Pinus Taiwanensis Hayata İğnelerinden Anti-inflamatuar İlkeler ve Potansiyel Yaşlanma Karşıtı Etkilerinin In Silico Çalışmaları Ⅱ

Çam iğneleri, metanol ile özümlendi ve heksanlar, etil ile paylaştırıldı.sırasıyla üç çözünür tabaka elde etmek için asetat ve su. buantienflamatuvarkesir,etil asetat tabakası, sürekli konvansiyonel kromatoya tabi tutuldugrafik teknik kombinasyonu ve tarif edilmemiş beş bileşik karakterize edildiiki yeni lignan dahil, 1-[(70 R,80 S)-70 ,90 -dihidroksi-70 -(4-hidroksifenil)propan-80 -iloksi]benzoik asit (1), 1-[(70 R,80 S)-70 ,90 -dihidroksi-70 -(4-hidroksi-3-metoksifenil)-propan-80 -iloksi]-2-hidroksibenzoik asit (2), bir yeni diterpenoid, (13E,12R)-12 -hidroksiagatikasit (3), bir monoterpenoid, 5-izopropil-3-oksosikloheks-1-ene-1-karboksilik asit (4), ve birfenilpropan, stiraksinolik asit (5). Bu yeni bileşiklerin kimyasal yapılarıNMR spektral aydınlatma ve MS spektro yardımıyla oluşturuldumetrik analiz. Ayrıca, bir steroid içeren yetmiş iki bilinen bileşik, -sitosterol (6); bir seskiterpenoid, (-)-oplopan-4-bir-10- -O- -D-glikozit (7); birkumarin, umbelliferon (8); biralkoloid, indol-3-aldehit (9); dört diterpenoid,

Yaşlanma Karşıtı Cistanche Krem Almak İçin Tıklayın

3-metoksifenil)-1-propanon (64), 3-hidroksi-1-(4-hidroksifenil)-1-propanon (65),2-(4-hidroksifenil)asetik asit (66), fenilasetik asit (67), vanilik asittir (68), benzoikasit (69), vanilya (70), p-hidroksiasetofenon (71), sodyum salisilat (72), vanilik asit4-O- -L-ramnosid (73), Trans-Ferulik asit (74), sodyump-kumarat (75), p-kumarikasit (76), Trans-metilp-kumarat (77), sırasıyla, incelenmesi ile belirlendifiziksel ve spektroskopik verileri daha önce yayınlanmış olanlarla (bilinen kaynakların referansları)bileşikler, Ek Malzemeler Ek B'de sağlanmıştır).

3.1. Bileşiklerin Yapısal Açıklamaları 1-5

Birleştirmek1 optik olarak aktif renksiz bir şurup olarak izole edildi ve molekülerformül C olarak atandı16H16O6 HR-ESI-MS analizi ile ([M− H]−, m/z 303.0855, hesaplanan.C için16H15O6, 303.0869, Şekil S1). IR spektrumu, bir hidroksilin varlığını gösterir.(3412 santimetre−1 ) ve bir konjuge karbonil grubu (1598 cm-−1 ). bu1H-NMR verileri (Şekil S2)iki için sinyalleri gösterdipara-ikame edilmiş aromatik kısımlar [δH 6.72 (2H, d, J = 8.4 Hz,H-30 , -50 ), 6.86 (2H, d, J = 8,8 Hz, H-2, -6), 7,24 (2H, d,J = 8.4 Hz, H-20 , -60 ) ve 7.83(2H, d, J = 8.8 Hz, H-3, -5)], iki oksijenli metin [δH 4.48 (1H, m, H-80 ) ve 4.85(1H, d, J = 5.6 Hz, Y-70 )] ve iki metin [δH 3,81 (1H, dd,J {{0}}.0, 4.0 Hz, H-90 a), ve 3.86 (1H, dd,J {{{0}}.0, 5.6 Hz, H-90 B)]. bu13C ve DEPT NMR spektrumları (Şekil S3)ile ilgili1 bir metilen grubuna karşılık gelen on altı karbon sergiledi, ikisi oksijenlikarbon, on iki aromatik karbon ve bir konjuge karbonil (Tablo1). bu2 J- Ve3 J- H-2, -6'den C-1 ve 4'e HMBC korelasyonları; H-3, 5'ten C-1 ve 7'ye; H'den-20, 60 ileC-40 ve 70 ; H-70 C-8'ye0 ve 90 ; ve H-8'dan0 sırasıyla C-1 için gözlendiHMBC spektrumu1 (Şekil S4). Ayrıca, H-7 arasında büyük bir bağlantı sabiti0 ve H-80 (J = 5,6 Hz) göreli yapılandırmayı destekledi1 C-7'de0 /C-80 gibiüçlü[44]. C-7'deki mutlak yapılandırmalar0 ve C-80 ile ilgili1 elektronik sirküler ile belirlendidikroizm (ECD) analizi. 230 nm'de pozitif Pamuk etkisi (∆ε artı 0.17) bir 8 ortaya çıkardıS için yapılandırma1, yayınlanan literatüre göre [37,38] ve dolayısıyla 70 R aynı zamandaazimli. Diğer 2B spektrumlar (Şekil S5 – S7), protonun tam atamasını sağladı vekarbon sinyalleri. Buna göre, yapısı1 1-[(7) olarak atandı0 R,80 S)-70 ,90 -dihidroksi-7 0 -(4-hidroksifenil)propan-80 Şekilde gösterildiği gibi -iloksi]benzoik asit1. 

