WT1 Darbeli İnsan CD141+ Dendritik Hücre Aşısı, Katı Tümör Hedefli İmmünoterapide Yüksek Potansiyele Sahiptir

Soyut:

Dendritik hücreler (DC), anti-tümör bağışıklığında kritik rol oynayan güçlü hücrelerdir ve bunların kanser immünoterapisinde kullanılması, etkili bir terapötik olarak gizli yeteneklerin kilidini açar. DC'nin tam potansiyelini en üst düzeye çıkarmak için CellgramDC-WT1 (CDW) adında bir DC aşısı geliştirdik. CDW, katı tümörlerde yaygın olarak eksprese edilen bir antijen olan WT1 ile dolduruldu ve DC olgunlaşmasına yardımcı olmak için zoledronat ile uyarıldı. Her ne kadar önceki çalışmamız Rg3'ü DC olgunlaşmasının indükleyicisi olarak kullanmaya odaklanmış olsa da, kalite kontrol ve erişimle ilgili sorunlar bizi daha iyi bir alternatif olarak zoledronatı seçmeye yöneltti. Ayrıca CDW, saf T hücrelerinin aktif CD8+ T hücrelerine farklılaşmasını indükleyen ve WT1 antijenlerine sahip kanser hücrelerine karşı sitotoksik T lenfosit (CTL) tepkisini ortaya çıkaran IL-12 ve IFN-'yi salgıladı. CDW'nin kimliğini ve işlevini doğrulayarak, CDW'nin geliştirilmiş bir DC aşısı olduğuna ve kanser immünoterapisi alanında umut verici bir potansiyele sahip olduğuna inanıyoruz.

cistanche tubulosa-bağışıklık sistemini iyileştirir

Anahtar Kelimeler:

DC aşısı; CD141; dentritik hücreler; zoledronat; T hücresi aktivasyonu; kanser immünoterapisi; Katı tümör; kanser antijenleri; Wilms tümörü1 (WT1); tümörle ilişkili antijenler

1. Giriş

Kanser dünya çapında önde gelen ölüm nedenidir ve geleneksel tedavi yöntemleri arasında cerrahi, kemoterapi ve ışınlama yer alırken, kanserli ve normal hücreler arasında ayrım yapılamaması nedeniyle sıklıkla olumsuz yan etkilere neden olurlar. Bununla birlikte, immünoterapi alanındaki son gelişmeler, vücudun bağışıklık sistemini spesifik olarak kanser hücrelerini hedef alacak şekilde aktive etmeyi ve dolayısıyla yan etkileri en aza indirmeyi amaçlayan kanser aşılarının geliştirilmesine olanak sağlamıştır [2]. Kanser aşıları öncelikle bağışıklık sisteminin antijene özgü lenfositlerini aktive etmek için tümörle ilişkili antijenleri veya tümöre özgü antijenleri kullanır [3]. Aktive edilmiş lenfositler, ağırlıklı olarak T hücreleri, kanserin ilerlemesini kontrol etmek için sitotoksisite ve sitokin üretimi gibi efektör fonksiyonları üstlenirler [4]. Farklı kanser aşısı türleri, doğal öldürücü (NK) hücreler [5] ve dendritik hücreler (DC) [6] gibi spesifik bir bağışıklık hücresi kümesini kullanır. Bunlardan DC, antijen sunan hücrelerdir (APC) ve T hücreleri yoluyla bağışıklık tepkisinin aktive edilmesinde kritik bir rol oynar. DC'nin ana özelliği, antijenleri yakalama ve proteini, ana doku uyumluluk kompleksi (MHC) molekülleri tarafından T hücrelerine sunulacak bir peptit halinde işleme yeteneğini içerir. Bununla birlikte DC, her bir alt kümenin farklı fenotipler ve işlevler taşıdığı heterojen bir popülasyon içerir [7].

cistanche bitkisi bağışıklık sistemini güçlendiriyor

DC'ler büyük ölçüde klasik/geleneksel DC (cDC), plazmasitoid DC (pDC) ve monosit türevli DC (mo-DC) olarak ayrılır. İki geniş cDC grubu vardır: CD8+ T hücresinden (CTL) CTL yanıtı elde etmek için öncelikle MHC sınıf I kullanarak antijenleri sunan tip 1 DC (cDC1) ve MHC sınıf I'i kullanan tip 2 DC (cDC2) MHC sınıf II, CD4+ T hücresinden (yardımcı T hücresi) bir yanıtı teşvik eder [8]. Plazmasitoid DC'ler, tip I interferon (IFN) [9] salgılamada uzmanlaşmış benzersiz bir DC alt kümesidir. Mo-DC öncelikle inflamasyonda rol oynar ve TH17 immün yanıtını destekler [10] (Şekil 1A). Şu anda mo-DC en çok DC anti-kanser immünoterapi araştırması alanında kullanılmaktadır [11-13]. Her ne kadar mo-DC iyi tolere edilse ve güvenli olsa da, düşük terapötik etkinliği yaygın kullanımını engellemektedir. Mo-DC'nin sınırlaması, güçlü sitotoksik T lenfosit (CTL) yanıtlarını aktive etmek için lenf düğümlerine sınırlı göç etme yeteneği gösterdikleri in vitro olarak gösterilmiştir [14]. Mevcut DC aşısı modlarının sınırlamalarının üstesinden gelmek için, bu çalışmada cDC1 seçilmiştir çünkü en üstün antijen sunum kabiliyetine sahiptir ve yüksek bir CTL tepkisi gösterir. Her ne kadar cDC1 aşıları ile ilgili çalışmalar artıyor olsa da, cDC1 henüz klinik bir çalışmada araştırılmamıştır [15].

