İletişim:joanna.jia@wecistanche.com/ WhatsApp: 008618081934791

Bu makalenin Bölüm I (Giriş, materyaller ve yöntemler) hakkında bilgi için buraya tıklayın.

Böbrek epitelyal hedefli mitokondriyal transkripsiyon faktörü A eksikliği, şiddetli kistik hastalıkla ilişkili ilerleyici mitokondriyal tükenme ile sonuçlanır--Bölüm II

Ken Ishii^1,2,11et al.

TARTIŞMA

Burada böbrek dokusu homeostazında mt transkripsiyon faktörü TFAM için kritik bir fonksiyon oluşturuyoruz. TFAM'ın HOXB7 progenitör hücrelerinde değil, SIX2'de etkisizleştirilmesinin, mt tükenmesi ve OXPHOS'tan glikolize doğru metabolik bir kayma ile ilişkili ciddi doğum sonrası kistik hastalığın gelişmesine yol açtığını gösterdik. Ayrıca, hücresel TFAM seviyelerinde bir azalma ve mt işlev bozukluğu, murin ve insan PKD'sinin karakteristik özellikleridir.(polikistik böbrek hastalığı), TFAM aktivitesinde bir azalmanın renal kistik hastalığın gelişimine katkıda bulunabileceğini ve/veya modüle edebileceğini düşündürmektedir.

Mt hastalığı sendromları olan hastalar gelişmeye eğilimlidirböbrekpatoloji.Böbrek hastalığıbu durumda sıklıkla tübüler disfonksiyon ve/veya tübülointerstisyel hastalık olarak ortaya çıkar, buna karşın renal kist oluşumu nadirdir.12,19 22 MT-CO1 gibi TFAM tarafından düzenlenen genlerdeki mutasyonlar, 23 tubulointerstisyel hastalık, kronik hastalığı olan hastalarda TFAM'nin kendisinde mutasyonlar bildirilmemiştir.böbrek hastalığı. Bununla birlikte, kronik böbrek hastalığı progresyonu son zamanlarda azalmış TFAM aktivitesi ile ilişkilendirilmiştir, bu da mt stresi nedeniyle fibrotik ve inflamatuar yolakların aktivasyonu ile sonuçlanmıştır.14,24 Six2-Tfam^-/-mutantlar, Ksp-Cre aracılı Tfam inaktivasyonu olan farelerde renal fibrozis ve inflamasyon14 gelişti, ancak kistik bir hastalık gelişmedi. 2 model arasındaki fenotipik farklılıklar, muhtemelen Cre eksprese eden hücrelerin farklılaşma durumunun yanı sıra böbrek hücre tiplerinin hedeflendiğinin bir yansımasıdır. Ksp-Cre, Henle segmentinin medüller kalın çıkan kolunda ve üreter tomurcuğu kaynaklı CD'de belirgin Cre aktivitesi ile distal nefronda rekombinasyona aracılık ederken, Altı2-eGFP/Cre, kap mezenşiminde eksprese edilir ve üreteri hedeflemez tomurcuktan türetilmiş nefron segmentleri.16 Bu bulgularla tutarlı olarak, 15-aylık Hoxb7-Tfam /mutantlarda hücre dışı matris birikimindeki artış ve kistik hastalığın yokluğu; Hoxb7-Cre, üreter tomurcuk türevli nefron segmentlerini hedefler (Ek Şekil S5).26 Ayrıca, gelişim aşaması ve hücre tipi bağımlılık kavramına uygun olarak, Nph'ler kullanılarak Tfam'ın etkisizleştirilmesinin gözlemlenmesidir{{16 }}Cre (Podocin-Cre) gelişimsel veya yetişkin renal fenotiplerle sonuçlanmadı,27 oysa Six2-Tfam^-/- fareler önemli albüminüri geliştirdi.

içinde Acteosidecistancheiçin ..... iyidirpolikistik böbrek hastalığı

Six2-'de nefron farklılaşmasındaki kusurlar tamamen beklenmedik değildi.Tfam^-/- çünkü farklılaşmamış pluripotent hücreler, enerji taleplerini karşılamak için OXPHOS yerine glikoliz tercih ederken hücresel farklılaşma, ATP üretimi için OXPHOS'a artan güven ile ilişkilendirilmiştir.28 Six{{1} }Tfam^-/-mutantlar daha fazla araştırmayı garanti eder. Son çalışmalar, PKD'deki mutasyonların(polikistik böbrek hastalığı)1, ODPBH vakalarının yüzde 85'inden sorumlu olan29, artan glikolitik akışla ilişkilidir.30 Ancak, glukoz yoksunluğunun kist proliferasyonu ve PKD progresyonu üzerindeki etkileri tartışmalı olduğundan, bu bulgunun patofizyolojik ve terapötik önemi tam olarak açık değildir. 31,32.

