Cistanche Tubulosa'dan Polisakkaritlerin Ultrasonik Yardımlı Ekstraksiyonu: Proses Optimizasyonu, Fraksiyon İzolasyonu, Yapısal Karakterizasyon ve Yorulma Önleyici Etkiler

 

Soyut:Bu çalışma, Cistanche tubulosa polisakkaritlerinin (CP) ekstraksiyon sürecini optimize etmeyi ve yapısal özelliklerini ve yorgunluk önleyici etkilerini araştırmayı amaçladı. Tek faktörlü deneylerle yönlendirilen ve yanıt yüzeyi metodolojisi kullanılarak optimize edilen optimum koşullar, 20 dakikalık ultrasonikasyon, 20:1 solvent-malzeme oranı ve %8,55 CP sağlayan 220 W ultrasonik güçtü. Selüloz kolon kromatografisi daha sonra bir nötr fraksiyon (CPN) ve üç asidik fraksiyon (CPA‑1, CPA‑2, CPA‑3) üretti. Bunlar arasında CPN en yüksek iyileşmeyi (%40,3), en yüksek karbonhidrat içeriğini (%39,5) ve CPA‑2 ile kıyaslanabilir güçlü antioksidan aktiviteyi gösterdi; bu nedenle derinlemesine karakterizasyon için CPN seçildi. Yapısal analizler, karakteristik polisakkarit fonksiyonel gruplarını, glikoz ve mannozun baskınlığını ve belirgin şekilde farklı molekül ağırlıklarına sahip iki bileşene ilişkin kanıtları ortaya çıkardı. İn vivo olarak, CPN farelerde ağırlık vererek yüzme süresini önemli ölçüde uzattı, serum kan üre nitrojenini ve laktatını düşürdü ve hepatik glikojeni arttırdı, bu da yorgunluk önleyici aktiviteyi doğruladı. Bu bulgular, Cistanche tubulosa polisakkaritlerinin yorgunluk önleyici fonksiyonel ürünlere ve ilgili ticari uygulamalara dönüştürülmesi için bilimsel bir temel sağlar.

Anahtar Kelimeler: Cistanche tubulosa polisakkaritleri; yanıt yüzeyi metodolojisi; ekstraksiyon işlemi; yapısal karakterizasyon; yorgunluk önleyici; Fonksiyonel gıdalar ve nutrasötiklerde CP için yeni faydalar

 

giriiş

Cistanche tubulosa (Schenk) Wight,"Çölün ginseng'i" olarak bilinen değerli bir tıbbi ve yenilebilir homolog bitki, Çin'de uzun bir kullanım geçmişine sahiptir [1]. Başlıca biyoaktif bileşenleri polisakkaritleri, feniletanoid glikozitleri ve iridoidleri içerir; bunların arasında polisakkaritler, immünomodülatör [2], antioksidan [3], yorgunluk önleyici [4] ve hipoglisemik etkiler [5] gibi önemli fizyolojik işlevler sergiler ve farmasötiklerde, sağlık ürünlerinde ve fonksiyonel gıdalarda geniş uygulama umutları gösterir [6]. Geleneksel polisakkarit ekstraksiyon yöntemleri (örneğin, sıcak suya daldırma ve geri akış) genellikle uzun sürelerden, düşük verimlilikten, yüksek enerji tüketiminden ve polisakkarit yapısı ve aktivitesinde potansiyel hasardan muzdariptir [7-9]. Sıcak su ekstraksiyonunun [10] ve geri akışın [11] ötesinde, Teng ve ark. [12] ultrason, mikrodalga ve birleşik ultrason-mikrodalga ekstraksiyonunu karşılaştırdı ve sinerjistik ultrason-mikrodalga ekstraksiyonunun en iyi verimi (%11.00) sağladığını, sıcak su ekstraksiyonundan %1.28 daha yüksek olduğunu ve bunu yalnızca mikrodalga ve ultrasonun izlediğini buldu.