Kemik iliğinden mononükleer hücreler (MNC) elde ettik ve ardından MACS® Hücre Ayırma tekniğini kullanarak CD34+ hücrelerini (hematopoietik kök hücreler) izole ettik. Hücreler granülosit-makrofaj koloni uyarıcı faktör (GM-CSF), kök hücre faktörü (SCF) ve DC'ye farklılaşmayı doğrudan indükleyen Fms benzeri tirozin kinaz reseptör 3 (FLT3)-ligandı kullanılarak çoğaltıldı [16] ve farklılaşma DC'ye geçiş GM-CSF ve interlökin 4 (IL-4) ile indüklendi. Olgunlaşmamış DC, WT1 proteinini antijen olarak tanır ve zoledronat kullanılarak olgunlaştırılır. WT1 (Wilms tümörü1) antijeni, çeşitli malignitelerde ve çeşitli katı tümörlerde yüksek oranda eksprese edilir. Bu nedenle WT1, kansere yönelik immünoterapinin hedeflerinden biri olarak kullanılmıştır [17]. Zoledronat, hem osteoporoz hem de iskelet metastazı tedavisinde yaygın olarak kullanılan bifosfonat sınıfına ait bir ilaçtır. Ek olarak zoledronat, mevalonat yolunda ve Ras gibi küçük GTPaz proteinlerinin müteakip prenilasyonunda rol oynayan farnesil difosfat sentaz enzimini inhibe eder [18]. Olgunlaşan DC daha sonra DC aşısı olarak sonlandırılır (Şekil 1A). Genel olarak olgunlaşmış DC, bağışıklık hücrelerinin aktivasyonunu indüklemek için çeşitli sitokinler salgılar [19] ve antijen sunumu için doğrudan T hücrelerine bağlanır [20]. T hücreleri, bağışıklık tepkisine yardımcı olmak için yardımcı T hücreleri (CD4+) veya anti-kanser etkilerini doğrudan başlatmak için sitotoksik T hücreleri (CD8+) olmak üzere DC ile reaksiyona girdi [21] (Şekil 1B). DC aşısının bileşimi akış sitometrisi ile doğrulandı ve aşının işlevi sitokin salgılama testi, T hücresi değişimi ve sitotoksik T Lenfosit (CTL) tahlili yoluyla analiz edildi.

cistanche tubulosa-bağışıklık sistemini iyileştirir

Cistanche Enhance Immunity ürünlerini görüntülemek için buraya tıklayın

【Daha fazlasını isteyin】 E-posta:cindy.xue@wecistanche.com / Whats App: 0086 18599088692 / Wechat: 18599088692

2. Sonuçlar

2.1. Yüksek CD141+ İfadesi ile DC Aşısını Gösteren Akış Sitometri Profilleri

DC'nin kimliğini doğrulamak için, CD141 (en yaygın kullanılan cDC1 işaretçisi), CD1c (cDC2'nin bir işaretçisi) ve CD303a (pDC'nin bir işaretçisi) dahil olmak üzere çeşitli işaretçiler analiz edildi. Ayrıca aktivasyon belirteçleri olan HLA-DR, CD80 ve CD86 de analiz edildi. İnsan DC kanında bulunan cDC2'nin %70'inin aksine, üretilen DC çoğunlukla cDC1'den (CD141+ hücreler) oluşuyordu ve aktive edilmiş DC'de CD141+CD1c+'nın çift pozitif oluşumu şu şekildeydi: da doğrulandı [22,23]. Ayrıca, sonuçlar DC için önemli ölçüde yüksek düzeyde aktivite gösterdi (Şekil 2A, B). DC üretiminde farklı zaman noktaları için tam kan sayımı (CBC) kullanılarak hücre morfolojisi değişiklikleri de izlendi. Çoğalma aşamasında hücrelerin çoğu monosit olarak çoğalırken (Tablo 1), farklılaşma aşaması, üretim sürecinin sonuna doğru monositlerin kademeli olarak azalmasına ve yok olma düzeyine gelmesine neden oldu.

Şekil 2. CDW alt kümelerinin tanımlanması. DC'nin fenotipik özellikleri. Farklılaşma süreci sırasında DC'ye WT1 proteini uygulandı ve 3 saat boyunca 1 uM zoledronat ile işlendi. Veriler, insan DC'sinin (n=5) (A) uyarıcı işaretleyicisinin ifadesini ve DC temsilcisinin alt tipini gösterir. Sonuçlar nokta grafikleri (B) olarak gösterilmiştir.