TFAM işlev bozukluğunun PKD gelişiminde birincil bir olayı temsil ettiğini öne sürmesek de(polikistik böbrek hastalığı), çalışmalarımız TFAM işlev bozukluğunun patogenezinde ve/veya ilerlemesinde katkıda bulunan bir rolü olabileceği olasılığını artırmaktadır. Kemirgen ve insan PKD dokularından alınan kist astar epitel hücrelerinde TFAM protein seviyelerinin azaldığını gösterdik ve Six2-Tfam^-/- dokular moleküler özellikleri PKD ile paylaşır(polikistik böbrek hastalığı)sistogenez ile bağlantılı dokular. Böbrek kistik hastalıklarının patogenezinde anormal kirpikler işlevi gösterilmiştir.29,33,34 Bazı PKD'ler için kirpiklerin yokluğu bildirilmiş olsa da(polikistik böbrek hastalığı)hayvan modelleri,35,36 kirpikler Pkd1'de oluşturulur^-/-epitel hücreleri37 ve Six2- böbrek kistlerinde de saptandı.Tfam^-/- fareler (Ek Şekil S3). Sistogeneze bağlı birkaç sinyal yolu, kirpiklerle ilişkili sinyalleşmede rol oynar. Bunlar, mitojenle aktive olan protein kinaz/hücre dışı sinyalle düzenlenen kinaz sinyalini ve b-kateninle düzenlenen yolları içerir.33 Six'de hem p-ERK hem de b-katenin seviyeleri yükseldi2-Tfam^-/- böbrekler, bu yolların aktive olduğunu düşündürür. Bu bulgular, insan ADPKD hücrelerinde ve birkaç murin PKD'sinde yapılan gözlemlerle tutarlıdır.(polikistik böbrek hastalığı)modeller.38–43.

TFAM'nin yukarı akış transkripsiyonel düzenleyicisi ve mt biyogenezinin sürücüsü olan peroksizom proliferatörle aktive olan reseptör-gama koaktivatörü 1a (PGC-1a), ADPKD'li hastalardan izole edilen hücre hatlarında azalmıştır ve TFAM'ın kendisine ek olarak, PKD için potansiyel bir terapötik hedefi temsil eder(polikistik böbrek hastalığı). PKD'de artan mt süperoksit üretimine bağlı olarak kist proliferasyonunu teşvik etmek için PGC-1a bir ifadede bir azalma önerilmiştir.(polikistik böbrek hastalığı)1-kusurlu hücreler.44 Modelimizde mt ROS üretimini ölçmemiş olsak da, diğer hücre tiplerinde dokuya özgü TFAM inaktivasyonu, mt ROS üretiminde bir artışla değil, bir düşüşle ilişkilendirilmiştir.9 PGC'ye ek olarak -1a/TFAM ekseni, son çalışmalar hipoksi ve hipoksi ile indüklenebilir faktör yolunun mt hastalıklarının tedavisinde potansiyel bir rolü olduğunu vurgulamıştır.45,46 Hipoksi ile ilişkili yolakların tedavi için terapötik olarak ne dereceye kadar kullanılabileceği PKD gibi mt disfonksiyonu ile ilişkili hastalıkların araştırılması daha fazla araştırma gerektirir.

Özetle, verilerimiz, normal nefron farklılaşması için mt transkripsiyon faktörü TFAM'nin gerekli olduğunu ve böbrek epitel hücrelerinde TFAM aktivitesinin kaybının, PKD ile ilişkili moleküler ve metabolik özellikleri yeniden ürettiğini göstermektedir.(polikistik böbrek hastalığı). Bulgularımız, sistogenezde mt sağlığı ve fonksiyonunun rolüne ilişkin daha ileri araştırmalar için güçlü bir gerekçe sağlar. Mt sağlığını iyileştirmeyi amaçlayan terapötik stratejilerin PKD'li hastaların tedavisi için faydalı olabileceğini öneriyoruz.(polikistik böbrek hastalığı).

