Cistanche'de Flavonoidlerin Ekstraksiyonu ve Antioksidan Özellikleri Üzerine Bir Araştırma

Daha fazla bilgi için:ali.ma@wecistanche.com

şarkı yang

(Anshan Ürün Kalite Denetim ve Muayene Enstitüsü, Anshan 114006, Liaoning)

Soyut: Toplamflavonoidleriçindecistanche“ultrasonik titreşim yöntemi” ve “Soxhlet özütleme yöntemi” ile özütlenmiş, içerikleri veantioksidanözellikleri analiz edildi. Belirleme sonuçları, toplam içeriğinflavonoidleriçindecistancheUltrasonik titreşim yöntemiyle elde edilen ekstraksiyon, Soxhlet ekstraksiyon yöntemiyle elde edilenden daha yüksekti. Deneylerle belirlenen geri kazanım oranı yüzde 96.85 -99.46, hassasiyet yüksek ve numune çözeltisi 2 saat içinde çok kararlı, bu da UV-Vis spektrofotometrisinin yüksek doğruluk, küçük sapma ve deneysel koşulların kolay kontrolü. Analiz edilmesi ve belirlenmesiantioksidanfaaliyetiflavonoidleriçindecistanchefloresan yöntemiyle, temizleme oranı yüzde 91.5 idi, bu daflavonoidleriçindecistanchegüçlü olmakantioksidanözellikleri. Deneyde, tespit etmek için floresan analizinin kullanıldığı bulundu.antioksidantoplam kapasiteflavonoidlerözütünde hız, basitlik, yüksek hassasiyet ve iyi tekrarlanabilirlik avantajları vardır.

Anahtar Kelimeler: Cistanche; flavonoidler; ultrason; antioksidan

Çince Kütüphane Sınıflandırma Numarası: TQ028 Belge Tanımlama Kodu: A Makale Numarası: 1004-0935 (2013) 01-0013-03

cistanche

Yaşlanma karşıtı organik Cistanche için tıklayın

cistanchetonik bir ilaç olarak yaygın olarak kullanılmaktadır. farmakolojik etkileri ve kimyasal bileşenleri üzerine araştırmacistancheson yıllarda büyük ilerleme kaydetti. İç Moğolistan AlxacistancheGrup, yin'i besleyen ve yang'ı besleyen, bağırsakları nemlendiren, insan bağışıklık fonksiyonunu artıran, endokrin düzenleyen ve yaşlanmayı geciktiren bir dizi Cistanche geliştirdi. Likör,cistanchesağlık sıvısı Japonya'da et fıtığı, cinsel işlev bozukluğu ve amnezi için iyileştirici veya tedavi edici bir ajan olarak kullanılır. Amerika Birleşik Devletleri'nde ekinezya, vücudun bağışıklığını iyileştirmek için sağlık ürünlerine de dönüştürülür. Bu temelde, farmakolojik etkilerinin aktif bileşenleri ve etki mekanizmaları hakkında derinlemesine araştırma yapmalıyız. Etkinliği sağlama öncülü altında, geleneksel Çin tıbbı müstahzarlarını iyileştirmeli, kalite kontrol seviyesini iyileştirmeli ve kesin iyileştirici etkiler, güvenli kullanım ve kontrol edilebilir kalite geliştirmeliyiz. Geleneksel Çin tıbbının yeni ürünleri; Öte yandan, Cistanche yetiştirme teknolojisinin araştırmasını güçlendirmeli, Cistanche'nin standart ekimini ve sanayileşmiş üretimini gerçekleştirmeli, suni olarak cistanche ekmeli ve cistanche ve ev sahibi bitkilerin sanayileşmiş bir yetiştirme üssü kurmalı ve kaynak sıkıntısı sorununu çözmeliyiz. Aynı zamanda, batı çöl bölgesindeki çevresel yönetişim daha da gerçekleştirilecektir. Çeşitli yönlerden sürekli derinlemesine araştırma ile ülkemizin bu geleneksel Çin tıbbı, kesinlikle uluslararası pazara tanıtılacak ve Çin tıbbının modernizasyonunu hızlandıracaktır.