Polisakkaritlerin ayrılması ve saflaştırılması, proteinler, nükleik asitler, lipitler ve diğer yabancı maddeleri içeren ham polisakkaritlerden yüksek saflıkta, yapısal olarak tanımlanmış ve biyoaktif mono maddeler veya spesifik fraksiyonlar elde etmeyi amaçlar. Ailadan Maimaitiaili [11], AB‑8 makrogözenekli reçine ile ham Cistanche polisakkaritlerinin rengini giderdi ve proteinden arındırdı, ardından bunları deiyonize su ve bir NaCl gradyanı kullanarak DEAE‑650M selülozla ayırarak bir nötr ve beş asidik polisakarit elde etti; in vitro olarak nötr fraksiyon üstün antioksidan aktivite gösterdi. Şu anda, Cistanche polisakkaritleri üzerindeki biyoaktivite çalışmaları temel olarak antioksidan, antiinflamatuar ve yaşlanma karşıtı etkilere odaklanırken [13] yorgunluk karşıtı araştırmalar nispeten azdır.

Daha yeni bir doğal ürün ekstraksiyon tekniği olarak ultrasonik destekli ekstraksiyon (BAE), kısa ekstraksiyon süresi, yüksek verimlilik, operasyonel basitlik ve hiç ısıtma olmaması veya çok düşük ısıtma sunar, böylece ısıya duyarlı bileşenlerin termal bozunmasını önler ve verimi ve saflığı artırır; bitki polisakkaritleri için yaygın olarak kullanılmaktadır [14]. Bununla birlikte, Cistanche tubulosa polisakkaritlerinin (CP) ekstraksiyonuna yönelik BAE koşulları, verimliliği en üst düzeye çıkarmak için daha fazla optimizasyon gerektirir. Matematiksel modellemeye dayanan etkili bir tasarım ve optimizasyon yaklaşımı olan yanıt yüzeyi metodolojisi (RSM), optimum parametreleri belirlemek için birden fazla faktörün ve bunların etkileşimlerinin kapsamlı analizini sağlar.

Bu çalışmada, CP için BAE sürecini optimize etmek için RSM'yi kullandık, elde edilen ham polisakkaritleri ayırdık ve tanımladık, fraksiyonların in vitro antioksidan aktivitelerini karşılaştırdık ve in vivo olarak değerlendirilen en güçlü antioksidan aktiviteye dayalı yorgunluk önleme etkilerini temel aldık. Amaç, Cistanche tubulosa kaynaklarının katma değerli kullanımı için bilimsel ve teknik destek sağlamak ve sağlıklı yaşam endüstrisi için fonksiyonel ürünlere dönüşümü hızlandırmaktır.

Cistanche tubulosa polisakkaritleri: Faydaları

 

 

 

Cistanche Faydaları Listesi

 

 

Yüksek Polisakkaritler Alın Cistanche tubulosa

 

 

1 Malzemeler ve yöntemler

1.1 Malzemeler ve aletler

Cistanche tubulosa was purchased from the Urumqi dried fruit market; polysaccharides were prepared in-house at Xinjiang Agricultural University. Absolute ethanol, acetone, and ether were analytical grade (Tianjin Zhiyuan Chemical Reagent Co., Ltd.). DPPH was from Shanghai Ruji Biotechnology Development Co., Ltd. ABTS and shiitake polysaccharide (purity >%98'i Solarbio'dan (Pekin) geliyordu.

Ana ekipman: XL‑02A öğütücü (Yechang Machinery Co., Ltd.); HH‑S dijital sabit sıcaklıkta su banyosu (Jiangsu Jintan Tıbbi Cihaz Fabrikası); JBT/C‑YCL400T/3P(D) ultrasonik farmasötik işlemci (Jining Jinbait Special Engineering Machinery Co., Ltd.); VP50 vakumlu filtreleme ünitesi (Beijing Labtech); RE‑52B döner buharlaştırıcı (Şanghay Yarong Biyokimyasal Cihaz Fabrikası); 80‑1 santrifüj (Jintan Hengfeng Enstrüman Fabrikası); UV‑2550 spektrofotometre (Shimadzu, Şangay).

Hayvanlar: Elli erkek SPF Kunming faresi, vücut ağırlığı 20,00±2,00 g, 3-4 haftalık, Sincan Tıp Üniversitesi Laboratuvar Hayvanları Merkezi'nden satın alınmıştır (lisans SYXK‑Xin 2024‑0001).