Şekil 7|böbrek kistlerinde mitokondriyal transkripsiyon faktörü A (TFAM) ekspresyonupolikistik böbrek hastalığıazaltılır. (a) Normal insan böbreklerinden ve böbreklerden alınan formalinle sabitlenmiş parafine gömülü bölümlerin temsili görüntüleripolikistik böbrek hastalığı(PKD) hastaları, TFAM ekspresyonu için immünohistokimya, voltaja bağlı anyon seçici kanal 1 (VDAC) ekspresyonu için immünofloresan (IF) ve mitokondriyal olarak kodlanmış sitokrom c oksidaz 1 (MT-CO1) için RNA floresan in situ hibridizasyonu ile analiz edildi ve mitokondriyal olarak kodlanmış ATP sentaz membran alt birimi 6 (MT-ATP6) mRNA ifadesi. Oklar kist astar epitel hücrelerini tanımlar, sayı işaretleri kist lümenini gösterir ve yıldızlar glomerülleri gösterir. Düşük büyütmeli görüntüler için =100 mm ve yüksek büyütmeli görüntüler için 10 mm çubuk. (b) İnsan PKD'sinin temsili 3-boyutlu yapılandırılmış aydınlatma mikroskobik görüntüleri (polikistik böbrek hastalığı)VDAC ekspresyonu için IF ile analiz edilen böbrek kesitleri. 4', 6-diamidino-2-fenilindol (DAPI) nükleer boyama (mavi floresan) için kullanıldı. Kesik çizgiler tübülleri gösterir ve numara işaretleri tübüler veya kist lümenini gösterir. Mitokondriyal (mt) hacim, Imaris yazılımı (n=5) kullanılarak ölçülmüştür. Çubuk=4 mm. Veriler, ortalama artı -SEM olarak temsil edilir ve Student t-testi kullanılarak analiz edilir. *P < 0.05.="" bu="" görüntünün="" görüntülenmesini="" optimize="" etmek="" için="" lütfen="" bu="" makalenin="" çevrimiçi="" versiyonuna="" www.kidney-international.org="" adresinden="">

cistancheiçin ..... iyidirpolikistik böbrek hastalığı

YÖNTEMLER

Koşullu Tfam alelinin üretimi başka bir yerde açıklanmıştır.9 Fare çizgilerinin ve deneysel yöntemlerin ayrıntılı bir açıklaması, Ek Yöntemler ve Malzemeler bölümünde bulunabilir. RNAseq veri kümeleri geo@ncbi.nlm.hih.gov(erişim numarası GSE147189) adresinde paylaşılır.

istatistiksel analiz

Veriler ortalama SEM olarak rapor edilir. İstatistiksel analizler, Student t-testi kullanılarak Prism 6 yazılımı (GraphPad Software Inc., San Diego, CA) ile yapıldı. Hayatta kalma, Kaplan-Meier yöntemi kullanılarak analiz edildi ve gruplar log-rank testi ile karşılaştırıldı. 0.05'ten küçük P değerleri istatistiksel olarak anlamlı kabul edildi.

Çalışma onayı

Fareleri içeren tüm prosedürler, canlı hayvanların kullanımı ve bakımı için Ulusal Sağlık Enstitüleri yönergelerine uygun olarak gerçekleştirildi ve Vanderbilt Üniversitesi Kurumsal Hayvan Bakım ve Kullanım Komitesi tarafından onaylandı.

AÇIKLAMA

Tüm yazarlar rakip çıkarlar beyan etmemiştir.

TEŞEKKÜRLER

VHH, Vanderbilt Üniversitesi'ndeki Nefroloji Krick-Brooks başkanı tarafından desteklenmektedir, Ulusal Sağlık Enstitüleri R01-DK101791 ve R01-DK081646 ve Gazi İşleri Bakanlığı Başarı Ödülü 1I01BX002348 tarafından desteklenmektedir. Ulusal Sağlık Enstitüleri hibeleri R01-DK103033 (PVT), R01-DK108433 (MS) ve R01-DK56942 (ABF); Vanderbilt'in O'Brien'ıBöbrekMerkez (P30-DK114809); Vanderbilt'in Diyabet Araştırma ve Eğitim Merkezi (P30-DK20593); Vanderbilt Üniversitesi Tıp Merkezi'ndeki Dijital Histoloji Paylaşımlı Kaynak çekirdeği (www.mc.vanderbilt.edu/dhsr); Çeviri Patolojisi Paylaşılan Kaynak çekirdeği (P30-CA68485); Vanderbilt Fare Metabolik Fenotipleme Merkezi (U24-DK059637); ve Paylaşılan Enstrümantasyon hibesi S10-OD023475. Haase laboratuvarında gerçekleştirilen çalışma hakkında bilgi www.haaselab.org adresinde bulunabilir.

YAZAR KATKILARI

VHH projeyi tasarladı. KI, HK ve VHH araştırma çalışmalarını tasarladı, verileri analiz etti ve yorumladı, makaleyi yazdı ve şekiller yaptı. KI, HK, NG, KT, AL, CT, OD ve CRB deneyler yaptı ve elde edilen verileri analiz etti. MS, NSC ve PVT, fare reaktifleri ve fare dokuları ile kavramsal girdi sağladı ve verilerin yorumlanmasına yardımcı oldu. ABF ve MEK, insan dokuları sağladı.

cistancheiçin ..... iyidirpolikistik böbrek hastalığı

EK MATERYAL

Ek Dosya (PDF)

