Senil Kabızlık Sıçan Modelinde Cistanche Deserticola'nın Dışkılama Üzerine Terapötik Etkisi
Mar 27, 2022
İletişim:joanna.jia@wecistanche.com/ WhatsApp: 008618081934791
Xia Zhang, Fa-Juan Zheng, Zhen Zhang
Soyut
ARKA FON
Kabızlık, kronik gastrointestinal fonksiyonel hastalıklardan biridir. Yaşam kalitesini ciddi anlamda etkiler. Cistanche Deserticola (C. Deserticola) kabızlığı açıkça tedavi edebilir, ancak mekanizması açıklığa kavuşturulmamıştır. Mekanizmasının interstisyel Cajalcell'leri (ICC) uyararak bağırsak hareketliliğini geliştirdiğini varsaydık. ICC yüzeyindeki C-kit reseptörünün aktivasyonu, ICC fonksiyonu ile yakından ilişkilidir ve kök hücre faktörü (SCF)/C-kit sinyal yolları bunda önemli rol oynar. C. Deserticola'nın kabızlığı nasıl tedavi ettiğinin mekanizmasını araştırmak için bu çalışma, sıçanlarda bir kabızlık modeli oluşturmayı ve tedavide SCF/C-kit sinyal yolunun rolünü araştırmayı amaçladı.
AMAÇ
Bir kabızlık sıçan modeli ile kabızlığın tedavisinde C. Deserticola'nın rolündeki SCF/C-kit sinyal yollarını araştırmak.
YÖNTEMLER
Kırk sekiz 8-aylık Sprague–Dawley sıçanı rastgele ağırlık yöntemiyle 4 gruba ayrıldı: Normal grup (n=12), model grubu (n=12), C. Deserticola grubu (n=12) ve engelleyici grup (n=12). Normal grup, normal salin yan gavaj aldı; model grubu, sonda ile loperamid aldı; bloker grubuna sonda ile loperamid ve C. Deserticola verildi ve STI571 intraperitoneal olarak enjekte edildi. Tedavi sırasında ağırlık, dışkı granülleri ve dışkı kalitesi her 10 günde bir kaydedildi. Model indüksiyonundan 20 gün sonra, her grubun kolon dokuları çıkarıldı. Patolojik değişiklikleri gözlemlemek için hematoksilen ve eozin boyama kullanıldı. SCF, C-kit ve Aquaporin genlerinin ekspresyon seviyeleri, immünohistokimya, western blot ve gerçek zamanlı nicel polimeraz zincir reaksiyonu ile tespit edildi. Kolonik epitelyal mitokondri ve goblet hücreleri transmisyon elektron mikroskobu ile gözlendi.
SONUÇLAR
Normal grupla karşılaştırıldığında, tedavi ilerledikçe, model ve bloker gruplarındaki sıçanların ağırlığı önemli ölçüde azaldı, dışkı ağırlığı azaldı ve dışkı kalitesi kuruydu (P < {{0}}.{{6})="" }5).="" c.="" deserticola,="" vücut="" ağırlığı="" ve="" dışkı="" ağırlığındaki="" azalmayı="" tersine="" çevirdi="" ve="" dışkı="" kalitesini="" iyileştirdi.="" histopatolojik="" analiz,="" model="" grubundaki="" kolonik="" mukozal="" epitelinin="" eksik="" olduğunu="" ve="" bezlerin="" düzeninin="" düzensiz="" veya="" hasarlı="" olduğunu="" gösterdi.="" c.="" deserticola="" ile="" tedavi,="" epitel="" hücrelerinin="" bütünlüğünü="" ve="" devamlılığını="" ve="" bezlerin="" düzenli="" dizilimini="" iyileştirdi.="" bloke="" edici="" ajanlar,="" c.