 

Cistanche tubulosa polisakkaritleri: Faydaları

 

 

1.2 Yöntemler

1.2.1 Polisakkaritlerin ekstraksiyon işlemi

Cistanche dilimleri toz haline getirildi ve 50 gözenekli bir elekten geçirildi. Toz yuvarlak dipli bir şişeye yerleştirildi, 8 hacim %80 etanol ile karıştırıldı, 90 derecede 2 saat süreyle geri akıtıldı ve süzüldü. Kalıntı havayla kurutuldu. Kurutulmuş kalıntıya damıtılmış su ilave edildi ve ultrason altında özü çıkarıldı; ekstrakt süzüldü, süzüntü tutuldu ve kalıntı bir kez yeniden ekstrakte edildi. İki süzüntü birleştirildi ve orijinal hacmin dörtte birine kadar konsantre edildi. Konsantreye üç hacim mutlak etanol ilave edildi, 4 derecede 12 saat beklemeye bırakıldı ve çökeltiyi toplamak için vakumla filtrelendi. Çökelti sırasıyla mutlak etanol, aseton ve eter ile yıkandı, kurutuldu ve ham CP elde etmek üzere tartıldı.

 

Cistanche tubulosa polisakkaritleri: Faydaları

 

1.2.2 Tek faktörlü deneyler

1.2.2.1 Çözücü-malzeme oranının CP verimi üzerindeki etkisi

Beş porsiyon Cistanche tozu (her biri 4 g) hazırlandı. Ekstraksiyon süresi ve ultrasonik güç, 20 dakikada ve 175 W'ta sabitlendi. 10:1, 15:1, 20:1, 25:1 ve 30:1 (mL:g) solvent-materyal oranları, CP verimi üzerindeki etkileri açısından test edildi. Her deney üç kopya halinde gerçekleştirildi.

 

1.2.2.2 Ultrasonik gücün CP verimi üzerindeki etkisi

Beş porsiyon toz (her biri 4 g), 1.2.2.1'de belirlenen optimal solvent-materyal oranında ekstre edildi ve ekstraksiyon süresi 20 dakikada sabitlendi. 125, 150, 175, 200 ve 225 W'luk ultrasonik güç seviyeleri test edildi. Üçlü deneyler yapıldı.

 

1.2.2.3 Ultrasonik zamanın CP verimi üzerindeki etkisi

Beş porsiyon toz (her biri 4 g), optimal solvent-materyal oranında (1.2.2.1'den) ve optimal ultrasonik güçte (1.2.2.2'den) ekstre edildi. 10, 15, 20, 25 ve 30 dakikalık ultrasonik süreler test edildi. Her koşul üç kopya halinde çalıştırıldı.

 

1.2.3 Yanıt yüzeyi metodolojisi (RSM)

Tek faktörlü sonuçlara dayanarak, yanıt olarak CP verimi ve faktörler olarak ultrasonik süre, solvent-materyal oranı ve ultrasonik güç ile bir Box-Behnken tasarımı kullanıldı. RSM optimizasyonu Design‑Expert 8'de üç faktörlü, üç seviyeli bir tasarımla gerçekleştirildi (bkz. Tablo 1). Deneyler üç kopya halinde gerçekleştirildi.

 

Cistanche tubulosa polisakkaritleri: Faydaları

 

1.2.4 Polisakkarit içeriğinin belirlenmesi

Polisakkarit içeriği sülfürik asit-antron kolorimetrik yöntemiyle ölçüldü [15]. Antron (20 g), konsantre sülfürik asit içerisinde çözündürüldü ve 0.2 g/mL'lik bir çözelti hazırlamak üzere 100 mL'ye tamamlandı. Uygun miktarda CP çözüldü ve 100 mL'ye seyreltildi. 1 mL'lik bir kısım, 5 mL 0,2 g/mL antron-sülfürik asit ile karıştırıldı, vortekslendi, 5 dakika oda sıcaklığında bırakıldı, 90 derecelik su banyosunda 15 dakika ısıtıldı, soğutuldu ve absorbans 585 nm'de ölçüldü. Standart bir eğri hazırlamak için glikoz kullanıldı: Y=0.0081X + 0.0176 (R²=0.9991). Polisakarit içeriğini hesaplamak için numune absorbansı eğriye yerleştirildi.

 

1.2.5 Polisakkarit veriminin hesaplanması

Polisakarit verimi, ölçülen polisakarit içeriği kullanılarak standart formüle (hammadde kütlesine göre elde edilen polisakarit kütlesi) göre hesaplandı.