Şekil S1. Şekil 1 ile ilişkilidir. SIX2 progenitör hücrelerde heterozigot Tfam inaktivasyonu, aşağıdakilerle ilişkili değildir.böbrek hastalığı. Gösterilen formalinle sabitlenmiş, parafine gömülmüş temsili görüntülerdir.böbrek sections from Cre littermate control and heterozygous Six2-Tfam β/ mice at (A) 3 months of age and (B) >10 months of age. Sections were stained with alcian blue/periodic acid–Schiff (AB-PAS) and analyzed by immunohistochemistry (IHC) for a smooth muscle actin (ACTA2) expression. Asterisks depict glomeruli. Bars ¼ 100 mm. Right panels show blood urea nitrogen (BUN) levels and renal mt DNA content in Cre littermate control and Six2-Tfamþ/mutant mice at 3 months of age (n ¼ 5 and 6, respectively) and age>10 ay (sırasıyla n =4 ve 3). Veriler ortalama 0,01 olarak temsil edilir. SEM ve 2-kuyruklu Student t-testi ile analiz edildi; **P<>

Şekil S2. Şekil 1 ile ilişkili.Tfam^-/- böbrek kistleri, Altı2-eGFP/Cre ekspresyonuna sahip hücrelerden türetilir. Altı2-mT/mG;Tfam^-/-fareler, geliştirilmiş yeşil floresan proteine ​​(eGFP) ve tdTomato kırmızı floresan proteinine karşı antikorlarla immünofloresan (IF) ile analiz edildi. eGFP ifadesi, mT/mG Cre-raporter alelinin Altı2- eGFP/Cre aracılı rekombinasyonunu gösterir. (A) tdTomato ve/veya eGFP ifadesinin IF analiziböbreklerP7, P14 ve P29 yaşlarında. Yıldız işaretleri, Altı2-eGFP/ Cre-hedefli eGFP ifade eden hücrelerden (yeşil floresan) türetilen büyük kistleri gösterir; sayı işaretleri, hedeflenmemiş, tdTomato-ifade eden hücrelerden (kırmızı floresan) türetilen 2 küçük kisti göstermektedir. Kırmızı oklar, eGFP-negatif hücreleri gösterir (rekombinasyon yok). Beyaz oklar, eGFP-pozitif kist astar hücrelerini gösterir (rekombinasyonu gösterir). çubuk=100 mm. (B) Cre kontrolünde IF ve Six2- ile TFAM ifadesinin analiziTfam^-/-P7 yaşındaki mutantlar. Beyaz oklar, TFAM-pozitif tübüler yapıları (kırmızı floresan) göstermektedir. gl, glomerulus. çubuk=25μm.

Şekil S3. Şekil 1 ile ilişkili.Tfam^-/- böbreklerArtan proliferatif aktivite ile karakterizedir. (A) Cre littermate control ve Six2-'den alınan böbrek bölümlerinin temsili görüntüleriTfam^-/-P14 yaşındaki fareler, immünohistokimya (IHC) ile Ki67 ekspresyonu için analiz edildi. Kırmızı oklar, kontroldeki Ki67-pozitif hücreleri gösterir veTfam^-/- böbreks. Çubuk =100 mm. (B) ERK, fosfo-ERK (p-ERK) ve b-katenin ifadesinin bütün halinde immünoblot analiziböbrekCre littermate kontrolünden homojenatlar ve P14 yaşındaki Six2- Tfam / mutant fareler. (C) Formalinle sabitlenmiş, parafine gömülü olarak bölünmüş kaspaz 3 ifadeleriböbrekCre littermate kontrolü ve Six2-mT/mG'den bölümler;Tfam^-/- IHC ile analiz edilen P14 yaşındaki fareler. Düşük güçlü büyütmede doku dağılımını göstermek için bölünmüş kaspaz 3-pozitif hücrelerin üzerine kırmızı noktalar yerleştirildi. Kırmızı oklar, yüksek güçlü büyütme görüntülerinde bölünmüş kaspaz 3-pozitif hücreleri gösterir. Çubuklar =1 mm (üst) ve 100 mm (alt). (D) Anti-asetillenmiş a-tubulin boyaması ile immünofloresan ile silyal aksonem etiketlemesi. Gösterilen formalinle sabitlenmiş, parafine gömülmüş temsili görüntülerdir.böbrekCre littermate kontrolü ve Six2-'den bölümlerTfam^-/- P14 yaşındaki mutant fareler. #, ##, ### sırasıyla küçük, orta ve büyük boy kistleri gösterir. Beyaz oklar kirpikleri gösterir. Çubuklar =100 mm (üst) ve 10 mm (alt).

