Meme Kanserinde Hücre Göçü ve Koloni Oluşumunu Azaltmak İçin M2 Benzeri Makrofaj Polarizasyonunu Düzenleyen Cistanche Deserticola Ekstraktının Çalışması

Özet: Amaç Cistanche Deserticola epimedium brevican'ın etanol ekstraktının in vitro Makrofaj polarizasyonu üzerindeki düzenleyici mekanizmasını ve bunun 4T1 hücre göçünü ve koloni oluşumunu teşvik eden M{{0}}benzeri makrofaj üzerindeki etkisini araştırmak. Yöntemler CCK-8 yöntemi, Cistanche Deserticola Deserticola'nın farklı konsantrasyonlardaki etanol ekstraktının kemik iliğinden türetilmiş makrofajların (BMDM) aktivitesi üzerindeki etkisini saptamak ve Cistanche Deserticola Deserticola Deserticola'nın etanol ekstraktının güvenli konsantrasyonunu belirlemek için kullanıldı; Western blotlama ve qRT PCR, Cistanche Deserticola Deserticola'nın etanol ekstraktının, M2 benzeri makrofajların belirteçleri olan arginaz-1 (Arg-1) ve CD163'ün ifadesi üzerindeki etkisini saptamak için kullanıldı; QRT PCR, Cistanche Deserticola Deserticola'nın alkol ekstraktının, M2 Tümörle ilişkili makrofaj (TAM'ler) ile ilgili genlerin (peroksizom-proliferatör-aktive edilmiş alıcı , PPAR) inflamatuar bölge 1 (Fizz1) ve peroksizom proliferatörle aktive edilmiş reseptörü (PPAR) üzerindeki etkisini saptamak için kullanıldı. ）, Kitinaz 3-gibi 3 (Ym1), kemokin 24 (CCL24), makrofaj Galaktoz tip C-tipi Lectin 2 (MGL2) ve interferon düzenleyici faktör 4 (IRF4) mRNA ifadesinin etkileri; Etanol ekstraktının etkisi Cistanche Deserticola Deserticola'nın M2 TAM'ler üzerinde 4T1 Hücre göçünü teşvik ettiği çizik testi ile tespit edildi Cistanche Deserticola Deserticola'nın etanol ekstraktının M2 TAM'ler tarafından uyarılan 4T1 hücrelerinin büyümesi üzerindeki etkisi koloni deneyi ile tespit edildi.Sonuçlar gösterdi ki etanol ekstraktının Epimedium'un 0.015 625 ila 2.000 000 mg/mL konsantrasyonda BMDM hücreleri üzerinde hiçbir toksik veya yan etkisi olmamıştır; Cistanche Deserticola'nın etanol özü, M2 TAM'lerle ilişkili Arg{{ 36}}, CD163, Fizz1, PPAR , CCL24, Ym1, MGL2 ve IRF4'ün ifadesi (P<0.05, 0.01, 0.001) inhibited the migration and colony formation ability of M2-TAMs in 4T1 cells (P<0.05, 0.001). Conclusion The ethanol extract of Cistanche deserticola can weaken the promotion of M2-like macrophages on 4T1 Cell migration and colony formation, and its mechanism may be related to the inhibition of M2-type polarization of macrophages.

anahtar kelimeler: Cistanche Deserticola; makrofajlar; M2 polarizasyonu; Meme kanseri; Göç; Koloni oluşumu; Benzoin asidi; koniferil aldehit; Emodin; Vanilik asit