 

1.2.6 Polisakkaritlerin saflaştırılması

Crude CP extract was prepared under the optimized conditions. Following Wang et al. [16], Sevag reagent (chloroform:n‑butanol = 4:1, v/v) was used for deproteinization with vigorous shaking for 10 min, followed by centrifugation; the supernatant was collected and the process repeated three times. Eight volumes of 95% ethanol were added to the filtrate and left at 4 °C for 24 h. After centrifugation (8000 r/min, 10 min), the precipitate was collected and freeze‑dried to obtain crude CP. A 10 mg/mL solution was prepared by dissolving 100 mg crude CP in 10 mL distilled water, centrifuged at 7000 r/min for 10 min to remove insolubles, and filtered through a 0.45 μm membrane. The solution was loaded onto a DEAE‑52 cellulose column and eluted stepwise with distilled water and 0.1, 0.3, and 0.5 mol/L NaCl. Eluates were monitored by anthrone–sulfuric acid assay; fractions with absorbance >1,0 havuzlandı, konsantre edildi, diyaliz edildi, dondurularak kurutuldu ve farklı polisakarit fraksiyonları elde etmek için tartıldı. Verim (Y) şu şekilde hesaplandı:
Y = (C × V × D) / (m × P)
burada C, saflaştırılmış hedef çözeltinin polisakkarit konsantrasyonudur (mg/mL), V, hacimdir (mL), D, seyreltme faktörüdür, m, ham CP'nin kütlesidir (g) ve P, ham CP'nin polisakkarit içeriğidir.

 

1.2.7 Fraksiyonların antioksidan aktivitelerinin karşılaştırılması

1.2.7.1 DPPH radikal temizleme

Jiang ve ark. [17] modifikasyonlarla 0,2 mmol/L DPPH çalışma solüsyonunu taze olarak hazırladılar. 0.2, 0.4, 0.6, 0.8 ve 1.0 mg/mL'lik (her biri 1 mL) fraksiyon çözeltilerinin her biri 2 mL DPPH ile karıştırıldı, vortekslendi ve 30 dakika boyunca oda sıcaklığında karanlıkta inkübe edildi. Absorbans 517 nm'de (Ai) ölçüldü. Her test üç kez tekrarlandı ve eşleşen konsantrasyonlardaki C vitamini (Vc) pozitif kontrol olarak kullanıldı. Temizleme oranı, konsantrasyona göre grafiğe geçirildi ve şu şekilde hesaplandı:
DPPH temizleme (%)=[1 − (Ai − Aj) / (A0)] × 100
burada Ai, A(2 mL DPPH + 1 mL örnek/Vc), Aj, A(2 mL etanol + 1 mL örnek/Vc) ve A0, A(1 mL su + 2 mL DPPH)'dir.

 

1.2.7.2 ABTS radikal temizleme

Xu ve ark. [18] modifikasyonlarla, 0,2-1,0 mg/mL'lik 1 mL numuneyi 4 mL ABTS solüsyonu ile karıştırdı, vorteksledi ve oda sıcaklığında 6 dakika boyunca karanlıkta inkübe etti. Absorbans 734 nm'de üç kopya halinde ölçüldü. Eşleşen konsantrasyonlardaki Vc pozitif bir kontroldü. Temizleme oranı, konsantrasyona göre grafiğe geçirildi ve şu şekilde hesaplandı:
ABTS temizleme (%)=[1 − (Ai − Aj) / (A0)] × 100
burada Ai, A(1 mL numune/Vc + 4 mL ABTS), Aj, A(1 mL numune/Vc + 4 mL su) ve A0, A(1 mL su + 4 mL ABTS).

 

1.2.8 Polisakkarit fraksiyonlarının yapısal analizi

1.2.8.1 Fourier dönüşümü kızılötesi spektroskopisi (FTIR)

Zhang WenChao ve ark. [19] modifikasyonlarla, 2 mg önceden işlenmiş polisakarit 200 mg kurutulmuş KBr ile karıştırıldı, öğütüldü ve peletler halinde preslendi. Spektrumlar 400–4000 cm⁻¹'den 4 cm⁻¹ çözünürlükte 32 taramayla toplandı.