="" deserticola'nın="" etkilerini="" inhibe="" etti="" immünohistokimya="" ve="" gerçek="" zamanlı="" kantitatif="" polimeraz="" zincir="" reaksiyonu,="" model="" grubunun="" kolon="" dokusunda="" scf="" ve="" c-kitprotein="" veya="" genlerinin="" ekspresyonunun="" azaldığını="" (p="">< 0.05),="" c="" ile="" tedavi="" edilirken="" gösterdi.="" çölikola,="" protein="" veya="" gen="" ekspresyonunu="" arttırdı="" (p="">< 0.05).="" western="" blot,="" aquaporin="" apq3="" ekspresyonunun="" arttığını,="" cx43="" ekspresyonunun="" ise="" model="" grubunda="" azaldığını="" gösterdi.="" c.="" deserticola="" ile="" tedavi,="" apq3="" ekspresyonunu="" inhibe="" etti="" ve="" cx43="" ekspresyonunu="" arttırdı.="" transmisyon="" elektron="" mikroskobu,="" model="" grubundaki="" kolon="" epitelinin="" mitokondrilerinin="" şişmiş="" ve="" düzensiz="" düzenlenmiş="" olduğunu="" ve="" mikrovillilerin="" seyrek="" olduğunu="" gösterdi.="" c.="" deserticola="" grubunda="" durum="" daha="" iyiydi.="" sti571="" engelleyici="" ile="" tedavi="" edilen="" fareler,="" scf/c-kit="" yolunun="" bloke="" edilmesinin,="" c.="" deserticola="" tarafından="" kabızlığın="" iyileştirilmesini="" engellediğini="">
ÇÖZÜM
C. Deserticola, kabızlığı olan sıçanlarda dışkılamayı iyileştirdi ve ICC fonksiyonunun önemli bir halkası olan SCF/C-kit sinyal yolu, tedavide önemli bir rol oynadı.
Anahtar Kelimeler:Cistanche Deserticola; Senil kabızlık; Kök hücre faktörleri; C kiti
taze cistanche hammaddesi
GİRİİŞ
Senil kabızlık (SK), serebrovasküler olayları ve diğer hastalıkları indükleyen veya ağırlaştıran ve yaşlı popülasyonun yaşam kalitesini ciddi şekilde etkileyen geriatrik hastalarda sık görülen kronik gastrointestinal fonksiyonel hastalıklardan biridir[1,2]. Geleneksel Çin tıbbına göre ana SK'nin etiyolojisi ve patogenezi gastrointestinal ısı, Yin ve Jin eksikliği ve bağırsakların ıslanması[3,4] iken, Cistanche Deserticola (C. Deserticola) böbrekleri ısıtabilir ve bağırsakları rahatlatabilir. SC'nin motilite iyileştirmesi ve tedavisi açıktır, ancak mekanizması açıklığa kavuşturulmamıştır[5,6]. İnterstisyel Cajalcell'ler (ICC'ler), gastrointestinal sistemdeki özel bir mezenkimal hücre tipidir. ICC'lerin yüzeyindeki C-kit reseptörünün aktivasyonu, hücre proliferasyonu, farklılaşması ve fonksiyonu ile yakından ilişkilidir. ICC'ler birçok gastrointestinal motor fonksiyon bozukluğunun patogenezinde yer alır[7,8]. C-kit'in aktivasyonu, ligand kök hücre faktörünün (SCF) bağlanmasına bağlıdır[9]. C'nin etkisini ve etki mekanizmasını araştırmak. Deserticola'da SC'de çölikola, bu çalışma, C. Deserticola tarafından kabızlığın tedavisinde SCF/C-kit sinyal yolunun rolünü araştırmak için sıçanlarda loperidol ile indüklenen bir SC modeli oluşturmayı amaçladı.
