Bağlamsal Korku Belleğinin Yok Edilmesinde Karbonik Anhidrazların Rolü

Daha fazla bilgi için:ali.ma@wecistanche.com

Karbonik anhidrazlar (CA'lar; EC 4.2.1.1), memelilerde bulunan ve katalitik aktivitenin yanı sıra hücresel ve doku dağılımı açısından farklılık gösteren 16 izoforma sahip metalloenzimlerdir. CAS, CO'nun bikarbonat ve protonlara dönüşümünü katalize eder ve çeşitli fizyolojik süreçlerde yer alır.öğrenme ve hafıza.Burada, beyindeki CA aktivitesinin bütünlüğünün, korku tükenmesinin konsolidasyonu için gerekli olduğunu bildiriyoruz.hafıza.Bir CA inhibitörü olan asetazolamidin, neslinin tükenme seansından hemen sonra sistemik olarak uygulanmasının, doza bağlı olarak korku tükenmesinin konsolidasyonunu bozduğunu bulduk.hafızaBağlamsal korku koşullandırmasında eğitilmiş fareler. Bir CA aktivatörü olan D-fenilalanin zıt bir etki gösterirken, beyin dokusuna ulaşamayan membran geçirgen olmayan bir CA inhibitörü olan C18'in hiçbir etkisi olmadı. Asetazolamidin eşzamanlı uygulanması, D-fenilalaninin prokognitif etkilerini tamamen önlemiştir. D fenilalanin neslinin tükenmesini güçlendirirken, asetazolamid ventromedial prefrontal kortekse, bazolateral amigdalaya veya hipokampal CA1 bölgesine lokal olarak infüze edildiğinde de neslinin tükenmesini engelledi. Asetazolamid veya D-fenilalanin, substantia nigra pars kompaktına lokal olarak infüze edildiğinde hiçbir etki gözlenmedi. Ayrıca, yok olma eğitim oturumundan hemen sonra sistemik asetazolamid uygulaması, bağlamsal korku koşullandırma konusunda eğitilmiş sıçanların ventromedial prefrontal korteksinde bir alıkoyma testinde c-Fos ekspresyonunu modüle etti. Bu bulgular, bazı beyin bölgelerinde CA'ların devreye girmesinin, beyne duygusal olarak göze çarpan olayların yok olmasının konsolidasyonunu sağlamak için gerekli esnekliği sağlamak için gerekli olduğunu ortaya koymaktadır.

Cistanche tubulosa faydaları ve yan etkileri ve hafıza için Cistanche ürünleri için tıklayın

Duygusal deneyimler beyinde uzun süreli izler bırakır, tıpkı stresli olaylardan sonra oluşan hatıraların başlangıçta kararsız olabileceği, ancak zamanla bozulmaya karşı duyarsızlaşabileceği ve pekiştirme (1-3) olarak bilinen bir süreçle ömür boyu sürebileceği gibi. Buhafızasebat, bireylerin tehlikeye yeterince cevap verebilmesi için çok önemlidir (4,5). Bu anıların bozulması, obsesif-kompulsif bozukluklar gibi akıl hastalıklarında uyumsuz tepkileri tetikleyebilir. fobiler. travma sonrası stres bozukluğu(TSSB) ve yaygın anksiyete(6,7). Bu bozuklukların gelişmiş tedavilerine yol açan içgörü, altta yatan nöral mekanizmaların daha iyi anlaşılmasıyla elde edilebilir.duygusal hafıza. Bellek, edinmeyi içeren çok aşamalı bir süreçtir. konsolidasyon ve erişim (8). Alma, anımsatıcı bir izi yeniden etkinleştirir, onu kararsız bir duruma döndürür ve sonuç olarak yeniden konsolidasyonunu veya yok olmasını başlatır. Yeniden birleştirme, orijinal belleğin güncellenmesine izin vererek onu kalıcı hale getirir(9-11). Tersine, yok olma, orijinal belleğin alınmasını engelleyen yeni bir bellek izini ifade eder (12,13).

Korku güdümlü öğrenme görevleri, yok olma bilgisine büyük ölçüde katkıda bulunmuştur.hafızave fobiler, anksiyete ve TSSB gibi bozuklukları araştırmak için değerli bir çeviri modeli olarak kabul edilir (5.12.14). Extinction, maruz kalma tedavisinin(15-17) temelini oluşturur, şu anda bu bozukluklar için altın standart tedavidir(18,19). Bununla birlikte, tüm hastalar bu tedavinin yararlı etkilerini yaşamaz. Yok olma orijinali silmez çünkühafızaancak ifadesini engelleyen yeni bir öğrenmedir (20), sönen davranışlar zamanla kendiliğinden düzelebilir (21, 22). Korkunun yok olmasını teşvik eden ilaçlar, bu bozuklukları tedavi etmek için yeni bir terapötik stratejiyi temsil edebilir (19. 23-25)

Karbonik anhidrazlar (CA'lar; EC4.2.1.1) memelilerde bulunan ve katalitik aktivitenin yanı sıra hücresel ve doku dağılımı açısından farklılık gösteren 16 izoforma sahip enzimlerdir (26). CAS, CO'nun bikarbonat ve protonlara dönüşümünü katalize eder ve aşağıdakiler de dahil olmak üzere çeşitli fizyolojik süreçlerde(27) yer alır.hafızaoluşumu (28).CA aktivasyonunun uzamsal durumu iyileştirdiği bulundu.hafızasıçanlarda (29). Bu bulgularla uyumlu olarak, CA IX izoformunda genetik olarak eksik olan fareler, aynı görevde vahşi tip yavrulardan daha kötü performans gösterdi(30). Daha yakın zamanlarda, yaygın olarak kullanılan CA inhibitörü asetazolamidin (ACTZ) (31) CD1 farelere uygulanmasının beyindeki CA aktivitesini azalttığı ve nesne tanıma (OR) testinde amneziye neden olduğu bildirildi. oysa D-fenilalanin (D-fen) ile tedavi, hücre dışı sinyalle düzenlenen kinaz (ERK) aktivasyonunun bir sonucu olarak CA aktivitesini ve kuvvetlendirilmiş OR belleğini arttırdı (31.32). Bu sonuçlara paralel olarak, CA'ların inhibisyonu, ERK fosforilasyonunun inhibisyonu yoluyla sıçanlarda korku hafızası konsolidasyonunu da bozmuştur (33). Böylece. CA'ların da korku tükenme hafızasına dahil olması düşünülebilir.

Scheila Daiane Schmidt, Alessia Costa,Barbara Ranib, Eduarda Godfried Nachtigall, Maria Beatrice PassaniP,Fabrizio Carta, Alessio Nocentini, Jociane de Carvalho Myskiwd, Cristiane Regina Guerino Furinid, Claudiu T. Supuran, lvan Lzquier, ve Patrizio Bvodo

Hafıza Merkezi, Ro Grande do Sul Beyin Enstitüsü, Rio Grande do Sul Papalık Katolik Üniversitesi Porto Alegre 90619-900. Brezilya Sağlık Bilimleri Bölümü Floransa Üniversitesi, 50121 Horence, İtalya; Nörobilim, Psikoloji, İlaç Araştırmaları ve Çocuk Sağlığı Bölümü, Floransa Üniversitesi, 50121 Floransa, İtalya; ve "Ulusal Çeviri Nörobilim Enstitüsü (INNT), Brezilya Ulusal Araştırma Konseyi, Rio de Janeiro Federal Üniversitesi, Rio de Janeiro 21941-902, Brezilya

Bu çalışma, yok olma süreçlerinin anlaşılmasına büyük ölçüde katkıda bulunan bir ilişkisel öğrenme paradigması olan bağlamsal korku koşullandırması (CFC) kullanılarak sıçanlarda bu soruyu ele almak için özel olarak tasarlanmıştır(34). CA aktivitesi, sistemik veya lokal olarak uygulanan enzimlerin inhibitörleri ve aktivatörleri ile farmakolojik olarak modüle edildi.yok olma hafızası. Tutma testinin ardından bu beyin bölgelerinde c-Fos ekspresyonu da değerlendirildi. Sonuçlar, seçilen beyin bölgelerindeki CA modülasyonunun korkunun konsolidasyonunu etkilediğini göstermektedir.yok olma hafızası. Bu, akıl hastalıklarının daha iyi tedavisi için ilaçlar geliştirmek için daha önce keşfedilmemiş bir mekanizmayı temsil edebilir.