moleküler formülü2 C olarak atandı17H18O8 HR-ESI-MS bazındaanalitik veri (m/z 349.0936 [M − H]−, Şekil S8). IR spektrumundaki absorpsiyon(3425 ve 1541cm−1 ) hidroksil ve konjuge karbonil işlevselliklerini gösterdi,sırasıyla. NMR spektrumlarının karşılaştırılması1 Ve2, onların olduğunu gözlemleyebilirfarklı aromatik parçalara sahiptir. İki set ABX-bağlı aromatik halka ve birmetoksi grubu tespit edilebilmektedir.1H- (Şekil S9) ve13C-NMR (Şekil S10) verileriile ilgili2 (Masa1) ve bu bileşiği önerdi2 yerine iki trisubstitüe sahippara-iki ikame edilmiş aromatik kısımlar. Önemli HMBC korelasyonları (Şekil S11)H-3 ila C-1, C-5 ve C-7; H-6'den C-4'e; OCH'den3-30 C-3'ye0 ; H-60 C-4'ye0 VeC-70; H-70 C-1'ye0 , C-20 , C-80 ve 90 ; H-80 sırasıyla C-1 için,yapısı2 aynı zamanda bir neolignan iskeletiydi. Büyük bir kaplin kombinasyonu sayesindedevamlı (J7,8 = 5,2 Hz) ve 230 nm'de pozitif Pamuk etkisi (∆ε artı 1.14), mutlakkonfigürasyonu2 olarak atandıüç- ve (70 R,80 S)-formu ile aynı1 [44,45]. Diğer2B spektrumlar (Şekil S12 – S14), proton ve karbon sinyallerinin tam atamasını sağladı.Bu bulgular,2 1-[(7) olarak0 R,80 S)-70 ,90 -dihidroksi-70 -(4-hidroksi-3-metoksifenil)propan-80 -iloksi]-2-hidroksibenzoik asit (Şekil1). 