Tablo 1. CD34+ hücrelerinden DC'ye çoğalma ve farklılaşma süreci sırasında fenotipik değişiklikler CBC kullanılarak analiz edildi.

2.2. ELISA ile Belirlenen IL-12 ve IFN- Sitokinlerin Plazmatik Düzeyi

DC tarafından salgılanan birçok sitokin arasında en temsili olanları IL-12 ve IFN-'dir. IL-12, doğuştan gelen ve kazanılmış bağışıklık tepkilerini birbirine bağlayarak iltihabı düzenler. IL-12-indüklenen etkilerin çoğuna IFN- salgılanması aracılık eder ve Th1 hücrelerinin uyarılması için kritik olduğu ortaya çıktı. IFN- hücresel immünitenin aktivasyonunda ve ardından antitümör immün yanıtının uyarılmasında anahtar rol oynar [24-26]. CDW'nin etkinliğini doğrulamak amacıyla, IL-12 ve IFN-salgılama seviyeleri, T hücreleriyle etkileşim yoluyla analiz edildi. Yalnızca T hücresi ve darbesiz DC koşullarıyla tedavi edilen T hücresi, birbirine benzer salgı seviyeleriyle sonuçlanırken, gruplar, T hücresi + CDW grubuyla karşılaştırıldığında, T hücrelerinde CDW indüksiyonu, IL seviyesinin iki katını verdi -12(Şekil 3A) ve IFN- düzeyini önemli ölçüde artırdı (Şekil 3B).

Şekil 3. Sitokin analizi yoluyla T hücrelerinde CDW'nin indüksiyon karşılaştırması. IL-12 (A) ve IFN- (B) salgılaması yalnızca T hücresinde (aktive edilmiş IL-2 ve Trans ACT), T hücresi + darbesiz DC ve T hücresi + CDW ortak kültüründe ölçüldü ELISA tahlili kullanılarak süpernatan (n=3). ELISA, tamamlanma sırasında süpernatan kullanılarak yapıldı. Analiz SigmaPlot aracılığıyla yapıldı. *** p < 0.001.

2.3. Zoledronatın CDW'de cDC1'in Farklılaşması ve Olgunlaşması Üzerindeki Etkisi

Önceki çalışmada, DC'nin olgunlaşmasını teşvik etmek için Panax ginseng'de bulunan bir ginsenosid olan Rg3 [27] kullanıldı; ancak nihai ürün, kalite kontrolünde zorluklara neden olan bir yabancı madde tabakasından oluşuyordu. Bu sorunun üstesinden gelmek için Rg3'ün yerine zoledronat kullanıldı ve bunun DC olgunlaşmasının indüksiyonu üzerindeki etkisi analiz edildi. İki maddenin etkileri arasındaki en önemli fark, zoledronatın olağanüstü derecede yüksek bir cDC1 (CD141+ hücre) yüzey işaretçisi ekspresyonu sağlama yeteneğidir (Şekil 4A). Bu nedenle, cDC1'in antijen sunumunda en üstün DC alt tipi olduğu bilindiğinden, DC olgunlaşmasının indüksiyonu için zoledronat seçilmiştir [18]. DC olgunlaşmasını indüklemede zoledronatın optimal tedavi süresi de değerlendirildi. 24 saatlik tedavi yeterli oranda CD141+ hücresi vermesine rağmen, 3 saatlik tedavi sonucundaki CD141+ hücre oranı yaklaşık %20 daha yüksekti ve CD86 (ko-- 3 saatlik tedavide uyarıcı işaretleyici) oranı da %30 oranında daha yüksekti. Ayrıca zoledronatın etki mekanizması dikkate alındığında, 24 saate kıyasla 3 saat gibi daha kısa bir tedavi süresinin, daha yüksek kalitede DC üretilmesinde daha etkili olduğu değerlendirildi (Tablo 2).

Şekil 4. DC aşı üretiminde zoledronatın cDC1'in farklılaşması ve olgunlaşması üzerindeki etkisi. DC aşısında zoledronatın etkileri. DC aşısı üretimi sürecinde, zoledronatla 3 saatlik tedavi, DC'nin cDC1'e farklılaşmasını ve olgunlaşmasını indükler ve daha yüksek düzeyde CD141 işaretçisi verir. Fenotip belirteçleri, DC olgunlaşmasının uyarılması için kullanılan Rg3 (n=4) ve zoledronatı (n=5) karşılaştırmak için akış sitometrisi ile analiz edildi. *** p < 0.001.

Tablo 2. Zoledronat tedavi sürelerinin (3 saat ve 24 saat) yüzey belirteçleri üzerindeki etkisi.