Sonuçlar

CA İnhibitörlerinin Sistemik Uygulamasının Korku Sönme Belleğine Etkisi.

Deney tasarımı Şekil LA'da gösterilmiştir. CFC eğitiminden 24 saat sonra, hayvanlar 30-dakikalık nesli tükenme eğitim oturumuna maruz bırakıldı, hemen ardından ACTZ (10 mg/kg veya 30 mg/kg) ip uygulaması yapıldı. veya 1-N-(4-sülfamofenv-etil)-2,4,6-trimetilpiridinyum perklorat(C18;30 mg/kg).Kontroller, karşılaştırılabilir araç enjeksiyonları aldı. Sönme aslında yeni bir öğrenme olduğu için, yok olma eğitim oturumundan sonra uygulanan tedavi pekiştirmeyi etkiler ancak edinimi etkilemez (35). Yok olma seansından 24 saat sonra 3-dakikalık bir alıkoyma testi uygulandı: sonuçlar Şekil 1B'de gösterilmektedir. İlk 3 dakika(0-3)(Şekil 1B) ile karşılaştırıldığında son 3 dakika(27-30) sırasında donma süresinde bir azalma ile gösterildiği gibi, yok olma seansları boyunca donmanın söndüğünü gözlemledik. Bu, tüm farelerin CFC'nin yok oluşunu öğrendiğinin açık bir göstergesidir. Dahası, yok olma hafızası en az 24 saat sürdü, çünkü araç verilen fareler, yok olma oturumunun ilk 3-dakikalık aralığına(0-3) kıyasla alıkoyma testinde önemli ölçüde daha az donma zamanı harcadılar(Şekil 1B) . Bununla birlikte, 30 mg/kg ACTZ enjekte edilen sıçanlar tarafından alıkonma testinde gösterilen donma davranışı, yok olma seansının ilk3 dakikasında(0-3) ifade edilenden önemli ölçüde farklı değildi (Şekil 1B), ACTZ'nin ortaya çıktığını ortaya koyuyor. bu dozda CFC yok oluşunun konsolidasyonu bozuldu. Buna göre, 30 mg/kg ACTZ enjekte edilen sıçanlar, alıkoyma testinde diğer tüm sıçan gruplarından önemli ölçüde daha fazla dondurma süresi harcadı (Şekil 1B).

Donma davranışı lokomosyondaki değişikliklerden etkilenmedi, çünkü genel motorda önemli bir fark yok, aktivite, araçla tedavi edilen hayvanlarla 30 mg/kg ACTZ veya C18 verilenlerle karşılaştırıldığında (SIAppendix, Şekil S2) daha önceki raporlarla uyumlu olarak tespit edildi. bizim ve diğer laboratuvarlarımız(32,33). Daha düşük bir dozda (10 mg/kg) veya C18'de ACTZ, ACTZ 10 mg/kg veya C18 uygulanan sıçanlar, ilk 3 dakikaya kıyasla alıkoyma testinde önemli ölçüde daha az donma süresi harcadığından, CFC neslinin tükenmesinin konsolidasyonunu bozmadı ({{ 11}}) yok olma oturumunun(Şekil 1B).C18, ACTZ'den farklı olarak kan-beyin bariyerini geçmeyen bir CA inhibitörüdür (36). Öyleyse. C18 tarafından ortaya çıkarılan CA periferik aktivitesinin inhibisyonu, CFC yok oluşunun konsolidasyonunu sağlam bıraktı.

p-Phen Potansiyelli CFC Yok Oluşu.

Birkaç CA izoformunun bir aktivatörü olan D-phen'i uygulayarak CA aktivasyonunun CFC neslinin tükenmesi üzerindeki etkilerini test ettik (37). D-fen (300 mg/kg IP.) hareketi etkilemedi(SI Ek, Şekil S2). Deneysel tasarım Şekil 24'te gösterilmiştir. CFC eğitiminden 24 saat sonra, hayvanlar 15-dakikalık nesli tükenme eğitim oturumuna maruz bırakıldı, ardından hemen D-fen (300 mg/kg) veya ACTZ'siz(30 mg/kg). Kontroller, benzer araç enjeksiyonları aldı.

Güçlendirici bir etkiyi değerlendirmek için, yok olma seansı 15 dakikaya kısaltılarak daha zayıf bir yok olma protokolü başlatıldı. önceki çalışmalara göre(38). Sonuçlar Şekil 2B'de gösterilmektedir. Araçla tedavi edilen sıçanlar, yok olma seansının ilk(0-3) ve son (12-15)3 dakikasında veya alıkoyma testinde donma süresinde önemli bir farklılık göstermedi (Şekil 2B). Tersine, D-fen ile tedavi edilen sıçanlar, alıkoyma testinde araçla tedavi edilen sıçanlardan önemli ölçüde daha az donma süresi harcadı (Şekil 2B). Ayrıca, kalıcılık testinde, yok olma eğitim oturumunun ilk 3 dakikasına(0-3) veya son 3 dakikasına(12-15) kıyasla önemli ölçüde daha az donma davranışı gösterdiler (Şekil 2B). Bu nedenle, D-phen'in 300 mg/kg geliştirilmiş tükenme belleğinde uygulanması, normalde uzun süreli tükenme belleği oluşturmayan kısa bir tükenme oturumu olarak etkili olmuştur.

D-fen ile tedavi edilen sıçanlarda gelişmiş öğrenmenin CA aktivasyonuna bağlı olup olmadığını değerlendirmek için, ACTZ'nin (30 mg/kg IP.) 300 mg/kg D-fen tarafından ortaya çıkarılan prokognitif etkiler üzerindeki etkilerini test ettik (Şekil 2B). ). Bu grubun sıçanları, ayrı IP yoluyla hem D-fen hem de ACTZ aldı. yok olma eğitim oturumunun sonunda enjeksiyonlar (Şekil 24). Bu sıçanlar, alıkoyma testinde veya yok olma seansının ilk (0-3) ​​ve son (12-15)3 dakikasındaki donma süresinde önemli ölçüde farklılık göstermedi. Ayrıca, alıkonma sırasındaki donma süresi, araçla tedavi edilen hayvanlarınkinden önemli ölçüde farklı değildi (Şekil 2B). D-fen/ACTZ ile tedavi edilen sıçanlar, tek başına D-fen verilen sıçanlardan önemli ölçüde daha fazla dondurma süresi harcadı (Şekil 2B). Bu nedenle, CA'ların inhibisyonu, D-phen tarafından ortaya çıkarılan nesli tükenme belleği geliştirmesini ortadan kaldırdı.