Şekil S4. Şekil 2 ile ilişkilidir. SIX2 soyunda Tfam'ın etkisizleştirilmesi nefron olgunlaşmasını engeller. Gösterilen formalinle sabitlenmiş, parafine gömülmüş temsili görüntülerdir.böbrekCre littermate kontrolü ve Six2-'den bölümlerTfam^-/- P{{{{10}}}}, P7 ve P14 (n=4–6) yaşlarındaki mutant fareler. Kesit, lotus tetragonolobus (LTL) lektin ve Dolichos biflorus aglutinin (DBA) lektin kullanılarak lektin histokimyası ile analiz edildi. Wilms tümör 1 (WT1) protein ekspresyonu, immünofloresan ile analiz edildi. LTL ve DBA tübülleri olan alanlar ImageJ (Ulusal Sağlık Enstitüleri, Bethesda, MD) ile ölçülmüştür; glomerül sayısı manuel olarak sayıldı. Beyaz oklar, LTL veya DBA ile reaksiyona giren nefronları gösterir ve yıldızlar glomerülleri gösterir. Çubuklar ¼ 100 mm. Veriler ortalama SEM olarak temsil edilir ve bir 2-kuyruklu Student t-testi ile analiz edilmiştir. **P < 0.01.="" ***p=""><>

cistancheiçin ..... iyidirpolikistik böbrek hastalığı

Şekil S5. Şekil 2 ile ilişkilidir. HOXB7 progenitör hücrelerinde Tfam'ın inaktivasyonu, kist gelişimi ile sonuçlanmaz. (A) Gösterilen formalinle sabitlenmiş, parafine gömülmüş temsili görüntülerdir.böbrek3-aylık heterozigot Hoxb7-Tfamş/ ve Hoxb7-'dan kesitlerTfam^-/- mutant fareler. Kesitler Masson trichrome (MTrichrome) ile boyandı ve tdTomato (TDT) ve sitokrom oksidaz IV (COX IV) ekspresyonu için immünofloresan (IF) ile analiz edildi. Sayı işaretleri, MTrichrome ile boyanmış bölümlerde dilate tübülleri gösterir ve yıldız işaretleri, tdT-pozitif HOXB7 progenitör hücre kaynaklı toplama kanallarını gösterir. (B) 3-aylık heterozigot Hoxb7-Tfam'dan formalinle sabitlenmiş, parafine gömülü böbrek bölümlerinin IF ve RNA floresan in situ hibridizasyon (RNA-FISH) görüntüleri^-/-ve Hoxb7-Tfam^-/- mutant fareler. Kesitler, IF ve tdT RNA tarafından tdT ve AQP2 protein ekspresyonu ve RNA-FISH tarafından mitokondriyal olarak kodlanmış sitokrom c oksidaz alt birim 1 (mt-Co1) RNA ekspresyonu için analiz edildi. Yıldız işaretleri, TD ifade eden tübülleri (toplama kanalları) gösterir. Hoxb'da7-Tfam^-/- mutant fareler tdT eksprese eden tübüller, AQP2 ve mt-Co1'i eksprese etmez. Çubuk =100 mm. (C) Temsili görüntülerböbrek15-aylık kontrol ve Hoxb7-'dan bölümlerTfam^-/-Mtrichrome ile boyanmış fareler. Çubuk =100 mm. Sağ panel, Cre littermate kontrol farelerinden kan üre nitrojeni (BUN) ve Hoxb7-Tfam^-/- mutantlar (her biri n=6). Veriler, ortalama SEM olarak temsil edilir ve bir 2-kuyruklu Öğrenci t-testi kullanılarak analiz edilir.

Şekil S6. Şekil 3 ile ilişkilidir. Six2- kistlerinde nefron segment belirteci ekspresyonu eksikliğiTfam^-/- böbrekler. Formalinle sabitlenmiş, parafine gömülmüş temsili görüntülerböbrekAltı2-mT/mG'den bölümler;Tfam^-/- P14 yaşındaki fareler. Kesitler, geliştirilmiş yeşil floresan protein (eGFP), megalin, üromodulin, tiazide duyarlı sodyum klorür yardımcı taşıyıcı (NCC) ve aquaporin 2 (AQP2) için spesifik antikorlarla immünofloresan ile analiz edildi. Birleştirilmiş görüntüler sağda gösterilir. Oklar, ilgili nefron segment belirteçlerini ifade eden tübüler yapıları gösterir. çubuk=100μm.

Şekil S7. Şekil 4 ile ilişkili.Takım^-/- epitel hücreleri MT-CO1'de yetersizdir. (A) Gösterilen formalinle sabitlenmiş, parafine gömülmüş temsili görüntülerdir.böbrekAltı2-mT/ mG'den bölümler;Tfam^-/- P7 yaşındaki fareler. Böbrek kesitleri, geliştirilmiş yeşil flüoresan proteinin (eGFP) ve mitokondriyal olarak kodlanmış sitokrom c oksidaz alt birimi 1'in (MT-CO1) ekspresyonu için immünofloresan ile analiz edildi. eGFP ifadesi, mT/mG Cre-raporter alelinin Altı2-eGFP/ Cre-aracılı rekombinasyonunu gösterir. Yıldız işaretleri, MT-CO1 ifade eden eGFP-negatif tübülleri (rekombinasyon yok) gösterir; sayı işaretleri, MT-CO1'i eksprese etmeyen eGFP-pozitif tübülleri (rekombine) gösterir ve TFAM fonksiyonu kaybını gösterir. çubuk =100μm.