Cistanche-Antitümör Etkileri

Meme kanseri, kadın sağlığını tehlikeye atan ana kötü huylu tümördür ve ayrıca dünyada kansere bağlı ölümlerin ikinci önde gelen nedenidir [1-2]. Meme kanserinin geç evresinde akciğer ve karaciğer metastazı vardır. Organ metastazı meydana geldiğinde, hastaların hayatta kalma oranı ve yaşam kalitesi büyük ölçüde azalacaktır [3]. Meme kanserinin birinci basamak tedavisi, esas olarak antrasiklin, paklitaksel ve diğer sitotoksik ilaçların kemoterapisine dayanır, ancak tedavi sırasında sıklıkla ilaç direnci ortaya çıkar. Bu nedenle meme kanserinin patolojik mekanizmasının araştırılması ve etkili tedavi yöntemlerinin bulunması çok önemlidir. Makrofajlar, çeşitli tümörlerin [4-5] oluşumu ve gelişimi için çok önemlidir ve makrofajların biyobelirteçleri, prognostik göstergeler olarak hizmet edebilir. Makrofaj infiltrasyonunun yüksek oranı, meme kanserinin kötü prognozuyla ilişkilidir. Tümörle ilişkili makrofajlar (TAM'ler), tümöre sızan bağışıklık hücrelerinin en tipik türüdür. Meme kanserinin erken kanserleşmesinden progresyonuna, özellikle metastazına kadar önemli rol oynarlar [6]. TAM'ler, meme kanserinin metastazında, anjiyogenezinde, matrisin yeniden modellenmesinde, invazyonunda ve immünosupresyonunda rol oynar. Geleneksel Çin tıbbı, meme kanserinin tüm tedavi sürecinde önemli bir rol oynar. Geleneksel Çin tıbbı, tümör hastalarının nüks ve metastaz oranlarını azaltabilen, yaşam kalitelerini iyileştirebilen ve hayatta kalma sürelerini uzatabilen çoklu bileşen, yol ve hedef özelliklerine sahiptir. Cistanche Deserticola Deserticornu Maxim. Ranunculales'in bir Berberidaceae bitkisidir. Tadı tatlı ve tatlıdır, doğası gereği sıcaktır ve karaciğer ve böbrek olmak üzere iki kanalı takip eder. Kasları ve kemikleri güçlendirme, böbrek yangınını tonlama, kardiyovasküler sistemi koruma [7], kemik oluşumunu destekleme [8], bağışıklık kapasitesini düzenleme [9] ve kanseri önleme [10] etkileri vardır. Araştırmalar, Cistanche Deserticola'nın alkol ekstraktının meme kanseri hücrelerinin proliferasyonunu engelleyebileceğini göstermektedir [11], ancak Epimedium'un alkol ekstraktının meme kanserinin tümör immün mikroçevresini nasıl etkilediğine dair araştırma bildirilmemiştir. Bu nedenle, bu çalışma, takip için deneysel temel ve teorik rehberlik sağlamak üzere Cistanche Deserticola Deserticola'nın alkol ekstraktının M2-benzeri makrofajlar üzerindeki etkisini ve bunun 4T1 meme kanseri Hücre göçü ve koloni oluşumu üzerindeki düzenlemesini araştırmayı amaçlamaktadır. Epimedium'un klinik uygulaması.

Cistanche tozu sağlık yararları-Antitümör

Cistanche ürünlerini incelemek için tıklayınız

【Daha fazlasını isteyin】 E-posta:cindy.xue@wecistanche.com / Whats App: 0086 18599088692 / Wechat: 18599088692

1. Malzeme

1.1 Hayvan ve Hücre

SPF Sınıfı Dişi C57BL/6 Fare, 8 haftalık, hayvan sertifika numarası 110324210105240115 ile Sibeifu (Beijing) Biotechnology Co., Ltd.'den satın alındı. Fareler, Beşinci Tıp Merkezi Hayvan Deney Merkezinde büyütüldü. Halk Kurtuluş Ordusu. Tüm deney süresi boyunca, farelere ücretsiz yiyecek ve su verildi ve 12-saat ışık/12-saat karanlık döngüsü verildi. Hayvan deneyleri, deney hayvanlarının bakımı ve kullanımına ilişkin yönergelere göre yapıldı ve Halk Kurtuluş Ordusu Genel Hastanesi Beşinci Tıp Merkezi tarafından onaylandı. Hayvan deneyleri için etik onay numarası IACUC-2021-0007 şeklindedir. 4T1 hücreleri, Shanghai Fuheng Biotechnology Co., Ltd.'den satın alındı.

Cistanche Deserticola Üzerine Deneysel Çalışma

1.2 ilaç

Cistanche Deserticola, araştırmacı Xiao Xiaohe tarafından Brevicornum Maxim'den Berberidaceae Kuru yapraklarının bir bitkisi olan Epimedium E. olarak tanımlandı. Cistanche Deserticola Deserticola yapraklarını alın, ezin ve No. Kaybedilen ağırlığı telafi etmek için seyreltik etanol kullanın, çalkalayın, süzün, devam eden süzüntüyü alın, dondurun ve Cistanche Deserticola Deserticola özü elde etmek için kurutun. 1.3 İlaçlar ve reaktifler arginaz-1 (Arg-1) antikoru (seri numarası: 93668), Amerika Birleşik Devletleri'ndeki CST Company'den satın alınmıştır; - Aktin antikoru (seri numarası 20536 1-AP) Protentech Company'den satın alınmıştır; HRP etiketli keçi anti-tavşan IgG ikincil antikoru (parti numarası J111-035-003), Jackson Immuno Research'ten satın alındı; Trizol reaktifi (parti numarası BSC51M1) Biolux şirketinden satın alınmıştır; CCK-8 reaktifi (parti numarası KTA1020-1000T) Abbkine Company'den satın alınmıştır; Interleukin 4 (IL-4) faktörü (parti numarası 96-214-14-20), Peprotech'ten satın alındı.

1.4 Enstrüman

QB-9002 Sismik Plaka Aleti (Haimen Qilin Bell Company); Epoch enzim bağlantılı immünosorbent testi ve P100 artı nükleik asit konsantrasyon analizörü (Bio Tek Company, ABD); Quantstudio 6 Flex floresan kantitatif PCR cihazı (Thermo Fisher Scientific, ABD); MINI6K avuç içi santrifüjü (Hangzhou Aosheng Şirketi); Vortex-Genie 2 vibratör (Scientific Industries, ABD).