ACT Yerel Yönetiminin Seçilmiş Beyin Bölgelerine CEC Yok Olma Üzerindeki Etkisi, Daha sonra ACTZ'nin ventromedial prefrontal kortekse (vmPFC), bazolateral amigdalaya (BLA) yerel infüzyonlarının olup olmadığını sorduk. dorsal hipokampüsün (CA1) CA1 bölgesi veya substantia nigra pars compacta (SNpc), CFC'nin yok olmasını etkiledi. İncelenen beyin bölgesine göre dört deney alt grubuna dağıtılan tüm hayvanlar, bir CFC eğitim oturumuna ve 24 saat sonra 30-dakikalık bir yok olma eğitim oturumuna tabi tutuldu. hemen ardından iki taraflı ACTZ(10 nmol/yan) infüzyonları veya ayrı beyin bölgelerine araç (Şekil 3A). Yok olma seansından 24 saat sonra 3-dakikalık bir tutma testi yapıldı (Şekil 3A4). İlaç infüzyonunun vmPFC'ye etkileri Şekil 3B'de gösterilmektedir.

Son 3 dakikadaki (27-30) süresi, ilk 3 dakikadakinden (0-3) önemli ölçüde daha kısa olduğu için, her iki hayvan grubunda da yok olma seansı boyunca donma sönmüştür (Şekil 3B). Yok olma hafızası, tutma testinden bu yana en az 24 saat sürmüştür. araçla tedavi edilen sıçanlar, yok olma seansının ilk 3 dakikası(0-3) ​​sırasında gözlemlenene kıyasla önemli ölçüde azaltılmış donma davranışı sergilediler(Şekil 3B). Bununla birlikte, alıkoyma testinde ACTZ ile aşılanmış farelerin donma süresi, yok olma eğitim oturumunun (Şekil 3B) son 3 dakikasındaki (27-30) süreden önemli ölçüde daha uzundu. Ayrıca, tutma testinde ACIZ ile tedavi edilen sıçanlar, araçla tedavi edilen sıçanlardan önemli ölçüde daha uzun bir süre dondu (Şekil 3B).

ACTZ infüzyonunun BLA'ya etkileri Şekil 3C'de gösterilmiştir. Son 3 dakikadaki (27-30) donma süresi ilk 3 dakikadakinden (0-3 önemli ölçüde daha kısa olduğu için tüm hayvanlar neslinin tükenmesini öğrendiler. ) yok olma oturumunun (Şekil 3C). Yok olma hafızası uzun ömürlüydü. araçla tedavi edilen sıçanlar, yok olma eğitim oturumunun ilk 3 dakikasına (0-3) göre tutma testinde önemli ölçüde azaltılmış donma davranışı sergilediklerinden (Şekil, 3C), Tersine, BLA'ya ACTZinfüzyonu alan sıçanlar, önemli ölçüde daha uzun bir süre sergilediler. alıkoyma testindeki donma süresi, yok olma eğitim oturumunun son 3 dakikasına(27-30) göre (Şekil 3C). Ayrıca, alıkoyma testinde araçla tedavi edilen sıçanlara kıyasla bu sıçanlarda donma davranışı önemli ölçüde daha uzundu.

Şekil 3D, ACTZinfüzyonunun hipokampal CA1 bölgesine etkilerini gösterir. Donma, yok olma seansı boyunca her iki hayvan grubunda da söndürüldü ve ilk 3 dakikaya (0-3) kıyasla son 3 dakikadaki (27-30) süre önemli ölçüde azaldı (Şekil 3D). Tutma testinde, araçla tedavi edilen sıçanlar, yok olma eğitim oturumunun ilk 3 dakikası (0-3) sırasında gözlemlenene kıyasla önemli ölçüde daha kısa bir donma süresi sergiledi: ancak. ACTZ ile aşılanmış sıçanlar, alıkoyma testinde, yok olma oturumunun (Şekil 3D) son 3 dakikasına(27-30) göre önemli ölçüde daha uzun bir donma süresine sahipti. Ayrıca, ACTZ ile aşılanmış sıçanlar, önemli ölçüde daha uzun bir donma sergilemiştir. tutma testinde araçla tedavi edilen sıçanlardan daha uzun süre (Şekil 3D). ACTZ infüzyonunun SNpc'ye etkileri Şekil 3E'de gösterilmektedir. Donma, her iki deney grubunda da yok olma eğitim oturumu boyunca söndürüldü ve başlangıçtaki (0-3){{21 ile karşılaştırıldığında son (27-30)3-dakikalık aralıkta önemli bir süre düşüş oldu. }}dk aralık(Şekil 3E). Tutma testinde, donma süresi araçla ve ACTZ ile tedavi edilen sıçanlar arasında farklılık göstermedi, ancak yok olma eğitim oturumunun ilk 3 dakikasında (0-3) görülenden önemli ölçüde daha kısaydı (Şekil 3E). ). Birlikte ele alındığında, bu bulgular vmPFC, BLA. ve CA1'de CA'ların etkisizleştirilmesinin SNpc'de değil, CFC yok oluşunun konsolidasyonunu bozduğunu göstermektedir.

Yerel p-Phen İdaresinin Seçilmiş Beyin Bölgelerine CFC Yok Oluşuna Etkisi.

ACTZ yönetimi tarafından vmPFC, BLA ve CAl'de, ancak SNpc'de değil, CA in-aktivasyonunun CFCex-tinction konsolidasyonunu zayıflattığı gözlemini daha da desteklemek için, aynı bölgelerde CA aktivasyonunun zıt sonuçlara yol açıp açmadığını test ettik. Deney tasarımı Şekil 4A'da gösterilmiştir. Araştırılan beyin bölgesine göre dört deney alt grubuna dağıtılan tüm hayvanlar, bir CFC eğitimine ve 24 saat sonra 15-dakikalık bir yok olma eğitim oturumuna tabi tutuldu ve hemen ardından iki taraflı p-fen (50 nmol) infüzyonları yapıldı. /yan) veya araç ayrı beyin bölgelerine. Güçlendirici bir etkiyi değerlendirmek için, yok olma seansı, daha zayıf neslin tükenmesine neden olmak için 15 dakikaya kısaltıldı. mevcut çalışmaya ve önceki çalışmalara göre (38). İlaç infüzyonunun vmPFC'ye etkileri Şekil 4B'de gösterilmektedir.

İlk 3-dakika (0-3) ile son 3-dakika (12-15) donmanın karşılaştırılması, donmanın hem araç hem de D-fen ile tedavi edilen sıçanlar; bununla birlikte, araçla tedavi edilen sıçanların donma süresi, yok olma seansının ilk 3 dakikası (0-3) ve alıkoyma testinde (Şekil 4B) önemli ölçüde farklılık göstermediği için etki kısa sürdü. Tutma testinde, D-fen verilen sıçanlar, araçla tedavi edilen sıçanlara kıyasla önemli ölçüde daha az donma süresi harcadı (Şekil 4B). Ek olarak, D-fen ile tedavi edilen hayvanların donma süresi, alıkoyma testinde, nesli tükenme eğitim oturumunun ilk 3 dakikasına (0-3) göre önemli ölçüde daha kısaydı (Şekil 4B). D-fen infüzyonunun BLA'ya etkileri Şekil 4C'de gösterilmektedir. Son 3 dakikadaki (12-15) süresi, hem araçta hem de D-'de ilk 3-dakikadan (0-3) önemli ölçüde daha kısa olduğu için, sönme oturumu boyunca donma söndü. fen ile tedavi edilen sıçanlar (Şekil 4C). Bununla birlikte, alıkoyma testinde, araçla tedavi edilen sıçanların donma davranışı, yok olma oturumunun ilk 3 dakikasında (0-3) sergilenenden önemli ölçüde farklı değildi, bu da yok olma öğreniminin kısa ömürlü olduğunu gösteriyor (Şekil 1b). 4C). Tersine, D-fen alan sıçanlar, yok olma seansının ilk 3 dakikasına (0-3) göre tutma testinde önemli ölçüde daha kısa bir donma süresi sergilediler (Şekil 4C). Ayrıca, tutma testinde, D-fen ile tedavi edilen sıçanlar, araçla tedavi edilen sıçanlara kıyasla önemli ölçüde daha az donma süresi harcadılar (Şekil 4C). Şekil 4D, hipokampal CA1 bölgesine D-fen infüzyonunun etkilerini gösterir.