Birleştirmek3 renksiz bir toz halinde elde edildi ve moleküler formülü şöyleydi:C olarak atanan20H30O5 HR-ESI-MS analitik verilerine dayalı olarak (m/z 349.2024 [M − H]−, Şekil S15). Birleştirmek3 3450 (OH) ve 1648'de (karboksilikasit) cm−1 IR spektrumunda. Tarafından kanıtlandı13C-NMR spektrumu (Şekil S16)hangi iki karboksilik işlevsellik gözlendiδC 167.2 (C-15) ve 181.5 (C-19). İçindeonun1H-NMR (Şekil S17), rezonanslarδH 4,03 (1H, dd,J = 9.2, 2.8 Hz, H-12) veδC 75.5 (C-12), ikincil bir alkol grubunun varlığını gösterdi. terminal metilengrup, proton rezonansları nedeniyle kurulabilir.δH 4,53 (1H, s, H-17a) ve4.91 (1H, s, H-17b) ve karbon sinyalleriδC Sırasıyla 106.9 (C-17) ve 150.2 (C-8).iki metil grubuδH 0.63 (3H, s, CH3-20) ve 1.21 (3H, s, CH3-18) bağlandıHMBC korelasyonlarıyla kanıtlanan dörtlü karbonlar (C-10 ve C-4) (Şekil S18).C-4'deki karboksilik grubun koruyucu etkisi, CH'nin yukarı alan kaymasına neden oldu3-20 (δH 0.63), öneriyor-yapılandırma [46]. Ek olarak, H-17a'nın (δH 4.53) yukarı alan bölgesinde göründü ve 12'yi düşündürdü.R yapılandırma [47]. HMBC'despektrum, H-12 ile C-9, C-14 ve C-16 arasındaki korelasyonlar; H-17'den C-7 ve C-9'ye;CH'den3-16 ila C-12 ve C-14; CH'den3-18 ila C-3, C-4 ve C-19; CH'den3-20 ila C-1, C-5,Sırasıyla C-9 ve C-10,3 daha önce bildirildiği gibi12-hidroksiagatik asit için [46]. Ancak, C-13 yapılandırması3 saptanmıştırgibiE arasında NOE etkilerini gösteren NOESY analitik verileri (Şekil S19) tarafındanH-5/H-9, H-5/H-18 ve H-12/H-14. Ayrıca, H-14 ve CH arasındaki NOE3-16, 12-hidroksiagatik asit [46], içinde tespit edilmedi3. Diğer2B spektrum (Şekil S20–S21) proton ve karbon sinyallerinin tam atamasını sağladı.Sonuç olarak, yapısı3 olarak kuruldu (13E,12R)-12-hidroksiagatik asit olarakgösterilen (Şekil1).

HR-ESI-MS spektrumu4 bir [M sergiledi− H]− iyon zirvesim/z 181.0855 (Şekil S22), C'nin psödomoleküler formülü ile tutarlı10H13O3. emilim3456 ve 1635 cm'de zirveler-1 IR spektrumunda hidroksil ve konjuge karbonil gösterildisırasıyla gruplar. iki metin protonuδH 2,09 (1H, m, H-5) ve 6,32 (1H, dd,J = 2.4, 1,2 Hz, H-2), iki metilen grubuδH 1.84 (1H, m, H-4a), 2.02 (1H, m, H-4b), 2.50 (1H, dddd,J = 19.2, 9.2, 4.8, 2.4 Hz, H-6a) ve 2.70 (1H, dddd,J = 19.2, 5.2, 5.2, 1.2 Hz,H-6b) ve bir set izopropil protonδH 0.88 (3H, d, J = 6,8 Hz, CH3-9), 0.98 (3H, d, J = 6,8 Hz, CH3-10) ve 2,31 (1H, hept,J = 6.8 Hz, H-8) göründü1H-NMR spektrumuile ilgili4 (Şekil S23). Ek olarak, bir konjuge karbonil karbonδC 174.8 (C-7) ve birkarboksil karbonδC 205.7 (C-3) gözlemlenebilir13C- ve DEPT NMR spektrumları(Şekil S24). H-2'den C-7'e gözlemlenen HMBC korelasyonları (Şekil S25); H-4 ileC-3; H-6'den C-1, C-2 ve C-5'ye; CH'den3-9 - C-5 ve CH3-10; CH'den3-10 ila C-8,sırasıyla, yapısını inşa4 5-izopropil-3-oksosikloheks-1-ene-1-karboksilik olarakasit (Şekil1). Diğer 2B spektrumlar (Şekil S26–S28), protonun tam atamasını sağladıve karbon sinyalleri. Ancak, C-5'deki stereokimya belirsiz kaldı.

Birleştirmek5 C moleküler formülüne sahipti11H14O5 protondan arındırılmış olarak belirlenirnegatif mod HR-ESI-MS analizinde moleküler iyon zirvesi (m/z 225.0767 [M − H]−, FigürS29). IR spektrumunda, hidroksil (3421 cm−1 ) ve karboksil (1572 santimetre−1 ) işlevsellikler tespit edilebilir. bu1H-NMR spektrumu (Şekil S30) iki uzun menzilli ortaya çıkardıaromatik protonları birleştirmeδH 6.86 (1H, d, J = 2,4 Hz, H-4) ve 7,31 (1H, d,J = 2.4 Hz, H-6), bir metoksi grubuδH 3.56 (2H, t, J = 6.8 Hz, H-9) ve bir setpropanol protonlarıδH 1,82 (2H, tt,J {{0}},0, 6,8 Hz, H-8), 2,61 (2H, t,J {{0}}.0 Hz, H-7) ve 3.56(2H, t, J = 6,8 Hz, H-9). Ayrıca, bir karboksilik grup da şuraya yerleştirildi:δC 176.2 (C-10) içindeonun13C-NMR spektrumu (Şekil S31). düzlemsel yapısı5 önemli kişiler tarafından kurulmuştur.OCH'nin HMBC korelasyonları (Şekil S32)3-3 ila C-3; H-6 ila C-2, C-4, C-7 ve C-10; H-7C-4, C-5 ve C-8'ye; Sırasıyla H-9 ila C-7 ve C-8. Diğer 2B spektrumlar (Şekil S33–S35)proton ve karbon sinyallerinin tam atamasını sağladı. Yukarıdaki kanıtlar gösteriyor kiyapısı5 2-hidroksi-5-(3-hidroksipropil)-3-metoksibenzoik asit olarak (Şekil1), önceki sentetik literatürde zaten stiraksinolik asit olarak rapor edilmiş olan [48]. Bununla birlikte, bu araştırma ilk raporudur.5 doğal kaynaklardan.