2 Yöntem

2.1 Cistanche Deserticola'nın alkol ekstraktının bileşen analizi

2.1.1 Örnekhazırlık 5 mg/mL'lik bir süspansiyon hazırlamak için Cistanche Deserticola'nın alkol ekstraktına metanol ekleyin, 40 dakika boyunca ultrasonla ekstrakte edin, 1 mL alın ve 10 dakika boyunca 12 000 dev/dk'da santrifüjleyin , santrifüjlemeden sonra süpernatanı alın, 0,22 μ M filtre membranından geçirin, numuneyi UPLC-MS/MS içine alın. Cistanche Deserticola'nın bileşenleri, geleneksel Çin tıbbı sistemleri farmakoloji veri tabanı ve analiz platformu (TCMSP) aracılığıyla toplanmıştır. MS sonuçları, Progression QI veri platformu (NPATLAS ve GNPS veritabanlarına dayalı) kullanılarak analiz edildi ve sonuçlar, hedeflenmemiş bileşen analizi için Cistanche Deserticola bileşeni alma ile karşılaştırıldı.

2.1.2 Kromatografik koşullar:

Edinim UPLC BEH C18 kromatografik kolon (100 mm × 2,1 mm, 1,7 µm), mobil faz çift damıtılmış sudur (A) - asetonitril (B), gradyan elüsyon: 0-3 dakika, yüzde 5 B; 3 ila 35 dakika, yüzde 5 ila yüzde 95 B; 35-42 dakika, yüzde 95 -5 yüzde B. Hacimsel akış hızı 0,3 mL/dak; Enjeksiyon hacmi 5 μ L'dir; Sütun sıcaklık kutusunun sıcaklığı 40 derecedir. 2.1.3 Kütle spektrometresi koşulları: pozitif iyon modunda algılama için elektrosprey iyon kaynağı (ESI) kullanılır ve kılcal sıcaklık 275 derecedir; Kılıf gazı hacim akış hızı 20 Arb; Yardımcı gaz hacimsel akış hızı 5 Arb; İyon kaynağı voltajı 5 kV'dir. 2.2 Hücre kültürü Kemik iliği kaynaklı makrofajlar (BMDM), 8-haftalık dişi C57BL/6 farelerinin femoral kemik iliğinden izole edildi. Yüzde 10 Fetal sığır serumu, yüzde 1 penisilin/Streptomisin ve fare makrofaj koloni stimüle edici faktör M-CSF (50 ng/mL) içeren DMEM ortamında kültürlendiler ve 37 derecede ve yüzde 5 CO2'de 6 saat süreyle bir inkübatöre yerleştirildiler. günler.

Hücreleri yüzde 0,25 tripsin EDTA (2:1) ile 1,2 × İnoküle 106/mL yoğunlukta bir kuyu plakasında gece boyunca sindirin. İkinci gün, Cistanche Deserticola'nın alkol ekstraktı 1 saat eklendikten sonra, hücreler 24 saat IL-4 (20 ng/mL) ile uyarıldı.

2.3 CCK{{0}} yöntemi, Cistanche Deserticola Deserticola'nın alkol ekstraktının BMDM hücrelerine sitotoksisitesini saptamak için kullanıldı × 96 oyuklu plakalarda 106/mL yoğunluk aşılayın, gece boyunca inkübatöre koyun, farklı kütle konsantrasyonlarına sahip hücreleri tedavi et (0, 0.015 625, {{10}}.031 25, 0.{{ 9}}, 0.125, 0.25, 0.5, 1, 2, 4 mg/mL) 24 saat boyunca Cistanche Deserticola alkol ekstresi. Kültür ortamını atın, CCK-8-kültür ortamı (1:10) solüsyonu ekleyin, inkübatörde 1 saat inkübe edin, bir mikroplaka okuyucuyla 450 nm'de absorbansı (A) ölçün ve alkol ekstraktının toksisitesini tespit edin. Hücrelere Cistanche Deserticola Deserticola.

2.4Western lekeleme, BMDM hücrelerinde Arg{{0}} proteininin ekspresyonunu tespit etmek için kullanıldı. Farklı kütle konsantrasyonlarına (0.062 5, 0.125, 0.25 mg/mL) sahip Cistanche Deserticola'nın kontrol grubu, model grubu ve alkol ekstraktı grubu kuruldu. İlaç, "2.2" altındaki yönteme göre uygulandı. Hücreler toplandı ve proteini çıkarmak için RIPA lizatı eklendi. Protein numunesi yüzde 10 Sodyum dodesil sülfat-poliakrilamid jel elektroforezine tabi tutuldu, PVDF zarına aktarıldı, yüzde 5 yağsız süt içeren TBST içinde 1 saat süreyle kapatıldı, birincil antikor eklendi ve gece boyunca 4 derecede inkübe edildi; TBST ile yıkadıktan sonra, ikincil antikorla inkübe edin ve gelişmiş kemilüminesans saptama reaktifi kullanarak geliştirin.