Yok olma seansı sırasında donma süresi, ilk 3 dk(0-3)(Şek.4D) ile karşılaştırıldığında son 3 dakikada (12-15) önemli ölçüde azaldığından tüm sıçanlarda yok olma meydana geldi.ancak bu uzun değildi. - kalıcı, çünkü araçla tedavi edilen sıçanların donma süresi, yok olma seansının ilk 3 dakikası (0-3) ​​ile alıkoyma testinde (Şekil 4D) önemli ölçüde farklı değildi. D-fen ile tedavi edilen sıçanlar, alıkoyma testinde, yok olma seansının ilk 3 dakikasına (0-3) göre önemli ölçüde daha kısa bir donma süresi sergilediler(Şekil 4D). Tutma testindeki donma süresi, araçla tedavi edilen sıçanlara kıyasla D-fen ile aşılanmış sıçanlarda önemli ölçüde daha kısaydı (Şekil 4D).

SNPC'ye D-fen infüzyonunun etkileri Şekil 4E'de gösterilmektedir. Donma, yok olma eğitim oturumu boyunca söndürüldü ve ilk 3 dakikaya (0-3) kıyasla son 3 dakikadaki(12-15) önemli ölçüde azaltılan bir süre oldu. Araç ve D-fen ile tedavi edilen sıçanların donma süreleri, tutma testinde önemli ölçüde farklılık göstermedi ve yok olma oturumunun ilk 3 dakikasında (0-3) gözlemlenenlerden önemli ölçüde farklı değildi (Şekil 1a). 4E). Birlikte ele alındığında, bu bulgular, CA'nın vmPFC, BLA ve CA'da aktivasyonunun, ancak SNpc'de değil, CFC tükenmesinin konsolidasyonunu güçlendirdiğini göstermektedir.

Ventromedial Prefrontal Kortekste ACTZ Sistemik Yönetim Modüle edilmiş c-Fos İfadesi. Sıçanlar CFC'de eğitildi ve 24 saat sonra 30-dakikalık bir yok olma eğitim oturumuna maruz bırakıldı, ardından hemen ACTZ (30 mg/kg) veya aracın ip uygulaması yapıldı. Tutma testinden 90 dakika sonra sıçanlara ötenazi uygulandı (Şekil 5A). Şekil 1B'de gösterilen sonuçlar doğrultusunda. tüm sıçanlar, en az 24 saat süren CFC yok oluşunu öğrendi (SI Ek, Şekil S1); bununla birlikte, 30 mg/kg ACTZ enjekte edilen sıçanlarda, alıkoyma testinde sergilenen dondurma davranışı, yok olma eğitim oturumunun ilk 3 dakikasında (0-3) ifade edilenden önemli ölçüde farklı değildi (SI Ek. Şekil. S1). ACTZ'nin bu dozda CFC yok oluşunun konsolidasyonunu bozduğunu doğrulayarak. ACTZ verilen sıçanlarda vmPFC'deki c-Fos ifadesinin araçla tedavi edilen sıçanlara kıyasla önemli ölçüde daha yüksek olduğunu bulduk (Şekil 5C), oysa tedavi edilen sıçanların BLA.CA1. veya SNpc'sinde c-Fos ifadesinde hiçbir farklılık bulunmadı. ACTZ ile ve araçla tedavi edilenler(SI Ek, Şekil S3).

Tartışma

Korku anılarının kendiliğinden iyileşmesi, herhangi bir zamanda ortaya çıkabilir ve TSSB, yaygın kaygı ve fobiler gibi korku temelli bozukluklardan etkilenen insanlar için çok fazla sıkıntıyı tetikler. Bu bozukluklar için önerilen tedavi, yok olma anılarının orijinal korku hafızasını geçersiz kıldığı maruz kalma terapisidir (39). Bununla birlikte, maruz kalma tedavisi her zaman etkili değildir ve orijinal korku, neslinin tükenmesinden sonra sıklıkla kendiliğinden tekrarlar. yok oluşun, orijinal korkuyu engelleyen veya onunla rekabet eden ancak onu silmeyen yeni bir anı oluşturduğunu öne sürer(34, 40). Böylece. neslinin tükenmesini ve engelleyici öğrenmeyi artırabilecek yeni müdahalelere ihtiyaç vardır. Psikoterapi sırasında uygulanan davranışsal yöntemlere ve farklı beyin bölgelerinde aktiviteyi artıran veya azaltan cihaz tabanlı stimülasyon tekniklerine ek olarak, neslin tükenmesini ve engelleyici öğrenmeyi artırabilecek yeni ilaçlara yönelik destek de artmaktadır. özellikle maruz kalmaya dayalı psikoterapi(41-43) ile birleştirildiğinde. Bu yeni ilaçlar için hedefleri belirlemek için yok olma süreçlerinin daha fazla araştırılması gerekmektedir.

Burada, iki CA inhibitörü olan ACTZ(31) ve C18(37) ve bir CA aktivatörü D-phen'in (38) sistemik etkilerini değerlendirerek, sıçanlarda korku tükenme hafızasında CA'ların rolünü inceledik. Beyindeki CA'ların korku tükenme mekanizmalarında rol oynadığını bulduk. ACTZ'nin (30 mg/kg IP.) uygulanması, ancak beyne nüfuz etmeyen C18.a bileşiğinin, yok olma seansından hemen sonra uygulanması, korku tükenme hafızasının konsolidasyonunu bozdu. Davranışsal bir tepkinin yok olmasının yeni engelleyici öğrenmeyi gerektirdiği yaygın olarak kabul edilmektedir (5,34,44). Sonuçlarımız, beyin CA'larının inaktivasyonu uzamsal ve korku belleği oluşumunu bozduğundan, yeni bellek oluşumu için beyin CA aktivitesinin gerekli olduğunu öne süren önceki kanıtlarla uyumludur(28,33). Morris su labirenti testine maruz bırakılan CAIX izoformu, gizli platformu bulmayı öğrenmede vahşi tipteki yavru arkadaşlarına göre daha fazla zorluk yaşadı(30). Daha yakın zamanlarda, araştırma grubumuz, ACTZ'nin erkek CD1 farelerine sistemik olarak uygulanmasının nesne tanıma testinde amneziye neden olduğunu bildirdi(32). ACTZ'nin biliş üzerinde zararlı bir etkisi insanlarda da bildirilmiştir. randomize, çift kör, plasebo kontrollü bir çalışma olarak, bu CA inhibitörünün bilişsel performansı, yürütücü işlevi, kısa süreli belleği ve akut yüksek irtifa maruziyeti sırasında sürekli dikkati bozduğunu göstermiştir (45).

ACTZ'nin (30 mg/kg ip) sistemik uygulamasının fare beyninde CA aktivitesini önemli ölçüde azalttığını daha önce bildirmiştik (32). Bu çalışmada. ACIZ, önceki çalışmalarımızda kullanılan dozda amneziye neden oldu; bu nedenle, CA inhibisyonunun bir sonucu olarak nesli tükenme hafızasının bozulmasının meydana geldiği düşünülebilir. Bu nedenle, artan CA aktivitesinin yok olma belleğini iyileştirmesi beklenir. Sonuçlarımız bu fikri desteklemektedir; Bir CA aktivatörü olan D-phen'in uygulanması, yok olma seansından hemen sonra verildiğinde uzun süreli korku tükenme hafızası üretti. Buna göre, D-fen'in CD1 farelerine uygulanması, OR testinde hafızayı arttırdı ve beyin CA aktivitesini arttırdı (32). ACTZ'nin birlikte uygulanması, hem bu çalışmada hem de önceki çalışmada(32) p-fen kaynaklı bellek gelişimini tamamen bloke ederek, CA aktivasyonunun altta yatan bir mekanizma olarak kritik bir rolünü açıkça belirtir ve D-fen'in diğer etkilerinin olası katkılarını dışlar, örneğin aminerjik nörotransmitter sentezi ve/veya iletiminin kolaylaştırılması gibi (32).