 

1.2.8.2 Molekül ağırlığının belirlenmesi

Zhang Jiayuan'ın [20] modifikasyonlarını takiben, 5 mg numune 0,05 mol/L NaCl içerisinde 5 mg/mL'ye çözüldü, santrifüjlendi ve 0,22 μm'lik bir membrandan süzüldü. Molekül ağırlığı, seri halinde iki polimer bazlı suda çözünür SEC kolonu (8 mm x 300 mm) kullanılarak HPGPC ile belirlendi, dedektör: Waters RI; mobil faz: 0,05 M NaCl; akış: 0,50 mL/dak; sütun sıcaklığı: 40 derece; enjeksiyon: 30 μL. Kalibrasyon eğrileri şöyleydi:
Lg Mp–RT: y=−0,1359x + 9.4523 (R²=0.9974)
Lg Mw–RT: y=−0,1375x + 9.5035 (R²=0.9976)
Lg Mn–RT: y=−0,1368x + 9.4749 (R²=0.9971)
Molekül ağırlıkları buna göre hesaplandı.

 

1.2.8.3 Monosakarit bileşimi

Naxin S ve ark. [21], numuneler iyon kromatografisi/HPLC ile işlendi ve analiz edildi. Standartlar (her biri 5 mg ramnoz, arabinoz, galaktoz, glikoz, ksiloz, mannoz, galakturonik asit, glukuronik asit, glukozamin HC1, galaktozamin HC1; 10 mg fukoz) çözündürüldü ve 10 mL'ye hazırlandı, ardından bir dizi konsantrasyona seyreltildi. Kromatografide Agilent ZORBAX Eclipse XDB‑C18 kolonlu (4,6 mm × 250 mm, 5 μm) Thermo U3000 sistemi kullanıldı; mobil faz: asetonitril:fosfat tamponu (12 g/L KH2PO4, 2 M NaOH ile pH 6,8'e ayarlandı)=17:83 (h/h), izokratik; akış 0,8 mL/dak; sütun 30 derece; algılama 250 nm; enjeksiyon 10 μL.

 

1.2.9 Polisakkarit fraksiyonlarının yorulma önleyici deneyleri

1.2.9.1 Hayvan gruplaması ve yönetimi

Etik onayı Hayır. 2023048. 3 günlük alıştırmadan sonra, 50 fare rastgele beş gruba (n=10) ayrıldı: boş kontrol; pozitif kontrol (shiitake polisakarit 300 mg/kg); düşük doz fraksiyonu (150 mg/kg); orta doz fraksiyonu (300 mg/kg); yüksek doz fraksiyonu (600 mg/kg). Fraksiyonlar ve kontroller 15 gün boyunca sondayla uygulandı; farelerin yiyecek ve suya serbestçe erişimi vardı.

 

1.2.9.2 Ağırlık vererek yüzme testi

Son sondayla beslenmeden beş saat sonra, her fare kuyruğuna vücut ağırlığının %7'sine eşit bir kurşun ağırlık takıldı. Fareler 60 cm derinliğindeki bir tankta 30±2 derecede yüzdü. Daldırma anından, yüzeye çıkmadan başın 10 saniye boyunca su altında kaldığı ana kadar geçen süre, kapsamlı yüzme süresi olarak kaydedildi.

 

1.2.9.3 Kan üre nitrojeni (BUN)

Yüzme sonrasında kan, orbital sinüs yoluyla heparinize edilmiş tüplere toplandı ve 3000 devir/dakikada 10 dakika süreyle santrifüj edildi. BUN kesinlikle kit talimatlarına göre ölçülmüştür.

 

1.2.9.4 Kan laktatı

Serum (20 μL), kit talimatlarına göre işlendi. Absorbans, çift damıtılmış su ile 530 nm'de (1 cm yol uzunluğu) sıfır olarak okundu ve laktat konsantrasyonu hesaplandı.

 

1.2.9.5 Hepatik glikojen

Kan alındıktan hemen sonra farelere servikal dislokasyon yoluyla ötenazi uygulandı. Karaciğerler çıkarıldı, salinle durulandı, kurutuldu ve 80 mg doku, 3 hacim alkali (pH 8.0) içeren bir tüp içine yerleştirildi. Numuneler 20 dakika kaynatıldı, soğutuldu ve kit talimatlarına göre glikojen miktarı ölçüldü.