2.5 qRT PCR, BMDM hücre kemotaktik faktörü 24 (CCL24), enflamatuar bölge 1 (Fizz1), Kitinaz 3-like 3 (Ym1), makrofaj galaktoz tip C-tipi Lektin 2 (MGL2) ve Peroksizom proliferatörü- saptamak için kullanıldı kontrol grubu, model grubu ve farklı kütle konsantrasyonları ({{17} }.062 5, 0.125, 0.25 mg/mL) "2.2"ye göre Cistanche Deserticola alkol ekstresi

2.6Koşullu besiyerinin hazırlanması Referans yöntemi [12]: BMDM, "2.2" altındaki yönteme göre kültürlendi. Hücre tohum plakası takıldıktan sonra Cistanche Deserticola alkol özü (0,25 mg/mL) içeren serumsuz bir ortam eklendi ve IL-4 (20 ng/mL) ) 1 saat sonra eklendi. 24 saat sonra, şartlandırılmış ortam olarak süpernatanı toplayın. Şartlandırılmış ortam, parçaları çökeltmek için 2000 dev/dak'da santrifüjlendi, aspire edildi ve Hücre göçü deneyleri için -80 derecede saklandı. BMDM, "2.2" altındaki yönteme göre kültürlendi ve hücre tohum plakası duvara yapıştırıldıktan sonra Cistanche Deserticola'nın alkol ekstraktı (0.25 mg/mL) içeren DMEM ortamı eklendi ve IL-4 (20 ng) /mL) bir saat sonra eklendi. 24 saat sonra, şartlandırılmış ortam olarak süpernatanı toplayın. Parçaları çökeltmek, süpernatantı aspire etmek ve hücre kolonisi deneyleri için -80 derecede saklamak için şartlandırılmış ortamı 2000 santrifüjleyin.2.7 Hücre taşıma deneyi Yara iyileşmesi için {{0}delik eklentisini bir 12-delikli plakaya yerleştirin ve 4T1 hücreleri 3,6 × 105/mL aşılama ile tedavi edilir . Hücreler gece boyunca duvara yapıştıktan sonra eklentiyi çıkarın ve yüzen ölü hücreleri PBS ile yıkayın. Yüzde 5 0 şartlandırılmış ortam içeren serumsuz ortam ekleyin. 24 saat boyunca bir inkübatörde inkübe edin. 0 ve 24 saatte ters mikroskopla fotoğraf çekin, resimleri Image J ile analiz edin ve Hücre geçiş oranını hesaplayın. Hücre taşıma hızı=(0 sa yara alanı -24 sa yara alanı)/0 sa yara alanı

2.8Hücre koloni deneyi 1000 4T1 hücreleri, 6 gözlü plakaların her bir oyuğuna aşılandı ve 8 gün boyunca yüzde 50 şartlandırılmış ortam içeren ortamla inkübe edildi. Yüzde 2 Paraformaldehit ile sabitleyin, yüzde 1 Kristal viyole ile boyayın, fotoğraf çekin ve Image J ile resimleri analiz edin.

2.9İstatistiksel analiz GraphPad Prism 8 yazılımı kullanılarak yapıldı, ölçüm verileri xs ± olarak ifade edildi ve gruplar arası karşılaştırmalar tek yönlü ANOVA kullanılarak yapıldı.

3. Sonuçlar

3.1 Cistanche Deserticola Deserticola'nın alkol ekstraktının kompozisyon analizi, Şekil 1 ve Tablo 2'de gösterilmektedir. Cistanche Deserticola Deserticola'nın alkol ekstraktı, benzoik asit, koniferil aldehit, Emodin, vanilik asit, hiyalin ve lepirudin A içerir.

Tablo 1 Astar dizileri

Şekil 1 Cistanche Deserticola Deserticola'dan Alkol Ekstraktlarının Analizi

Tablo 2 Cistanche Deserticola Deserticola'nın alkol ekstraktının bileşen analizi

3.2BMDM üzerinde Cistanche Deserticola alkol ekstraktının sitotoksisitesi Sonuçlar, 0.015 625 - 2 mg/mL Cistanche Deserticola alkol ekstraktının, BMDM hücrelerini farklı konsantrasyonlarda Cistanche Deserticola alkol ekstraktı ile işledikten sonra BMDM hücreleri üzerinde hiçbir toksik etkiye sahip olmadığını gösterdi. 24 saat boyunca (Şekil 2).

Şekil 2 Cistanche Deserticola Deserticola'nın alkol ekstraktının BMDM'ye sitotoksisitesi (xs ±, n=3)