3.2. Anti-inflamatuar Aktivite

Enflamasyon, bakteriler tarafından uyarılan başlıca kendini savunma mekanizmalarından biridir.virüs, yaralar veya diğer çeşitli çevresel faktörler. Bağışıklığın ilk tepkisidir.Enfeksiyon ve tahrişe karşı sistem. Nötrofiller, bol miktarda bulunan bir türe aittir.makrofaj ve inflamasyonda önemli bir rol oynar ve genellikle ilk lenfoenfekte bölgeye ulaşmak için hücreler [49]. Nötrofiller, aşağıdakiler gibi bir dizi sitotoksin salgılar:bağışıklık sisteminin aktivasyonuna yanıt olarak süperoksit anyonu ve elastaz [50]. İçindeSon yıllarda, çeşitli insan hastalıklarının nötrofil ile ilişkili olduğu gösterilmiştir.aşırı ifade [51–55]. Enflamasyon ve kanser arasındaki ilişki kanıtlanmıştır.ve yazarlar, kanser hücrelerinin oluşumunun doğrudan ilişkili olduğuna dikkat çekti.iltihaba [49]. Bu nedenle, yeni anti-enflamatuar bileşikler,kanser tedavisi ile ilgili daha fazla çalışma. Kırk üç izole bileşik,insan nötrofilleri tarafından süperoksit anyon üretiminin ve elastaz salınımının inhibisyonufMLF/CB'ye yanıt olarak [56] (bkz. Ek Malzemeler, Tablo S2). önemli olaninhibitör sonuçları (Tablo2) sadece gösterdi45, 47, 48, 49, Ve50 (Figür2) görüntülendiIC ile süperoksit anyon oluşumunun önemli bir inhibisyonu50 arasında değişen değerler3.3 ± 0.9 ile7.7 ± 0.9 µM pozitif kontrol LY294002 (IC50 1.1 ± 0.3 µM). Dahası,48, 50, Ve51 (Figür2) elastaz salınımının önemli derecede inhibisyonunu ortaya çıkardıIC ile50 5.3 arasında değişen değerler± 0.2 - 8.3± 0.8 µPozitif ile karşılaştırıldığında Mkontrol LY294002 (IC50 3.2 ± 1.0 µE) (Tablo2). Bileşikler48 Ve50 her ikisi de görüntülendisüperoksit anyon üretimi ve elastaz salınımının inhibisyonu, bunların çoklu olduğunu gösteriranti-inflamatuar biyoaktiviteler. iğneleriP. morrisonicolasahip olduğu bildirildiRAW 264.7 makrofajlarında bir anti-inflamatuar etki [13]. Yazarlar önerdiepikateşin vep- içinde tanımlanan kumarik asitP. morrisonicolaetken maddeler olabilir.Mevcut araştırmada, tüm aktif bileşikler benzer flavon omurgasını içeriyordu.epikateşin vep-kumaroil parçası da gözlenebilir49, 50, Ve51. Bu, flflavonoid vep-kumaroil fonksiyonel grupları katkıda bulunabilirBu çalışmada anti-inflamatuar biyoaktivite. Bu bioassay sonuçları göstermektedir kiflavonoidler anahtar rol oynarPinusanti-inflamasyon biyoaktivitesi için türler.

Tablo 2.Saflaştırılmış bileşiklerin süperoksit anyon oluşumu ve elastaz salınımı üzerindeki inhibitör etkilerifMLF/CB'ye yanıt olarak insan nötrofilleri tarafından.