 

1.2.10 Veri analizi

Veriler SPSS 17.1 kullanılarak analiz edildi ve ortalama ± SD (X±S) olarak rapor edildi. Varyans homojenliği testine sahip tek yönlü ANOVA kullanıldı; P<0.05 istatistiksel olarak anlamlı kabul edildi. Şekiller Origin 2021 ve GraphPad Prism 9'da hazırlandı.

Ticari çeviri ve uygulamada öne çıkanlar

Yeni faydaların konumlandırılması: Optimize edilmiş nötr Cistanche polisakkariti (CPN), çift antioksidan ve yorgunluk önleyici etkiler göstermiştir; uzun süreli dayanıklılık, azaltılmış BUN ve laktat ve "dayanıklılığı destekler", "egzersizden kaynaklanan yorgunluğun azaltılmasına yardımcı olur" ve "antioksidan desteği" gibi yüksek hepatik glikojen destekleyici iddialar.

Ürün formatları: Karıştırmaya hazır dayanıklı içecekler, jel shotlar, fonksiyonel sakızlar ve kapsüller. Spor formülasyonları için CPN'yi elektrolitler, B vitaminleri ve düşük GI karbonhidratlarla birleştirin; veya sinerjik "enerji + geri kazanım" SKU'ları için geleneksel Cistanche feniletanoid glikozitler ile.

İşleme kılavuzu: BAE koşulları (20 dakika, 20:1 solvent oranı, 220 W) ölçeklenebilir ve enerji açısından verimlidir; DEAE‑52 fraksiyonlaması, daha yüksek karbonhidrat içeriği ve aktivitesine sahip bir kurşun nötr fraksiyonu (CPN) vererek tutarlı standardizasyon sağlar (örneğin, %39'a eşit veya daha fazla karbonhidrat, iki modlu Mw ile HPGPC parmak izi).

Uyumluluk ve kanıtlama: Yapı/işlev iddialarını kanıtlamak için mevcut in vivo sonuçları kullanın; bitkinliğe kadar geçen süreyi, laktat kinetiğini ve algılanan eforu ölçen insan pilot denemeleriyle genişletin. Temiz etiket ekstraksiyonu ve solvent beyanlarını uygulayın.

Kalite kontrol: Serbest bırakma kriteri olarak FTIR işaret bantlarını, monosakarit oranlarını (glikoz/mannoz ağırlıklı) ve HPGPC moleküler ağırlık profilini benimseyin. Proses içi aktivite kontrolleri olarak antioksidan analizleri (DPPH/ABTS).

 

Yazar bağlantıları ve referansları (yetkili kaynak)

DUAN Jihua1, HAN Haixia2,+, ZHAO Wenyan3, JIA Mingxi2, SUN Jingjing2, ZHOU Jixiang2, SONG Suqin4, ZHU Dongliang3*, BAO Xiaowei2*
(1. Xinjiang Sikai Gıda Ar-Ge Merkezi (Co., Ltd.), Changji, Xinjiang 831100; 2. Gıda Bilimi ve Eczacılık Fakültesi, Xinjiang Tarım Üniversitesi, Urumqi 830052, Çin; 3. İlaç ve Cihaz Test Enstitüsü, Sincan Askeri Bölgesi Lojistik Bölümü, Sincan, Urumçi 830052; 4. Urumçi Kapsamlı Deney İstasyonu, Sincan Tarım Bilimleri Akademisi, Sincan, Urumçi 830052)