3.3 Cistanche Deserticola'nın etanol özü, in vitro makrofajların M2 polarizasyonunu inhibe eder. BMDM M0 makrofajlarında, M2-benzeri makrofajların Arg-1 ve CD163 işaretleri düşük düzeyde ifade edilir ve ifade, IL-4 tarafından indüksiyondan sonra önemli ölçüde artar; BMDM'nin M2-benzeri makrofajlara başarıyla polarize olduğu. Western blot ve qRT PCR teknikleri, Cistanche Deserticola'nın alkol ekstraktının, IL-4 tarafından indüklenen Arg-4 ve CD163'ün ekspresyonunu doza bağlı bir şekilde (Şekil 3) modüle edebildiğini doğrulamak için kullanıldı (Şekil 3). Cistanche Deserticola'nın alkol ekstraktının, makrofajların M2 benzeri polarizasyonunu doğrudan engelleyebileceği. Cistanche Deserticola Deserticola'nın alkol ekstraktının makrofajların M2 polarizasyonu üzerindeki etkisini daha fazla araştırmak için, M2 benzeri makrofajla ilgili genler Fizz1 ve PPAR'ı incelemek için qRT PCR kullanıldı. Ym1, CCL24, MGL2 ve IRF4'ün transkripsiyon seviyeleri Şekil'de gösterilmektedir. 4. Model grubuyla karşılaştırıldığında, Cistanche Deserticola (0.062 5, 0.125, {) alkol özündeki Fizz1, Ym1, CCL24 ve IRF4'ün mRNA ifade seviyeleri {29}},25 mg/mL) grubu önemli ölçüde azaldı (P<0.05, 0.01, 0.001), and the PPAR in the alcohol extract of Cistanche deserticola (0.125, 0.25 mg/mL) group γ The mRNA expression level decreased significantly (P<0.01, 0.001), and the MGL2 mRNA expression level in the alcohol extract of Cistanche deserticola deserticola (0.25 mg/mL) group decreased significantly (P<0.001).

3.4 Cistanche Deserticola'nın etanol özü, 4T1 hücre göçünde M2-benzeri makrofajların teşvikini zayıflatır. Çizilme testi, Cistanche Deserticola etanol ekstraktının süpernatanının meme kanseri hücrelerinin migrasyon yeteneği üzerindeki etkisini gözlemlemek için kullanıldı. BMDM, IL-4 ve Cistanche Deserticola Deserticola'nın alkol ekstraktını içeren serumsuz bir ortamda 24 saat süreyle inkübe edildi ve süpernatan, şartlandırılmış bir ortam olarak toplandı. 4T1, Şekil 5'te gösterildiği gibi yüzde 50 şartlandırılmış ortam içeren serumsuz ortamda kültürlendi; yalnızca IL-4 ile işlenmiş BMDM tarafından toplanan şartlandırılmış ortam, 4T1 hücrelerinin göçünü önemli ölçüde destekledi (P<0.05), while the conditioned medium of BMDM treated with alcohol extract of Cistanche deserticola significantly inhibited the migration of 4T1 cells (P<0.05). 3.5 Cistanche deserticola alcohol extract weakens the promotion of M2-like macrophages on 4T1 cell colony formation Use colony formation experiment to evaluate the effect of Cistanche deserticola alcohol extract on M2-like macrophages promoting 4T1 cell colony formation. As shown in Figure 6, the conditioned medium treated with IL-4 significantly promoted the colony formation of 4T1 cells (P<0.05), while the conditioned medium treated with alcohol extract of Cistanche deserticola significantly inhibited the colony formation of cells (P<0.001)

4. Tartışma

Cistanche tubulosa-Antitumor'un Faydaları

Şu anda, meme kanseri hala küresel bir halk sağlığı sorunudur. Kadın sağlığını ciddi şekilde tehdit eden meme kanseri insidansı her yıl ve genç yaşta artmaktadır [13]. Geleneksel Çin tıbbı, tümörlerin erken evrelerinde vücudun yang eksikliği nedeniyle qi'yi dağıtamaması nedeniyle yin qi'nin yetersiz olduğuna ve normal sperm birikimi oluşturamayacağına inanmaktadır. Ancak anormal birikim balgam bulanıklığı ve kan staz gibi patolojik ürünlere yol açarak toksinlerin tümöre dönüşmesine yol açar [14]. Yang'ı tonlamak için temel bir ilaç olan Cistanche Deserticola Deserticola, hayati enerjiyi ve böbrek yangınını tonlama etkilerine sahiptir ve bağışıklığı düzenleyebilir. Çin tıbbında klinik uygulamada yaygın olarak kullanılan bir böbrek tonlayıcıdır. Şimdi genellikle meme kanserini tedavi etmek için kullanılıyor ve sıklıkla yüksek frekanslı bir bileşik ilaç olarak kullanılıyor. Kanserin özelliklerinden biri bağışıklık fonksiyon bozukluğudur. Tümörlere karşı savaşması gereken bağışıklık hücreleri, özellikle çevreleyen dokular ve tümörlerin kontrolsüz büyümesine ve yayılmasına yol açan Tümör mikroçevresi tarafından Cinsel olarak inhibisyondur [15]. Giderek daha fazla kanıt, Tümör mikroçevresinde var olduğunda, doğuştan gelen bağışıklık hücrelerinin (makrofajlar, nötrofiller, dendritik hücreler, doğuştan gelen lenfoid hücreler, kemik iliği kaynaklı Cinsel inhibisyon hücreleri ve NK hücreleri) ve adaptif bağışıklık hücrelerinin (T hücreleri ve B hücreleri) olduğunu göstermektedir. ) tümörün ilerlemesine katkıda bulunur [16]. Makrofajlar, doku homeostazının vazgeçilmez aracılarıdır ve alternatif aktif makrofajlara (M2 tipi) doğru polarizasyonları, kanser hücresi proliferasyonunu, anjiyogenezi ve metastazı teşvik edebilir. Bu nedenle, TAM'lerin düzenlenmesi ve homeostazlarının sürdürülmesi, tümör tedavisinin odak noktası haline gelmiştir [17]. TAM'ler, meme kanserinin metastazında, anjiyogenezinde, matrisin yeniden modellenmesinde, invazyonunda ve immünosupresyonunda rol oynar. TAM'ler temel olarak iki farklı fenotipe ayrılır, yani klasik aktive M1-benzeri makrofajlar ve alternatif aktive M2-benzeri makrofajlar [18]. İyi huylu veya işlevsel olmayan tümörlerde, TAM'lerin çoğu, interferon-, IFN-) veya Lipopolisakarit (LPS) aktivasyonu olan M1-gibi makrofajlar gibi klasik olarak aktive edilir ve böylece TAM'lerin proinflamatuar faktörler üretmesini ve tümör hücrelerinin fagositozunu teşvik eder. M2-benzeri makrofajlar, IL-4 gibi Th2 sitokinleri tarafından aktive edilerek meme kanseri gelişimini doğrudan destekleyen çok sayıda anti-inflamatuar faktör üretebilir [19]. Bu nedenle, M2-benzeri makrofajların polarizasyonunu tersine çevirmek veya engellemek, meme kanseri için immünoterapi stratejisidir. Arg-1, M2-benzeri makrofajların bir işaretçisidir ve aşırı ekspresyonu, kanser hastalarında kötü prognoz ile ilişkilidir [20].