ACTZ veya D-phen'in ayrı beyin bölgelerine lokal olarak verilmesini kullanan bu çalışma, CA'ların vmPFC'de nesli tükenme belleğinin konsolidasyonunda kritik bir rolü olduğunu göstermektedir. BLA.ve CA1.Doku lezyonlarından farmakolojik, optogenetik ve kemo-genetik yaklaşımlara kadar uzanan teknikleri kullanan çalışmalarda gösterildiği gibi, tüm bu bölgeler hafızanın yok edilmesinde rol oynar (22,46). Tersine, SNpc'deki CA'lar, en azından bu çalışmada araştırılan deneysel koşullar altında, bu sürece dahil değildir. Çalışmamız, tükenme belleği konsolidasyonunu sağlamak için bu beyin bölgelerindeki CA aktivasyonunun gerekli olduğunu kesin olarak göstermektedir. vmPFC, BLA ve CAI ile bağlantılı nöronal devreler de korku hafızası edinimi, konsolidasyonu ve geri alınmasıyla ilişkilendirilmiştir(34). Korku belleği konsolidasyonu ve neslinin tükenmesi için anımsatıcı süreçler bazı benzer moleküler mekanizmaları ve yolları paylaşmasına rağmen (34), korku konsolidasyonu ve korku tükenme devrelerindeki nöronal aktivasyon ve nöronal sinyal iletim mekanizmalarının kalıpları belirgin farklılıklar göstermektedir(13.22. 47). Bu farklılıklar, koşulsuz uyarıcının varlığı veya yokluğu ile ilgili prosedürel farklılıklardan kaynaklanabilir.

Korku koşullandırması sırasında, beyin devreleri, hayvanın hem koşulsuz bir uyarıcıya (şok) hem de koşullu bir uyarıcıya (bizim durumumuzda. bağlam) maruz kalmasıyla aktive edilirken, korku tükenmesi yalnızca koşullu uyarıcıyı sunarak uyarılır. Birkaç protein kinazı (Fyn, CDK5. PKA. ve PKC), protein fosfatazları (kalsinörin ve SHP1/2), transkripsiyon faktörleri ve ani erken genler (CARP. CREB.c-Fos, c-Jun. JunB. ve June) gelir. korku koşullanması veya yok olma sırasında çeşitli şekillerde artırılarak veya azaltılarak oyuna girer (ref.47'de gözden geçirilmiştir). Hem korku hafızasının pekiştirilmesinin(33) hem de neslinin tükenmesinin (mevcut çalışma) bozulması, azalmış beyin CA aktivitesi ile ilişkili görünmektedir. Beyin, farklı beyin bölgelerinde farklı şekilde dağılmış çeşitli CA izoformları bakımından zengindir (26). ACTZ, bu izoformların birçoğunun seçici olmayan bir inhibitörü olduğundan, etkisi, farklı izoformların(48) ve belirli beyin bölgelerinin spesifik katılımının (aşağıya bakınız) farklı katkılarını maskeleyebilir.

PFC'min yok olmadaki rolüne odaklanan birkaç çalışmadan elde edilen bulgular, bu bölgedeki nöronların neslinin tükenmesi öğrenmesi için gerekli olduğunu göstermektedir (12). Özellikle, infralimbik korteksin (vmPFC'nin bir alt bölgesi) kısa süreli uyarılmasının korku hafızasını azalttığı ve yok olmayı güçlendirdiği bulundu (12. 49). Daha yakın zamanlarda, ACTZ'nin sistemik uygulamasının in vivo olarak prefrontal kortikal tek ünite ateşlemesini engellediği ve prefrontal korteksin bazal nöronal aktivitesinin azalmasına yol açtığı bulundu(50). Birlikte ele alındığında, bu bulgular ACTZ'nin vmPFC ateşlemesinin inhibisyonu yoluyla korku tükenme hafızasını bozduğunu göstermektedir.

Yok olma alıkoyma testinden 90 dakika sonra, ACTZ ile tedavi edilen sıçanların vmPFC'sinde cFos-immünopozitif çekirdekler, araçla tedavi edilen sıçanlardan önemli ölçüde daha fazla sayıdaydı. Sonuçlarımızın en cimri yorumu, ACTZ ile tedavi edilen sıçanların, tutma sırasında vmPFC'de yüksek düzeyde donma davranışı ve artan sayıda c-Fos-pozitif çekirdek sergilediğini göstermektedir. yok oluşu pekiştirmedikleri, bunun yerine 48 saat önce uygulanan CFC eğitimini hatırladıkları için. Aslında. Pek çok deneysel kanıt, PFC'nin uzak bağlamsal korku anılarını işlemede ve hatırlamada(51, 52) ve bir alıkoyma testinden sonra (52-54) ziyade neslinin tükenmesinin pekiştirilmesi sırasında önemli bir rolü olduğunu göstermektedir. Soyu tükenme alımından sonra BLA ve hipokampal CA1 bölgesinde c-Fos immün boyama, araçla tedavi edilen sıçanların beyinlerinde düşüktü ve ACTZ ile tedavi edilen sıçanların beyinlerindekinden önemli ölçüde farklı değildi. Korku hafızasının geri alınmasında BLA ve CA1 nöronlarının zaman sınırlı bir rolü tanımlanmıştır (55), bu, neslinin tükenmesini öğrenmemiş (ACTZ ile tedavi edilmiş) ve sözde eğitim deneyimini hatırlamış sıçanlarda neden çok düşük c-Fos immüno-lekelemesi saptadığımızı açıklayabilir (55). . Üstelik. mPFC'de (yüksek) ve BLA'da (düşük) c-Fos indüksiyonunun çift yönlü bir regülasyonu, yok olma eğitimi ve kendiliğinden iyileşme sırasında rapor edilmiştir(56, 57); bununla birlikte, diğer çalışmalar, neslinin tükenmesinin alınmasından sonra BLA ve CA1'de yüksek c-Fos ifadesi bulmuştur(54). Hipokampusun korku hafızasının hatırlanması ve yok edilmesindeki rolünü kapsayan literatür çok geniştir ve oldukça tartışmalıdır (ref.52'de gözden geçirilmiştir). Orsini ve ark.(58) sönmüş farelerin ventral hipokampusunda c-Fos ekspresyonunda önemli bir artış bulamamış ve başka bir çalışmada dorsal hipokampusta yok olmanın uzak bağlamsal korku geri çağrılmasında önemli bir cFos artışı bulunmamıştır(59). Ayrıca, erken çalışmalar bağlamsal konsolidasyonda dorsal hipokampusun katılımının ezberleme evresinin erken dönemiyle sınırlı olduğunu ileri sürmüştür (60). Yukarıda bahsedilen çalışmalarda, bu farklılıklardan kısmen sorumlu olabilecek farklı protokoller (örneğin işitsel yok olma, birkaç gün boyunca tekrarlanan yok olma seansları) kullanılmıştır. Açıkça. Bu tartışmalı sonuçları araştırmak için daha fazla çalışmaya ihtiyaç vardır.