2.4. CDW Aşılamasının İndüklediği WT1 Antijene Spesifik T Hücre Yanıtları

Şekil 5. CDW, kanser hücrelerine karşı sitotoksisiteyi teşvik etmek için CD8+ T hücrelerini artırır. CDW'nin CTL yoluyla değerlendirilen T hücresi tepkisi üzerindeki etkisi. IL-2 ve Trans-Act, T hücresi uyarıcılarıdır ve T hücrelerini uyarmak için kullanılır. Aktive edilmiş T hücreleri, yedi gün süren ilk indüksiyon ve 10 güne uzanan ikinci indüksiyon için DC ile birlikte kültürlendi. T hücresi alt tipindeki değişiklikler akış sitometrisi (A) aracılığıyla analiz edildi. 10-14 gün boyunca kültürlenen T hücreleri, bir 96-kuyu plakasında uygun oranlara göre WT1 ifade eden kanser hücreleriyle birlikte kültürlendi. -72 saat sonra, kanser hücrelerinin hayatta kalma oranı CCK8 (B-D) kullanılarak analiz edildi. CDW grubu (B) tarafından indüklenen T hücreleri. Yalnızca T hücresi grubu (aktive edilmiş IL-2 ve Trans ACT) (C). Darbesiz DC grubu (D) tarafından indüklenen T hücreleri. * p < 0,05, *** p < 0,001.

2.5. CellgramDC Aşısının Güvenliğinin Doğrulanması

Her iki uygulama grubunda da (3,4 x 104 hücre/hayvan veya 1,7 x 105 hücre/hayvan), uygulanan maddenin bir sonucu olarak ölüm veya genel semptomlar açısından herhangi bir anormallik gözlenmedi.

Gözlem süresi boyunca, uygulanan maddenin bir sonucu olarak uygulama gruplarında (3,4 x 104 hücre/hayvan veya 1,7 x 105 hücre/hayvan) toksikolojik açıdan anlamlı bir değişiklik gözlenmedi. Gözlemler arasında vücut ağırlığı (Şekil 6A), idrar tahlili (Şekil 6B), yem alımı, oftalmolojik muayene, hematolojik muayene, kan biyokimyasal muayenesi, organ ağırlığı, otopsi ve lokal tolerans testi (Ek 1, Tablo S1-S9) yer alıyordu. Kökten türetilmiş DC (CellgramDC) ve monositten türetilmiş DC (mo-DC) karşılaştırılarak çeşitli testler doğrulandı. Farelerin hayatta kalması ve tümör boyutu da test edildi. Kök DC grubundaki tümör boyutu, mo-DC grubuna kıyasla %50'den fazla azaldı ve hayatta kalma oranı da arttı, bu da güçlü bir antikanser etkisini doğruladı (Ek 2).

Şekil 6. C57BL/6 farelerinde CellgramDC'nin deri altı doz toksisite çalışması. CellgramDC'nin güvenliğini ve toksik tepkisini test etmek için, C57BL/6 suşunun dişi ve erkek farelerine toplam altı hafta boyunca (haftada bir enjeksiyon) CellgramDC deri altından enjekte edildi. Cell gramDC'nin güvenliği, toplam altı hafta boyunca (haftada bir enjeksiyon) dişi ve erkek farelere deri altı enjeksiyon yoluyla test edildi. Uygulama grupları iki gruptan oluşmuştur: 3,4 x 104 hücre/hayvan enjekte edilen 10 fare ve 1,7 x 105 hücre/hayvan enjekte edilen 15 fare. Negatif bir kontrol grubu 15 fareden oluşuyordu ve eksipiyan, plazma solüsyonu-A/insan serum albümini (HSA) %90 + %10 DMSO ve salinden oluşan bir solüsyon altı hafta boyunca (haftada bir enjeksiyon) intravenöz olarak enjekte edildi. Geri dönüşümlü bir toksik tepkiyi test etmek için, her karşılaştırma grubundan, negatif kontrol grubundan ve 1,7 x 105 hücre/hayvan uygulama grubundan beş fareye iki haftalık iyileşme süresi verildi. İyileşme döneminde kilo kontrolü (A), idrar tahlili (B), genel semptomlar, yem tüketimi ölçümü ve oftalmolojik muayene gözlemlendi. Gözlem sürecinin ardından hematolojik testler, kan biyokimyasal testleri ve organ ağırlığı ölçümlerinin yanı sıra otopside görsel ve histopatolojik incelemeler yapıldı.

CellgramDC'nin stabilitesini ve etkinliğini doğruladık. WT1 ile doldurulan ve zoledronat ile tedavi edilen CDW de toksisite ve etkinlik açısından test edilecek ve daha iyi sonuçlar bekleniyor.