Şekil S8. Şekil 5 ile ilişkilidir. SIX2 soy hücrelerinde Tfam'ın etkisizleştirilmesi, metabolik genlerin ekspresyonunu değiştirir. RNAseq ile genom çapında RNA ekspresyon analizi, Cre kontrol littermate ve Six2-'den izole edilen tüm renal korteks ile yapıldı.Tfam^-/- P7 yaşındaki mutant fareler. Oksidatif fosforilasyon, glikoliz, glukoz taşınması, yağ asidi metabolizması ve trikarboksilik asit döngüsü (her biri n=4) ile ilgili genlerin ekspresyon modellerindeki değişiklikleri gösteren ısı haritaları gösterilmektedir.

Şekil S9. Şekil 6 ile ilişkilidir. Cyscpk/cpk böbrek kistlerinde TFAM ekspresyonu azalır. (A) Cys'den formalinle sabitlenmiş, parafine gömülü böbrek bölümlerinin temsili görüntüleri gösterilmiştir.^cpk/cpkP18 yaşındaki fareler. Kesitler, mitokondriyal olarak kodlanmış sitokrom c oksidaz alt birimi 1 (mt-Co1) ve mitokondriyal olarak kodlanmış ATP sentaz membran alt birimi 6 (mt-Atp6) ekspresyonu için RNA floresan in situ hibridizasyonu ile voltaja bağlı anyon seçici kanal için immünofloresan (IF) ile analiz edildi. 1 (VDAC) ifadesi ve lotus tetragonolobus lektin (LTL) ile lektin histokimyası ile. Beyaz oklar kisti astarlayan epitel hücrelerini, kesik çizgiler kisti astarlayan epitel hücrelerini ana hatlarıyla gösterir ve sayı işaretleri kist lümenini gösterir. Çubuklar ¼ 100 mm (düşük güçlü büyütme) ve 10 mm (yüksek güçlü büyütme). (B) littermate vahşi türün 3D yapılandırılmış aydınlatma mikroskobu (3D SIM)böbrekP18 yaşında. Gösterilenler, LTL ile boyanmış ve sitokrom c oksidaz alt birimi IV (COX IV) ve VDAC ifadesi için IF ile analiz edilen böbrek bölümlerinin temsili görüntüleridir. Çubuk ¼ 10 mm (düşük güçlü büyütme görüntüleri) ve 2 mm (yüksek güçlü büyütme görüntüleri). Yıldız işareti, bir interstisyel hücre çekirdeğini gösterir.

Şekil S10. Şekil 7 ile ilişkilidir. Böbrek kistlerinde TFAM ekspresyonu azalmıştır.polikistik böbrek hastalığı. 5 hastadan böbrek kistlerinde nispi TFAM ekspresyon seviyeleripolikistik böbrek hastalığıimmünohistokimya (n=5) ile değerlendirildi. Gösterilen, kist astar epitelinde düşük veya yüksek TFAM ekspresyonu olan kistlerin oranıdır. Bölüm başına sayılan kist sayısı beyaz olarak gösterilir.

cistancheürünler için iyidirpolikistik böbrek hastalığı

' Böbrek epitelyal hedefli mitokondriyal transkripsiyon faktörü A eksikliği, şiddetli kistik hastalık ile ilişkili ilerleyici mitokondriyal tükenme ile sonuçlanır' Ken Ishii1,2,11 ve ark.

---BöbrekUluslararası (2021) 99, 657-670

REFERANSLAR

1. Batı AP, Shadel GS. Doğuştan gelen bağışıklık tepkilerinde ve inflamatuar patolojide mitokondriyal DNA. Nat Rev İmmünol. 2017;17:363–375.

2. Chandel NS. Sinyal organelleri olarak mitokondrinin evrimi. Hücre Metab. 2015;22:204-206.

3. Campbell CT, Kolesar JE, Kaufman BA. Mitokondriyal transkripsiyon faktörü A, mitokondriyal transkripsiyon başlangıcını, DNA paketlemesini ve genom kopya sayısını düzenler. Biochim Biophys Acta. 2012;1819:921–929.

4. Kukat C, Larsson NG. mtDNA, mitokondriyal nükleoid için bir U dönüşü yapar. Trendler Hücre Biol. 2013;23:457–463.

5. Taanman JW. Mitokondriyal genom: yapı, transkripsiyon, translasyon ve replikasyon. Biochim Biophys Acta. 1999;1410:103–123.