Sonuç olarak, bu çalışma, CA'ların korku belleğine katılımı hakkında birkaç önemli içgörü sağlar. (i) beyindeki CA'ların seçici inhibisyonunun, yok olma bozuklukları ile ilişkili olduğunu; () beyindeki CA'ların seçici aktivasyonunun, yok olma üzerinde faydalı bir etkisi vardır; ve (i) CA aktivitesi, yalnızca belirli beyin bölgelerinde sönme modülasyonunda yer alır. CA'ların yok olma üzerindeki etkilerinin altında yatan mekanizmalar çoğunlukla bilinmemektedir. ACTZ, CA'ları inhibe ederek tamponlama kapasitesini azaltır. böylece hücre içi ve hücre dışı pH'ı etkiler ve proteinleri, NMDA'yı etkiler. ve y-aminobütirik asit (GABA) reseptör fonksiyonu(51). CA inhibitörleri ayrıca hücre içi CO, birikimini arttırır. anyon taşınmasını bloke eder ve GABA seviyelerini arttırır. ateşleme hızının (61) modülasyonuna yol açar. İlk çalışmalar, CA1 hipokampal bölgesinde, piramidal nöronlar üzerindeki çoklu sinaptik girdilerin ilişkili aktivasyonunun, geçici olarak GABAerjik inhibitör postsinaptik potansiyelleri (IPSP'ler) uyarıcı postsinaptik potansiyellere(62-64) dönüştürdüğünü göstermiştir. GABAerjik internöronlardan gelen dönüştürülmüş sinaptik girdiler, hipokampal ağ boyunca sinyal akışını modüle etmek, sinyal-gürültü oranını arttırmak ve belirli bir hafızayla ilgili sinaptik ağırlıkları seçici olarak yükseltmek için bir mekanizma sağlar(64). Bu sinaptik dönüşüm, ACTZ(64) tarafından azaltılan veya ortadan kaldırılan depolarize edici bir transmembran HCO3-akısına bağlıdır. Ayrıca, p-fen varlığında, piramidal nöronlara eşik altı girdiler, GABA aracılı IPSP'leri depolarize edici tepkilere çevirdi (65). Hipokampal ağ üzerinden bilgi akışının değiştirilmesi, ACTZ'nin hafızayı bozan etkilerini açıklayabilir. ACTZ'nin prefrontal korteks nöronlarının bazal nöronal aktivitesini azaltırken hipokampustan afferent sürücüyü arttırdığı bulunduğundan, mPFC'ye hipokampal çıktı da CA inhibitörlerinden etkilenecektir (50).

Yakın zamanda ACTZ'nin amigdalada korku koşullandırma ile indüklenen ERK fosforilasyonunu engellediği bildirilmiştir(33), rapor edilen yok olma bozukluğu ile tutarlıdır (66. Bu bağlamda, D-fen uygulamasının hızla aktive olduğunun tespit edilmesi önemlidir. korteks ve hipokampustaki ERK yolları ve ameliyathane hafızasını (32) ve su labirenti performansını (29) geliştirmek.

Önceki travmanın hatırlatıcılarına maruz kaldığında istenmeyen tepkilerin yok olması, maruz bırakma terapisinin altında yatan temel bir süreçtir. Kannabinoidler, noradrenerjik ilaçlar, histaminerjik ilaçlar ve nörotrofik faktörler gibi yok olmayı kolaylaştıran sistemik ilaçlar, maruziyete dayalı tedavilerin klinik tepkisini iyileştirmede faydalı olabilir(3.5.12). Bu çalışmanın sonuçlarına dayanarak, beyin CA aktivatörleri(67), yok olmayı iyileştirebilen moleküller olarak fobiler, anksiyete ve PISD gibi bozuklukların maruziyete dayalı tedavisini iyileştirebilir. Bu bileşiklerin klinik potansiyelleri, altta yatan mekanizma hakkında bilgi eksikliği nedeniyle azalmaz, ancak korku zayıflamasını ortaya çıkarma mekanizmaları anlaşıldığında, kullanımlarını optimize etme girişimleri çok daha büyük bir başarı olasılığına sahip olacaktır.

Malzemeler ve yöntemler

Üç aylık erkek Wistar fareleri, Chares River Lab-oratoryum İtalya'dan satın alındı ​​ve grup olarak, Floransa Üniversitesi, Laboratuar Hayvan Barındırma Hizmetleri Merkezi'nde (CeSAL) barındırıldı. Korku koşullandırması, 30-s aralıklarla üç elektriksel ayak şokuyla (0.5 mA 2s) gerçekleştirildi. Bağlamsal korku koşullandırmasının yok edilmesi, daha önce açıklandığı gibi (38,68) çok az değişiklikle gerçekleştirildi. Ardından, 24 saat sonra hayvanlar, ayak şoklarının yokluğunda 15- veya 30-dakikalık bir yok olma eğitim oturumu (deney setine bağlı olarak) için aynı odaya yerleştirildi. Bu seanslardan hemen sonra araç, CA aktivatörü (p-fen) veya CA inhibitörü (ACTZor C18) sistemik olarak (ip) veya iki taraflı stereotaksik olarak implante edilen kanüller yoluyla seçilen beyin bölgelerine lokal olarak infüze edildi. Hayvanın donarak geçirdiği süre, tedavilerden habersiz eğitimli bir gözlemci tarafından manuel olarak kaydedildi. ve deney grupları arasındaki istatistiksel olarak anlamlı farklılıklar, tekrarlanan ölçümlü iki yönlü ANOVA ile belirlendi. Tespit edilen anlamlılığın kaynağı Bonferroni'nin çoklu karşılaştırmalı post hoc test P değerleri kullanılarak belirlendi<0.05 were="" considered="" statistically="" significant.="" detail="" of="" statistical="" analysis="" is="" provided="" in="" s/appendix,="" table="">

c-Fos ölçümleri için, sıçanlar CFC görevinde eğitildi ve 24 saat sonra 30-dk bir yok olma eğitimine tabi tutuldu. Bu seanstan hemen sonra, bir aracın IP. enjeksiyonunu veya ACTZ 30 mg aldılar. Yok olma eğitim oturumundan 24 saat sonra 3-dakikalık bir alıkoyma testi yapıldı. Tutma testinden 90 dakika sonra sıçanlara ötenazi uygulandı ve ardından soğuk fizyolojik alne ile transkardiyal olarak perfüze edildi. ardından yüzde 4 (0.1 M fosfat tamponu içinde valval paraformaldehit (pH 7.4). Doku hazırlıkları, immün boyama ve analiz daha önce anlatıldığı gibi yapıldı (69). c-Fo sayısını karşılaştırmak için öğrenci t-testi kullanıldı{{ 15}}farklı deney grupları arasında pozitif çekirdekler.

Çalışma protokolünün ayrıntıları ve malzeme listesi S/Ek'te mevcuttur. Bu çalışmanın bulgularını destekleyen ham veriler Veri Kümesi S1'de sunulmaktadır. Daha fazla bilgi talepleri ilgili yazarlara yönlendirilmelidir.

Referans

1. JL McGaugh, Kalıcı anılar yapmak: Önemli olanı hatırlamak. Proc. Natl. Acad. bilim ABD 110 (ek 2), 10402–10407 (2013).

2. CM Tyng, HU Amin, MNM Saad, AS Malik, Duygunun öğrenme ve hafıza üzerindeki etkileri. Ön. Psikol. 8, 1454 (2017).

3. G. Provensi, MB Passani, A. Costa, I. Izquierdo, P. Blandina, Neuronal histamin ve duygusal olarak göze çarpan olayların hafızası. Br. J. Pharmacol. 177, 557–569 (2020).

4. MS Fanselow, Tehdit yakınlığı ve savunma davranışlarında öğrenmenin rolü. Kör. Görüş. Davran. bilim 24, 44-49 (2018).

5. C. Furini, J. Myskiw, I. Izquierdo, Korkunun tükenmesinin öğrenilmesi. Nörobilim. Biyolojik davranış. Rev. 47, 670–683 (2014).