MALZEMELER VE YÖNTEMLER
deneysel malzemeler
Deney hayvanları:Deney hayvanları, 500-550 g ağırlığındaki 48 erkek 8-aylık Sprague Dawley faresiydi; tümü Changsha Tianqin BiotechnologyCo'dan satın alındı. Ltd. Sıçanlar, Chongqing Weisiteng BiomedicalTechnology Co. Ltd.'nin hayvan laboratuvarında, normal gündüz ve gece ışığı, yiyecek ve içecek verilerek büyütüldü. Tüm prosedürler, Chongqing Geleneksel Çin Tıbbı Hastanesi Etik Komitesi tarafından yayınlanan yönetim yönergelerine uygundur.
Birincil reaktifler:Birincil reaktifler loperamid (Sigma, St. Louis, MO, Amerika Birleşik Devletleri), Hubei Jurui Geleneksel Çin Tıbbı DecoctionCo.'dan C. Deserticola'yı içeriyordu. Ltd., STI571, Chinese Selleck Co. Ltd.'den ve SCF, C-kit, connexin 43 (Cx43), aquaporin 3 (AQP3) ve -aktin antikorları (Abcam, Cambridge, MA, Amerika Birleşik Devletleri), PrimeScript II 1st Strand cDNA Sentez Kiti ve Premix Taq™ (Ex Taq™ Sürüm 2.0)(Takara Co. Ltd., Japonya).
cistanche otlar özü takviyeleri
yöntemler
SC model hazırlama ve gruplama:Vücut ağırlığı gibi kafa karıştırıcı faktörlerin deneysel sonuçlar üzerindeki etkisinden kaçınmak için, sıçanlar rastgele blok rastgele gruplama yöntemi ile gruplandırıldı. Kırk sekiz sıçan, 1 hafta boyunca adaptif olarak beslendi ve sıçanlar, hafiften ağıra ağırlık sırasına göre numaralandırıldı. Vücut ağırlık sırasına göre, sıçanlar 12 bölgeye ayrıldı (her bölgedeki sıçanların ağırlığı benzerdi), her bölgede 4 sıçan vardı. 12 bölge, 12'li (normal, model, C. Deserticola ve engelleyici) 4 gruba ayrıldı. Model grubundaki sıçanlara sonda ile loperamid (0.0625/100 g, 10 mL/kg) verildi. İlk gavaj dozu iki katına çıkarıldı ve ilaç art arda 20 gün boyunca her gün saat 10:00'da verildi. Normal gruba sonda ile aynı miktarda normal salin verildi. Ayrıca model grubu gavaj yoluyla C. Deserticola (0.156 g/100 g, 10 ml/kg) ile muamele edilmiştir. Bloker grubuna gavaj yoluyla C. Deserticola (0.156 g/100 g, 10 mL/kg) ve intraperitoneal enjeksiyon yoluyla STI571 (25 mg/mL, 1 mL/kg) verildi. Deney sırasında her 10 günde bir vücut ağırlığı, dışkı ağırlığı ve dışkı durumu kaydedildi. Sıçanların hiçbirinde kaza sonucu ölüm meydana gelmemiştir. Yirmi gün sonra, sıçanlar öldürüldü ve inceleme ve sıvı nitrojen muhafazası için kolon dokusu çıkarıldı. Kalan parçalar sabitlendi ve gömüldü.
Histopatolojik analiz:Gece boyunca aç bırakılan sıçanlara, ertesi gün yüzde 7 kloral hidrat (5 mL/kg) ile intraperitoneal enjeksiyon yoluyla anestezi uygulandı. Kolon dokusunu ayırmak için karın açıldı ve kolonun 8-10 mm'si çıkarıldı. Bağırsak içeriği, önceden soğutulmuş polibütilensüksinat içinde hafifçe çalkalanarak çıkarıldı ve yüzde 4'lük bir paraformaldehit fiksatif solüsyonunda 24 saat sabitlendi. Geleneksel parafin gömme işlemi yapıldı. Hematoksilen ve eozin boyaması için doku kesitleri (5 μm) çıkarıldı ve histopatolojik morfoloji mikroskop altında gözlendi.