1 Deneysel kısım

1.1 Deneysel alet

H, H, S, 21-tipi elektrikli ısıtma sabit sıcaklıkta su banyosu (Shanghai No. 5 Tıbbi Alet Fabrikası); TG328A elektro-optik analitik terazi (Shanghai Tianping Enstrüman Fabrikası); 40 ağ elek (Zhejiang Hongxing Enstrüman Fabrikası) KQ-250B ultrasonik çıkarıcı (Kunshan Ultrasonic Instrument Co., Ltd.); Soxhlet Çıkarıcı (Zhejiang Hongxing Enstrüman Fabrikası); Model 766-2 Uzak Kızılötesi Radyasyon Kurutma (Shanghai Sunshine Instrument Co., Ltd.); Model HX-200Yüksek Hızlı Çin Tıbbı Kırıcı (Xi'an Hardware, Zhejiang Yongkang) İlaç Fabrikası); TU-1201 UV spektrofotometresi (Beijing Puxi General Instrument Co., Ltd.); PHS-3C hassas dijital asitlik ölçer (Shanghai Tianda Instrument Co., Ltd. tarafından üretilmiştir); Floresan spektrofotometre (VARIAN)

1.2 Deneysel reaktifler ve ilaçlar

cistanche(laboratuvarda sağlanır); mutlak etanol (analitik saflık) (Shenyang Xinhua Reaktif Fabrikası); rutin (standart) (laboratuvarda sağlanır); 50 g/L sodyum nitrit solüsyonu (ev yapımı); 100g/L Alüminyum nitrat çözeltisi (ev yapımı); 40 g/L sodyum hidroksit solüsyonu (ev yapımı); PH=6.5 karışık fosfat çözeltisi: 0.1mol/L disodyum hidrojen fosfat, 0.1mol/L potasyum dihidrojen fosfat; benzoik asit Çözeltisi: 0.400 0 g benzoik asit (AR Shenyang Reaktif Fabrikası), pH=9.5 olan karışık bir fosfat çözeltisi içinde çözündürülür, su ile 100 mL'ye seyreltilir ve karanlıkta saklanır. daha sonra kullanım; Cu* solüsyonu: 1.0 x IO"g/mL; Hidrojen peroksit (AR, Shenyang No. 1 Reaktif Fabrikası): yüzde 30; 0.1 MoVL karışık fosfat (disodyum hidrojen fosfat, AR, Shenyang Xincheng Chemical Plant; potasyum dihidrojen fosfat, AR, Shenyang Hefu Kimyasal Reaktif Dağıtımı) Çözeltisi; Su iki kez damıtılmış sudur.

1.3 Cistanche'de toplam flavonoidlerin ekstraksiyonu

1.3.1 Cistanche Deserticola'dan flavonoidlerin ekstraksiyonu (ultrasonik yöntem)

2,000 g (bir 40-gözenekli elekten geçerek) doğru tartın.cistanche100 mL'lik konik bir şişeye, oda sıcaklığında 1:15 katı-sıvı oranında yüzde 95 etanol reaktifi ekleyin ve her seferinde ultrasonik ekstraksiyon gerçekleştirin. 30 dakika sonra, emme filtrasyonu gerçekleştirin, filtre kalıntısını geri kazanın, ultrasonik çalkalama, emme filtrasyonu, ultrasonik ekstraksiyon için 3 kez yüzde 95 etanol reaktifi ekleyin, istenen özü elde etmek için 3 süzüntüyü birleştirin, hacmi sabit hale getirmek için yüzde 95 etanol reaktifi ekleyin 100 mL'lik bir ölçülü balona koyun ve bir kenara koyun.

1.3.2 Cistanche'den flavonoidlerin ekstraksiyonu (Soxhlet ekstraksiyon yöntemi) P]

10.000 Og (bir 40-gözenekli elekten geçirilen) patlıcan püresini doğru bir şekilde tartın, yağı alınmış filtre kağıdına sarın, bir ucunu bağlayın ve Soxhlet ekstraktörünün ekstraksiyon tüpüne koyun. Özütleyicinin yüzde 95 etanol reaktifini ekstraksiyon şişesine yakl. Hacmin 1/2'si kadardır, daha sonra Soxhlet ekstraktörünü kurun, 4 saat boyunca Soxhlet ekstraksiyonu için özütleyicinin (etanol) kaynama noktasından biraz daha yüksek sabit sıcaklıkta bir su banyosu kullanın, ardından soğutun, döner buharlaştırma, konsantrasyon ve belirlemek için yüzde 95 etanol reaktifi kullanın. 100 mL'lik ölçülü balona koyun ve bir kenara koyun.