3. Tartışma

Üretilen CDW aşısında cDC1 oranı en yüksekti ve yüksek düzeyde aktivite gösterdi. cDC1, en üstün antijen sunma yeteneğine sahip hücrelerdir ve DC'nin ana işlevinden sorumludur. cDC1'in DC'nin nadir bir alt kümesini nasıl oluşturduğu göz önüne alındığında [~0.03% PBMC] [28], CDW'de CD141+ popülasyonunun baskınlığı, etkinliğin arttırılmasında açık bir avantajdır. aşı. Ayrıca, CDW'deki cDC1, sitokinleri (IL-12 ve IFN-) yüksek düzeyde salgıladı ve saf T hücrelerinin aktif CD8+ T hücrelerine farklılaşmasını indükleme yeteneğine sahipti. Önceki çalışmamızda olgunlaşma faktörü olarak Rg3 kullanılmıştı ancak nihai ürünün tedariki ve kalite kontrolünün sağlanmasındaki zorluk göz önüne alındığında, bu zorlukların üstesinden gelmek için ikame olarak zoledronat kullanıldı. Zoledronat tarafından indüklenen DC, V9δ T hücre aktivasyonunun bir indükleyicisi olarak rolünü analiz etmek için incelenmiştir [29]. Zoledronat bir bifosfonat sınıfıdır ve bifosfonatlar δ T hücrelerinin hızlı ve bol miktarda proinflamatuar sitokin üretme aktivitesini indükler [30], bunu dikkate alarak deneyimizi kısa süreli tedavinin etkilerini test etmek için tasarladık. Çalışmamızda zoledronat (Rg3 ile karşılaştırıldığında), CDW'de CD{17}} T hücrelerinin aktivasyonunu indükledi ve aynı zamanda cDC1 seviyesini de arttırdı. Önceki çalışmamızda Rg3 (NCT 046158-45) tarafından indüklenen DC için ilk klinik deneme yürütüldü, ancak sonuçlar bildirilmedi. Bununla birlikte, mevcut bulgular göz önüne alındığında, zoledronat tarafından indüklenen DC'nin kullanıldığı gelecekteki klinik çalışmalarda daha iyi sonuçlar bekliyoruz.

cistanche bitkisi bağışıklık sistemini güçlendiriyor

Son zamanlarda kansere karşı immünoterapiyi çevreleyen birçok çalışma yapılmıştır ve en çok araştırılan tedaviler CAR-T [31,32] ve CAR-NK'dir [33,34]. Bu tedavilerin etkinliği kanıtlanmış olup, kanser tedavisinde büyük beklentiler bulunmaktadır. Ancak CAR-T, tüm kanser türlerinin çok küçük bir kısmını oluşturan kan kanserinin tedavisi ile sınırlıdır [35]. Ayrıca hastalar tedavinin sitokin salınım sendromu (CRS) gibi yan etkilerinden de muzdarip olabilir [36]. Bu eksikliklerin üstesinden gelmek için NK hücrelerinin kullanıldığı immün terapi araştırılmaktadır. NK hücreleri oldukça güçlü lenfositlerdir ve geniş çapta eksprese edilen çok sayıda aktive edici ligand yoluyla kanseri hedefler. Sonuç olarak NK hücreleri, otolog CAR T hücre tedavisinin sınırlamalarını giderebilir. Bununla birlikte, NK hücrelerinin kullanımının, hücre kültüründeki zorluk, hücresel kinetiklerin zirve aktivitesinin hemen ortaya çıkması ve daha kısa içsel uzun ömür ile yaşam süresi ve yanıtta sınırlı hafıza fenotipi gibi çeşitli potansiyel dezavantajları vardır. ,38]. Diğer araştırmalar, DC veya T hücreleri ve anti-PD1 (programlanmış hücre ölümü proteini1) [39] veya anti-PD-L1 (programlanmış ölüm ligand1) [40] gibi bağışıklık kontrol noktası inhibitörlerini kullanan kombinasyon tedavilerini içerir. Bu ilaçların birlikte uygulanması, bağışıklık sistemini baskılayan tümör mikro ortamının hedeflenmesine olanak sağlar ve bu tedavilerin etkinliğini artırmak için ileri araştırmalar devam etmektedir.

Cistanche tubulosa'nın faydaları-Bağışıklık sistemini güçlendirmek

İmmünoterapiye yönelik DC aşısının geliştirilmesine yönelik araştırmalar sürekli olarak artmakta ve bu alanda birçok ilerleme kaydedilmektedir. DC, gelişmiş bağışıklık sisteminde merkezi ve kritik bir rol oynar ve DC aşısı, kansere yönelik diğer immünoterapi yöntemleriyle karşılaştırıldığında bir avantaj sunabilir. DC, kanser hücrelerini doğrudan öldürmediğinden normal hücreler etkilenmez ve olumsuz yan etkiler ortadan kalkar. Ayrıca, birçok katı tümörde yaygın olarak eksprese edilen bir antijen olan WT1 ile DC'yi darbelendirerek [17], DC aşısı katı tümör modellerini hedefleyebilir. WT1 protein antijenine karar vermeden önce çeşitli antijen türleriyle deneyler yaptık. Kalite garantili ürünlerin yanı sıra peptit, büyüleyici veya pop karışımı gibi çeşitli antijenler kullanıldığında, en büyük etkiye sahip antijen, protein olarak kullanıldığında elde edildi. Sonuç olarak, antijen darbesi için WT1 proteinini kullandık. DC terapisinde en yaygın olarak çalışılan yaklaşım, kemoterapiyle birlikte WT1 ile darbeli mo-DC'yi kullanır [12]. mo-DC'nin güvenliği ve immünojenitesi klinik çalışmalarla doğrulanmıştır [13]. Diğer DC aşı araştırmaları, aşılarını kandan elde edilen monosit türevi DC'yi kullanarak geliştirirken, kök hücrelerden türetilen DC'nin artan potansiyele sahip olacağını öngördük. Ek olarak cDC'nin mo-DC'den daha büyük bir güce sahip olduğunun bilinmesi bizi bu araştırmaya yöneltmektedir. Bu nedenle CDW, mo-DC'ye daha iyi bir alternatif olabilir çünkü birincil bileşeni, en etkili çapraz sunum yeteneğine sahip bir DC alt tipi olan cDC1'dir. Her ne kadar sitotoksik aktivite T hücreleri + darbesiz DC grubu ve CDW grubunda benzer olsa da, bunun nedeninin darbesiz DC'nin aynı zamanda bir cDC1 hücresi türü olması olduğunu varsayıyoruz. Ne olursa olsun, CDW, cDC1 popülasyonunu artırarak etkili bir şekilde güçlü bir anti-tümör immün tepkisi ortaya çıkarabilir. Klinik öncesi çalışma aracılığıyla DC aşısının tekrarlanan doz toksisitesini test ettik. CDW'nin geliştirme ve üretim süreci doğrulandı ve CDW'nin geliştirilmiş etkilerini test etmek için daha fazla çalışma yapmayı umuyoruz. Etkinlik in vitro doğrulanırken, in vivo etkinlik doğrulaması için bir doz toksisite çalışması yapıldı. CDW'nin kullanıldığı klinik araştırmaların sonuçları raporlandıktan sonra, araştırmamızı mevcut araştırmaları iyileştirecek yönde yönlendirmeyi amaçlıyoruz.