İmmünohistokimyasal boyama ile SCF ve C-kit ekspresyonunun tespiti:Yukarıda histopatoloji ile incelenen parafin dokuları kesitlere ayrıldı, kesitli ksilen mumu alınmış gradyan etanol ile yeniden hidratlandı, antijen ısı ile düzeltildi ve oda sıcaklığında keçi serumu ile 1 saat süreyle kapatıldı. SCF ve C-kit primer antikorları damla damla eklendi ve dokular gece boyunca 4 derecede tutuldu. Polibütilensüksinat ile durulandıktan sonra, ikincil antikoru etiketlemek için yaban turpu peroksidaz damlatıldı, 5 dakika boyunca polibütilen süksinat ile durulandı, damla 2,4-diaminobütirik asit kromojen çözeltisi, hematoksilen ile yeniden boyama, ters gradyan alkol dehidrasyonu, ksilen ile şeffaflaştırıldı ve nötral reçine mühür. Mikroskobik olarak, çekirdekler morumsu maviydi ve pozitif sonuç ürünleri kahverengimsi sarı veya sarı parçacıklardı.
Gerçek zamanlı kantitatif polimeraz zincir reaksiyonu (RT-qPCR) ile kolon dokusunda C-kit mRNA ekspresyonunun tespiti:Dondurulmuş sıçan kolonik dokusu bir homojenleştirici ile öğütüldü ve 1 mL RNAiso Plus eklendi. Kolon dokusunun toplam RNA'sı kloroform/izopropanol yöntemiyle ekstrakte edildi ve RNA kalitesi jel elektroforezi ile tespit edildi. Bir Bio-Rad jel görüntüleyici tarafından tanımlandıktan sonra, 1 ug RNA, Takara PrimeScript II 1st Strand cDNA Sentez Kiti tarafından cDNA'ya ters kopyalandı. NCBI veritabanı Gen ID: 64030'a göre, C-kit geninin CDS bölgesi bulundu ve NCBI Primer-Blast tasarımı Sangon Biotech Co. Ltd. tarafından sentezlenen Primer dizisi, C-kit primer dizisi sens dizisi 5'-AGGT GTACCGTTCCTGTCCC-3', antisens dizisi 5'-GGCTGGATTTGCTCTTTGCTGT-3', - aktin duyu dizisi 5'-CTTCCTTCCTGGGTATGGAATC-3', antisens dizisi 5'-CTGTGTTGGCATAGAGGTCTT-3'. PCR amplifikasyonu, bir Bio-RadCFX90 Real-Time PCR aletinde gerçekleştirildi. PCR testi için koşullar, 95 derecede 5 dakika, 30 döngü 95 derecede 30 saniye, 60 derecede 30 saniye ve 72 derecede 1 dakika ve ardından 72 derecede 10 dakika son uzatma idi. Göreceli gen ekspresyonunu analiz etmek için 2-ΔΔCt (ΔCt=Ct değeri - -aktin Ctvalue) alınmıştır.
Western blot yöntemiyle kolon dokusunda Cx43 ve AQP3'ün protein ekspresyon seviyesinin tespiti:Yaklaşık 1 cm donmuş kolon dokusu toplandı ve RIPA güçlü piroliz sıvısı (100 uL) ile parçalandı. Doku 20 kez cam homojenleştirici ile homojenize edildi ve 1.5 mL santrifüj tüpüne aktarıldı. Süpernatan, 12000 rpm'de 4 derecede 5 dakika santrifüj edildikten sonra ekstre edildi ve süpernatandaki toplam protein konsantrasyonu BCA yöntemi ile belirlendi. Sodyum dodesil sülfat-poliakrilamid jel elektroforezi gerçekleştirmek için 25 ug denatüre proteini çıkardık ve sonra jeldeki proteinleri 200 mA sabit akımda poliviniliden florür zara aktardık, ardından oda sıcaklığında 2 saat boyunca yüzde 5 yağsız süt sınırlayıcı sıvı ile kapattık. Karşılık gelen birincil antikorlar, sızdırmazlık sıvısı ile seyreltildi, gece boyunca 4 derecede inkübe edildi, ardından membran direnci yıkandı ve ikinci antikorlar eklendi. ECL sıvısı ilave edildikten sonra optik yoğunluk analizi ile test için maruziyet ölçerin altına alındılar.