Şekil 2.Antiinflamatuar ilkelerin yapıları45, 47, 48, 49, 50, Ve51. 

3.3. Moleküler Yerleştirme Çalışması

BH seviyelerinde yaşa bağlı düşüşün nöroendokrin bir semptom olduğu düşünülmektedir.yaşlanma [57]. Bu fenomen, insanlar, evcil hayvanlar gibi birçok memeli türünde mevcuttur.köpekler ve laboratuvar kemirgenleri [57]. İnsanda, plazmadaki GH seviyeleri azalmaya başlar.tam fiziksel olgunlaşmadan sonra yaşla birlikte ve yaşamın onlarca yılı boyunca devam eder [57]. Ghrelin, GHSR için endojen ligand olarak tanımlanır ve ana düzenleyicidir.BH salgısı [18,19]. Ghrelin, çeşitli fizyolojik ve patofizyolojik süreçlerde yer alır.yaşlanma gibi insanlarda mekanizmalar [24,25]. Ek olarak, grelin şu şekilde düşünülebilir:anti-inflamatuar aktivite ile ilişkili olabilir. Bağışıklık hücresi aktivasyonu ghrelin ile sınırlıydıNF- inhibisyonu yoluyla tedaviκB aktivasyonu ve müteakip MCP-1 salgılanması [26]. Sentetik bir ghrelin analoğu büyüme hormonu salgılayan peptit-2 (GHRP-2) bildirildiartritik sıçanlarda inflamatuvar faktörleri azaltmak ve bağışıklık hücrelerininghrelin reseptörlerinin aktivasyonu aracılık etmiştir [27]. Neves ve ark. Ayrıca önerilenYaşlanma karşıtı bir müdahale olarak inflamasyonun düzenlenmesi [58]. Böylece, göreanti-inflamatuar bioassay deneysel verileri,45, 47, 48, 49, 50, Ve51 (Figür2) gösterdiönemli inhibe edici etkiler ve bunların bağlanma yeteneklerini belirlemek için seçildiler.ghrelin reseptörü. Yerleştirme simülasyonundan önce, 6KO5'e dahil olan yerel ligand (8QX)PDB dosya dosyası, doğrulama için yeniden yerleştirildi. 8QX ve 6KO5 arasındaki etkileşimler vehesaplanan sonuçların en iyi pozu, yerel verilerle yüksek benzerlik ve tekrarlanabilirlik gösterdi(veri gösterilemiyor). Sonuçlar, mevcut simülasyon sisteminin yüksek doğruluğunu göstermektedir.ve daha fazla hesaplamayı destekledi.