6. Larsson NG, Wang J, Wilhelmsson H, et al. Mitokondriyal transkripsiyon faktörü A, farelerde mtDNA bakımı ve embriyogenez için gereklidir. Nat Genet. 1998;18:231–236.

7. Larsson NG, Rustin P. Solunum zinciri hastalığı için hayvan modelleri. Trendler Mol Med. 2001;7:578-581.

8. Torraco A, Diaz F, Vempati UD, et al. Oksidatif fosforilasyon kusurlarının fare modelleri: mitokondriyal hastalıkların patobiyolojisini incelemek için güçlü araçlar. Biochim Biophys Acta. 2009;1793:171–180.

9. Hamanaka RB, Glasauer A, Hoover P, et al. Mitokondriyal reaktif oksijen türleri, epidermal farklılaşmayı ve saç folikülü gelişimini destekler. Bilim Sinyali. 2013;6:ra8.

10. Vernochet C, Mourier A, Bezy O, et al. TFAM'nin yağa özgü silinmesi mitokondriyal oksidasyonu arttırır ve fareleri obezite ve insülin direncine karşı korur. Hücre Metab. 2012;16:765–776.

11. Salon AM, Unwin RJ, Hanna MG, et al. Böbrek fonksiyonu ve mitokondriyal sitopati (MC): cevaplardan daha fazla soru mu? QJM. 2008;101:755–766.

12. Emma F, Montini G, Parikh SM, et al. Kalıtsal böbrek hastalığında ve akut böbrek hasarında mitokondriyal disfonksiyon. Nat Rev Nefrol. 2016;12: 267–280.

13. Kang I, Chu CT, Kaufman BA. Nörodejenerasyonda mitokondriyal transkripsiyon faktörü TFAM: ortaya çıkan kanıtlar ve mekanizmalar. FEBS Lett. 2018;592:793 811.

14. Chung KW, Dhillon P, Huang S, et al. Mitokondriyal hasar ve STING yolunun aktivasyonu böbrek iltihabına ve fibrozise yol açar. Hücre Metab. 2019;30:784–799.e785.

15. Küçük MH, McMahon AP. Memeli böbrek gelişimi: ilkeler, ilerleme ve projeksiyonlar. Cold Spring Harb Perspect Biol. 2012;4:a008300.

16. Kobayashi A, Valerius MT, Mugford JW, et al. Six2, memeli böbrek gelişimi boyunca çok potansiyelli, kendi kendini yenileyen bir nefron progenitör popülasyonunu tanımlar ve düzenler. Hücre Kök Hücre. 2008;3:169–181.

17. Wredenberg A, Wibom R, Wilhelmsson H, et al. Mitokondriyal miyopati farelerinde artan mitokondriyal kütle. Proc Natl Acad Sci US A. 2002;99:15066–15071.

18. Guder WG, Ross BD. Nefron boyunca enzim dağılımı. Böbrek Int.1984;26:101–111.

19. Guery B, Choukroun G, Noel LH, et al. Böbrek lezyonu ve mitokondriyal tRNA(Leu) gen mutasyonu ile başvuran erişkinlerde sistemik tutulum spektrumu. J Am Soc Nephrol. 2003;14:2099–2108.

20. O'Toole JF, Liu Y, Davis EE, et al. Bir mitokondriyal proteini kodlayan XPNPEP3'te mutasyona sahip bireylerde nefronoftis benzeri nefropati gelişir. J Clin Invest. 2010;120:791-802.

21. Alston CL, Morak M, Reid C, et al. İzole kompleks I eksikliğine, böbrek yetmezliğine ve miyopatiye neden olan yeni bir mitokondriyal MTND5 çerçeve kayması mutasyonu. Nöromuskül Bozukluğu. 2010;20:131–135.

22. Finsterer J, Scorza FA. Primer mitokondriyal bozuklukların böbrek belirtileri. Biomed Rep. 2017;6:487–494.

23. Fervenza FC, Gavrilova RH, Nasr SH, et al. Yeni bir mitokondriyal DNA mutasyonuna bağlı CKD: bir olgu sunumu. J Böbrek Dis. 2019;73:273–277.

24. Huang S, Park J, Qiu C, et al. Jagged1/Notch2, Tfam aracılı metabolik yeniden programlama yoluyla böbrek fibrozunu kontrol eder. PLoS Biol. 2018;16:e2005233.

25. Shao X, Somlo S, Igarashi P. Gelişmekte olan böbrek ve genitoüriner sistemde epitelyal spesifik Cre/lox rekombinasyonu. J Am Soc Nephrol.2002;13:1837–1846.

26. Yu J, Carroll TJ, McMahon AP. Sonik kirpi, fare metanefrik böbreğinde mezenkimal hücrelerin çoğalmasını ve farklılaşmasını düzenler. Gelişim. 2002;129:5301–5312.