6. JE LeDoux, Beyindeki duygu devreleri. Annu. Rev. Neurosci. 23, 155–184 (2000).

7. RM Visser, A. Lau-Zhu, RN Henson, EA Holmes, Çoklu bellek sistemleri, çoklu zaman noktaları: Bilim, istenmeyen duygusal anıların ifadesini kontrol etmek için tedaviyi nasıl bilgilendirebilir. Philos. Trans. R. Soc. Londra. B Biol. bilim 373, 20170209 (2018).

8. T. Abel, KM Lattal, Moleküler bellek edinme, birleştirme ve geri çağırma mekanizmaları. Kör. Görüş. Nörobiyol. 11, 180–187 (2001).

9. NC Tronson, JR Taylor, Belleğin yeniden konsolidasyonunun moleküler mekanizmaları. Nat. Rev. Neurosci. 8, 262–275 (2007).

10. B. Jones, E. Bukoski, L. Nadel, JM Fellous, Hatıraları yeniden oluşturma: Yeniden birleştirme, sıçanlarda pozitif olarak motive edilmiş uzamsal belleği günceller. Öğrenmek. Mem. 19, 91–98 (2012).

11. C. Bucherelli, E. Baldi, C. Mariottini, MB Passani, P. Blandina, Aversive memory reaktivation, amigdala ile sadece konsolidasyona dahil olan bazı nörotransmitterlerle ilgilenir. Öğrenmek. Mem. 13, 426–430 (2006).

12. MR Milad, GJ Quirk, Translasyonel nörobilim için bir model olarak korku neslinin tükenmesi: On yıllık ilerleme. Annu. Rev. Psikol. 63, 129–151 (2012).

13. DW Bloodgood, JA Sugam, A. Holmes, TL Kash, Korku tükenmesi, bazolateral amigdalaya infralimbik korteks projeksiyonları gerektirir. Tercüme Psikiyatri 8, 60 (2018).

14. O. Bukalo, CR Pinard, A. Holmes, Mechanisms to ilaçlar: Anksiyete bozuklukları için yeni tedavileri belirlemek için korku tükenmesinin nöral ve moleküler substratlarını aydınlatmak. Br. J. Pharmacol. 171, 4690-4718 (2014).

15. MG Craske, D. Hermans, B. Vervliet, Korku ve endişe için bir öteleme modeli olarak neslinin tükenmesi için son teknoloji ve gelecekteki yönelimler. Philos. Trans. R. Soc. Londra. B Biol. bilim 373, 20170025 (2018).

16. BM Graham, MR Milad, Korku tükenmesi çalışması: Anksiyete bozuklukları için çıkarımlar. Ben. J. Psikiyatri 168, 1255–1265 (2011).

17. JS Abramowitz, Maruz kalma terapisi uygulaması: Bilişsel-davranışçı teori ve yok olma teorisinin uygunluğu. Davran. orada. 44, 548–558 (2013).

18. MB Powers, JM Halpern, MP Ferenschak, SJ Gillihan, EB Foa, Travma sonrası stres bozukluğu için uzun süreli maruz kalmanın meta-analitik incelemesi. Klinik. Psikol. Rev. 30, 635-641 (2010).

19. JC Myskiw, I. Izquierdo, CR Furini, Korku öğrenmenin yok olmasının modülasyonu. Beyin Araş. Boğa. 105, 61-69 (2014).

20. G. Zhu ve diğerleri, Calpain-1 silinmesi, mGluR'a bağlı LTD'yi bozar ve hafızanın yok olmasından korkar. bilim 7, 42788 (2017).

21. IP Pavlov, "Serebral korteksin fizyolojik aktivitesinin araştırılması", Koşullu Refleksler, GV Anrep, Ed. (Oxford University Press, Londra, Birleşik Krallık, 1927).

22. CA Orsini, S. Maren, Sinirsel ve hücresel korku mekanizmaları ve yok olma anı oluşumu. Nörobilim. Biyolojik davranış. Rev. 36, 1773–1802 (2012).

23. A. Garakani, SJ Mathew, DS Charney, Anksiyete bozukluklarının nörobiyolojisi ve tedaviye etkileri. Sina Dağı J. Med. 73, 941-949 (2006).

24. L. Ledgerwood, R. Richardson, J. Cranney, D-sikloserin, öğrenilmiş korkunun yok olmasını kolaylaştırır: Yeniden edinme ve genelleştirilmiş yok olma üzerindeki etkiler. Biol. Psikiyatri 57, 841-847 (2005).

25. P. Busquet, A. Hetzenauer, MJ Sinnegger-Brauns, J. Striessnig, N. Singewald, Role of L-type Ca2 plus kanal izoformlarının koşullu korkunun yok oluşunda. Öğrenmek. Mem. 15, 378–386 (2008).

26. CT Supuran, A. Scozzafava, Tıbbi kimya için hedefler olarak Karbonik anhidrazlar. Bioorg. Med. Kimya 15, 4336-4350 (2007).

27. A. Waheed, WS Sly, Karbonik anhidraz XII, sağlık ve hastalıkta işlev görür. Gen 623, 33-40 (2017).

28. MK Sun, DL Alkon, Karbonik anhidraz dikkat kapısı: Hafıza terapisi ve güçlendirme. Trendler Pharmacol. bilim 23, 83-89 (2002).

29. MK Sun, DL Alkon, Sıçanlarda karbonik anhidraz aktivasyonu yoluyla sinaptik etkinliğin, uzaysal öğrenmenin ve hafızanın farmakolojik olarak geliştirilmesi. J. Pharmacol. Tecrübe. orada. 297, 961–967 (2001).

30. PW Pan ve diğerleri, Karbonik anhidraz IX eksikliği olan farelerin beyin fenotipi. Transgenik Araş. 21, 163–176 (2012).

31. L. Canto de Souza ve diğerleri, Karbonik anhidraz aktivasyonu, korteks ve hipokampusta hücre dışı sinyalle düzenlenen kinazın fosforilasyonu yoluyla farelerde nesne tanıma hafızasını geliştirir. Nörofarmakoloji 118, 148–156 (2017).

32. TH Maren, Yeni bir karbonik anhidraz inhibitörü olan Diamox'un (6063) farmakolojik ve renal etkileri. Trans. NY Acad. bilim 15, 53 (1952).

33. MT Yang, WL Chien, DH Lu, HC Liou, WM Fu, Asetazolamid, kemirgenlerde korku hafızasını pekiştirir. Nörofarmakoloji 67, 412–418 (2013).

34. I. Izquierdo, CR Furini, JC Myskiw, Korku hafızası. Fizol. Rev. 96, 695–750 (2016).

35. E. Baldi, C. Bucherelli, Korku hafızasının yeniden pekiştirilmesi ve kemirgenlerin neslinin tükenmesiyle ilgili beyin bölgeleri. Nörobilim. Biyolojik davranış. Rev. 53, 160–190 (2015).

36. V. Menchise ve diğerleri, Karbonik anhidraz inhibitörleri: Phe131 ile istifleme, izozim II ile kompleks haline getirilmiş membran geçirgen olmayan bir antitümör sülfonamidin X-ışını kristal yapısı ile örneklendiği gibi inhibitörlerin aktif bölge bağlama bölgesini belirler. J. Med. Kimya 48, 5721-5727 (2005).

37. C. Temperini, A. Scozzafava, D. Vullo, CT Supuran, Karbonik anhidraz aktivatörleri. I, II, IV, VA, VII ve XIV izoformlarının L- ve D-fenilalanin ile aktivasyonu ve bunların eklerinin izozim II ile kristalografik analizi: Bir enzimin aktif bölgesi içinde stereospesifik tanıma ve bunun ilaç tasarımı için sonuçları. J. Med. Kimya 49, 3019–3027 (2006).