Her ligandın en düşük bağlanma enerjisi, en iyi konformasyon olarak kabul edildi. bubağlanma afiniteleri Tabloda listelenmiştir3. Büyüme hormonu salgılayan peptit 6 (GHRP-6)bizimki gibi ghrelin reseptörünün bağlanma cebine kenetlenmek için pozitif kontrol olarak kullanılır.önceki rapor AutoDock Vina, peptidler arasında kenetlenme için tasarlanmamasına rağmenve proteinler, önceki raporlarda birkaç başarılı sonuç yayınlanmıştır [59–61]. Bu nedenle, bu çalışmada, GHRP-6 ilk olarak, testin doğruluğunu belirlemek için hesaplanmıştır.mevcut yerleştirme modeli ve sonuçlar iyi bir şekilde çakıştı (Şekil3A). GHRP-6 ile karşılaştırıldığında,bağlanma enerjileri49, 50, Ve51 daha düşüktü−10,3 kcal/mol (Tablo3). Buöneriyor49, 50, Ve51 ghrelin reseptörünün cebine benzer şekilde kenetlenebilir veyaGHRP'den bile daha iyi-6. İçin49arasında hidrojen bağları gözlenebilmektedir.iki karbonil grubu (C-4 vep-kumaroil) ve Arg283, C-5 hidroksil ve Gln120,C-7 hidroksil ve Tyr313 ve C-40 sırasıyla hidroksil ve Cys304. Arg199 bir oluşturdubir karbonil grubu ile geleneksel hidrojen bağıp-kumaroil. Ek olarak,49 öyleydiArg283, Arg102, Asp99, Phe279, Phe312, Leu181 ve Pro200 kalıntılarına bağlıgibi farklı etkiler yoluyla ghrelin reseptörüπ-katyon,π-anyon,π–π T şeklinde veπ-alkil etkileşimleri. Bu izin verilen bileşik49 ve kararlı bir kompleks oluşturmak için protein(Figür3B). 50 Asp99, Arg102, Gln120, Arg283, Leu103, Asn305 veArg199 çeşitli hidrojen bağları aracılığıyla, diğer etkileşimler ise (π-katyon,π-anyon,π–π T şeklinde veπ–alkil) ayrıca Asp99, Arg102, Arg283, Phe279, Phe312 ile gözlendi,Leu181 ve Leu210 (Şekil3C). 51 ayrıca hidrojen veya karbon-hidrojen bağları kurdudiğer etkileşimlerle birlikte Tyr313, Ser123, Arg283, Arg102 ve Asn305 ile (π-katyon,π-anyon,π-sigma,π–π T şeklinde veπ-alkil) Asp99, Arg283, Arg102, Leu181 ile bağlantı kurmak için,Ghrelin reseptörünün Phe312 ve Pro200 kalıntıları tespit edilebildi (Şekil3D). NazaranBileşikler45, 47, Ve48 ile49, 50, Ve51, eski grup bir flflavonoide sahiptisadece ikinci grup şeker ve kumaroyil kısımlarına sahipken iskelet. bildirildi kişekere bağlı kumaroil grubu, ghreline bağlanma afinitesi için çok önemliydialıcı [34]. GHSR'nin boşluk yapısı, grelinin asil asit kısmı ile etkileşime girerghrelin reseptörünün aktif bir konfigürasyona dönüşmesine neden oldu [43]. Ayrıca, GHSR'nin bağlama cebi, Glu124 arasındaki tuz köprüsü tarafından çatallanır.ve Arg283 ve bu bölge hidrofobik amino asitler açısından zengindir [43]. Bize göreveriler, yerleştirme puanları49, 50, Ve51 olanlardan daha yüksekti45, 47, Ve48, Hangidaha iyi bir bağlama yeteneği önerdi. Başlıca yapısal özellikler şunlardı:şeker kısımlarından ziyade kumaroil grupları ve bu, şu şekilde daha fazla kanıtlanabilir:Kumaroil fonksiyonelliklerine sahip daha fazla bileşiğin incelenmesi. Bu çalışmada,aktif içerik49, 50, Ve51 sadece antienflamatuvar biyoaktiviteye değil, aynı zamandaghrelin reseptörü bağlanma potansiyeli. Bu, iddia edilen yaşlanma karşıtı etkilerininçam iğnesi çayı da bu çay ghrelin benzeri bileşiklere dayalı olabilir.

4. Sonuçlar

Tanımlanmamış on beş bileşik içeren toplam yetmiş yedi izolat saflaştırıldı.metanol ekstraktlarından doğrulanmıştır.P. taiwanensisiğneler. Yapıları karakterize edildispektroskopik ve spektrometrik analizler yoluyla. Kırk üç saflaştırılmış bileşikonların için incelendiiltihap önleyici aktivitetarafındansüperoksit anyon oluşumunun inhibisyonuVenötrofil modelinde elastaz salınımı. Sonuçlar gösteriyor ki45, 47, 48, 49, 50, Ve51 önemli sahipanti-enflamatuar potansiyeller. Daha fazla moleküler yerleştirmedesteklenen hesaplama sonuçları49, 50, Ve51 aktif maddeye bağlanma afinitesi sergileyenghrelin reseptörünün cebi. Bu nedenle, ham ekstraktlar ve saflaştırılmış bileşenlerP. taiwanensisyeni antienflamatuvar kurşun ilaçlar olarak geliştirilme potansiyeline sahip veyagıda maddeleri.

Tamamlayıcı Malzemeler:Aşağıdakiler şu adreste çevrimiçi olarak mevcuttur:, Ek A: Eksiksiz ekstraksiyon ve izolasyon prosedürleri,Ek B: Referanslarbilinen bileşiklerin, Tablo S1: İğnelerin ön biyoaktivite taramasıP. taiwanensissüperoksit üzerindefMLF/CB'ye yanıt olarak insan nötrofilleri tarafından anyon üretimi ve elastaz salınımı,Tablo S2: Saflaştırılmış bileşiklerin süperoksit anyonu oluşumu ve elastaz üzerindeki inhibitör etkilerifMLF/CB'ye yanıt olarak insan nötrofilleri tarafından salınma, Şekil S1–S35: HRMS ve NMR spektrumlarıyeni bileşikler