Referanslar

1. Padma, VV Hedefe yönelik kanser tedavisine genel bakış. BioMedicine 2015, 5, 19. [CrossRef] [PubMed]

2. Schirrmacher, V. Kanser aşıları ve onkolitik virüsler, kanser hastalarında diğer sistemik tedavilere göre çok daha düşük yan etkiler gösterir: Karşılaştırmalı bir analiz. Biyotıplar 2020, 8, 61. [CrossRef] [PubMed]

3.Smith, CC; Selitsky, SR; Chai, S.; Armistead, Başbakan; Vincent, BG; Serody, JS Alternatif tümöre özgü antijenler. Nat. Rahip Kanser 2019, 19, 465–478. [CrossRef] [PubMed]

4.Lu, H.; Zhao, X.; Li, Z.; Hu, Y.; Wang, H. CAR-T hücrelerinden CAR-NK hücrelerine: Hematolojik maligniteler için gelişen bir immünoterapi yöntemi. Ön. Onkol. 2021, 11, 720501. [CrossRef]

5. Chu, J.; Gao, F.; Yan, M.; Zhao, S.; Yan, Z.; Şi, B.; Liu, Y. Doğal öldürücü hücreler: Kanser için umut verici bir immünoterapi. J. Tercüme. Med. 2022, 20, 240. [CrossRef] [PubMed]

6. Sabado, RL; Balan, S.; Bhardwaj, N. Dendritik hücre bazlı immünoterapi. Hücre Arş. 2017, 27, 74–95. [CrossRef] [PubMed]

7. Patente, TA; Milletvekili Pinho; Oliveira, AA; Evangelista, GCM; Bergami-Santos, PC; Barbuto, JAM İnsan dendritik hücreleri: Heterojenlikleri ve kanser immünoterapisinde klinik uygulama potansiyeli. Ön. İmmünol. 2019, 9, 3176. [CrossRef]

8. Collin, M.; Bigley, V. İnsan dendritik hücre altkümeleri: Bir güncelleme. İmmünoloji 2018, 154, 3–20. [Çapraz Referans]

9. Fitzgerald-Bocarsly, P.; Dai, J.; Singh, S. Plazmasitoid dendritik hücreler ve tip I IFN: 50 yıllık yakınsak tarih. Sitokin Büyüme Faktörü Rev. 2008, 19, 3–19. [Çapraz Referans]

10. Segura, E.; Touzot, M.; Bohineust, A.; Cappuccio, A.; Chiocchia, G.; Hoşmalin, A.; Dalod, M.; Sumelis, V.; Amigorena, S. İnsan inflamatuar dendritik hücreleri Th17 hücre farklılaşmasını indükler. Bağışıklık 2013, 38, 336–348. [Çapraz Referans]

11. Geskin, LJ; Damiano, JJ; Patrone, CC; Butterfield, L.; Kirkwood, JM; Falo, LD Metastatik melanom için dendritik hücre aşılarında üç antijen yükleme yöntemi. Melanom Res. 2018, 28, 211. [CrossRef] [PubMed]

12. Guo, Z.; Yuan, Y.; Chen, C.; Lin, J.; Ma, Q.; Liu, G.; Gao, Y.; Huang, Y.; Chen, L.; Chen, L.-Z.; ve ark. Metastatik mide kanserinde anti-PD-1 tedavisinin ardından neoantijen yüklü dendritik hücre aşısına kalıcı tam yanıt. Npj Precis. Onkol. 2022, 6, 34. [CrossRef] [PubMed]