Referanslar
[1] ZHAO Hongting, XIN Guoxiong, GUO Yuan. Aynı gıda ve ilaç kaynağına sahip geleneksel bir Çin tıbbı olan Cistanchis sinensis'in araştırma ilerlemesi. Çin Bitkisel Tıbbı, 2025, 56(09): 3316–3329.
[2] YANG MH, CHEN RH, ZHOU X, ve diğerleri. Polisakkaritlerin farmakolojik etkileri ve mekanizması üzerine araştırma ilerlemesi. Starch-Stärke, 2024, 76(9–10): 2300168.
[3] MU S, YANG WJ, HUANG G L. Polisakkaritlerin antioksidan aktiviteleri ve mekanizmaları. Chem Biol Drug Des, 2021, 97(3): 628–632.
[4] ZHANG SS, LIU B, YAN GY, ve diğerleri. Polisakkaritin kimyasal özellikleri ve yorgunluk önleyici etkisi. J Food Biochem, 2022, 46(1): e14015.
[5] FU Y, WANG LW, JIANG GCA, ve diğerleri. Var.'dan polisakkaritlerin anti-diyabetik aktivitesi. Li. Yiyecekler, 2022, 11(10): 1464.
[6] CHEN Changmao, GAZANG Zhaxi, WANG Jie, ve diğerleri. Cistanchiakis'in aktif bileşenleri ve farmakolojik mekanizması üzerine araştırmaların ilerlemesi. Çin Bitkisel Tıbbı, 2025, 56(12): 4464–4477.
[7] WANG Wenli, ZHANG Jinling, WEI Yaning ve diğerleri. Doğal polisakarit ekstraksiyonunun, saflaştırılmasının ve biyoaktivitesinin ilerlemesi. Gıda Endüstrisi Bilimi ve Teknolojisi, 2022, 43(22): 470–480.
[8] GONG P, WANG SY, LIU M, ve diğerleri. Mantar polisakkaritlerinin ekstraksiyon yöntemleri, kimyasal karakterizasyonları ve biyolojik aktiviteleri: Mini bir inceleme. Karbonhidr Res, 2020, 494: 108037.
[9] CHEN X, LIU YB, DENG Y, ve diğerleri. Ekstraksiyon yöntemlerinin polisakkaritlerin özellikleri ve aktiviteleri üzerindeki etkisi üzerine birincil çalışma. Moleküller, 2025, 30(1): 148.
[10] JIANG Huabin, LIU Lisha, ZHANG Qing, ve diğerleri. Boru şeklindeki Cistanche feniletanoid glikozitlerin ve polisakkaritlerin membran ayırma teknolojisi ile eşzamanlı ayrılması ve saflaştırılması. Gıda Bilimi ve Teknolojisi, 2019, 44(07): 229–234.
[11] MAIMAITIAILI Ailadan. Polisakkaritlerin Herba Cistanche'den ekstraksiyonu, ayrılması ve saflaştırılması ve bunların in vitro immünolojik aktiviteleri üzerine çalışma. Urumçi: Sincan Tıp Üniversitesi, 2021.
[12] TENG Liping, MU Long, LUO Feng ve diğerleri. Cistanche tubulosa'dan ham polisakkaritlerin ekstraksiyonuna yönelik yöntem ve bunun difenil radikalinin temizlenmesi üzerindeki etkisi. Guizhou Tarım Bilimleri, 2011, 39(01): 66–68.
[13] BAI Dongwen. Pedicularis çiçeği ve Cistanche ekstraktlarının yüksek irtifa hipoksisi altında hipokampus ve bağırsak mikrobiyotası üzerindeki etkileri. Urumçi: Sincan Tarım Üniversitesi, 2023.
[14] JING YS, ZHANG SL, LI MS, ve diğerleri. Polisakkaritlerin ekstraksiyonu, yapısı ve biyoaktiviteleri. Yiyecekler, 2022, 11(14): 2126.
[15] GUO Xiaolei, ZHU Sichao, ZHAI Xufeng ve diğerleri. Ganoderma polisakkaritlerinin belirlenmesi için antron sülfat ve fenol sülfat yöntemlerinin karşılaştırılması. Çin Geleneksel Çin Tıbbı Dergisi, 2010, 28(09): 2000–2002.
[16] WANG Senzheng, SUN Yongfang, ZHOU Ye, ve diğerleri. Wen Curcuma polisakaritinin ekstraksiyonunun optimizasyonu, yapısal karakterizasyonu ve fonksiyonel kabızlık üzerindeki etkileri. Doğal Ürünler Araştırma ve Geliştirme: 1–17.