Transmisyon elektron mikroskobu:Yaklaşık 1 cm proksimal kolon dokusu aldık, 24 saat boyunca yüzde 2.5 glutaraldehit içinde sabitledik, dereceli aseton ile dehidre ettik, Epon812'ye gömdük ve bir ultramikrotom üzerinde 50 nm ultra ince kesitler kestik. Kesitler uranyum dioksit asetat ve kurşun sitrat boyama sıvısı ile oda sıcaklığında 10 dakika boyandı. Philips Tecnai-10 transmisyon elektron mikroskobu altında kolonik villus, epitel hücre mitokondrileri ve goblet hücreleri gözlemledik.
istatistiksel analiz
Veri analizi için SPSS 19.0 yazılımı, sonuçların grafiğini çıkarmak için GraphPad Prism8.4 yazılımı kullanıldı. Normallik testi için Shapiro-Wilk testi kullanıldı. Normal dağılıma sahip veriler ortalama ± SD ile temsil edildi. Tedaviden sonra hemoglobinin ortalama ± SD'sini temsil etmek için hata öğeleri kullanıldı. İki grup arasında karşılaştırma yapmak için öğrenci t testi kullanıldı. Birden fazla grup arasında karşılaştırma yapmak için varyans analizi kullanıldı. Çiftler halinde birden fazla grup arasında karşılaştırma yapmak için Student-Newman-Keuls yöntemi kullanıldı ve sırayla her bir deney grubu ile kontrol grubu arasındaki farklılıkları ölçmek için Dunnett testi kullanıldı. İlişkili veriler birden çok zaman noktası ile ölçüldü ve tekrarlanan ölçüm verileri varyans analizi yapıldı. yürütülen. Küresellik testi P > 0 gösteriyorsa.{{10}}5, tekrarlanan ölçüm verileri varyans analizi kullanıldı. P < 0.05="" ise="" genelleştirilmiş="" tahmin="" denklemi="" alınmıştır.="" normal="" dağılıma="" uymayan="" veriler="" m="" (p25,="" p75)="" ile="" temsil="" edildi="" ve="" gruplar="" arası="" karşılaştırma="" için="" kruskal-wallis="" h="" sıra-toplam="" testi="" kullanıldı.="" χ2="" testi,="" veriler="" sırasız="" veri="" olduğunda="" gruplar="" arasında="" karşılaştırma="" yapmak="" için="" kullanıldı="" ve="" teorik="" frekansı="">< 5="" olan="" hücrelerin="" oranı="">< yüzde="" 20="" olduğunda="" pearson'ın="" χ2="" testi="" kullanıldı.="" teorik="" frekansı="">< 5="" olan="" hücrelerin="" oranı="" yüzde="" 20'den="" büyük="" veya="" buna="" eşitse,="" fisher'in="" kesin="" testi="" kullanıldı.="" farkın="" istatistiksel="" olarak="" anlamlı="" olduğunu="" belirlemek="" için="" p="">< 0.05="">
Şekil 1 Kolonik histopatolojik değişiklikler.