13. Bol, KF; Schreibelt, G.; Rabold, K.; Wculek, SK; Schwarze, JK; Dzionek, A.; Teijeira, A.; Kandalaft, LE; Romero, P.; Coukos, G.; ve ark. Doğal olarak dolaşan dendritik hücrelere dayanan kanser immünoterapisinin klinik uygulaması. J. İmmunother. Kanser 2019, 7, 109. [CrossRef] [PubMed]

14. Koya, T.; Tarih, İ.; Kawaguchi, H.; Watanabe, A.; Sakamoto, T.; Togi, M.; Kato, JT; Yoshida, K.; Kojima, S.; Yanagisawa, R.; ve ark. Dendritik hücrelere kanser aşısı için optimize edilmiş kültürde Wilms Tümörü 1 ile önceden puls uygulandı. Eczacılık 2020, 12, 305. [CrossRef] [PubMed]

15. Zhou, Y.; Slone, N.; Chrisikos, TT; Kyrysyuk, O.; Babcock, RL; Medik, YB; Li, HS; Kleinerman, ES; Watowich, SS İn vitro üretilen CD103+ geleneksel dendritik hücrelerle birincil ve metastatik kansere karşı aşı etkinliği. J. İmmunother. Kanser 2020, 8, e000474. [Çapraz Referans]

16. Cueto, F.; Sancho, D. Dendritik hücre biyolojisi ve kanser immünoterapisinde Flt3L/Flt3 ekseni. Yengeçler 2021, 13, 1525. [CrossRef]

17. Yanagisawa, R.; Koizumi, T.; Koya, T.; Sano, K.; Koido, S.; Nagai, K.; Kobayashi, M.; Okamoto, M.; Sugiyama, H.; Shimodaira, S. WT1-bir aşama I çalışmasında, rezeke edilmiş pankreas kanseri için kemoterapiyle birlikte darbeli dendritik hücre aşısı. Antikanser. Res. 2018, 38, 2217–2225. 18. Orsini, G.; Failli, A.; Legitimo, A.; Adinolfi, B.; Romanini, A.; Consolini, R. Zoledronik asit, insan monosit türevli dendritik hücrelerin olgunlaşmasını modüle eder. Tecrübe. Biyol. Med. 2011, 236, 1420–1426. [CrossRef] [PubMed]

19. Schmidt, SV; Nino-Castro, AC; Schultze, JL Düzenleyici dendritik hücreler: Bağışıklık aktivasyonundan daha fazlası var. Ön. İmmünol. 2012, 3, 274. [CrossRef]

20. Tai, Y.; Wang, S.; Korner, H.; Zhang, L.; Wei, W. Otoimmün hastalıklarda dendritik hücreler tarafından T hücrelerinin aktivasyonunun moleküler mekanizmaları. Ön. Farmakol. 2018, 9, 642. [CrossRef]

21. Alfei, F.; Ho, P.-C.; Lo, W.-L. Tümörlerde DCision yapımı, T hücresi anti-tümör bağışıklığını yönetir. Onkogen 2021, 40, 5253–5261. [CrossRef] [PubMed]

22. Granot, T.; Senda, T.; Marangoz, DJ; Matsuoka, N.; Weiner, J.; Gordon, CL; Miron, M.; Kumar, BV; Griesemer, A.; Ho, S.-H.; ve ark. Dendritik hücreler, insan yaşamı boyunca alt küme ve dokuya özgü olgunlaşma dinamikleri gösterir. Bağışıklık 2017, 46, 504–515. [CrossRef] [PubMed]

23. Breton, G.; Lee, J.; Zhou, YJ; Schreiber, JJ; Keler, T.; Puhr, S.; Anandasabapathy, N.; Schlesinger, S.; Caskey, M.; Liu, K.; ve ark. İnsan CD1c+ ve CD141+ dendritik hücrelerinin dolaşımdaki öncüleri. J. Exp. Med. 2015, 212, 401–413. [CrossRef] [PubMed]

24. Tugues, S.; Burkhard, SH; Ah, ben.; Vrohlings, M.; Nussbaum, K.; vom Berg, J.; Kulig, P.; Becher, B. IL-12- aracılı tümör baskılamasına ilişkin yeni bilgiler. Hücre Ölümü Farklı. 2015, 22, 237–246. [Çapraz Referans]

25. Ashour, D.; Arampatzi, P.; Pavloviç, V.; Förstner, KU; Kaisho, T.; Beilhack, A.; Erhard, F.; Th1 indüksiyonu için aşı DC değil, endojen cDC1'den MB IL-12 Lutz gereklidir. JCI İçgörüsü. 2020, 5, e135143. [Çapraz Referans]

26. Jorgovanoviç, D.; Şarkı, M.; Wang, L.; Zhang, Y. Tümör ilerlemesi ve gerilemesinde IFN-'nin rolleri: Bir inceleme. Biyomark. Res. 2020, 8, 49. [CrossRef]

27. Oğul, K.-j.; Choi, KR; Lee, SJ; Lee, H. Ginsenosid Rg3'ün neden olduğu immünojenik hücre ölümü: Dendritik hücre bazlı anti-tümör immünoterapisinde önemi. Bağışıklık Ağı 2016, 16, 75–84. [Çapraz Referans]