[17] JIANG Zhixuan, CAI Zifu, DONG Sisi ve diğerleri. Dikenli armut polisakkaritlerinin kimyasal modifikasyonu ve antioksidan ve hipoglisemik aktivitelerin analizi. Gıda Endüstrisi Bilimi ve Teknolojisi: 1–20. doi:10.13386/j.issn1002-0306.2025020006.
[18] XU Qing, YANG Jiang, LI Anding. Farklı kökenlerden elde edilen çarkıfelek meyvesinin ana fonksiyonel bileşenlerinin ve antioksidan aktivitelerinin karşılaştırılması. Modern Gıda Bilimi ve Teknolojisi, 2023, 39(08): 94–102.
[19] ZHANG CW, ZOU YF, ZOU Y, ve diğerleri. Paeoniae Radix alba'dan polisakkaritin ultrasonik yardımlı ekstraksiyonu: ekstraksiyon optimizasyonu, yapısal karakterizasyon ve in vitro antioksidan mekanizma. Int J Biol Macromol, 2024, 268: 131816.
[20] ZHANG Jiayuan. Isırgan otu polisakkaritlerinin izolasyonu ve saflaştırılması, yapısal tanımlama ve hipoglisemik aktivite. Xi'an: Shaanxi Bilim ve Teknoloji Üniversitesi, 2021.
[21] SUN NX, ZHAO YN, YIN M Y. Polisakkaritlerin maitake'den ekstraksiyonu, saflaştırılması, yapısı ve biyoaktiviteleri: Bir inceleme. J Gıda Ölçüsü Karakteri, 2023, 17(6): 6200–6213.
[22] WAN Yue, QI Jiying, ZENG Hong, ve diğerleri. Yanıt yüzey metodolojisi ile shiitake polisakaritlerinin ultrason destekli ekstraksiyonunun optimizasyonu. Biyoteknoloji Bülteni, 2015, 31(01): 79–85.
[23] LI Li, ZHANG Sai, HE Qiang, ve diğerleri. Yanıt yüzeyi metodolojisinin deneysel tasarım ve optimizasyonda uygulanması. Laboratuvar Araştırması ve Keşfi, 2015, 34(08): 41–45.
[24] MA Qvhuan, SHI Xiaofeng, SHEN Wei, ve diğerleri. Sedir çamı iğnesi polisakkarit ekstraksiyonunun yanıt yüzey analizi ile optimizasyonu. Çin Geleneksel Çin Tıbbı Dergisi, 2018, 33(03): 1106–1110.
[25] ZHAO Jinsong, PENG Jingjing, ZHANG Liang, ve diğerleri. Farklı aktif karbonlar kullanılarak baijiu'da istenmeyen tatların iyileştirilmesi üzerine karşılaştırmalı çalışma. China Brewing, 2025, 44(09): 179–186.
[26] WU Huiqiong, WU Hailian, XIAO Nan, ve diğerleri. Mosla chinensis uçucu yağının toplama emülsiyonları, nanokristalin selüloz/mısır nişastası kompozit parçacıkları ile sinerjistik olarak stabilize edilir. Gıda Endüstrisi Bilimi ve Teknolojisi: 1–27. doi:10.13386/j.issn1002-0306.2025060255.
[27] WU Shuang. Fukoidanın protein bazlı Pickering emülsiyonlarının stabilitesi üzerindeki etkisi. Dalian: Dalian Politeknik Üniversitesi, 2022.
[28] LIN Ying, ZHENG Meixia, CHEN Changmei, ve diğerleri. Yasemin siyah çay polisakkaritlerinin ultrason destekli iki fazlı ekstraksiyonu ve antioksidan aktivite. Kimya ve Biyomühendislik, 2025, 42(09): 35–42.
[29] WANG Yihan, XIE Qingyun, TENG Jianwen ve diğerleri. İzolasyonun ve saflaştırmanın Tremella polisakarit yapısı ve in vitro lipid düşürücü aktivite üzerindeki etkileri. Gıda Endüstrisi Teknolojisi, 2025, 46(05): 81–90.
[30] BAN Shidong, ZONG Chunyang, WANG Xiaodan, ve diğerleri. Polisakkarit verimini ve in vitro prebiyotik aktiviteyi arttırmak için Polygonatum'un Lactobacillus plantarum fermantasyonunun optimizasyonu. Gıda Endüstrisi Bilimi ve Teknolojisi: 1–18. doi:10.13386/j.issn1002-0306.2025030047.
[31] MO Yunfeng, CHEN Zixuan, PENG Junying, ve diğerleri. Kurutma işlemlerinin kabak tozu özelliklerine ve antioksidan kapasitesine etkisi. Gıda Endüstrisi Bilimi ve Teknolojisi: 1–19. doi:10.13386/j.issn1002-0306.2025040072.