Çin otu cistanche-Antitümör

CD163, tümör metastazı ile ilişkili olan M2-benzeri makrofajların [21] spesifik bir işaretçisidir. CD163 artı TAM, epitelyal-mezenkimal geçişi (EMT) indükler ve kanser hücresi göçünü destekler [22]. Bu çalışmanın sonuçları, Cistanche Deserticola Deserticola ekstraktının, M2-benzeri makrofajların yüzey belirteçleri olan Arg-1 ve CD163'ün ifadesini inhibe ederek, bağışıklığı belirli bir dereceye kadar düzenlemede rol oynadığını göstermektedir. ve makrofajların M2-tipi polarizasyonunu inhibe etmek. PPAR Çeşitli yağ asitlerinin ve yağ asidi türevlerinin (Palmitik asit gibi) aktivasyonu yoluyla lipid homeostazını düzenleyen metabolik bir sensördür [23]. Makrofajların M2 polarizasyonu ile ilgili PPAR, PPAR makrofajlarda M2 polarizasyonunun ana düzenleyicisi haline gelmiştir [24], PPAR Ligandlarının in vivo tümör büyümesi üzerinde güçlü inhibitör etkileri olduğu gösterilmiştir [25]. Fizz1 ve Ym1'in her ikisi de M2-benzeri makrofaj işaretleyici genlerdir ve Fizz1 ve Ym1, doku onarımı sırasında fibrozda yer alır [26]. M2-benzeri makrofajlar, in vitro olarak büyük miktarda CCL24 üretir [27] ve CCL24'ün artan ekspresyonu, tümör proliferasyonunu, göçünü ve invazyonunu destekleyebilir [28]. IRF4, IRF ailesinin bir üyesidir. Makrofajların M2 polarizasyon sürecine katılır ve MyD88 adaptör molekülü ile birleşerek Toll benzeri reseptör sinyallerinin negatif düzenleyicisi olarak görev yapar [29]. MGL2, Galaktoz tip C tipi Lektin makrofaj ailesinin bir üyesidir ve alternatif aktivasyon koşulları altında uyarılan makrofajlarda da ifade edilir [30]. Bu çalışmanın sonuçları, Cistanche Deserticola Deserticola ekstraktının, M2 benzeri makrofajla ilgili gen PPAR'ı inhibe ettiğini göstermektedir. M2 benzeri makrofajların inhibitörü. Giderek daha fazla kanıt, M2-benzeri makrofajların kanser metastazını ve büyümesini destekleyebileceğini düşündürmektedir [31]. M2-benzeri makrofajlardan elde edilen şartlandırılmış ortam, Tümör mikroçevresini simüle edebilir ve kötü huylu tümörlerden izole edilen makrofajlara benzer şekilde tümör göçünü ve büyümesini indükleyebilir [12]. IL-4, makrofaj polarizasyonunu M2 tipine doğru ilerletebilir ve tümör proliferasyonunu ve anjiyogenezi teşvik edebilir [18]. Bu çalışma, makrofaj polarizasyonu ile Cistanche Deserticola Deserticola'nın anti-tümör etkisi arasındaki ilişkiyi göstermiştir. IL-4-aktive edilmiş makrofajlardan gelen şartlandırılmış ortam, 4T1 hücrelerinin göçünü ve büyümesini destekledi ve Cistanche Deserticola ile birlikte müdahaleden sonra, bu M2-aktive edilmiş tümör teşvik edici etkiyi tersine çevirerek, IL{{55} }aktive edilmiş M2 polarizasyonu, Cistanche Deserticola tarafından ortadan kaldırıldı.