Yaşlanma karşıtı

1.3 Çıkarılan malzeme içeriğinin belirlenmesi ve geri kazanım oranı deneyi

1.3.1 İçerik belirleme ve kurtarma deneyi

Altı adet 25 mL'lik ölçülü balon alın, ultrasonik yöntemle ekstrakte edilen et Shuangrong numune sıvısından 0.10, 0.20 ve 0.30 mL çekin. 3 ölçülü balon, son 3 ölçülü balona aynı miktarda numune sıvısı ekleyin ve ardından sırasıyla 1.0 mL standart rutin solüsyonu ekleyin, 6 ölçülü balona 1 mL 50 g/L sodyum nitrit solüsyonu ekleyin, iyice çalkalayın , ve 7 dakika bekletin; 1 mL 100 g/L alüminyum nitrat solüsyonu ekleyin, İyice çalkalayın ve 7 dakika bekletin; 10 mL 40 g/L sodyum hidroksit çözeltisi ekleyin ve ayrıca iyice çalkalayın ve 7 dakika bekletin; yüzde 95 etanol çözeltisi ile işarete kadar seyreltin, iyice çalkalayın ve 15 dakika bekletin; Tonerin boş çözeltisi bir referanstır, absorbans A 503 nm'de ölçülür ve konsantrasyon standart eğriden hesaplanır

Tablo 1 İçeriğiflavonoidler benn Cistanche

Altı adet 25 mL'lik ölçülü balon alın, striata'nın Soxhlet ekstraksiyon yönteminden 15 mL çekin: püre örnek çözeltisi ve hacmi 100 mL'lik ölçülü balona ve pipetle 0 doldurun .40, 0,50 ve 0,60 mL ondan. 3 ölçülü balonda, son 3 ölçülü balona aynı miktarda numune solüsyonu ekleyin, ardından 1.0 mL standart solüsyon ekleyin, 1 mL 50 g/L sodyum nitrit solüsyonu ekleyin, iyice çalkalayın ve 7 dakika bekletin; Daha sonra 1 mL 100 g/L alüminyum nitrat çözeltisi ekleyin, iyice çalkalayın ve 7 dakika bekletin; sonra 10 mL 40 g/L sodyum hidroksit solüsyonu ekleyin, iyice çalkalayın ve 7 dakika bekletin; yüzde 95 etanol çözeltisi ile işarete kadar seyreltin, İyice çalkalayın, 15 dakika bekletin, boş çözeltiyi referans olarak kullanın, 503 nm'de absorbansı A ölçün ve standart eğriden konsantrasyon C'yi hesaplayın.

1.3.2 Stabilite deneyinin belirlenmesi

0.2 mL numune solüsyonunu pipetleyin, 50 g/L renk reaktifi ile 1 mL sodyum nitrit solüsyonu ekleyin, iyice çalkalayın ve 7 dakika bekletin; 1 mL 100 g/L alüminyum nitrat çözeltisi ekleyin, iyice çalkalayın ve 7 dakika bekletin; 10 mL 40 g/L sodyum hidroksit çözeltisi ekleyin ve ayrıca iyice çalkalayın ve 7 dakika bekletin; yüzde 95 etanol solüsyonuyla işarete kadar seyreltin, iyice çalkalayın ve 15 dakika bekletin; geliştirici ile boş çözeltiyi referans olarak alın ve daha sonra bir ultraviyole-görünür spektrofotometre ile ölçüldü, süre 2 saat olarak belirlendi ve numune çözeltisinin absorbansının 2 saat içinde stabil olduğu ve temelde değişmeden kaldığı bulundu.

Tablo 2 İçeriğiflavonoidlerCistanche'de

1.4 Cistanche cistanche'deki flavonoidlerin antioksidan aktivitesinin analizi, Çin bitkisel tıbbının hidroksil serbest radikalleri üzerindeki süpürme oranının katalitik kinetik florimetrik tayini

1.4.1 Deneysel yöntem

Bir dizi 25 mL kolorimetrik tüpe benzoik asit çözeltisi ekleyin, ardından belirli bir miktarda Co? artı ve hidrojen peroksit, sırayla, pH=6.5'lik bir sabit hacimde 25 mL'lik bir karışık fosfat çözeltisi ile seyreltilir, iyice çalkalanır ve kaynar suya konur 45 dakika banyoda bekletildikten sonra, floresan Her bir çözeltinin yoğunluğu ölçüldü.

1.4.2 Numunenin hidroksil radikallerine temizleme hızının belirlenmesi

Numune solüsyonunun hazırlanması: Partikül boyutu 450 μm olan bir numunenin 1.000 Og'sini doğru bir şekilde tartın ve oda sıcaklığında, her seferinde 20 mL reaktif kullanarak, 60 mL mutlak etanol ile 3 kez ultrasonik olarak ekstrakte edin, 10 dakikalık bir zaman aralığı ile. 3 ekstraksiyon Filtresini birleştirin ve süzüntüyü mutlak etanol ile 100 mL'lik bir ölçülü balona seyreltin.