38. J. de Carvalho Myskiw, F. Benetti, I. Izquierdo, Davranışsal etiketleme, nesli tükenme öğrenmesi. Proc. Natl. Acad. bilim ABD 110, 1071-1076 (2013).

39. WW Eaton, OJ Bienvenu, B. Miloyan, Spesifik fobiler. Lancet Psikiyatri 5, 678–686 (2018).

40. B. Vervliet, MG Craske, D. Hermans, Korku neslinin tükenmesi ve nüksetmesi: Son teknoloji. Annu. Rev. Clin. Psikol. 9, 215–248 (2013).

41. JS Weisman, TL Rodebaugh, Maruz kalma terapisi güçlendirme: Bir engelleyici öğrenme yaklaşımıyla bilgilendirilmiş tekniklerin gözden geçirilmesi ve genişletilmesi. Klinik. Psikol. Rev. 59, 41-51 (2018).

42. TR Cahill, AL Milton, Geri alma-yok etme etkisinin altında yatan nörokimyasal ve moleküler mekanizmalar. Psikofarmakoloji (Berl.) 236, 111–132 (2019).

43. LAM Lebois, AV Seligowski, JD Wolff, SB Hill, KJ Ressler, Anksiyete ve travma ile ilgili bozukluklarda eksilme ve engelleyici öğrenmenin arttırılması. Annu. Rev. Clin. Psikol. 15, 257–284 (2019).

44. JE Dunsmoor, VD Campese, AO Ceceli, JE LeDoux, EA Phelps, Novelty kolaylaştırılmış nesli tükenme: Beklenen bir tehdit yerine yeni bir sonuç sağlamak, savunma tepkilerinin iyileşmesini azaltır. Biol. Psikiyatri 78, 203-209 (2015).

45. J. Wang ve diğerleri, Asetazolamidin yüksek irtifaya maruz kalma sırasında bilişsel performans üzerindeki etkileri. Nörotoksikol. Teratol. 35, 28–33 (2013).

46. ​​N. Singewald, A. Holmes, Bozulmuş korku neslinin kemirgen modelleri. Psikofar mikoloji (Berl.) 236, 21–32 (2019).

47. NC Tronson, KA Corcoran, V. Jovaseviç, J. Raduloviç, Korku koşullandırma ve yok olma: Farklı sinyal yollarıyla kodlanmış duygusal durumlar. Trendler Neurosci. 35, 145–155 (2012).

48. CT Supuran, Karbonik anhidraz inhibitörlerinin böbrek ve merkezi sinir sistemi hastalıklarında uygulamaları. Uzman Görüşü. orada. Pat. 28, 713–721 (2018).

49. MR Milad, GJ Quirk, Medial prefrontal korteksteki nöronlar, korku tükenmesi için hafıza sinyali veriyor. Doğa 420, 70-74 (2002).

50. LS Bueno-Junior ve diğerleri, Acetazolamide prefrontal kortekse afferent tahriki in vivo olarak güçlendirir. Fizol. 5, e13066 (2017).

51. PW Frankland, B. Bontempi, LE Talton, L. Kaczmarek, AJ Silva, Ön singulat korteksin uzak bağlamsal korku belleğine katılımı. Bilim 304, 881-883 (2004).

52. FH Do Monte, GJ Quirk, B. Li, MA Penzo, Zaman geçtikçe korku anılarını geri getirmek... Mol. Psikiyatri 21, 1027-1036 (2016).

53. FH Do-Monte, G. Manzano-Nieves, K. Quiñones-Laracuente, L. Ramos-Medina, GJ Quirk, Optogenetik ile korku tükenmesinde infralimbik korteksin rolünü tekrar gözden geçirmek. J. Neurosci. 35, 3607–3615 (2015).

54. E. Knapska, S. Maren, Koşullu korkunun yok olması ve yenilenmesinden sonra medial prefrontal korteks ve amigdalada c-Fos ifadesinin karşılıklı kalıpları. Öğrenmek. Mem. 16, 486-493 (2009).

55. FH Do-Monte, K. Quiñones-Laracuente, GJ Quirk, Korku hafızasının geri getirilmesine aracılık eden devrelerde bir zamansal kayma. Doğa 519, 460-463 (2015).

56. C. Herry, N. Mons, Yok olmaya karşı direnç, medial prefrontal korteks ve amigdalada bozulmuş ani erken gen indüksiyonu ile ilişkilidir. Avro. J. Neurosci. 20, 781–790 (2004).

57. AC Huang, BC Shyu, S. Hsiao, TC Chen, AB He, Pasif kaçınma öğrenmede korku koşullandırma, yok olma ve kendiliğinden iyileşmenin sinirsel alt katmanları: Sıçanlarda bir c-fos çalışması. Davran. Beyin Araş. 237, 23–31 (2013).

58. CA Orsini, JH Kim, E. Knapska, S. Maren, Hipokampal ve bazal amigdalaya prefrontal projeksiyonlar, yok olma sonrası korkunun bağlamsal düzenlenmesine aracılık eder. J. Neurosci. 31, 17269-17277 (2011).

59. BA Silva, AM Burns, J. Gräff, Uzaktan korku belleği zayıflamasının bir cFos aktivasyon haritası. Psikofarmakoloji (Berl.) 236, 369-381 (2019).

60. B. Sacchetti, CA Lorenzini, E. Baldi, G. Tassoni, C. Bucherelli, İşitsel talamus, dorsal hipokampus, bazolateral amigdala ve peririnal korteks, sıçanda koşullu dondurmanın bağlama ve akustik koşullu uyarıcıya konsolidasyonunda rol oynar. J. Neurosci. 19, 9570-9578 (1999).

61. E. Wyllie, G. Cascino, B. Gidal, H. Goodkin, Treatment of Epilepsy: Principles and Practice, (Lippincott Williams & Wilkins, Philadelphia, PA, 2010).

62. KJ Staley, BL Soldo, WR Proctor, İnhibitör GABAA reseptörleri tarafından nöronal uyarımın iyonik mekanizmaları. Bilim 269, 977-981 (1995).

63. MK Sun, TJ Nelson, DL Alkon, GABAerjik sinapsların ryanodin reseptör aktivasyonu ile fonksiyonel değişimi. Proc. Natl. Acad. bilim ABD 97, 12300–12305 (2000).

64. M. Sun, D. Dahl, DL Alkon, Hipokampusta GABAerjik geçitlerin heterosinaptik dönüşümü ve karbonik anhidraz inhibisyonunun etkileri. J. Pharmacol. Tecrübe. orada. 296, 811-817 (2001).

65. MK Sun, WQ Zhao, TJ Nelson, DL Alkon, Hipokampal CA1 nöron aktivitesinin Theta ritmi: GABAerjik sinaptik depolarizasyon ile Gating. J. Nörofizyol. 85, 269-279 (2001).

66. M. Cammarota ve diğerleri, Geri alma ve hafızanın yok olması. Hücre. Mol. Nörobiyol. 25, 465-474 (2005).

67. CT Supuran, Karbonik anhidraz aktivatörleri. Gelecek Med. Kimya 10, 561–573 (2018). 68. SD Schmidt ve diğerleri, PACAP, NMDA reseptörleri aracılığıyla bağlamsal korku koşullandırmasının pekiştirilmesini ve yok edilmesini modüle eder. Nörobiyol. Öğrenmek. Mem. 118, 120–124 (2015).

69. R. Fabbri ve diğerleri, Engelleyici kaçınmanın hafızaya alınması, hipokampusta histamin H1 reseptör aktivasyonunu gerektirir. Proc. Natl. Acad. bilim ABD 113, E2714–E2720 (2016).