27. Brinkkoetter PT, Bork T, Salou S, et al. Anaerobik glikoliz, mitokondriyal metabolizma ve dinamiklerden bağımsız olarak glomerüler filtrasyon bariyerini korur. Hücre Temsilcisi 2019;27:1551–1566.e1555.

28. Wanet A, Arnould T, Najimi M, et al. Mitokondri, metabolizma ve kök hücre kaderini birbirine bağlamak. Kök Hücre Dev. 2015;24:1957–1971.

29. Guay-Woodford LM. Renal kistik hastalıklar: çeşitli fenotipler siliyer/sentrozom kompleksinde birleşir. Pediatr Nefrol. 2006;21:1369-1376.

30. Rowe I, Chiaravalli M, Mannella V, et al. Polikistik böbrek hastalığında kusurlu glikoz metabolizması, yeni bir terapötik strateji tanımlar. Nat Med.2013;19:488-493.

31. Warner G, Hein KZ, Nin V, et al. Gıda kısıtlaması, polikistik böbrek hastalığının gelişimini iyileştirir. J Am Soc Nephrol. 2016;27:1437–1447.

32. Chiaravalli M, Rowe I, Mannella V, et al. 2-Deoksi-d-glukoz, PKD'yi iyileştirir(polikistik böbrek hastalığı)ilerleme. J Am Soc Nephrol. 2016;27:1958–1969.

33. Hildebrandt F, Benzing T, Katsanis N. Ciliopathies. N Engl J Med. 2011;364: 1533–1543.

34. Harris PC, Torres VE. Otozomal dominant polikistik böbrek hastalığında genetik mekanizmalar ve sinyal yolları. J Clin Invest. 2014;124:2315–2324.

35. Pazour GJ, Dickert BL, Vucica Y, et al. Chlamydomonas IFT88 ve fare homologu, polikistik böbrek hastalığı geni tg737, kirpikler ve kamçıların birleştirilmesi için gereklidir. J Cell Biol. 2000;151:709–718.

36. Lin F, Hiesberger T, Cordes K, et al. Kinesin-II'nin alt biriminin böbreğe özgü inaktivasyonu, renal siliogenezi inhibe eder ve polikistik böbrek hastalığı üretir. Proc Natl Acad Sci US A. 2003;100:5286–5291.

37. Nauli SM, Alenghat FJ, Luo Y, et al. Polikistin 1 ve 2, böbrek hücrelerinin birincil siliyerinde mekanosensasyona aracılık eder. Nat Genet. 2003;33:129–137.

38. Saadi-Kheddouci S, Berrebi D, Romagnolo B, et al. Beta-katenin geninin aktive edilmiş bir mutantını eksprese eden transgenik farelerde polikistik böbrek hastalığının erken gelişimi. Onkogen. 2001;20:5972–5981.

39. Yamaguchi T, Nagao S, Wallace DP, et al. Siklik AMP, otozomal dominant polikistik böbreklerdeki kist epitel hücrelerinde B-Raf ve ERK'yi aktive eder. Böbrek İnt. 2003;63:1983–1994.

40. Nagao S, Yamaguchi T, Kusaka M, et al. Otozomal dominant polikistik böbrek hastalığı olan sıçanlarda hücre dışı sinyalle düzenlenen kinazın böbrek aktivasyonu. Böbrek İnt. 2003;63:427–437.

41. Qian CN, Knol J, Igarashi P, et al. Fare renal tübüler epitelinde APC'nin koşullu inaktivasyonunu takiben kistik renal neoplazi. J Biol Chem. 2005;280:3938–3945.

42. Omori S, Hida M, Fujita H, et al. Hücre dışı sinyalle düzenlenen kinaz inhibisyonu, polikistik böbrek hastalığı olan farelerde hastalığın ilerlemesini yavaşlatır. J Am Soc Nephrol. 2006;17:1604-1614.

43. Shibazaki S, Yu Z, Nishio S, et al. PKD'nin böbreğe özgü inaktivasyonundan sonra hücre dışı düzenlenmiş kinaz yolunun kist oluşumu ve aktivasyonu(polikistik böbrek hastalığı)1. Hım Mol Genet. 2008;17:1505–1516.

44. Ishimoto Y, Inagi R, Yoshihara D, et al. Mitokondriyal anormallik otozomal dominant polikistik böbrek hastalığında kist oluşumunu kolaylaştırır. Mol Hücre Biol. 2017;37:e00337-17.

45. Jain IH, Zazzeron L, Goli R, et al. Mitokondriyal hastalık için bir tedavi olarak hipoksi. Bilim. 2016;352:54–61.

46. ​​Ferrari M, Jain IH, Goldberger O, et al. Hipoksi tedavisi, Leigh sendromunun bir fare modelinde nörodejeneratif hastalığı tersine çevirir. Proc Natl Acad Sci US A. 2017;114:E4241–E4250.