Reaktif hazırlama: 7.16 g disodyum hidrojen fosfat tartın ve 200 mL su ekleyerek 0.1 mol/L solüsyon elde edin; 2.72 g potasyum dihidrojen fosfat tartın ve 0.1 mol/L'lik bir çözelti elde etmek için 200 mL su ekleyin. İki çözeltiyi karıştırın ve pH=6.5 ile karışık bir fosfat hazırlamak için bir pH metre kullanın; 0.400 0 g benzoik asit (AR Shenyang Reaktif Fabrikası) tartın, pH=9.5 olan karışık bir fosfat çözeltisi ile çözün ve su WOmL ile hacme kadar seyreltin, daha sonra karanlıkta saklayın kullanmak; 0.1547 g Ci/ tartın ve 100 mL 1 mol/L Cu* çözeltisi hazırlamak için] mol/L hidroklorik asit ile çözün. Yüzde 30 hidrojen peroksit çözeltisi hazırlayın.

Örnek çözeltisinden 0.2 ml'yi 25 mL kolorimetrik tüpe alın, sırayla benzoik asit, hidrojen peroksit ve Cu gözleri ekleyin, pH=6 karışık fosfat çözeltisiyle 25 mL'ye seyreltin. 5, iyice çalkalayın ve temizleme oranı formülüne göre ölçün Numunenin hidroksil radikallerine temizleme oranını elde edin.

1.4.3 Hesaplama sonuçları

Tablo 3 Hesaplama sonuçları

Sonuç: Cistanche'deki flavonoidler güçlü antioksidan özelliklere sahiptir.

cistanche'deki flavonoidlerin yaşlanma karşıtı etkisi vardır

2 Sonuçlar ve tartışma

(1) Toplamı çıkarmak için "ultrasonik yöntem" ve "Soxhlet çıkarma yöntemi" kullanmaflavonoidleriçindecistanche çöl çiçeği, bu iki yöntemin karşılaştırılması, ultrasonik yöntemin ekstraksiyon süresini büyük ölçüde kısalttığını ve etkili bileşenlerin ekstraksiyon oranını iyileştirdiğini göstermektedir. Kullanım oranı böylece hammadde tasarrufu sağlar. Aksine Soxhlet ekstraksiyon yöntemi zaman alıcı ve zahmetlidir ve ekstraksiyon etkisi iyi değildir. Bu nedenle, toplam ultrasonik ekstraksiyonflavonoidlergüçlü pratik önemi olan en iyi ekstraksiyon işlemidir.

(2) Toplamın niteliksel analiziflavonoidlerUV spektroskopisi ile rutinin çok uygun bir standart ürün olduğunu gösterdi. Deneysel hesaplama, toplam içeriğinflavonoidleriçindecistancheyüksek hassasiyetle çok yüksektir ve geri kazanım oranı yüzde 96.85 ~ yüzde 99.46'dır, numune 2 saat içinde sabit kalmıştır.

(3) Anti-oksidan analizi ve toplamın belirlenmesiflavonoidleriçindecistancheçöl floresan yöntemi ile gerçekleştirilmiştir. Sonuç: Hesaplanan temizlenme oranı yüzde 91,5 olup,cistancheMacunun kendisi, serbest radikalleri temizleyen ve lipidleri engelleyen güçlü bir antioksidan etkiye sahiptir. Oksidasyon, vb., yaşlanma karşıtı, karsinojenez, iltihaplanma, radyasyon doku iskemisi ve tıp alanındaki diğer hastalıkların araştırmalarında büyük değer taşır.

Referanslar:

[1] Cheng Xiyu, Guo Bin, Ni Wen, Liu Chunchao. Araştırma ilerlemesicistanche[J]. Doğal Ürünlerin Araştırma ve Geliştirme, 2005, 17 (2): 235-240.

[2] Hou Dongyan, Hui Ruihua, et al. Toplamın spektral analiziflavonoidlerhanımeli ve antioksidan aktivitenin belirlenmesi [J]. Analitik Test, 2004, 23 (11): 52-55.

[3] Zhou Gui, Deng Guanghui, Liang Dawen.flavonoidleralıç yapraklarından ultrasonik yöntemle[J]. Güneybatı Tarım Üniversitesi Dergisi, 2005, 27 (5): 605-607.