Bu çalışma, makrofaj polarizasyonu ile Cistanche Deserticola Deserticola'nın anti-tümör etkisi arasındaki ilişkiyi göstermiştir. IL-4-aktive edilmiş makrofajlardan gelen şartlandırılmış ortam, 4T1 hücrelerinin göçünü ve büyümesini destekledi ve Cistanche Deserticola ile birlikte müdahaleden sonra, bu M2-aktive edilmiş tümör teşvik edici etkiyi tersine çevirerek, IL{{7} }aktive edilmiş M2 polarizasyonu Epimedium tarafından ortadan kaldırıldı. Bu çalışma, Cistanche Deserticola ekstraktının, makrofajların in vitro polarizasyonunu düzenleyerek meme kanserinin Hücre göçünü ve koloni oluşumunu engellediğini bulmuştur; Cistanche Deserticola'nın anti-tümör işlevi için yeni mekanizma içgörüleri sağlayan makrofajları etkileyerek metastaz bölgesindeki Tümör mikro ortamının düzenleyicisi kanser ve kansere bağlı ölüm. Gelecekte, araştırma ekibi, Cistanche Deserticola'nın anti-tümör mekanizmasını daha fazla açıklamak ve klinik uygulama için temel sağlamak üzere, makrofajların M2 polarizasyonunu in vivo inhibe ettikten sonra Cistanche Deserticola'nın meme kanserinin büyümesi ve metastazı üzerindeki etkisini daha fazla araştıracaktır. Tümör hastalıklarının tedavisinde Cistanche Deserticola.

Referanslar

Referanslar

[1] GBD 2019 Kanser Risk Faktörleri İşbirlikçileri. Risk faktörlerine atfedilebilen küresel kanser yükü, 2010-19: Küresel Hastalık Yükü Çalışması 2019 [J] için sistematik bir analiz. Lancet, 2022, 400(10352): 563-591.

[2] Yin L, Duan JJ, Bian XW ve ark. Üçlü negatif meme kanseri moleküler alt tipi ve tedavi ilerlemesi [J]. Göğüs Kanseri Araştırması, 2020, 22(1): 61.

[3] Medeiros B, Allan A L. Akciğere meme kanseri metastazının moleküler mekanizmaları: Klinik ve deneysel perspektifler [J]. Int J Mol Sci, 2019, 20(9): 2272.

[4] Pathria P, Louis TL, Varner JA. Kanserde tümörle ilişkili makrofajları hedefleme [J]. Trendler Immunol, 2019, 40(4): 310-327.

[5] Shen MJ, Chen YB, Xu LJ ve ark. Makrofajların radyodirençli akciğer kanseri hücrelerine artan infiltrasyonu, tümör hücrelerinin NK hücrelerinin [J] sitotoksik etkilerine karşı ek direncinin gelişmesine katkıda bulunur. Int J Oncol, 2018, 53(1): 317-328.

[6] Tariq M, Zhang JQ, Liang GK, et al. Makrofaj polarizasyonu: Meme kanserinde tümörle ilişkili makrofajı hedeflemek için kanser karşıtı stratejiler [J]. J Cell Biochem, 2017, 118(9): 2484-2501.

[7] Akut orta serebral arter enfarktüsü olan sıçanlarda Cistanche Deserticola glikozidinin stromal hücre kaynaklı faktör-1 (SDF-1) ve reseptörü CXCR-4 üzerindeki Ma Li Etkileri [D] Nanjing : Nanjing Çin Tıbbı Üniversitesi, 2014

[8] Hao Fuliang Cistanche Deserticola glikozidinin tavşan kafatası kusurlarının onarımı ve iyileşmesi üzerindeki etkisi ve mekanizması [D] Shijiazhuang: Hebei Tıp Üniversitesi, 2013

[9] He J, Zang SL, Liu N, et al. Epimedium polisakkaritler, benzen kaynaklı kemik iliği yetmezliği [J] fare modelinde oksidatif stresi azaltarak ve bağışıklık fonksiyonunu artırarak hematotoksisiteyi hafifletir. Biomed Eczacı, 2020, 125: 109908.

[10] Hua Ciyi, Shi Youyang, Xie Ying, et al. Cistanche Deserticola'nın meme kanseri tedavisindeki etken maddesinin mekanizmasına ilişkin araştırma ilerlemesi [J] Çin bitkisel ilacı, 2022, 53 (20): 6593-6600

[11]Chen Xiaolei, Tang Lijian, Li Qinglin Meme kanseri hücrelerinin Cistanche Deserticola ve frazil özleri tarafından in vitro olarak çoğalmasına karşı çalışma [J] China Pharmacy, 2007, 18 (15): 1124-1127

[12] Xu F, Cui WQ, Wei Y ve ark. Astragaloside IV, AMPK sinyali [J] yoluyla makrofaj polarizasyonunu modüle ederek akciğer kanseri ilerlemesini ve metastazını inhibe eder. J Exp Clin Cancer Res, 2018, 37(1): 207.