28.Jongbloed, SL; Kassianos, AJ; McDonald, KJ; Clark, GJ; Ju, X.; Melek, CE; Chen, C.-JJ; Dunbar, Halkla İlişkiler; Wadley, RB; Jeet, V.; ve ark. İnsan CD141+ (BDCA-3)+ dendritik hücreler (DC'ler), nekrotik hücre antijenlerini çapraz sunan benzersiz bir miyeloid DC alt kümesini temsil eder. J. Exp. Med. 2010, 207, 1247–1260. [Çapraz Referans]

29. Noguchi, A.; Kaneko, T.; Kamigaki, T.; Fujimoto, K.; Ozawa, M.; Saito, M.; Ariyoshi, N.; Goto, S. Zoledronatla aktive edilen V9δ T hücresi bazlı immünoterapi mümkündür ve katı tümörlü hastalarda δ T hücrelerinin bozulmasını onarır. Sitoterapi 2011, 13, 92–97. [Çapraz Referans]

30. Hewitt, RE; Lissina, A.; Yeşil, AE; Öldürmek, ES; Fiyat, DA; Sewell, AK Bifosfonat akut faz yanıtı: Amino bifosfonatlara yanıt olarak periferik kan gd T hücreleri tarafından proinflamatuar sitokinlerin hızlı ve bol miktarda üretilmesi, statinler tarafından inhibe edilir. Klin. Tecrübe. İmmünol. 2005, 139, 101–111. [Çapraz Referans]

31. Haziran, CH; O'Connor, RS; Kawalekar, OU; Ghassemi, S.; Milone, MC CAR İnsan kanseri için T hücresi immünoterapisi. Bilim 2018, 359, 1361–1365. [CrossRef] [PubMed]

32. Sterner, RC; Sterner, RM CAR-T hücre tedavisi: Mevcut sınırlamalar ve potansiyel stratejiler. Kan Kanseri J. 2021, 11, 69. [CrossRef] [PubMed]

33. Xie, G.; Dong, H.; Liang, Y.; Ham, JD; Rizwan, R.; Chen, J. CAR-NK hücreleri: Kanser için umut verici bir hücresel immünoterapi. EBioMedicine 2020, 59, 102975. [CrossRef] [PubMed]

34.Zhang, L.; Meng, Y.; Feng, X.; Han, Z. Kanser immünoterapisi için CAR-NK hücreleri: Tezgahtan yatağa. Biyomark. Res. 2022, 10, 12. [CrossRef] [PubMed]

35. Marofi, F.; Motavalli, R.; Safonov, VA; Thangavelu, L.; Yumaşev, AV; Alexander, M.; Shomali, N.; Chartrand, MS; Pathak, Y.; Jarahian, M.; ve ark. Katı tümörlerde CAR T hücreleri: Zorluklar ve fırsatlar. Kök Hücre Arş. Orada. 2021, 12, 81. [CrossRef]

36. Santomasso, B.; Bachier, C.; Westin, J.; Rezvani, K.; Shpall, EJ CAR T hücresi tedavisinin diğer tarafı: Sitokin salınım sendromu, nörolojik toksisite ve mali yük. Am. Sos. Klin. Onkol. Eğitim Kitap 2019, 39, 433–444. [Çapraz Referans]

37. Liu, S.; Galat, V.; Galat, Y.; Lee, YKA; Wainwright, D.; Wu, J. NK hücre bazlı kanser immünoterapisi: Temel biyolojiden klinik geliştirmeye. J. Hematol. Onkol. 2021, 14, 7. [CrossRef]

38. Streltsova, M.; Ustiuzhanina, M.; Barsov, E.; Kust, S.; Velichinskii, R.; Kovalenko, E. Telomeraz ters transkriptaz, ölümsüzleştirme olmadan insan NK hücrelerinin çoğalmasını ve ömrünü artırır. Biyotıplar 2021, 9, 662. [CrossRef]

39. Garris, CS; Arlauckas, SP; Kohler, RH; Milletvekili Trefny; Garren, S.; Piot, C.; Engblom, C.; Pfirschke, C.; Siwicki, M.; Gungabeesoon, J.; ve ark. Başarılı anti-PD-1 kanser immünoterapisi, IFN- ve IL-12 sitokinlerini içeren T hücresi-dendritik hücre çapraz karışmasını gerektirir. Bağışıklık 2018, 49, 1148–1161.e7. [Çapraz Referans]

40. Thongchot, S.; Jirapongwattana, N.; Luangwattananun, P.; Chirapapphaiboon, W.; Chuangchot, N.; Sa-Nguanraksa, D.; O Charoenrat, P.; Thuwajit, P.; Yenchitsomanus, P.-T.; Thuwajit, C. Üçlü negatif meme kanserine karşı PD-L1 inhibisyonu ile birleştirilmiş anti-nükleolin T hücrelerinin benimsenen transferi. Mol. Kanser Ter. 2022, 21, 727–739. [Çapraz Referans]