SONUÇLAR
Genel Şartlar
Normal grupla karşılaştırıldığında loperamid gavajından bir gün sonra, model grubunda vücut ağırlığı ve dışkı ağırlığı önemli ölçüde azaldı (P < {{0}}.05),="" ancak="" dışkı="" kalitesinde="" anlamlı="" bir="" fark="" yoktu="" puan="" (p=""> 0.05). Model grubundaki C. çölikol tedavisi, vücut ağırlığı ve dışkı ağırlığındaki azalmayı yavaşlattı (P< 0.05),="" but="" the="" bodyweight="" in="" the="" blocker="" group="" was="" not="" significantly="" reduced.="" after="" 10="" d="" of="" treatment,="" compared="" with="" the="" normal="" group,="" the="" body="" weight="" and="" stool="" volume="" of="" rats="" in="" the="" model="" group="" were="" further="" significantly="" reduced,="" and="" the="" stools="" were="" dry="" and="" almost="" contained="" no="" water="" (p="" <="" 0.05).="" the="" body="" weight="" loss="" of="" rats="" was="" also="" significantly="" reduced="" by="" treatment="" with="" c.="" deserticola="" (p="" <="" 0.05).="" the="" bodyweight="" of="" rats="" in="" the="" blocker="" group="" was="" not="" significantly="" different="" from="" that="" in="" the="" model="" group="" (p="" >="" 0.05).="" on="" day="" 20="" before="" sampling,="" the="" bodyweight="" of="" rats="" in="" the="" model="" group="" was="" significantly="" lower="" than="" that="" in="" the="" normal="" group,="" and="" the="" stool="" quality="" score="" was="" significantly="" increased="" (p="" <="" 0.05),="" while="" the="" weight="" loss="" caused="" by="" constipation="" was="" inhibited="" by="" c.="" deserticola="" treatment,="" and="" the="" stool="" quality="" score="" was="" decreased="" (p="" <="">
kolon histopatolojisi
Sıçanların kolon dokusunun hematoksilen ve eozin boyaması Şekil 1'de gösterilmiştir. Normal grupta bağırsak villusları sağlam, bağırsak mukozası sağlam ve sürekli, hücreler ve bezler düzenli olarak düzenlenmiştir. Mukoza ve submukoza inflamatuvar hücreler tarafından sızmamıştı ve doku yapısı normaldi. Model grubunda bağırsak villusları ve mukoza büyük ölçüde tahrip olmuş, yerel villuslar dökülmüş ve gevşek bir şekilde düzenlenmiş ve glandüler yapının bir kısmı kaybolmuştur. C. Deserticola grubunda histopatolojik boyanma model grubuna göre daha azdı, ancak bazı goblet hücrelerinde nekroz vardı. Bloker grubunda intraperitoneal enjeksiyondan sonra C.deserticola grubuna göre lokal barsak villus kaybı devam etmekte, barsak mukozasında kırık ve kayıp mevcuttu.
Şekil 2 İmmünohistokimyasal saptama ile kolon dokusunda kök hücre faktörünün ve bağıl optik yoğunluk oranının ifadesi.
İmmünohistokimyasal boyama ile kök hücre faktörü ve C-kit protein ekspresyonunun tespiti
İmmünohistokimyasal boyama, kontrol grubunun kolonunda SCF ve C-kit'in eksprese edildiğini gösterdi. Kontrol grubu ile karşılaştırıldığında, model grubunda SCF ve C-kit ekspresyonu önemli ölçüde azaldı (P < 0.05).="" model="" grubu="" ile="" karşılaştırıldığında,="" c.="" deserticola="" grubunda="" scf="" ve="" c-kit="" ekspresyonu="" önemli="" ölçüde="" arttı="" (p="">< 0.05).="" bloker="" ve="" model="" grupları="" arasında="" scf="" ve="" c-kit="" ekspresyonunda="" fark="" yoktu="" (p="">< 0.05,="" şekil="" 2="" ve="">
RT-qPCR
RT-qPCR showed that expression of C-kit mRNA in the model group was significantly lower than in the normal group (Figure 4, P < 0.05). Compared with the model group, C-kit in the C. deserticola group was significantly increased (P < 0.05). There was no significant difference in C-kit mRNA level between the model and blocker groups (P >0.05). Bu sonuçlar, C. Deserticola tarafından ayarlanan C-kit ekspresyonunun kabızlığın iyileştirilmesine katıldığını ve blokerlerin C'nin etkinliğini engellediğini gösterdi. çölikola.
