelini atın.