[13] Britt KL, Cuzick J, Phillips KA. Etkili meme kanseri önleme için temel adımlar [J]. Nat Rev Cancer, 2020, 20(8): 417-436.

[14] Hao Feifei, Tian Sisheng Malign Tümör Metastazında Gazlaştırma Teorisine Dayalı Olarak "Yang Domine Eden Yin"in Keşfi [J] Shi Zhen Guoyi Guoyao, 2021, 32 (1): 164-166

[15] Denk D, Petrocelli V, Conche C ve ark. Ürolitin A'nın neden olduğu mitofaji [J] ile üstün anti-tümör bağışıklığına sahip T bellek kök hücrelerinin genişlemesi. Bağışıklık, 2022, 55(11): 2059-2073.

[16] Hinshaw DC, Shevde LA. Tümör mikro ortamı, kanserin ilerlemesini doğal olarak modüle eder [J]. Kanser Araştırması, 2019, 79(18): 4557-4566.

[17] DeNardo DG, Ruffell B. Tümör bağışıklığı ve immünoterapi düzenleyicileri olarak makrofajlar [J]. Nat Rev Immunol, 2019, 19(6): 369-382.

[18] Dong R, Gong YL, Meng W ve ark. Kolon kanseri [J] üzerinde fenretinid aracılı kemopreventif etkilerde M2 ​​makrofaj polarizasyon inhibisyonunun katılımı. Kanser Lett, 2017, 388: 43-53. [19] Jiménez-Garcia L, Herránz S, Luque A, et al. p38 MAPK'nın IL-4-peritoneal makrofajların [J] alternatif aktivasyonundaki kritik rolü. Eur J Immunol, 2015, 45(1): 273-286.

[20] Ma ZG, Lian J, Yang M, et al. Arginaz-1'ın aşırı ekspresyonu, kolorektal kanser [J] hastalarında kötü prognozun bir göstergesidir. Pathol Res Uygulaması, 2019, 215(6): 152383.

[21] Tao SF, Chen Q, Lin C ve ark. Linc00514, meme kanseri metastazını ve tümörle ilişkili makrofajların M2 polarizasyonunu Jagged1-aracılı Notch sinyal yolu [J] yoluyla destekler. J Exp Clin Cancer Res, 2020, 39(1): 191.

[22] Wei C, Yang CG, Wang SY ve ark. Mezenkimal dolaşımdaki tümör hücresi aracılı kolorektal kanser metastazı [J] için kanser hücreleri ve tümörle ilişkili makrofajlar arasındaki karışma gereklidir. Mol Kanseri, 2019, 18(1): 64.

[23] Francque S, Szabo G, Abdelmalek MF, et al. Alkolsüz steatohepatit: Peroksizom proliferatörle aktive olan reseptörlerin [J] rolü. Nat Rev Gastroenterol Hepatol, 2021, 18(1): 24-39.

[24] Tian Y, Yang CM, Yao QY, et al. Procyanidin B2, fare makrofajlarında [J] M2 polarizasyonunu indüklemek için PPAR'ı aktive eder. Ön İmmunol, 2019, 10: 1895.

[25] Takada I, Makishima M. Peroksizom proliferatörü ile aktive edilen reseptör agonistleri ve antagonistleri: Bir patent incelemesi (2014- mevcut) [J]. Uzman Görüşü Ther Pat, 2020, 30(1): 1-13.

[26] Okuzumi S, Miyata J, Kabata H, et al. TLR7 agonisti, IL-27-üreten interstisyel makrofajlar [J] aracılığıyla grup 2 doğuştan gelen lenfoid hücre aracılı enflamasyonu baskılar. Am J Respir Cell Mol Biol, 2021, 65(3): 309-318.

[27] Makita N, Hizukuri Y, Yamashiro K ve ark. IL-10, IL-4 tarafından indüklenen M2 makrofajlarının fenotipini geliştirir ve eozinofil göçünü artırma yeteneği verir [J]. Uluslararası Bağışıklık, 2015, 27(3): 131-141.

[28] Jin L, Liu WR, Tian MX ve ark. CCL24, RhoB-VEGFA-VEGFR2 anjiyogenez yolu yoluyla HCC malignitesine katkıda bulunur ve kötü prognozu gösterir [J]. Oncotarget, 2017, 8(3): 5135-5148.

[29] Satoh T, Takeuchi O, Vandenbon A ve ark. Jmjd3-Irf4 ekseni, M2 makrofaj polarizasyonunu ve helmint enfeksiyonuna [J] karşı konak yanıtlarını düzenler. Nat Immunol, 2010, 11(10): 936-944.

[30] Raes G, Brys L, Dahal BK, et al. Paraziter enfeksiyonlar ve alerjik hava yolu inflamasyonu [J] tarafından ortaya çıkarılan alternatif olarak aktive edilmiş makrofajlar için yeni belirteçler olarak makrofaj galaktoz tip C-tipi lektinler. J Leukoc Biol, 2005, 77(3): 321-327.

[31] Mantovani A, Allavena P, Sica A, et al. Kansere bağlı inflamasyon [J]. Doğa, 2008, 454(7203): 436-444.