cistanche salsa faydaları
Western blotlama
Western blot, AQP3 proteininin normal kontrol grubunda düşük bir seviyede eksprese edildiğini, model grubunda ise kontrol grubuna kıyasla önemli ölçüde arttığını gösterdi (Şekil 5) (P < 0.05)="" .="" aqp3="" protein="" ekspresyonu,="" c.="" deserticola="" ile="" tedaviden="" sonra="" azaldı="" ve="" c.deserticola'nın="" aqp3="" ekspresyonu="" üzerindeki="" inhibitör="" etkisi,="" bloker="" tedavisi="" ile="" inhibe="" edildi="" (p="">< 0.05).="" cx43'ün="" ekspresyonu,="" aqp3'ünkinin="" tersiydi.="" bu="" sonuçlar,="" c.="" deserticola'nın="" sc'li="" sıçanlar="" üzerindeki="" farmakolojik="" etkisinin,="" cx43="" ekspresyonunu="" teşvik="" ederek="" ve="" aqp3="" ekspresyonunu="" inhibe="" ederek="" elde="" edildiğini="" ileri="" sürdü="" (şekil="">
transmisyon elektron mikroskobu
Loperamid indüksiyonundan sonra, model grubundaki bazı kolonik mukozal epitel hücrelerinde mitokondriyal şişme ve otofaji meydana geldi. Bağırsak mikrovilluslarının sayısı ve uzunluğu azaldı ve goblet hücre piknozu oluştu (Şekil 8). C. Deserticola ile tedavi sonrası bağırsak mikrovilluslarının sayısı arttı. Mikrovilli düzgün bir şekilde düzenlenmiş ve yapı tamamlanmıştı. Goblet hücreleri daha kısa uzunluk, düzensiz mitokondri morfolojisi ve goblet hücrelerinin şiddetli piknozu.
Şekil 3 İmmünohistokimyasal saptama ile kolon dokusunda C-kit ve bağıl optik yoğunluk oranının ifadesi.
TARTIŞMA
Kabızlık yaşlı nüfusta sık görülen ve yaşlıların sağlık durumunu ve yaşam kalitesini etkileyen yaygın belirtilerden biridir[10,11]. Geleneksel Çin tıbbı açısından, Bai ve arkadaşları[12] SC'nin temel patogenezinin kalın bağırsak iletim fonksiyonunun işlev bozukluğu, yaşlılık vücut yetmezliği, kademeli karaciğer ve böbrek fonksiyonları kaybı, qi ve kan eksikliği ve vücut sıvısı kaybı olduğuna inanıyordu. , bu da kuru dışkıya yol açarak kabızlığa neden oldu [13]. SC birçok yönden hastalar ve aileleri üzerinde baskı oluşturur ve patogenezini araştırmak önemlidir.
C. Deserticola, böbrek Yang'ını güçlendirme, kandan yararlanma ve vücut bağışıklığını düzenleme işlevlerine sahiptir[14]. C. Deserticola ve C içeren Çin bitkisel kaynatma. Deserticola kabızlık tedavisinde yaygın olarak kullanılmaktadır ve klinik etkisi dikkat çekicidir. Du ve arkadaşları[15] bir sıçan Yang eksikliği ve kabızlık modelinde, C. Deserticola'nın izole kolonun kasılma genliğini iyileştirdiğini, bağırsak yolunun kasılmasını güçlendirdiğini ve mide-bağırsak hormonlarının seviyesini normale döndürdüğünü buldu. Ek olarak, C. Deserticola'nın bir işleme yan ürünü olan C. Deserticola'nın diyet lifi, dışkının su tutma kapasitesini geliştirir ve bağırsakları beslemede ve dışkılamayı iyileştirmede düşük doz ve iyi etki avantajına sahiptir[16]. Çalışmamız C. Deserticola tedavisinin kabızlığı olan sıçanlarda dışkı nemini ve kolonik histopatolojiyi iyileştirdiğini buldu.