1–5. Yazar Katkıları:Kavramsallaştırma, P.-CK ve JTCT; Metodoloji, P.-CK ve T.-LH;Soruşturma, Y.-CL, AMK ve M.-LY; Kaynaklar, S.-YW; Veri iyileştirme, Y.-CL ve G.-HY;Yazma—orijinal taslak hazırlama, P.-CK ve Y.-CL; Yazma—inceleme ve düzenleme, P.-CK TümüYazarlar, makalenin yayınlanan sürümünü okudu ve kabul etti.

Finansman:Bu çalışma Tayvan Bilim ve Teknoloji Bakanlığı (MOST) tarafından desteklenmiştir. buAraştırma, Milli Eğitim Bakanlığı'nın Yüksek Öğrenim Filiz Projesi tarafından kısmen desteklenmiştir.Ulusal Cheng Kung Üniversitesi'ndeki (NCKU) Üniversite İlerleme Genel Merkezi.

Kurumsal İnceleme Kurulu Beyanı:Çalışma, Kurum onayı ile gerçekleştirilmiştir.Chang Gung Memorial Hastanesi İnceleme Kurulu (KİK No. 201800369A3).Bilgilendirilmiş Onam Beyanı:Açıklama istek üzerine sağlanabilir.

Veri Kullanılabilirliği Bildirimi:Orijinal veriler talep üzerine ilgili yazardan temin edilebilir.

Teşekkür:Yazarlar ayrıca Chang Gung Memorial Hastanesine (CRPPD1B0281~3,T.-LH'ye verilen CMRPF1D0442~3, CMRPF 1F0011~3, CMRPF1F0061~3 ve BMRP450)mevcut araştırmanın kısmi mali desteği. Yazarlar, NMR kullanımını minnetle kabul etmektedir.Ulusal Cheng Kung Üniversitesi Enstrüman Merkezine ait ekipman.

Çıkar çatışmaları:Yazarlar herhangi bir çıkar çatışması beyan etmemektedir.

Referanslar

1. Xie, Q.; Liu, Z.; Li, Z. Altı uçucu yağın kimyasal bileşimi ve antioksidan aktivitesiPinusÇin'e özgü takson.moleküller2015, 20, 9380–9392. [çapraz referans] 

2. Kim, KY; Chung, HJ Çam filizi çayı ve çam iğnesi çayının aroma bileşenleri.J. Agric. Gıda Kimyası2000, 48, 1269–1272. [çapraz referans] 

3. Park, G.; Paudyal, DP; Hwang, ben; Tripathi, GR; Yang, Y.; Cheong, H. Kızılçamdan fermente iğne özlerinin üretimi vefonksiyonel karakterizasyonları.Biyoteknoloji Biyoproses Müh.2008, 13, 256. [çapraz referans]

4. IDžojti´c, M.; Kaçba, D.; Franji´c, J. F1 melezlerinin farklılaşmasıP. nigraJF Arnold× P. sylvestrisL., P. nigraJF Arnold× P. densifloraSiebold ve Zucc.,P. nigraJF Arnold× P. thunbergianaFranco ve ebeveyn türleri iğne uçucu bileşimi ile.biyokimyaSist. ekol.2005, 33, 427–439. [çapraz referans] 

5. Kim, YS; Shin, DH Çam iğnesinin uçucu bileşenleri ve antibakteriyel etkileri (pinus densiflfloraS. ve Z.) alıntılar.Gıda Mikrobiyolü.2005, 22, 37–45. [çapraz referans] 

6. Dob, T.; Berramdane, T. Uçucu yağ bileşimipinus halepensisDeğirmen Cezayir'in üç farklı bölgesinden.J. Essent. Petrol Res.2007, 19, 40–43. [çapraz referans] 

7. Nam, AM; Tomi, F.; Gibernau, M.; Kazanova, J.; Bighelli, A. İğne yağının bileşimi ve kimyasal değişkenliğipinus halepensisKorsika'da büyüyor.kimya Biyodalgıçlar.2016, 13, 380–386. [çapraz referans] 

8. Sezik, E.; Üstün, Ö.; Demirci, B.; Başer, KHC Uçucu yağların bileşimipinus nigraTürkiye'den Arnold.Türk. J. Chem.2010, 34, 313–325.