ICC'ler bağırsak yolu boyunca bulunur ve kalp pili ve bağırsak sinir iletimi olarak bağırsak hareketinin nöral kontrolünde hayati bir rol oynar. C kiti[18]. SCF/C-kit sistemi, ICC'lerin gelişiminde çok önemlidir. SCF/C-kit sinyal yolu, sıçanlarda akupunktur ile yavaş transfer kabızlığının tedavisi sırasında analiz edilmiştir[19]. Tianshu noktasında elektroakupunktur, ACK2- ile tedavi edilen farelerde kolon ICC'lerinin sayısını arttırdı, SCF ve C-kit proteinlerinin ekspresyonunu yükseltti ve ICC'nin fenotipini tersine çevirdi. Qi ve dalağı canlandırmak için reçete, kolonik dokuda ICC ekspresyonunu artırabilir ve C-kit ve SCF mRNA ekspresyonunu yükseltebilir, böylece kabızlık semptomlarını iyileştirebilir[20]. Çalışmamızda, immünohistokimya, C. Deserticola'nın bir SC sıçan modelinde SCF ve C-kit protein ekspresyonunu önemli ölçüde yukarı regüle ettiğini gösterdi ve RT-qPCR, C. Deserticola'nın C-kitmRNA ekspresyonunu önemli ölçüde yukarı regüle ettiğini gösterdi. C-kit blokeri, C. Deserticola tarafından indüklenen SCF ve C-kit ekspresyonunun yukarı regülasyonunu inhibe etti.
Fekal su içeriği ve kolonik su taşınması, bağırsak su metabolizmasında önemli bir rol oynayan AQP'ler ile yakından ilişkilidir[21]. Yavaş taşıma kabızlığı olan sıçanlarda yapılan bir çalışmada, dışkılama kaynatma, AQP3 ve AQP4'ü aşağı regüle ederek bağırsak su emilimini düzenleyerek kabızlık semptomlarını önemli ölçüde iyileştirmiştir[22]. Bir sıçan fonksiyonel kabızlık modelinde, Oral Xiaofu Tongjie Fluid'in fonksiyonel kabızlık için tedavi mekanizması, kolonda vazoaktif bağırsak polipeptidi ve AQP3 ekspresyonunun düzenlenmesiyle gerçekleştirilebilir[23]. Boşluklar, düz kas hücrelerinin senkron kasılmasına aracılık etmede önemli bir rol oynar. Cx43 bu süreçteki en önemli proteindir[24]. Cx43 ekspresyonunun kaybı, düz kas motor disfonksiyonundan kısmen sorumlu olabilir[25]. Yavaş geçiş kabızlığı olan sıçanlarda bağırsak sinir sistemi ağ yapısının onarımı, Cx43 vb. ekspresyonunu ve kabızlık semptomlarını iyileştirebilir[26]. AQP3'ün ekspresyonu, dışkıdaki su içeriğini azaltarak, önemli bir kabızlık mekanizması olabilen kabızlığa yol açar. Cx43'ün ifadesi, bağırsak düz kasının kasılması ile ilişkili olabilir ve kabızlık oluşumunu azaltır. Çalışmamızda western blotlama, C.deserticola tedavisi ile Cx43 ekspresyonunun arttığını ve AQP3 ekspresyonunun inhibe edildiğini, bunun sonucunda düz kas kasılmasının arttığını ve su absorpsiyonunun azaldığını ve bloker tedavisinin bu etkileri tersine çevirdiğini gösterdi.
Daha fazla bilgi için lütfen buraya tıklayın.
ÇÖZÜM
Sonuç olarak, C. Deserticola, AQP3 ekspresyonunu inhibe edebilir ve SCF/C-kit yolu yoluyla Cx43 ekspresyonunu destekleyebilir, böylece yaşlı sıçanlarda konstipasyonun neden olduğu kabızlığı iyileştirir ve kolonik doku hasarını azaltır. Bu çalışma, C. Deserticola'nın klinik kullanımı için iyi bir teorik temel sağlamıştır.
